期刊文献+
共找到34篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
研究生科研能力培养的新举措——扩展学习理论的视角 被引量:2
1
作者 李鹏 罗建河 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第19期227-230,共4页
传统研究生教学导致研究生的知识基础窄化,这与社会变革和社会知识生产对研究生知识基础与能力的要求形成矛盾。研究生要能够在知识生产和社会能力这两个方面都得到发展,必须改革传统的研究生教学框架。新的教学框架需要解决研究生教学... 传统研究生教学导致研究生的知识基础窄化,这与社会变革和社会知识生产对研究生知识基础与能力的要求形成矛盾。研究生要能够在知识生产和社会能力这两个方面都得到发展,必须改革传统的研究生教学框架。新的教学框架需要解决研究生教学如何能够促进研究生的深层次学习,如何能够生产与社会发展相关的知识,如何能够生产培养学生社会变革能力的知识的问题。基于扩展学习理论的研究生教学框架设计可以为解决这些问题提供有益的参考。 展开更多
关键词 研究生 科研能力 扩展学习 教学 改革
植物乳杆菌ZDY2013与两歧双歧杆菌WBIN03对TNBS诱导小鼠结肠炎的缓解作用
2
作者 王圆圆 郭怡麟 +2 位作者 谢琼 魏华 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期279-283,共5页
目的为阐明益生菌抗氧化与结肠炎的关系,对植物乳杆菌ZDY2013与两歧双歧杆菌WBIN03缓解三硝基苯磺酸(trinitro-benzene-sulfonic acid,TNBS)诱导的小鼠结肠炎进行探究。方法通过对BALB/c小鼠肛门注射TNBS,构建小鼠结肠炎模型;分别采... 目的为阐明益生菌抗氧化与结肠炎的关系,对植物乳杆菌ZDY2013与两歧双歧杆菌WBIN03缓解三硝基苯磺酸(trinitro-benzene-sulfonic acid,TNBS)诱导的小鼠结肠炎进行探究。方法通过对BALB/c小鼠肛门注射TNBS,构建小鼠结肠炎模型;分别采用植物乳杆菌ZDY2013与两歧双歧杆菌WBIN03的单菌悬液(10~9CFU/mL)及1:1混合菌悬液(10~9CFU/mL)进行8 d灌胃治疗。结果治疗组小鼠结肠组织炎性细胞浸润症状获得缓解,血清中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)(t1=3.247,P1〈0.05;t2=3.397,P2〈0.05)、过氧化氢酶(catalase,CAT)(t1=5.289,P1〈0.001;t2=3.563,P2〈0.05)和总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)(t1=3.317,P1〈0.05;t2=3.551,P2〈0.05)活性均有显著恢复。结论植物乳杆菌ZDY2013与两歧双歧杆菌WBIN03可通过增强机体抗氧化酶活性,起到缓解TNBS诱导的小鼠结肠炎的作用。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 两歧双歧杆菌 结肠炎
马尾松毛虫质型多角体病毒非结构蛋白p44在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位 预览
3
作者 彭晗 王洪秀 +3 位作者 王金昌 关丽梅 靳亮 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期122-128,共7页
为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44... 为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44-e GFP和Bacmid-e GFP)。转染昆虫细胞Sf9进行表达,通过Western blot检测和蛋白的亚细胞定位观察。Western blot检测结果显示,Bacmid-S8在昆虫细胞Sf9中表达实际蛋白的大小为35 kD,比在原核系统中表达的蛋白(44 k D)略小;利用激光共聚焦显微镜观察p44-e GFP的融合蛋白的亚细胞定位发现,融合p44的绿色荧光蛋白(eGFP)主要聚集在细胞质中,而未融合的eGFP则分布于整个细胞,说明DpCPV 1的p44蛋白定位于细胞质中。 展开更多
关键词 马尾松毛虫质型多角体病毒 多克隆抗体 真核表达 细胞定位
在线阅读 免费下载
植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达 预览 被引量:2
4
作者 田喜梅 谢琼 +3 位作者 黄仁慧 陶雪莹 魏华 《南昌大学学报:理科版》 CAS 北大核心 2016年第2期182-187,共6页
构建植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因原核表达载体,表达并纯化蛋白。本研究以植物乳杆菌ZDY 2013基因组DNA为模板,PCR扩增谷氨酸脱氢酶基因,连接到表达载体pET-32a(+)上,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达和镍柱亲和层... 构建植物乳杆菌谷氨酸脱氢酶基因原核表达载体,表达并纯化蛋白。本研究以植物乳杆菌ZDY 2013基因组DNA为模板,PCR扩增谷氨酸脱氢酶基因,连接到表达载体pET-32a(+)上,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达和镍柱亲和层析后获得目的蛋白,活性测定显示该蛋白具有谷氨酸脱氢酶的活性。同时,对表达菌株的酸耐受性测定结果表明,细胞对pH 4.5的酸胁迫耐受性提高1.4倍。实验结果为深入研究植物乳杆菌ZDY 2013谷氨酸脱氢酶保护细胞抵御酸胁迫提供有益的参考。 展开更多
关键词 谷氨酸脱氢酶 植物乳杆菌 基因表达
在线阅读 下载PDF
高产无色素普鲁兰糖突变菌株P1012的选育及发酵性能研究 被引量:4
5
作者 王贤卓 +1 位作者 郭建军 袁林 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第1期101-106,共6页
本研究旨在选育出高产普鲁兰多糖且黑色素分泌缺失的菌株,为普鲁兰的发酵生产提供宝贵的菌种资源。研究采用三种诱变剂(紫外线(UV)、亚硝基胍(NTG)、硫酸二乙酯(DES))对出发菌株茁芽短梗霉P23进行多轮诱变处理。通过从PDA平板... 本研究旨在选育出高产普鲁兰多糖且黑色素分泌缺失的菌株,为普鲁兰的发酵生产提供宝贵的菌种资源。研究采用三种诱变剂(紫外线(UV)、亚硝基胍(NTG)、硫酸二乙酯(DES))对出发菌株茁芽短梗霉P23进行多轮诱变处理。通过从PDA平板上挑选出色素低且黏度大的菌落作为候选菌株,并经红外光谱(FT-IR)分析其胞外多糖的构型。结果筛选出13株候选菌株,其中菌株P1012于PDA平板上培养7 d形成的菌落为白色,96 h发酵液呈乳白色,且吸光值(OD654 nm表示色素的相对含量)达到0.048,其胞外多糖经红外光谱检测可初步分析为普鲁兰多糖,与出发菌株P23相比,菌株P1012主要表现在细胞合成色素上的缺失。发酵培养后,测得普鲁兰产量为28.01 g/L,糖转化率达到56.02%,糖转化率比出发菌株高出28.8%。表明菌株P1012可以作为生产普鲁兰多糖的候选菌株。 展开更多
关键词 茁芽短梗霉 诱变 普鲁兰 黑色素
人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶(SP)活性区基因的克隆、表达与功能研究 预览
6
作者 崔佳 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第10期982-985,共4页
目的克隆和表达人纤溶酶原(plasminogen,Plg)的丝氨酸蛋白酶(SP)活性区基因μplg,并进行重组蛋白的纯化及功能探索。方法用PCR方法从p DNR-plg质粒上扩增μplg,构建原核表达载体p ET22b(+)-μplg,IPTG诱导重组蛋白表达后复性,再... 目的克隆和表达人纤溶酶原(plasminogen,Plg)的丝氨酸蛋白酶(SP)活性区基因μplg,并进行重组蛋白的纯化及功能探索。方法用PCR方法从p DNR-plg质粒上扩增μplg,构建原核表达载体p ET22b(+)-μplg,IPTG诱导重组蛋白表达后复性,再经Ni+-NTA树脂亲和层析纯化,通过与双歧杆菌外膜蛋白Serpin的共孵育实验来探索μPlg的功能。结果 PCR成功扩增出了680 bp的人纤溶酶原Plg的SP区基因μplg,测序正确后与表达载体p ET22b(+)重组,重组质粒p ET22b(+)-μplg在大肠杆菌BL21中成功表达出分子量约为35 k D的μPlg蛋白质,经纯化后的蛋白纯度高达约90%以上,与Serpin蛋白共孵育后得到了二者的复合物。结论人纤溶酶原μPlg的成功克隆、表达及纯化对于研究SP区功能和与双歧杆菌的黏附作用有重要意义。 展开更多
关键词 人纤溶酶原 丝氨酸蛋白酶(SP) 活性区 μplg 质粒构建
在线阅读 下载PDF
双歧杆菌插入失活载体的构建 预览
7
作者 崔佳 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第12期1180-1182,共3页
目的构建双歧杆菌serpin基因插入失活载体,为探究双歧杆菌外膜蛋白Serpin功能做准备。方法在实验室前期构建的p MD18-T/serpin质粒中serpin基因片段的SacⅡ酶切位点插入氯霉素抗性基因cmr,构建双歧杆菌p MD18-T/serpincmr,插入失活载体... 目的构建双歧杆菌serpin基因插入失活载体,为探究双歧杆菌外膜蛋白Serpin功能做准备。方法在实验室前期构建的p MD18-T/serpin质粒中serpin基因片段的SacⅡ酶切位点插入氯霉素抗性基因cmr,构建双歧杆菌p MD18-T/serpincmr,插入失活载体。结果 PCR成功扩增出了氯霉素抗性基因cmr且测序结果正确;p MD18-T/serpin质粒经SacⅡ单酶切、去磷酸化后与cmr连接,通过菌落PCR、酶切验证和测序显示cmr已成功插入serpin基因片段中。结论成功构建了双歧杆菌serpin基因插入失活载体p MD18-T/serpin-cmr。 展开更多
关键词 双歧杆菌 serpin基因 氯霉素抗性基因cmr 插入失活载体
在线阅读 下载PDF
泡菜中植物乳杆菌的筛选及益生活性研究 预览 被引量:3
8
作者 段超 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第24期201-205,221共6页
从民间自制泡菜中筛选乳酸菌。根据菌落形态,革兰氏染色和溶钙透明圈,分离得到17株乳酸菌菌株,用16S r DNA测序鉴定分离菌株,并测试了其耐酸和耐胆盐能力。结果表明,筛选菌株中WHLP-01、WHLP-02、WHLP-03和WHPE-02四株菌株可以在p H=2.... 从民间自制泡菜中筛选乳酸菌。根据菌落形态,革兰氏染色和溶钙透明圈,分离得到17株乳酸菌菌株,用16S r DNA测序鉴定分离菌株,并测试了其耐酸和耐胆盐能力。结果表明,筛选菌株中WHLP-01、WHLP-02、WHLP-03和WHPE-02四株菌株可以在p H=2.0的环境下生存2 h;WHLP-01与WHLP-02两株菌株可以在0.3%胆盐浓度下存活;其中菌株WHLP-01属植物乳杆菌,其对常见的8株致病菌均有明显的抑制效果和降胆固醇能力,可以作为微生态制剂的候选菌株深入研究。 展开更多
关键词 泡菜 乳杆菌 益生活性 16S RDNA
在线阅读 免费下载
基于细胞的抗单增李斯特菌单域重链抗体的筛选及鉴定 被引量:1
9
作者 陈奇 +3 位作者 涂追 谭强来 熊勇华 陶勇 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1816-1821,共6页
【目的】获得针对单增李斯特菌的特异性单域重链抗体,并对筛选过程中特异性克隆的富集规律进行分析,为筛选具有种属特异性的噬菌体展示抗体提供参考。【方法】采用固相筛选技术,以热灭活的单增李斯特菌菌体为抗原,通过四轮常规筛选和一... 【目的】获得针对单增李斯特菌的特异性单域重链抗体,并对筛选过程中特异性克隆的富集规律进行分析,为筛选具有种属特异性的噬菌体展示抗体提供参考。【方法】采用固相筛选技术,以热灭活的单增李斯特菌菌体为抗原,通过四轮常规筛选和一轮消减筛选,从驼源天然噬菌体展示文库中筛选针对单增李斯特菌的单域重链抗体。采用Phage-ELISA法,对后四轮筛选洗脱物中随机挑选的噬菌体进行鉴定,阳性克隆进行基因测序及结合特异性分析。通过多序列比对分析将获得的基因序列进行分组和统计。【结果】成功筛选到2株单增李斯特菌特异性的单域重链抗体。【结论】在优化的筛选条件下,基于全细胞的筛选方法能够获得特异性识别单增李斯特菌的单域重链抗体,消减筛选对于去除非特异性克隆是有效的和必要的。 展开更多
关键词 噬菌体抗体库 单增李斯特菌 消减筛选法 单域重链抗体
双歧杆菌原生质体的制备及其转化系统的建立 预览 被引量:2
10
作者 章昭琳 +1 位作者 王报贵 魏华 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期61-65,共5页
考察了长双歧杆菌WBL001菌体生长状态、酶解浓度、时长、温度以及不同渗透压稳定剂等因素,获得长双歧杆菌WBL001原生质体制备及再生的优化条件:长双歧杆菌以3%接种量活化至MRS培养基,培养至对数中期(OD600∶1),5μg/mL变溶菌素,37℃... 考察了长双歧杆菌WBL001菌体生长状态、酶解浓度、时长、温度以及不同渗透压稳定剂等因素,获得长双歧杆菌WBL001原生质体制备及再生的优化条件:长双歧杆菌以3%接种量活化至MRS培养基,培养至对数中期(OD600∶1),5μg/mL变溶菌素,37℃孵育30 min,以原生质体稳定液SMM为反应缓冲液,原生质体生成率达到81%,其再生率达到48%;在此基础上,通过聚乙二醇PEG融合,将穿梭表达载体pBAX转入双歧杆菌原生质体,成功建立双歧杆菌转化体系。 展开更多
关键词 双歧杆菌 原生质体 再生 变溶菌素 转化
在线阅读 免费下载
两歧双歧杆菌中serpin基因的克隆、表达与功能分析 被引量:2
11
作者 叶若松 黎鹏 +3 位作者 章昭琳 崔佳 魏华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期38-42,共5页
从Bifidobacterium bifidum WBB102基因组中克隆了serpin基因片段,构建了重组Serpin蛋白的原核表达体系,实现了Serpin的表达与纯化。纯化的Serpin蛋白进行了抑制肠道蛋白酶活性检测,以及对双歧杆菌粘附作用影响的显微观察研究。结果... 从Bifidobacterium bifidum WBB102基因组中克隆了serpin基因片段,构建了重组Serpin蛋白的原核表达体系,实现了Serpin的表达与纯化。纯化的Serpin蛋白进行了抑制肠道蛋白酶活性检测,以及对双歧杆菌粘附作用影响的显微观察研究。结果表明:WBB102中长度为768bp的serpin基因序列,与cENEBANK中Bifidobacterium longum NCC2705 serpin序列同源性为99.9%。原核表达载体pBX2-WBB102表达的Serpin能有效地抑制糜蛋白酶和胰弹性蛋白酶的活性,最高抑制率分别为90%和97%,显微观察结果证实Serpin能促进双歧杆菌对HT-29细胞的粘附。 展开更多
关键词 双歧杆菌 SERPIN 克隆表达 粘附
显齿蛇葡萄中二氢杨梅素的提取纯化 预览 被引量:3
12
作者 夏慧玲 胡居吾 +3 位作者 熊伟 李雄辉 林金枝 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第32期 19783-19785,共3页
[目的]优化显齿蛇葡萄中二氢杨梅素的提取纯化工艺。[方法]采用水提法从显齿蛇葡萄中提取二氢杨梅素,并对二氢杨梅素进行了纯化和检测。通过单因素试验和正交试验优化工艺提取条件。[结果]最佳工艺条件为:提取温度为90℃,料液比为1∶10... [目的]优化显齿蛇葡萄中二氢杨梅素的提取纯化工艺。[方法]采用水提法从显齿蛇葡萄中提取二氢杨梅素,并对二氢杨梅素进行了纯化和检测。通过单因素试验和正交试验优化工艺提取条件。[结果]最佳工艺条件为:提取温度为90℃,料液比为1∶10(g∶ml),提取时间为60 min,在此工艺条件下,二氢杨梅素的得率最大;重结晶5次后总黄酮纯度由原来的68.51%提高至91.0%。[结论]该二氢杨梅素的提取纯化工艺简单,成本低、原料来源易,作为抗氧化剂生产工艺前景看好。 展开更多
关键词 二氢杨梅素 显齿蛇葡萄 纯化
在线阅读 下载PDF
Serpin多抗制备和产Serpin的双歧杆菌菌株的初步筛选 预览 被引量:1
13
作者 崔佳 +6 位作者 杨友均 黎鹏 魏华 章昭琳 徐迪 徐锋 李波 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期 934-939,共6页
从长双歧杆菌WBL001基因组中克隆了serpin基因,构建重组Serpin蛋白的原核表达体系pBX2-serpin,纯化表达产物作为抗原,免疫小鼠制备Serpin的多克隆抗体。采用偶联Serpin的磁珠纯化多克隆抗体,并探究了不同溶剂对抗体洗脱效率的影响。纯... 从长双歧杆菌WBL001基因组中克隆了serpin基因,构建重组Serpin蛋白的原核表达体系pBX2-serpin,纯化表达产物作为抗原,免疫小鼠制备Serpin的多克隆抗体。采用偶联Serpin的磁珠纯化多克隆抗体,并探究了不同溶剂对抗体洗脱效率的影响。纯化的多抗用于斑点杂交筛选产Serpin蛋白的菌株。结果表明:磁珠纯化多克隆抗体以1 mol/L NaOH的洗脱率最高,达50%;纯化后的Serpin抗体消除了与部分乳酸菌和致病菌的非特异性反应;采用斑点杂交方法从11株双歧杆菌中筛选到婴儿双歧杆菌WBAN07具有类Serpin蛋白。 展开更多
关键词 长双歧杆菌WBL001 SERPIN 纯化 抗血清 斑点杂交
在线阅读 下载PDF
双歧杆菌表达系统的研究进展 预览 被引量:2
14
作者 崔佳 +1 位作者 曾明 魏华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2010年第5期914-918,共5页
双歧杆菌作为表达外源基因的宿主备受关注,成为近年来研究的热点。本文从双歧杆菌表达系统的组成、外源蛋白的表达等角度综述了近期的研究成果,对该系统在口服疫苗和抗肿瘤方面的研究及应用前景进行了展望。
关键词 双歧杆菌 表达系统 外源蛋白
在线阅读 下载PDF
高特异性长双歧杆菌多克隆抗体的制备 被引量:3
15
作者 徐锋 彭珍 +5 位作者 熊勇华 赖卫华 魏华 曾明 陈雪岚 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期182-184,195共4页
目的制备高特异性长双歧杆菌多克隆抗体,为长双歧杆菌的免疫学检测提供参考。方法以破碎的长双歧杆菌细胞碎片为抗原免疫小鼠,制备抗血清 利用偶联相同抗原的磁珠,分离纯化长双歧杆菌多抗,分别采用间接ELISA、SDS-PAGE和点杂交法检测纯... 目的制备高特异性长双歧杆菌多克隆抗体,为长双歧杆菌的免疫学检测提供参考。方法以破碎的长双歧杆菌细胞碎片为抗原免疫小鼠,制备抗血清 利用偶联相同抗原的磁珠,分离纯化长双歧杆菌多抗,分别采用间接ELISA、SDS-PAGE和点杂交法检测纯化多抗的效价、纯度和交叉反应性。结果所制备的纯化多抗效价约为1∶1500,回收率约为80%,纯度可达83%。纯化的多抗有效消除了与金黄葡萄球菌的非特异性交叉反应。结论已制备出高特异性的长双歧杆菌多克隆抗体,可用于长双歧杆菌制剂的菌体检测。 展开更多
关键词 长双歧杆菌 多克隆抗体 磁珠 交叉反应
玉米赤霉烯酮降解酶基因(ZEN-jjm)的克隆、表达及活性分析 预览 被引量:22
16
作者 程波财 史文婷 +3 位作者 罗洁 彭福中 魏华 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期 225-230,共6页
玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是世界上污染范围最广泛的一种镰刀霉毒素,能导致人或动物不孕、流产等症状,损害内脏器官并促进癌细胞的生长。本文通过设计1对特异性引物,从粉红螺旋聚孢霉(Gliocladium roseum)中克隆获得大小为795b... 玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是世界上污染范围最广泛的一种镰刀霉毒素,能导致人或动物不孕、流产等症状,损害内脏器官并促进癌细胞的生长。本文通过设计1对特异性引物,从粉红螺旋聚孢霉(Gliocladium roseum)中克隆获得大小为795bp的DNA片段(ZEN-jjm),通过构建E.coil原核表达载体进行表达。经HPLC检测证实,IPTG诱导后的细胞裂解上清能在3h内完全降解液体中1μg/mL的ZEN。序列分析结果表明ZEN-jjm与zhd101存在9个碱基的差异,ZEN-jjm编码的ZEN降解酶与文献报道的乳糖水解酶存在3个氨基酸的差异,但ZEN毒素降解实验证实二者活性相似。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 粉红螺旋聚孢霉 ZEN降解酶 基因克隆 表达
在线阅读 下载PDF
2株动物微生态制剂菌的分离鉴定及其生物学特性初步研究
17
作者 谭强来 姜淑英 +5 位作者 陈廷涛 汪孟娟 熊顺强 魏华 徐国茂 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2010年第12期1077-1080,共4页
目的从饲料中进行微生物的分离与培养,筛选动物微生态制剂候选菌株。方法利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)筛选得到的7株微生物区分为2种菌,经测序确定其为热带假丝酵母和植物乳杆菌;检测了不同pH、温度、胆盐、金属铜和需/厌氧对其生长的... 目的从饲料中进行微生物的分离与培养,筛选动物微生态制剂候选菌株。方法利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)筛选得到的7株微生物区分为2种菌,经测序确定其为热带假丝酵母和植物乳杆菌;检测了不同pH、温度、胆盐、金属铜和需/厌氧对其生长的影响。结果当pH小于2.5或铜离子高于150 ppm时,植物乳杆菌无法生长,而热带假丝酵母数量略有下降;胆盐和金属离子对2种菌影响较小,42℃培养条件下相对于30℃培养时热带假丝酵母数量下降了6个数量级。结论筛选得到的2株菌具有应用于动物微生态制剂的潜力,为动物微生态制剂候选菌筛选和评价提供了基础数据。 展开更多
关键词 饲料 动物微生态制剂 活菌计数 DGGE
益生菌DGGE Marker的制备及验证 被引量:2
18
作者 陈廷涛 谭强来 +4 位作者 徐锋 叶若松 魏华 曾明 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第10期865-868,共4页
目的制备指示益生菌标准菌株的DGGEmarker并对其可靠性进行验证。方法分别利用乳杆菌、双歧杆菌特异性引物和细菌V3区通用引物对选取的乳杆菌、双歧杆菌标准菌株DNA进行扩增,利用DGGE检测每个标准菌株条带位置是否与利用这些标准菌株... 目的制备指示益生菌标准菌株的DGGEmarker并对其可靠性进行验证。方法分别利用乳杆菌、双歧杆菌特异性引物和细菌V3区通用引物对选取的乳杆菌、双歧杆菌标准菌株DNA进行扩增,利用DGGE检测每个标准菌株条带位置是否与利用这些标准菌株制备的DGGEmarker条带相对应。结果DGGE图谱显示,乳杆菌和双歧杆菌特异性引物或V3区通用引物扩增后的每个标准菌株优势条带,与乳杆菌、双歧杆菌DGGEmarker均有对应关系。结论常见益生菌菌株的DGGEmarker可以指示相应菌株的存在;其研制成功,可为微生物生态学中应用DGGE技术检测特定微生物种类的动态变化,提供新的思路。 展开更多
关键词 乳酸菌 双歧杆菌 DC GE
Viili中乳酸菌的分离、鉴定及其产胞外多糖的初步研究 预览 被引量:4
19
作者 郭亮 谭强来 +3 位作者 徐锋 魏华 曾明 《食品科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期263-267,共5页
从Viili中分离得到两株具有较高产胞外多糖能力的乳酸菌,其产多糖量可达111.7mg/L和106.5mg/L。对菌株I、菌株II进行16SrDNA序列分析及生理生化鉴定。16S rDNA序列测序和API 50 CI-IL试纸条鉴定结果表明:两株菌分别为Lactobacillu... 从Viili中分离得到两株具有较高产胞外多糖能力的乳酸菌,其产多糖量可达111.7mg/L和106.5mg/L。对菌株I、菌株II进行16SrDNA序列分析及生理生化鉴定。16S rDNA序列测序和API 50 CI-IL试纸条鉴定结果表明:两株菌分别为Lactobacillus paracasei ssp.paracasei和Lactobacillus delbrueckii ssp.bulgaricus。 展开更多
关键词 Viili 胞外多糖 乳酸菌 16S RDNA
在线阅读 下载PDF
单核增生李斯特菌Internalin A的克隆表达与抗体制备 被引量:5
20
作者 彭珍 魏华 +3 位作者 熊勇华 赖卫华 徐锋 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1073-1076,共4页
目的克隆表达单核增生李斯特菌Internalin A(InlA),并以之为抗原制备检测单核增生李斯特菌的抗体。方法通过PCR技术从单核细胞增生李斯特菌4b中扩增出inlA基因,克隆筛选和测序鉴定后,最终构建该基因的原核表达质粒pGEX-4T-InlA,谷胱... 目的克隆表达单核增生李斯特菌Internalin A(InlA),并以之为抗原制备检测单核增生李斯特菌的抗体。方法通过PCR技术从单核细胞增生李斯特菌4b中扩增出inlA基因,克隆筛选和测序鉴定后,最终构建该基因的原核表达质粒pGEX-4T-InlA,谷胱甘肽树脂亲和层析纯化表达产物后,免疫小鼠分别制备相应的多抗和单抗。结果在大肠埃希菌中成功表达了InlA,并对其进行了纯化,融合表达产物分子量约为110 kD;免疫小鼠获得的抗血清效价达到1∶1600;得到了3株抗InlA的单克隆抗体杂交瘤细胞株,腹水单抗效价为1∶1×10^5-1∶3×10^5。2种抗体与其他病原菌均无交叉反应。结论通过表达单核增生李斯特菌的特异性蛋白制备的抗体,能有效地消除交叉反应,提高检测的特异性。 展开更多
关键词 单核增生李斯特菌 InlA 纯化 抗血清 特异性
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈