期刊文献+
共找到95篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
杭州地区甲型副伤寒沙门菌基因组流行病学的初步研究
1
作者 汪皓秋 +2 位作者 郑伟 郑之北 潘劲草 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期116-123,共8页
目的 了解近年来杭州地区甲型副伤寒沙门菌的基因组流行病学特征.方法 采用二代测序技术(NGS)对2002—2013年杭州地区分离的60株甲型副伤寒沙门菌代表株进行测序并下载公共数据库中的391株甲型副伤寒沙门菌基因组数据.以ATCC9150基因... 目的 了解近年来杭州地区甲型副伤寒沙门菌的基因组流行病学特征.方法 采用二代测序技术(NGS)对2002—2013年杭州地区分离的60株甲型副伤寒沙门菌代表株进行测序并下载公共数据库中的391株甲型副伤寒沙门菌基因组数据.以ATCC9150基因组为参考序列,鉴定所有基因组的单核苷酸多态性(SNP)位点并去除重组,构建基于SNP位点的系统发育树.用SRST2和多位点序列分型(MLST)工具扫描获得MLST型别,用SISTR扫描获得核心基因组多位点序列分型(cgMLST)型别,用SRST2和BLASTN扫描获得耐药基因.选择7种抗生素对60株杭州菌株进行药物敏感试验.结果 451株甲型副伤寒沙门菌基因组序列去重组后共鉴定得到19258个SNP位点,菌株平均距离为0.0070,距离小于0.05的占96.73%,提示451株甲型副伤寒沙门菌基因组差异较小.58株杭州ST85型分离株基因组序列高度相似,提示2002—2013年杭州地区甲型副伤寒疫情主要由ST85型菌株克隆传播引起.杭州菌株与5株国内5省菌株遗传距离较远(平均距离为0.057),与15株云南菌株距离较近(平均距离为0.0032),与柬埔寨菌株的距离最近(平均距离为0.0018),提示ST85型菌株存在跨国传播的可能性.2株杭州ST129型分离株中,HZ333与分离自江苏的两株菌近源(平均距离为0.0097),提示ST129型部分菌株存在国内传播的可能性.60株杭州菌株除2株未分型外,其余58株菌被分为9个cgMLST型别;公共数据库中391株菌除57株未分型外,其余334株菌被分为165个cgMLST型别.60株杭州菌株均携带耐药基因,其中56株菌携带aac6-Iy耐药基因,4株菌携带aac6-Iaa耐药基因;公共数据库中的391株甲型副伤寒沙门菌除了13株菌未携带耐药基因,其他378株菌均携带aac6-Iy耐药基因.60株杭州菌株中56株菌对7种抗生素均敏感;3株菌对复方新诺明耐药;1株菌对氨苄西林、四环素耐药.结论 2002—2013年杭州地区甲型副� 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 二代测序 单核苷酸多态性 多位点序列分型 核心基因组多位点序列分型 耐药基因
二代测序技术在一起食源性疾病事件病原鉴定中的初步应用
2
作者 汪皓秋 +7 位作者 郑伟 张蔚 刘涛 楼秀芹 黄春萍 黄利明 沈利明 潘劲草 《中华预防医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期647-652,共6页
目的 分析一起食源性疾病事件中病原的基因组学特征.方法 选取事件中死亡病例血样和洗胃前胃内容物,以及其就餐食物作为样品,共11份,对金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌以及有毒物质进行检测,并对食物中检测到的细菌进行计数.采用实时荧光... 目的 分析一起食源性疾病事件中病原的基因组学特征.方法 选取事件中死亡病例血样和洗胃前胃内容物,以及其就餐食物作为样品,共11份,对金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌以及有毒物质进行检测,并对食物中检测到的细菌进行计数.采用实时荧光PCR方法检测分离得到的10株蜡样芽胞杆菌的16 S rDNA保守区基因和呕吐毒素ces基因,并采用二代测序技术对分离株进行了基因组测序,初步分析质粒携带情况,并与公共数据库中参考序列进行比较基因组学分析.结果 所有样品中,仅蜡样芽胞杆菌检测阳性,其中蛋炒饭中蜡样芽胞杆菌计数为1.9×10^7 CFU/g,干炸鱼和卤猪头肉中均为3.0×10^3 CFU/g.10株分离株均携带hlyⅢ、nheA、nheB、inlA、inhA毒力基因;携带plcR和nheC基因的菌株均为9株.分离株16 S rDNA保守区基因和ces基因均为阳性,而且均携带完整的ces基因簇序列,并且与分离自英国的AH187株携带的呕吐毒素质粒pCER270(NC_010924.1)和分离自日本的NC7401株携带的质粒pNCcld(NC_016792.1)的序列完全一致.质粒比对结果显示,分离株序列与炭疽杆菌的pXO1和pXO2质粒差异较大,但携带含ces基因的pNCCld质粒.10株分离株基因组系统发生树显示,10株蜡样芽胞杆菌高度相似(系统发生树上距离为2.0×10^-6~9.0×10^-6)且与AH187株和NC7401株均高度相似(均属ST26型,系统发生树上距离均为3.8×10^-5~4.5×10^-5).结论 本次食源性疾病事件由不携带pXO1、pXO2质粒的呕吐型蜡样芽胞杆菌污染蛋炒饭引起.提示蜡样芽胞杆菌引起呕吐型食物中毒可能与携带ces基因的ST26、ST164等型别菌株相关. 展开更多
关键词 病原 基因组学 序列分析 蜡样芽胞杆菌 二代测序
杭州市2014年一起金黄色葡萄球菌肠毒素所致食源性疾病暴发调查 被引量:2
3
作者 黄利明 胡连鑫 +3 位作者 陈树昶 黄春萍 刘辉 《中华流行病学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1642-1644,共3页
目的 运用现场流行病学手段,分析2014年杭州市某大学发生的一起食源性疾病暴发原因。方法 通过查阅学校附近医院就诊记录和校医务室门诊日志开展病例个案调查,描述疾病分布特征,绘制流行病学曲线图,开展病例对照研究和危害因素调查... 目的 运用现场流行病学手段,分析2014年杭州市某大学发生的一起食源性疾病暴发原因。方法 通过查阅学校附近医院就诊记录和校医务室门诊日志开展病例个案调查,描述疾病分布特征,绘制流行病学曲线图,开展病例对照研究和危害因素调查。结果 本次食源性疾病暴发潜伏期为3.0(1.5~5.0) h。病例均有学校附近某小吃店就餐史,因可疑食物粉丝在不锈钢保温桶中存放时间过长(〉3 h),导致污染金黄色葡萄球菌后产生肠毒素;采集的18份样品中3份病例粪便和6份食物原料葡萄球菌肠毒素检测结果为阳性。结论 该起食源性疾病暴发为粉丝污染金黄色葡萄球菌导致的食物中毒。 展开更多
关键词 食物中毒 金黄色葡萄球菌 肠毒素 呕吐
2002-2013年杭州地区甲型副伤寒沙门菌分子分型研究 被引量:1
4
作者 汪皓秋 郑伟 +2 位作者 张蔚 潘劲草 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期57-61,共5页
目的了解近年来杭州地区甲型副伤寒沙门菌的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)对2002—2013年杭州地区分离的72株甲型副伤寒沙门菌代表株进行分子分型及流行病学分析。结果72株甲型副伤寒沙门... 目的了解近年来杭州地区甲型副伤寒沙门菌的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)对2002—2013年杭州地区分离的72株甲型副伤寒沙门菌代表株进行分子分型及流行病学分析。结果72株甲型副伤寒沙门菌分为11个PFGE(XbaⅠ、BlnⅠ)型别,6个MLVA型别。受检的34个可变串联重复序列(VNTR)位点中,1188K、2075K、2201K、4346K这4个位点表现出多态性。PFGE显示出较MLVA更高的分辨力。除X4B5、X7B7、X8B8、X9B9、X10B10这5种型别外,其他6种型别为同一个克隆系(相似度大于95%),该克隆系菌株占受试总菌株数的93.1%。结论2002—2013年杭州地区甲型副伤寒疫情主要由同一克隆系的菌株引起,联合应用PFGE和MLVA有利于甲型副伤寒的流行病学调查。 展开更多
关键词 甲型副伤寒沙门菌 脉冲场凝胶电泳 多位点串联重复序列分析
免疫磁珠-环介导等温扩增联用技术快速检测副溶血性弧菌方法的建立 被引量:2
5
作者 刘涛 +2 位作者 张蔚 楼秀芹 斯国静 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2017年第4期266-271,共6页
目的建立一种快速且质优价廉的检测副溶血性弧菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。方法制备副溶血性弧菌跨膜转录调控蛋白toxR多克隆抗体,鉴定纯化后,进行磁珠包被制成免疫磁珠。利用免疫磁... 目的建立一种快速且质优价廉的检测副溶血性弧菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。方法制备副溶血性弧菌跨膜转录调控蛋白toxR多克隆抗体,鉴定纯化后,进行磁珠包被制成免疫磁珠。利用免疫磁珠分离法和环介导等温扩增联用完成对副溶血性弧菌的检测,扩增产物经SYBR Green I染色肉眼观察和电泳鉴定。将副溶血性弧菌菌液作一系列稀释后,运用LAMP法进行敏感性检测,利用副溶血性弧菌和非副溶血性弧菌来验证LAMP方法的特异性。结果LAMP检测副溶血性弧菌的检测下限为10~5 CFU/ml。副溶血性弧菌出现LAMP特征性扩增反应,非副溶血性弧菌未出现LAMP扩增。结论 LAMP检测方法为快速诊断试剂盒打下实验基础,适合日常监测,可满足快速检测的需要。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 ToxR基因 环介导等温扩增 免疫磁珠
杭州地区单核细胞增生李斯特菌食品分离株分子型别研究 预览 被引量:2
6
作者 潘劲草 +5 位作者 汪皓秋 斯国静 刘涛 楼秀芹 张蔚 严杰 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期264-270,共7页
目的研究杭州地区单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)食品分离株的分子分型情况,了解当地流行株的型别特征。方法用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)的方法对单核细胞增生李斯特菌进行分子分型。PFGE结果... 目的研究杭州地区单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)食品分离株的分子分型情况,了解当地流行株的型别特征。方法用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)的方法对单核细胞增生李斯特菌进行分子分型。PFGE结果进行聚类分析,并绘制MLST数据的最小生成树。结果 6个血清型组成的133株杭州食品分离株共获得19个MLST型别,并发现1个新的ST型ST767。ST9和ST121是数量最多的型别。用AscI和ApaI酶切分别获得33和45个PFGE带型。结论杭州地区单核细胞增生李斯特菌食品分离株分子型别分布广泛,大部分菌株是可引起人李斯特菌病的Lineage I和Lineage II菌株。食品中单核细胞增生李斯特菌的污染比较严重,应加强监测与管理以防食源性疾病的发生。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 多位点序列分型 脉冲场凝胶电泳
在线阅读 下载PDF
多位点序列分型和脉冲场凝胶电泳技术在肠炎沙门菌暴发事件病原学鉴定中的应用 被引量:1
7
作者 郑伟 汪皓秋 +4 位作者 张蔚 文艳苹 郑之北 潘劲草 《中国预防医学杂志》 CAS 2015年第4期292-295,共4页
目的 探讨脉冲场凝胶电泳(pulse-field gel electrophoresis,PFGE)和多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术在沙门菌鉴定中的应用价值。方法 对分离自一起食物中毒事件中的27株沙门菌,用肠杆菌科鉴定系统API 20E和AT... 目的 探讨脉冲场凝胶电泳(pulse-field gel electrophoresis,PFGE)和多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术在沙门菌鉴定中的应用价值。方法 对分离自一起食物中毒事件中的27株沙门菌,用肠杆菌科鉴定系统API 20E和ATB ID 32E进行生化鉴定并血清分型,以脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)进行分子分型。结果 27株沙门菌的生化鉴定结果为沙门菌属细菌,其中25株血清分型结果为肠炎沙门菌,抗原模式(9,12:g,m);其余两株菌H相抗原除g和m因子凝集阳性外,d因子也有凝集反应。PFGE结果显示27株菌株中26株的带型完全一致,另1株与其他26株仅有1条条带的差异,相似度为96.3%。27株菌的MLST型别均为ST11型,提示为肠炎沙门菌。结论 分子分型技术,特别是MLST技术有助于沙门菌的辅助鉴定。 展开更多
关键词 沙门菌 肠炎 多位点序列分型 电泳 凝胶 脉冲场
食品中阪崎肠杆菌多重PCR检测方法的建立 被引量:3
8
作者 楼秀芹 斯国静 +2 位作者 戚建江 刘涛 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第2期159-163,共5页
目的建立并优化食品中阪崎肠杆菌检测的多重PCR方法。方法以阪崎肠杆菌ITS序列,16srDNA和ompA基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化多重PCR反应体系;验证其特异性、灵敏度和抗干扰能力;并在实际样品中进行阪崎肠杆菌的检测,检测... 目的建立并优化食品中阪崎肠杆菌检测的多重PCR方法。方法以阪崎肠杆菌ITS序列,16srDNA和ompA基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化多重PCR反应体系;验证其特异性、灵敏度和抗干扰能力;并在实际样品中进行阪崎肠杆菌的检测,检测结果与现行国家标准方法进行比较。结果该多重PCR反应体系具有良好的特异性、灵敏度和较强的抗干扰能力。人工污染奶粉样品的模拟实验表明,增菌后该多重PCR反应体系可以检出1CFU/100g奶粉的阪崎肠杆菌。108份不同种类的实际样品中共检出阪崎肠杆菌10份,检出率为9.26%,检测结果与采用现行国家标准方法测定具有良好的一致性。结论本研究所建立的多重PCR方法特异好、灵敏较高、结果准确,可用于食品中阪崎肠杆菌的日常检测。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 多重PCR 食源性致病菌
2型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段的表达及其抗原性分析 被引量:1
9
作者 刘涛 刘继峰 +3 位作者 斯国静 胡俊 李钧 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第12期2570-2572,2592共4页
目的获得单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G(gG2)免疫优势片段gG321-580并初步研究其抗原性。方法PCR扩增gG321-580基因,利用Bac—to—Bac表达系统表达gG321-580融合蛋白,Westernblot和间接ELISA鉴定蛋白活性。结果在Sf9细胞中成功表... 目的获得单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G(gG2)免疫优势片段gG321-580并初步研究其抗原性。方法PCR扩增gG321-580基因,利用Bac—to—Bac表达系统表达gG321-580融合蛋白,Westernblot和间接ELISA鉴定蛋白活性。结果在Sf9细胞中成功表达HSV-2gG321-580His蛋白,gG321-580His能与小鼠抗HSV-2gG2单抗结合,在60KDa附近出现特异性结合条带,ELISA分析初步证实gG321-580His能够与HSV-2阳性血清反应,而不与HSV-1阳性血清和正常人血清反应。结论gG321-580His蛋白获得成功表达,ELISA检测显示其具有良好的抗原性,为研究以gG321-580蛋白作为靶区域的HSV-2型特异性诊断试剂盒打下实验基础。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒2型 糖蛋白G Bac—to—Bac杆状病毒表达系统 酶联免疫吸附
中国部分食品分离单增李斯特菌的抗菌药物敏感性及耐药基因检测 被引量:9
10
作者 王天姝 王艳 +12 位作者 贺春月 叶正兴 王毅 许柯 汪永禄 张兰荣 曾莹春 许学斌 王红 陈伟伟 王和 叶长芸 《疾病监测》 CAS 2013年第3期224-229,共6页
目的了解我国部分食品中分离单增李斯特菌的抗菌药物敏感性和耐药性,探讨单增李斯特菌耐药基因的携带与耐药表型的关系。方法采用微量肉汤稀释法对2005—2011年从我国7个省市/地区食品分离的203株单增李斯特菌进行庆大霉素、氨苄西林... 目的了解我国部分食品中分离单增李斯特菌的抗菌药物敏感性和耐药性,探讨单增李斯特菌耐药基因的携带与耐药表型的关系。方法采用微量肉汤稀释法对2005—2011年从我国7个省市/地区食品分离的203株单增李斯特菌进行庆大霉素、氨苄西林、头孢噻吩、青霉素、四环素、强力霉素、亚胺培南、红霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、利福平、万古霉素、氯霉素、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明、诺氟沙星、头孢呋肟、多粘菌素B、呋喃妥因、氯林可霉素共20种抗菌药物药敏试验,采用PCR方法对实验菌株进行9种耐药基因及接合型转座子Tn916检测,并对阳性基因产物进行序列测定分析。结果食源性单增李斯特菌对多粘菌素B、呋喃妥因、头孢呋肟、氯林可霉素、四环素、强力霉素、环丙沙星、诺氟沙星和氯霉素的耐药率分别为98.52%、55.66%、50.25%、12.81%、2.46%、1.97%、0.99%、0.99%和0.49%。203株单增李斯特菌中,5株对四环素耐药的菌株均检测出terM基因,其中3株菌的terM基因位于接合型转座子Tn916上。结论食品中分离的单增李斯特菌存在不同程度的耐药情况,并有83株多重耐药株存在,具有引起食源性单增李斯特菌感染的风险存在,应加强对抗生素使用的管理以保证食品安全及公众健康。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 微量肉汤稀释法 接合型转座子Tn916
应用脉冲场凝胶电泳技术对肠炎沙门菌食物中毒溯源分析 被引量:12
11
作者 吴爱萍 汪皓秋 +5 位作者 郑伟 张蔚 郑丽芳 王晓燕 李琳 《疾病监测》 CAS 2013年第12期1027-1029,共3页
目的 了解两起食物中毒事件的相关性,确定传染源及传播路径。方法 对采集的215份样本进行致病菌分离培养,将分离到的菌株进行生化鉴定和血清分型;并应用脉冲场凝胶电泳技术(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对其进行同源... 目的 了解两起食物中毒事件的相关性,确定传染源及传播路径。方法 对采集的215份样本进行致病菌分离培养,将分离到的菌株进行生化鉴定和血清分型;并应用脉冲场凝胶电泳技术(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)对其进行同源性分析。结果 共检出27株肠炎沙门菌,其中4株分离自留样食品,3株分离自厨师,20株分离自患者。PFGE图谱显示27株菌中有26株条带完全一致,1株菌与其他26株菌有1个条带的差异,两者相似性为96.3%。结论 两起食物中毒事件的原因是冷菜制作过程中受到携带肠炎沙门菌厨师的污染。PFGE技术适用于食物中毒事件中传染源的追踪及传播路径的明确。 展开更多
关键词 食物中毒 肠炎沙门菌 脉冲场凝胶电泳
多位点序列分型技术在沙门菌鉴定中的应用研究 被引量:3
12
作者 周国明 汪皓秋 +1 位作者 郑伟 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第1期120-122,126共4页
目的:探讨多位点序列分型技术(Multilocus sequence typing,MLST)在沙门菌鉴定中的应用。方法:对1株分离自腹泻病人的沙门菌疑似菌株用肠杆菌科鉴定试条API 20E进行生化鉴定并进行血清学鉴定,应用MLST分型方法对该菌株分子分型。结... 目的:探讨多位点序列分型技术(Multilocus sequence typing,MLST)在沙门菌鉴定中的应用。方法:对1株分离自腹泻病人的沙门菌疑似菌株用肠杆菌科鉴定试条API 20E进行生化鉴定并进行血清学鉴定,应用MLST分型方法对该菌株分子分型。结果:API 20E鉴定为沙门菌属,Vi因子血清不凝集,O因子血清A-F O多价不凝集。该菌的MLST型别为ST64型,提示为鸭沙门菌。结论:MLST分子分型技术有助于沙门菌的鉴别。 展开更多
关键词 鸭沙门菌 多位点序列分型
2011—2012年杭州市肠道沙门菌临床分离株的分子型别分析 被引量:1
13
作者 张蔚 +2 位作者 郑伟 汪皓秋 潘劲草 《中国预防医学杂志》 CAS 2013年第6期444-448,共5页
目的研究2011—2012年杭州市肠道沙门菌临床分离株的型别,了解本地菌株分子流行病学特征。方法对66株肠道沙门菌临床分离株进行血清分型和多位点序列分型(MLST)。对其中主要血清型:鼠伤寒、甲型副伤寒、萨雷甲尼和肠炎沙门菌菌株进... 目的研究2011—2012年杭州市肠道沙门菌临床分离株的型别,了解本地菌株分子流行病学特征。方法对66株肠道沙门菌临床分离株进行血清分型和多位点序列分型(MLST)。对其中主要血清型:鼠伤寒、甲型副伤寒、萨雷甲尼和肠炎沙门菌菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果分布于21个血清型的66株沙门菌分成26个ST型别。发现一株纽波特沙门菌为新型ST1690。菌株血清型与MLST型别数据库中所对应的血清型符合率为100.00%。9株甲型副伤寒沙门菌的PFGE带型完全一致(P7型),与先前杭州流行菌株有差异(P1-P6型)。6株肠炎沙门菌分成4个PFGE型,型间最小相似性为92.70%。13株鼠伤寒沙门菌分为11个PFGE型,型间最小相似性为71.70%。7株萨雷甲尼沙门菌分成4个PFGE型别,型间最小相似性为91.00%。结论近年杭州腹泻病人中流行的肠道沙门菌菌株主要血清型为鼠伤寒、甲型副伤寒、萨雷甲尼和肠炎等。甲型副伤寒沙门菌菌株在杭州出现了新PFGE型别。MLST数据可以对沙门菌血清学鉴定提供一定的帮助。 展开更多
关键词 肠道沙门菌 血清型 多位点序列分型 脉冲场凝胶电泳
中国部分食品来源单增李斯特菌中致病相关基因的分布研究 被引量:5
14
作者 贺春月 王艳 +15 位作者 王天姝 叶正兴 代航 许柯 汪永禄 张兰荣 王连秀 曾莹春 许学斌 王红 陈伟伟 冉陆 姚颖波 王和 叶长芸 《疾病监测》 CAS 2013年第5期384-388,共5页
目的了解中国食品来源部分单增李斯特菌(Listeria monocytogences,LM)中致病相关基因的分布情况。方法 383株LM分离自2002-2011年中国14省(市)的生肉、熟食、蔬菜、冷饮、水产等食品。采用PCR(polymerase chain reaction)和DNA打... 目的了解中国食品来源部分单增李斯特菌(Listeria monocytogences,LM)中致病相关基因的分布情况。方法 383株LM分离自2002-2011年中国14省(市)的生肉、熟食、蔬菜、冷饮、水产等食品。采用PCR(polymerase chain reaction)和DNA打点杂交方法在单增李斯特菌中进行了55个致病相关基因的检测。结果 50个致病相关基因检出率均为100%,inlF、fbpA和mprF基因检出率为99.73%,aut基因检出率为99.22%(380/383),vip基因检出率为98.17%(376/383)。结论 383株食品来源单增李斯特菌中,大部分致病相关基因均存在,部分毒力基因的缺失存在多样性。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 致病相关基因 聚合酶链反应 DNA打点杂交
单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白免疫优势肽段在杆状病毒表达系统的表达及其反应原性
15
作者 刘涛 刘继峰 +3 位作者 斯国静 胡俊 李钧 《中国预防医学杂志》 CAS 2013年第4期273-276,共4页
目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对单纯疱疹病毒II型(HSV-2)糖蛋白G(gG-2)免疫优势片段gG321-580进行表达,纯化并评价其反应原性,以探索HSV-2免疫诊断试剂的研制。方法提取HSV-2DNA作为模板,PCR扩增gG321-580基因,克隆至pFastBa... 目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对单纯疱疹病毒II型(HSV-2)糖蛋白G(gG-2)免疫优势片段gG321-580进行表达,纯化并评价其反应原性,以探索HSV-2免疫诊断试剂的研制。方法提取HSV-2DNA作为模板,PCR扩增gG321-580基因,克隆至pFastBac HTC载体中,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达His-gG321-580融合蛋白,SDS-PAGE和Western-blotting鉴定表达产物,NTA-Ni 2+纯化后间接ELISA评价其反应原性。结果 HSV-2gG321-580在昆虫细胞Sf9中得到特异性表达,纯化后的重组gG321-580蛋白对HSV-2阳性血清抗体有较好的抗原性和特异性。结论 gG321-580蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中成功表达,表达产物表现出良好的反应原性,为发展HSV-2免疫诊断试剂奠定了基础。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒Ⅱ型 糖蛋白G Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 免疫优势肽段
2007年-2011年杭州地区食品中单核细胞增生李斯特菌PFGE型别分析 被引量:3
16
作者 郑伟 +3 位作者 王艳 金东 斯国静 潘劲草 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第5期1189-1192,共4页
目的:研究2007年~2011年杭州地区食品中分离的单核细胞增生李斯特菌的血清型别与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型状况,建立区域PFGE数据库,为该菌的分子流行病学研究和食源性疾病溯源提供支持。方法:对56株单核细胞增生李斯特菌进行... 目的:研究2007年~2011年杭州地区食品中分离的单核细胞增生李斯特菌的血清型别与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型状况,建立区域PFGE数据库,为该菌的分子流行病学研究和食源性疾病溯源提供支持。方法:对56株单核细胞增生李斯特菌进行血清鉴定和PFGE分型,采用BioNumerics软件分析聚类关系。结果:56株菌分为5个不同的血清型和24个PFGE带型。1/2a(51.79%)和1/2c(30.36%)是优势血清型。P12是优势PFGE型别(16.07%)。结论:杭州地区的单核细胞增生李斯特菌分子型别呈现多态性,用2种酶切综合分析能更好地了解单核细胞增生李斯特菌的遗传相关性及流行病学特征。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 人李斯特菌病 脉冲场凝胶电泳 血清型 分子分型
多重实时PCR及脉冲场凝胶电泳技术在一起食源性疾病暴发事件中的应用
17
作者 黎燕 +3 位作者 张蔚 钱小平 郑伟 汪皓秋 《中国预防医学杂志》 CAS 2012年第6期 439-442,共4页
目的探讨多重实时PCR(multiplex real-time PCR,MRP)和脉冲场凝胶电泳(pulse field gel elec-trophoresis,PFGE)技术在食源性疾病检测中的应用。方法利用多重实时PCR技术对39份样本增菌培养物进行沙门菌侵袭蛋白A基因(invA)、肠... 目的探讨多重实时PCR(multiplex real-time PCR,MRP)和脉冲场凝胶电泳(pulse field gel elec-trophoresis,PFGE)技术在食源性疾病检测中的应用。方法利用多重实时PCR技术对39份样本增菌培养物进行沙门菌侵袭蛋白A基因(invA)、肠产毒素性大肠埃希菌不耐热肠毒素基因(elt)、志贺菌和肠侵袭性大肠埃希菌侵袭力基因(ipaH)的检测,并根据多重实时PCR的结果有针对性的开展了常规的分离培养鉴定工作。应用PFGE对10株分离菌株进行分子分型。结果 10份患者肛拭检出沙门菌侵袭蛋白A(invA)基因,并从这10份样本中分离到10株都柏林血清型沙门菌。39份样本均未检出肠产毒素性大肠埃希菌不耐热肠毒素基因(elt)、志贺菌和肠侵袭性大肠埃希菌侵袭力基因(ipaH)。10株都柏林血清型沙门菌PFGE条带完全一致。结论多重实时PCR有助于提高细菌性食源性疾病的判明率,指导病原菌的常规分离培养,PFGE可用于细菌性食源性疾病的追踪溯源。 展开更多
关键词 多重实时PCR 脉冲场凝胶电泳 食源性疾病
重组免疫优势肽段为抗原的ELISA法在检测2型单纯疱疹病毒感染中的应用
18
作者 刘涛 斯国静 +2 位作者 胡俊 李钧 《国际流行病学传染病学杂志》 2012年第6期369-372,共4页
目的表达2型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白G免疫优势片段gG321-580,探讨重组gG321-580作为检测HSV-2特异性IgG诊断抗原的可行性,为进一步开发诊断试剂盒奠定基础。方法整合有sG32l-5踟基因的重组杆状病毒接种s19昆虫细胞,NTA-Ni^2+... 目的表达2型单纯疱疹病毒(HSV-2)糖蛋白G免疫优势片段gG321-580,探讨重组gG321-580作为检测HSV-2特异性IgG诊断抗原的可行性,为进一步开发诊断试剂盒奠定基础。方法整合有sG32l-5踟基因的重组杆状病毒接种s19昆虫细胞,NTA-Ni^2+纯化表达His-gG32M80融合蛋白。应用HSV-2感染Vero细胞,制备HSV-2病毒抗原。将gG321-580蛋白和HSV-2病毒抗原分别作为包被抗原,建立间接ELISA法(gG321-580-ELISA和病毒抗原-ELISA)。分别用gG32M80-ELISA和病毒抗原-ELISA检测105份临床样本,两者的检测结果以HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒作为金标准,在特异性、灵敏性和符合率等方面进行比较。结果SDS-PAGE和Western印迹结果显示,表达的gG321-580蛋白相对分子质量约为60000,具有良好的免疫学活性。与HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒相比,gG321-580-ELISA的灵敏度、特异度、符合率分别为83.3%、81.8%、82.9%,病毒抗原-ELISA的灵敏度、特异性和符合率分别为20.8%、93.9%、43-8%。gG321-580-ELISA敏感度和符合率高于病毒抗原-ELISA。结论表达的HSV-2重组gG32M80蛋白作为包被抗原的ELISA法是一种敏感、特异的方法,具有较大的应用价值。 展开更多
关键词 疱疹病毒2型 免疫优势片段 酶联免疫吸附测定
杭州地区伤寒及甲型副伤寒沙门菌流行菌株分子特征的研究 被引量:9
19
作者 汪皓秋 潘劲草 +5 位作者 葛玉梅 郑伟 张蔚 孟冬梅 严杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期711-715,共5页
目的了解并确定2002-2008年杭州地区伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌优势菌株的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)或多位点序列分型(MLST)对2002-2008年杭州地区分离的31株伤寒沙门菌、404株... 目的了解并确定2002-2008年杭州地区伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌优势菌株的分子特征。方法采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点串联重复序列分析(MLVA)或多位点序列分型(MLST)对2002-2008年杭州地区分离的31株伤寒沙门菌、404株甲型副伤寒沙门菌进行分型并分析。结果404株甲型副伤寒沙门菌可分为6个PFGE型,P1型和P2型属于同一个克隆系,99.0%(400/404)菌株属于该克隆系,其中P1型菌株占该克隆系菌株的93.3%(373/400)。31株伤寒沙门菌株存在高度多样性,可分为14个PFGE型、28个MLVA型(分辨率90.3%)、3个MLST型。根据MLVA各型靶位点多态性差异,本地区流行的伤寒沙门菌株与东南亚地区菌株相近,但与欧洲菌株差距较大,呈高度多态性的可变串联重复序列(VNTR)位点TR1、TR2、Sal02可作为本地区伤寒沙门菌株的检测标志。伤寒沙门菌株MLST型别包括了目前国际上发现的所有3个型别,但以ST2型为主(23/31,74.2%)。结论近年杭州地区甲型副伤寒疫情由同一亚系菌株感染所致,但本地区流行的伤寒沙门菌株呈现高度多样性。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 脉冲场凝胶电泳 多位点串联重复序列分析 多位点序列分型
杭州市2009年食品污染状况及食源性疾病调查分析 被引量:6
20
作者 黄利明 斯国静 +6 位作者 金铨 方叶珍 朱晓霞 刘辉 胡俊 王玲莉 《中国农村卫生事业管理》 2012年第7期741-743,共3页
目的:了解杭州市食品污染及食源性疾病状况。方法:对杭州市区农贸市场和超市销售的168件食品分别进行了沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌及海鸥弧菌的定性检测和大肠菌群、金黄... 目的:了解杭州市食品污染及食源性疾病状况。方法:对杭州市区农贸市场和超市销售的168件食品分别进行了沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌及海鸥弧菌的定性检测和大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单增李斯特菌的定量测定。对360件食品检测金属污染物、食品添加剂、农药残留、兽药残留等。对2家社区卫生服务中心在2009年5月-10月间就诊,以腹泻为主要症状的275例食源性疾病病例检测沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌、大肠杆菌O157:H7等主要食源性病原菌。结果:从168份检样中共检出各类病原菌32株,在各类检测到的病原菌中以单增李斯特菌检出率最高,共检得15株,其次为沙门氏菌,检得9株;对130份食品样品进行铅含量的测定,检出109份,检出率为83.85%,合格率为96.92%。镉含量的测定,检出128份,检出率为98.46%,合格率为93.85%。油条类的平均值为154.5mg/kg,路边摊所购买的油条铝含量超标较为严重。110个食品样品进行17种农药的监测共检测到8种有机磷农药。对275例病人的食源性病原菌的有关项目的检测,共检出相关病原菌45株,总检出率为16.36%。结论:保障食品安全必须先了解食品污染物和食源性疾病状况并及时做出预警,进而提出有针对性的控制措施,达到减少食品污染、预防食源性疾病的目标。 展开更多
关键词 食品安全 污染 食源性疾病 监测
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈