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基于专业兴趣和应用能力培养的生物科技人才培养体系的改革与实践
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作者 刘京 赵晓萌 +2 位作者 郭蓓 薛飞燕 《高等农业教育》 2019年第1期59-63,共5页
我国高等教育为国家经济社会的高速发展输送了大批高素质人才,但近几年高等教育出现了教学质量下降的问题,其中专业兴趣和应用能力逐渐成为提高高校人才培养质量的一个瓶颈。围绕学生专业兴趣和实践应用能力的培养,北京农学院生物学院... 我国高等教育为国家经济社会的高速发展输送了大批高素质人才,但近几年高等教育出现了教学质量下降的问题,其中专业兴趣和应用能力逐渐成为提高高校人才培养质量的一个瓶颈。围绕学生专业兴趣和实践应用能力的培养,北京农学院生物学院经过几年的探索和实践,借鉴体验式教学模式,构建了'以专业兴趣培养为出发点、以思辨能力培养为制高点和以应用能力培养为落脚点'的生物科技人才培养体系,拓展了'由教到学到用'的知识传播途径,取得良好的效果。 展开更多
关键词 体验式教学模式 专业兴趣 应用能力 人才培养体系
Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡的结合特性 预览
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作者 李婷 张淑臣 +2 位作者 申晓鸿 师光禄 刘京 《北京农学院学报》 2019年第1期1-7,共7页
【目的】营养期杀虫蛋白Vip3A是一种由苏云金芽孢杆菌在对数生长期产生的新型杀虫毒素.Vip3A与敏感昆虫中肠上皮细胞的结合是其发挥杀虫活性的关键步骤.为进一步探究Vip3A毒素的杀虫机理,研究Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡(BBMVs)的... 【目的】营养期杀虫蛋白Vip3A是一种由苏云金芽孢杆菌在对数生长期产生的新型杀虫毒素.Vip3A与敏感昆虫中肠上皮细胞的结合是其发挥杀虫活性的关键步骤.为进一步探究Vip3A毒素的杀虫机理,研究Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡(BBMVs)的结合特性.【方法】在大肠杆菌中用IPTG诱导表达Vip3Aa10,用亲和层析和离子交换层析的方法纯化蛋白,并用胰蛋白酶活化Vip3Aa10,得到Vip3Aa10-T.然后分析Vip3Aa10前毒素和Vip3Aa10-T对甜菜夜蛾的杀虫活性,用免疫印迹法和配体印迹法分析Vip3Aa10-T与甜菜夜蛾BBMVs的结合特性以及在甜菜夜蛾BBMVs上的结合蛋白.【结果】Vip3Aa10-T与Vip3Aa10前毒素对甜菜夜蛾的杀虫活性很高.Vip3Aa10-T在pH8.0时更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合,并且能够与非敏感性昆虫黄粉虫BBMVs结合.在相同pH条件下,Vip3Aa10前毒素比Vip3Aa10-T更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合.Vip3Aa10-T在甜菜夜蛾BBMVs上有4条结合蛋白,其分子量分别为80、38、31和22kDa.【结论】活化的Vip3Aa10与甜菜夜蛾BBMVs的结合是pH依赖性的,并且能与BBMVs上的4个蛋白结合. 展开更多
关键词 Vip3Aa10 甜菜夜蛾 刷状缘膜囊泡 杀虫活性
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鹅小肠肠球菌的分离鉴定 预览
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作者 张腾帅 李巧玲 +4 位作者 贾青辉 张召兴 刘京 张艳英 高聪 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第11期19-22,共4页
昌黎县某鹅场20日龄左右雏鹅发生一起以精神沉郁、厌食、腹泻、关节肿大为主要临床表现。无菌采集病鹅肝脏、肿大关节渗出液等进行病原菌的分离培养,通过细菌形态学观察、生化特性和16SrRNA基因序列分析,鉴定为小肠肠球菌(命名为HQ1505... 昌黎县某鹅场20日龄左右雏鹅发生一起以精神沉郁、厌食、腹泻、关节肿大为主要临床表现。无菌采集病鹅肝脏、肿大关节渗出液等进行病原菌的分离培养,通过细菌形态学观察、生化特性和16SrRNA基因序列分析,鉴定为小肠肠球菌(命名为HQ150506)。测序结果运用BLAST软件比对,采用DNAStar生物软件分析得出:该分离菌株与小肠肠球菌参考菌株同源性为99.6%~100%。雏鹅致病性试验结果显示,该分离菌株具有致病性。药敏试验显示,分离菌株对氨苄西林、磷霉素、氟苯尼考、左氧氟沙星等抗菌药物敏感;对庆大霉素、头孢唑林、青霉素、卡那霉素等抗菌药物耐药。 展开更多
关键词 小肠肠球菌 分离鉴定 药敏试验
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北京农学院生物工程专业实践教学体系的构建 预览 被引量:5
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作者 薛飞燕 刘灿 +3 位作者 申晓鸿 张婧 刘京 《高校生物学教学研究(电子版)》 2017年第1期14-17,共4页
本文分析了北京农学院生物工程专业实践教学体系构建的必要性,重点介绍了"以社会需求为导向,以学生收获为目标,以大学科技园实践平台建设和校外实习基地建设为重点,系统构建生物工程专业教学体系"的思路和具体运行实践;推广应用效果表... 本文分析了北京农学院生物工程专业实践教学体系构建的必要性,重点介绍了"以社会需求为导向,以学生收获为目标,以大学科技园实践平台建设和校外实习基地建设为重点,系统构建生物工程专业教学体系"的思路和具体运行实践;推广应用效果表明,所构建的"校内实验教学中心专题操作-大学科技园实践基地综合实训-校外指选基地专业实习-校外自选单位毕业实习"实践教学体系增强了学生专业综合能力和社会适应能力,为培养符合北京"四个中心"新定位需求的复合应用型人才提供了重要保障。 展开更多
关键词 生物工程专业 实践教学体系 复合应用型人才
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Cry1Ac毒素突变体的构建、表达及杀虫活性测定 预览 被引量:1
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作者 袁晓曼 丁照鑫 +1 位作者 张淑臣 刘京 《中国农学通报》 2017年第36期139-144,共6页
为了构建对敏感和类钙粘蛋白突变的抗性昆虫都具有高杀虫活性的毒素,将Cry1Ac毒素结构域I中α1和α2之间插入一个α胰凝乳蛋白酶作用位点,并分析突变体毒素在苏云金芽孢杆菌中形成伴孢晶体、目标蛋白的表达情况,以及鉴定突变体毒素的杀... 为了构建对敏感和类钙粘蛋白突变的抗性昆虫都具有高杀虫活性的毒素,将Cry1Ac毒素结构域I中α1和α2之间插入一个α胰凝乳蛋白酶作用位点,并分析突变体毒素在苏云金芽孢杆菌中形成伴孢晶体、目标蛋白的表达情况,以及鉴定突变体毒素的杀虫活性。结果发现:4个突变体蛋白都能在苏云金芽孢杆菌中表达产生约130 k Da的目标蛋白,但不能形成有规则的伴孢晶体。这可能是由于突变体蛋白在Bt生长的平稳期达到最高,在衰亡期开始被降解造成的。4个突变体中,Cry1Acm4在培养48 h时产量最高,而且其对甜菜夜蛾杀虫活性比野生型高1.6倍,但是其产量只有野生型毒素产量的十分之一。尽管由于Cry1Acm4的表达量较低而使其实际应用的价值不大,但这种构建突变体的方法对研究高毒力的Cry1Ac毒素提供一种新的思路。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 Cry1Ac毒素 突变体 杀虫活性
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教学团队建设带动教育教学发展的思考 被引量:3
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作者 郑冬梅 刘京 《高等农业教育》 2016年第4期43-45,共3页
加强教学团队建设是促进高校师资队伍建设和提高高等教育质量的重要举措。阐述教学团队的内涵与作用,分析北京农学院建设教学团队的目标定位,从教学团队的制度、团队带头人、团队精神、教学平台等方面对加强教学团队建设提出建设思路与... 加强教学团队建设是促进高校师资队伍建设和提高高等教育质量的重要举措。阐述教学团队的内涵与作用,分析北京农学院建设教学团队的目标定位,从教学团队的制度、团队带头人、团队精神、教学平台等方面对加强教学团队建设提出建设思路与对策。 展开更多
关键词 师资队伍建设 教学质量 团队凝聚力 教学资源
培养大学生专业学习兴趣的实践与探索 预览 被引量:2
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作者 赵晓萌 刘铁军 +2 位作者 胡海文 刘京 李钧涛 《教育教学论坛》 2016年第1期139-140,共2页
当前,占有相当大比例的学生对所学专业不感兴趣。如何培养学生的专业学习兴趣成为高校教育面临的难题。北京农学院生物科学与工程学院在培养学生专业学习兴趣方面进行了积极探索,通过延长入学教育时间、全体专业教师轮流讲一次生动的专... 当前,占有相当大比例的学生对所学专业不感兴趣。如何培养学生的专业学习兴趣成为高校教育面临的难题。北京农学院生物科学与工程学院在培养学生专业学习兴趣方面进行了积极探索,通过延长入学教育时间、全体专业教师轮流讲一次生动的专业讲座、将培养学生专业兴趣固化为必修课的方式,有效培养了学生的专业学习兴趣,使学生明确了学习目标。 展开更多
关键词 专业学习兴趣 实践 探索
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重组产番茄红素大肠杆菌工程菌株中异戊烯异构酶(IDI)基因的筛选 被引量:1
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作者 韩莉 张莎莎 +4 位作者 王博军 刘京 刘伟丰 王艳萍 陶勇 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第13期137-142,共6页
番茄红素是一类在食品、医药等领域具有广泛应用价值的萜类化合物。异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)是番茄红素合成途径中的关键酶,也是代谢工程改造的主要靶点。本研究为了系统比较不同来源IDI对重组... 番茄红素是一类在食品、医药等领域具有广泛应用价值的萜类化合物。异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)是番茄红素合成途径中的关键酶,也是代谢工程改造的主要靶点。本研究为了系统比较不同来源IDI对重组大肠杆菌番茄红素(Lycopene)产量的影响,分别克隆了原核微生物、真核微生物、植物、古菌等多种来源的I型及II型异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)基因,在大肠杆菌E.coli中异源表达,在加强自身2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)代谢途径的背景下,通过优化多靶点组合及转化时间提高番茄红素的合成水平。结果表明酿酒酵母来源的I型IDI(Sc IDI)及枯草芽孢杆菌来源的II型IDI(Bs IDI)在经优化的背景下可以获得最高的番茄红素产量,产量分别达到9.96 mg/g DCW,8.78 mg/g DCW,番茄红素积累在转化8 h达到最高,最高能达到10.29 mg/g DCW。本研究最终确定了不同类型IDI发挥功能的条件,为后续番茄红素以及萜类化合物的代谢途径的改造提供依据。 展开更多
关键词 异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI) 大肠杆菌 番茄红素 代谢工程 MEP途径
苏云金芽孢杆菌Vip3Aa10毒素结合肽的筛选及活性测定 预览 被引量:2
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作者 丁照鑫 王涵祎 +3 位作者 曹利娟 郝艳同 申晓鸿 刘京 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期3627-3634,共8页
【目的】Vip3A是由苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在对数生长期产生并分泌到胞外的对鳞翅目昆虫有较广杀虫谱的毒素,其在敏感昆虫中肠上的结合受体尚未得到鉴定。利用噬菌体展示技术,论文试图从肽库中筛选到能与Vip3A毒素特... 【目的】Vip3A是由苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在对数生长期产生并分泌到胞外的对鳞翅目昆虫有较广杀虫谱的毒素,其在敏感昆虫中肠上的结合受体尚未得到鉴定。利用噬菌体展示技术,论文试图从肽库中筛选到能与Vip3A毒素特异性结合的多肽,为研究Vip3A毒素的杀虫模式提供线索。【方法】将构建的p ET28a-Vip3Aa10表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,用亲和纯化的方法制备Vip3Aa10,并用胰蛋白酶活化和离子交换层析进一步纯化。以活化的Vip3Aa10毒素为诱饵,经“吸附-洗脱-扩繁”4轮条件逐渐严格的淘选,从噬菌体随机肽库中筛选能特异性地与活化的Vip3Aa10结合的噬菌体。以筛选到的噬菌体基因组DNA为模板,经PCR扩增和测序,获得插入到噬菌体上的外源基因的序列,并推导出相应多肽的氨基酸序列。将化学合成的多肽与活化的Vip3Aa10一起与甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)刷状缘膜囊泡共育后,用免疫印迹方法检测多肽对活化的Vip3Aa10与BBMV结合的影响。将合成的多肽与活化的Vip3Aa10一起涂布在饲料表面,晾干后,每孔放1只1龄的甜菜夜蛾幼虫。6 d后统计昆虫死亡情况。【结果】在25℃条件下用IPTG诱导含p ET28a-Vip3Aa10质粒的大肠杆菌BL21(DE3)可以表达出可溶性的Vip3Aa10蛋白。经亲和纯化、胰蛋白酶活化以及离子交换层析后,可得到较纯的活化的Vip3Aa10。以活化的Vip3Aa10为诱饵,经过4轮条件逐渐严格的淘选,从十二肽库中筛选出9条多肽,其中3条多肽的丰度较高,分别命名为P12-1、P12-2和P12-3,从七肽库中筛选出5条多肽,其中1条多肽的丰度较高,命名为P7-1。结合试验和杀虫活性测定试验结果表明,P12-2和P7-1多肽能不同程度地抑制Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡的结合,以及抑制Vip3Aa10的杀虫活性。【结论】用噬菌体展示技术筛选的多肽P7-1能显著性地抑制V 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 营养期杀虫蛋白 结合肽 筛选 活性分析
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生物学实验教学中心建设的实践与思考 预览
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作者 黄体冉 刘京 王文平 《科教文汇》 2015年第20期51-52,共2页
生物学实验教学中心建设对培养区域农业专业技术人才有着重要的影响,对其他高等院校也有一定的示范作用。生物学实验教学中心在借鉴其他高校国家级实验教学示范中心建设经验的基础上,结合自身办学实际,从实验教学中心的管理、实验教学... 生物学实验教学中心建设对培养区域农业专业技术人才有着重要的影响,对其他高等院校也有一定的示范作用。生物学实验教学中心在借鉴其他高校国家级实验教学示范中心建设经验的基础上,结合自身办学实际,从实验教学中心的管理、实验教学队伍建设以及实验教学三个方面就如何建设生物学实验教学中心提出了建设和发展的新思考。 展开更多
关键词 生物学 实验教学中心 实践与思考
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气体分析仪在炼铁高炉中的应用及改进 预览
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作者 刘京 安辉刚 杨利风 《北方钒钛》 2015年第3期48-51,共4页
高炉煤气是高炉生产过程中的副产能源,是钢铁企业的能源结构中的重要组成部分。而精准测量高炉煤气中所含CO、CO2、H2的浓度,对岗位人员优化高炉生产提高煤气利用率、降低焦比有着极为重要的意义。同时在能源气回收、节能环保和安全控制... 高炉煤气是高炉生产过程中的副产能源,是钢铁企业的能源结构中的重要组成部分。而精准测量高炉煤气中所含CO、CO2、H2的浓度,对岗位人员优化高炉生产提高煤气利用率、降低焦比有着极为重要的意义。同时在能源气回收、节能环保和安全控制3个方面也都具有很重要的作用。 展开更多
关键词 高炉煤气 气体分析 样气 EL3020 吹扫装置 PLC
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农业院校《生物分离技术与工程设备》的课程改革 预览 被引量:1
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作者 薛飞燕 刘京 +2 位作者 柳春梅 刘悦萍 赵晓萌 《教育教学论坛》 2014年第46期140-142,共3页
《生物分离工程》和《生物工程设备》在生物工程专业课程设置中占有重要的地位。本文所介绍的课程改革是通过对北京农学院生物工程专业4届学生的调研,针对学校人才培养目标和这两门课程开设过程中存在的问题,对课程开设时间、讲授内容... 《生物分离工程》和《生物工程设备》在生物工程专业课程设置中占有重要的地位。本文所介绍的课程改革是通过对北京农学院生物工程专业4届学生的调研,针对学校人才培养目标和这两门课程开设过程中存在的问题,对课程开设时间、讲授内容和组织形式等进行了多方面改革。改革后合并成《生物分离技术与工程设备》一门课,合理安排课程讲授时间、精简优化课程设置内容、增强实践教学环节等有效措施的执行,有利于取得较好的教学效果。 展开更多
关键词 生物分离技术 生物工程设备 课程改革
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大学教学实验平台信息化创新建设 预览
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作者 任建军 刘京 +1 位作者 杨爱珍 张子安 《产业与科技论坛》 2014年第9期96-98,共3页
目前,在我国大学实验教学中仍存在一些管理制度落后现象,建立信息化管理系统是现代大学实验中心建设的基础和实现现代教学的必要条件,目的是实现实验信息的统一管理,充分发挥教师的主观能动性,并调动学生的实验积极性,提高学生的... 目前,在我国大学实验教学中仍存在一些管理制度落后现象,建立信息化管理系统是现代大学实验中心建设的基础和实现现代教学的必要条件,目的是实现实验信息的统一管理,充分发挥教师的主观能动性,并调动学生的实验积极性,提高学生的创新和实践能力,能最大限度地应用实验教学资源。 展开更多
关键词 信息化 管理系统 实验教学平台
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发酵工程课程教学改革的探索与实践 预览 被引量:4
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作者 刘京 申晓鸿 +2 位作者 薛飞燕 万善霞 刘悦萍 《安徽农业科学》 CAS 2013年第8期3754-3754,3757共2页
为适应企业对发酵人才的需求,本着以培养优秀发酵工程师的理念为导向,对发酵工程课程的教学进行了改革。经过4年的摸索,在加强校企人才互动,提高理论教学的实用性;以工程的理念设计试验,强化学生动手能力;加强基地建设,努力拓宽学生专... 为适应企业对发酵人才的需求,本着以培养优秀发酵工程师的理念为导向,对发酵工程课程的教学进行了改革。经过4年的摸索,在加强校企人才互动,提高理论教学的实用性;以工程的理念设计试验,强化学生动手能力;加强基地建设,努力拓宽学生专业视野等方面做了初步探索,取得了良好的效果。 展开更多
关键词 发酵工程 教学改革 人才互动 综合性实验 基地建设
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缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性分析(英文) 预览
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作者 刘京 郭蓓 +1 位作者 赵晓萌 师光禄 《农业科学与技术:英文版》 CAS 2012年第2期 265-267,303,共4页
[目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达... [目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达。提取目标蛋白,并涂在棉铃虫饲料表面,检测其杀虫活性。[结果]Cry1Acdelα1基因在大肠杆菌中能正常表达目标蛋白,但该目标蛋白是以包涵体形式存在。生测结果显示,在相同浓度下,活化的Cry1Ac对棉铃虫的致死率达75%以上,而Cry1Acdelα1只有10%左右。[结论]用大肠杆菌表达的Cry1Acdelα1对棉铃虫基本没有杀虫活性。 展开更多
关键词 CRY1AC α1片段 杀虫活性
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苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白Vip3的研究进展 预览
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作者 刘京 师光禄 《中国农学通报》 CSCD 2012年第15期175-179,共5页
为了更好地理解Vip3毒素的研究进展,从Vip3毒素的类型、理化特性、功能、杀虫机理以及应用研究等方面做了详细的综述。并指出,尽管Vip3毒素的研究取得了很大的进展,但是还有一些重要的问题在后续研究中亟待解决。
关键词 苏云金芽孢杆菌 营养期杀虫蛋白 Vip3毒素
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缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性分析 预览
17
作者 刘京 郭蓓 +1 位作者 赵晓萌 师光禄 《安徽农业科学》 CAS 2012年第6期 3248-3250,共3页
[目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增缺乏α螺旋的Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目... [目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增缺乏α螺旋的Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达。提取目标蛋白,并涂在棉铃虫饲料表面,检测其杀虫活性。[结果]Cry1Acdelα1基因在大肠杆菌中能正常表达目标蛋白,但该目标蛋白是以包涵体形式存在。生侧结果显示,在相同浓度下,活化的Cry1Ac对棉铃虫的致死率达75%以上,而Cry1Acdelα1只有10%左右。[结论]用大肠杆菌表达的Cry1Acdelα1对棉铃虫基本没有杀虫活性。 展开更多
关键词 CRY1AC α1片段 杀虫活性
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类钙粘蛋白对Cry3A毒素杀虫活性的影响 被引量:3
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作者 刘京 申晓鸿 +3 位作者 李彤春 张玉 杨爱珍 师光禄 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期 466-470,共5页
将克隆的黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达纯化,并分析其对Cry3A毒素杀虫活性的影响,从而探讨黄粉虫类钙粘蛋白对Cry3A毒素杀虫活性的增效作用。黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达产物为包涵体,经尿素变性后,用亲和纯... 将克隆的黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达纯化,并分析其对Cry3A毒素杀虫活性的影响,从而探讨黄粉虫类钙粘蛋白对Cry3A毒素杀虫活性的增效作用。黄粉虫类钙粘蛋白基因片段在大肠杆菌中表达产物为包涵体,经尿素变性后,用亲和纯化法可得到较纯的重组蛋白;随着类钙粘蛋白片段与Cry3A质量比值的升高,Cry3A毒素对黄粉虫的杀虫活性也逐步提高,当其比值为1时,活性达到最大,提高了2.5倍,而黄粉虫类钙粘蛋白片段对Cry3Am的杀虫活性却没有显著性影响。研究表明,黄粉虫类钙粘蛋白对Cry3A毒素的杀虫活性具有增效作用。 展开更多
关键词 黄粉虫 类钙粘蛋白 Cry3A毒素 杀虫活性
含有α-胰凝乳蛋白酶作用位点的Cry3A突变体的构建、表达、纯化以及杀虫活性分析 预览 被引量:3
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作者 刘京 赵晓萌 +1 位作者 杨爱珍 师光禄 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1384-1389,共6页
【目的】构建含有α-胰凝乳蛋白酶作用位点的Cry3A的突变体Cry3Am,以期提高Cry3A的活化效率,增强杀虫活性。【方法】利用重叠PCR技术,构建Cry3A杀虫蛋白的突变体Cry3Am,使之在原核细胞中表达纯化突变体蛋白;将Cry3Am与饲料混合后饲喂黄... 【目的】构建含有α-胰凝乳蛋白酶作用位点的Cry3A的突变体Cry3Am,以期提高Cry3A的活化效率,增强杀虫活性。【方法】利用重叠PCR技术,构建Cry3A杀虫蛋白的突变体Cry3Am,使之在原核细胞中表达纯化突变体蛋白;将Cry3Am与饲料混合后饲喂黄粉虫,用以评价Cry3Am的杀虫活性。【结果】成功地在Cry3A杀虫蛋白结构域I的α3和α4之间加上1个α-胰凝乳蛋白酶的作用位点,并提取Cry3Am到杀虫蛋白。体外酶切试验结果表明,Cry3Am很容易地被降解为55 kD的杀虫蛋白。生测分析结果表明,Cry3Am对黄粉虫的毒力是Cry3A的2倍以上。【结论】向Cry3A中插入α-胰凝乳蛋白酶作用位点可以使突变体Cry3Am很容易地被α-胰凝乳蛋白酶降解成55 kD的片段,并能提高Cry3A的杀虫活性。 展开更多
关键词 Cry3A突变体 α-胰凝乳蛋白酶 表达纯化 杀虫活性分析
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新4~#高炉渣处理系统液位计故障分析及改进 预览
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作者 张宏伟 刘京 李海东 《北方钒钛》 2010年第4期50共2页
对承钢新4~#高炉渣处理系统液位计的作用进行简单介绍,针对生产中出现的问题进行分析并进行改进,从而满足了生产需要。
关键词 渣处理 液位计
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