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冠突曲霉Fig基因敲除菌株的构建及表型分析
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作者 逸梅 谭玉梅 +1 位作者 王亚萍 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2055-2061,共7页
为了研究冠突曲霉(Aspergillus cristatus) Fig基因的功能,本研究采用同源重组的方法获得敲除株。并对敲除株进行功能验证。结果显示对Fig基因敲除株培养观察并与野生型菌株相比发现,在含有不同浓度NaCl的MYA培养基中,仍能产生成熟的子... 为了研究冠突曲霉(Aspergillus cristatus) Fig基因的功能,本研究采用同源重组的方法获得敲除株。并对敲除株进行功能验证。结果显示对Fig基因敲除株培养观察并与野生型菌株相比发现,在含有不同浓度NaCl的MYA培养基中,仍能产生成熟的子囊孢子和分生孢子,但分生孢子数量是野生型的1/4,子囊孢子数量是野生型的1/5,且敲除株菌落几乎没有渗出液,无皱褶,菌落表面干燥,色素产生量急剧下降,这些结果表明Fig基因对冠突曲霉产孢起正调控,本实验为冠突曲霉发育调控机制的研究提供了一定的技术基础。 展开更多
关键词 Fig基因 基因敲除 荧光定量
转录因子ACZ影响冠突曲霉色素及产孢数量的研究
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作者 邵蕾 谭玉梅 +3 位作者 任春光 王亚萍 王玉臣 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期2041-2048,共8页
本实验室前期在高渗条件下筛选得到8个转录因子,其中ACZ (SI65-00458)基因表达量最高,推测ACZ基因在冠突曲霉中参与响应渗透压及调控孢子的产生。因而本研究利用同源重组原理,构建了ACZ基因敲除载体,通过农杆菌介导转化,筛选获得了ACZ... 本实验室前期在高渗条件下筛选得到8个转录因子,其中ACZ (SI65-00458)基因表达量最高,推测ACZ基因在冠突曲霉中参与响应渗透压及调控孢子的产生。因而本研究利用同源重组原理,构建了ACZ基因敲除载体,通过农杆菌介导转化,筛选获得了ACZ敲除菌株,将敲除株分生孢子液接种在含不同浓度NaCl的MYA培养基上,以野生型冠突曲霉为对照,观察敲除株与野生型菌株的区别。研究发现:培养基中不加NaCl时色素有明显变化,野生型为黄色,敲除株为褐黄色;在低渗透压下,菌落边缘不规则;在高渗透压下,敲除株产生的分生孢子数量为野生型的4倍多;无论是在27℃还是在37℃培养,敲除株在低渗及高渗条件下,菌落直径都较野生型小,菌丝较稀疏。表明敲除ACZ基因会影响冠突曲霉菌丝生长、色素的合成及孢子的产生。 展开更多
关键词 冠突曲霉 Acz基因 产孢 色素
冠突曲霉veA基因缺失型与野生型的差异代谢物研究
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作者 任春光 谭玉梅 +3 位作者 任秀秀 王亚萍 永翔 《菌物学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期193-204,共12页
为了鉴定冠突曲霉veA基因缺失型与野生型的差异代谢物,寻找与veA 基因产孢相关的代谢物,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学技术,分别收集2个菌株培养48h的菌丝体,经液氮研磨、超声萃取、三甲基氯硅烷衍生化后上机检测,将GC-MS... 为了鉴定冠突曲霉veA基因缺失型与野生型的差异代谢物,寻找与veA 基因产孢相关的代谢物,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)的代谢组学技术,分别收集2个菌株培养48h的菌丝体,经液氮研磨、超声萃取、三甲基氯硅烷衍生化后上机检测,将GC-MS检测的数据进行前处理和代谢物注释,并用统计学相关软件进行差异物筛选和相关性分析。结果显示,共鉴定99种代谢物,其中差异代谢物41种,野生型菌株中表达上调的显著差异代谢物有20种,veA缺失型菌株中表达上调的显著差异代谢物有21种,并预测差异代谢物的相关性,发现与623种代谢物产生相关性,其中313种呈正相关,310种呈负相关。筛选出来的差异代谢物涉及有机酸、氨基酸、碳水化合物、醇类、脂肪酸类等多种代谢物质,其中有机酸和氨基酸类代谢物占主导地位。本研究结果为进一步研究冠突曲霉代谢物与产孢的关联提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 丝状真菌 GC-MS 产孢 代谢物相关性分析
响应面法优化“金花”菌培养基配方 预览
4
作者 周国庆 谭玉梅 +4 位作者 王亚萍 黄永会 任锡毅 永翔 《山地农业生物学报》 2018年第2期27-32,共6页
采用单因素试验和响应面法对冠突曲霉液体培养基进行优化,以子囊孢子浓度为响应值,通过单因素实验确定最佳含水量、氯化钠浓度、接种量分别是10ml、5%、240μl。使用 Design expert 8中的Box-Behnken design(BBD)进行试验设计,采... 采用单因素试验和响应面法对冠突曲霉液体培养基进行优化,以子囊孢子浓度为响应值,通过单因素实验确定最佳含水量、氯化钠浓度、接种量分别是10ml、5%、240μl。使用 Design expert 8中的Box-Behnken design(BBD)进行试验设计,采用响应面分析法优化出液体培养基最佳配方是在10g麸皮的基础上,添加NaCl6.13%(0.613g),9.79mL无菌水,接种246.48μl 浓度为108个/ml“金花”菌孢子悬液,28℃条件下,培养7d,发酵物浸泡过滤处理得孢子含量达3.51×107个/mL,优化后仅用简单、经济的麸皮培养基就能快速培养得到高浓度的金花菌孢子,这些孢子按需求洗脱稀释后即可用于人工接种,这促进了金花菌人工接种发花的普及,同时为培养基的优化提供了参考。 展开更多
关键词 茯砖茶 金花菌 冠突曲霉 响应面法 发酵剂
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冠突曲霉AN1类锌指蛋白zfpA基因的克隆及表达分析
5
作者 谭玉梅 王亚萍 +3 位作者 葛永怡 任秀秀 永翔 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第9期3754-3759,共6页
本研究采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆出冠突曲霉中zfpA基因的cDNA全长序列并进行生物信息分析。该序列全长1 443 bp,开放阅读框长度为924 bp,从312~1 235 bp,没有内含子序列。推测编码的蛋白... 本研究采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆出冠突曲霉中zfpA基因的cDNA全长序列并进行生物信息分析。该序列全长1 443 bp,开放阅读框长度为924 bp,从312~1 235 bp,没有内含子序列。推测编码的蛋白质含有307个氨基酸,同源性分析显示该基因与米曲霉的AN1锌指蛋白(XP_001826567)相似性达71%。利用荧光定量PCR技术分析了zfpA基因在营养菌丝体阶段、无性产孢阶段及有性产孢阶段的表达量差异。结果表明,这个基因在在无性产孢时期的表达量最低,有性产孢时期的表达量最高,相比无性产孢时期上调了4倍。本实验为深入研究zfpA基因对冠突曲霉的产孢调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 茯砖茶 有性产孢 RACE技术 相对定量
冠突曲霉钙调素cam基因的克隆及表达分析
6
作者 任秀秀 余芳 +4 位作者 谭玉梅 任春光 永翔 王玉臣 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第11期4663-4669,共7页
冠突曲霉是茯砖茶发花阶段的主要微生物,其在Na Cl作为渗透压调节下分别进入有性产孢和无性产孢两个不同的世代,为了考查钙信号途径在其特殊产孢过程中的作用,通过克隆冠突曲霉钙信号调控的关键基因钙调素cam基因,并对这一基因进行结构... 冠突曲霉是茯砖茶发花阶段的主要微生物,其在Na Cl作为渗透压调节下分别进入有性产孢和无性产孢两个不同的世代,为了考查钙信号途径在其特殊产孢过程中的作用,通过克隆冠突曲霉钙信号调控的关键基因钙调素cam基因,并对这一基因进行结构和表达分析。结果表示:冠突曲霉中的cam基因全长924 bp,开放阅读框为450 bp,含6个内含子,预测编码149个氨基酸。cam参与了冠突曲霉的产孢及盐压力响应过程,cam基因对其无性发育产生正调控。实验结果为钙信号调控丝状真菌盐压力应答下的产孢机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 冠突曲霉 钙调素 基因表达
贵州地区茯砖茶“金花菌”的分离和分子鉴定 被引量:2
7
作者 谭玉梅 王亚萍 +3 位作者 葛永怡 任秀秀 王玉臣 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期154-163,共10页
本研究对贵州地区茯砖茶中的"金花菌"进行了分离鉴定。通过PCR扩增及测序技术获得转录间隔区序列及部分核糖体大亚基(ITS+LSU)、β-微管蛋白(β-tubulin)、钙调蛋白(Ca M)和RNA聚合酶Ⅱ(RPB2)4个基因的序列,然后构建多基因... 本研究对贵州地区茯砖茶中的"金花菌"进行了分离鉴定。通过PCR扩增及测序技术获得转录间隔区序列及部分核糖体大亚基(ITS+LSU)、β-微管蛋白(β-tubulin)、钙调蛋白(Ca M)和RNA聚合酶Ⅱ(RPB2)4个基因的序列,然后构建多基因系统树,并对其形态特征进行观察,将其鉴定为冠突曲霉Aspergillus cristatus。 展开更多
关键词 冠突散囊菌 冠突曲霉 系统学
茯砖茶“金花菌”vcx基因克隆及表达分析
8
作者 任秀秀 谭玉梅 +3 位作者 任春光 王玉臣 永翔 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第12期5135-5142,共8页
茯砖茶是一种紧压黑茶,冠突曲霉是茯砖茶发花阶段的主要微生物,其有性发育产生闭囊壳又名"金花菌",其数量和质量常用来判断茯砖茶的品质好坏。冠突曲霉可以用Na Cl来控制其产有性孢子及无性孢子,为了研究这一特殊产孢机理,及钙信号和... 茯砖茶是一种紧压黑茶,冠突曲霉是茯砖茶发花阶段的主要微生物,其有性发育产生闭囊壳又名"金花菌",其数量和质量常用来判断茯砖茶的品质好坏。冠突曲霉可以用Na Cl来控制其产有性孢子及无性孢子,为了研究这一特殊产孢机理,及钙信号和液泡在这产孢过程中的作用。通过克隆冠突曲霉钙信号途径中的液泡上钙氢交换子vcx基因,并对这一基因进行结构和表达分析。结果表示:冠突曲霉中的vcx基因编码区1 326 bp,不含内含子,预测编码441个氨基酸,不含信号肽,是一个疏水蛋白,含有11个跨膜结构,符合钙氢交换蛋白的基本结构。通过对其在冠突曲霉的有性、无性、菌丝各生长阶段的表达量进行测定,结果显示:vcx基因对其发育产生正调控,可能参与了冠突曲霉的无性产孢及盐压力响应过程。实验结果不仅为该蛋白的后续研究提供了条件,而且为钙信号调控丝状真菌在盐压力应答下的产孢机制奠定基础。 展开更多
关键词 冠突曲霉 钙氢交换子 基因表达
冠突散囊菌nsdD基因超表达菌株的构建及表型分析
9
作者 余春芳 熊庆 +4 位作者 李文仿 谭玉梅 永翔 欧琴 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第3期900-905,共6页
为了研究冠突散囊菌nssdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转... 为了研究冠突散囊菌nssdD基因的功能,本研究将冠突散囊菌nsdD的cDNA置于强启动子三磷酸甘油醛脱氢酶启动子PgpdA下游及色氨酸合成酶C基因终止子TtrpC上游构建nsdD基因超表达载体PURT5750,采用根癌农杆菌介导方法将表达质粒PURT5750转化到冠突散囊菌进行功能验证。结果显示向基因组随机插入外源质粒DNA,随机挑选11个nsdD基因超表达转化子,对nsdD基因超表达转化子菌株培养观察并与野生型菌株相比发现,在5%和17%NaCl培养基中菌落差异不显著,而且仍能产生成熟的有性孢子。本实验为冠突散囊菌有性发育调控机制的研究提供了技术基础。 展开更多
关键词 冠突散囊菌 表达质粒构建 nsdD基因超表达 农杆菌介导
冠突曲霉产孢相关基因的克隆及功能分析 被引量:1
10
作者 王亚萍 谭玉梅 +1 位作者 永翔 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第9期3767-3774,共8页
为探究冠突曲霉有性产孢调控的相关机制,从已构建的T-DNA随机插入突变体库中选取有性产孢突变株,采用Southern杂交鉴定T-DNA为单拷贝插入,并用Tail-PCR技术扩增获得T-DNA插入位点侧翼序列,分离获得突变基因。序列分析表明,该基因位于冠... 为探究冠突曲霉有性产孢调控的相关机制,从已构建的T-DNA随机插入突变体库中选取有性产孢突变株,采用Southern杂交鉴定T-DNA为单拷贝插入,并用Tail-PCR技术扩增获得T-DNA插入位点侧翼序列,分离获得突变基因。序列分析表明,该基因位于冠突曲霉基因组scaffold 7上,开放阅读框2 511 bp,含有4个内含子,预测编码666个氨基酸,含有NDT80_Pho G蛋白质超级家族保守结构域。BLASTp结果表明,该预测蛋白与Eurotium rubrum p53-like转录因子(EYE95652.1)相似性最高,identity=89%。显微观察发现T-DNA的插入影响了有性产孢结构的发育。本实验为进一步研究该基因在有性产孢过程中的分子功能及可能参与的调控途径奠定基础。 展开更多
关键词 冠突曲霉 有性发育 TAIL-PCR NDT80
虎耳草炭疽病病原菌鉴定 被引量:1
11
作者 杨友联 李树江 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期818-824,共7页
【目的】从虎耳草炭疽病病斑分离病原菌,并对病原菌进行鉴定。【方法】采用柯赫氏法则对从病斑组织块分离的病原菌进行验证,通过形态学结合多基因分子系统学方法对病原菌进行鉴定。【结果】从虎耳草炭疽病病斑分离到2株菌株(菌株号:LP... 【目的】从虎耳草炭疽病病斑分离病原菌,并对病原菌进行鉴定。【方法】采用柯赫氏法则对从病斑组织块分离的病原菌进行验证,通过形态学结合多基因分子系统学方法对病原菌进行鉴定。【结果】从虎耳草炭疽病病斑分离到2株菌株(菌株号:LPSU 20120244、LPSU 20120251)。2株菌株孢子均无色,无隔,直、圆柱状,菌株LPSU 20120244孢子(11-25)μm×(5-9)μm,菌株LPSU 20120251孢子(15-25)μm×(5-7)μm。多基因分子系统树中,2株菌株分别与喀斯特炭疽菌(Colletotrichum karstii Y.L.Yang,Zuo Y.Liu,K.D.Hyde&L.Cai)和江西炭疽菌(C.jiangxiense F.Liu&L.Cai)模式菌株聚为一支,支持率均为100%。【结论】形态学及多基因分子系统学分析表明菌株LPSU 20120244为喀斯特炭疽菌,菌株LPSU 20120251为江西炭疽菌。 展开更多
关键词 炭疽菌属 多基因分子系统学 柯赫氏法则
CRISPR/Cas9系统研究进展及应用 预览 被引量:2
12
作者 王亚萍 谭玉梅 +1 位作者 永翔 《贵州农业科学》 CAS 2017年第1期16-21,共6页
CRISPR/cas9是目前应用广泛的基因组编辑工具,该系统利用一段RNA引导Cas9核酸酶可对多种细胞及动植物基因组实现特定位点的切割和修饰,具有操作简单、作用高效等优点。Ago是另一类核酸内切酶,具有良好的应用潜力。从CRISPR/Cas9的... CRISPR/cas9是目前应用广泛的基因组编辑工具,该系统利用一段RNA引导Cas9核酸酶可对多种细胞及动植物基因组实现特定位点的切割和修饰,具有操作简单、作用高效等优点。Ago是另一类核酸内切酶,具有良好的应用潜力。从CRISPR/Cas9的发展现状、结构基础、作用机制、改进后的基因编辑机制及基因编辑技术的应用等方面进行了综述,讨论其存在的问题,并提出相应对策。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 基因组编辑 NgAgo-gDNA
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丝状真菌全局性调控因子LaeA的研究进展 被引量:1
13
作者 王亚萍 谭玉梅 +4 位作者 周国庆 兰亚 永翔 罗钊 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期712-718,共7页
全局调控因子在丝状真菌次级代谢调控及其生长发育过程中有着重要作用。LaeA是2004年首次被发现的丝状真菌全局性调控因子。本综述介绍了LaeA在丝状真菌发育、次级代谢中的功能及其作用机制,总结了丝状真菌中己发现的laeA的同源基因,... 全局调控因子在丝状真菌次级代谢调控及其生长发育过程中有着重要作用。LaeA是2004年首次被发现的丝状真菌全局性调控因子。本综述介绍了LaeA在丝状真菌发育、次级代谢中的功能及其作用机制,总结了丝状真菌中己发现的laeA的同源基因,并对存在的问题及应用前景进行讨论与展望。 展开更多
关键词 全局性调控因子 LAEA 次级代谢调控 发育调控
试管捕捉实时荧光RT-PCR法同时检测烟草花叶病毒病和马铃薯Y病毒病 预览 被引量:1
14
作者 任锡毅 永翔 +1 位作者 黄永会 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第6期96-100,共5页
为建立一套简单、快速、有效的病毒病检测方法,避开病毒病检测中分子生物学方法检测时RNA提取这一复杂、费时、费力的过程,且能在同一个反应中同时检测多种病毒病,对我国常见的 2种烟草病毒的外壳蛋白基因部分序列设计引物和TaqMan... 为建立一套简单、快速、有效的病毒病检测方法,避开病毒病检测中分子生物学方法检测时RNA提取这一复杂、费时、费力的过程,且能在同一个反应中同时检测多种病毒病,对我国常见的 2种烟草病毒的外壳蛋白基因部分序列设计引物和TaqMan探针,结合实时荧光逆转录PCR(RT-PCR)和试管捕捉RT-PCR法,对实时荧光RT-PCR法加以改进,与双抗夹心酶联免疫法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbant assay,简称DAS-ELISA)和试管捕捉RT-PCR法进行比较,并在此基础上构建多重试管捕捉实时荧光RT-PCR检测体系。结果首次成功构建能同时检测烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒的多重试管捕捉实时荧光RT-PCR检测体系。该技术无须提取RNA,包括叶片研磨、捕捉、反转录、荧光PCR 扩增等步骤,简单快捷、省时省力,具有高效性、系统性和经济简便性等特点。 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 马铃薯Y病毒 实时荧光RT-PCR 检测
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我国虫草产业发展现状、问题及展望——虫草产业发展金湖宣言 被引量:51
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作者 董彩虹 李文佳 +67 位作者 李增智 闫文娟 李泰辉 杏忠 蔡磊 曾文波 柴美清 陈仕江 陈自宏 代永东 戴天机 都兴范 顾寅钰 郭良栋 郭晓玲 郭英兰 韩日畴 何沛平 贺宗毅 黄显智 柯传奎 孔德勇 郎宁 李兵 李毅 李春如 李建刚 李培荣 李玉玲 林文飞 文海 艳芳 乙清 陆震鸣 罗信昌 马欣 钱正明 施新琴 史劲松 王莹 王成树 王国强 王文风 王元兵 旺姆 温鲁 魏江春 文戈 吴根土 肖波 谢放 辛树权 徐娟 徐国华 徐鸿雁 徐泰浩 许正宏 阳武雄 斯富 于兴军 虞泓 袁峰 翟立泰 赵丰丽 朱景明 朱荣才 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-15,共15页
虫草是寄生于昆虫、少数真菌和植物体上的一类真菌,是广义虫草属Cordyceps s.l.真菌的总称,是具有营养、保健和医疗功效的宝贵生物资源。目前我国的虫草产业涉及了冬虫夏草Ophiocordyceps sinensis、蛹虫草Cordyceps militaris、蝉花Isa... 虫草是寄生于昆虫、少数真菌和植物体上的一类真菌,是广义虫草属Cordyceps s.l.真菌的总称,是具有营养、保健和医疗功效的宝贵生物资源。目前我国的虫草产业涉及了冬虫夏草Ophiocordyceps sinensis、蛹虫草Cordyceps militaris、蝉花Isaria cicadae及其相关真菌,已经形成了一个巨大的产业,实现了较高的经济价值和社会效益。本文从产业发展历史、产品研发、功效及市场等方面对我国虫草产业发展现状进行了总结,结合最新科学研究进展,分析了虫草产业中存在的一些问题,提出了促进产业健康发展的建议,并对产业前景进行了展望。 展开更多
关键词 虫草 虫草菌 产业 冬虫夏草 蛹虫草 广东虫草 蝉花
赤散囊菌MAPKs超家族的鉴定及分析
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作者 王玉臣 谭玉梅 +3 位作者 陈丽 建魁 永翔 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1117-1129,共13页
本研究以赤散囊菌Eurotium rubrum全基因组序列为对象,利用HMMER软件构建隐马尔可夫模型(hidden markov models,HMM)结合BLAST的方法鉴定了促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)超家族。通过构建系统发育... 本研究以赤散囊菌Eurotium rubrum全基因组序列为对象,利用HMMER软件构建隐马尔可夫模型(hidden markov models,HMM)结合BLAST的方法鉴定了促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)超家族。通过构建系统发育树对鉴定蛋白进行分析,并利用MEME软件进行了保守性基序的预测及活性位点注释。分析结果表明,赤散囊菌基因组包含了4个MAPK蛋白,分别属于Hog1-type、Mpk C-type、Slt2-type和Fus3/Kss1-type类型;3个MAPK kinase(MAPKK)蛋白,分别属于MKK1-type、Pbs2-type和Ste7-type类型;3个MAPK kinase kinase(MAPKKK)蛋白,分别属于BCK1-type、Ste11-type和Ssk22-type类型。保守性基序分析及注释结果表明,MAPKs超家族蛋白都包含了蛋白激酶活性位点"-D[L/I/V]K-"以及保守性的ATP-binding标签序列。MAPK与MAPKK蛋白分别包含了"-Tx Y-"和"-SD[I/V]WS-"磷酸化位点,且MAPK蛋白还包含一个保守性的common docking基序(CD motif),而MAPKKK蛋白则包含了一个功能不明的保守性基序,其一致性序列为"-GTPYWMAPEV-"。研究结果为揭示MAPKs信号途径在赤散囊菌中参与调控的生物学过程奠定了基础。 展开更多
关键词 赤散囊菌 促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) MAPK激酶(MAPKK) MAPK激酶激酶(MAPKKK)
茯砖茶生产过程中“金花”菌的检测 被引量:2
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作者 朱李丽 谭玉梅 +3 位作者 葛永怡 王玉臣 永翔 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期124-129,共6页
茯砖茶生产过程中“金花”菌出现的时期,一直是茯砖茶生产者和研究者关注的问题,也是进行茯砖茶生产工艺改良必备的前提条件。本研究从已测序的“金花”菌基因组中分析获得29个特异性基因,对这些特异性基因进行引物设计和筛选,最后在SI-... 茯砖茶生产过程中“金花”菌出现的时期,一直是茯砖茶生产者和研究者关注的问题,也是进行茯砖茶生产工艺改良必备的前提条件。本研究从已测序的“金花”菌基因组中分析获得29个特异性基因,对这些特异性基因进行引物设计和筛选,最后在SI-02588和SI-02863基因上获得引物OEC-6和OEC-10,2对引物表达效率高、特异性好,2对引物可用于全程监控“金花”菌动态变化。运用2对引物检测茯砖茶生产流程中“金花”菌,结果显示在茯砖茶生产过程中萎调至第一次渥堆均为阴性,第二次渥堆至发花11 d均为阳性,这表明“金花”菌最早出现的时期是第二次渥堆前,之后至茯砖茶成品都含有“金花”菌。本研究的开展说明了“金花”菌在茯砖茶中最早出现的时期,为茯砖茶生产工艺的改良提供了理论基础和指导。 展开更多
关键词 茯砖茶 冠突散囊菌 特异性基因
西南地区市场冰球子分子鉴定 预览 被引量:1
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作者 朱英 杨友联 +3 位作者 黄永会 永翔 张丽娜 《种子》 北大核心 2016年第9期12-14,19共4页
利用rDNA ITS和叶绿体trnL-F序列,对17份西南地区冰球子进行分子鉴定。采用改进CTAB法提取独蒜兰叶片基因组DNA,利用通用引物ITS 1和ITS 4以及引物trnL-F对其DNA中rDNA ITS区和叶绿体trnL-F序列进行扩增,对目的片段进行测序并对测序结... 利用rDNA ITS和叶绿体trnL-F序列,对17份西南地区冰球子进行分子鉴定。采用改进CTAB法提取独蒜兰叶片基因组DNA,利用通用引物ITS 1和ITS 4以及引物trnL-F对其DNA中rDNA ITS区和叶绿体trnL-F序列进行扩增,对目的片段进行测序并对测序结果进行聚类分析。结果表明,17份西南独蒜兰代表3个种,即云南独蒜兰、独蒜兰和一未定种,药源基本可靠。 展开更多
关键词 RDNA ITS序列 TRNL-F序列 独蒜兰属 兰科植物
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玉米-大豆间作行距对大豆生长及品质的影响 预览 被引量:5
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作者 朱星陶 谭春燕 +3 位作者 陈佳琴 杨春杰 龚丽娜 《贵州农业科学》 CAS 2016年第6期22-25,52共5页
为玉米与大豆间作共生体系的高产复合群落提供合理的田间配置技术参数,设置玉米与大豆间作的行距变化试验,研究高秆强势作物玉米对矮秆弱势作物大豆的生长、产量及品质等性状的影响。结果表明:大豆与玉米的行距在25~60cm,随行距增大,... 为玉米与大豆间作共生体系的高产复合群落提供合理的田间配置技术参数,设置玉米与大豆间作的行距变化试验,研究高秆强势作物玉米对矮秆弱势作物大豆的生长、产量及品质等性状的影响。结果表明:大豆与玉米的行距在25~60cm,随行距增大,大豆单株产量增加,群体产量先增加后降低,当大豆与玉米行距为45cm时,大豆群体产量最高(59.65kg/667m~2);随着大豆与玉米行距减小,大豆株高增加,行距在40~45cm时,大豆平均株高为55cm(大豆最适高度);大豆与玉米行距在40cm以下时,玉米对大豆有效荚及籽粒的形成抑制明显,对大豆百粒重、底荚高度、主茎节数等影响不明显;大豆与玉米距离越近,大豆蛋白质含量增加,脂肪含量降低,可溶性蛋白含量增加,可溶性糖含量呈M型变化,脯氨酸含量降低,SOD和POD的活性呈波浪形不规律变化;生产上大豆与玉米间作应选择玉米与大豆的行距在30~45cm较为合理。 展开更多
关键词 玉米 大豆 间作 品质
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谢瓦氏曲霉间型变种esdC基因的功能分析 被引量:4
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作者 谭玉梅 +1 位作者 永翔 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期227-234,共8页
为了研究谢瓦氏曲霉间型变种esd C基因的功能,构建该基因的敲除载体,通过农杆菌介导转化及筛选获得敲除突变体,并对突变体的形态进行了初步分析。生物学特性显示:△esd C突变子的子囊结构与野生型相似,子囊孢子均为球形或近球形,无性... 为了研究谢瓦氏曲霉间型变种esd C基因的功能,构建该基因的敲除载体,通过农杆菌介导转化及筛选获得敲除突变体,并对突变体的形态进行了初步分析。生物学特性显示:△esd C突变子的子囊结构与野生型相似,子囊孢子均为球形或近球形,无性发育也与野生型无显著差异。但是,在MYA培养基上培养14d后,△esd C突变体菌落的渗出液相对野生型较少,且无皱褶,菌落表面干燥。这些结果表明esd C基因的缺失对孢子结构的影响不显著,为谢瓦氏曲霉间型变种有性调控机制的研究奠定了技术基础。 展开更多
关键词 谢瓦氏曲霉间型变种 ESD C基因 基因敲除 功能分析
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