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浙江省和河北省规模猪场弓形虫感染的血清学调查 认领
1
作者 严鹏 尚学东 +1 位作者 田忠园 华利忠 《现代畜牧兽医》 2020年第1期50-53,共4页
为了解浙江省和河北省规模化猪场猪群弓形虫自然感染的情况,在23个规模化猪场随机采集了463例猪血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)对猪血清中弓形虫抗体进行检测。结果表明:猪群总感染率为44.49%;浙江省猪群感染率为36.82%,河北省猪... 为了解浙江省和河北省规模化猪场猪群弓形虫自然感染的情况,在23个规模化猪场随机采集了463例猪血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)对猪血清中弓形虫抗体进行检测。结果表明:猪群总感染率为44.49%;浙江省猪群感染率为36.82%,河北省猪群感染率为50.38%;从不同年份感染情况分析,2016、2017和2018年猪群感染率分别为为37.11%、45.49%和52.20%,呈逐年上升的趋势;从胎次感染情况分析,1~6胎次、高胎次(6胎以上)母猪感染率分别为42.10%、52.94%、47.17%、45.95%、54.00%、63.64%、37.50%,母猪群总感染率为49.28%。调查检测结果表明猪群弓形虫感染很普遍,在不同猪场均有一定程度的感染,而母猪感染率较高。 展开更多
关键词 规模猪场 猪弓形虫 血清学 间接ELISA 浙江 河北
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猪肺炎支原体人工感染引起易感猪各肺叶病变差异的研究 认领
2
作者 甘源 谢星 +13 位作者 张磊 熊祺琰 杨浩 刘蓓蓓 韦艳娜 王海燕 于岩飞 白昀 袁厅 李俊 郝飞 华利忠 邵国青 冯志新 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS 北大核心 2020年第4期71-76,共6页
为研究猪肺炎支原体对易感猪肺脏及各肺叶部位的损伤差异性,选二元猪(大白×二花脸)和三元猪(杜洛克×长白×大白) 2个品系,共6批次的猪肺炎支原体(Mhp)阴性猪,经人工"气管定位注射"途径感染猪肺炎支原体,于感染... 为研究猪肺炎支原体对易感猪肺脏及各肺叶部位的损伤差异性,选二元猪(大白×二花脸)和三元猪(杜洛克×长白×大白) 2个品系,共6批次的猪肺炎支原体(Mhp)阴性猪,经人工"气管定位注射"途径感染猪肺炎支原体,于感染后28 d剖检,通过肉眼观察,运用"猪支原体肺炎的肺病变28分制评分法"对肺脏及各个肺叶部位所显示的病变情况进行测算、评分、统计和分析,并对所收集的肺泡灌洗液(BAFL)中猪肺炎支原体病原进行PCR检测。结果表明:猪肺炎支原体能引起肺脏各个肺叶产生特异性"虾肉样"病变,该病变主要呈现在心叶和尖叶部位。不同肺叶所呈现的病变程度存在一定的差异,其中猪肺炎支原体对心叶造成病变最严重,且右心叶比左心叶严重。猪肺炎支原体引起的右肺的病变程度高于左肺,推测其在右肺部位的定植水平可能高于左肺。通过猪肺炎支原体人工感染引起易感猪各肺叶病变差异的研究,为丰富猪支原体肺炎的临床诊断方法和致病机制、疫苗免疫效果评价研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 易感猪 气管注射 肺病变
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苏淮猪和外来品种猪肺炎支原体血清抗体变化规律研究 认领
3
作者 毛爱民 华利忠 +5 位作者 冯志新 范锋 邹建波 姚黄江 缪剑岭 胡明英 《兽医导刊》 2019年第16期223-224,245共3页
本文通过检测不同周龄苏淮育肥猪和外三元猪、不同胎次苏淮母猪和二元猪血清中猪肺炎支原体抗体,调查苏淮猪与外来品种猪在自然感染猪肺炎支原体的情况下血清抗体的变化规律。结果发现:育肥猪群中,苏淮育肥猪和三元猪的猪肺炎支原体抗... 本文通过检测不同周龄苏淮育肥猪和外三元猪、不同胎次苏淮母猪和二元猪血清中猪肺炎支原体抗体,调查苏淮猪与外来品种猪在自然感染猪肺炎支原体的情况下血清抗体的变化规律。结果发现:育肥猪群中,苏淮育肥猪和三元猪的猪肺炎支原体抗体阳性率在4周龄以内均有下降趋势,但7周龄以后均随周龄的增加而升高,且除20周龄外,苏淮猪在其余各个周龄阶段猪肺炎支原体阳性率均高于三元猪。母猪群中,苏淮母猪和二元母猪的猪肺炎支原体血清抗体均随着胎次的增加而下降,但无论哪个胎次,两品种猪之间比较,差异均不显著。结论:育肥猪群中,年龄、品种是猪肺炎支原体抗体变化的影响因素;母猪群中,胎次是猪肺炎支原体抗体变化的影响因素,该结果为临床不同品种、不同猪群猪支原体肺炎防治方法提供依据。 展开更多
关键词 苏淮猪 猪肺炎支原体 血清抗体 检测 风险因素
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猪支原体肺炎活疫苗(168株)气溶胶免疫后呼吸道sIgA分泌及抗原存留规律 认领 被引量：1
4
作者 华利忠 白昀 +6 位作者 武昱孜 王佳 杨浩 吴猛 袁厅 邵国青 冯志新 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第4期69-74,共6页
猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae ,Mhp)引起的猪的一种慢性呼吸道疾病,严重影响养猪业发展,活疫苗气溶胶免疫是防治该病的新措施。为研究猪肺炎支原体活疫苗(168株)经气溶胶免疫后,疫苗株在免疫猪肺内的占位存... 猪支原体肺炎是由猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae ,Mhp)引起的猪的一种慢性呼吸道疾病,严重影响养猪业发展,活疫苗气溶胶免疫是防治该病的新措施。为研究猪肺炎支原体活疫苗(168株)经气溶胶免疫后,疫苗株在免疫猪肺内的占位存留规律,选用3周龄不吃初乳猪27头,随机分为3组,G1气溶胶免疫组12头,G2肺内免疫组12头,同时设立阴性对照3头。分别于免疫后第2 h、7 d、14 d及28 d进行鼻拭子Mhp sIgA检测以及血清抗体检测。另外在上述时间点分别宰杀G1和G2组各3头,对照组在实验组免疫后第28 d宰杀,采集肺泡灌洗液,分别进行Mhp sIgA检测及Mhp疫苗株含量检测。结果显示:(1)所有试验猪至实验结束,Mhp血清抗体未出现转阳现象;(2)鼻拭子sIgA水平G1组在免疫后第14 d与对照组相比上升,差异具有显著统计学意义(p <0.05);G2组在免疫后第7 d和14 d与相应的对照组相比上升,差异具有显著统计学意义(p <0.05),各时间点G1组与G2组sIgA水平差异不具备统计学意义(p >0.05);(3)G1组肺泡灌洗液中的 sIgA在免疫后14 d部分转阳(阳性率33.33%),28 d全部转阳(阳性率100%);G2组在免疫14 d时已全部转阳(阳性率100%),各时间点G1组与G2组sIgA水平差异不具备统计学意义(p >0.05);(4)气溶胶免疫组肺泡灌洗液内Mhp疫苗株浓度在免疫后第2 h、7 d、14 d和28 d分别是相应肺内免疫组的0.37倍、1.01倍、0.88倍以及0.52倍。猪支原体肺炎活疫苗(168株)经气溶胶免疫后,和肺内免疫一样可以诱导免疫猪的局部黏膜免疫以及具有同等的占位效应,且经气溶胶免疫的疫苗株在免疫仔猪体内的增殖水平可能与其诱导的黏膜免疫水平相关。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体活疫苗(168株) 气溶胶免疫 肺内免疫 占位效应 黏膜免疫
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猪肺炎支原体醛缩酶原核表达及致猪气管上皮细胞凋亡的研究 认领 被引量：1
5
作者 华利忠 王世杰 +6 位作者 马丹夫 刘茂军 冯志新 刘蓓蓓 韦艳娜 于岩飞 邵国青 《动物医学进展》 北大核心 2019年第6期17-22,共6页
为了研究Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(FBA)是否为猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)的毒力因子,并参与其致病作用,根据已发表的猪肺炎支原体醛缩酶全基因序列设计特异性的引物,以猪肺炎支原体168株基因组为模板,通过Overlap PCR点... 为了研究Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(FBA)是否为猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)的毒力因子,并参与其致病作用,根据已发表的猪肺炎支原体醛缩酶全基因序列设计特异性的引物,以猪肺炎支原体168株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增醛缩酶基因。将FBA克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析,结果表明,FBA基因全长864 bp。将构建的重组表达质粒pET-28a(+)/FBA转化至大肠埃希菌BL21(DE3),通过筛选获得阳性克隆,重组工程菌在IPTG诱导下成功获得表达融合蛋白猪肺炎支原体Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(Mhp FBA),大小约为35 ku。纯化蛋白并接种于猪气管上皮细胞至FBA终浓度分别为0、10、50、100、150、200μg/mL,孵育24 h后进行上清中丙酮酸浓度的检测和细胞凋亡检测。结果上清中丙酮酸浓度随着FBA浓度的上升,出现先极显著上升(P<0.01)、后急剧下降的现象;细胞平均凋亡率依次分别为3.54%、10.91%、13.99%、27.19%、32.84%和40.71%,并随着FBA浓度的升高而升高,且相比阴性对照组差异均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。成功构建了Mhp FBA重组菌,表达获得了Mhp重组蛋白FBA,该蛋白可能为猪肺炎支原体的毒力因子,参与猪肺炎支原体的致病作用,从而为进一步开展Mhp致病机理和药物研究奠定基础。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 果糖二磷酸醛缩酶 原核表达 气管上皮细胞 凋亡
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鉴别牛5种重要病毒的LAMP-基因芯片方法的建立 认领 被引量：1
6
作者 高峰 华利忠 +5 位作者 于伯华 王建峰 张丹 张琳 唐泰山 张常印 《动物医学进展》 北大核心 2019年第5期7-12,共6页
为建立牛的主要疫病的快速、准确及高通量鉴别诊断技术,以赤羽病病毒(AKV)、牛白血病病毒(BLV)、蓝舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)5种牛传染病病原为研究对象,将LAMP技术与微流控芯片技术有机结合,建立... 为建立牛的主要疫病的快速、准确及高通量鉴别诊断技术,以赤羽病病毒(AKV)、牛白血病病毒(BLV)、蓝舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)5种牛传染病病原为研究对象,将LAMP技术与微流控芯片技术有机结合,建立了相应的基因芯片检测技术,并优化了该基因芯片的反应条件。结果表明,建立的基因芯片可同时检测上述5种病原,特异性好,60min反应时间即可给出检测结果。其中AKV和PPRV的敏感性为103copies/μL,BLV的敏感性为105copies/μL,BTV和BVDV的敏感性为102copies/μL,与LAMP检测的敏感性一致。成功建立了基于LAMP技术的5重RT-LAMP基因芯片,可同时快速准确检测上述5种病毒,为口岸检疫探索出一种能快速、高通量检测动物疫病的方法。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 高通量 微流控芯片 牛的病毒鉴别检测
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以史为鉴,浅谈中国非洲猪瘟的防控与净化 认领 被引量：10
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作者 华利忠 冯志新 +4 位作者 张永强 郝飞 戈胜强 王佳 邵国青 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第2期96-104,共9页
自2018年8月中国首例非洲猪瘟案例以来,短短数月,已蔓延了十几个省份,给我国养猪业造成了巨大的损失,形势异常严峻。如何控制甚至净化非洲猪瘟疫情以及如何防止非洲猪瘟跨境传入(或再次跨境传入)已成为整个产业急需解决的重大问题。由... 自2018年8月中国首例非洲猪瘟案例以来,短短数月,已蔓延了十几个省份,给我国养猪业造成了巨大的损失,形势异常严峻。如何控制甚至净化非洲猪瘟疫情以及如何防止非洲猪瘟跨境传入(或再次跨境传入)已成为整个产业急需解决的重大问题。由于国内尚缺乏防控非洲猪瘟的经验,本文从国外防控非洲猪瘟成败的关键风险因素出发,描述了非洲猪瘟的传播途径,分析了西欧防控非洲猪瘟入境的主要措施,探讨了撒丁岛和俄罗斯控制失败的因素,总结了西班牙和巴西成功净化的关键措施,最后根据上述相关因素分析了我国在控制和净化非洲猪瘟的优势条件和风险因素,针对各风险因素提出了我国控制非洲猪瘟的优化控制措施,并提出了我国地方品种猪资源保护的建议,为我国非洲猪瘟的防控提供理论基础和实践经验。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 中国 净化 风险因素 防控策略
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生态高效发酵床养猪技术体系创建与应用 认领
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作者 顾洪如 颜培实 +8 位作者 王小治 杨杰 贡玉清 罗佳 杨智青 韦习会 余刚 华利忠 刘满昌 《中国科技成果》 2018年第13期67-70,共4页
规模化养猪粪尿集中排放造成严重的环境污染。粪尿聚集度高造成了饲养场周边局部区域土壤、水体和大气等环境负荷增加，恶臭影响了周边居民的生活环境质量，成为关停并转的重要因素，据报道：2015年仅浙江省因环保关停畜牧场594件。另... 规模化养猪粪尿集中排放造成严重的环境污染。粪尿聚集度高造成了饲养场周边局部区域土壤、水体和大气等环境负荷增加，恶臭影响了周边居民的生活环境质量，成为关停并转的重要因素，据报道：2015年仅浙江省因环保关停畜牧场594件。另外，作物生产中不能有效利用畜禽粪尿资源，化学肥料的大量使用造成土壤肥力及农产品质量下降，同时农作物秸秆资源也未得到有效利用。发酵床饲养是基于粪尿原位降解，向环境零排放的生态技术，但因所需垫料成本高、饲养管理技术不配套，使这项技术难以推广。 展开更多
关键词 养猪技术 生态技术 发酵床 农作物秸秆资源 应用 生活环境质量 饲养管理技术 环境污染
猪肺炎支原体强弱毒株感染后呼吸道特异性sIgA抗体分泌规律差异性 认领 被引量：4
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作者 倪博 白昀 +7 位作者 甘源 杨浩 韦艳娜 华利忠 熊祺琰 刘茂军 邵国青 冯志新 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1307-1309,1320共4页
检验猪肺炎支原体强毒株与弱毒株感染后呼吸道sIgA抗体活性，并比较其抗体分泌规律差异。分别使用猪肺炎支原体强毒Js株和弱毒168株接种实验猪，同时设置健康猪为对照组，按时采集鼻拭子样本。通过ELISA检测0，2，4，7，14，21，28，35... 检验猪肺炎支原体强毒株与弱毒株感染后呼吸道sIgA抗体活性，并比较其抗体分泌规律差异。分别使用猪肺炎支原体强毒Js株和弱毒168株接种实验猪，同时设置健康猪为对照组，按时采集鼻拭子样本。通过ELISA检测0，2，4，7，14，21，28，35，42，49和56d特异性sIgA抗体滴度，比较两组抗体分泌规律。结果显示，在接种4-7d之间，强毒组已出现阳性猪，14d时所有猪呈感染阳性。而弱毒组在14-21d之间开始逐渐出现阳性猪，35d时80％左右的猪呈阳性感染，随后下降。并且强毒组抗体平均滴度高于弱毒组。结果显示，强毒转阳更早，抗体滴度更高，持续时间更长；弱毒为猪支原体肺炎弱毒疫苗株，该菌株同样保持了良好的免疫原性，可刺激呼吸道黏膜产生特异的sIgA，但黏膜抗体转阳时间较晚，滴度较低。强弱毒株在黏膜抗体分泌方面的差异有助于临床上对猪肺炎支原体的感染以及活疫苗免疫进行区别鉴定。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 强弱毒株 SIGA
不同处理方式对发酵床模式下猪主要寄生虫病防治效果 认领 被引量：1
10
作者 李健 华利忠 +7 位作者 蔡梦 杨杰 徐小波 宦海琳 邵乐 秦枫 潘孝青 顾洪如 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第12期108-112,共5页
探讨发酵床养猪模式下寄生虫病防控效果,构建寄生虫病防控规程。将发生寄生虫病的表层垫料混匀,添加4组发酵床表层,将60头35日龄苏钟猪随机分为4组:A组(垫料翻耙后进猪,定期药物驱虫2次)、B组(垫料堆积发酵后进猪)、C组(垫料发酵后进猪... 探讨发酵床养猪模式下寄生虫病防控效果,构建寄生虫病防控规程。将发生寄生虫病的表层垫料混匀,添加4组发酵床表层,将60头35日龄苏钟猪随机分为4组:A组(垫料翻耙后进猪,定期药物驱虫2次)、B组(垫料堆积发酵后进猪)、C组(垫料发酵后进猪,定期药物驱虫2次)、D组(垫料翻耙后进猪,感染寄生虫时药物治疗1次),试验期120 d。垫料堆积发酵组垫料发酵温度极显著高于垫料翻耙组(P<0.01),并且堆积发酵后垫料中未检出寄生虫卵,试验第45、90天在垫料和粪便中的蛔虫卵、鞭虫卵、球虫卵数量均处于低水平;采用药物驱虫程序可有效降低猪粪便中的蛔虫卵、鞭虫卵、球虫卵数量和对应寄生虫的感染率,但不能避免垫料中寄生虫的重复感染; B、C组末重、总增重、平均日增重均显著高于A组(P<0.05)和D组(P<0.01),A组末重、总增重、平均日增重也均显著高于D组(P<0.05)。综上所述,在发酵床养猪模式下,采用进猪前药物驱虫、垫料堆积发酵,猪群饲养阶段定期驱虫,同时注意养殖管理器具消毒,可有效降低寄生虫感染率。 展开更多
关键词 发酵床 发酵方法 猪 寄生虫虫卵 防治
猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒研制及应用 认领 被引量：1
11
作者 李爽 荣桂芬 +5 位作者 盛英霞 陈银辉 温凯 华利忠 熊雅婷 杨若松 《动物医学进展》 北大核心 2018年第6期66-70,共5页
以原核表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法并进行相应优化,成功研制猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒,与国内市场标杆产品进行比较,敏感性为97.8%,特异性为92.8%,总体符合率达到了95%。同时,该试剂盒批间、... 以原核表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法并进行相应优化,成功研制猪圆环病毒2型间接ELISA抗体检测试剂盒,与国内市场标杆产品进行比较,敏感性为97.8%,特异性为92.8%,总体符合率达到了95%。同时,该试剂盒批间、批内变异系数均小于10%,具有较好的重复性。在临床应用中显示,该试剂盒测定江苏A猪场阳性率为82.2%,其中母猪阳性率为100%,育肥猪阳性率为73.3%。B猪场免疫母猪及后代的阳性率为98.3%,其中母猪阳性率为100%,后代为97.7%,且母猪的抗体水平高于子代,结果为圆环病毒2型在猪场的感染情况与疫苗免疫效果提供了有力的支撑。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ELISA试剂盒 符合率 临床应用
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猪伪狂犬病毒变异株AH02LA单因子发病模型的建立 认领 被引量：1
12
作者 毛爱民 范锋 +3 位作者 王继春 冯志新 华利忠 刘剑锋 《中国动物检疫》 CAS 2017年第4期86-89,共4页
2011年以来,猪伪狂犬病毒（PRV）变异株在我国多地区流行,造成了严重的经济损失。本研究以主要猪病病原为阴性的仔猪为基础,建立了PRV变异株AH02LA单因子发病模型,并研究了其主要病理学变化。研究发现PRV会引起仔猪非化脓性脑炎,这一病... 2011年以来,猪伪狂犬病毒（PRV）变异株在我国多地区流行,造成了严重的经济损失。本研究以主要猪病病原为阴性的仔猪为基础,建立了PRV变异株AH02LA单因子发病模型,并研究了其主要病理学变化。研究发现PRV会引起仔猪非化脓性脑炎,这一病理变化将有助于猪伪狂犬病的临床快速准确诊断。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 发病模型 病理学 猪
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猪肺炎支原体和猪鼻支原体双重荧光定量PCR检测方法的建立 认领 被引量：11
13
作者 武昱孜 熊祺琰 +5 位作者 刘蓓蓓 张珍珍 王佳 华利忠 韦艳娜 邵国青 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1491-1498,共8页
建立同时检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体的双重荧光定量PCR方法。根据猪肺炎支原体P97序列和猪鼻支原体P37序列的特异性引物，分别标记FAM和Texas Red荧光报告基团的2条TaqMan探针，建立和优化双重实时荧光定量PCR反应条件和体系，同时... 建立同时检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体的双重荧光定量PCR方法。根据猪肺炎支原体P97序列和猪鼻支原体P37序列的特异性引物，分别标记FAM和Texas Red荧光报告基团的2条TaqMan探针，建立和优化双重实时荧光定量PCR反应条件和体系，同时检测其敏感性、特异性和重复性。建立的双重荧光定量PCR对猪肺炎支原体和猪鼻支原体的最低检测值均为10 copies·μL-1；与猪源致病菌、病毒和其他常见细菌均无交叉反应；各浓度标准品的Ct值变异系数小于5%，重复性好。检测72份临床样本，其中猪肺炎支原体的肺阳性率为80%，鼻拭子阳性率22%，支气管肺泡灌洗液阳性率58.33%；猪鼻支原体的肺阳性率为40%，鼻拭子阳性率66%，支气管肺泡灌洗液阳性率41.67%。建立的双重荧光定量PCR方法比普通PCR更加敏感，实用性强，可用于临床样品的检测。该方法能同时快速和定量地检测猪肺炎支原体和猪鼻支原体，在短时间内获得样品的多个信息，快速地解决了多次检测所需的时间以及经济消耗，为猪肺炎支原体和猪鼻支原体的监测和防控提供了新型、可靠的检测技术。 展开更多
关键词 猪肺炎支原体 猪鼻支原体 双重荧光定量PCR
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猪流感H3N2型病毒特异性sIgA抗体分泌规律研究 认领 被引量：2
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作者 白昀 舒采松 +5 位作者 甘源 倪博 华利忠 吴猛 邵国青 冯志新 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期956-961,共6页
目的 研究不同品种猪应答猪流感病毒感染,呼吸道分泌特异性sIgA抗体的分泌规律,以及针对不同抗原蛋白sIgA抗体的分泌差异。方法 将猪流感病毒A/swine/Nanjing/51/2010（H3N2）滴鼻感染试验猪（1×107 TCID50/mL,2mL/头）,采集感染后... 目的 研究不同品种猪应答猪流感病毒感染,呼吸道分泌特异性sIgA抗体的分泌规律,以及针对不同抗原蛋白sIgA抗体的分泌差异。方法 将猪流感病毒A/swine/Nanjing/51/2010（H3N2）滴鼻感染试验猪（1×107 TCID50/mL,2mL/头）,采集感染后21d内不同时间点的鼻拭子样品,用M1、NS1和PB1三种重组蛋白分别建立的间接ELISA方法检测特异性sIgA抗体,并分析其分泌规律及差异。结果 显示针对3种重组蛋白的特异性sIgA抗体在整个检测周期内,分泌规律相似,差异无统计学意义,均表现为感染后第5d特异性sIgA抗体水平迅速升高,第14d达到高峰,随后开始逐渐下降。在不同品种猪之间,仅巴马猪分泌抗PB1蛋白的sIgA抗体在第14d和21d时高于二元猪（P〈0.05）,而抗M1和抗NS1蛋白的sIgA抗体在两种品种猪之间无统计学差异（P〉0.05）。结论 初步探索了猪在感染猪流感病毒后特异性sIgA黏膜抗体的分泌规律,为进一步研究SIV黏膜抗体诊断试剂奠定基础。 展开更多
关键词 猪流感病毒 间接ELISA sIgA抗体
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猪鼻支原体血清抗体间接ELISA检测方法的建立 认领
15
作者 王佳 熊祺琰 +6 位作者 华利忠 刘蓓蓓 甘源 冯志新 刘茂军 武昱孜 邵国青 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期1932-1938,共7页
猪鼻支原体是猪体内的一种常在菌,可引发猪的多发性浆膜炎、肺炎、关节炎、心包炎等炎症。由于猪鼻支原体与猪其他支原体有较高的交叉反应,目前并没有特异性的血清学诊断方法的报道。本试验以建立猪鼻支原体特异性ELISA检测方法为目的,... 猪鼻支原体是猪体内的一种常在菌,可引发猪的多发性浆膜炎、肺炎、关节炎、心包炎等炎症。由于猪鼻支原体与猪其他支原体有较高的交叉反应,目前并没有特异性的血清学诊断方法的报道。本试验以建立猪鼻支原体特异性ELISA检测方法为目的,将猪鼻支原体的表面可变脂蛋白Vlp的特定肽段作为包被抗原,优化该方法检测条件,最终确定：其抗原的最佳包被浓度为0.312 5μg·mL^-1;一抗的最佳稀释度为1∶100,作用时间为30min;二抗的最佳稀释浓度为1∶20 000,最佳作用时间为30min;显色时间为10min;阴阳性的判定值为0.27。交叉性试验结果显示,Vlp抗原与猪其他支原体阳性血清及猪常见传染病阳性血清均无交叉反应。在重现性试验中,批内及批间的变异系数均低于10%,证明重现性良好。利用所建立的方法对已知阴性及阳性样本进行检测,结果显示特异性和灵敏度均良好。最后,用建立的方法对人工感染后28d的猪血清和247份临床样品进行检测,感染猪血清抗体呈阳性,建立的Vlp-ELISA方法、吐温20膜蛋白-ELISA方法对不同猪群临床样品检测的阳性率趋势相同。综上所述,建立的Vlp-ELISA方法特异性、稳定性良好,可以广泛用于临床猪鼻支原体血清抗体检测,为该病的检测和防控提供了重要工具。 展开更多
关键词 间接ELISA 猪鼻支原体 血清学诊断 VLP
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猪伪狂犬病病毒新流行变异毒株的研究进展 认领 被引量：26
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作者 华利忠 刘剑锋 +2 位作者 冯志新 杨若松 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期共5页
近30年内,猪伪狂犬活疫苗的应用对中国猪伪狂犬病的防控贡献巨大.2011年以来,中国许多免疫猪场相继暴发猪伪狂犬疫情,给养猪业造成了巨大的损失.研究显示最新流行的PRV毒株为变异株,部分商品化活疫苗不能对其提供完全的保护.本文详细介... 近30年内,猪伪狂犬活疫苗的应用对中国猪伪狂犬病的防控贡献巨大.2011年以来,中国许多免疫猪场相继暴发猪伪狂犬疫情,给养猪业造成了巨大的损失.研究显示最新流行的PRV毒株为变异株,部分商品化活疫苗不能对其提供完全的保护.本文详细介绍了2011年以来中国猪伪狂犬病的发病情况及其分子流行病学调查结果,分析了猪伪狂犬新变异株的分子生物学特性及其变异株来源,同时论述了针对PRV突变株新型疫苗的研究进展,最后对深入开展中国猪伪狂犬病控制与净化研究进行了展望. 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 分子生物学 疫苗
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东北及华北地区猪弓形体血清学调查 认领 被引量：4
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作者 华利忠 魏德宝 +5 位作者 王佳 熊祺琰 冯志新 刘茂军 王丽 邵国青 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期124-127,141共5页
为研究东北及华北地区猪弓形体感染情况,本研究于2015年4月~5月采集4个省20个猪场的491份血清样品进行猪弓形体血清抗体的检测。结果表明黑龙江、辽宁、河北及山西的弓形体阳性率分别为63.24%、52.55%、50.92%及45.45%,平均为50.51%。... 为研究东北及华北地区猪弓形体感染情况,本研究于2015年4月~5月采集4个省20个猪场的491份血清样品进行猪弓形体血清抗体的检测。结果表明黑龙江、辽宁、河北及山西的弓形体阳性率分别为63.24%、52.55%、50.92%及45.45%,平均为50.51%。分胎次统计,4省3~5次经产母猪（S3-5）及6胎次及以上经产母猪（S6＋）的弓形体抗体阳性率相比后备猪群（G）,均极显著上升（p〈0.01）,华北两省的S3-5及S6＋组相比1~2胎次经产母猪（S1-2）组,阳性率也极显著上升（p〈0.01）,但东北两省差异不显著（p〉0.05）。抗体亲和力指数检测结果显示,4省高亲和力抗体样品数比例均在70%以上,平均为77.82%,低亲和力抗体平均为6.85%。除黑龙江外,S6＋的高亲和力指数的比例（92%~100%）相比G组以及S1-2组（40%~63.64%）,均极显著上升（p〈0.01）,但与S3-5（77.78%~88.24%）相比差异均不显著（p〉0.05）。该调查结果表明猪弓形体在我国东北和华北地区的猪场依然普遍存在,对猪场进行弓形体的防治非常必要。 展开更多
关键词 猪 弓形体 血清学 东北 华北
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发酵床与传统水冲圈模式下猪寄生虫虫卵调查及防治效果 认领 被引量：2
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作者 陈财 吴文开 +2 位作者 华利忠 高昆 邵国青 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第1期242-244,共3页
对江苏省阜宁县发酵床与传统水冲圈模式下寄生虫虫卵流行病学进行调查,并观察寄生虫防控措施的效果。选取阜宁县A、B、C、D、E 5个发酵床猪场,及W、X、Y、Z 4个传统水冲圈猪场,进行新鲜粪便寄生虫虫卵的定性和定量检测。根据检测结果,在... 对江苏省阜宁县发酵床与传统水冲圈模式下寄生虫虫卵流行病学进行调查,并观察寄生虫防控措施的效果。选取阜宁县A、B、C、D、E 5个发酵床猪场,及W、X、Y、Z 4个传统水冲圈猪场,进行新鲜粪便寄生虫虫卵的定性和定量检测。根据检测结果,在A、B、C、D发酵床猪场及X、Y、Z水冲圈猪场制定并实施发酵床模式下的寄生虫防治程序。猪场E、W为对照,不采取任何驱虫处理。于1年后再次调查上述9个猪场,以确定发酵床、水冲圈模式下的寄生虫防治效果。首次流行病学调查显示,阜宁县猪群主要感染猪蛔虫、猪鞭虫、猪球虫,发酵床模式下猪蛔虫、猪鞭虫、猪球虫的感染强度高于水冲圈猪场。实施驱虫程序1年后,发酵床、水冲圈模式下猪蛔虫和猪鞭虫的防治效果均较为理想,猪球虫的防治效果次之。阜宁县发酵床养猪模式比水冲圈猪场更易感染猪蛔虫、猪鞭虫、猪球虫,所制定的驱虫程序对防治猪蛔虫、猪鞭虫效果显著。 展开更多
关键词 发酵床 猪蛔虫卵 猪鞭虫卵 猪球虫卵 阜宁县
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猪支原体肺炎活疫苗（168株）滴鼻免疫保护效果的研究 认领
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作者 杨若松 邢宪平 +4 位作者 冯志新 华利忠 熊祺琰 Hassan Zackaria Ali Ishag 邵国青 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期93-97,共5页
本研究通过滴鼻免疫新途径免疫猪支原体肺炎活疫苗168株,与肺内免疫组及对照组进行比较,来确定滴鼻免疫猪支原体肺炎活疫苗（168株）的免疫保护力。将20只猪随机分为肺内免疫组、滴鼻免疫组、健康对照组和攻毒对照组。定期观察和检测各... 本研究通过滴鼻免疫新途径免疫猪支原体肺炎活疫苗168株,与肺内免疫组及对照组进行比较,来确定滴鼻免疫猪支原体肺炎活疫苗（168株）的免疫保护力。将20只猪随机分为肺内免疫组、滴鼻免疫组、健康对照组和攻毒对照组。定期观察和检测各组猪免疫后的临床症状。结果表明：滴鼻免疫组免疫后,猪群体温正常,无免疫引起的局部或全身不良反应,免疫途径安全可行;滴鼻免疫组和肺内免疫组与健康对照组相比,SIgA水平显著升高,差异极显著（P〈0.01）,但滴鼻免疫组与肺内免疫组相比,差异不显著。流式细胞仪检测显示CD4＋数值未发生显著性变化。肺脏剖检评分显示滴鼻免疫组的肺脏的病变水平与攻毒对照组相比呈极显著降低（P〈0.01）,保护率达到60%,相对低于肺内免疫组100%的保护率。猪支原体肺炎活疫苗（168株）通过滴鼻免疫方式,可以产生较好的免疫保护力。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎活疫苗(168株) 滴鼻免疫 SIGA 肺脏病变
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猪支原体肺炎发病模型的建立 认领 被引量：1
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作者 杨若松 冯志新 +4 位作者 华利忠 熊祺琰 Hassan Zackaria Ali Ishag 刘茂军 邵国青 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期79-82,87共5页
本研究旨在选择含有猪肺炎支原体强毒株的猪病肺组织为攻毒材料,建立一种猪支原体肺炎的发病模型。首先,通过荧光定量PCR方法确定猪支原体肺炎冻干病变组织中病原的含量;其次,利用小鼠接种试验,确定该组织毒用做攻毒材料的安全性;再次,... 本研究旨在选择含有猪肺炎支原体强毒株的猪病肺组织为攻毒材料,建立一种猪支原体肺炎的发病模型。首先,通过荧光定量PCR方法确定猪支原体肺炎冻干病变组织中病原的含量;其次,利用小鼠接种试验,确定该组织毒用做攻毒材料的安全性;再次,选择猪肺炎支原体阴性大白×二花脸杂交猪,按1：10,1：100,1：1 000,1：10 000稀释后组织强毒经气管内注射途径进行攻毒;最后,攻毒后28 d剖检感染猪,观察肺脏病变情况和临床症状,并通过攻毒剂量比较,确定了猪肺炎支原体感染剂量大于9.50×10^4拷贝时,能够引起猪发病,从而建立猪支原体肺炎人工发病模型,为猪肺炎支原体相关研究提供基础保障。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 动物模型 肺脏病变评分
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