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α2-巨球蛋白的特性与功能 被引量:5
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作者 皇甫超济 +2 位作者 马玉媛 赵雄 章金刚 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期217-222,共6页
α2-巨球蛋白(α2-M)是1种大分子糖蛋白,广泛存在于脊椎动物及非脊椎动物的体液中,属于巨球蛋白超家族的一员;其由4个相同的单体组成的同源四聚体,每个单体均含有5个功能区域,这决定了其特性及生物学功能。α2-M能够广泛参与机体的生... α2-巨球蛋白(α2-M)是1种大分子糖蛋白,广泛存在于脊椎动物及非脊椎动物的体液中,属于巨球蛋白超家族的一员;其由4个相同的单体组成的同源四聚体,每个单体均含有5个功能区域,这决定了其特性及生物学功能。α2-M能够广泛参与机体的生理及病理活动,其最基本的功能是作为广谱蛋白酶抑制剂以清除内源性及外源性蛋白酶,同时它能够与一些重要的细胞因子,如碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、神经生长因子(NGF)等,结合并调节其生物活性。有研究显示α2-M也具有抗辐射、抑制肿瘤及参与凝血平衡等作用。除此之外,α2-M还能够作为诊断或预测某些疾病的生物标记物。对α2-M生物特性及制备工艺研究的深入将有助于推进α2-M在临床的应用。 展开更多
关键词 Α2-巨球蛋白 大分子糖蛋白 蛋白酶抑制剂 生物活性调节 抗辐射 生物标记物 血液制品
离子交换层析分离纯化人结合珠蛋白的研究
2
作者 闫晶晶 赵雄 +3 位作者 马玉媛 马小伟 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期569-572,592共5页
目的探索应用离子交换层析从Cohn组分Ⅳ分离纯化人结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)的方法,并对纯化产物进行初步鉴定及活性分析。方法 Cohn组分Ⅳ溶解液稀释后经利凡诺络合,收集上清并用50%硫酸铵进行沉淀,沉淀重溶后用Q Sepharose Fast F... 目的探索应用离子交换层析从Cohn组分Ⅳ分离纯化人结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)的方法,并对纯化产物进行初步鉴定及活性分析。方法 Cohn组分Ⅳ溶解液稀释后经利凡诺络合,收集上清并用50%硫酸铵进行沉淀,沉淀重溶后用Q Sepharose Fast Flow层析分离纯化得到目的蛋白。然后利用SDS-PAGE及免疫印迹对目的蛋白进行鉴定,并利用Native-PAGE方法测定纯化产物的活性。结果 Cohn组分Ⅳ经过利凡诺络合及盐析处理后能有效去除部分杂蛋白,并使目的蛋白富集。利用离子交换层析方法从Cohn组分Ⅳ中纯化得到的主要产物为Hp2-2,SDS-PAGE显示Hp纯度较好,免疫印迹分析进一步证明,利用该法成功分离得到目的蛋白Hp,且利用NativePAGE方法测得目的蛋白活性为2.8 U/ml。结论利用该法从Cohn组分Ⅳ中成功分离得到人Hp,方法简单,易于放大生产,具有较好应用前景。 展开更多
关键词 结合珠蛋白 Cohn组分Ⅳ 纯化 鉴定
人巨细胞病毒包膜糖蛋白B线性B细胞抗原表位的预测 被引量:2
3
作者 闫晶晶 +2 位作者 赵雄 尹惠琼 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期184-188,共5页
目的 通过生物信息学方法分析人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)包膜糖蛋白B(glycoprotein B,g B)的结构及理化特性,预测g B的线性B细胞抗原表位。方法基于HCMV g B的序列,利用两种在线B细胞表位预测程序及DNAstar软件对g ... 目的 通过生物信息学方法分析人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)包膜糖蛋白B(glycoprotein B,g B)的结构及理化特性,预测g B的线性B细胞抗原表位。方法基于HCMV g B的序列,利用两种在线B细胞表位预测程序及DNAstar软件对g B进行预测;利用SWISS-MODEL服务器同源构建g B三级结构模型,进行进一步验证。结果与结论综合多项分析,预测得到HCMVg B的多个线性B细胞表位,为后续验证其优势中和表位,建立富含高效价中和抗体的原料血浆的筛选方法奠定了基础。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 糖蛋白B B细胞表位
冻干血浆与人血白蛋白在战创伤休克救治中的应用 被引量:3
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作者 赵雄 章纳 +4 位作者 马玉媛 贾俊婷 赵媛媛 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期216-219,共4页
冻干血浆和人血白蛋白在战创伤休克治疗中发挥着举足轻重的作用。冻干血浆是由健康人血浆根据血型按照一定比例混合经灭活病毒和冷冻干燥制成,其成分与新鲜冰冻血浆基本相同,对于战创伤休克、烧伤等具有良好的治疗效果,也是各国军方的... 冻干血浆和人血白蛋白在战创伤休克治疗中发挥着举足轻重的作用。冻干血浆是由健康人血浆根据血型按照一定比例混合经灭活病毒和冷冻干燥制成,其成分与新鲜冰冻血浆基本相同,对于战创伤休克、烧伤等具有良好的治疗效果,也是各国军方的研究热点。随着病毒灭活技术的不断进步,冻干血浆的安全性不断提高,已经在军队应用,在特殊情况下可以民用。白蛋白是血浆中含量最多的蛋白,具有维持血浆胶体渗透压、结合并输运血液中小分子物质等生理功能。目前上市的人血白蛋白包括血浆来源和重组来源两种,二者在分子组成、结构及生理功能上基本一致,在人体内的耐受性、安全性及药物代谢动力学等方面也没有明显差别。尽管人血白蛋白在休克救治中的作用曾存在争议,其在失血性休克、烧伤等的治疗中发挥着不可替代的作用。随着技术的不断进步,冻干血浆和人血白蛋白的质量将不断提高,更加安全、高效、经济,更加适用于战场环境。 展开更多
关键词 休克 战创伤 冻干血浆 人血白蛋白
特异性人免疫球蛋白与传染性疾病的防治 被引量:6
5
作者 马玉媛 向思龙 +2 位作者 王卓 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期220-224,共5页
特异性人免疫球蛋白是指针对某一特定病原体或生物毒素等的一类高免疫球蛋白制剂,是血液制品的重要品种,多用于预防和治疗一些发病率高、感染后果严重、无特效治疗方法的病原体感染,在传染性疾病的防治中具有其他药物不可比拟的优点。... 特异性人免疫球蛋白是指针对某一特定病原体或生物毒素等的一类高免疫球蛋白制剂,是血液制品的重要品种,多用于预防和治疗一些发病率高、感染后果严重、无特效治疗方法的病原体感染,在传染性疾病的防治中具有其他药物不可比拟的优点。国外特异性人免疫球蛋白上市品种较多,而国内由于技术瓶颈约束、经济效益有限等原因,新型特异性人免疫球蛋白的研发进展缓慢。该文对多种特异性人免疫球蛋白及其对于传染病的防治作用进行了综述。 展开更多
关键词 特异性人免疫球蛋白 传染性疾病 防治
水痘-带状疱疹病毒快速微量中和试验的建立与初步应用 被引量:1
6
作者 王卓 +3 位作者 赵雄 马玉媛 赵媛媛 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期179-183,共5页
目的 建立水痘-带状疱疹病毒(VZV)的快速微量中和试验筛查技术,用于高免原料血浆的筛选和VZV特异性免疫球蛋白(VZIG)的制备。方法 参考美国FDA批准的VZIG制品,设立原料血浆筛选滴度的下限;通过病毒滴度优化,设立快速微量中和试验筛... 目的 建立水痘-带状疱疹病毒(VZV)的快速微量中和试验筛查技术,用于高免原料血浆的筛选和VZV特异性免疫球蛋白(VZIG)的制备。方法 参考美国FDA批准的VZIG制品,设立原料血浆筛选滴度的下限;通过病毒滴度优化,设立快速微量中和试验筛查体系中的病毒使用滴度;建立筛选体系并引入VZIG国际标准品作为质量控制,对1∶2~1∶256倍比稀释的各滴度的单人份和混合原料血浆进行测定,同时利用抗VZV中和抗体ELISA检测试剂盒Vacc Zyme复核快速微量中和筛选结果,对其灵敏度进行分析。结果快速微量中和筛选试验中原料血浆的最低筛选下限为1∶16(VZV中和抗体滴度不低于0.4 U/ml);筛选体系病毒使用滴度为1500 PFU/ml;20份单采血浆中有8人份的滴度≥1∶16,混合血浆中无符合筛选标准的样本;ELISA的复核结果与快速微量中和试验呈良好的直线关系(r=0.895 24,P〈0.0001)。结论 快速微量中和试验的灵敏性、通量和可操作性等,适于VZV高免原料血浆的筛选,解决了VZIG制备中原料血浆筛选的关键技术问题。 展开更多
关键词 水痘-带状疱疹病毒 免疫球蛋白类 快速微量中和试验 血浆
发色底物法在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶的活性 被引量:2
7
作者 张晋超 赵雄 +3 位作者 尹惠琼 王延琳 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期189-192,共4页
目的 优化发色底物法,使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶(AAT)的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法 采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响;计算初速度并确定被底物饱和的最大酶浓度... 目的 优化发色底物法,使其在酶促反应初速度内测定α1抗胰蛋白酶(AAT)的活性并用于血浆蛋白纯化过程中各样品活性的检测。方法 采用酶标仪动态监测模式观察酶浓度和反应时间对酶促反应的影响;计算初速度并确定被底物饱和的最大酶浓度。将AAT与胰蛋白酶孵育,剩余靶酶和底物作用产生的光密度可反映AAT的活性。通过△D与AAT标准品活性进行拟合建立标准曲线,测定相关样品的活性,进行精密度和准确度验证。结果 胰蛋白酶浓度为0.0625 mg/ml,20 min内酶促反应处于初速度内。AAT标准曲线范围为200~1200 IU/ml,r〉0.99。该法测定CohnⅣ、前处理液、洗脱峰样品中AAT的活性分别为(720.59±18.63)、(601.84±19.18)、(568.09±24.83)IU/ml。每个样品之间的RSD〈10%,加样回收率均在90%~110%。结论 发色底物法经优化后,准确度和精密度大幅度提高,更适于实验室制备AAT或不同生产阶段样品的活性检测。 展开更多
关键词 发色底物法 酶促反应初速度 Α1抗胰蛋白酶 活性测定
α2-巨球蛋白活性检测方法的建立与优化 被引量:2
8
作者 皇甫超济 +3 位作者 马玉媛 王延琳 赵雄 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期193-195,共3页
目的 建立α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2-M)活性检测方法,检测Cohn组分Ⅳ中α2-M的活性。方法 α2-M可与胰蛋白酶相互作用形成"α2-M-胰蛋白酶复合物",利用酶标仪检测出"α2-M-胰蛋白酶复合物"与小分子底物Na-苯甲酰-DL-精... 目的 建立α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,α2-M)活性检测方法,检测Cohn组分Ⅳ中α2-M的活性。方法 α2-M可与胰蛋白酶相互作用形成"α2-M-胰蛋白酶复合物",利用酶标仪检测出"α2-M-胰蛋白酶复合物"与小分子底物Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐(Na-benzoyl-DL-arginine 4-nitroanilide hydrochloride,BAPNA)显色反应后的光密度值(410 nm),根据建立的血浆α2-M活性标准曲线,定量计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2-M的活性。结果 通过对实验体系中几个关键实验条件进行优化,建立了血浆α2-M活性标准曲线,并计算出Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2-M活性的平均值为1.578 PU/ml。结论 以正常人混合血浆作为参考标准品,用发色底物法检测Cohn组分Ⅳ浓缩液中α2-M的活性,方法简便易行,为α2-M制备过程中活性测定提供了实验基础。 展开更多
关键词 Α2-巨球蛋白 Cohn组分Ⅳ 胰蛋白酶 胰蛋白酶抑制剂 BAPNA
加速试验预测纤维蛋白止血贴稳定性
9
作者 赵雄 章纳 +4 位作者 马玉媛 贾俊婷 赵媛媛 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期196-198,共3页
目的 通过加速试验推算纤维蛋白止血贴(FHP)的保存期。方法 根据多点等温稳定性原理,温度选择70,80和90℃,将FHP样品放入不同温度培养箱中(70、80和90℃),在不同时间点(70℃取样时间为1、3、9、10、12、13、20、25、29、32 d;80℃... 目的 通过加速试验推算纤维蛋白止血贴(FHP)的保存期。方法 根据多点等温稳定性原理,温度选择70,80和90℃,将FHP样品放入不同温度培养箱中(70、80和90℃),在不同时间点(70℃取样时间为1、3、9、10、12、13、20、25、29、32 d;80℃取样时间为1、3、13、15、16、17 d;90℃取样时间为1、2、4 d)取样测定其活性,根据活性与对应时间建立FHP的模拟一级热降解曲线,得出不同温度下FHP的热降解速度,再分别建立FHP热降解速度曲线和FHP贮存时间曲线,以此推算出FHP在4、25和37℃的保存期。结果 FHP在70、80和90℃时的热降解速度分别为0.0148、0.0247、0.1057,热降解速度曲线和FHP贮存时间曲线分别为y=-0.0399x+4.445和y=-1.154x-0.376,据此推算出FHP在4、25和37℃的保存期分别为5734、958和345 d。结论 FHP在25℃条件下可以保存〉2年。 展开更多
关键词 纤维蛋白止血贴 加速试验 稳定性
人血浆凝血因子Ⅷ柱纯化前处理方法的比较
10
作者 王方 +2 位作者 赵雄 余蓉 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期199-202,共4页
目的 对人血浆凝血因子Ⅷ(coagulation factorⅧ,FⅧ)制备过程中4种柱纯化前处理方法进行比较并分析其优缺点,为血源FⅧ的纯化制备提供借鉴与参考。方法 冷沉淀经Tris溶解后的上清,分别用甘氨酸沉淀法、PEG沉淀法、酸沉淀法和氢氧化... 目的 对人血浆凝血因子Ⅷ(coagulation factorⅧ,FⅧ)制备过程中4种柱纯化前处理方法进行比较并分析其优缺点,为血源FⅧ的纯化制备提供借鉴与参考。方法 冷沉淀经Tris溶解后的上清,分别用甘氨酸沉淀法、PEG沉淀法、酸沉淀法和氢氧化铝凝胶吸附法处理;用活化部分凝血活酶(APTT)法测定样品上清中FⅧ活性,计算总活性回收率和样品的比活性,用非还原性SDS-PAGE电泳比较去除杂蛋白的效果。结果 4种处理方法中,甘氨酸沉淀法总活性回收率最高[(94.00±7.60)%],其次是酸性沉淀法[(89.47±2.60)%]、PEG沉淀法[(80.92±9.67)%],氢氧化铝吸附法的总活性回收率最低[(78.65±7.52)%];甘氨酸沉淀法与PEG沉淀法去除杂蛋白的效果优于酸性沉淀法和氢氧化铝吸附法;经4种不同方法处理后,甘氨酸沉淀法所得样品中FⅧ比活最高[(0.6856±0.1258)IU/mg],其次是PEG沉淀法[(0.5773±0.0787)IU/mg]、酸性沉淀法[(0.3885±0.0301)IU/mg],氢氧化铝吸附法所得样品比活最低[(0.2879±0.0472)IU/mg]。结论 在上述方法中,甘氨酸沉淀法和PEG沉淀法的总体效果较佳,且因后者操作更加简便、快捷,在实际生产过程中采用PEG沉淀法较为合适。 展开更多
关键词 人凝血因子Ⅷ 冷沉淀 柱纯化前处理
人凝血因子Ⅶ重组腺病毒载体的构建及鉴定
11
作者 揭飞龙 +4 位作者 王升尧 颜仁和 何悦 李红卫 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期203-205,共3页
目的 构建表达人凝血因子Ⅶ(FⅦ)的重组腺病毒载体,利用腺病毒载体介导哺乳动物细胞表达重组人凝血因子Ⅶ(rh FⅦ)。方法 利用Bam HⅠ和EcoRⅤ双酶切pc DNA 3.1-FⅦ载体得到FⅦ基因片段,补平后,插入经SalⅠ单酶切、补平并去磷酸化... 目的 构建表达人凝血因子Ⅶ(FⅦ)的重组腺病毒载体,利用腺病毒载体介导哺乳动物细胞表达重组人凝血因子Ⅶ(rh FⅦ)。方法 利用Bam HⅠ和EcoRⅤ双酶切pc DNA 3.1-FⅦ载体得到FⅦ基因片段,补平后,插入经SalⅠ单酶切、补平并去磷酸化处理的加强型绿色荧光蛋白(GFP)表达盒的p Ad Track-CMV腺病毒穿梭载体,构建p Ad Track-CMV-FⅦ,继而进行酶切和测序鉴定;经PmeⅠ单酶切线性化后,p Ad Track-CMV-FⅦ在BJ5183感受态菌内与p Ad Easy-1腺病毒骨架发生同源重组,构建重组表达FⅦ的腺病毒质粒p Ad-FⅦ;经PacⅠ酶切后的p AdFⅦ,使用PEI试剂转染293A细胞,包装表达FⅦ的重组腺病毒Ad-FⅦ;利用Western印迹检测重组腺病毒Ad-FⅦ介导293A细胞表达FⅦ的蛋白水平;通过观察EGFP的表达来判断质粒转染及病毒感染细胞的效率。结果 经酶切和测序鉴定,FⅦ克隆到p Ad Track-CMV腺病毒穿梭载体中,获得重组质粒p Ad Track-CMV-FⅦ;将其与p Ad Easy-1在细菌内发生同源重组,成功获得FⅦ重组腺病毒质粒p Ad-FⅦ;在293A细胞内包装重组腺病毒,Western印迹检测到FⅦ蛋白的表达。结论 成功构建重组腺病毒Ad-FⅦ,并实现了rh FⅦ在哺乳动物细胞中的表达,为利用哺乳动物细胞表达rh FⅦ的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 人凝血因子Ⅶ 重组腺病毒载体 哺乳动物细胞 蛋白表达
凝血因子与创伤止血 被引量:8
12
作者 王方 +1 位作者 赵雄 章金刚 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期211-215,共5页
凝血因子参与机体凝血过程的内、外源性途径,与机体抗凝系统相互协调,两者的动态平衡维持着体内血液正常的生理状态。该文从分子结构、理化特性、生理功能等方面对参与创伤止血相关的凝血因子进行了详述,同时,对其在创伤出血控制、凝血... 凝血因子参与机体凝血过程的内、外源性途径,与机体抗凝系统相互协调,两者的动态平衡维持着体内血液正常的生理状态。该文从分子结构、理化特性、生理功能等方面对参与创伤止血相关的凝血因子进行了详述,同时,对其在创伤出血控制、凝血方面发挥的重要作用及相关凝血因子类制品的研究进展、使用现状进行了综述,以期为凝血因子类药物的研发及应用提供借鉴。 展开更多
关键词 凝血因子 创伤 止血
四氯化碳诱导大鼠肝硬化腹水模型的改进与优化 被引量:6
13
作者 唐倩 王卓 +3 位作者 赵雄 章金刚 《国际药学研究杂志》 CAS 2012年第3期 220-224,共5页
目的应用四氯化碳(CCl4)联合苯巴比妥及乙醇的方法,以期建立稳定性、均一性、重复性良好且成模率较高的大鼠肝硬化腹水模型,为相关血浆蛋白制品的药效学评价等研究奠定基础。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组10只,腹... 目的应用四氯化碳(CCl4)联合苯巴比妥及乙醇的方法,以期建立稳定性、均一性、重复性良好且成模率较高的大鼠肝硬化腹水模型,为相关血浆蛋白制品的药效学评价等研究奠定基础。方法将90只雄性Wistar大鼠随机分为5组:正常对照组10只,腹腔注射橄榄油,正常饮水;模型组分为CCl4组、CCl4+苯巴比妥组、CCl4+乙醇组、CCl4+苯巴比妥+乙醇组,每组20只,给予不同饮用水处理,腹腔注射40%CCl4橄榄油混合液。各实验组腹腔注射剂量均为2 ml/kg,每周注射2次,共12周。建模过程中,定期测量体质量和腹围,采集静脉血监测肝功能指标和血浆胶体渗透压(COP)。建模结束后,随机处死各组大鼠,取肝右叶组织进行病理学鉴定。应用统计学方法对数据进行分析。结果各模型组在建模的第8~12周先后出现符合筛选标准的模型。其中,第8周时,CCl4+苯巴比妥+乙醇组大鼠开始出现腹水阳性体征,个别达到建模标准;第9周时,CCl4+苯巴比妥组和CCl4+乙醇组均有符合要求的模型产生;CCl4组至第10周时开始出现建模成功的大鼠。至12周建模结束时,与正常对照组相比,各模型组体质量、腹围、肝功能指标、COP等差异均具有统计学意义,以CCl4+苯巴比妥+乙醇组的差异最为明显。各模型组的成模率分别是65%、75%、75%和80%。镜下观察模型组大鼠的肝组织病理学切片,可见假小叶形成等典型的肝硬化形成特征。结论四氯化碳联合苯巴比妥与乙醇诱导大鼠肝硬化腹水动物模型较传统的方法可以有效提高实验动物的成模率,缩短建模周期。 展开更多
关键词 肝硬化 腹水 四氯化碳 大鼠 模型 动物
猪内源性反转录病毒囊膜基因env真核表达质粒的构建及鉴定
14
作者 叶小丽 +5 位作者 颜奇坡 郭逸 吴健敏 田克恭 马玉媛 章金刚 《生物技术通讯》 CAS 2011年第5期 683-686,共4页
目的:构建猪内源性反转录病毒(PERV)囊膜基因env的真核表达质粒pHCMV-env并加以鉴定,为研究PERV的细胞嗜性和宿主范围奠定基础。方法:用RT-PCR方法扩增五指山猪来源PERV的env基因,将其插入pGEM-T easy载体中,构建重组质粒pGEM-T-env... 目的:构建猪内源性反转录病毒(PERV)囊膜基因env的真核表达质粒pHCMV-env并加以鉴定,为研究PERV的细胞嗜性和宿主范围奠定基础。方法:用RT-PCR方法扩增五指山猪来源PERV的env基因,将其插入pGEM-T easy载体中,构建重组质粒pGEM-T-env,酶切鉴定正确后,将pGEM-T-env与pHCMV-VSV-G表达质粒同时经EcoRⅠ酶切消化后连接,构建重组表达质粒pHCMV-env,并进行酶切、测序鉴定;将鉴定正确的质粒pHCMV-env转染HEK293T细胞,采用PCR、RT-PCR检测转染后env基因的整合和转录情况。结果:扩增得到五指山猪来源PERV的env基因,并构建了pHCMV-env真核表达质粒,转染HEK293T细胞系后,该细胞系中有目的基因的整合和转录。结论:构建了真核表达质粒pHCMV-env,并且在HEK293T细胞中能够整合并转录,为研究PERV的细胞嗜性和宿主范围奠定了基础。 展开更多
关键词 猪内源性反转录病毒 ENV基因 真核表达
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血液制品的现状与展望 被引量:35
15
作者 王卓 赵雄 +1 位作者 章金刚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期730-746,共17页
血液制品特指血浆蛋白制品和相应的重组制品。根据临床应用的效能,血液制品可以分为白蛋白类、免疫球蛋白类、凝血因子类和微量蛋白制品等不同种类。血浆白蛋白制品是最早应用于战伤救治的血液制品,高纯白蛋白、重组白蛋白以及重组白蛋... 血液制品特指血浆蛋白制品和相应的重组制品。根据临床应用的效能,血液制品可以分为白蛋白类、免疫球蛋白类、凝血因子类和微量蛋白制品等不同种类。血浆白蛋白制品是最早应用于战伤救治的血液制品,高纯白蛋白、重组白蛋白以及重组白蛋白融合药物的研发和上市开创了血液制品的新局面。肌肉注射用免疫球蛋白因其制备工艺相对简单,使用方便,价格低廉且不良反应可以接受而一直在临床实践中应用;静脉注射用免疫球蛋白随着新的适应症不断发现,其应用范围越来越广;皮下注射用免疫球蛋白的出现使免疫球蛋白的使用更加方便,已经成为静脉注射用免疫球蛋白安全有效的替代品;针对特定病原体的特异性免疫球蛋白在临床上更具有不可替代的作用。凝血因子和重组凝血因子类制品主要用于相应的先天性遗传性缺陷患者,纤维蛋白原、因子Ⅶ、因子Ⅷ、von Willebrand因子复合物、因子Ⅸ和凝血酶原复合物、因子Ⅺ、因子ⅩⅢ等制品的应用取得了良好的治疗效果。因子Ⅶa和活化凝血酶原复合物对于治疗产生凝血因子抑制物的血友病病人具有十分明显的效果。纤维蛋白原类制品和凝血酶在外科止血方面发挥着重要的作用。多种微量血浆蛋白制品已经上市,如蛋白C、抗凝血酶、α1-抗胰蛋白酶和组织纤溶酶原激活剂等。部分微量血浆蛋白制品也在研发和临床试验过程中,如C1-抑制剂、补体系统Ⅰ因子、α2-巨球蛋白、血清胆碱酯酶、铜蓝蛋白以及纤维结合蛋白等。尽管多种重组血浆蛋白制品已经上市,血浆来源的制品仍将具有其不可替代的特殊地位,血浆蛋白新品种的研发仍是热点。目前,我国血液制品的研发与国外存在着较大的差距,我国血液制品企业面临着机遇与挑战。 展开更多
关键词 血液制品 血浆蛋白 重组血浆蛋白 白蛋白 免疫球蛋白 凝血因子
两种ELISA试剂盒对我国单采血浆中水痘-带状疱疹病毒中和抗体滴度的测定和比较 预览 被引量:2
16
作者 王卓 唐倩 +3 位作者 马玉媛 赵雄 章金刚 《中国医药生物技术》 CSCD 2011年第6期 405-409,共5页
目的采用两种不同的检测抗水痘一带状疱疹病毒(VZV)中和抗体间接ELISA法试剂盒,对我国单采血浆中vZv特异性免疫球蛋白(VZIG)的效价进行测定,比较两种试剂盒测定结果的相关性和血浆筛查的适用性,并分析利用国内单采血浆研发生产V... 目的采用两种不同的检测抗水痘一带状疱疹病毒(VZV)中和抗体间接ELISA法试剂盒,对我国单采血浆中vZv特异性免疫球蛋白(VZIG)的效价进行测定,比较两种试剂盒测定结果的相关性和血浆筛查的适用性,并分析利用国内单采血浆研发生产VZIG的可行性。方法随机选取182份单采血浆样品,100倍稀释后,使用Virion/Serion和VaccZyme/BindingSite两种商品试剂盒同时对样品进行测定,根据评估系统公式或曲线方程计算每份样品中VZIG的效价;采用Pearson乘积矩相关性方法对两种试剂盒的线性关系进行统计学分析。结果(1)VZIG高于10IU/ml的血浆样品数量为13份(7%,Vifion)和16份(9%,VaccZyme);②两种试剂盒检测结果之间的直线线性关系数R2为0.62(P〈0.0001),变异系数为4%;(3)Virion与VaccZyme的工作范围有不同,前者对于低效价(0.2—0.4IU/m1)样本的测定具有很好的灵敏度,而VaccZyme适用于高效价血浆样本(〉150IU/ml)的检测。结论Virion与VaccZyme结果具有一致性和相关性;两种试剂盒的工作范围略有差异,VaccZyme较Virion更适用于高效价VZIG原料血浆的检测,可用于普通献浆员单采血浆中VZV中和抗体的筛查。 展开更多
关键词 疱疹病毒3型 酶联免疫吸附测定 免疫球蛋白
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嗜人性猪内源性反转录病毒感染性克隆感染人胚肾细胞HEK293后Stathmin蛋白差异表达分析
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作者 颜奇坡 马玉媛 +5 位作者 叶小丽 郑霖 吴健敏 田克恭 章金刚 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期804-808,共5页
目的 分析嗜人性猪内源性反转录病毒(porcine endogenous retroviruses,PERV)感染的人源细胞中Stathmin蛋白的差异表达情况,探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的效应机制.方法 嗜人性PERV感染性克隆感染HEK293细胞,采用PCR、实时... 目的 分析嗜人性猪内源性反转录病毒(porcine endogenous retroviruses,PERV)感染的人源细胞中Stathmin蛋白的差异表达情况,探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的效应机制.方法 嗜人性PERV感染性克隆感染HEK293细胞,采用PCR、实时定量RT-PCR、免疫荧光分析确认PERV感染,利用实时定量RT-PCR和免疫印迹法分析Stathmin蛋白表达差异.结果 嗜人性PERV感染性克隆成功感染HEK293细胞,实时定量RT-PCR和免疫印迹法检测结果表明,PERV感染后Stathmin蛋白与对照相比表达上调.结论 嗜人性PERV感染HEK293细胞后Stathmin表达上调,该研究结果为深入研究嗜人性PERV与人源细胞的相互作用及PERV感染后的分子效应等提供了线索,也提示了PERV感染后可能会对细胞的生长、生理功能等造成影响,甚至存在潜在的致病性.对探索嗜人性PERV感染人源细胞后可能产生的效应以及猪→人异种移植的病毒安全性评价也具有重要意义. 展开更多
关键词 猪内源性反转录病毒 HEK293细胞 STATHMIN 差异表达
纤维蛋白止血敷料的免疫安全性研究
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作者 赵雄 曹晓涵 +6 位作者 马玉媛 冯晶晶 王卓 唐倩 尹惠琼 章金刚 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2010年第S1期112-113,共2页
关键词 可降解生物材料 牛胶原蛋白 止血材料 埋植 降解生物 生物相容性 大鼠 人纤维蛋白原 脾脏系数 肝脏系数
纤维蛋白止血敷料的生物相容性研究 被引量:9
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作者 赵雄 曹晓涵 +4 位作者 马玉媛 尹惠琼 刘明 章金刚 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期247-249,共3页
目的评价纤维蛋白止血敷料的生物相容性。方法对纤维蛋白止血敷料进行如下生物学检测:细胞毒性试验(MTT法)、急性全身毒性试验、皮肤刺激试验、皮内刺激试验和溶血试验,根据标准对实验数据进行分析和评估。结果纤维蛋白止血敷料的细... 目的评价纤维蛋白止血敷料的生物相容性。方法对纤维蛋白止血敷料进行如下生物学检测:细胞毒性试验(MTT法)、急性全身毒性试验、皮肤刺激试验、皮内刺激试验和溶血试验,根据标准对实验数据进行分析和评估。结果纤维蛋白止血敷料的细胞毒性分级0—1级;无急性全身毒性作用,无皮肤刺激反应、皮内刺激反应,无溶血性。结论纤维蛋白止血敷料具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 纤维蛋白止血敷料 生物相容性 细胞毒性试验 急性全身毒性试验 皮肤刺激试验 皮内刺激试验 溶血试验
纤维蛋白止血敷料的止血效果 被引量:9
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作者 赵雄 曹晓涵 +4 位作者 马玉媛 尹惠琼 刘明 章金刚 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期250-252,共3页
目的评价纤维蛋白止血敷料对股动脉切口和肝脏损伤出血模型的止血效果。方法制造大鼠股动脉切口出血模型和兔肝脏损伤出血模型,分别用纤维蛋白止血敷料和医用胶原蛋白海绵进行止血,记录止血时间和出血量。结果对大鼠股动脉切口模型,纤... 目的评价纤维蛋白止血敷料对股动脉切口和肝脏损伤出血模型的止血效果。方法制造大鼠股动脉切口出血模型和兔肝脏损伤出血模型,分别用纤维蛋白止血敷料和医用胶原蛋白海绵进行止血,记录止血时间和出血量。结果对大鼠股动脉切口模型,纤维蛋白止血敷料止血时间为(90.60±33.12)s,出血量为(0.51±0.26)ml,医用胶原蛋白海绵止血时间为(164.20±53.70)s,出血量为(1.04±0.50)ml,二者差异有统计学意义(P〈0.05);对兔肝损伤模型,纤维蛋白止血敷料止血时间为(48.67±8.14)s,出血量为(0.82±0.09)ml,医用胶原蛋白海绵止血时间为(107.67±6.66)s,出血量为(1.07±0.13)ml,二者差异有统计学意义(P〈0.01)。结论纤维蛋白止血敷料的止血效果优于医用胶原蛋白海绵,是一种良好的止血材料。 展开更多
关键词 纤维蛋白止血敷料 大鼠股动脉切口模型 兔肝脏损伤模型 止血
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