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低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNAs的生物信息学分析 预览
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作者 郝文革 孙逊沙 +4 位作者 洁莹 陈劲松 喻秋霞 李焱 《广州医药》 2019年第2期1-6,共6页
目的采用生物信息学方法预测低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNAs相对应的miRNA及其靶基因,并分析靶基因所参与的生物学过程和信号通路。方法用Arraystar公司的商业软件为环状RNAs预测其相对应的miRNAs,分别用targetScan7.1和mi... 目的采用生物信息学方法预测低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNAs相对应的miRNA及其靶基因,并分析靶基因所参与的生物学过程和信号通路。方法用Arraystar公司的商业软件为环状RNAs预测其相对应的miRNAs,分别用targetScan7.1和mirdbV5数据库预测miRNAs的靶基因,并取两个预测结果的合集,应用在线网站http://www.geneontology.org和http://www.genome.ad.jp/kegg对靶基因进行功能富集分析和信号通路富集分析。结果功能富集分析表明,circRNAs的靶基因主要涉及到细胞发育、细胞分化和细胞发育调控。东京基因和基因组百科全书信号通路富集分析表明肿瘤中转录失控和有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路最有意义,而且分析发现MAPK信号通路为核心通路。本研究表明,低氧预处理使得间充质干细胞中部分circRNAs的表达量发生差异性变化。结论低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNAs同低氧预处理间充质干细胞的生物学特性变化密切有关,为了解低氧预处理影响间充质干细胞特性发生变化的分子机制提供新思路。 展开更多
关键词 环状circRNA 低氧 间充质干细胞 生物信息学
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低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞环状RNA筛选 预览 被引量:1
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作者 孙逊沙 洁莹 +6 位作者 陈劲松 陆琰 喻秋霞 李茹 王丹 李焱 《中国医药导报》 CAS 2018年第18期9-11,共3页
目的探讨环状RNA在人胎盘绒毛膜间充质干细胞低氧预处理和常氧培养中表达谱的差异。方法利用芯片技术检测3例低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞及其相应对照的常氧培养细胞的环状RNA表达,分析两者差异表达的环状RNA及其结合mi RNA。... 目的探讨环状RNA在人胎盘绒毛膜间充质干细胞低氧预处理和常氧培养中表达谱的差异。方法利用芯片技术检测3例低氧预处理人胎盘绒毛膜间充质干细胞及其相应对照的常氧培养细胞的环状RNA表达,分析两者差异表达的环状RNA及其结合mi RNA。结果在检测的13 617条环状RNA中,有分析结果的环状RNA12 114条,低氧和常氧培养人胎盘间充质干细胞差异表达环状RNA共102条,其中低氧中表达上调的85条,下调的17条(倍数变化〉1.5倍且P〈0.05),而表达差异倍数变化大于2倍以上的环状RNA有27条,且均为上调表达。每个环状RNA预测到5个结合mi RNA。结论低氧预处理使得人胎盘绒毛膜间充质干细胞的环状RNA表达谱发生了显著变化,这些环状RNA可能和低氧预处理有关。 展开更多
关键词 低氧 人胎盘绒毛膜间充质干细胞 环状RNA 表达谱
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人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养的新方法 预览 被引量:1
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作者 唐书生 孙逊沙 +5 位作者 洁莹 陆琰 陈劲松 李发涛 唐婕 《生物医学工程研究》 2018年第2期229-232,共4页
建立一种简便、快捷的人胎盘绒毛膜间充质干细胞(human placental chorionic-derived mesenchymal stem cells,hpc MSCs)分离培养方法。用手持电动匀浆器处理人绒毛膜,经酶消化后接种培养,用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8测定细胞生... 建立一种简便、快捷的人胎盘绒毛膜间充质干细胞(human placental chorionic-derived mesenchymal stem cells,hpc MSCs)分离培养方法。用手持电动匀浆器处理人绒毛膜,经酶消化后接种培养,用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8测定细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标记,成脂、成骨诱导分化试剂盒鉴定细胞的分化潜能。获得的人胎盘绒毛膜间充质干细胞为成纤维细胞样细胞,呈平行排列或漩涡状生长,高表达CD73、CD105、CD90,而CD34、CD45、CD14、CD19、HLA-DR呈阴性,生长曲线为"S"型,经成骨或成脂诱导后,茜素红染色或油红O染色呈阳性。符合国际细胞治疗学会认可的间充质干细胞标准。建立了人胎盘绒毛膜间充质干细胞的分离培养新方法,结合了组织块法和酶消化法的优点,为绒毛膜间充质干细胞的应用提供基础。 展开更多
关键词 间充质干细胞 绒毛膜 细胞分离 细胞培养 方法
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立足听说读写凸显语用教学 预览 被引量:2
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作者 《福建基础教育研究》 2018年第3期49-50,共2页
《义务教育语文课程标准(2011年版)》明确提出:“语文课程是一门学习语言文字运用的综合性、实践性的课程”,说明语文教学最终指向“学习运用语言文字”。在阅读课堂中,教师要立足听说读写,关注言语表达,凸显语用教学,提高语言文字运用... 《义务教育语文课程标准(2011年版)》明确提出:“语文课程是一门学习语言文字运用的综合性、实践性的课程”,说明语文教学最终指向“学习运用语言文字”。在阅读课堂中,教师要立足听说读写,关注言语表达,凸显语用教学,提高语言文字运用的实效。从朗读涵咏,感受语用;揣摩写法,习得语用;随文练笔,训练语用;个性习作,落实语用四个方面进行教学实践,使语用真正成为语文课上的靓丽风景,推动学生语文素养的整体发展。 展开更多
关键词 语用 朗读 习法 练笔 创作
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改良原代培养方法提高人胎盘绒毛膜间充质干细胞的产量 被引量:2
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作者 唐国一 洁莹 +9 位作者 陆琰 陈劲松 李发涛 唐婕 刘东 梁绮华 李焱 汤雪薇 谢闺娥 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2017年第3期183-187,I0004共6页
目的建立获得大量P0代人胎盘绒毛膜间充质干细胞(hpcMSCs)培养方法。方法从胎盘绒毛膜分离出hpcMSCs,经初次培养和再次培养7d后,将原培养瓶中培养基、未贴壁组织和冲洗生理盐水离心后分别进行再次培养和第3次培养。用倒置显微镜观... 目的建立获得大量P0代人胎盘绒毛膜间充质干细胞(hpcMSCs)培养方法。方法从胎盘绒毛膜分离出hpcMSCs,经初次培养和再次培养7d后,将原培养瓶中培养基、未贴壁组织和冲洗生理盐水离心后分别进行再次培养和第3次培养。用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8测定细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞表面标记,成脂、成骨诱导分化试剂盒鉴定细胞的分化潜能。结果获得的hpcMSCs均为成纤维细胞样贴壁细胞,每例胎盘获得(25.54±3.38)×10^个P0代细胞,初次培养、再次培养和第3次培养获得的细胞数分别为(11.73±2.09)×10^6、(11.12±1.42)×10^6和(2.69±0.71)×10^6,培养时间分别为(12.00±0.64)d、(8.87±0.63)d和(12.33±0.80)d。再次培养时间和获得细胞数同初次培养、第3次培养差异均有统计学意义(均P〈0.05),初次培养和第3次培养的时间差异无统计学意义(P〉0.05),但第3次培养有时间延迟的趋势。3次培养的每培养瓶获得细胞数分别为(1.12±0.15)×10^6、(2.10±0.16)×10^6和(1.04±0.16)×10^6,再次培养获得细胞数同初次培养、第3次培养差异均有统计学意义(均P〈0.05),初次培养和第3次培养获得细胞数差异无统计学意义(P〉0.05),但第3次培养有细胞数量减少的趋势。3次培养的细胞生长曲线和表面标记的表达率无差异,成骨、成脂诱导分化检测均呈阳性。结论一份绒毛膜标本,通过3次培养,获得的P0代hpcMSCs细胞数量比初次培养翻倍,本方法可为再生医学提供足够的种子细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 绒毛膜 细胞培养
人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养:组织块法的优化 预览 被引量:1
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作者 金宇林 洁莹 +9 位作者 陆琰 陈劲松 李发涛 唐婕 刘东 梁绮华 李焱 汤雪薇 谢闺娥 《中国组织工程研究》 北大核心 2017年第21期3388-3393,共6页
背景:关于人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法的研究很多,但是如何简便、快捷获得大量原代培养间充质干细胞的问题尚未解决。目的:探讨优化人胎盘绒毛膜间充质干细胞体外分离培养组织块法的最佳方法。方法:无菌条件下,取正常足月... 背景:关于人胎盘绒毛膜间充质干细胞分离培养方法的研究很多,但是如何简便、快捷获得大量原代培养间充质干细胞的问题尚未解决。目的:探讨优化人胎盘绒毛膜间充质干细胞体外分离培养组织块法的最佳方法。方法:无菌条件下,取正常足月剖宫产胎盘绒毛膜,用匀浆器处理组织块,采用组织块法贴壁分离培养人胎盘绒毛膜间充质干细胞,经初次培养的组织块进行再次接种培养。结果与结论:用电动匀浆器处理人胎盘绒毛膜省时省力,组织分散度和去除红细胞效果好。初次培养和再次培养获得细胞的平均时间分别为(17.73±1.14)d和(10.03±1.30)d。每个Φ100 mm培养皿获得的原代细胞分别为(6.97±0.98)×10~5个和(13.82±1.44)×10~5个。获得的贴壁细胞呈典型的成纤维细胞形态,呈平行或漩涡状生长,高表达CD90、CD73、CD105,而CD45、CD34、CD14、CD19、HLA-DR为阴性。细胞可向成骨、成脂方向诱导分化。结果表明优化的方法能够简便、快捷地处理人胎盘绒毛膜组织,获得大量的原代间充质干细胞。 展开更多
关键词 胎盘 绒毛膜 间质干细胞 细胞培养技术 组织工程 干细胞 培养 间充质干细胞 细胞培养 组织块法 优化 匀浆器 国家自然科学基金
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6.0GyX射线辐照所致BALB/c小鼠造血系统损伤的动态检测 预览 被引量:3
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作者 金字林 洁莹 +4 位作者 陆琰 陈劲松 李发涛 谢闺娥 《中国医药导报》 CAS 2017年第13期13-16,共4页
目的观察6.0GyX射线辐照对BALB/c小鼠造血系统的影响。方法将80只BALB/c小鼠随机分为对照组和辐照组,每组各40只。用直线加速器x射线对辐照组BALB/c小鼠进行一次性全身6.0GyX射线照射。照射后,每天记录小鼠体重和状况。辐照前和... 目的观察6.0GyX射线辐照对BALB/c小鼠造血系统的影响。方法将80只BALB/c小鼠随机分为对照组和辐照组,每组各40只。用直线加速器x射线对辐照组BALB/c小鼠进行一次性全身6.0GyX射线照射。照射后,每天记录小鼠体重和状况。辐照前和辐照后1、3、5、7、14、21、28d检测小鼠外周血血象和骨髓有核细胞数的变化。结果与对照组相比,辐照组小鼠辐照后体重下降(P〈0.05),6d后缓慢上升;外周血象中白细胞、红细胞、血小板和血红蛋白含量均下降(P〈O.05),分别于照射后5、14、14、14d下降至最低值,然后回升:骨髓有核细胞数急剧下降(P〈0.05),于照射后5d下降至最低值,而后逐渐上升。结论6.0GyX射线辐照可引起BALB/c小鼠造血系统损伤,其机体有一定的自我修复机制。 展开更多
关键词 X射线 BALB/C小鼠 外周血 骨髓有核细胞
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妊娠期碘营养状态与甲状腺功能的关系研究 预览 被引量:3
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作者 赵霞 唐婕 +4 位作者 邱先桃 梁绮华 戴妙灵 黄永兰 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第11期1490-1492,共3页
目的了解妊娠期碘营养状态,及其与甲状腺功能的关系。方法随机选择于2016年6-10月接受妊娠期检查的孕妇295例,采用化学发光法检测血清游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平,采用碘催化砷铈反... 目的了解妊娠期碘营养状态,及其与甲状腺功能的关系。方法随机选择于2016年6-10月接受妊娠期检查的孕妇295例,采用化学发光法检测血清游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)水平,采用碘催化砷铈反应检测尿碘水平。结果 295例孕妇尿碘水平中位数为174.90μg/L。碘缺乏和碘过量孕妇分别占40.00%和7.12%。与碘适量孕妇相比,碘缺乏及碘过量孕妇TPOAb阳性率和甲状腺疾病发生率均显著升高(P〈0.05)。与碘适量孕妇相比,碘过量孕妇TSH和FT4水平明显升高(P〈0.05)。结论妊娠期碘不足或碘过量较为常见,维持适量的尿碘水平对预防甲状腺功能异常十分重要。 展开更多
关键词 尿碘 甲状腺功能 甲状腺过氧化物酶抗体 妊娠
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优化细胞因子诱导胎盘源间充质干细胞向胰岛β样细胞分化的实验研究
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作者 陆琰 王娟 +1 位作者 张洹 《热带医学杂志》 CAS 2017年第8期1000-1003,1011,F0004共6页
目的优化多种细胞因子联合诱导人胎盘源间充质干细胞分化为胰岛B样细胞的实验条件。方法从胎盘中分离、扩增间充质干细胞;扩增后的细胞采用激活素A、表皮生长因子(EGF)等多种细胞因子联合诱导;在诱导过程中运用消化重悬、调节葡萄... 目的优化多种细胞因子联合诱导人胎盘源间充质干细胞分化为胰岛B样细胞的实验条件。方法从胎盘中分离、扩增间充质干细胞;扩增后的细胞采用激活素A、表皮生长因子(EGF)等多种细胞因子联合诱导;在诱导过程中运用消化重悬、调节葡萄糖浓度等方法优化诱导方案,促进细胞形成胰岛样细胞团,向胰岛B样细胞的分化;比较不同诱导条件下,诱导后的细胞在胰岛素、C肽分泌及胰岛素释放实验中的差异,筛选出最佳方案。结果经诱导后的细胞,免疫荧光染色及免疫细胞化学染色均能检测出PDX-1及胰岛素表达;优化方案3诱导后的细胞不仅胰岛素分泌量明显提高至(222.00±38.00)mU/L,还能分泌C肽至(0.45±0.22)ng/mL,而且对胰岛素释放实验敏感,胰岛素刺激释放指数为(5.93±0.79)。结论经多种细胞因子联合诱导后,人胎盘源间充质干细胞可分化为胰岛β样细胞,胰岛样细胞团的形成有助于胰岛B样细胞的分化发育。 展开更多
关键词 胎盘 间充质干细胞 分化 胰岛 糖尿病
一种初步快速甄别总肠道病毒的基因分型方法 预览
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作者 欧志英 +4 位作者 尹应先 李丽霞 周荣 徐翼 龚四堂 《分子诊断与治疗杂志》 2016年第4期231-236,264共7页
目的建立并验证总肠道病毒5′-非编码区(5′-non coding region,5′-NCR)PCR扩增测序并在NCBI数据库比对进行生物信息分析的方法,为手足口病的早期快速诊断提供敏感、高效的总肠道病毒分子分型检测方法。方法收集165例临床检测阳性的... 目的建立并验证总肠道病毒5′-非编码区(5′-non coding region,5′-NCR)PCR扩增测序并在NCBI数据库比对进行生物信息分析的方法,为手足口病的早期快速诊断提供敏感、高效的总肠道病毒分子分型检测方法。方法收集165例临床检测阳性的标本,提取总RNA扩增人肠道病毒A、B、C和D型5′端非编码区用于总肠道病毒初步基因分型,PCR产物测序并在Genbank中进行BLAST分析。结果成功从临床咽拭子标本中扩增了5′-NCR用于基因分型。165例总肠道病毒阳性标本中鉴定出12种肠道病毒类型,有77例人肠道病毒(enterovirus type 71,EV-71),37例人柯萨奇病毒(coxsackievirus,CV)CV-A16,31例CV-A4,20例其它型别。结论 5′-NCR PCR测序是总肠道病毒基因分型和监测的敏感、简单、早期、快速的检测方法。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒 分子流行病学 分子分型
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广州地区手足口病爆发流行的分子流行病学和气象学研究(英文) 被引量:6
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作者 欧志英 尹应先 +4 位作者 李丽霞 周荣 徐翼 龚四堂 《热带医学杂志》 CAS 2016年第8期971-975,1082共6页
目的手足口病是2~5岁儿童常见的感染性疾病,近年来在亚太地区多次爆发流行,死亡率较高,本研究的目的是分析2008年广州地区爆发流行的手足口病的病毒分子流行病学及其与气象变量之间的关系。方法从互联网收集气象资料,收集466例疑似手足... 目的手足口病是2~5岁儿童常见的感染性疾病,近年来在亚太地区多次爆发流行,死亡率较高,本研究的目的是分析2008年广州地区爆发流行的手足口病的病毒分子流行病学及其与气象变量之间的关系。方法从互联网收集气象资料,收集466例疑似手足口病患儿的咽拭子标本,扩增人肠道病毒5′端非编码区,PCR产物测序并在Genbank中BLAST分析,分析肠道病毒基因型。结果成功从临床咽拭子标本中扩增了5′-NCR用于基因分型。从466例临床标本中扩增出165例阳性标本,获得12种肠道病毒类型:77例(46.67%)EV-71,37例(22.42%)CVA16,31例(18.79%)CV-A4,20例其它型别。EV-71和CV-A16是本次流行的主要病原。手足口病总发病率与CVA16和EV-71显著相关。手足口病发病率与疾病症状出现前7天的最高气温(P=0.00)、平均温度(P=0.001)和平均湿度(P=0.017)显著相关。结论 5'-NCR测序是手足口病病原体基因分型和监测的敏感、简单、早期、快速的检测方法,EV-71和CV-A16是本次手足口病爆发的重要肠道病毒。气象变量包括最高温度、平均气温、相对湿度明显与手足口病发病率相关,在时间上滞后一周,这可作为手足口病暴发监测的潜在指标指导卫生决策。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒 分子流行病学 5′-非编码区 流行性疾病
脐带血血浆分离培养脐带间充质干细胞及体外扩增人脐血CD34~+细胞的研究 预览 被引量:2
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作者 洁莹 陆琰 +3 位作者 陈劲松 汤雪薇 李焱 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1112-1119,共8页
目的:探讨以脐带血血浆替代胎牛血清体外分离培养脐带间充质干细胞(UCMSC)的可行性,并观察其作为滋养层细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的支持作用。方法:收集符合广州脐血库供者合格筛选标准的脐带血,在脐带血干细胞制备过程中去除的血浆... 目的:探讨以脐带血血浆替代胎牛血清体外分离培养脐带间充质干细胞(UCMSC)的可行性,并观察其作为滋养层细胞对脐血CD34+细胞体外扩增的支持作用。方法:收集符合广州脐血库供者合格筛选标准的脐带血,在脐带血干细胞制备过程中去除的血浆,经病原学及微生物检测合格,多份混合用于细胞培养。采用酶消化法从健康足月分娩新生儿的脐带组织分离获得UCMSC,将其分为3组。培养第1和第2组以DMEM/F12为基础培养液,分别添加胎牛血清(FBS)和混合脐带血血浆(UCP),第3组为商品化无血清培养液(Stem ProM SC SFM CTSTM)。经培养扩增后,采用流式细胞仪检测细胞免疫表型,并进行MSC成骨、成脂分化鉴定。取冻存复苏后的3组细胞,标记为UCM SCFBS、UCMSCUCP及UCMSCSFM,分别建立滋养层。应用免疫磁珠分选系统(MACS)分选人脐带血CD34+细胞,在添加造血因子组合(Stem SpanCC100)的CD34+无血清培养液(Stem Pro-34SFM)中培养,并根据滋养层的不同,分为4组:A组CD34+细胞(CD34+cells)为空白对照组;B组为FBS滋养层组(UCM SCFBS+CD34+cells),C组为UCP滋养层组(UCM SCUCP+CD34+cells),D组为SF滋养层组(UCM SCSFM+CD34+cells)。于培养第0天和第7天计数各组的有核细胞数(NC)、流式细胞仪检测CD34+比例,并进行造血祖细胞集落培养,评估扩增效率。结果:在3种培养体系下的UCMSC均呈现典型的梭形漩涡状生长,MSC表面标记的表达谱系基本无差异,均具有向成脂、成骨分化的能力,但在UCP培养条件下细胞的扩增能力显著高于其他2组(P<0.05)。经过7 d与脐带血CD34+细胞的共培养,虽然4组的CD34+细胞比例均下降,但NC及CD34+细胞数均得到显著扩增,其中UCMSCUCP滋养层组和UCMSCSFM滋养层组均大于UCMSCFBS滋养层组和空白对照组(P<0.05)。与第0天的集落形成能力比较,UCM SCUCP滋养层组与UCMSCSFM滋养层组的集落扩增倍数无差异,但前者的扩增倍数高于UCMSCFBS及空白� 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 脐带血血浆 CD34+细胞 体外扩增
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母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血的影响
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作者 谢闺娥 +5 位作者 洁莹 陈劲松 陆琰 李焱 汤雪薇 廖灿 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第30期5901-5906,5913共7页
目的:探讨母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血(high-quality cord blood units,HQCBUs)的影响。方法:用logistical回归模型回顾性分析广州脐血库(Guangzhou Cord Blood Bank,GZCBB)库存的4613例脐血的母亲、新生儿和收集相... 目的:探讨母亲、新生儿和收集相关因素对高质量脐血(high-quality cord blood units,HQCBUs)的影响。方法:用logistical回归模型回顾性分析广州脐血库(Guangzhou Cord Blood Bank,GZCBB)库存的4613例脐血的母亲、新生儿和收集相关因素,所有脐血均严格按照操作规程进行供者选择、采集、运送、处理、检测和冻存。结果:影响HQCBUs的因素包括分娩时顺产、孕周大于37周、新生儿为女性、较重的体重(〉3500 g)、脐血体积大(〉80 m L)、运送耗时短(〈12 hr)。α-地贫携带者对处理后细胞数(postprocessing total nucleated cell count,p-TNCC)〉1.25×109和CD34+细胞数〉6.01×106有影响,而羊水粪染和母亲分娩年龄小于25岁分别对p-TNCC〉1.25×109和细胞集落形成单位(colony forming units,CFUs)〉23.24×105有影响。结论:我们鉴定出影响HQCBUs的因素,为GZCBB更新脐血采集标准、优化处理程序提供参考依据,有助于提高HQCBUs的数量和比例及有效利用脐血库的资源。 展开更多
关键词 高质量脐血 脐血库 集落形成单位
胎盘间充质干细胞脐血血浆培养体系的建立 预览 被引量:1
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作者 陆琰 洁莹 +3 位作者 陈劲松 汤雪薇 李焱 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第15期2312-2315,共4页
目的建立并优化适用于临床级胎盘源间充质干细胞的脐血血浆体外培养体系。方法采用酶消化法分离胎盘间充质干细胞,分为胎牛血清组(10%胎牛血清+DMEM/F12)、脐血血浆组(10%脐血血浆+DMEM/F12+1 000 IU/L肝素)和无血清组(Stem Pro... 目的建立并优化适用于临床级胎盘源间充质干细胞的脐血血浆体外培养体系。方法采用酶消化法分离胎盘间充质干细胞,分为胎牛血清组(10%胎牛血清+DMEM/F12)、脐血血浆组(10%脐血血浆+DMEM/F12+1 000 IU/L肝素)和无血清组(Stem ProMSC SFM CTSTM);经培养扩增后,采用流式细胞术检测间充质干细胞表面标志,并诱导细胞向成脂肪、成骨分化,比较3组培养扩增所得间充质干细胞的差异。结果 3组细胞的增殖速度并无明显差异;脐血血浆组、胎牛血清组及无血清组培养扩增所得的细胞均表达CD90、CD29、CD44、CD49e、CD105、CD73,不表达CD34、HLA-DR、CD45;而且均具有向成脂、成骨分化的能力。结论脐血血浆可取代胎牛血清或无血清培养基用于胎盘间充质干细胞的培养扩增,以此获取可供临床应用的胎盘间充质干细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐血血浆 细胞培养
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广州市育龄妇女TORCH筛查回顾性分析 被引量:4
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作者 唐婕 潘敏 《热带医学杂志》 CAS 2015年第6期850-853,共4页
目的了解广州市育龄妇女外周血中的弓形体(TOX)、风疹病毒(RUB)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSV-Ⅰ+Ⅱ)及细小病毒(B19)抗体(合称为TORCH抗体)感染现状,为本地区的妇女保健及优生优育工作提供依据。方法选取2... 目的了解广州市育龄妇女外周血中的弓形体(TOX)、风疹病毒(RUB)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSV-Ⅰ+Ⅱ)及细小病毒(B19)抗体(合称为TORCH抗体)感染现状,为本地区的妇女保健及优生优育工作提供依据。方法选取2013年在广州市妇女儿童医疗中心进行孕前检查及早孕期妇女,应用ELISA方法检测外周血中的TORCH-Ig M和TORCH-Ig G,并对筛查阳性具有产前诊断指针的孕妇抽取胎血进行相关检测。结果TORCH-Ig M抗体总阳性率达1.94%,其中以人微小病毒B19-Ig M感染率最高,为3.71%。调查发现秋季为风疹病毒感染的相对高发期,其余病毒感染无明显季节性。TORCH-Ig G抗体总阳性率达60.01%,其中以CMV-Ig G的阳性率最高,达97.21%。胎血筛查中,TOX-Ig M、RUB-Ig M、CMV-Ig M、B19-Ig M均可筛查出阳性例数。结论广州市孕前和孕早期妇女TORCH感染率较高,积极进行监测以预防先天性TORCH感染非常必要。 展开更多
关键词 产前诊断 TORCH 感染 育龄妇女
新生儿高胆红素血症 TORCH 感染情况分析 预览 被引量:1
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作者 苏洁玲 许遵鹏 +1 位作者 唐婕 《国际检验医学杂志》 CAS 2015年第15期2226-2227,共2页
目的:了解新生儿高胆红素血症T O RC H病毒感染的情况,探讨两者之间的相关性。方法选择2014年1~12月该院住院的644例高胆红素血症新生儿(新生儿高胆红素血症组),另选择同期住院的160例健康新生儿作为对照组,采用化学发光法和ELIS... 目的:了解新生儿高胆红素血症T O RC H病毒感染的情况,探讨两者之间的相关性。方法选择2014年1~12月该院住院的644例高胆红素血症新生儿(新生儿高胆红素血症组),另选择同期住院的160例健康新生儿作为对照组,采用化学发光法和ELISA法进行血清TORCH‐IgM抗体测定,观察两组感染的情况。结果644例新生儿高胆红素血症组中TORCH‐IgM抗体阳性58例,阳性率为9.0%,对照组160例中T O RC H‐Ig M抗体阳性0例,阳性率为0%,两组比较差异有统计学意义( P<0.05)。其中微小病毒B19感染率最高,阳性率为7.3%,CMV‐IgM 抗体阳性率为1.7%。结论 TORCH感染与新生儿高胆红素血症相关,是其重要原因之一,应在高胆红素血症新生儿中进行TORCH项目的实验室检查。 展开更多
关键词 新生儿高胆红素血症 感染 抗体
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稳定沉默动粒蛋白-H表达的人乳腺癌细胞株的构建
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作者 谢闺娥 汤红平 +6 位作者 刘岩丽 陈劲松 汤雪薇 洁莹 李焱 廖灿 《肿瘤研究与临床》 CAS 2014年第10期654-657,共4页
目的 构建人动粒蛋白-H(CENP-H) shRNA反转录病毒表达载体,获得稳定转染的人乳腺癌细胞株.方法 合成CENP-H基因干扰序列,定向插入反转录病毒表达载体pSUPE-Rretro-puro质粒并测序鉴定;干扰质粒经磷酸钙介导转染293FT细胞制备反转录病... 目的 构建人动粒蛋白-H(CENP-H) shRNA反转录病毒表达载体,获得稳定转染的人乳腺癌细胞株.方法 合成CENP-H基因干扰序列,定向插入反转录病毒表达载体pSUPE-Rretro-puro质粒并测序鉴定;干扰质粒经磷酸钙介导转染293FT细胞制备反转录病毒;对人乳腺癌MCF-7和MDA-MB-435细胞进行反转录病毒感染,嘌呤霉素筛选获得稳定转染的细胞株.Real-time PCR和Western blot分别检测稳定转染细胞株的CENP-H mRNA和蛋白的表达.结果 成功构建和筛选出靶向CENP-H基因的两对shRNA质粒表达载体.稳定转染细胞CENP-H mRNA表达显著下调,CENP-H的蛋白表达水平明显低于对照.结论 稳定沉默CENP-H表达的人乳腺癌细胞株的建立,为以CENP-H基因为靶点的人乳腺癌基因研究提供了实验基础. 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 动粒蛋白-H RNA干扰
广州市2000—2009年出生缺陷情况分析 预览 被引量:4
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作者 曾芳玲 王平 +2 位作者 邹兴文 于佳 《广州医药》 2014年第4期20-25,共6页
目的动态分析广州市出生缺陷发生情况,了解出生缺陷种类及主要出生缺陷的变化,为出生缺陷的预防和干预提供依据。方法开展以医院为基础的出生缺陷回顾性调查,统计分析广州市各医院2000年1月—2009年9月的出生缺陷资料,其中包含23间医院... 目的动态分析广州市出生缺陷发生情况,了解出生缺陷种类及主要出生缺陷的变化,为出生缺陷的预防和干预提供依据。方法开展以医院为基础的出生缺陷回顾性调查,统计分析广州市各医院2000年1月—2009年9月的出生缺陷资料,其中包含23间医院的连续监测资料。结果广州市产科质量报表显示2000—2009年全市出生缺陷发生率有逐年增加的趋势,其平均发生率为121.3/万,10年出生缺陷儿12153例,主要出生缺陷为:先天性心脏病、外耳畸形、总唇裂、多指(趾)、水肿胎等。结论应了解出生缺陷的影响因素,加大卫生知识宣教、加强孕前筛查及产前诊断,以预防和减少出生缺陷的发生。 展开更多
关键词 出生缺陷 发生率 动态分析
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人乳头状瘤病毒感染妇女的年龄及其亚型分析 被引量:12
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作者 李发涛 廖灿 +2 位作者 李焱 汤雪薇 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期4345-4347,共3页
目的分析广州地区人乳头状瘤病毒(HPV)感染阳性妇女的年龄及其亚型分布,为预防HPV感染及宫颈癌的发生提供依据。方法采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术进行HPV分型检测,根据芯片上HPV基因亚型分布图进行阳性或阴性及单重或多重... 目的分析广州地区人乳头状瘤病毒(HPV)感染阳性妇女的年龄及其亚型分布,为预防HPV感染及宫颈癌的发生提供依据。方法采用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术进行HPV分型检测,根据芯片上HPV基因亚型分布图进行阳性或阴性及单重或多重感染判断。结果4210例HPV阳性病例中,HPV感染年龄段分布前5位依次为26~30、21~25、31~35、36~40、41~45岁,分别占25.89%、20.07%、17.91%、13.63%、8.08%;感染率排在前10位的HPV亚型依次为HPV52、16、58、6、11、CP8304、53、68、18、33,分别占阳性病例数的25.44%、17.86%、13.14%、12.71%、9.86%、9.17%、9.05%、6.53%、5.99%、5.82%;其中,单一和多重感染率分别为70.14%、29.86%;随年龄的增长,HPV52、16、58感染率逐渐增加,HPV6、11亚型感染率逐渐下降。结论HPV感染阳性妇女主要集中在21~40岁年龄段,HPV52、16、58、6是最主要的感染亚型,HPV感染以单一亚型感染为主,不同年龄段HPV感染的优势亚型有所不同。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒 基因分型 年龄 流行病学调查
六色流式细胞术检测儿童急性B淋巴细胞白血病微小残留病变价值研究 被引量:1
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作者 刘光明 孙新 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2012年第12期931-934,共4页
目的利用六色流式细胞术(FCM)检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留病变(MRD),探讨传统用于临床危险度分级各因素与六色FCM检测MRD值间关系及化疗不同时间点MRD检测值间关系。方法研究对象为2010-7-15-2011-1-25在广州市妇女... 目的利用六色流式细胞术(FCM)检测急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)微小残留病变(MRD),探讨传统用于临床危险度分级各因素与六色FCM检测MRD值间关系及化疗不同时间点MRD检测值间关系。方法研究对象为2010-7-15-2011-1-25在广州市妇女儿童医疗中心初诊并接受正规化疗的25例B-ALL患儿。根据患儿初发时免疫分型结果,分别在诱导化疗第15、33天及大剂量MTX化疗前3个时间点进行MRD检测,每例患儿使用-组六色同型对照及根据初诊时免疫分型结果灵活调整的两组六色抗体组合进行检测。一组六色同型对照为IgGl-FITC/IgGl-PE/IgGl-PE-Cy7/IgGl-APC/IgGl-Percp/IgGl-APC-cy7;两组六色抗体组合为CD20-FITC/CD34-PE/CDl0-PE-Cy7/CD22-APCtCD45-Percp/CDl9-APC-cy7、CD7-FITC/CD5-PE/CDl3-PE-Cy7/CD33-APC/CD45-Percp/CDl9-APC-cy7或CD38-FITC/CD34-PE/CDl0-PE-Cy7/CD22-APC/CD45-Percp/CDl9-APC-cy7、CD7-F11、C/CDl5-PE/CD34-PE-Cy7/CD33-APC/CD45-Percp/CDl9-APC-cy7。分析各时间点MRD检测值与传统用于临床危险度分级各因素间关系及3个不同检测时间点MRD检测值间关系。结果化疗第15天使用六色FCM检出骨髓MRD阳性20例,P25为0.19%,P50为0.67%,P75为4_21%;第33天检出骨髓MRD阳性10例,P25为0.07%,P50为O.10%,P75为0-26%;大剂量MTX化疗前检出骨髓MRD阳性14例,P25为0.03%,P50为0.04%,P75为0.09%。结论在诱导化疗阶段、诱导化疗结束时MRD的阳性率与诱导化疗第15天相比有显著下降;大剂量MTX化疗前MRD阳性值与诱导化疗第15天和诱导化疗结束时相比,有随化疗时间延长逐步下降的趋势。按传统危险度分级的相关因素分别分组,各组在诱导化疗第15天、诱导化疗结束时和大剂量MTX化疗前MRD检出率均无明显差异。 展开更多
关键词 急性B淋巴细胞白血病 六色流式细胞术 微小残留病变
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