期刊文献+
共找到7篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达 被引量:1
1
作者 马健娟 何志旭 +3 位作者 舒莉萍 李莉 李燕 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期371-374,共4页
目的探讨HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的作用机制,从而为进一步研究其在造血发育中的功能奠定基础。方法提取斑马鱼总RNA,利用RT-PCR克隆得到HOXC4基因片段,将克隆得到的基因片段和载体pCS^2+用限制性内切酶BarnHI和Xho I... 目的探讨HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的作用机制,从而为进一步研究其在造血发育中的功能奠定基础。方法提取斑马鱼总RNA,利用RT-PCR克隆得到HOXC4基因片段,将克隆得到的基因片段和载体pCS^2+用限制性内切酶BarnHI和Xho I双酶切后,把基因片段插入pCS^2+中,重组质粒经双酶切及测序鉴定后,采用T3RNA聚合酶体外转录体系制备地高辛标记的HOXC4基因反义mRNA探针,然后行全胚胎原位杂交。结果构建HOXC4-pCS^2+重组质粒,获得地高辛标记的反义mRNA探针并且完成其在野生型斑马鱼中的全胚胎原位杂交,显示HoXC4基因在Tuebingen野生型斑马鱼神经系统高表达。结论得到HOXC4基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的基本表达情况,为进一步研究该基因在造血发育过程中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 斑马鱼 HOXC4基因 反义mRNA 原位杂交
野生型斑马鱼胚胎中hoxd3基因mRNA的表达谱 预览 被引量:3
2
作者 舒莉萍 何志旭 +3 位作者 马健娟 李涛 叶芝旭 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 69-74,共6页
目的:为探讨hoxd3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT-PCR扩增斑马鱼hoxd3... 目的:为探讨hoxd3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT-PCR扩增斑马鱼hoxd3基因片段,将得到的hoxd3基因片段和pCS2+质粒经EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切后插入pCS2+质粒中,挑选阳性克隆,通过双酶切、菌落PCR以及测序鉴定;将pCS2+-hoxd3重组子经EcoRⅠ酶切线性化,经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记的hoxd3基因的反义mRNA探针。用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交。结果:构建和鉴定了pCS2+-hoxd3重组质粒,经斑马鱼全胚胎原位杂交检测hoxd3基因的表达,发现在Tuebingen野生型斑马鱼受精后24 h~72 h胚胎的中脑后脑交界处以及后脑中可以观察到hoxd3基因的表达。结论:hoxd3基因在Tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育早期的神经系统高表达,未发现在血管生成区域的表达。 展开更多
关键词 寡核苷酸类 反义/遗传学 原位杂交 基因表达 斑马鱼 胚胎发育 遗传载体 质粒/遗传学 转染 内皮 血管/细胞学
在线阅读 免费下载
Pax5基因在野生型斑马鱼全胚胎发育早期的表达 被引量:1
3
作者 舒莉萍 +3 位作者 何志旭 马建娟 李涛 黄惠敏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 21-25,共5页
目的为了深入了解在胚胎发育过程中,尤其是在早期B淋巴细胞的生成和中脑的发育过程中pax5基因可能的作用及其机制,选择斑马鱼作为实验动物,构建野生型斑马鱼pC^2+-pax5重组质粒,并观察pax5基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达。方法提... 目的为了深入了解在胚胎发育过程中,尤其是在早期B淋巴细胞的生成和中脑的发育过程中pax5基因可能的作用及其机制,选择斑马鱼作为实验动物,构建野生型斑马鱼pC^2+-pax5重组质粒,并观察pax5基因在野生型斑马鱼胚胎中的表达。方法提取斑马鱼胚胎总RNA后经RT-PCR克隆斑马鱼pax5基因片段,将得到的pax5基因片段和pCS^2+质粒经EcoRⅠ、XbaⅠ双酶切后,在T4 DNA连接酶的作用下插入pCS^2+质粒中,通过对重组质粒进行双酶切、菌落PCR以及插入片段序列测定鉴定后,经T3RNA体外转录体系合成地高辛标记的pax5基因的反义mRNA探针。将得到的探针用全胚胎原位杂交技术检测pax5基因在斑马鱼早期发育过程中的表达。结果成功构建pCS^2+-pax5重组质粒并制备了pax5基因的反义mRNA探针,通过斑马鱼原位杂交技术,发现在斑马鱼受精后18-72小时(18-72 hpf)胚胎头部的小脑、中脑后脑交界处均可观察到pax5基因阳性杂交信号;在24-72hpf胚胎的耳蜗均可观察到pax5基因的阳性杂交信号,且随着时相的增长其表达逐渐增多;在18-48 hpf胚胎的脊索部位可见pax5基因的阳性杂交信号。结论明确了pax5基因在斑马鱼胚胎的脑部、脊索神经系统高表达,并首次证实其在耳蜗听神经的早期发育过程中有表达,可能对斑马鱼早期胚胎神经系统的发育起着某些至关重要的作用。 展开更多
关键词 斑马鱼 pCS2+载体 pax5基因 反义mRNA 原位杂交
珠江网河二维水动力数值计算研究 预览 被引量:5
4
作者 包芸 《水动力学研究与进展:A辑》 CSCD 北大核心 2005年第z1期 881-886,共6页
通过ECOMSED数学模型对珠江网河广州区域进行数值模拟计算.计算区域为老鸦岗、沙洛围、大石、黄埔水位站组成的闭合区域,采用贴体自适应网格技术.计算结果显示,水位、流速、流量计算值与观测值都吻合较好,结果令人满意.并应用到广州地... 通过ECOMSED数学模型对珠江网河广州区域进行数值模拟计算.计算区域为老鸦岗、沙洛围、大石、黄埔水位站组成的闭合区域,采用贴体自适应网格技术.计算结果显示,水位、流速、流量计算值与观测值都吻合较好,结果令人满意.并应用到广州地铁过江隧道建设的水文特征分析中. 展开更多
关键词 Ecomsed模式 珠江网河 水动力计算
在线阅读 下载PDF
野生型斑马鱼胚胎中hoxd3基因mRNA的表达谱 预览
5
作者 舒莉萍 何志旭 +3 位作者 马健娟 李涛 叶芝旭 《贵阳医学院学报》 CAS 2012年第5期579-579,共1页
目的:为探讨hoxcl3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT—PCR扩增斑马鱼h... 目的:为探讨hoxcl3基因在斑马鱼发育过程中与血管形成可能的作用机制,用hoxd3基因的反义mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交,观测hoxd3基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达情况。方法:提取斑马鱼胚胎总RNA,经RT—PCR扩增斑马鱼hoxd3基因片段, 展开更多
关键词 斑马鱼 基因MRNA 全胚胎 野生型 表达谱 胚胎发育过程 d3基因 RNA探针
在线阅读 下载PDF
cdh 5-mRNA在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达 预览
6
作者 吴西军 +5 位作者 刘庆 杨小燕 王念雪 王一慧 舒莉萍 何志旭 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第11期1241-1246,共6页
目的:探讨cdh 5-mRNA在野生型斑马鱼胚胎期发育过程中的表达模式。方法:收取tuebingen野生型斑马鱼多个发育时间节点的胚胎,提取其总RNA,体外逆转录后RT-PCR扩增cdh 5基因片段,将cdh 5基因片段插入pCS^2+质粒载体中,挑选阳性单克隆菌落... 目的:探讨cdh 5-mRNA在野生型斑马鱼胚胎期发育过程中的表达模式。方法:收取tuebingen野生型斑马鱼多个发育时间节点的胚胎,提取其总RNA,体外逆转录后RT-PCR扩增cdh 5基因片段,将cdh 5基因片段插入pCS^2+质粒载体中,挑选阳性单克隆菌落,通过双酶切、测序等方法鉴定pCS^2+-cdh 5重组质粒;重组质粒单酶切后用T3RNA体外转录体系制备地高辛标记的cdh 5基因的反义mRNA探针,对斑马鱼全胚胎进行原位杂交,显微镜下观察各发育节点胚胎cdh 5-mRNA杂交信号并拍照。结果:构建并鉴定了pCS^2+-cdh 5重组质粒,各发育节点胚胎经全胚胎原位杂交后发现在tuebingen野生型斑马鱼胚胎发育至3.7~12 hpf时cdh 5-mRNA呈低丰度泛在表达,18~36 hpf时在后脑及血管处表达、在造血系统高表达,48 hpf后仅在脑部和血管处低表达。结论:在野生型斑马鱼胚胎期发育过程中可以检测到cdh 5-mRNA在后脑和血管处有表达,并且在造血组织高表达。 展开更多
关键词 斑马鱼 胚胎发育 cdh 5基因 基因表达 遗传载体 全胚胎原位杂交
在线阅读 下载PDF
高表达hoxb 4转基因斑马鱼胚胎定向造血阶段cdh 5-mRNA的表达 预览
7
作者 吴西军 +5 位作者 刘庆 杨小燕 王念雪 王一慧 舒莉萍 何志旭 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第11期1247-1253,共7页
目的:探讨高表达hoxb 4转基因系斑马鱼胚胎定向造血发育中cdh 5-mRNA的表达。方法:实验分为野生型(WT)对照组、增强绿色荧光蛋白(EGFP)对照组及高表达hoxb 4实验组斑马鱼胚胎,收取定向造血阶段32、36、40、44、48 hpf的胚胎各30枚;将pCS... 目的:探讨高表达hoxb 4转基因系斑马鱼胚胎定向造血发育中cdh 5-mRNA的表达。方法:实验分为野生型(WT)对照组、增强绿色荧光蛋白(EGFP)对照组及高表达hoxb 4实验组斑马鱼胚胎,收取定向造血阶段32、36、40、44、48 hpf的胚胎各30枚;将pCS^2+-cdh 5重组质粒进行单酶切,用T3 RNA体外转录体系转录得到地高辛标记的cdh 5基因的反义mRNA片段,以其为探针对各组胚胎进行全胚胎原位杂交,显微镜下观察32、36、40、44、48 hpf的造血组织区域cdh 5-mRNA杂交信号并拍照记录灰度值。结果:32、36 hpf时高表达hoxb 4实验组斑马鱼胚胎造血组织AGM区、PBI区cdh 5-mRNA的表达较EGFP对照组及WT对照组增高,差异均有统计学意义(P<0.05),EGFP对照组与WT对照组差异无统计学意义(P>0.05);40、44 hpf时高表达hoxb 4实验组斑马鱼胚胎造血组织PBI区cdh 5-mRNA的表达较EGFP对照组及WT对照组增高,差异均有统计学意义(P<0.05),EGFP对照组与WT对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);48 hpf时3组斑马鱼胚胎在造血组织区域均未见cdh 5-mRNA杂交信号。结论:在高表达hoxb 4转基因斑马鱼胚胎中,cdh 5-mRNA在定向造血阶段相应造血区域高表达。 展开更多
关键词 基因表达 原位杂交 胚胎 造血 发育 调控
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈