期刊文献+
共找到364篇文章
< 1 2 19 >
每页显示 20 50 100
水产生物基因组研究进展与趋势 预览
1
作者 郑先虎 匡友谊 +4 位作者 吕伟华 栾培贤 鲁翠云 效文 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期15-35,共21页
本文综述了水产生物基因组研究相关技术的发展历程和关键技术的应用。以二代测序技术的出现为分界点,首先回顾了早期水产养殖生物在遗传学和分子生物学方面的研究结果,以及为开展全基因组测序所做的相关基础研究,然后重点介绍了二代测... 本文综述了水产生物基因组研究相关技术的发展历程和关键技术的应用。以二代测序技术的出现为分界点,首先回顾了早期水产养殖生物在遗传学和分子生物学方面的研究结果,以及为开展全基因组测序所做的相关基础研究,然后重点介绍了二代测序技术应用于水产生物全基因组测序和经济性状遗传基础解析的研究进展,最后展望了水产生物基因组研究发展趋势。水产生物经济性状遗传机制高度复杂,从全基因组角度阐明其遗传机制仍有很多难题,但基因决定性状是生物学法则之一,探索这一过程的奥秘引人入胜。 展开更多
关键词 水产生物 基因组 下一代测序
在线阅读 下载PDF
肌间刺缺失突变对斑马鱼胚胎发育过程中肌肉发育的影响 预览
2
作者 杨建 佟广香 +4 位作者 郑先虎 吕伟华 效文 匡友谊 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期296-303,共8页
为阐明肌间刺缺失对斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育时期肌肉发育的影响,采用qRT-PCR的方法,检测分析了斑马鱼不同肌间刺表型间5个肌肉特异性基因(mef2、myf5、myod、myog和sox6)在囊胚期(3hpf,hourspost fertilization)、原肠胚期(6 hpf)... 为阐明肌间刺缺失对斑马鱼(Danio rerio)胚胎发育时期肌肉发育的影响,采用qRT-PCR的方法,检测分析了斑马鱼不同肌间刺表型间5个肌肉特异性基因(mef2、myf5、myod、myog和sox6)在囊胚期(3hpf,hourspost fertilization)、原肠胚期(6 hpf)、体节期(12 hpf)、咽囊期(24 hpf)和孵化期(72 hpf)5个发育时期的表达情况,对比分析了肌间刺缺失对斑马鱼胚胎发育过程中肌肉发育特异性基因的时序表达差异和肌肉发育的影响,以及对受精率、孵化率和畸形率的影响。结果显示, 5个特异性基因在肌间刺缺失突变型与野生型斑马鱼各发育时期的表达量无显著性差异(P>0.05)。其中,myf5、myod基因在原肠胚期表达量升高,在体节期和咽囊期开始逐步下降;mef2、myog和sox6基因在囊胚期和原肠胚期表达量很低,在体节期和咽囊期表达量迅速升高,并在孵化期开始下降。此外,受精率、孵化率和畸形率的统计结果显示,肌间刺突变型与野生型间亦无显著性差异(P>0.05)。综上,推测肌间刺的缺失对斑马鱼胚胎发育及胚胎发育过程中肌肉的发育没有影响。 展开更多
关键词 肌间刺 斑马鱼 胚胎发育 肌肉
在线阅读 下载PDF
鲤lipea基因表达的时空特征及与脂肪沉积相关性分析 预览
3
作者 党红阳 吕伟华 +4 位作者 匡友谊 曹顶臣 效文 郑先虎 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期251-260,共10页
本文旨在克隆鲤(Cyprinus carpio)激素敏感性脂肪酶a (hormone-sensitive lipase a, lipea)基因,探究其时空表达特征及其与脂肪沉积的关系,以期为鲤脂肪沉积分子调控机制研究奠定理论基础。本实验采用RACE技术克隆获得鲤lipea基因,其cDN... 本文旨在克隆鲤(Cyprinus carpio)激素敏感性脂肪酶a (hormone-sensitive lipase a, lipea)基因,探究其时空表达特征及其与脂肪沉积的关系,以期为鲤脂肪沉积分子调控机制研究奠定理论基础。本实验采用RACE技术克隆获得鲤lipea基因,其cDNA全长为3379 bp,包括230 bp的5′非翻译区(5′-UTR)、1067 bp的3′非翻译区(3′-UTR)和编码693个氨基酸的开放阅读框。多序列比对显示,鲤lipea与斑马鱼(Danio rerio)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)和虹鳟(Oncorhynchusmykiss)的氨基酸序列相似性分别为88.17%、64.94%和63.35%,不同物种间序列差异主要集中在C-端的多肽序列上。蛋白质结构分析显示该蛋白含有3个功能域分别具有脂肪酶活性、乙酰基水解酶活性和水解酶活性。应用实时荧光定量PCR技术分析了lipea基因在鲤各组织、不同发育时期以及脂肪含量极端差异个体的肌肉和脂肪组织中mRNA表达量的变化。结果显示, lipea在各组织中均有表达,腹腔脂肪中相对表达量最高,其次是腹部肌肉,血液中最少。随着胚胎的发育, lipea的表达水平呈现下降趋势, 8细胞期表达量最高,其次是囊胚晚期,开口期最少。lipea表达量与背部肌肉脂肪含量呈正相关,但差异不显著(P>0.05),与腹腔脂肪量呈负相关,且差异极显著性(P<0.01),推测lipea基因对鲤腹腔脂肪沉积可能具有抑制作用。本实验结果可为进一步解析鲤lipea基因的功能和基因调控脂肪沉积分子机制研究提供参考。 展开更多
关键词 激素敏感性脂肪酶 基因克隆 基因表达 脂肪沉积
在线阅读 下载PDF
IgG4相关唾液腺炎的临床病理特点及诊断 预览
4
作者 俞光岩 洪霞 +10 位作者 李巍 张严妍 高岩 陈艳 张祖燕 谢晓艳 栗占国 刘燕鹰 苏家增 朱文瑄 《北京大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-3,共3页
IgG4相关唾液腺炎(IgG4-related sialadenitis,IgG4-RS)是最近一些年才被认识的一类自身免疫性疾病,属于IgG4相关系统性疾病的一种,临床上表现为单个或多个唾液腺和(或)泪腺肿大,以往常误诊为肿瘤或慢性炎症行下颌下腺切除,导致唾液腺... IgG4相关唾液腺炎(IgG4-related sialadenitis,IgG4-RS)是最近一些年才被认识的一类自身免疫性疾病,属于IgG4相关系统性疾病的一种,临床上表现为单个或多个唾液腺和(或)泪腺肿大,以往常误诊为肿瘤或慢性炎症行下颌下腺切除,导致唾液腺功能器官的丧失[1-3]。近10年来,本课题组对IgG4相关唾液腺炎的临床病理特点、诊断及鉴别诊断进行了较为系统的研究。 展开更多
关键词 IgG4相关唾液腺炎 IgG4相关病 唾液腺 下颌下腺 腮腺 泪腺
在线阅读 下载PDF
现货交易平台诈骗犯罪的取证指引 预览
5
作者 朱梁双 《西部学刊》 2019年第5期87-89,共3页
现货交易平台的便捷性使其发展迅速,这也导致一旦平台本身涉嫌犯罪,就会带来跨地域的严重危害和巨大经济损失。文章在认定非法经营标准的基础上,重点围绕如何判断现货交易平台属于诈骗,从交易标的、平台数据、大盘涨跌、角色中立、金融... 现货交易平台的便捷性使其发展迅速,这也导致一旦平台本身涉嫌犯罪,就会带来跨地域的严重危害和巨大经济损失。文章在认定非法经营标准的基础上,重点围绕如何判断现货交易平台属于诈骗,从交易标的、平台数据、大盘涨跌、角色中立、金融杠杆、资金安全六个方面进行了分析,指明了具体的取证方向和要点。 展开更多
关键词 电子现货 非法经营 网络投资诈骗 电子数据
在线阅读 下载PDF
高速动车组轮对轴承压装工艺优化与应用 预览
6
作者 王明萌 韩树涛 《中国新技术新产品》 2019年第9期64-65,共2页
针对高速动车组轮对轴承压装生产过程中存在的风险隐患,深入分析论证引进技术的不足,改进轴承压装设备,并结合自身技术能力提出“6字轴承压装法”,创立高速动车组轴承组装工艺技术的“中国方案”。
关键词 轴承 压装 工艺技术
在线阅读 下载PDF
三种CRISPR/Cas9基因敲除变异检测方法的比较分析 预览
7
作者 唐国盘 黄安群 +3 位作者 匡友谊 王胜杰 王大伟 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第2期20-26,共7页
比较三种常用的CRISPR/Cas9基因敲除检测变异方法,从准确性、耗时、成本和应用限制等方面进行评估。采用T7核酸内切酶I、限制性内切酶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别对利用CRISPR/Cas9方法敲除的fibinb和ngs基因的50尾斑马鱼(Daniore... 比较三种常用的CRISPR/Cas9基因敲除检测变异方法,从准确性、耗时、成本和应用限制等方面进行评估。采用T7核酸内切酶I、限制性内切酶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别对利用CRISPR/Cas9方法敲除的fibinb和ngs基因的50尾斑马鱼(Daniorerio)突变纯合个体和突变杂合个体进行检测,用野生型个体作对照;同时用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对CRISPR/Cas9方法敲除的ogn和ddb1基因的突变杂合个体进行了检测。结果表明:三种方法均能够区分突变杂合个体,其中T7核酸内切酶I检测法耗时最短,但该方法不能用于鉴定突变纯合个体;限制性内切酶检测法能够用于鉴定纯合个体,但需要有特异性的识别位点;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法能够区分纯合和杂合个体,对序列无依赖性,能够检测出序列中存在的所有变异。成本上,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法最经济;限制性内切酶的价格存在较大的差异,因此检测成本依赖于酶的价格。三种检测方法各有优缺点,在应用实践中可根据试验需要选择合适的方法。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 T7核酸内切酶Ⅰ 限制性内切酶 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 检测
在线阅读 下载PDF
东北鳈繁殖力的研究 预览
8
作者 曹顶臣 +4 位作者 匡友谊 吕伟华 鲁翠云 何立川 郑先虎 《水产学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期22-26,共5页
2018年6—7月,在乌苏里江抚远江段采集了284尾东北鳈Sarcocheilichthys lacustris,研究其生物学体征、种群年龄组成及繁殖力。结果表明:284尾东北鳈中有雌鱼226尾、雄鱼58尾,雌雄比例为3.9∶1;年龄范围1~5龄,3~4龄年龄组个体为优势年龄... 2018年6—7月,在乌苏里江抚远江段采集了284尾东北鳈Sarcocheilichthys lacustris,研究其生物学体征、种群年龄组成及繁殖力。结果表明:284尾东北鳈中有雌鱼226尾、雄鱼58尾,雌雄比例为3.9∶1;年龄范围1~5龄,3~4龄年龄组个体为优势年龄组,占总样本量的68%;性腺成熟系数(GSI)为(11.27±5.62)%,绝对繁殖力(F)为(5924.69±2177.01)粒,相对繁殖力(F1)为(60.81±15.25)粒/g,体长相对繁殖力(FL)为(33.02±10.66)粒/mm,体质量相对繁殖力(FW)为(49.41±11.61)粒/g;个体绝对繁殖力与体长(L)、体质量(W)及GSI的关系分别为:F=1170.8L-2.6L2-119577,F=320.65W-0.9W2-18919,F=143.89GSI1.452。 展开更多
关键词 东北鳈 生物学指标 繁殖力
在线阅读 下载PDF
视频背景分离中一种新的非凸秩近似的RPCA模型 预览
9
作者 王永丽 +1 位作者 王淑琴 《山东科技大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第4期83-91,共9页
视频背景分离以及前景提取广泛应用于场景分析、目标追踪等领域。而鲁棒主成分分析(RPCA)则是实现视频背景与前景分离的重要技术之一。但是,用核范数来近似秩函数的传统RPCA模型在处理含有较大奇异值的图像时效果并不理想。为了解决这... 视频背景分离以及前景提取广泛应用于场景分析、目标追踪等领域。而鲁棒主成分分析(RPCA)则是实现视频背景与前景分离的重要技术之一。但是,用核范数来近似秩函数的传统RPCA模型在处理含有较大奇异值的图像时效果并不理想。为了解决这一问题,提出一种新的非凸函数来近似秩函数,对基于核范数的RPCA模型进行改进,并应用增广拉格朗日乘子法求解改进的模型。实验结果表明,与传统的RPCA及现有的一些改进模型相比,提出的基于非凸秩近似的RPCA模型计算效率更高,且图像分离效果更好。 展开更多
关键词 视频背景分离 RPCA模型 非凸秩近似 增广拉格朗日乘子法
在线阅读 免费下载
多分类支持向量机在电力变压器故障诊断中的应用 预览
10
作者 崔青 +2 位作者 王涛 张天伟 《电气技术》 2019年第10期25-28,共4页
支持向量机是以统计学习理论为基础发展起来的新的通用学习方法,较好地解决了小样本、高维数、非线性等学习问题。支持向量机分类性能的好坏很大程度依赖于核函数与核参数的选取。目前常用的参数寻优方法有网格搜索法、遗传算法和粒子... 支持向量机是以统计学习理论为基础发展起来的新的通用学习方法,较好地解决了小样本、高维数、非线性等学习问题。支持向量机分类性能的好坏很大程度依赖于核函数与核参数的选取。目前常用的参数寻优方法有网格搜索法、遗传算法和粒子群优化算法。本文提出了一种基于支持向量机多分类的电力变压器故障诊断模型,以变压器油中5种特征气体作为输入,5种故障状态作为相应的输出,选用高斯径向基核函数,使用网格搜索法获取最优参数C、g。经实验表明,该模型准确率为83.3%,具有较好的实用性。 展开更多
关键词 电力变压器 故障诊断 支持向量机 多分类
在线阅读 下载PDF
多现场总线为乳制品工厂带来的大数据应用
11
作者 王冬梅 《流程工业》 2019年第5期31-33,共3页
本文介绍乳制品工厂总线的设计及应用,大数据的应用和智能化工厂的设计——要想减少工厂桥架的数量和电缆的敷设量,减少洁净区域洁净板开孔数量,满足现场清洗要求,满足大量数据的采集与传输,使控制系统及线缆敷设不成为制约设备排布的瓶... 本文介绍乳制品工厂总线的设计及应用,大数据的应用和智能化工厂的设计——要想减少工厂桥架的数量和电缆的敷设量,减少洁净区域洁净板开孔数量,满足现场清洗要求,满足大量数据的采集与传输,使控制系统及线缆敷设不成为制约设备排布的瓶颈.并减少工厂建设投资费用,就需要采用多总线的网络架构来实现分布式的控制。 展开更多
关键词 多现场总线 数据应用 化工厂 乳制品 控制系统 现场清洗 投资费用 网络架构
基于大型建筑群消防安全应对措施探析 预览
12
作者 丁琨 +3 位作者 张媛 陈龙飞 王永华 翟敏 《消防界(电子版)》 2019年第12期54-54,56共2页
随着社会经济的快速发展和城市化进程的不断加快,大型建筑群商业综合体不断涌现,而且建筑空间体量大,商业业态种类多,人员密集,火灾隐患大。根据商业综合体设计特点,结合火灾案例分析,提出在大型建筑群内划定特定区域,通过强化安全措施... 随着社会经济的快速发展和城市化进程的不断加快,大型建筑群商业综合体不断涌现,而且建筑空间体量大,商业业态种类多,人员密集,火灾隐患大。根据商业综合体设计特点,结合火灾案例分析,提出在大型建筑群内划定特定区域,通过强化安全措施,既满足现代大型商场的使用功能,又解决了消防安全问题。 展开更多
关键词 商业建筑 消防安全 亚安全区
在线阅读 免费下载
供给侧改革背景下提振消费者信心对策——以乳业供应链建设为例 预览
13
作者 王超凡 王姝宁 《大众标准化》 2019年第6期15-19,共5页
从推进我国乳业供给侧结构性改革的视角下,探讨乳业供应链建设提振消费者信心的对策,阐明应从加强供应链的'全链条'标准化管理、建立完备的质量信息披露制度,同时加强社会舆论监督,以及执法监管力度等方面着手,为政府引导、乳... 从推进我国乳业供给侧结构性改革的视角下,探讨乳业供应链建设提振消费者信心的对策,阐明应从加强供应链的'全链条'标准化管理、建立完备的质量信息披露制度,同时加强社会舆论监督,以及执法监管力度等方面着手,为政府引导、乳业转型升级提供参考。 展开更多
关键词 乳业 标准化 供应链 消费者信心
在线阅读 下载PDF
新型与主流:全媒体背景下的新闻评论
14
作者 《青年记者》 北大核心 2019年第16期45-47,共3页
当前,媒体融合正在如火如荼地展开,舆论生态、媒体格局、传播方式都在发生着剧烈变化,新闻评论的内容形式、传播主体、受众习惯等都受到巨大冲击。全媒体背景下,探寻新闻评论发展的新路径,成为学界与业界共同思考的问题。改革开放以来,... 当前,媒体融合正在如火如荼地展开,舆论生态、媒体格局、传播方式都在发生着剧烈变化,新闻评论的内容形式、传播主体、受众习惯等都受到巨大冲击。全媒体背景下,探寻新闻评论发展的新路径,成为学界与业界共同思考的问题。改革开放以来,随着新闻事业的转型,新闻评论经历着显著而又激烈的变革。一方面,都市报和晚报纷纷推出评论版;另一方面,中央媒体也通过扩版和改版的方式增强主流媒体的话语权。而互联网的诞生对新闻评论产生了颠覆性的影响,并使新闻评论步入了一个全新的纪元。 展开更多
关键词 新闻评论 媒体背景 媒体融合 媒体格局 传播方式 内容形式 传播主体 受众习惯
某型船柴油机发电机组飞车故障原因分析 预览
15
作者 顾东杰 苏军锋 +2 位作者 李俊涛 刘玉猛 《内燃机与配件》 2019年第2期141-143,共3页
针对某型船备航时柴油机发电机组飞车问题,通过对柴油机故障现象、相关零部件的拆检分析,确定了故障原因为复位弹簧断裂后,电源失电造成柴油机控制箱失电,失去对执行器、电调等外围电路的控制,柴油机油泵齿条无法复位,齿条向下运动,柴... 针对某型船备航时柴油机发电机组飞车问题,通过对柴油机故障现象、相关零部件的拆检分析,确定了故障原因为复位弹簧断裂后,电源失电造成柴油机控制箱失电,失去对执行器、电调等外围电路的控制,柴油机油泵齿条无法复位,齿条向下运动,柴油机油量急速供给导致柴油机飞车抱轴。 展开更多
关键词 飞车 复位弹簧 燃油超供
在线阅读 下载PDF
安徽徽州传统服饰文化传承现状实证研究 预览
16
作者 曲义 《景德镇学院学报》 2019年第1期89-93,共5页
有效传承徽州传统服饰文化艺术是发展特色徽派服饰,进而振兴安徽服装产业的内核。以徽州服饰学术研究现状、安徽省高等院校传承徽州服饰现状和安徽省文博机构传承徽州服饰现状为观测点,运用调查、统计分析等方法,对安徽省徽州服饰传承... 有效传承徽州传统服饰文化艺术是发展特色徽派服饰,进而振兴安徽服装产业的内核。以徽州服饰学术研究现状、安徽省高等院校传承徽州服饰现状和安徽省文博机构传承徽州服饰现状为观测点,运用调查、统计分析等方法,对安徽省徽州服饰传承现状进行实证研究。结果表明,徽州服饰学术研究和设计教育均以安徽工程大学为龙头,但其自身实力与带动能力不强,高质量研究成果比较缺乏。文博机构对徽州服饰的展示与传承仅局限于配饰,不具备对于徽州传统服装实物的展示与文化艺术传承功能。 展开更多
关键词 传承 学术研究 高等教育 博物馆 现状
在线阅读 下载PDF
硅烷涂层对316L不锈钢耐腐蚀性能的影响 预览
17
作者 林元华 马毓聪 +4 位作者 MohdTalha 李冰 石云升 唐亮 《表面技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期220-225,共6页
目的提高316L不锈钢的耐腐蚀性能。方法在316L不锈钢样品表面涂覆主要成分为1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷(BTSE)的硅烷涂层。通过电化学分析测试,评价涂覆硅烷涂层的316L不锈钢的耐蚀性,并通过扫描电子显微镜和扫描电化学显微镜对其表面形... 目的提高316L不锈钢的耐腐蚀性能。方法在316L不锈钢样品表面涂覆主要成分为1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷(BTSE)的硅烷涂层。通过电化学分析测试,评价涂覆硅烷涂层的316L不锈钢的耐蚀性,并通过扫描电子显微镜和扫描电化学显微镜对其表面形貌进行分析。结果在相同的腐蚀环境下,与未涂覆硅烷涂层的316L不锈钢样品相比,涂覆硅烷涂层样品的表面更加光滑,点蚀现象明显好转。电化学测试结果显示,涂覆硅烷涂层的316L不锈钢样品的腐蚀电位为.565.02mV,未涂覆硅烷涂层样品的腐蚀电位为.796.01mV,前者明显高于后者,其腐蚀倾向明显减小。另外,涂覆硅烷涂层的316L不锈钢样品的腐蚀电流为2.5177μA,未涂覆硅烷涂层样品的腐蚀电流为5.4291μA,涂覆硅烷涂层样品的腐蚀电流明显更小,表现出了更好的耐腐蚀性能。通过观察扫描电化学显微镜图像可以得出,未涂覆硅烷涂层的316L不锈钢样品的电流范围为.3.144×10^-9~.1.957×10^-9A,涂覆硅烷涂层的316L不锈钢样品的电流范围为.3.004×10^-9~.1.975×10^-9A,涂覆硅烷涂层样品的电流范围更窄,腐蚀程度明显减轻。结论在316L不锈钢表面涂覆硅烷涂层可以在一定程度上减缓样品的腐蚀程度,硅烷涂层起到了物理屏障的作用,显着提高了316L不锈钢的耐腐蚀性。 展开更多
关键词 腐蚀 硅烷涂层 电化学 不锈钢 点蚀
在线阅读 免费下载
“酷骑”单车SWOT战略分析对组织发展的启示
18
作者 陈桂明 杜荔红 《经营与管理》 2019年第8期34-38,共5页
作为近两年来方兴未艾的新兴产业,共享单车近期发展可谓突飞猛进,同时势必面临激烈的竞争与挑战。以“酷骑”单车为代表的部分中小企业在这场浪潮中逐渐走向衰败,给同行业其他企业留下了深刻教训与启示。用SWOT战略分析法对“酷骑”单... 作为近两年来方兴未艾的新兴产业,共享单车近期发展可谓突飞猛进,同时势必面临激烈的竞争与挑战。以“酷骑”单车为代表的部分中小企业在这场浪潮中逐渐走向衰败,给同行业其他企业留下了深刻教训与启示。用SWOT战略分析法对“酷骑”单车的成败进行了分析,为认识共享单车企业的提供了一个新的视角,同时对其他组织的发展具有一定的警示和借鉴意义。 展开更多
关键词 “酷骑”单车 SWOT 战略分析 组织 启示
北方常见园林绿化栽植类型及养护技术探究 预览
19
作者 《现代园艺》 2019年第13期184-185,共2页
阐述了北方常见绿化栽植类型,分析了落叶乔木、常绿乔木、绿篱植物、藤本植物、花灌木、地被植物以及草坪等常见栽植类型的特点。在此基础上,探讨了草坪、绿篱、树木等修剪、肥水工程以及越冬保护措施等养护技术,为从业者提供借鉴。
关键词 园林绿化 北方地区 养护技术
在线阅读 下载PDF
APE-1 shRNA与过表达载体的构建及其对肝细胞免疫炎性因子、细胞凋亡的影响 预览
20
作者 朱昱冰 +3 位作者 阿民布和 樊庆 吴广东 张能维 《华中科技大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期137-142,共6页
目的 探究脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic-apyrimidinicendonuclease1,APE-1)小发卡RNA(shorthairpinRNA,shRNA)与过表达载体构建及对肝细胞免疫炎性因子表达、细胞凋亡的影响。方法基于基因表达数据库GEO获取肝移植免疫耐受患者及... 目的 探究脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic-apyrimidinicendonuclease1,APE-1)小发卡RNA(shorthairpinRNA,shRNA)与过表达载体构建及对肝细胞免疫炎性因子表达、细胞凋亡的影响。方法基于基因表达数据库GEO获取肝移植免疫耐受患者及非耐受患者外周血基因表达谱数据,通过R语言程序分析差异表达基因,获得肝移植免疫耐受相关基因APE-1。构建4个平行APE-1shRNA载体(APE-1shRNA_1,APE-1shRNA_2,APE-1shRNA_3,APE-1shRNA_4),经质粒测序、Real-timePCR检测mRNA表达、Westernblot检测蛋白表达筛选沉默效果最优的APE-1shRNA。同理构建并鉴定APE-1过表达载体。STRING网站预测APE-1蛋白互作网络。利用构建的APE-1shRNA和过表达载体,干预人正常肝细胞L-02的APE-1表达(分为对照组、APE-1沉默组和APE-1过表达组),ELISA法检测各组细胞炎性因子IL-1β、IL-10、TNF-α、INF-γ的表达情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡变化。结果筛选获得35个肝移植免疫耐受相关显著差异表达基因,选取肝移植免疫耐受患者高表达基因APE-1。获得沉默效果最优APE-1shRNA_1载体及APE-1过表达载体。预测APE-1与ANP32A、FEN1、HMGB2、LIG1、MUTYH、NTHL1、OGG1、PCNA、POLB、SET等蛋白具有潜在相互作用。APE-1沉默导致L-02细胞(APE-1沉默组)炎性因子IL-1β、IL-10、TNF-α、INF-γ表达显著升高,细胞凋亡率显著增加;相反,APE-1过表达后(APE-1过表达组)L-02细胞炎性因子表达显著降低,细胞凋亡率显著降低。结论APE-1表达可影响人正常肝细胞株L-02细胞炎性因子表达及细胞凋亡,这可能是肝移植免疫耐受中的关键基因。 展开更多
关键词 肝移植 免疫耐受 APE-1 小发卡RNA 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 19 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈