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高焓横向射流尾迹区掺混燃烧的数值特性 预览
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作者 马光伟 孙明 +1 位作者 李光欣 闫巍 《气体物理》 2019年第5期1-12,共12页
尾迹区作为横向射流流场的重要结构受到广泛关注,其掺混和燃烧特性对近壁面区域的流场特性有重要影响.文章在对仿真充分验证的基础上,采用Reynolds平均模拟方法对Ma=8飞行条件下高焓横向射流尾迹区中的掺混和燃烧特性进行了数值研究.探... 尾迹区作为横向射流流场的重要结构受到广泛关注,其掺混和燃烧特性对近壁面区域的流场特性有重要影响.文章在对仿真充分验证的基础上,采用Reynolds平均模拟方法对Ma=8飞行条件下高焓横向射流尾迹区中的掺混和燃烧特性进行了数值研究.探究了冷热流场尾迹区中的氢气掺混特性,冷态流场尾迹区中的激波结构对氢气分布产生一定影响,热态流场尾迹区中存在多种氢气掺混路径.V形回流区中的高浓度氢气对燃烧产生了一定的阻碍作用.定量测量了尾迹区中的火焰结构,尾迹区火焰的顶点位置随高度增加向下游线性移动,受射流主流影响,尾迹区火焰的展向宽度在距离壁面一定高度后开始增大.对冷热流场中的主要参数进行了对比,燃烧消耗了氢气使温度升高,但是尾迹区中的流动速度没有明显增加,燃烧放出的热量没有完全转化为流体的动能. 展开更多
关键词 超声速横向射流 尾迹区 高焓 掺混 燃烧
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分子排阻高效液相色谱法检测组分无细胞百白破联合疫苗的纯度
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作者 梁疆莉 马艳 +3 位作者 顾琴 高娜 孙明 杨卉娟 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2019年第3期276-280,共5页
目的建立组分无细胞百白破联合疫苗(DTaP)纯度分析的分子排阻高效液相色谱(SE-HPLC)方法,用于疫苗生产过程的质量检测指标。方法建立SE-HPLC法检测DTaP中破伤风类毒素(TT)、白喉类毒素(DT)、百日咳毒素(PT)、百日咳丝状血凝素(FHA)、百... 目的建立组分无细胞百白破联合疫苗(DTaP)纯度分析的分子排阻高效液相色谱(SE-HPLC)方法,用于疫苗生产过程的质量检测指标。方法建立SE-HPLC法检测DTaP中破伤风类毒素(TT)、白喉类毒素(DT)、百日咳毒素(PT)、百日咳丝状血凝素(FHA)、百日咳黏附素(PRN)五种组分纯化液和TT脱毒液纯度的方法,同时用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法对各组分纯度进行对比检测和分析。结果选TSK-GEL G4000PWXL色谱柱,DTaP组分的SE-HPLC法纯度检测和分析显示,PT、FHA、PRN、DT纯化液的平均纯度分别为98.46%、91.88%、94.16%、90.11%;TT纯化液二聚体、单体的含量分别占74.50%、25.50%,TT脱毒液二聚体、单体的含量分别占57.22%、42.78%。上述结果与SDS-PAGE法的检测和分析结果相似。结论 SE-HPLC法可以用于DTaP五种纯化液的纯度分析,其与SDS-PAGE法都可以对DTaP生产过程中的纯度指标进行监控。 展开更多
关键词 无细胞百白破疫苗 分子排阻高效液相色谱法 纯度
超声速燃烧火焰放热区结构CH-PLIF成像技术 预览
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作者 梁剑寒 李韵 +4 位作者 孙明 吴戈 朱家健 高强 李博 《国防科技大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期27-33,共7页
超燃冲压发动机是吸气式高超声速飞行器的关键部件之一,超燃冲压发动机燃烧室内火焰结构的研究对揭示超声速燃烧的稳焰机理具有重要意义。利用平面激光诱导荧光(Planar Laser-Induced Fluorescence,PLIF)技术测量了超声速燃烧直连式试... 超燃冲压发动机是吸气式高超声速飞行器的关键部件之一,超燃冲压发动机燃烧室内火焰结构的研究对揭示超声速燃烧的稳焰机理具有重要意义。利用平面激光诱导荧光(Planar Laser-Induced Fluorescence,PLIF)技术测量了超声速燃烧直连式试验台燃烧过程中重要自由基CH的二维分布,实现了超声速燃烧火焰放热区结构的可视化。在开敞空间的低速射流火焰炉中使用甲烷/空气预混火焰对CH-PLIF技术进行了初步验证和系统优化,再利用CH-PLIF技术在凹腔稳焰的超燃直连台上实现了超声速燃烧火焰放热区结构的二维可视化,并与OH-PLIF和CH自发辐射测量结果进行了对比。实验结果表明,在开敞空间的低速射流预混火焰中,火焰放热区会发生扭曲、褶皱和分裂等现象,随着雷诺数的增大,火焰锋面褶皱程度更加显著;在凹腔稳焰的超声速燃烧中,火焰放热区高度褶皱和破碎,放热区结构的厚度为0.5~6.5mm,同时也存在放热区的分裂与剥离等现象。CH-PLIF技术能够以较高的空间分辨率更准确地呈现凹腔超声速火焰放热区的结构,其在凹腔稳焰的超声速燃烧诊断中具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 CH-PLIF 超声速燃烧 火焰结构 放热区 激光诱导荧光 湍流火焰
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基于主动喷注方式的后缘突扩凹腔激光诱导等离子体点火实验研究
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作者 蔡尊 朱家健 +1 位作者 孙明 王振国 《推进技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期115-122,共8页
针对马赫数2.92,总压2.6MPa和总温1530K的超声速来流条件,基于主动喷注乙烯的燃料喷注方案,在后缘突扩凹腔燃烧室中开展了激光诱导等离子体点火实验研究。通过采集50kHz的CH*基自发辐射图像,详细观测了火焰传播过程并进而研究了主动式... 针对马赫数2.92,总压2.6MPa和总温1530K的超声速来流条件,基于主动喷注乙烯的燃料喷注方案,在后缘突扩凹腔燃烧室中开展了激光诱导等离子体点火实验研究。通过采集50kHz的CH*基自发辐射图像,详细观测了火焰传播过程并进而研究了主动式燃料喷注方案对点火过程的影响。研究表明,在激光诱导等离子体点火以后,CH*基强度沿时间的变化会呈现出不同的阶段性特征,大体可以分为四个不同的发展变化阶段(激光激发阶段、初始火焰阶段、过渡阶段和全局火焰阶段)。对于采用凹腔主动式燃料喷注方案,都会经历一个类似的初始火焰形成、减弱、增长和迅速发展成全局火焰的过程,区别在于采用凹腔后壁面燃料喷注方案的初始火焰要更加微弱,而且要经历一个难以观测到CH*基信号的初始火焰沉寂阶段。在全局当量比0.03~0.07的条件下,凹腔前壁面燃料喷注方案要比凹腔后壁面燃料喷注方案更加利于初始火焰的发展,但在形成全局火焰以后会引起较大的波动不利于火焰稳定。 展开更多
关键词 激光诱导等离子体 点火 凹腔主动喷注方案 后缘突扩凹腔
应用于超宽输入的LLC谐振变换器设计 预览
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作者 孙明 马运东 温海涛 《电源学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期1-9,共9页
针对光伏、风电等新能源输出不稳定的特点,在二极管箝位的全桥三电平LLC谐振变换器的基础上,提出了一种应用于超宽输入的控制策略。该变换器可通过控制开关逻辑,灵活地选择输入源进行供电,同时在每种固定的输入下,辅以调频控制及定频移... 针对光伏、风电等新能源输出不稳定的特点,在二极管箝位的全桥三电平LLC谐振变换器的基础上,提出了一种应用于超宽输入的控制策略。该变换器可通过控制开关逻辑,灵活地选择输入源进行供电,同时在每种固定的输入下,辅以调频控制及定频移相控制,实现高增益比。详细分析了不同模式下的电路拓扑、开关逻辑以及模式之间的切换方案,并在不同负载下进行了相关的实验,有效验证了该变换器在宽输入、变功率的苛刻环境下的普遍适用性。 展开更多
关键词 宽输入 LLC 调频 移相
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COL5A1抑制肺腺癌转移的蛋白分泌组分析的研究 预览
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作者 孙靖宇 于滢 +3 位作者 孙明 付新 余洋 刘赞 《世界最新医学信息文摘(电子版)》 2019年第7期139-140,共2页
背景肺腺癌(LAC)是全球范围内癌症相关死亡的首要原因。LAC分泌组中,优先表达基因/蛋白的异常表达可能为其治疗和预后提供依据。FOLR1在多种肿瘤研究中作为治疗靶点,但在肺腺癌中未见研究。本研究拟对同一来源的具有高低转移性的两株LA... 背景肺腺癌(LAC)是全球范围内癌症相关死亡的首要原因。LAC分泌组中,优先表达基因/蛋白的异常表达可能为其治疗和预后提供依据。FOLR1在多种肿瘤研究中作为治疗靶点,但在肺腺癌中未见研究。本研究拟对同一来源的具有高低转移性的两株LAC细胞系进行比较分泌组研究,在LAC的转移分泌组作为生物标志物的组中进行比较分析,进一步探究LAC转移相关早期生物标志物,为其治疗和预后提供依据。方法 对同一来源的两株肺腺癌细胞系Anip973和AGZY83a进行有血清和无血清培养后提取其分泌蛋白,采用同位素标记绝对与相对定量(iTRAQ)技术进行蛋白多肽N末端或赖氨酸侧链基团进行标记,经二维液相色谱-串联质谱(2D-MS/MS)进行所获得全部蛋白的鉴定。利用信号肽预测软件SignalP 4.0和软件共筛选出经典途径分泌蛋白。免疫印迹(Western Blot)方法分析两株细胞系分泌蛋白中COL5A1蛋白的表达变化。结果 经信号肽预测软件共筛选出82个分泌蛋白,研究表明Anip973细胞系中表达高于AGZY83a细胞系的蛋白27个,AGZY83a细胞系中表达高于Anip973细胞系的蛋白55个。COL5A1在低转移细胞系AGZY83a中高表达,由此推测分泌蛋白COL5A1有抑制肺腺癌转移的作用,可以作为肺腺癌潜在的治疗和预后靶点。结论 COL5A1有抑制肺腺癌转移的作用,可以作为肺腺癌潜在的治疗和预后潜在靶点。 展开更多
关键词 肺腺癌 分泌蛋白 转移 COL5A1
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“华龙一号”装卸料机研制 预览
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作者 李军 孙明 +1 位作者 甘林 张平 《中国核电》 2019年第2期124-129,共6页
"华龙一号"是我国自主研发的具有完全自主知识产权的第三代压水堆核电技术。介绍了"华龙一号"核电机组反应堆核燃料操作与贮存系统(RFH系统)核心设备装卸料机的研制情况,主要在对以往项目经验反馈系统总结、分析的... "华龙一号"是我国自主研发的具有完全自主知识产权的第三代压水堆核电技术。介绍了"华龙一号"核电机组反应堆核燃料操作与贮存系统(RFH系统)核心设备装卸料机的研制情况,主要在对以往项目经验反馈系统总结、分析的基础上,针对其关键零部件结构制造技术、调试技术进行了深入研究,对各关键控制要点、难点提出了更为有效的解决措施和加工方案等方面进行阐述,进一步改进和优化其工艺技术,确保装卸料机满足精度、性能和使用需求。 展开更多
关键词 核电 “华龙一号” 装卸料机
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基于HGWO-MSVM的齿轮箱故障诊断研究 预览
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作者 孙明 马秋丽 +1 位作者 雷俊辉 张炎亮 《组合机床与自动化加工技术》 北大核心 2018年第5期95-98,102共5页
针对齿轮箱多类故障信号非线性、不确定性难以进行有效识别的问题,提出了一种混合灰狼优化算法(Hybrid Grey Wolf Optimizer,HGWO)优化多分类支持向量机(Multi-class Support Vector Machine,MSVM)的齿轮箱故障诊断方法。首先利用... 针对齿轮箱多类故障信号非线性、不确定性难以进行有效识别的问题,提出了一种混合灰狼优化算法(Hybrid Grey Wolf Optimizer,HGWO)优化多分类支持向量机(Multi-class Support Vector Machine,MSVM)的齿轮箱故障诊断方法。首先利用小波包对齿轮箱故障信号进行降噪处理,并通过信号中各频带的能量,提取能量特征值,再将获取的特征值输入优化后的MSVM模型进行故障模式的识别。实验结果表明,相对于传统的诊断模型,基于HGWO-MSVM的齿轮箱故障诊断模型能够更有效地诊断齿轮箱的实际运行状态,提高识别效率和精度。 展开更多
关键词 小波包 混合灰狼优化算法 多分类支持向量机 齿轮箱 故障诊断
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血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测结果的影响 预览
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作者 张名 伍胤杰 +5 位作者 沈武玲 周健 寸怡娜 平玲 彭佳 孙明 《医学研究杂志》 2018年第5期43-46,共4页
目的比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度(CCID50)检测结果的影响。方法分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组(免疫吸附法)进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测(微细胞病变法),检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎... 目的比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度(CCID50)检测结果的影响。方法分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组(免疫吸附法)进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测(微细胞病变法),检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,并使用处理血清组进行促细胞生长试验。最后分析不同血清对感染性滴度的影响。结果6种未处理血清组病毒感染性滴度检测结果差异有统计学意义(P〈0.01),6种处理血清组病毒感染性滴度差异无统计学意义(P〉0.05)。未处理组2号血清的中和抗体滴度为1∶4,6号血清的中和抗体滴度为1∶8,其余各组血清的中和抗体滴度均〈1∶4。6种处理血清组的中和抗体滴度均为1∶2。血清促细胞生长试验显示6种处理组血清细胞生长趋势正常。结论Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测前使用免疫吸附对血清进行预处理,可降低血清中存在的中和抗体对检测的影响,为比较不同实验室数据提供可能。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 滴度 中和抗体 血清
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喷注方案对凹腔稳焰燃烧室低频振荡的影响研究
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作者 崔兴达 孙明 +2 位作者 汪洪 江雄 李伟 《推进技术》 CSCD 北大核心 2018年第10期2370-2380,共11页
为了研究在入口来流马赫数2.52,总温1486K的超声速来流条件下,稳焰凹腔上游不同位置乙烯横向喷注对模型发动机燃烧室内低频燃烧振荡特性的影响,通过1kg/s直连式超燃试验平台,利用高频压力传感器、高速摄影相机等设备,对凹腔上游近距离... 为了研究在入口来流马赫数2.52,总温1486K的超声速来流条件下,稳焰凹腔上游不同位置乙烯横向喷注对模型发动机燃烧室内低频燃烧振荡特性的影响,通过1kg/s直连式超燃试验平台,利用高频压力传感器、高速摄影相机等设备,对凹腔上游近距离、远距离喷注等方案的发动机内部压力与火焰动态特性进行了研究。试验结果表明:在当前当量比条件下,当稳焰凹腔上游近距离喷注燃料时,燃烧室存在较大范围亚声速区域,并出现由热声不稳定性激励的低频压力振荡,频率分布范围较宽(50~400Hz)且振幅较弱。对于燃料喷注位置到稳焰凹腔距离较远的情况,燃烧室内出现以火焰逆传和火焰吹脱为特征的周期性火焰振荡现象。分析认为较远喷注距离有利于燃料-空气充分混合并形成预混区,导致火焰快速逆传。火焰逆传与DDT (爆燃转爆震)中的火焰加速传播过程有关。周期性火焰逆传与火焰吹脱过程相耦合形成了具有特定主频(约85Hz)且振幅较大的低频压力振荡。 展开更多
关键词 低频燃烧振荡 喷注位置 稳焰凹腔 热声不稳定性 火焰逆传 火焰加速 爆燃转爆震
超声速单边扩张燃烧室分离区振荡现象及其解耦分析
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作者 高天运 梁剑寒 孙明 《推进技术》 CSCD 北大核心 2018年第10期2381-2393,共13页
为了揭示超声速燃烧中非定常现象的主导机制,通过解耦分析系统研究了单边扩张燃烧室中一种以分离区不稳定为特征的非稳态燃烧。采用控制变量的方法,对Ma=6条件(隔离段来流马赫数3.46,总温1430K)下燃烧不稳定的可能影响因素进行了解耦... 为了揭示超声速燃烧中非定常现象的主导机制,通过解耦分析系统研究了单边扩张燃烧室中一种以分离区不稳定为特征的非稳态燃烧。采用控制变量的方法,对Ma=6条件(隔离段来流马赫数3.46,总温1430K)下燃烧不稳定的可能影响因素进行了解耦分析,并对典型工况在直连式实验台上开展了验证。研究表明,火焰不是本文中燃烧不稳定现象的主要影响因素,释热形成的反压才是该现象的主因。低当量比工况下反压较小,流场的非稳态机制由射流和凹腔共同主导;中高当量比工况下反压较大,非稳态机制由反压主导。射流与凹腔相互作用能形成周期性极强的非稳态过程,其压力振荡频率约为200Hz。在较高反压的驱动下,超声速燃烧室内会发生复杂的非定常现象,具体表现为激波串轴向大幅振荡,并伴有非对称分离区的间歇性切换。由反压主导的流场振荡周期性不强、频率以中低频为主(100~500Hz)。非稳态过程可能源于激波边界层干扰中的低频不稳定性,其被燃烧释热所形成的分离区放大,在下游反压的影响下形成了流场中复杂的非定常过程。 展开更多
关键词 超声速燃烧 反压 分离区 激波边界层干扰 解耦分析
复合材料层板冲击损伤检出概率预测研究 预览
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作者 孙明 马秋丽 +1 位作者 雷俊辉 张炎亮 《组合机床与自动化加工技术》 北大核心 2018年第7期97-99,共3页
针对航空领域复合材料层板冲击损伤检出概率的影响因素复杂、不确定性难以进行准确预测的问题,将BP神经网络和模糊推理系统相结合,提出了一种基于自适应神经模糊推理系统(Adaptive Neuron Fuzzy Inference System,ANFIS)的冲击损伤目视... 针对航空领域复合材料层板冲击损伤检出概率的影响因素复杂、不确定性难以进行准确预测的问题,将BP神经网络和模糊推理系统相结合,提出了一种基于自适应神经模糊推理系统(Adaptive Neuron Fuzzy Inference System,ANFIS)的冲击损伤目视检测检出概率预测方法。首先利用仿真函数验证预测模型的有效性,然后以实验数据为例进行仿真分析,与传统的BP神经网络和支持向量机预测模型进行比较。仿真和实验结果表明,自适应神经模糊推理系统预测模型在目视检测损伤检出概率预测中具有更高的精度。 展开更多
关键词 复合材料 目视检测 冲击损伤
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响应面法建立层析纯化去除百日咳丝状血凝素中内毒素工艺
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作者 高娜 梁疆莉 +7 位作者 马艳 邓燕 姬秋彦 顾琴 李菁 胡文著 史荔 孙明 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2018年第6期1384-1392,共9页
【背景】无细胞组分百日咳疫苗在人群中接种后不良反应发生率大大降低,是未来百日咳疫苗的发展方向,但是新的抗原纯化方式需要工艺中加入内毒素的去除。【目的】使用响应面法优化层析纯化法去除无细胞百日咳疫苗中百日咳丝状血凝素(Fil... 【背景】无细胞组分百日咳疫苗在人群中接种后不良反应发生率大大降低,是未来百日咳疫苗的发展方向,但是新的抗原纯化方式需要工艺中加入内毒素的去除。【目的】使用响应面法优化层析纯化法去除无细胞百日咳疫苗中百日咳丝状血凝素(Filamentous hemagglutinin,FHA)中内毒素的工艺。【方法】通过单因素试验,确定响应面设计范围;根据响应面法设计原理,使用Mini TAB软件,以FHA的回收率和收获的FHA蛋白浓度,同时兼内毒素合格为考察指标,对上样样品量、样品p H、样品电导Cond进行优化,最终确定去除FHA内毒素的层析纯化工艺。【结果】使用目前的层析纯化条件获得的Capto adhere去除FHA的内毒素的最佳工艺条件:p H 5.3,Cond 9.6,Mass 3.0。【结论】用响应面法优化了去除百日咳丝状血凝素中内毒素的层析纯化工艺,这种方法效率高、耗时少,为后续生物制品工艺扩大再生产提供参考。 展开更多
关键词 百日咳丝状血凝素 内毒素 响应面法
基于HGWO-MSVM的采煤机滚动轴承故障诊断方法 预览 被引量:1
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作者 孙明 马秋丽 +1 位作者 张炎亮 雷俊辉 《工矿自动化》 北大核心 2018年第3期81-86,共6页
针对采煤机滚动轴承故障特征向量提取较困难、多分类效果不理想等问题,提出了基于HGWO-MSVM的采煤机轴承故障诊断方法。对轴承故障信号进行小波降噪处理,利用经验模态分解算法对降噪后信号进行分解,并提取能量特征值,作为MSVM的训... 针对采煤机滚动轴承故障特征向量提取较困难、多分类效果不理想等问题,提出了基于HGWO-MSVM的采煤机轴承故障诊断方法。对轴承故障信号进行小波降噪处理,利用经验模态分解算法对降噪后信号进行分解,并提取能量特征值,作为MSVM的训练集和测试集。采用MSVM进行故障状态识别,并用HGWO算法对MSVM的参数进行优化。试验结果表明,相比于GWO、GA和PSO优化MSVM模型,基于HGWO-MSVM的采煤机轴承故障诊断模型可明显提高故障识别精度和效率。 展开更多
关键词 煤炭开采 采煤机 滚动轴承 故障诊断 经验模态分解 混合灰狼优化算法 多分类支持向量机
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去除百日咳毒素、丝状血凝素中内毒素的工艺探索
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作者 姬秋彦 高娜 +9 位作者 梁疆莉 胡文著 顾琴 马艳 戴永娟 李婧妍 史荔 孙明 衡燮 杨卉娟 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第5期533-537,共5页
目的探讨无细胞百日咳疫苗纯化工艺中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)的内毒素去除问题。方法选用Triton法和离子交换层析法,分别对百日咳杆菌发酵液上清和经Capto SP Imp Res柱纯化的... 目的探讨无细胞百日咳疫苗纯化工艺中百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)的内毒素去除问题。方法选用Triton法和离子交换层析法,分别对百日咳杆菌发酵液上清和经Capto SP Imp Res柱纯化的发酵液进行内毒素去除,按《中国药典》三部(2015版)相关方法检测纯化样品的蛋白含量、内毒素含量、抗原含量,并进行SDS-PAGE分析。结果使用Triton法和离子交换层析法均可以将FHA和PT这两种成分的内毒素在脱毒前阶段降低至200 EU/mg以下。在合适的纯化条件下使用离子层析去除内毒素的能力高于Triton法,而在对抗原的回收率上Triton法又稍占优势。结论使用Triton法和离子交换层析法均可解决FHA和PT去除内毒素的问题,两类工艺下对目的蛋白活性的影响有待进一步研究。 展开更多
关键词 无细胞百日咳疫苗 百日咳毒素 丝状血凝素 内毒素
甲型肝炎病毒疫苗株H2株的连续传代及其基因稳定性
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作者 王东宝 曹晗 +5 位作者 郑勇 史小军 马忠飞 段颖融 邓燕 孙明 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期80-84,共5页
目的 分析甲型肝炎减毒活疫苗H2株(hepatitis A virus H2 live attenuated vaccine strain)毒种H2M20K7(K7)经连续传代后病毒基因的遗传稳定性.方法 将H2株毒种K7用细胞工厂在人二倍体细胞KMB17中进行连续传代后,收获不同代次的病毒... 目的 分析甲型肝炎减毒活疫苗H2株(hepatitis A virus H2 live attenuated vaccine strain)毒种H2M20K7(K7)经连续传代后病毒基因的遗传稳定性.方法 将H2株毒种K7用细胞工厂在人二倍体细胞KMB17中进行连续传代后,收获不同代次的病毒,提取病毒RNA,用二代高通量深度测序方法,测定不同代次病毒(K7,K10,Kll,K13,K15,K18)的全基因序列,对比分析病毒的基因变异率,同时对病毒的感染性滴度进行检测和对比.结果 H2M20K7主代毒种经连续传代后,不同代次病毒的全基因序列总体变异率较低,非同义突变率小于0.58%,基因结构稳定;在5'NCR非编码区域的基因突变率<0.1%;在VP1/2 A、2C毒力位点区域突变率小于0.01%;不同代次病毒的感染性滴度维持在7.76~ 8.50 lgCCID50/ml之间,P值为0.981差异无统计学意义.结论 H2M20K7主代毒种、工作毒种、疫苗批病毒及经过连续传代后的各代次病毒基因结构稳定;在5'NCR非编码区未发生明显突变,毒力相关位点VP1/2 A、2B、2C等关键位点的基因均为减毒特征,变异率极低,未引起病毒毒力特征改变.病毒感染性稳定且符合要求,具有较好的遗传稳定性. 展开更多
关键词 甲肝病毒H2株 基因稳定性 二代高通量全基因测序 核苷酸序列
不同氢氧化铝佐剂和吸附方式对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗免疫效果的影响
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作者 粱疆莉 顾琴 +5 位作者 高娜 马艳 姬秋彦 史荔 孙明 衡燮 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期697-701,共5页
目的 研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)免疫效果的影响.方法 用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用... 目的 研究不同氢氧化铝佐剂含量、两种吸附方式以及不同厂家氢氧化铝佐剂对无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTaP-sIPV)免疫效果的影响.方法 用0.42 mg/ml、0.47 mg/ml、0.52 mg/ml终浓度的铝吸附相同剂量的百白破5种抗原,用顺序吸附和分别吸附两种方式吸附抗原,使用进口和自制氢氧化铝,比较各抗原的吸附率、各抗原抗体水平以及百日咳、破伤风、白喉疫苗效价.结果 0.52 mg/ml铝含量组吸附率最高,0.42 mg/ml铝含量组吸附率最低;顺序吸附和分别吸附两种吸附方式没有明显差异;使用进口氢氧化铝佐剂和自制氢氧化铝佐剂组分抗体反应各有不同,差异无统计学意义.结论 0.52 mg/ml铝含量、自制氢氧化铝佐剂和分别吸附的方式适用于DTaP-sIPV疫苗的制备. 展开更多
关键词 DTaP—sIPV 吸附率 疫苗效价 抗百日咳毒素抗体 抗丝状血凝素抗体 抗百日 咳粘着素抗体 抗白喉类毒素抗体 抗破伤风类毒素抗体
吸附无细胞百白破疫苗生产用菌株主要保护性抗原基因序列的遗传稳定性及理化性质的稳定性
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作者 姬秋彦 顾琴 +7 位作者 梁疆莉 衡燮 马艳 高娜 戴永娟 宋绍辉 史荔 孙明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期1-4,13共5页
目的对吸附无细胞百白破疫苗生产用菌株的主要保护性抗原基因序列遗传稳定性及理化性质稳定性进行研究,为无细胞百白破疫苗的安全性和有效性提供依据。方法分别从百日咳、白喉和破伤风疫苗生产用菌株的主代、工作代、疫苗生产用工作种子... 目的对吸附无细胞百白破疫苗生产用菌株的主要保护性抗原基因序列遗传稳定性及理化性质稳定性进行研究,为无细胞百白破疫苗的安全性和有效性提供依据。方法分别从百日咳、白喉和破伤风疫苗生产用菌株的主代、工作代、疫苗生产用工作种子(P1)、P2、P3(P1后再传2代)的菌体全基因组DNA中,扩增出百日咳主要抗原组分[百日咳毒素(pertussis toxin,PT)、外膜蛋白(pertactin,PRN)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin,FHA)]、白喉主要抗原[白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)原液]、破伤风主要抗原[破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)原液]的基因序列,克隆至p LB-Simple Vector,转化E.coli DH5α,测序后,运用DNAMAN软件与Gen Bank中登录的相应序列进行比对和分析。按照《中国药典》三部(2015版)相关方法,进行菌株理化性质稳定性检测。结果生产用百日咳、白喉、破伤风菌株的主代、工作代、P1、P2、P3的主要抗原基因序列大小及同源性与预期一致,理化性质稳定。结论吸附无细胞百白破疫苗生产用菌株的主要保护性抗原基因序列遗传稳定,理化性质稳定。 展开更多
关键词 百白破联合疫苗 抗原基因序列 理化性质 遗传稳定性
CHO细胞簇集法与小鼠体内法检测百日咳毒素残余毒性的相关性 预览
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作者 高娜 梁疆莉 +5 位作者 姬秋彦 顾琴 马艳 史荔 孙明 衡燮 《昆明医科大学学报》 CAS 2018年第10期13-17,共5页
目的比较CHO细胞簇集试验、小鼠体内检测法(小鼠组胺致敏试验、小鼠白细胞增多试验)检测不同脱毒条件下的百日咳类毒素残余毒性的应用效果和相关性。方法以不同脱毒条件百日咳类毒素作为研究对象,用CHO细胞簇集试验、小鼠体内法检测... 目的比较CHO细胞簇集试验、小鼠体内检测法(小鼠组胺致敏试验、小鼠白细胞增多试验)检测不同脱毒条件下的百日咳类毒素残余毒性的应用效果和相关性。方法以不同脱毒条件百日咳类毒素作为研究对象,用CHO细胞簇集试验、小鼠体内法检测百日咳毒素残余毒性,并进行相关性分析。结果白细胞增多实验与组胺致敏实验结果存在显著的正相关(r=0.881,P=0.00),CHO细胞法与白细胞增多实验呈负相关(r=0.630,P=0.028),CHO细胞法与组胺致敏实验呈负相关(r=-0.613,P=0.034)。结论分析了无细胞组分百日咳疫苗脱毒工艺中CHO细胞簇集试验和小鼠体内检测法2种检测试验的差异性和相关性,为百日咳毒素脱毒工艺的便捷检测开发提供重要参考。 展开更多
关键词 百日咳毒素 CHO细胞法 体内检测法 脱毒工艺
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无细胞百日咳疫苗生产用培养基的改进和培养条件优化 预览
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作者 梁疆莉 姬秋彦 +6 位作者 罗娜 姬光 高娜 马艳 史荔 孙明 衡燮 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第10期1232-1236,共5页
目的:改进无细胞百日咳疫苗生产用培养基并优化培养条件。方法:用不同浓度溶血(0.1%)赫氏琼脂及酸水解酪蛋白制备百日咳活性炭培养基,选择最优培养条件;使用百日咳活性炭培养基成功复苏菌种后,优化传代代次和培养时间,评价百日咳活... 目的:改进无细胞百日咳疫苗生产用培养基并优化培养条件。方法:用不同浓度溶血(0.1%)赫氏琼脂及酸水解酪蛋白制备百日咳活性炭培养基,选择最优培养条件;使用百日咳活性炭培养基成功复苏菌种后,优化传代代次和培养时间,评价百日咳活性炭培养基替代羊血包姜氏培养基的可行性;用酸水解酪蛋白代替自制50%酸水解酪蛋白制备改良SS液体培养基,并用ELISA、SDS-PAGE电泳和CHO细胞簇集等方法评价对菌种的培养效果。结果:溶血(0.1%)赫氏琼脂的加入量为33.2g/L、酸水解酪蛋白加入量为8g/L时,菌苔生长最快;百日咳活性炭培养基培养第1代72h、第2代48h、第3代48h、第4代24h和第1代72h、第2代36h、第3代24h的血凝(HA)和UV600均较高,这两组细菌生长状态较好;酸水解酪蛋白制备的百日咳活性炭培养基在优化条件后复苏菌种生长良好,和羊血包姜氏培养基没有明显差异;8g/L酸水解酪蛋白制备的改良SS液体培养基所得菌量优于50%酸水解酪蛋白制备培养基(P=0.001),改良SS液体培养基培养所得百日咳毒素纯度、产量和CHO细胞簇集活性均较好。结论:使用酸水解酪蛋白的百日咳活性炭培养基和改良SS液体培养基所得的百日咳杆菌纯度、产量、活性均较高,适用于无细胞百日咳组分疫苗的生产。 展开更多
关键词 博德特菌 百日咳 百日咳毒素 培养基 仓鼠卵巢细胞 酶联免疫吸附测定
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