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污泥好氧堆肥中微生物群落结构分析 预览
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作者 张先成 曹旭 +1 位作者 李晶 利强 《黑龙江科学》 2019年第8期1-3,共3页
采用微生物培养方法及高通量测序技术,综合分析了污泥好氧堆肥过程中微生物群落结构的变化,结果显示,细菌和真菌对温度的敏感度要高于放线菌,在堆肥的高温期生长受限。细菌和真菌的高通量测序结果显示,不同的堆肥时期,堆肥微生物群落中... 采用微生物培养方法及高通量测序技术,综合分析了污泥好氧堆肥过程中微生物群落结构的变化,结果显示,细菌和真菌对温度的敏感度要高于放线菌,在堆肥的高温期生长受限。细菌和真菌的高通量测序结果显示,不同的堆肥时期,堆肥微生物群落中的优势菌菌数是有规律变化的。其为污泥堆肥微生物的分离选育及相关微生物种群结构分析提供技术参考。 展开更多
关键词 污泥 好氧堆肥 微生物群落 结构分析 高通量测序
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微生物型育苗垫片对水稻根围土壤微生物多样性的影响
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作者 李晶 胡基华 +6 位作者 王峥鉴 陈静宇 刘宇帅 姜威 曹旭 利强 张淑梅 《生物技术》 CAS 2019年第3期277-282,250共7页
[目的]分析微生物型育苗垫片对水稻根围土壤微生物多样性和群落组成的影响,为微生物型育苗垫片的示范应用提供科学参考。[方法]采用水稻秧盘育苗试验,基于常规微生物培养和高通量测序技术测定微生物型垫片育苗对水稻根围土壤微生物种群... [目的]分析微生物型育苗垫片对水稻根围土壤微生物多样性和群落组成的影响,为微生物型育苗垫片的示范应用提供科学参考。[方法]采用水稻秧盘育苗试验,基于常规微生物培养和高通量测序技术测定微生物型垫片育苗对水稻根围土壤微生物种群数量、多样性及群落组成变化。[结果]与普通壮秧剂育苗相比,微生物型垫片育苗的水稻根围土壤细菌数量在出苗后第7 d增加了36. 59%,第14 d和第21 d时降低但差异不显著;放线菌数量分别显著增加了271. 11%、702. 48%和100%;真菌数量在第7 d和第14 d分别降低了127. 05%和740%,第21 d时明显增加了160. 98%。在水稻幼苗根围微生物群落组成中,变形菌门、放线菌门、酸杆菌门和螺旋体菌门为优势细菌,子囊菌门、担子菌门、接合菌门和壶菌门为优势真菌;与对照相比,微生物型育苗垫片组中变形菌门增加,螺旋体菌门和酸杆菌门减少,其中高丰度的假单胞菌属、根瘤菌属、节杆菌属、克雷伯氏菌属等根围促生菌均为水稻幼苗根围优势菌;真菌的子囊菌门增加,担子菌门、接合菌门和壶菌门减少,后期子囊菌门成为单一优势菌,该门的腐质霉属、假裸囊菌属和接合菌门的被孢霉属菌为优势菌。[结论]微生物型垫片育苗在水稻幼苗前期可提高土壤细菌的丰富度,后期降低土壤真菌的丰富度和多样性,具有改善水稻幼苗根围微生态环境的作用。 展开更多
关键词 微生物型育苗垫片 水稻根围土壤 微生物多样性
微生物复合菌剂在马铃薯上的田间应用效果研究 预览
3
作者 李晶 高雪 +3 位作者 陈静宇 张淑梅 曹旭 利强 《现代化农业》 2019年第9期28-29,共2页
采用田间小区试验研究了福太尔微生物复合菌剂(颗粒剂)对马铃薯的生长及产量的影响。结果表明,施用福太尔微生物复合菌剂(颗粒剂)对马铃薯具有增产作用,2017、2018年度分别比不施肥的处理增产13.16%、33.79%。
关键词 微生物复合菌剂 马铃薯 增产
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环境因素对Bacillus amyloliquefaciens TF28在土壤中定殖的影响 预览
4
作者 姜威 利强 +4 位作者 陈靖宇 曹旭 胡基华 李晶 张淑梅 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1479-1484,共6页
为了明确生防菌株 Bacillus amyloliquefaciens TF28在土壤中的定殖动态,采用活菌计数及菌株特异PCR验证相结合的方法,研究温度、含水量、pH、接种量、土壤类型和病原菌对其在离体土壤中定殖的影响。结果表明,适于菌株TF28定殖的温度、p... 为了明确生防菌株 Bacillus amyloliquefaciens TF28在土壤中的定殖动态,采用活菌计数及菌株特异PCR验证相结合的方法,研究温度、含水量、pH、接种量、土壤类型和病原菌对其在离体土壤中定殖的影响。结果表明,适于菌株TF28定殖的温度、pH、含水量范围较广,在20~35 ℃,pH 4.5~8.6,含水量 5%~35%范围内均能有效定殖;25 ℃、弱酸性和中性、15%含水量更利于其定殖;接种量和病原菌显著影响其定殖,接种量越大,定殖能力越强;病原菌在接种后14 d内显著促进其定殖;另外,土壤有机质质量分数高更利于其定殖。该研究为菌株TF28的推广应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 生防菌株 BACILLUS amyloliquefaciens TF28 土壤 定殖
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污泥好氧堆肥中功能菌群的分离筛选 预览
5
作者 张先成 李晶 +3 位作者 曹旭 姜威 胡基华 利强 《安徽农业科学》 CAS 2019年第15期78-80,共3页
开展了污泥堆肥中功能菌株筛选的研究,分别以污泥堆肥物料中的各种大分子有机物为目标底物,筛选各自的降解菌株,通过初筛和复筛(酶活性强弱)选择最佳功能菌株,优化组合获得污泥堆肥的功能复合菌群。该研究可为污泥堆肥的功能菌株优选及... 开展了污泥堆肥中功能菌株筛选的研究,分别以污泥堆肥物料中的各种大分子有机物为目标底物,筛选各自的降解菌株,通过初筛和复筛(酶活性强弱)选择最佳功能菌株,优化组合获得污泥堆肥的功能复合菌群。该研究可为污泥堆肥的功能菌株优选及其工艺优化提供理论依据和技术支持。 展开更多
关键词 污泥堆肥 功能菌群 分离筛选 酶活
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解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌脂肽芬芥素的分离鉴定及抑菌作用
6
作者 刘宇帅 张杰 +3 位作者 钟瑾 李晶 利强 张淑梅 《中国生物工程杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期20-29,共10页
对一株解淀粉芽孢杆菌TF28产生的抗菌脂肽进行分离鉴定及抑菌活性研究,采用酸沉淀、乙酸乙酯和甲醇萃取技术制备了抗菌脂肽粗提物,经过2次HPLC分离纯化,在保留时间32-42min内获得8个抗菌脂肽纯品,经MALDI-TOF-MS鉴定为芬芥素(fengycins... 对一株解淀粉芽孢杆菌TF28产生的抗菌脂肽进行分离鉴定及抑菌活性研究,采用酸沉淀、乙酸乙酯和甲醇萃取技术制备了抗菌脂肽粗提物,经过2次HPLC分离纯化,在保留时间32-42min内获得8个抗菌脂肽纯品,经MALDI-TOF-MS鉴定为芬芥素(fengycins),对尖孢镰刀菌和禾谷镰刀菌显示出较强的抑菌活性,该研究为提高菌株TF28抗菌脂肽产量的定向遗传改造奠定基础。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 尖孢镰刀菌 禾谷镰刀菌 抗菌脂肽 芬芥素
粘质沙雷氏菌几丁质酶基因的研究进展 被引量:1
7
作者 李晶 于丽萍 +1 位作者 刘宇帅 利强 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2017年第9期3837-3841,共5页
几丁质酶具有降解几丁质的作用,其降解产物氨基寡糖和几丁低聚糖在农业、食品、医药等领域具有重要的应用价值和广泛的应用前景。自然界中多种微生物可以产生几丁质酶,而其在细菌体内的合成受精密调控。粘质沙雷氏菌作为一种高产几丁质... 几丁质酶具有降解几丁质的作用,其降解产物氨基寡糖和几丁低聚糖在农业、食品、医药等领域具有重要的应用价值和广泛的应用前景。自然界中多种微生物可以产生几丁质酶,而其在细菌体内的合成受精密调控。粘质沙雷氏菌作为一种高产几丁质酶的菌种,在农业生防领域具有很大的应用潜力。本综述从粘质沙雷氏菌几丁质酶基因的分类和结构特征、几丁质酶基因克隆、表达和调控以及几丁质酶的应用等方面论述了粘质沙雷氏菌几丁质酶基因的研究进展,为粘质沙雷氏菌几丁质酶基因和功能蛋白的利用提供理论基础。 展开更多
关键词 粘质沙雷氏菌 几丁质酶基因 基因克隆 表达
生防细菌TF28对大豆内生细菌多样性的影响 预览
8
作者 陈静宇 李晶 +1 位作者 胡基华 利强 《现代化农业》 2017年第9期2-3,共2页
通过对大豆各生长时期各组织部位内生细菌进行分离统计,发现其开花期内生细菌数量最多,其中根部内生细菌数量要高于茎部和叶部。生防细菌TF28能够促进大豆植株内生细菌的生长,同时抑制了病原菌的染病性,提高了大豆植株的抗病性。
关键词 大豆 内生细菌 生物防治 多样性
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马铃薯微生物菌剂的应用效果及对根际土壤微生物的影响 预览 被引量:1
9
作者 陈静宇 利强 +2 位作者 曹旭 刘宇帅 李晶 《现代化农业》 2017年第7期11-12,共2页
将离体条件下对马铃薯晚疫病菌和丝核病菌具有较强抑菌活性的枯草芽孢杆菌PB12菌株以拌种和颗粒底肥方式施用,结果对马铃薯出苗和幼苗生长均具一定促进作用,可降低马铃薯晚疫病病情指数,且增产效果明显,并可提高马铃薯根际土壤细菌... 将离体条件下对马铃薯晚疫病菌和丝核病菌具有较强抑菌活性的枯草芽孢杆菌PB12菌株以拌种和颗粒底肥方式施用,结果对马铃薯出苗和幼苗生长均具一定促进作用,可降低马铃薯晚疫病病情指数,且增产效果明显,并可提高马铃薯根际土壤细菌数量,降低真菌数量,促进马铃薯根际土壤的微生态平衡。 展开更多
关键词 PB12菌剂 田间效果 根际微生物
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低温生防菌株的诱变选育及生防效果 预览 被引量:2
10
作者 王玉霞 胡基华 +6 位作者 刘宇帅 姜威 利强 李晶 曹旭 陈静宇 张淑梅 《核农学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期1873-1880,共8页
为了提高生防菌株wswshg-10低温生长速度和抑菌活性,采用常压室温等离子体诱变技术(ARTP)对其进行诱变选育。结果表明,最佳照射时间为120 s,此时菌株致死率为95.4%,单菌落变大的突变率为24.5%。经低温平板培养和抑菌活性测定,从19个... 为了提高生防菌株wswshg-10低温生长速度和抑菌活性,采用常压室温等离子体诱变技术(ARTP)对其进行诱变选育。结果表明,最佳照射时间为120 s,此时菌株致死率为95.4%,单菌落变大的突变率为24.5%。经低温平板培养和抑菌活性测定,从19个大菌落的菌株中筛选出2株低温生长速度和抑菌活性明显高于出发菌株的突变菌株WM4和WM7,其低温(15℃)生长速度分别是出发菌株的1.94倍和2.09倍,平板抑菌活性分别较出发菌株高26.2%和29.8%。传代培养10代,2株突变菌株在低温生长速度和抑菌活性方面均表现出良好的遗传稳定性。突变菌株WM7对玉米茎基腐病的温室防效为70.8%,比出发菌株高15.1%。本研究结果为适于低温地区生物农药的研发提供了菌株资源。 展开更多
关键词 低温生防菌株 常压室温等离子体 诱变 生防效果
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等离子体法诱变淡紫拟青霉产几丁质酶菌种的筛选 预览
11
作者 谷军 张晓彦 +1 位作者 利强 沙长青 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期28-32,共5页
采用菌株诱变技术,提高生防用淡紫拟青霉菌株产几丁质酶的能力。通过常温常压等离子体诱变技术(MPMS)对淡紫拟青霉进行诱变育种处理,对处理的菌种先采用透明圈法进行初筛,然后采用发酵方法进行复筛。采用MPMS法诱变淡紫拟青霉产几丁... 采用菌株诱变技术,提高生防用淡紫拟青霉菌株产几丁质酶的能力。通过常温常压等离子体诱变技术(MPMS)对淡紫拟青霉进行诱变育种处理,对处理的菌种先采用透明圈法进行初筛,然后采用发酵方法进行复筛。采用MPMS法诱变淡紫拟青霉产几丁质酶菌种时,温度25℃,处理时间30 s,样品处理量60μL,诱变菌的致死率为30.33%时,正突变率为14%。采用摇瓶分批发酵培养,诱变菌种的几丁质酶活为0.17 U/mL。结果表明,经过对淡紫拟青霉的诱变处理,获得高活性几丁质酶产生菌株,几丁质酶酶活提高180%。 展开更多
关键词 淡紫拟青霉 诱变育种 等离子体法诱变育种技术
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解淀粉芽胞杆菌TF28产抗菌脂肽培养基优化 预览 被引量:1
12
作者 刘宇帅 利强 +5 位作者 陈静宇 姜威 曹旭 胡基华 李晶 张淑梅 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期52-58,共7页
采用响应面方法对解淀粉芽胞杆菌TF28产抗菌脂肽培养基进行优化,以提高其产量。利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响抗菌脂肽产量的3个主要因素:葡萄糖、硫酸镁和磷酸氢二钠。通过最陡爬坡试验逼近最大响应值区域,利用响应面分析方... 采用响应面方法对解淀粉芽胞杆菌TF28产抗菌脂肽培养基进行优化,以提高其产量。利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响抗菌脂肽产量的3个主要因素:葡萄糖、硫酸镁和磷酸氢二钠。通过最陡爬坡试验逼近最大响应值区域,利用响应面分析方法确定显著组份的最佳水平。结果表明,优化后的培养基组份为葡萄糖42.37 g/L,酵母膏2 g/L,牛肉膏2 g/L,硫酸铵2 g/L,硫酸镁2.11 g/L,氯化钙0.1 g/L,硫酸锰0.1 g/L,磷酸二氢钾1.5 g/L,磷酸氢二钠3 g/L,经3次平行试验验证,抗菌脂肽产量为1.75 g/L,比优化前提高了5.25倍。该研究优化了解淀粉芽胞杆菌TF28提高抗菌脂肽产量的培养基,为抗菌脂肽的生产奠定基础。 展开更多
关键词 解淀粉芽胞杆菌 抗菌脂肽 培养基优化
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榆紫叶甲病原菌分离及生防菌的筛选与鉴定 预览
13
作者 胡基华 陈静宇 +5 位作者 曹旭 姜威 刘宇帅 利强 李晶 张淑梅 《安徽农业科学》 CAS 2017年第11期3-6,共4页
[目的]探寻防治榆紫叶甲病的生防菌株。[方法]从榆紫叶甲虫体上分离菌株后进行培养,并对室内饲养的榆紫叶甲各龄幼虫进行致病性试验。[结果]从感病榆紫叶甲成虫虫体上分离到18个菌株,其中12个菌株具有几丁质和蛋白质降解活性。5个菌株对... [目的]探寻防治榆紫叶甲病的生防菌株。[方法]从榆紫叶甲虫体上分离菌株后进行培养,并对室内饲养的榆紫叶甲各龄幼虫进行致病性试验。[结果]从感病榆紫叶甲成虫虫体上分离到18个菌株,其中12个菌株具有几丁质和蛋白质降解活性。5个菌株对1~2龄幼虫表现出不同程度的致病力,在接种后1~3 d幼虫开始死亡,处理后7 d幼虫的累积死亡率为21.2%~46.8%,其中YJA-03和YJA-10菌株的累积死亡率〉30.0%。YJA-03菌株为革兰氏阳性菌,经过形态学、生理生化特性和PCR扩增鉴定确定它属于短杆菌属(Exiguobacterium)。YJA-10菌株为革兰氏阴性菌,经鉴定其属于Glutamicibacter属。[结论]YJA-03和YJA-10菌株可用作防治榆紫叶甲病的生防菌。 展开更多
关键词 榆紫叶甲 生物防治 菌株分离 生理生化特性
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解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌蛋白AP1的表达、纯化与抑菌活性 被引量:1
14
作者 姜威 李晶 +4 位作者 利强 胡基华 刘宇帅 陈静宇 张淑梅 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期3083-3087,共5页
本研究采用人工合成方法合成抗菌蛋白基因A肼,连接到pET32a(+)表达载体,导入E.coli BL21菌株进行原核表达,表达产物经HIS柱纯化和肠激酶切割后测定抑菌活性。人工合成了分子量为321bp的抗菌蛋白基因AP1,获得了pET32a(+)-AP1-B... 本研究采用人工合成方法合成抗菌蛋白基因A肼,连接到pET32a(+)表达载体,导入E.coli BL21菌株进行原核表达,表达产物经HIS柱纯化和肠激酶切割后测定抑菌活性。人工合成了分子量为321bp的抗菌蛋白基因AP1,获得了pET32a(+)-AP1-BL21基因工程菌株,该菌株在0.1mmol/L IPTG,25℃诱导2h,蛋白表达率为43.2%,HIS柱纯化后获得SDS-PAGE电泳一条带分子量为27kD的融合蛋白,其含量为124.82mg/L,收率为92%,肠激酶切割后的蛋白能抑制大豆根腐病菌和水稻恶苗病菌的生长。获得高效表达抗菌蛋白AP1的工程菌株,该菌株表达的抗菌蛋白纯化后具有抑菌活性,在植病生防方面具有应用潜力。 展开更多
关键词 BACILLUS amyloliquefaciens TF28 抗菌蛋白AP1 表达纯化 抑菌活性
刺五加立枯病内生生防菌株的筛选 预览
15
作者 姜威 李晶 +1 位作者 利强 张淑梅 《黑龙江科学》 2016年第16期8-9,共2页
从健康刺五加植株的根、茎、叶中分离内生细菌,并对刺五加立枯病有拮抗作用的生防菌株进行了筛选。结果从刺五加各组织中共分离了48株内生菌,经鉴定分属于芽孢杆菌属、假单孢菌属、黄单孢菌属及短小杆菌属。其中有4株内生细菌对刺五加... 从健康刺五加植株的根、茎、叶中分离内生细菌,并对刺五加立枯病有拮抗作用的生防菌株进行了筛选。结果从刺五加各组织中共分离了48株内生菌,经鉴定分属于芽孢杆菌属、假单孢菌属、黄单孢菌属及短小杆菌属。其中有4株内生细菌对刺五加立枯病有拮抗作用,具有作为生防菌的潜能。 展开更多
关键词 刺五加 内生细菌 拮抗作用
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薄皮甜瓜采后病害生防菌株的安全性研究 预览 被引量:1
16
作者 曹旭 陈静宇 +5 位作者 胡基华 姜威 刘宇帅 利强 张淑梅 李晶 《微生物前沿》 2016年第4期66-70,共5页
目的:研究对薄皮甜瓜采后病害具有防治作用的生防菌株浅黄假单胞菌的安全性,为微生物农药的开发提供安全的微生物资源。方法:将浅黄假单胞菌(Pseudomonas luteola)以3 &#215;109 cfu/mL的最大浓度、0.4 mL/10 g的最大体积,对小鼠二... 目的:研究对薄皮甜瓜采后病害具有防治作用的生防菌株浅黄假单胞菌的安全性,为微生物农药的开发提供安全的微生物资源。方法:将浅黄假单胞菌(Pseudomonas luteola)以3 &#215;109 cfu/mL的最大浓度、0.4 mL/10 g的最大体积,对小鼠二次灌胃给药,测定半数致死量和最大耐受量。结果:观察21 d,20只小鼠均状态良好,未出现任何不适现象,皮毛光亮、活动正常、摄食正常、无腹泻发生,无死亡病例。结论:该受试样品作为微生物农药使用是安全的。 展开更多
关键词 浅黄假单孢菌 急性毒性 安全性
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寒地耐冷生防菌株筛选鉴定及特性研究 预览 被引量:5
17
作者 王玉霞 姜威 +6 位作者 刘宇帅 利强 李晶 曹旭 胡基华 陈静宇 张淑梅 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期31-38,共8页
试验分离鉴定黑龙江省鹤岗地区玉米根围冻土中生防菌株wswshg-10,并检测其低温生长特性、分泌活性物质能力、拮抗病原菌活性及催芽促生特性。综合形态和理化特性、16S r DNA和gyr B基因序列分析将其鉴定为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus me... 试验分离鉴定黑龙江省鹤岗地区玉米根围冻土中生防菌株wswshg-10,并检测其低温生长特性、分泌活性物质能力、拮抗病原菌活性及催芽促生特性。综合形态和理化特性、16S r DNA和gyr B基因序列分析将其鉴定为甲基营养型芽孢杆菌Bacillus me thylotrophicus。该菌株在4-15℃低温及20-30℃常温范围内可正常生长,是一株耐冷生防菌株,分泌几丁质酶、纤维素酶、蛋白酶、嗜铁素、吲哚乙酸、抗菌蛋白等多种活性物质,抑制烟草角斑病菌、玉米茎基腐病菌、黄瓜枯萎病菌、大豆菌核病菌、水稻恶苗和稻曲病菌、番茄灰霉病菌以及刺五加根腐病菌生长,抑制率74.3%-89.2%。菌液处理玉米种子能促进种子萌发及幼苗生长,根长和茎长显著增加。该菌株具有低温生长、抗菌促生特性,为低温菌剂研发提供菌株资源。 展开更多
关键词 寒地 耐冷生防菌 鉴定 特性
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枯草芽孢杆菌B91产芽孢发酵条件优化 预览 被引量:2
18
作者 陈静宇 李晶 +1 位作者 张淑梅 利强 《黑龙江科学》 2016年第12期1-3,8共4页
在三角瓶培养条件下,采用单因素实验对枯草芽孢杆菌B91发酵条件装液量、起始p H值及温度进行了优化。在此基础上进行了响应面分析,获得了响应面回归模型,模型拟合良好,确定了菌株B91最佳的产孢发酵条件为装液量44.7 mL、初始pH8.3、温度... 在三角瓶培养条件下,采用单因素实验对枯草芽孢杆菌B91发酵条件装液量、起始p H值及温度进行了优化。在此基础上进行了响应面分析,获得了响应面回归模型,模型拟合良好,确定了菌株B91最佳的产孢发酵条件为装液量44.7 mL、初始pH8.3、温度31.5℃。在最优条件下发酵培养,芽孢浓度为44.89亿±0.29亿/mL,较优化前提高了36.4%。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 芽孢 响应面 发酵条件 优化
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烟草野火病与角斑病生防菌株的筛选 预览 被引量:1
19
作者 刘宇帅 张淑梅 +5 位作者 曹旭 胡基华 姜威 利强 陈静宇 李晶 《黑龙江科学》 2016年第12期11-13,共3页
本研究通过室内平板拮抗作用实验,筛选对烟草细菌病害具有较好防治作用的生防菌株,并对其拮抗作用及复合菌剂进行研究。筛选到一株对烟草野火病菌具有拮抗作用的生防菌株CZS,抑菌圈平均直径为25.92mm;一株对烟草角斑病菌具有拮抗作用的... 本研究通过室内平板拮抗作用实验,筛选对烟草细菌病害具有较好防治作用的生防菌株,并对其拮抗作用及复合菌剂进行研究。筛选到一株对烟草野火病菌具有拮抗作用的生防菌株CZS,抑菌圈平均直径为25.92mm;一株对烟草角斑病菌具有拮抗作用的生防菌株18,抑菌圈平均直径为28.76mm。此外,通过不同配比复合菌剂的抑菌实验表明,无论是针对野火病菌还是角斑病菌,生防细菌CZS、18以2:1配比而得的复合菌剂抑菌效果最明显。 展开更多
关键词 烟草细菌病害 生防菌 筛选 拮抗作用
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解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌蛋白基因TasA克隆与表达
20
作者 张淑梅 姜威 +5 位作者 利强 刘宇帅 曹旭 胡基华 李晶 高娃 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期130-135,共6页
[目的]克隆解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌蛋白基因Tas A并进行原核表达和抑菌活性研究。[方法]采用PCR方法扩增抗菌蛋白基因Tas A,连接p ET22b载体,导入E.coliBL21(DE3)菌株,进行IPTG低温诱导表达,用His柱纯化表达产物,采用纸片方法测定其... [目的]克隆解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌蛋白基因Tas A并进行原核表达和抑菌活性研究。[方法]采用PCR方法扩增抗菌蛋白基因Tas A,连接p ET22b载体,导入E.coliBL21(DE3)菌株,进行IPTG低温诱导表达,用His柱纯化表达产物,采用纸片方法测定其抑菌活性。[结果]从解淀粉芽孢杆菌TF28中克隆了抗菌蛋白基因TasA,以pET22b为表达载体构建高效表达抗菌蛋白Tas A的基因工程菌株,该菌株在0.05 mmol/LIPTG 15℃诱导4 h,TasA蛋白表达率为34.2%,经His柱纯化后获得SDS-PAGE电泳一条带的纯化TasA蛋白,其含量为67.8 mg/L,收率为90.8%。该蛋白抑制番茄灰霉病和叶霉病、玉米茎基腐病和水稻稻曲病菌生长。[结论]实现抗菌蛋白基因Tas A的原核表达,表达率34.2%,表达蛋白具有广谱抑菌活性,在植病生防方面具有应用潜力。 展开更多
关键词 BACILLUS amyloliquefaciens TF28 抗菌蛋白基因TasA 表达纯化 抑菌活性
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