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利用CRISPR/Cas9双基因敲除系统初步解析大豆GmSnRK1.1和GmSnRK1.2对ABA及碱胁迫的响应 预览 被引量:2
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作者 李慧卿 陈超 +4 位作者 陈冉冉 宋雪 李佶娜 朱延明 丁晓东 《遗传》 CSCD 北大核心 2018年第6期496-507,共12页
蔗糖非发酵相关激酶(sucrose non-fermenting related protein kinases,Sn RKs)是广泛存在于植物中的一类Ser/Thr蛋白激酶,在植物的生长、发育、代谢和抗逆等方面具有重要调节作用。大豆(Glycine max L.)基因组中含有4个Sn RK1同源... 蔗糖非发酵相关激酶(sucrose non-fermenting related protein kinases,Sn RKs)是广泛存在于植物中的一类Ser/Thr蛋白激酶,在植物的生长、发育、代谢和抗逆等方面具有重要调节作用。大豆(Glycine max L.)基因组中含有4个Sn RK1同源基因,其中GmSnRK1.1和GmSnRK1.2为两个主要表达基因,可能参与大豆多种抗逆途径。为解析大豆GmSnRK1.1和GmSnRK1.2对ABA及碱胁迫的响应,本研究构建了双靶点CRISPR载体定向敲除GmSnRK1.1和GmSnRK1.2基因,利用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导大豆遗传转化,获得双基因敲除突变体毛状根,经测序鉴定双基因突变率为48.6%;同时,利用实验室前期构建的植物超量表达载体获得超量表达GmSnRK1基因大豆毛状根。经25μmol/L ABA处理15 d,对照组和超量表达毛状根的生长受到明显抑制,其根长与根鲜重均显著低于双基因敲除突变体毛状根;经50 mmol/L Na HCO3处理15 d,对照组和双基因敲除突变体毛状根的生长受到明显抑制,其根长与根鲜重均显著低于超量表达毛状根。本研究建立的CRISPR/Cas9系统能够有效地对大豆进行GmSnRK1.1和GmSnRK1.2双基因敲除,基因敲除突变降低了植物对ABA的敏感性及对碱胁迫的耐性,研究结果初步说明Sn RK1激酶在植物响应非生物胁迫中具有重要作用。 展开更多
关键词 大豆 CRISPR/Cas9 GmSnRK1.1 GmSnRK1.2 ABA信号 碱胁迫
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未成年人违法犯罪现象探究 预览
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作者 宋雪 《黑龙江省政法管理干部学院学报》 2018年第3期47-50,共4页
未成年人违法犯罪一直是近年来社会上的热点话题,违法犯罪低龄化现象日益凸显,通过对未成年违法犯罪现状、立法缺陷、国外相关对策及国内新措施进行分析,有助于应对我国关于如何预防和控制未成年人违法犯罪行为的研究过程中出现的问题.
关键词 未成年人违法犯罪 行拘执行年龄 恶意补足年龄 警司警诫制度
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磺胺和四环素类抗生素对大肠杆菌联合突变效应的研究
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作者 宋雪 马清萍 +3 位作者 于洋 宋春磊 林志芬 张饮江 《生态毒理学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期110-117,共8页
抗生素的滥用造成的环境安全问题已不可忽视,关于抗生素联合毒性效应研究较多,但联合突变效应研究较少。因此,本文以大肠杆菌为受试生物,研究了2种磺胺类抗生素(磺胺氯哒嗪(SCP)、磺胺二甲嘧啶(SMZ))和3种四环素类抗生素(二甲胺... 抗生素的滥用造成的环境安全问题已不可忽视,关于抗生素联合毒性效应研究较多,但联合突变效应研究较少。因此,本文以大肠杆菌为受试生物,研究了2种磺胺类抗生素(磺胺氯哒嗪(SCP)、磺胺二甲嘧啶(SMZ))和3种四环素类抗生素(二甲胺四环素(MH)、盐酸四环素(TH)和盐酸强力霉素(DH))单一及联合暴露时对大肠杆菌的突变效应。结果表明:在单一暴露下,磺胺类抗生素会促进大肠杆菌的突变效应,四环素类抗生素没有明显的促进作用;联合暴露下,磺胺类抗生素对大肠杆菌突变效应为相加,磺胺和四环素类抗生素对大肠杆菌突变效应为拮抗。本研究初步探索了抗生素对大肠杆菌的联合致突变风险,为今后环境中抗生素混合暴露的生态风险评价和抗生素污染控制标准制定提供一种理论支撑。 展开更多
关键词 磺胺 四环素 大肠杆菌 联合突变效应
全文增补中
碱胁迫相关基因GsWRKY15的克隆及其转基因苜蓿的耐碱性分析 预览 被引量:3
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作者 朱娉慧 陈冉冉 +6 位作者 于洋 宋雪 李慧卿 杜建英 李强 丁晓东 朱延明 《作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1319-1327,共9页
WRKY蛋白属于锌指型转录调控因子,能够参与植物多种逆境响应。本研究利用前期野生大豆盐碱胁迫RNA-seq测序数据,从构建的碱胁迫基因调控网络中筛选并克隆到GsWRKY15基因。分析GsWRKY15在碱胁迫下野生大豆根中的表达模式,发现该基因受碱... WRKY蛋白属于锌指型转录调控因子,能够参与植物多种逆境响应。本研究利用前期野生大豆盐碱胁迫RNA-seq测序数据,从构建的碱胁迫基因调控网络中筛选并克隆到GsWRKY15基因。分析GsWRKY15在碱胁迫下野生大豆根中的表达模式,发现该基因受碱胁迫诱导显著上调表达,且在胁迫后1h表达量最高。分析GsWRKY15基因在野生大豆各组织中的表达特异性,发现该基因在各组织中均有表达,花中表达量最高。采用根癌农杆菌侵染苜蓿子叶节方法,将GsWRKY15转化肇东苜蓿,获得39株抗性植株。通过PCR、Southernblot和RT-PCR方法分析抗性植株,获得了超量表达GsWRKY15基因的转基因株系并对其进行了耐碱性分析。在150mmolL–1NaHCO3处理2周后转基因苜蓿生长状态良好,而非转基因苜蓿出现萎蔫、变黄,甚至死亡;非转基因苜蓿的相对质膜透性和丙二醛含量显著高于转基因苜蓿,而叶绿素含量显著低于转基因苜蓿;同时分析碱胁迫下转基因植株中胁迫相关基因的表达模式,发现H+-Ppase、NADP-ME、KIN1、RD29A基因的表达量高于非转基因苜蓿。结果表明GsWRKY15基因的超量表达能够显著增强苜蓿的耐碱能力。 展开更多
关键词 野生大豆 GsWRKY15 肇东苜蓿 农杆菌 耐碱性
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碱胁迫应答基因GsARHP的克隆及转基因紫花苜蓿的耐碱性分析 预览 被引量:2
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作者 陈冉冉 朱娉慧 +6 位作者 贾博为 宋雪 王子君 李佶娜 李强 丁晓东 朱延明 《草业学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期92-103,共12页
本研究基于实验室前期野生大豆碱胁迫转录组数据,筛选出一个碱胁迫下上调表达的假定蛋白基因,暂命名为GsARHP(alkali stress related hypothetical protein gene)。首先利用Real-time PCR方法验证了GsARHP基因受碱胁迫诱导表达。生物... 本研究基于实验室前期野生大豆碱胁迫转录组数据,筛选出一个碱胁迫下上调表达的假定蛋白基因,暂命名为GsARHP(alkali stress related hypothetical protein gene)。首先利用Real-time PCR方法验证了GsARHP基因受碱胁迫诱导表达。生物信息学分析表明,该基因编码一个含有130个氨基酸的亲水蛋白,含有信号肽但无跨膜结构域;构建了GsARHP植物超量表达载体,利用农杆菌介导的子叶节侵染法转化肇东紫花苜蓿,通过PCR,Southern Blot和RT-PCR方法检测获得了3个超量表达GsARHP基因的转基因株系,并对其耐碱性进行了分析。结果表明,在0,100和150mmol/L NaHCO3处理14d后,非转基因株系明显萎蔫、黄化甚至死亡,而转基因株系则长势良好;进一步分析其生理指标显示,相对质膜透性与丙二醛含量均显著低于非转基因株系(P〈0.01),而叶绿素含量与CAT活性显著高于非转基因株系(P〈0.01),说明GsARHP基因的超量表达可以增强紫花苜蓿的耐碱能力。 展开更多
关键词 野生大豆 GsARHP基因 碱胁迫 紫花苜蓿 遗传转化
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产业用纺织品特点及与传统纺织品的区别 预览
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作者 宋雪 郝燕 姚冰坤 《辽宁丝绸》 2016年第3期26-26,28共2页
纺织品可分为服用、装饰用和产业用纺织品三大类。近年来,产业用纺织品发展迅速,是人们生活中不可或缺的一部分。产业用纺织品可作为其他产品的一个组成部分,直接对产品产生影响;可作为加工其他产品过程中使用的一个部件;可单独用来执... 纺织品可分为服用、装饰用和产业用纺织品三大类。近年来,产业用纺织品发展迅速,是人们生活中不可或缺的一部分。产业用纺织品可作为其他产品的一个组成部分,直接对产品产生影响;可作为加工其他产品过程中使用的一个部件;可单独用来执行一种或几种功能。产业用纺织品的种类繁多,涉及范围极其广泛,在工业、农业、交通运输、石油、化工、国防、城市建设等多领域中均有应用。 展开更多
关键词 产业用纺织品 分类 特点
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小麦温敏不育系BNS366育性转换的敏感期研究 预览
7
作者 周美兰 宋雪 +4 位作者 朱潇 杨庚武 孔得群 贺晓敏 茹振刚 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期7-15,共9页
为了确定BNS366育性转换的敏感时期和温光阈值,探寻杂交制种最佳时空区域,2011-2013年度在长沙进行了分期播种,研究了BNS366群体不同生育时期的气象因子与花粉败育率、自交不育度和自交实粒数等性状的相关关系。结果表明,播种-分蘖盛期... 为了确定BNS366育性转换的敏感时期和温光阈值,探寻杂交制种最佳时空区域,2011-2013年度在长沙进行了分期播种,研究了BNS366群体不同生育时期的气象因子与花粉败育率、自交不育度和自交实粒数等性状的相关关系。结果表明,播种-分蘖盛期的气温与育性呈极显著相关;拔节始期-孕穗始期的日平均气温、日最低气温和日长也与育性呈极显著相关。即BNS366育性受到播种-分蘖盛期和拔节始期-孕穗始期温光因子的影响。播种-分蘖盛期的日平均气温为17.1-21.7℃不育,日平均气温为14.0-16.2℃育性转换,日平均气温为5.5-6.2℃可育。BNS366育性转换的敏感时期为群体拔节始期-孕穗始期,即小花原基分化期-药隔形成期。育性转换的温光阈值:日平均气温6.6-8.10℃,日长10.92-11.18h不育;日平均气温8.13-10.72℃,日长11.40-11.53h育性转换;日平均气温15.5-18.4℃,日长11.75-12.33h完全可育。 展开更多
关键词 小麦 温敏不育 敏感时期 临界温度 临界日长 BNS366
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小麦温敏不育系BNS366育性研究 预览 被引量:3
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作者 周美兰 扬庚武 +4 位作者 孔得群 宋雪 朱潇 贺晓敏 茹振刚 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1303-1311,共9页
为了揭示小麦温敏不育系BNS366的育性转换规律,为不育系的转育及杂种优势利用提供依据,于2011-2013年度连续2年采用大田分期播种试验分析了BNS366、BNS、矮抗58和扬麦13的育性特点。结果表明,随着播种期的推迟,BNS366表现出规律性育性... 为了揭示小麦温敏不育系BNS366的育性转换规律,为不育系的转育及杂种优势利用提供依据,于2011-2013年度连续2年采用大田分期播种试验分析了BNS366、BNS、矮抗58和扬麦13的育性特点。结果表明,随着播种期的推迟,BNS366表现出规律性育性转换特征。9月23日至10月17日播种,花粉败育率为99.77%~100%,自交不育度为99.21%~99.81%,每穗自交实粒数为0.10~0.51。10月25日播种,花粉败育率为91.78%~98.89%,自交不育度为92.86%~94.96%,每穗自交结实粒数为3.20~4.37,12月4日播种可育。BNS366具有两个育性转换的临界期,10月25日播期为不育变为高度不育的育性转换临界期,12月4日播期为半不育转换为可育的育性转换临界期,不育期花粉以典型败育为主。BNS366可以作为小麦杂种优势利用新的不育系。 展开更多
关键词 小麦 温敏不育系 育性转换 花粉育性 自交结实率
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辽宁省农村会计人员执业现状调查研究 预览
9
作者 宋雪 何睿 +1 位作者 浦宝婧 耿黎 《现代商业》 2014年第27期229-230,共2页
会计的基本职能为反映和监督,党的十八大以来,农业、农村、农民问题的受重视程度大幅度提高,农村会计人员是否真的能够有效的发挥其职能,对乡村自治及农民专业合作社的发展中起着重要的作用。本文主要针对农村会计人员的执业现状进行了... 会计的基本职能为反映和监督,党的十八大以来,农业、农村、农民问题的受重视程度大幅度提高,农村会计人员是否真的能够有效的发挥其职能,对乡村自治及农民专业合作社的发展中起着重要的作用。本文主要针对农村会计人员的执业现状进行了调查,通过调查发现了农村会计人员执业的一些特点如受教育程度不高、年龄偏大等,并结合目前辽宁省村级财务管理现行体制进行了原因分析,最后制度建设、待遇提高和加强培训等方面提出了优化农村会计人员队伍的对策建议。 展开更多
关键词 农村会计人员 执业状况 调查分析
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外科护理学试卷不同出题方式的质量评价 预览
10
作者 郭蕾蕾 张林 +1 位作者 刘堃 宋雪 《护理研究:上旬版》 2011年第6期 1480-1481,共2页
[目的]比较分析不同出题方式对我院外科护理学试卷质量的影响,为外科护理学试卷质量评价和出题提供参考。[方法]整群抽取辽宁医学院2005级、2006级本科外科护理学试卷249份,其中2005级采取教师出题,2006级采取题库抽题,应用试卷分析中... [目的]比较分析不同出题方式对我院外科护理学试卷质量的影响,为外科护理学试卷质量评价和出题提供参考。[方法]整群抽取辽宁医学院2005级、2006级本科外科护理学试卷249份,其中2005级采取教师出题,2006级采取题库抽题,应用试卷分析中的相关评价指标,对题库抽题和教师出题的试卷质量进行比较分析。[结果]题库抽题比教师出题试卷考点有所增加,试卷分数分布存在差异性;各分数段不同出题方式人数分布具有差异性;难易度总体升高,区分度差的题比例大幅下降;信度变化不大;效度部分降低。[结论]应积极探索题库出题的考核方式,规范管理,加强题库建设。 展开更多
关键词 外科护理学 教师出题 题库抽题 试卷质量
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开发客户的酸与甜
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作者 宋雪 《中国石油石化》 2010年第23期 I0054-I0055,共2页
“您好,王主任,我是中国石油第33加油站的小宋。我在您的楼下,能跟您见个面吗?”“对不起,我马上去开会。”10月27日是我休班的日子,本来约好与某染料厂的王主任谈办理加油卡的事情,
关键词 客户 开发 中国石油 加油站 加油卡 染料厂 主任
试析张爱玲小说中的女性意识 预览
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作者 宋雪 《广东蚕业》 2017年第7期78-78,共1页
张爱玲是我国现代著名女作家,因其作品大多被翻拍为影视剧而家喻户晓.与同时期的作家相比,张爱玲的言情小说并非单纯的歌颂爱情,更多的是对男权社会下女性心理的揭露,由此流露出作者本人乃至社会部分女性自我意识的觉醒.下面,笔者将结... 张爱玲是我国现代著名女作家,因其作品大多被翻拍为影视剧而家喻户晓.与同时期的作家相比,张爱玲的言情小说并非单纯的歌颂爱情,更多的是对男权社会下女性心理的揭露,由此流露出作者本人乃至社会部分女性自我意识的觉醒.下面,笔者将结合张爱玲的优秀言情小说作品,探讨其作品中的女性意识. 展开更多
关键词 张爱玲 小说 男权社会 女性意识
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应用SILAC方法发掘2个萜类物质诱导A549细胞凋亡的新机制
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作者 孙雄华 徐素雅 +1 位作者 宋雪 蒋小岗 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第10期1083-1083,共1页
目的探讨蓝萼甲素、冬凌草甲素诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的新机制。方法蓝萼甲素、冬凌草处理A549细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,并采用蛋白免疫印迹法检测cleaved PARP表达;应用稳定同位素标记氨基酸细胞培养(SILAC)定量蛋白质组学方... 目的探讨蓝萼甲素、冬凌草甲素诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的新机制。方法蓝萼甲素、冬凌草处理A549细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率,并采用蛋白免疫印迹法检测cleaved PARP表达;应用稳定同位素标记氨基酸细胞培养(SILAC)定量蛋白质组学方法分析蓝萼甲素、冬凌草甲素诱导A549细胞凋亡后蛋白质差异表达谱,并验证差异蛋白表达情况;蓝萼甲素联合应用自噬抑制剂、冬凌草甲素结合ADRM1过表达作用于A549细胞后细胞凋亡情况。结果蓝萼甲素、冬凌草甲素作用于A549细胞后,结果显示给药组细胞凋亡率、cleaved PARP蛋白表达明显上升;蓝萼甲素、冬凌草甲素诱导A549细胞凋亡后均约有150个蛋白表达发生显著变化,所选择验证的m TOR与ADRM1的蛋白免疫印迹结果与组学分析结果是一致的;联合应用蓝萼甲素和自噬抑制剂、冬凌草甲素结合ADRM1过表达作用A549细胞后,细胞存活率进一步下降,cleaved PARP表达水平进一步增加。结论基于组学分析手段可深入发掘2个萜类物质诱导A549细胞凋亡的机制,为肺腺癌化疗提供潜在靶标。 展开更多
关键词 蓝萼甲素 冬凌草甲素 A549细胞 细胞凋亡 mTOR ADRM1 SILAC
花青素转录因子调控机制及代谢工程研究进展
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作者 宋雪 魏解冰 +1 位作者 狄少康 庞永珍 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期133-156,共24页
花青素是广泛存在于植物中的一类重要的类黄酮化合物,在植物生长发育和人类营养保健方面具有重要价值。花青素的生物合成途径已经解析得比较清楚,但花青素的代谢调控网络还在不断完善。调控花青素生物合成的转录因子主要包括MYB、bHLH和... 花青素是广泛存在于植物中的一类重要的类黄酮化合物,在植物生长发育和人类营养保健方面具有重要价值。花青素的生物合成途径已经解析得比较清楚,但花青素的代谢调控网络还在不断完善。调控花青素生物合成的转录因子主要包括MYB、bHLH和WD40三大类,这些转录因子通过激活或抑制CHS、ANS和DFR等花青素途径关键结构基因的表达水平,进而决定花青素积累的部位与水平。该文结合国内外花青素生物合成与转录调控方面的研究进展,简要介绍了花青素的生物合成途径,归纳总结了模式植物中花青素代谢调控的分子机理,尤其是MYB、bHLH和WD40三类主要转录因子的调控机理,以及这些转录因子在观赏植物和水果等经济作物花青素代谢工程中的应用。该文将为系统阐明花青素的转录调控机制和利用代谢工程改良花青素的相关研究提供有益参考。 展开更多
关键词 花青素 转录因子 转录调控 代谢工程
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