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口蹄疫病毒A-O型多表位二价融合抗原的构建及其在小鼠模型中的免疫学功能
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作者 雷垚 邵军军 +2 位作者 赵付荣 常惠 张永光 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期135-143,共9页
为了研制广谱高效的新型口蹄疫病毒(FMDV) A-O型重组多表位二价疫苗,以结核分支杆菌热休克蛋白70(mHSP70)的C端肽结合区作为多表位免疫原的载体蛋白,将A型和O型FMDV代表性毒株VP1上的B细胞表位以及非结构蛋白3A上的T细胞表位基因进行串... 为了研制广谱高效的新型口蹄疫病毒(FMDV) A-O型重组多表位二价疫苗,以结核分支杆菌热休克蛋白70(mHSP70)的C端肽结合区作为多表位免疫原的载体蛋白,将A型和O型FMDV代表性毒株VP1上的B细胞表位以及非结构蛋白3A上的T细胞表位基因进行串联合成后与mHSP70的肽结合区编码基因相连接,构建重组质粒pAO-HSP,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。重组蛋白经过纯化和鉴定后免疫BALB/c小鼠,检测相应的体液免疫应答和细胞免疫应答。结果显示:重组蛋白pAO-HSP在BL21(DE3)中能够以可溶性形式表达,纯化后经Western blot检测能够与感染了A型和O型FMDV猪的阳性血清发生特异性反应,并能够刺激小鼠产生抗A-O型FMDV特异性抗体。免疫后小鼠的脾淋巴细胞在A型、O型灭活FMDV刺激后,均出现显著的增殖现象,同时可以产生相关的Th1或Th2型细胞因子。本研究成功构建重组抗原pAO-HSP,并在小鼠模型中初步显示出了良好的免疫效果,为新型FMDV A-O型多表位二价疫苗的研发奠定基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 表位疫苗 mHSP70 载体蛋白 小鼠模型
非洲猪瘟诊断技术研究进展 预览
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作者 高瞻 张光磊 +1 位作者 邵军军 常惠 《中国动物检疫》 CAS 2019年第9期63-68,共6页
非洲猪瘟是猪的一种急性、高度接触性传染病,致死率可达100%。本文综述了非洲猪瘟病原学和血清学诊断技术研究进展,包括红细胞吸附试验(HAD)、聚合酶链反应技术(PCR)、环介导恒温扩增技术(LAMP)、荧光抗体技术(FAT)、酶联免疫吸附试验(E... 非洲猪瘟是猪的一种急性、高度接触性传染病,致死率可达100%。本文综述了非洲猪瘟病原学和血清学诊断技术研究进展,包括红细胞吸附试验(HAD)、聚合酶链反应技术(PCR)、环介导恒温扩增技术(LAMP)、荧光抗体技术(FAT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和胶体金快速免疫层析技术(GICA)等,并对各种方法的优缺点进行简要汇总分析,总结认为今后非洲猪瘟诊断的发展趋势在于不同诊断技术的联合应用。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 诊断技术 研究进展 联合诊断
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口蹄疫病毒感染中乳鼠epsilon干扰素mRNA转录水平的实时荧光定量PCR检测
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作者 李世芳 赵付荣 +1 位作者 邵军军 常惠 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第3期269-274,共6页
利用3~4日龄的乳鼠作为研究对象,在口蹄疫病毒(FMDV)MYA/98株攻毒后第0、5、10小时及濒临死亡期(第15小时)收集其肠道组织并提取RNA,用实时荧光定量PCR检测乳鼠IFN-ε表达量在感染前后及不同时间段的变化。结果显示,IFN-ε表达量... 利用3~4日龄的乳鼠作为研究对象,在口蹄疫病毒(FMDV)MYA/98株攻毒后第0、5、10小时及濒临死亡期(第15小时)收集其肠道组织并提取RNA,用实时荧光定量PCR检测乳鼠IFN-ε表达量在感染前后及不同时间段的变化。结果显示,IFN-ε表达量在乳鼠感染FMDV前后以及不同时间段并没有发生明显的变化。本研究结果为进一步了解Ⅰ型干扰素的不同亚型及其在抗口蹄疫病毒感染中的作用提供了实验数据。 展开更多
关键词 干扰素 乳鼠 IFN-ε 荧光定量PCR
牛病毒性腹泻疫苗的研究进展 被引量:1
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作者 李世芳 龚美娇 +1 位作者 邵军军 常惠 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期828-832,共5页
牛病毒性腹泻(bovine viral diarrhea,BVD)作为一种病毒性腹泻黏膜病,给养殖业造成了巨大的经济损失,应用疫苗来防控牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)依然是重要的方法。直至目前,我国还没有成熟的BVDV疫... 牛病毒性腹泻(bovine viral diarrhea,BVD)作为一种病毒性腹泻黏膜病,给养殖业造成了巨大的经济损失,应用疫苗来防控牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)依然是重要的方法。直至目前,我国还没有成熟的BVDV疫苗,本研究主要综述了近几年来国外BVDV疫苗的研究进展,旨在为国内BVDV疫苗的研制及应用提供参考。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻 预防 新型疫苗
细胞因子佐剂研究进展 预览 被引量:4
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作者 李世芳 刘泽众 常惠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期296-301,共6页
佐剂可通过增强巨噬细胞活性促进机体T细胞或B细胞的反应,参与半抗原或抗原免疫应答。随着人们对疫苗免疫效果的研究,细胞因子作为新型分子佐剂能增强疫苗的特异性免疫反应而被广泛研究。细胞因子在调节先天免疫和适应性免疫中发挥着关... 佐剂可通过增强巨噬细胞活性促进机体T细胞或B细胞的反应,参与半抗原或抗原免疫应答。随着人们对疫苗免疫效果的研究,细胞因子作为新型分子佐剂能增强疫苗的特异性免疫反应而被广泛研究。细胞因子在调节先天免疫和适应性免疫中发挥着关键作用,能增强疫苗的特异性免疫反应。最近几年,白细胞介素、干扰素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、肿瘤坏死因子、趋化因子的研究已取得了很大进展,现对细胞因子佐剂的应用进展进行阐述,以期为其在将来的应用中提供参考。 展开更多
关键词 细胞因子 佐剂 干扰素 白细胞介素
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猪O型FMDV重组多表位抗原基因的克隆表达及免疫学鉴定 预览 被引量:2
6
作者 高明 邵军军 +4 位作者 林彤 赵付荣 刘泽众 常惠 吴润 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期1-6,共6页
【目的】制备猪O型FMDV广谱多表位疫苗,并筛选最适合的免疫佐剂.【方法】选取O型FMDV 3个毒株VP1蛋白的优势表位,设计并合成重复串联表位基因3FoEN2,并克隆猪IgG重链恒定区基因.利用BamHⅠ,EcoRⅠ等位点将2个基因依次克隆到pProEX-HTb载... 【目的】制备猪O型FMDV广谱多表位疫苗,并筛选最适合的免疫佐剂.【方法】选取O型FMDV 3个毒株VP1蛋白的优势表位,设计并合成重复串联表位基因3FoEN2,并克隆猪IgG重链恒定区基因.利用BamHⅠ,EcoRⅠ等位点将2个基因依次克隆到pProEX-HTb载体,构建重组质粒pE-IgG并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞.以IPTG诱导表达得到融合蛋白pE-IgG,经SDS-PAGE电泳分析,Western-blotting鉴定.分别用5种佐剂ISA206、ISA201、IMS1313、603、ISA61乳化融合蛋白配制疫苗免疫BALB/c雌鼠,间接ELISA方法测定抗体水平.【结果】重组蛋白以包涵体形式正确表达,大小为45kU,且能与感染O型FMDV的猪的阳性血清发生特异性免疫反应;ISA201佐剂试验组刺激机体产生的抗体水平最高.【结论】pE-IgG蛋白具有很强的免疫原性,与ISA201佐剂混合制备成的猪O型口蹄疫病毒多表位疫苗可刺激动物机体产生高水平抗体,是具有良好开发前景的疫苗. 展开更多
关键词 猪O型口蹄疫病毒 表位 佐剂 疫苗
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口蹄疫表位疫苗的研究进展 预览 被引量:8
7
作者 李世芳 邵军军 常惠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期396-401,共6页
口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物发生的一种急性、烈性传染病,给发病地区的畜牧业造成巨大的损失,目前应用疫苗来防控口蹄疫仍是最主要的手段。作为一种新型疫苗,表位疫苗是用病毒相关抗原表位制备,可同时携带多个抗原表位及辅助性表... 口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄动物发生的一种急性、烈性传染病,给发病地区的畜牧业造成巨大的损失,目前应用疫苗来防控口蹄疫仍是最主要的手段。作为一种新型疫苗,表位疫苗是用病毒相关抗原表位制备,可同时携带多个抗原表位及辅助性表位的疫苗,具有安全性好、易操作和可控等优势,受到人们密切的关注。近些年来,对于口蹄疫表位及疫苗的研究取得了很大的进展,现对口蹄疫病毒相关的细胞表位及其以此为基础的表位疫苗的最新进展进行综述,为研制更加安全有效的口蹄疫疫苗提供参考。 展开更多
关键词 口蹄疫 CTL表位 表位疫苗
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小反刍兽疫病毒甘肃株F基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 被引量:3
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作者 肖敏 包世俊 +2 位作者 邢小勇 常惠 薛慧文 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期477-484,共8页
小反刍兽疫(peste des petits ruminants, PPR)是由副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbillivirus)的小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus, PPRV)引起绵羊(Ovis aries)和山羊(Capra hircus)等小反刍... 小反刍兽疫(peste des petits ruminants, PPR)是由副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbillivirus)的小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus, PPRV)引起绵羊(Ovis aries)和山羊(Capra hircus)等小反刍兽的一种急性和高度传染性病毒性疾病,由于其高死亡率常造成绵羊和山羊养殖业的重大经济损失。为研究小反刍兽疫病毒甘肃(GS)株融合蛋白(fusion protein)基因序列特征及其免疫原性,参照GenBank中PPRV Nigeria 75/1株F基因序列(GenBank登录号: HQ197753)设计引物,应用RT-PCR扩增PPRV GS株F基因,在测序及序列分析的基础上,设计引物扩增去信号肽和跨膜区的F基因片段Fa并将其亚克隆至原核表达载体pET-32a(+)。重组质粒pET-PPRV-Fa转化大肠杆菌表达菌(Escherichia coli)Transetta(DE3)后经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)诱导表达,表达产物纯化后免疫新西兰兔(Oryctolagus cuniculus)制备多克隆抗体,进而应用间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和Western blot对重组蛋白免疫原性进行分析。结果表明,PPRV GS株F基因(GenBank登录号: KX822738)完整CDS全长1 641 bp,编码546个氨基酸。去信号肽和跨膜区的F基因片段Fa在大肠杆菌中成功获得表达,重组蛋白大小约为59 kD,且主要以包涵体形式存在;间接ELISA和Western blot结果表明,纯化产物免疫原性良好。研究结果为F蛋白的相关功能研究及小反刍兽疫的快速诊断方法的建立提供了理论依据。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒(PPRV) F基因 克隆 原核表达 免疫原性
动物肠道菌群的研究进展
9
作者 李世芳 赵付荣 +1 位作者 常惠 张永光 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2017年第11期1354-1361,共8页
肠道微生物是由存在于肠道部位的细菌、古菌、真菌、原生动物以及病毒所组成的群体。人们通过对细菌16SrRNA序列进行测序与分析,对动物及其在特定条件下的肠道菌群进行了相关方面的研究并取得了很大的进展。此外,由微生态原理发展而成... 肠道微生物是由存在于肠道部位的细菌、古菌、真菌、原生动物以及病毒所组成的群体。人们通过对细菌16SrRNA序列进行测序与分析,对动物及其在特定条件下的肠道菌群进行了相关方面的研究并取得了很大的进展。此外,由微生态原理发展而成的益生菌、益生元和合生元等微生态制剂,可维持机体肠道微生物的平衡、提高肠道屏障功能、增强机体免疫力。因此越来越多的微生态制剂应用于畜牧业、水产业中。论文综述了小鼠、犬、猪这三种动物的肠道菌群及其应用的研究进展,旨在为进一步深入了解动物肠道菌群的结构、功能以及促进微生态制剂的应用提供参考。 展开更多
关键词 肠道菌群 小鼠 微生态制剂
蓝舌病毒VP6蛋白的原核表达及抗体制备
10
作者 张国芮 独军政 +4 位作者 高闪电 田占成 常惠 殷宏 薛慧文 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2017年第5期603-609,共7页
本试验首先利用RT-PCR技术扩增获得了蓝舌病毒1型(BTV1)的VP6基因,然后将其克隆到表达载体pPRoEx-HTb上,构建重组表达质粒pPro-VP6,转化大肠杆菌BL21感受态细胞后用IPTG诱导表达,优化表达条件,纯化重组表达的VP6蛋白,免疫新西兰白兔... 本试验首先利用RT-PCR技术扩增获得了蓝舌病毒1型(BTV1)的VP6基因,然后将其克隆到表达载体pPRoEx-HTb上,构建重组表达质粒pPro-VP6,转化大肠杆菌BL21感受态细胞后用IPTG诱导表达,优化表达条件,纯化重组表达的VP6蛋白,免疫新西兰白兔制备抗VP6蛋白的多克隆抗体,利用Western-blot和细胞免疫荧光试验检测抗体的特异性及VP6蛋白在BTV1感染细胞中的分布。结果显示,重组VP6蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,利用组氨酸标签纯化树脂获得了高纯度的VP6蛋白;制备的抗VP6多克隆抗体不仅可与重组表达的VP6蛋白反应,而且可与BTV1感染细胞中的天然VP6蛋白发生特异性反应;在BTV1感染的BHK21细胞中检测到了VP6蛋白的特异表达,且分布于整个细胞质中。本研究成功表达了BTV重组VP6蛋白并制备了相应的特异抗体,为进一步揭示VP6蛋白的特性和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病毒 VP6基因 原核表达 多克隆抗体 免疫荧光
化学发光技术在人兽共患病诊断中的应用 预览 被引量:2
11
作者 刘泽众 李扬帆 常惠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期485-489,共5页
化学发光技术是一种极其敏感的新型检测技术。本文阐述了化学发光技术的原理与类型,介绍了可应用于化学发光检测技术中的纳米、磁珠、生物传感器等相关新型技术,同时对当前该技术在人兽共患病、动物疫病诊断中的最新应用做了报道,最后... 化学发光技术是一种极其敏感的新型检测技术。本文阐述了化学发光技术的原理与类型,介绍了可应用于化学发光检测技术中的纳米、磁珠、生物传感器等相关新型技术,同时对当前该技术在人兽共患病、动物疫病诊断中的最新应用做了报道,最后提出了未来几年化学发光检测技术的发展前景。 展开更多
关键词 化学发光 动物疫病 人兽共患病 检测
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免疫佐剂研究进展 预览 被引量:3
12
作者 高明 邵军军 +1 位作者 常惠 张永光 《安徽农业科学》 CAS 2015年第34期204-206,210共4页
佐剂是能够增强免疫应答或改变免疫应答类型的物质,本身可以具有免疫原性,也可以没有免疫原性。佐剂种类很多,如氢氧化铝佐剂、细菌佐剂、脂多糖、细胞因子等。综述了氢氧化铝佐剂、多糖佐剂、细胞因子佐剂以及一些新型佐剂的研究进展,... 佐剂是能够增强免疫应答或改变免疫应答类型的物质,本身可以具有免疫原性,也可以没有免疫原性。佐剂种类很多,如氢氧化铝佐剂、细菌佐剂、脂多糖、细胞因子等。综述了氢氧化铝佐剂、多糖佐剂、细胞因子佐剂以及一些新型佐剂的研究进展,旨在为今后开展疫苗和佐剂的相关研究提供参考。 展开更多
关键词 疫苗 免疫佐剂 研究进展
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蓝舌病毒1型VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:2
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作者 李扬帆 独军政 +4 位作者 邵军军 高闪电 林彤 赵付荣 常惠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期265-269,共5页
为了研制蓝舌病新型亚单位疫苗,将蓝舌病毒1型(BTV1)VP2基因克隆到pFastBacHTB载体中,得到重组转座载体pVP2,并转化至DH10Bac感受态细胞,获得了重组杆粒rVP2。然后采用脂质体转染法转染Sf9昆虫细胞,通过克隆筛选获得重组杆状病毒。SDS-... 为了研制蓝舌病新型亚单位疫苗,将蓝舌病毒1型(BTV1)VP2基因克隆到pFastBacHTB载体中,得到重组转座载体pVP2,并转化至DH10Bac感受态细胞,获得了重组杆粒rVP2。然后采用脂质体转染法转染Sf9昆虫细胞,通过克隆筛选获得重组杆状病毒。SDS-PAGE分析结果显示,获得了约110ku的表达产物,与预期结果相符。Western-blot结果显示,目的蛋白能被BTV1感染的山羊阳性血清识别。结果表明,经杆状病毒体系表达的可溶性重组VP2蛋白具有良好的反应原性,为进行蓝舌病新型亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病毒1型 VP2基因 杆状病毒 表达
Asia1型口蹄疫新型多表位疫苗免疫豚鼠的效力试验 预览 被引量:1
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作者 邵军军 王景锋 +2 位作者 高闪电 林彤 常惠 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期692-697,共6页
目的:评价一种改进型Asia 1型口蹄疫多表位重组疫苗的免疫效能。方法根据Asia 1型口蹄疫病毒的基因序列设计多表位基因,构建重组表达质粒(pRE-oIgG)。用大肠杆菌细胞分别表达靶标蛋白RE-oIgG和口蹄疫病毒3D蛋白,并用组氨酸亲和层... 目的:评价一种改进型Asia 1型口蹄疫多表位重组疫苗的免疫效能。方法根据Asia 1型口蹄疫病毒的基因序列设计多表位基因,构建重组表达质粒(pRE-oIgG)。用大肠杆菌细胞分别表达靶标蛋白RE-oIgG和口蹄疫病毒3D蛋白,并用组氨酸亲和层析柱纯化。纯化的RE-oIgG ,3D和RE-oIgG与3D的混合物分别经油性佐剂IAS206乳化后配制成相应的疫苗。25只雌性豚鼠被随机分成5组,每组5只豚鼠,经肌肉途径分别注射RE-oIgG、3D、RE-oIgG与3D的混合物、Asia 1口蹄疫灭活疫苗和PBS ,所有动物进行两次免疫。采用ELISA、病毒微量中和试验、攻毒试验和流式细胞术分别测定免疫前后抗口蹄疫特异性抗体、中和抗体、保护率以及淋巴细胞增殖反应。结果 RE-oIgG与3D的混合物能够诱导高效价的抗Asia 1型口蹄疫病毒的特异性抗体,与RE-oIgG单独免疫豚鼠相比较具有明显的差异性(P<0.05)。除了阴性对照组PBS外,来自所有免疫动物的外周血淋巴细胞经过体外培养刺激后均产生了明显的淋巴细胞增殖反应。单独免疫3D蛋白和安慰剂PBS实验组既没有测到抗口蹄疫病毒特异性抗体,也没有测到中和抗体。而RE-oIgG与3D的混合物不仅诱导机体产生了高水平的保护性中和抗体,而且诱发了明显的淋巴细胞增殖反应。更为重要的是,该蛋白质混合物针对1000 GPID50强毒攻击后,所有动物没有出现症状完全保护。值得一提的是,单独免疫3D蛋白的5只豚鼠中,其中2只完全保护;另外3只虽然出现了临床症状,但相对PBS对照组来说发病时间大约推迟2~3 d。因此,笔者认为RE-oIgG与3D的混合物不仅能够诱导体液免疫反应,而且能够诱发细胞免疫反应,是一种高效能的新型疫苗,将来可用于我国口蹄疫的防控。 展开更多
关键词 口蹄疫 表位 疫苗 豚鼠
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C型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备与鉴定 预览 被引量:1
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作者 杨沁 林彤 +1 位作者 常惠 薛慧文 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-5,共5页
将灭活的C型FMDV背部皮下多点注射免疫BABL/c小鼠,取小鼠脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞在PEG1 500作用下融合,用有限稀释法进行亚克隆.以C型FMDV重组VP1蛋白为抗原,间接ELISA法筛选单抗.以O、Asial、A型FMDV以及猪水疱病病毒为抗原,间接ELIS... 将灭活的C型FMDV背部皮下多点注射免疫BABL/c小鼠,取小鼠脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞在PEG1 500作用下融合,用有限稀释法进行亚克隆.以C型FMDV重组VP1蛋白为抗原,间接ELISA法筛选单抗.以O、Asial、A型FMDV以及猪水疱病病毒为抗原,间接ELISA法检测单抗特异性.获得2株抗C型FMDV的单抗3B3和6D5,亚型鉴定为IgG1、IgG3;腹水效价分别为1∶25 600和1∶51 200;中和效价分别为1∶1 280和1∶640;2株单抗与O、Asial、A型FMDV以及猪水疱病病毒间无交叉反应,表明这2株单抗为高特异性抗C型FMDV单抗.研究结果可为C型FMD的诊断及预防提供基础材料,也可用于病因学及免疫学研究. 展开更多
关键词 C型口蹄疫病毒 单克隆抗体 ELISA 特异性鉴定
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基于表位的反向疫苗学研究进展 预览
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作者 孙静静 邵军军 常惠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1026-1029,共4页
20世纪末应用传统的技术研制的疫苗梢续问世,对一些重要传染病的有效防制起到了关键性的作用。
关键词 反向疫苗学 表位 传染病
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A型口蹄疫病毒抗原表位与牛IgG重链恒定区的融合表达及活性鉴定 预览
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作者 陈建文 王兴叶 +3 位作者 邵军军 郝春霞 常惠 胡永浩 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第7期24-28,共5页
为了研制广谱高效的A型口蹄疫新型多表位疫苗,根据GenBank数据库的A型代表毒株VP1序列设计并合成了VP1结构蛋白上的主要抗原表位DNA段,即135aa~160aa和200aa~213aa,与牛IgG重链恒定区编码基因连接,将合成的2个表位基因经XhoⅠ、EcoRⅠ... 为了研制广谱高效的A型口蹄疫新型多表位疫苗,根据GenBank数据库的A型代表毒株VP1序列设计并合成了VP1结构蛋白上的主要抗原表位DNA段,即135aa~160aa和200aa~213aa,与牛IgG重链恒定区编码基因连接,将合成的2个表位基因经XhoⅠ、EcoRⅠ和BamHⅠ酶切后依次克隆到pET-30a(+)载体上,构建重组质粒pRE2IgG,将其转化到大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达融合蛋白pRE2IgG,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析,Western blot检测。结果显示,重组蛋白获得高效表达,并以包涵体形式存在,其分子质量约为60ku,且能与抗A型FMDV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应活性。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 中和表位 牛IgG 重链恒定区
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蓝舌病病毒VP7基因的原核表达及反应原性分析 预览
18
作者 郝春霞 独军政 +3 位作者 高闪电 陈建文 常惠 薛慧文 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期19-22,28共5页
为获得蓝舌病病毒(BTV)VP 7基因原核表达蛋白并检测其生物学活性,根据Genbank登录的BTVVP 7基因,设计1对引物,运用RT-PCR扩增技术获得BTVVP 7目的片段,然后定向克隆到 pPROEXHTb原核表达载体上,再转化重组质粒 pPROEXHTb-VP7到BL21感... 为获得蓝舌病病毒(BTV)VP 7基因原核表达蛋白并检测其生物学活性,根据Genbank登录的BTVVP 7基因,设计1对引物,运用RT-PCR扩增技术获得BTVVP 7目的片段,然后定向克隆到 pPROEXHTb原核表达载体上,再转化重组质粒 pPROEXHTb-VP7到BL21感受态细胞,IPTG 诱导,表达产物纯化,进行 SDS-PAGE 鉴定及 Western-blot反应原性分析。结果表明:表达的 VP7目的蛋白大小为35 ku,Western-blot 分析表明纯化后的蛋白可以与BTV单克隆抗体发生特异性反应。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 VP7基因 克隆 原核表达 蛋白质印迹法
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口蹄疫病毒与宿主细胞的相互作用研究进展
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作者 付银 常惠 +1 位作者 刘静 陈慧勇 《生命科学》 CSCD 2013年第11期1065-1070,共6页
口蹄疫病毒(FMDV)导致了偶蹄动物口蹄疫的发生,它是一类有着自身特点的RNA病毒。首先,FMDV衣壳蛋白VP1识别结合宿主细胞膜上的整联蛋白等受体,以内吞的方式进入细胞,利用宿主细胞成分完成病毒蛋白的合成。这些新合成的L^pro、2C和... 口蹄疫病毒(FMDV)导致了偶蹄动物口蹄疫的发生,它是一类有着自身特点的RNA病毒。首先,FMDV衣壳蛋白VP1识别结合宿主细胞膜上的整联蛋白等受体,以内吞的方式进入细胞,利用宿主细胞成分完成病毒蛋白的合成。这些新合成的L^pro、2C和3C^pro等病毒致病因子进一步抑制宿主基因的转录和翻译,诱导细胞凋亡和白噬,并抑制干扰素介导的一系列先天性和获得性免疫反应。宿主则在病毒侵染细胞的初期,利用病毒识别受体等来识别病毒并诱导合成干扰素等细胞因子,介导多种免疫反应以清除病毒。病毒和宿主两者在持续的利用和较量中完成疾病的发生和痊愈等。其次,不断发现的病毒受体、结合基序、致病因子及宿主细胞的多种免疫调节因子将成为相关领域新的研究内容。综上,开发高效安全疫苗、增强自身免疫力及利用RNAi直接抑制病毒RNA等便成为现代FMDV防治的主要内容。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 宿主细胞 受体 致病因子 凋亡 自噬 免疫反应
口蹄疫新型疫苗研究进展 被引量:2
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作者 陈建文 邵军军 常惠 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第10期90-93,共4页
口蹄疫在流行区域的持续感染,影响了以家畜为生计的人们的正常生活,这经常发生在资源缺乏的发展中国家。由于口蹄疫所带来的危害,世界动物卫生组织以及粮农组织呼吁对于口蹄疫病毒在全球范围内进行控制以及消除。然而,由于目前所使... 口蹄疫在流行区域的持续感染,影响了以家畜为生计的人们的正常生活,这经常发生在资源缺乏的发展中国家。由于口蹄疫所带来的危害,世界动物卫生组织以及粮农组织呼吁对于口蹄疫病毒在全球范围内进行控制以及消除。然而,由于目前所使用的灭活疫苗并不能满足此要求,因此需要研制新型疫苗满足口蹄疫的全球性防护及消除。本文主要介绍了DNA疫苗、病毒样衣壳疫苗、病毒载体疫苗、cDNA源性灭活疫苗以及修饰的活疫苗等新型疫苗的研究现状以及在临床中的应用前景。 展开更多
关键词 口蹄疫 防控 新型疫苗
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