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非洲猪瘟病毒无标签重组K205R抗原制备与应用 预览
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作者 肖景景 卢会鹏 +10 位作者 李洋洋 周晓慧 刘晓明 胡威 晓凯 徐保娟 崔晓霞 夏晓莉 孙怀昌 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期90-94,100共6页
为建立敏感、特异的非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测方法,将ASFV K205R基因与类弹性蛋白多肽(ELP)进行融合表达,用相变循环纯化ELP-K205R融合蛋白,用烟草蚀纹病毒(TEV)蛋白酶活性包涵体切除ELP标签,用相变循环回收K205R蛋白,用抗体阳性血清... 为建立敏感、特异的非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体检测方法,将ASFV K205R基因与类弹性蛋白多肽(ELP)进行融合表达,用相变循环纯化ELP-K205R融合蛋白,用烟草蚀纹病毒(TEV)蛋白酶活性包涵体切除ELP标签,用相变循环回收K205R蛋白,用抗体阳性血清对重组K205R蛋白进行ELISA鉴定。结果表明:重组大肠埃希菌能正确表达ELP-K205R融合蛋白,相变循环纯化的融合蛋白纯度大于80%;TEV蛋白酶活性包涵体能有效切割ELP标签,回收的重组K205R蛋白纯度大于95%,能被特异抗体阳性血清识别;重组K205R抗原与抗体阴性猪血清反应阴性,与抗体阳性猪血清反应阳性,D450nm值与血清稀释倍数具有线性相关性。用重组K205R抗原对已知猪血清进行ELISA检测,结果显示24份ASFV抗体阳性血清为检测阳性,24份ASFV抗体阴性血清为检测阴性,检测符合率为100%。这一研究提示制备的无标签重组K205R抗原可用于ASFV抗体检测。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 无标签K205R抗原 制备 抗体检测
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溶栓模式对急性缺血性脑卒中静脉溶栓DNT的影响及效果分析
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作者 重阳 王耀辉 +4 位作者 刘维斌 孙伟 何焰鹏 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期755-759,共5页
目的分析急诊溶栓模式对急性缺血性脑卒中(AIS)患者入院-溶栓时间(DNT)的影响及效果。方法选取2015年5月至2017年6月秦皇岛市第一医院行静脉内溶栓的AIS患者182例。会诊溶栓组83例,为2015年5月至2016年5月经神经内科会诊后行静脉内溶栓... 目的分析急诊溶栓模式对急性缺血性脑卒中(AIS)患者入院-溶栓时间(DNT)的影响及效果。方法选取2015年5月至2017年6月秦皇岛市第一医院行静脉内溶栓的AIS患者182例。会诊溶栓组83例,为2015年5月至2016年5月经神经内科会诊后行静脉内溶栓的患者;急诊溶栓组99例,为2016年6月至2017年6月经急诊溶栓小组于急诊科行静脉内溶栓的患者。比较两组DNT,溶栓24 h症状性出血转化率,溶栓24 h、7 d美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,溶栓7 d和溶栓3个月病死率及溶栓3个月改良Rankin评分(mRs)。结果两组资料基线特征差异无统计学意义(P>0.05)。与会诊组比较,急诊溶栓组DNT[(69.77±11.66)min比(80.12±15.49)min,t=5.745,P<0.01]明显缩短,治疗3个月评分良好率[39(39.4%)比21(25.3%),χ^2=4.272,P=0.039]明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗24 h颅内出血转化率[12(12.12%)比5(6.02%),χ^2=1.982,P=0.159]、治疗7 d病死率[10(10.10%)比6(7.22%),χ^2=0.464,P=0.496]、治疗3个月病死率[14(14.14%)比11(13.25%),χ^2=0.030,P=0.862]、治疗24 h有效率[57(57.6%)比53(63.8%),χ^2=0.745,P=0.388]、治疗7 d有效率[50(50.5%)比46(55.4%),χ^2=0.438,P=0.508]结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论急诊溶栓模式可缩短AIS患者rt-PA静脉溶栓治疗的DNT,其安全性及效果与神经科会诊模式相比无差异,且可以提高预后良好率。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 血栓溶解疗法 急诊溶栓 入院至静脉溶栓时间 出血转化 安全性 治疗效果 预后
盘尾丝虫ASP1蛋白佐剂活性区不同标签融合表达与佐剂活性比较 预览
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作者 胡威 卢会鹏 +4 位作者 晓凯 李洋洋 夏晓莉 孙怀昌 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第3期44-50,共7页
为了探明纯化标签对盘尾丝虫活化相关分泌蛋白1(activation-associated secreted protein 1,ASP1)佐剂活性的影响,将其佐剂活性区PR-1编码序列分别与类弹性蛋白多肽(elastin-like polypeptide,ELP)、ELK16自聚肽或His标签进行融合表达,... 为了探明纯化标签对盘尾丝虫活化相关分泌蛋白1(activation-associated secreted protein 1,ASP1)佐剂活性的影响,将其佐剂活性区PR-1编码序列分别与类弹性蛋白多肽(elastin-like polypeptide,ELP)、ELK16自聚肽或His标签进行融合表达,用相变循环、离心洗涤和镍亲和层析进行融合蛋白纯化;将ELP与传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)VP2基因片段进行融合表达,用蛋白酶切除ELP标签后与不同标签融合PR-1免疫小鼠,两次免疫后不同时间采血分离血清,采用ELISA检测VP2特异IgG、IgG1和IgG2c滴度,用试剂盒检测免疫小鼠血清的IFN-γ、TNF-α、IL-6、IL-10浓度。结果显示,ELP-PR1、ELK-PR1、His-PR1和ELP-VP2融合蛋白在重组大肠杆菌中均获得正确表达,纯化蛋白纯度大于90%;3种标签融合PR-1均能增强免疫小鼠的抗原特异IgG、IgG1和IgG2应答,并能刺激小鼠产生IFN-γ、TNF-α、IL-6或IL-10细胞因子。在3种PR-1融合蛋白中,ELP-PR1的佐剂活性最强,ELK-PR1与不完全弗氏佐剂相当。本研究探索了不同纯化标签对PR-1免疫佐剂活性的影响,为传染性法氏囊病新型亚单位疫苗佐剂研制提供思路。 展开更多
关键词 盘尾丝虫活化相关分泌蛋白1 PR-1佐剂活性区 融合标签 佐剂
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猪繁殖与呼吸综合征病毒接触感染仔猪模型的建立 预览
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作者 夏文龙 吴植 +4 位作者 郭长明 朱善元 夏晓莉 孙怀昌 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期3-6,10,I0001共6页
为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)接触感染模型,将易感仔猪与PRRSV人工感染仔猪在隔离器中同居饲养,每日观察记录体温变化和临床症状,定期采集血清和粪便样品,用荧光定量RT-PCR检测病毒血症和粪便排毒水平;对病死猪和试验结束迫... 为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)接触感染模型,将易感仔猪与PRRSV人工感染仔猪在隔离器中同居饲养,每日观察记录体温变化和临床症状,定期采集血清和粪便样品,用荧光定量RT-PCR检测病毒血症和粪便排毒水平;对病死猪和试验结束迫杀猪进行剖检和肺脏组织病理学检查,并检测各器官病毒载量和组织分布。结果显示:接触感染仔猪出现高热和PRRS症状时间分别较人工接种猪推迟2~3d;第3天起血清检测PRRSV阳性,第10天病毒血症上升至较高水平(108.6拷贝/mL);第5天起粪便检测PRRSV阳性,第7天粪便排毒量上升至较高水平(103.9拷贝/0.1g);3头接触感染仔猪分别于同居后第12天和第13天死亡,较人工接种猪推迟1~2d,病死猪的主要器官病毒载量以及剖检和肺脏显微病理变化与人工接种病死猪相似。这些结果表明,本研究建立的接触感染仔猪模型可用于PRRS疫苗免疫效果评价。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 接触感染 仔猪模型
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CBM的结构、应用及与多糖的相互作用研究进展 预览
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作者 王晓燕 +3 位作者 王沛沛 田静 宋君龙 《纤维素科学与技术》 CAS CSCD 2019年第2期66-73,84共9页
碳水化合物结合模块(CBM)是碳水化合物活性酶的重要组成部分,其功能是识别并结合到多糖底物上以增加催化模块在底物上的浓度并提高活性。不同家族的CBM具有不同的结构和结合特异性,与底物的相互作用也存在差异。CBM与多糖表面的特异性... 碳水化合物结合模块(CBM)是碳水化合物活性酶的重要组成部分,其功能是识别并结合到多糖底物上以增加催化模块在底物上的浓度并提高活性。不同家族的CBM具有不同的结构和结合特异性,与底物的相互作用也存在差异。CBM与多糖表面的特异性吸附决定了蛋白质-多糖复合材料的化学性能和机械性能。从CBM的结构与分类、功能与应用、CBM与多糖的相互作用与检测方法等方面对CBM近年的研究进行了综述,特别是对其作为独立功能单元运用到纤维改性,生物纯化和生物修复方面的应用进行了总结。 展开更多
关键词 碳水化合物结合模块 多糖 相互作用 吸附 石英晶体微天平
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资本深化、有偏技术进步与全要素生产率增长
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作者 余东华 孙婷 《世界经济》 CSSCI 北大核心 2019年第8期50-71,共22页
本文探讨资本深化和有偏技术进步对全要素生产率的交互影响机制,并利用1999-2016年中国制造业大中型企业分行业数据,采用增长核算和计量回归两种方法对理论机制进行检验。研究结果表明,资本深化程度、技术进步偏向性及二者对全要素生产... 本文探讨资本深化和有偏技术进步对全要素生产率的交互影响机制,并利用1999-2016年中国制造业大中型企业分行业数据,采用增长核算和计量回归两种方法对理论机制进行检验。研究结果表明,资本深化程度、技术进步偏向性及二者对全要素生产率的交互影响效应在制造业行业间具有明显的异质性特征;与基期相比,中国制造业资本深化程度呈现上升趋势且技术进步偏向资本,资本深化程度和技术进步偏向性相匹配,从而推动了全要素生产率的增长;资本偏向型技术进步有助于削弱资本深化对全要素生产率增长的不利影响,但是未能完全抵消资本深化对全要素生产率增长的直接抑制作用。 展开更多
关键词 资本深化 技术进步偏向性 全要素生产率 交互影响效应
安徽涉外企业国际化路径研究 预览
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作者 《现代交际》 2019年第10期66-68,共3页
随着经济全球化的发展愈加深入,加快安徽企业"走出去"步伐、提高安徽企业国际竞争力已成为推动安徽经济升级转型的重要条件。在我国实施"一带一路"倡议的大背景下,安徽涉外企业提升国际化水平有利于增强"安徽... 随着经济全球化的发展愈加深入,加快安徽企业"走出去"步伐、提高安徽企业国际竞争力已成为推动安徽经济升级转型的重要条件。在我国实施"一带一路"倡议的大背景下,安徽涉外企业提升国际化水平有利于增强"安徽制造"的国际竞争力,提升安徽省的全球资源配置能力和开放型经济发展水平。 展开更多
关键词 安徽 企业国际化 对外投资
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稻田鱼蟹养殖飞虫捕食装置的发展现状 预览 被引量:1
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作者 宋秋红 王海洋 +1 位作者 吴志聪 《农业与技术》 2019年第1期72-75,共4页
本文主要结合稻田鱼蟹养殖的现状,对飞虫捕食装置的研发现状进行了综述和分析,在阐述飞虫捕食装置的基本原理和分类的基础上,结合飞虫捕食装置的能源供应和飞虫的趋光性,综合比较各种捕虫装置的弊端与益处,结合我国的飞虫捕食装置的农... 本文主要结合稻田鱼蟹养殖的现状,对飞虫捕食装置的研发现状进行了综述和分析,在阐述飞虫捕食装置的基本原理和分类的基础上,结合飞虫捕食装置的能源供应和飞虫的趋光性,综合比较各种捕虫装置的弊端与益处,结合我国的飞虫捕食装置的农业背景与环境,探讨了捕食装置开发中存在的问题及发展远景. 展开更多
关键词 稻田鱼蟹养殖 捕食装置 能源供应 趋光性
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青年“佛系心态”透视 预览
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作者 《当代青年研究》 CSSCI 2019年第2期39-44,共6页
“佛系青年”是当前“90后”青年群体自我推崇的新标签,其“佛系心态”是这类群体有别于青年其他心态的显著表征,通过片面截取佛教基本教义进行意义的拼贴、置换、认同,展现出这类青年亚群体当下的生活样貌和精神困境。“佛系心态”折... “佛系青年”是当前“90后”青年群体自我推崇的新标签,其“佛系心态”是这类群体有别于青年其他心态的显著表征,通过片面截取佛教基本教义进行意义的拼贴、置换、认同,展现出这类青年亚群体当下的生活样貌和精神困境。“佛系心态”折射出了处在人生奋斗阶段的“90后”青年群体当前复杂的生存样态,呈现出了处在两个历史交汇期的青年群体既渴望获得成功却又逃避的矛盾心态。对身边的事秉持着无欲无求、不争不抢的心理状态是青年新兴亚文化的主观映射,是对当下青年生存所面临的现实问题的镜像反映。在新时代的背景下,通过党和政府助力青年发展,青年增强担当精神,以及舆论坚持正确价值观引导青年,对塑造奋发有为的新时代青年具有重要意义。 展开更多
关键词 佛系心态 青年亚文化 90后
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冶金企业如何提高燃气锅炉热经济性 预览
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作者 《中国金属通报》 2019年第2期19-20,共2页
从冶金企业发展现状来说,为了更好的适应行业发展变化,保持竞争力,必须要强化成本控制。这需要不断提高锅炉的运行效率,减少资源浪费,提高能效,进而减少成本。本文对影响机组热经济性的各个因素都进行了相应的分析,并提出了改进的意见,... 从冶金企业发展现状来说,为了更好的适应行业发展变化,保持竞争力,必须要强化成本控制。这需要不断提高锅炉的运行效率,减少资源浪费,提高能效,进而减少成本。本文对影响机组热经济性的各个因素都进行了相应的分析,并提出了改进的意见,以此提升机组热经济性。 展开更多
关键词 燃气锅炉 热经济性 影响因素 分析
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生物质加工副产物作为洗涤剂原料的应用 预览
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作者 周越 +1 位作者 樊晔 方云 《中国洗涤用品工业》 2019年第7期28-34,共7页
环境和人口问题及当前社会对能源和化学品日益增长的需求,促进了基于生物质原材料的环境友好型应用技术的研究,尤其是利用生物质加工副产物生产高附加值产品,更加受到广泛的关注。洗涤剂及相关表面活性剂作为应用最广泛的精细化学品,其... 环境和人口问题及当前社会对能源和化学品日益增长的需求,促进了基于生物质原材料的环境友好型应用技术的研究,尤其是利用生物质加工副产物生产高附加值产品,更加受到广泛的关注。洗涤剂及相关表面活性剂作为应用最广泛的精细化学品,其原料的绿色化和可持续化倍受关注。本文将从近期文献中汲取信息,主要针对工农业废弃资源,尤其是生物质加工副产物作为洗涤剂原料方面的应用进行综述。 展开更多
关键词 洗涤剂 表面活性剂 生物质加工 副产物 循环经济
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原位构筑表面缺陷的碳掺杂型三元钻锦铁磷化物纳米立方体用于高效全水分解
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作者 高文坤 杨敏 +6 位作者 迟京起 谢静宜 郭宝玉 王磊 柴永明 董斌 《中国科学:材料科学(英文版)》 CSCD 2019年第9期1285-1296,共12页
本文以三元金属钻-镰-铁普鲁士蓝结构纳米立方体(Co0.9-Ni0.9Fe1.2NCs)为前驱体,通过简单气相磷化处理,得到优化比例的P-Co0.9Ni0.9Fe1.2纳米立方体磷化物,其具有高本征活性、导电性和高缺陷密度的特点.SEM和TEM结果表明,碳掺杂型P-Co0.... 本文以三元金属钻-镰-铁普鲁士蓝结构纳米立方体(Co0.9-Ni0.9Fe1.2NCs)为前驱体,通过简单气相磷化处理,得到优化比例的P-Co0.9Ni0.9Fe1.2纳米立方体磷化物,其具有高本征活性、导电性和高缺陷密度的特点.SEM和TEM结果表明,碳掺杂型P-Co0.9Ni0.9Fe1.2保持了纳米立方体的结构,其粗糙的表面结构意味着丰富的缺陷位,暴露更多真实活性位.三元金属普鲁士蓝前驱体的磷化处理不仅提供了碳掺杂,而且原位构筑了立方体表面缺陷位.碳掺杂降低了电荷传输的阻抗,优化了电子传输速率.三元金属离子之间的协同作用以及丰富的缺陷活性位有效提高了电催化的性能.P-Co0.9Ni0.9Fe1.2拥有极其高的HER和OER催化活性,仅需要-200.7mV(HER)和273.1mV(OER)过电位就可以达到10mAcm^-2的电流密度.其全水分解仅需1.52V就可以达到10mAcm^-2的电流密度.此外,本文还对催化剂的稳定性进行了测试.本工作为设计高效过渡金属基双功能电解水催化剂提供了一种简便方法. 展开更多
关键词 表面缺陷 立方体 碳掺杂 水分解 磷化物 掺杂型 纳米 三元
雅安旅游业融入成渝发展战略思考 预览
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作者 《当代县域经济》 2019年第3期56-57,共2页
成渝经济圈是西部地区聚集人口最多、经济总量最大、社会发展水平最高的区域。区域经济的聚合与联动已成为当代经济发展过程的一大显著特点。雅安市旅游业融入成渝经济圈有利于充分发挥雅安旅游资源的比较优势,实现旅游主题、旅游功能... 成渝经济圈是西部地区聚集人口最多、经济总量最大、社会发展水平最高的区域。区域经济的聚合与联动已成为当代经济发展过程的一大显著特点。雅安市旅游业融入成渝经济圈有利于充分发挥雅安旅游资源的比较优势,实现旅游主题、旅游功能、旅游产品的科学布局,形成区域特色旅游板块;有利于雅安参与经济圈内旅游产业融合、产业分工和项目合作. 展开更多
关键词 发展 旅游 雅安 区域 经济圈 旅游业
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新型智能直流电动阀门驱动器的设计 预览
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作者 邵大帅 王浩成 +3 位作者 黄全伟 阿克卓利·霍斯拜克 范若琳 《电子世界》 2019年第12期118-121,共4页
为提高直流电动阀门驱动的安全性与可靠性,本文提出一种采用H桥驱动,并具有状态监测功能的直流阀门驱动器。使用驱动电流作为反馈,应用PI控制算法对阀门电流进行闭环控制,实现了阀门的软启动、软关断。对控制器电源电压、输出电流及芯... 为提高直流电动阀门驱动的安全性与可靠性,本文提出一种采用H桥驱动,并具有状态监测功能的直流阀门驱动器。使用驱动电流作为反馈,应用PI控制算法对阀门电流进行闭环控制,实现了阀门的软启动、软关断。对控制器电源电压、输出电流及芯片温度进行实时监测,状态异常时进行报警。使用双电源模块设计,保证H桥与单片机的稳定运行。引入MODBUS-RTU通信协议,使阀门的远程控制、状态监测及远程报警成为可能。此方案在提高了直流阀门驱动器可靠性的同时,还具有智能化程度高,维护方便,使用寿命长的优点。 展开更多
关键词 阀门驱动器 电动阀门 模块设计 智能化 RTU通信协议 PI控制算法 H桥驱动 驱动电流
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联合注射牛γ干扰素和人溶菌酶表达质粒对奶牛乳房炎的治疗效果
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作者 尹召华 宜辉 +4 位作者 孙怀昌 陈阳 夏晓莉 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第8期95-98,共4页
通过乳腺注射牛γ干扰素(BoINF-γ)和人溶菌酶(LYZ)表达质粒,比较单独和联合注射重组质粒与抗生素对奶牛乳房炎的治疗效果。将PCR扩增的BoINF-γc DNA插入真核表达载体pcDNAK,用重组质粒pcDNAK-BoINF-γ转染NIH 3T3细胞,经免疫荧光... 通过乳腺注射牛γ干扰素(BoINF-γ)和人溶菌酶(LYZ)表达质粒,比较单独和联合注射重组质粒与抗生素对奶牛乳房炎的治疗效果。将PCR扩增的BoINF-γc DNA插入真核表达载体pcDNAK,用重组质粒pcDNAK-BoINF-γ转染NIH 3T3细胞,经免疫荧光试验证明,重组质粒能正确表达。将91个奶牛乳房炎乳区分为4组,通过乳腺穿刺法注射,第1组注射400μg pcDNAKLYZ,第2组注射400μg pcDNAK-BoINF-γ,第3组注射400μg pcDNAKLYZ和400μg pcDNAK-BoINF-γ,第4组注射100 IU青霉素和25μg链霉素,次日重复注射1次。在注射后10 d进行临床症状观察、乳汁体细胞检测和细菌培养计数。结果显示:注射pcDNAKLYZ对临床型乳房炎的治疗效果为80%,对隐性乳房炎的治疗效果为79.2%;注射pcDNAK-BoINF-γ对临床型乳房炎的治疗效果为50%,对隐性乳房炎的治疗效果为66.7%;联合注射pcDNAKLYZ和pcDNAKBoINF-γ对临床型乳房炎的治疗效果为100%,对隐性乳房炎的治疗效果为83.5%;青链霉素合剂对临床型乳房炎的治疗效果为50%,对隐性乳房炎的治疗效果为60%。试验结果表明,联合注射人溶菌酶和牛γ干扰素表达质粒对奶牛乳房炎具有更好的治疗效果。 展开更多
关键词 奶牛γ干扰素 人溶菌酶 表达载体注射 奶牛乳腺炎治疗
非洲猪瘟病毒特点及扬州大学对其研究简介 预览
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作者 孙怀昌 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 北大核心 2018年第3期50-51,共2页
非洲猪瘟是目前威胁世界养猪业最危险的传染病,强毒感染猪致死率高达100%。该病在沙哈拉以南28个非洲国家呈地方性流行,2007年传入格鲁吉亚后很快传播到10多个临国,目前在高加索地区和俄罗斯广泛流行,我国沈阳也有首例报道。非洲猪瘟病... 非洲猪瘟是目前威胁世界养猪业最危险的传染病,强毒感染猪致死率高达100%。该病在沙哈拉以南28个非洲国家呈地方性流行,2007年传入格鲁吉亚后很快传播到10多个临国,目前在高加索地区和俄罗斯广泛流行,我国沈阳也有首例报道。非洲猪瘟病毒具有许多独特特点,目前无安全有效的疫苗,一旦发生必须实行严格的隔离封锁、猪群销毁和感染场地消毒,对社会、经济造成巨大的影响,因此快速、准确诊断十分重要。扬州大学孙怀昌教授带领的团队对非洲猪瘟分子诊断进行了深入研究,为我国非洲猪瘟防控提供了系统的技术与试剂储备。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 病毒特点 研究概况
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定量检测猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体夹心ELISA方法的建立与应用 预览
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作者 夏文龙 吴植 +5 位作者 郭长明 朱善元 余树培 夏晓莉 孙怀昌 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第4期881-887,共7页
为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)游离受体定量检测方法,本试验用表达猪唾液酸黏附素(Sn)游离受体的重组腺病毒rAd-Sn4D-Fc感染PK-15细胞,以细胞培养上清纯化的Sn4D-Fc游离... 为了建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)游离受体定量检测方法,本试验用表达猪唾液酸黏附素(Sn)游离受体的重组腺病毒rAd-Sn4D-Fc感染PK-15细胞,以细胞培养上清纯化的Sn4D-Fc游离受体作为标准抗原,鼠抗猪Sn免疫血清为一抗,生物素标记兔抗猪Sn多克隆抗体为二抗,建立定量检测Sn4D-Fc游离受体的双抗体夹心ELISA方法;用rAd-Sn4D-Fc注射仔猪,定期采集血清进行游离受体检测。结果显示,纯化Sn4D-Fc标准抗原的纯度为94.3%,能被Sn免疫血清识别;一抗的最佳工作浓度为5μg/mL蛋白,二抗的最佳稀释度为1∶4 000,夹心ELISA检测标准抗原的灵敏度为0.4 ng/mL,对照抗原无交叉反应;夹心ELISA能从重组腺病毒注射猪血清中检测到Sn4D-Fc游离受体,最高表达量为6.54 ng/mL,持续时间为15 d。研究结果表明,建立的双抗体夹心ELISA可用于PRRSV游离受体的体内外定量检测。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 游离受体 夹心ELISA 定量检测
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填料对聚合物乳液建筑防水涂料拉伸性能的影响研究 预览
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作者 《中国建筑防水》 2018年第12期1-4,共4页
介绍了聚合物乳液建筑防水涂料的成膜机理,探讨了填料种类、目数对聚合物乳液建筑防水涂料拉伸性能的影响,同时研究了其中两种填料的复配效果。结果表明,填料种类和目数对防水涂料的拉伸性能影响较大,以600-800目石英粉作为填料制备的... 介绍了聚合物乳液建筑防水涂料的成膜机理,探讨了填料种类、目数对聚合物乳液建筑防水涂料拉伸性能的影响,同时研究了其中两种填料的复配效果。结果表明,填料种类和目数对防水涂料的拉伸性能影响较大,以600-800目石英粉作为填料制备的防水涂料综合性能较佳,以占比不超过75%的重质碳酸钙复配硫酸钡作为填料,可制得经济、实用、性能良好的聚合物乳液建筑防水涂料。 展开更多
关键词 聚合物乳液建筑防水涂料 填料 断裂延伸率 拉伸强度
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一株鹅源坦布苏病毒的分离鉴定及全基因组序列测定
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作者 任丹 李拓凡 +5 位作者 刘潇羽 邵红霞 秦爱建 叶建强 高巍 《中国家禽》 北大核心 2018年第12期51-54,共4页
2017年10月,安徽六安某朗德鹅养殖场鹅群出现精神沉郁,采食下降,陆续死亡。对送检病死鹅组织观察,可见肝脏肿胀、质脆、颜色变淡,脑组织水肿、充血、出血。将脑组织研磨后接种SPF鸡胚进行分离病毒。收集死亡鸡胚尿囊液、离心后进行电镜... 2017年10月,安徽六安某朗德鹅养殖场鹅群出现精神沉郁,采食下降,陆续死亡。对送检病死鹅组织观察,可见肝脏肿胀、质脆、颜色变淡,脑组织水肿、充血、出血。将脑组织研磨后接种SPF鸡胚进行分离病毒。收集死亡鸡胚尿囊液、离心后进行电镜负染发现直径约为40 nm的病毒粒子。利用黄病毒E蛋白基因特异性引物进行的RT-PCR以及序列分析证明该分离株为黄病毒属坦布苏病毒,命名为AHRD2018。将AHRD2018株全基因组进行PCR分段扩增、克隆、测序发现,AHRD2018全基因组全长为10 992 bp。AHRD2018株全基因组与国内鸭源坦布苏病毒分离株同源性最高可达97.7%,处于同一进化分支;与鸽源TMUV同源性为96.7%;与鹅源TMUV同源性为96.7%左右。这一鹅源坦布苏病毒的分离及其全基因组的测定为进一步探究坦布苏病毒的跨宿主传播机制及其致病分子机理提供了材料、打下了基础。 展开更多
关键词 鹅源坦布苏病毒 分离 电镜 PCR 全基因组
重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究 预览
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作者 肖真真 汤明元 +2 位作者 夏晓莉 孙怀昌 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第10期16-19,24共5页
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切... 为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性。结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90%,产量为400 mg/mL;TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100%,回收的重组P128纯度达98%,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0.47μg/mL和1.88μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强。这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。 展开更多
关键词 重组P128蛋白 融合表达 纯化 抗葡萄球菌活性
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