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牦牛BoLA-I基因mRNA及其相关miRNAs在牦牛不同组织器官中表达分析
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作者 孙宏宇 +9 位作者 索朗斯珠 牛家强 贡嘎 郭敏 王玉恒 张鹏宇 张雷 旦巴次仁 王刚 罗润波 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期47-56,共10页
为了解牦牛BoLA-I基因mRNA组织表达谱,并探索可能靶定BoLA-I基因的miRNAs,利用RT-PCR技术对牦牛BoLA-I基因mRNA在牦牛肝、脾、肺、肾、肌肉、卵巢、小肠、下颌淋巴结、大肠和肠系膜淋巴结等10种组织的表达谱进行分析,再通过Targetscan和... 为了解牦牛BoLA-I基因mRNA组织表达谱,并探索可能靶定BoLA-I基因的miRNAs,利用RT-PCR技术对牦牛BoLA-I基因mRNA在牦牛肝、脾、肺、肾、肌肉、卵巢、小肠、下颌淋巴结、大肠和肠系膜淋巴结等10种组织的表达谱进行分析,再通过Targetscan和miRBase软件来预测可能靶定BoLA-I基因的miRNAs,检测其在10种牦牛组织中的表达情况。结果表明:BoLA-I基因mRNA在检测的10种牦牛组织中均有表达,尤其在免疫器官组织中广泛表达,在牦牛的肠系膜淋巴结组织表达水平极显著高于小肠和大肠组织(P<0.01);预测到的可能靶定牦牛BoLA-I基因的miRNA共有28个,从中选择了6个进行组织表达谱分析,发现bta-miR-759、bta-miR-142-5p、bta-miR-665、bta-miR-2322-5p、bta-miR-199a-3p与牦牛BoLA-I基因共表达;除卵巢外,bta-miR-219-5p在其他组织中均有表达,且在肝脏组织中的表达水平极显著高于其他组织(P<0.01)。bta-miR-142-5p在肠系膜淋巴结中表达量极显著高于其他组织(P<0.01)。由此推测,牦牛BoLA-I基因及其预测的miRNA可能在牦牛组织中起重要作用。 展开更多
关键词 牦牛 BoLA-I MRNA miRNA 组织表达谱
牦牛Nramp1基因mRNA组织表达谱及其相关miRNAs初步研究 预览
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作者 温东旭 张雷 +7 位作者 索朗斯珠 牛家强 王玉恒 贡嘎 旦巴次仁 席广银 郭敏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1576-1586,共11页
旨在探究牦牛Nramp1基因mRNA及可能靶定Nramp1的miRNAs组织表达谱。本研究利用RT-PCR技术对牦牛Nramp1基因的mRNA组织表达谱进行分析,同时运用TargentScan和miRBase软件预测牦牛可能靶定Nramp1基因的miRNAs,并利用加PloyA尾法RT-PCR技... 旨在探究牦牛Nramp1基因mRNA及可能靶定Nramp1的miRNAs组织表达谱。本研究利用RT-PCR技术对牦牛Nramp1基因的mRNA组织表达谱进行分析,同时运用TargentScan和miRBase软件预测牦牛可能靶定Nramp1基因的miRNAs,并利用加PloyA尾法RT-PCR技术分析miRNAs在肝、脾、肺、肾、后腿骨骼肌、卵巢、小肠、颌下淋巴结、大肠、肠系淋巴结10种组织中的相对表达量。试验结果显示,Nramp1基因mRNA在所检测的10种组织中均有表达,其中在脾、颌下淋巴结及肺组织中的表达量极显著高于肝、肾、大肠、肠系淋巴结组织(P<0.01),显著高于小肠组织表达量(P<0.05)。预测到可能靶定牦牛Nramp1基因的miRNAs共有201个,从中选择6个进行表达谱分析,发现bta-miR-106a、bta-miR-20b、bta-miR-17-5p在牦牛免疫组织脾、颌下淋巴结、肠系淋巴结中,bta-miR-93、bta-miR-106b、bta-miR-20a在牦牛免疫组织颌下淋巴结、肠系淋巴结中均与Nramp1基因mRNA共表达,但是bta-miR-93、bta-miR-20a、bta-miR-106a、bta-miR-17-5p和bta-miR-20b在颌下淋巴结和肠系淋巴结间的表达量无显著差异(P>0.05),而bta-miR-106a、bta-miR-20b在颌下淋巴结、肠系淋巴结组织中的表达量极显著高于脾组织表达量(P<0.01),bta-miR-106b在颌下淋巴结组织中的表达量极显著高于肠系淋巴结组织表达量(P<0.01)。Nramp1基因mRNA在牦牛体内广泛表达说明其可能具有广泛免疫调节作用;bta-miR-93、bta-miR-20b、bta-miR-106a、bta-miR-106b、bta-miR-20a和bta-miR-17-5p与Nramp1基因mRNA在免疫组织中的共表达表明二者可能具有靶向调控关系参与免疫调控作用,但二者是否存在真实的靶向调控以及其调控机制有待于深入研究。 展开更多
关键词 牦牛 Nramp1基因 MIRNA 组织表达谱
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西藏高校《家畜育种学》精品课程建设与实践 预览
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作者 商鹏 张健 +5 位作者 段梦琪 祁雨田 谭占坤 牛加强 强巴央宗 《吉林农业》 2019年第16期94-95,共2页
本文阐述了《家畜育种学》课程建设现状与存在问题,从教师队伍建设,丰富讲义与教案,课程定位及目标还原了其精品课程建设与实践取得的成效,其目的是促进学科发展,提高教学质量,以探索更加适宜本校学生、适宜西藏产业发展的课程规划,将... 本文阐述了《家畜育种学》课程建设现状与存在问题,从教师队伍建设,丰富讲义与教案,课程定位及目标还原了其精品课程建设与实践取得的成效,其目的是促进学科发展,提高教学质量,以探索更加适宜本校学生、适宜西藏产业发展的课程规划,将《家畜育种学》真正建设成为精品课程。 展开更多
关键词 西藏高校 家畜育种学 课程建设 实践
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西藏林芝牦牛卵母细胞体外成熟培养 预览
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作者 王玉恒 索朗斯珠 +5 位作者 贡嘎 王刚 王冬经 段佳财 《高原农业》 2018年第1期40-43,共4页
本研究旨在建立一个良好的牦牛卵母细胞体外成熟培养体系,为改善牦牛繁殖力研究提供基础参考。通过参考牛卵母细胞体外培养方法,对西藏林芝牦牛卵母细胞体外培养24h后观察卵丘扩展和第一极体排出情况,从而判定卵母细胞是否成熟。结果表... 本研究旨在建立一个良好的牦牛卵母细胞体外成熟培养体系,为改善牦牛繁殖力研究提供基础参考。通过参考牛卵母细胞体外培养方法,对西藏林芝牦牛卵母细胞体外培养24h后观察卵丘扩展和第一极体排出情况,从而判定卵母细胞是否成熟。结果表明牦牛卵泡内的卵丘卵母细胞复合(cumulus-oocyte complexes,COCs)的卵丘细胞团至少向外扩展了裸卵直径的2倍,并且卵母细胞有第一极体排出,此时牦牛卵母细胞已经处于成熟阶段,卵母细胞成熟率达(67.27±3.2)%。结果说明此培养体系能应用于牦牛卵母细胞体外成熟培养。 展开更多
关键词 牦牛 卵母细胞 成熟培养
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应用ELISA法进行西藏牦牛牛支原体流行病学研究 预览
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作者 王冬经 王子 +5 位作者 唐吴双 索朗斯珠 参木友 达娃央拉 牛家强 《高原农业》 2018年第5期497-502,共6页
为了摸清近年来西藏各地区牦牛支原体感染情况。应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对来自西藏全区的2126份牦牛血清进行牛支原体抗体检测。结果检出阳性血清994份,其阳性率为46.75%。从西藏七地的具体情况来看,其阳性率分别为:林芝57.... 为了摸清近年来西藏各地区牦牛支原体感染情况。应用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对来自西藏全区的2126份牦牛血清进行牛支原体抗体检测。结果检出阳性血清994份,其阳性率为46.75%。从西藏七地的具体情况来看,其阳性率分别为:林芝57.14%(40/70)、昌都46.73%(229/490)、拉萨53.24%(41/77)、山南16.67%(4/24)、日喀则47.81%(491/1027)、阿里55.21%(143/259)、那曲25.70%(46/179)。结果表明西藏各地牦牛支原体感染均比较严重,且大部分地区感染率呈现上升趋势,应及时采取必要措施进行综合防控。 展开更多
关键词 牦牛 牛支原体 ELISA法 流行病学
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藏鸡鸡毒支原体的分离鉴定及对常用抗菌药物的敏感性试验
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作者 牛家强 +4 位作者 胡思顺 陆时娟 李家奎 李自力 毕丁仁 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期2084-2087,2093共5页
为了探究藏鸡鸡毒支原体(MG)的生物学特性,采用分离培养法对疑似慢性呼吸道病(CRD)藏鸡气管进行了MG分离纯化,根据菌落形态、鸡红细胞吸附试验、生长抑制试验和PCR进行鉴定,利用微量法测定了分离株对临床常用抗菌药物的敏感性。结... 为了探究藏鸡鸡毒支原体(MG)的生物学特性,采用分离培养法对疑似慢性呼吸道病(CRD)藏鸡气管进行了MG分离纯化,根据菌落形态、鸡红细胞吸附试验、生长抑制试验和PCR进行鉴定,利用微量法测定了分离株对临床常用抗菌药物的敏感性。结果表明;从30份样本中仅分离到3株符合MG特征,分别命名为ZJ-1、ZJ-2和ZJ-3;通过MG 16srRNA序列比对,证实3株分离株均为与S6和HS株亲缘关系较近的较强毒力致病性MG;对试验用抗菌药物的敏感性较为一致,即对泰妙菌素、泰乐菌素、氟苯尼考、强力霉素、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、林可霉素、庆大霉素均高度敏感;对红霉素中度敏感;对土霉素不敏感,但未发现高度耐药现象。证实了藏鸡群中存在致病性MG流行,且毒力具有增强趋势,临床中可使用泰乐菌素、强力霉素等高度敏感药物进行防治。 展开更多
关键词 藏鸡 鸡毒支原体 分离鉴定 抗菌药物 药敏试验
牦牛bta-miR-1434-5p和Smad1基因组织表达谱及荧光素酶报告载体构建 被引量:1
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作者 牛家强 索朗斯珠 +6 位作者 王玉恒 商鹏 强巴央宗 郭敏 席广银 赵良栋 《中国农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期52-59,共8页
为探索牦牛Smad1基因与bta-miR-1434-5p是否存在靶向关系,探究bta-miR-1434-5p分子调控可能机制,利用RT-PCR技术对bta-miR-1434-5p和Smad1 mRNA在牦牛组织中的表达谱进行检测,并构建pmiR-RBREPORTTM双荧光素酶报告载体对牦牛Smad1基因3... 为探索牦牛Smad1基因与bta-miR-1434-5p是否存在靶向关系,探究bta-miR-1434-5p分子调控可能机制,利用RT-PCR技术对bta-miR-1434-5p和Smad1 mRNA在牦牛组织中的表达谱进行检测,并构建pmiR-RBREPORTTM双荧光素酶报告载体对牦牛Smad1基因3′端非翻译区(3′UTR)与bta-miR-1434-5p的靶向关系进行研究。结果表明:Smad1基因mRNA在牦牛下丘脑、垂体、心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、淋巴结、卵巢、输卵管、子宫组织中均有广泛表达;bta-miR-1434-5p除在牦牛输卵管中没有表达外,在其他组织均与Smad1基因mRNA共表达;获得牦牛Smad1基因3′UTR序列并成功构建野生型及突变型pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告质粒;荧光素酶活性检测发现bta-miR-1434-5p mimics对Smad1野生型质粒报告荧光没有明显的下调作用,由此推测btamiR-1434-5p与牦牛Smad1基因的该段3′UTR之间未发现明显互作。 展开更多
关键词 牦牛 bta-miR-1434-5p Smad1基因 组织表达谱 载体构建
猪萨佩罗病毒RT-PCR检测方法的建立与应用
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作者 孙杰 刘畅 +5 位作者 朱琳 焦点 郭容利 李彬 何孔旺 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第7期118-121,共4页
猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)是一种无囊膜、球形的单股正链RNA病毒,属于微RNA病毒科,能引起猪脑脊髓灰质炎、肠道、呼吸道、生殖器官疾病等多系统综合征。本试验依照已经在NCBI发表的中国地区猪萨佩罗病毒基因序列设计合成... 猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)是一种无囊膜、球形的单股正链RNA病毒,属于微RNA病毒科,能引起猪脑脊髓灰质炎、肠道、呼吸道、生殖器官疾病等多系统综合征。本试验依照已经在NCBI发表的中国地区猪萨佩罗病毒基因序列设计合成了1对特异性引物,通过优化扩增条件,建立了快速高效检测PSV的RT-PCR方法。结果表明,建立的RT-PCR检测方法特异性高、敏感性好,对PSV的最低检测限为4×103拷贝/μL;利用优化后的RT-PCR方法对2014~2016年间我国7个省市的345份临床样品进行检测,结果显示,临床PSV感染的感染率为8.12%(28/345),表明我国猪场中存在PSV感染。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 RT-PCR 应用
西藏林芝地区牦牛卵泡颗粒细胞体外分离培养和形态观察
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作者 王玉恒 索朗斯珠 +4 位作者 强巴央宗 牛家强 姚一龙 王英杰 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第5期12-14,共3页
旨在建立牦牛卵泡颗粒细胞模型以研究牦牛生殖生理机制。从林芝市牛屠宰场采集牦牛卵巢,并采用口吸管法在体视显微镜下分离卵巢表面直径为2-5 mm卵泡内的颗粒细胞,用于体外培养。结果表明:原代颗粒细胞培养12-48 h时处于潜伏期,此时细... 旨在建立牦牛卵泡颗粒细胞模型以研究牦牛生殖生理机制。从林芝市牛屠宰场采集牦牛卵巢,并采用口吸管法在体视显微镜下分离卵巢表面直径为2-5 mm卵泡内的颗粒细胞,用于体外培养。结果表明:原代颗粒细胞培养12-48 h时处于潜伏期,此时细胞刚刚贴壁并且黏附不牢固,增殖分化速度较慢;培养72-96 h时,细胞进入指数增殖期,此时细胞多呈放射状,增殖分化速度最快;培养144 h时形成颗粒细胞单层;然而传代颗粒细胞生长速度较快,48 h后细胞进入指数增殖期,72 h后颗粒细胞生长至培养皿的90%左右,形成颗粒细胞单层。 展开更多
关键词 牦牛 卵泡 颗粒细胞
牛主要抗病候选基因的研究进展 预览
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作者 孙宏宇 索朗斯珠 +4 位作者 牛家强 姚一龙 张入丹 王冬经 《中国畜牧兽医》 北大核心 2018年第7期1912-1918,共7页
牛抗病基因与其自身的抗病性和免疫能力有一定的相关性,因此研究相关抗病基因对提高牛自身免疫能力和选育优良后代有重要意义,文章着重介绍了国内外关于天然抗性相关巨噬细胞蛋白1(natual resistant macrophage protein 1,Nramp1)、... 牛抗病基因与其自身的抗病性和免疫能力有一定的相关性,因此研究相关抗病基因对提高牛自身免疫能力和选育优良后代有重要意义,文章着重介绍了国内外关于天然抗性相关巨噬细胞蛋白1(natual resistant macrophage protein 1,Nramp1)、主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)、甘露糖结合凝集素(maflnan binding lectin,MBL)、Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)及干扰素基因(interferon,IFN)与牛某些疾病相关性的研究进展,及其是否可用于后代育种的分子标记,如MHC与奶牛的乳房炎密切相关;牛TLR4基因的外显子1760C〉T突变中的CC基因型可作为奶牛乳房炎抗性筛选中的分子标记等。笔者认为研究这些抗病基因可更深层次了解牛的抗病机制,同时借助先进的技术手段如分子标记、基因工程等,可更好的选育出抗病后代,抗病基因在育种中的应用将是未来研究抗病性和免疫能力的主要方向。 展开更多
关键词 抗病候选基因 研究进展
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GDF-9对牦牛COCs体外成熟培养及其相关基因mRNA表达的影响
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作者 王玉恒 +7 位作者 索朗斯珠 强巴央宗 郭敏 程玲华 牛家强 贡嘎 王刚 孔庆辉 《中国农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第11期88-96,共9页
为探明生长分化因子-9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)对牦牛卵丘-卵母细胞复合体(Cumulusoocyte complexes,COCs)体外培养的卵母细胞成熟率及相关基因mRNA表达水平的影响:采取健康牦牛的卵巢,分离COCs进行体外成熟培养;在牦牛... 为探明生长分化因子-9(Growth differentiation factor 9,GDF-9)对牦牛卵丘-卵母细胞复合体(Cumulusoocyte complexes,COCs)体外培养的卵母细胞成熟率及相关基因mRNA表达水平的影响:采取健康牦牛的卵巢,分离COCs进行体外成熟培养;在牦牛COCs成熟培养液中添加终浓度分别为0、200、400、600ng/mL的GDF-9,统计卵母细胞成熟率;采用Real-time PCR方法检测GDF-9处理的COCs中Smad信号通路下游分子Smad4以及卵丘扩展相关基因(HAS2、PTX3、PTGS2)的mRNA表达水平。结果表明:添加0、200、400、600ng/mL GDF-9的COCs成熟率差异不显著(P>0.05)。Smad4和卵丘扩展相关基因(HAS2、PTX3、PTGS2)的mRNA表达量随着GDF-9浓度升高呈上升趋势,其中600ng/mL GDF-9处理组的Smad4和PTX3mRNA表达量最高,与其他处理组差异显著(P<0.05);600ng/mL GDF-9处理组的HAS2、PTGS2mRNA表达量与400ng/mL GDF-9处理组差异不显著(P>0.05),与其他实验组差异显著(P<0.05)。研究发现,在牦牛COCs体外培养过程中,添加不同浓度的GDF-9对牦牛卵母细胞成熟率的影响差异不显著;GDF-9显著提高其信号通路下游分子Smad4基因以及卵丘细胞扩展相关基因(HAS2、PTX3、PTGS2)的mRNA表达,说明600ng/mL GDF-9对牦牛体外培养过程中卵丘扩展有作用,作用机制可能与激活Smad信号通路有关。 展开更多
关键词 牦牛 卵丘卵母细胞复合体 体外成熟 生长分化因子-9
牦牛Smad 4基因3′UTR区双荧光素酶载体构建及与bta-miR-146a的靶向验证 预览
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作者 牛家强 王玉恒 +5 位作者 索朗斯珠 强巴央宗 郭敏 程玲华 杨士承 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1366-1376,共11页
旨在鉴定牦牛Smad4基因与bta-miR-146a的靶向关系,为探究它们在牦牛卵巢卵泡发育过程中的可能分子调控机制提供理论基础。利用miRBase数据库和MEGA 6.0软件分析miR-146a在不同物种中的保守性,同时利用TargetScan软件预测其潜在靶基因,... 旨在鉴定牦牛Smad4基因与bta-miR-146a的靶向关系,为探究它们在牦牛卵巢卵泡发育过程中的可能分子调控机制提供理论基础。利用miRBase数据库和MEGA 6.0软件分析miR-146a在不同物种中的保守性,同时利用TargetScan软件预测其潜在靶基因,通过构建psiCHECK2双荧光素酶报告基因载体进行靶向验证。生物信息学分析结果显示,miR-146a成熟序列在脊椎动物中具有高度的保守性,并预测到178个与卵巢卵泡发育相关的潜在靶基因,从中选取Smad4基因分析发现其3′非编码区域(3′UTR)与bta-miR-146a存在结合位点;进一步成功构建牦牛Smad4基因3′UTR野生型及突变型psiCHECK2双荧光素酶报告质粒,荧光素酶活性检测结果显示,bta-miR-146amimic对牦牛Smad4基因3′UTR野生型报告质粒荧光活性有明显的下调作用,分别与突变型及NC对照组差异显著(P〈0.05)。本研究初步证实,牦牛Smad4基因是bta-miR-146a的靶基因,从而提示btamiR-146a可能通过调控Smad4基因在牦牛卵巢卵泡发育过程中的表达发挥作用。 展开更多
关键词 牦牛 bta-miR-146a Smad4 荧光素酶活性
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西藏牦牛牛支原体感染的血清学调查分析 预览 被引量:1
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作者 王冬经 陈建春 +3 位作者 索朗斯珠 苏中华 牛家强 《甘肃畜牧兽医》 2018年第6期77-79,共3页
为了解近年来西藏各地牦牛牛支原体的感染情况,本试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对2017年采集的436份牦牛血清进行了牛支原体抗体检测。结果显示:本次检测的平均阳性率为46.10%(201/436),其中林芝血清抗体阳性率为42.96%(17... 为了解近年来西藏各地牦牛牛支原体的感染情况,本试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对2017年采集的436份牦牛血清进行了牛支原体抗体检测。结果显示:本次检测的平均阳性率为46.10%(201/436),其中林芝血清抗体阳性率为42.96%(17/27);昌都血清抗体阳性率为46.81%(44/94);拉萨血清抗体阳性率为55.26%(21/38);日喀则血清抗体阳性率为47.83%(44/92);阿里血清抗体阳性率为55.43%(51/92);那曲血清抗体阳性率为25.64%(20/78);山南血清抗体阳性率为26.67%(4/15)。七个地区中阳性率由高到低分别为:林芝(62.96%)、阿里(55.43%)、拉萨(55.26%)、日喀则(47.83%)、昌都(46.81%%)、山南(26.67%)、那曲(25.64%)。结果表明,目前西藏牦牛牛支原体感染状况不容乐观,且各地之间感染率有较大差异,相关部门应引起重视,并采取相应的防控措施。 展开更多
关键词 牦牛 牛支原体 ELISA 分析
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猪萨佩罗病毒3C蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立 预览
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作者 孙杰 朱琳 +6 位作者 焦点 俞正玉 范宝超 郭容利 何孔旺 李彬 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第8期697-701,共5页
为建立快速检测猪萨佩罗病毒(PSV)的血清学方法,本研究以原核表达的PSV 3C重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PSV重组3C蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该ELISA方法仅对PSV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪繁殖与... 为建立快速检测猪萨佩罗病毒(PSV)的血清学方法,本研究以原核表达的PSV 3C重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PSV重组3C蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该ELISA方法仅对PSV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型等主要猪源病毒阳性血清均无特异性反应,具有良好的特异性。该方法的批内和批间重复性变异系数均小于10%,血清稀释度可以达到1:320;采用该ELISA方法对我国2016年间采集的江苏省6个不同地区猪场的281份临床血清样品进行了检测,阳性率高达38.43%,表明江苏地区猪群中存在PSV感染。本实验建立的ELISA方法可以用于检测临床样品中的PSV抗体,特异性强、敏感性高、重复性好,是PSV流行病学调查的一种有效工具,对该病的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 3C蛋白 原核表达 间接ELISA
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西藏林芝一起黄牛亚硝酸盐中毒的诊断报告 预览
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作者 牛家强 王玉恒 +3 位作者 张德成 王冬经 索朗斯珠 《高原农业》 2017年第1期83-86,共4页
本文通过对西藏林芝一起黄牛急性死亡事件进行流行病学调查,病理剖检和实验室诊断,确诊为一起亚硝酸盐中毒事件,旨在为今后当地黄牛亚硝酸盐中毒的诊断提供参考依据,也为当地养殖户提供防制参考。采用流行病学调查,病理剖检和固体格氏... 本文通过对西藏林芝一起黄牛急性死亡事件进行流行病学调查,病理剖检和实验室诊断,确诊为一起亚硝酸盐中毒事件,旨在为今后当地黄牛亚硝酸盐中毒的诊断提供参考依据,也为当地养殖户提供防制参考。采用流行病学调查,病理剖检和固体格氏试剂法进行瘤胃内容物亚硝酸盐检测。病牛生前曾与亚硝酸盐存在密切接触史,剖检各器官病变与亚硝酸盐中毒基本一致,瘤胃内容物中检测出中毒剂量的亚硝酸盐。此事件是一起黄牛因误食工业用亚硝酸钠所致的中毒事件。 展开更多
关键词 食物中毒 亚硝酸盐 诊断
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牦牛Smad4基因mRNA组织表达谱及其miRNAs初步研究 预览 被引量:3
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作者 王玉恒 +6 位作者 牛家强 王宏辉 索朗斯珠 强巴央宗 张德成 郭敏 程玲华 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期1882-1891,共10页
本研究旨在了解牦牛Smad4基因mRNA组织表达谱,并探索研究可能靶定Smad4基因的miRNAs。利用RT-PCR技术对牦牛Smad4基因的mRNA在下丘脑、垂体、心、肝、脾、肺、肾、股二头肌、下颌淋巴结、卵巢、输卵管、子宫12种组织中的表达谱进行分析... 本研究旨在了解牦牛Smad4基因mRNA组织表达谱,并探索研究可能靶定Smad4基因的miRNAs。利用RT-PCR技术对牦牛Smad4基因的mRNA在下丘脑、垂体、心、肝、脾、肺、肾、股二头肌、下颌淋巴结、卵巢、输卵管、子宫12种组织中的表达谱进行分析,并运用TargentScan和miRBase软件预测可能靶定牛Smad4基因的miRNAs,并分析其在牦牛上的组织表达谱。结果表明,Smad4基因mRNA在所检测的牦牛12种组织中均有表达,尤其是在生殖系统的卵巢、输卵管、子宫组织中广泛表达;预测到可能靶定牦牛Smad4基因的miRNA共20个,从中选择6个进行表达谱分析发现,bta-miR-106a和bta-miR-377在所检测的12种组织中均有表达,bta-miR-146a、bta-miR-224和bta-miR-1434-5p除了在输卵管中没有表达外,在其他组织均有表达,bta-miR-212只在卵巢中有表达。综上表明,Smad4基因在牦牛各组织中可能发挥重要作用,bta-miR-212可能仅在卵巢组织作用于靶定Smad4基因,并参与牦牛繁殖生理过程调控,其机制有待进一步研究证实。 展开更多
关键词 牦牛 SMAD4 mRNA MIRNA 组织表达谱
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IGF-I及其受体IGF-IR基因在鸡胚胎腿肌发育过程中表达模式分析 被引量:2
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作者 商鹏 张浩 +3 位作者 张博 穷达 强巴央宗 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期48-54,共7页
为研究胰岛素样生长因子IGF-I及其受体IGF-IR在鸡胚胎腿部肌肉发育过程中的作用,选取藏鸡和矮小蛋鸡受精蛋孵化后,采集鸡胚胎孵化第9天、第13天和第20天时腿部肌肉组织,并利用荧光定量PCR技术检测IGF-I和IGF-IR mRNA的表达水平,同时检测... 为研究胰岛素样生长因子IGF-I及其受体IGF-IR在鸡胚胎腿部肌肉发育过程中的作用,选取藏鸡和矮小蛋鸡受精蛋孵化后,采集鸡胚胎孵化第9天、第13天和第20天时腿部肌肉组织,并利用荧光定量PCR技术检测IGF-I和IGF-IR mRNA的表达水平,同时检测IGF-I基因编码区的单核苷酸多态性并利用RFLP(限制性片段长度多态性)方法对筛选到的单核苷酸多态性进行群体水平分型。结果表明:藏鸡和矮小蛋鸡胚胎腿部肌肉组织在孵化第9天和第13天时的IGF-I和IGF-IR的mRNA表达量均极显著高于第20天,且藏鸡IGF-I的mRNA表达量在第9天也显著高于第13天,而矮小蛋鸡的IGF-I mRNA表达水平在第9天和第13天无明显差异。此外,在整个孵化过程中,矮小蛋鸡的IGF-IR的表达模式与IGF-I表达模式基本一致。而藏鸡IGF-IR的表达水平在第9天明显高于第13天但未达到显著水平(P〉0.05),同时发现第9天藏鸡IGF-IR的表达水平也高于矮小蛋鸡(P〉0.05)。除此之外,在藏鸡和矮小蛋鸡的IGF-I的编码区均发现c.282A〉G单核苷酸多态性,该SNP在藏鸡中主要以杂合子AG基因型为优势基因型,基因型频率为0.57,而在矮小蛋鸡中主要以GG基因型为优势基因型,基因型频率为0.77。根据试验结果分析得出,IGF-I和IGF-IR在腿部肌肉组织的表达水平在鸡胚胎孵化中期(第9天和第13天)显著高于孵化后期(第20天),可能是由于中期属于胚胎腿部肌肉快速发育阶段而后期腿部肌肉发育变得相对迟缓,同时IGF-I和IGF-IR的表达水平也随之发生变化。 展开更多
关键词 IGF-I IGF-IR 腿肌 胚胎 mRNA
西藏林芝地区藏猪心电图分析 预览 被引量:4
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作者 王震 +3 位作者 牛家强 商鹏 索朗斯珠 强巴央宗 《安徽农业科学》 CAS 2016年第4期143-146,共4页
[目的]通过对西藏林芝地区藏猪的心电图测定和分析,探索其心电图特征,为兽医临床诊断提供资料。[方法]利用数字单道心电图仪,分别描记和分析了西藏林芝地区46头藏猪的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ标准导联,a VR、a VL、a VF单极加压肢体导联和V1、V2、V3... [目的]通过对西藏林芝地区藏猪的心电图测定和分析,探索其心电图特征,为兽医临床诊断提供资料。[方法]利用数字单道心电图仪,分别描记和分析了西藏林芝地区46头藏猪的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ标准导联,a VR、a VL、a VF单极加压肢体导联和V1、V2、V3、V4、V5和V6单极胸导联的心电图。[结果]西藏林芝地区藏猪心率为(124.49±44.06)次/min,心电图均为窦性心律,但窦性心律不齐发生率为39.13%;QRS心电轴范围为-80°至186°,其中左偏、右偏发生率分别为19.6%;各波形和波向在不同导联一致性较好,各波的间期时间分别为:P波(37.17±7.85)ms、P-R间期(83.62±13.15)ms、QRS间期(50.86±8.13)ms、Q-T间期(226.23±19.12)ms、Q-Tc间期(225.47±31.23)ms,但各波和间期时间在成年和幼年间及公猪和母猪间均无显著差异(P〉0.05)。[结论]心率较快、心律不齐和心电轴偏离发生率较高是西藏藏猪正常心电图的特征。 展开更多
关键词 西藏 藏猪 心电图
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藏绵羊IGHA基因的PCR-SSCP检测及其与胃肠道线虫FEC的关系 被引量:1
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作者 索朗斯珠 +4 位作者 杨相前 吴超 周杰 索朗曲扎 牛家强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期118-123,142共7页
利用PCR-SSCP技术分析了352只藏绵羊免疫球蛋白Aα重链恒定区基因(immunoglobulin constant heavyα-chain gene,IGHA)DNA片段的多态性。结果显示:藏绵羊IGHA基因存在多态性,共有6种基因型(分别命名为AA、BB、CC、AB、AC和BC),由3... 利用PCR-SSCP技术分析了352只藏绵羊免疫球蛋白Aα重链恒定区基因(immunoglobulin constant heavyα-chain gene,IGHA)DNA片段的多态性。结果显示:藏绵羊IGHA基因存在多态性,共有6种基因型(分别命名为AA、BB、CC、AB、AC和BC),由3个等位基因控制(分别命名为A、B、C),克隆测序表明它们主要表现在长度(A长度为321bp,B、C长度都为315bp)和多个单核苷酸差异上;藏绵羊以基因型BC为主(基因型频率为0.534);不同基因型与5种可辨析的胃肠道线虫粪便虫卵计数(faecal egg counts,FEC)关联分析表明,CC基因型蔵绵羊对于类圆线虫(Strongyloides sp.)和夏伯特线虫(Chabertia sp.)具有相对较低的每克粪便中的虫卵数(eggs per gram,EPG)(P〈0.05),说明CC基因型具有较高的抗这2种线虫感染的能力,为优势基因型,可以初步将之作为藏绵羊分子标记辅助育种的标记之一。 展开更多
关键词 藏绵羊 IGHA基因 SSCP FEC
藏东南林芝地区特色动物养殖业的选择分析和发展评价 预览
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作者 牛家强 +3 位作者 商鹏 刘忠艳 贡嘎 谭占坤 《畜禽业》 2015年第8期44-46,共3页
西藏自治区东南部的林芝地区拥有相对较丰富的动物及饲料资源条件,这决定了大力发展特色动物养殖业经济在西藏的优势地位。文章设立了藏东南林芝地区特色动物养殖业选择标准,并对养猪业、养牛业、养羊业等主要动物养殖业及衍生产业奶... 西藏自治区东南部的林芝地区拥有相对较丰富的动物及饲料资源条件,这决定了大力发展特色动物养殖业经济在西藏的优势地位。文章设立了藏东南林芝地区特色动物养殖业选择标准,并对养猪业、养牛业、养羊业等主要动物养殖业及衍生产业奶业进行了选择分析扣发展评价,结果表明适合选择养猪业和奶业作为藏东南林芝地区的特色畜牧产业大力发展。 展开更多
关键词 动物养殖业 林芝地区 选择
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