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NaCl胁迫对马铃薯试管苗POD酶活性及同工酶的影响 认领 被引量：1
1
作者 裴怀弟 刘润萍 +2 位作者 林玉红 李淑洁 吕汰 《甘肃农业科技》 2020年第6期12-15,共4页
选用4个马铃薯品种(系)的试管苗,在不同NaCl浓度的培养基上诱导分化成苗,对其耐盐性进行初步研究。结果表明,随着NaCl浓度的增加,大西洋、L03-1、L03-6的POD酶活性与无胁迫处理相比呈现下降趋势,但L03-2与无胁迫处理相比POD酶活性呈增... 选用4个马铃薯品种(系)的试管苗,在不同NaCl浓度的培养基上诱导分化成苗,对其耐盐性进行初步研究。结果表明,随着NaCl浓度的增加,大西洋、L03-1、L03-6的POD酶活性与无胁迫处理相比呈现下降趋势,但L03-2与无胁迫处理相比POD酶活性呈增加趋势。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对NaCl胁迫马铃薯试管苗POD同工酶监测表明,马铃薯盐诱导再生苗POD同工酶谱带存在品种(系)间显著差异,盐胁迫已经不能使POD同工酶谱带保持完整,参试马铃薯品种(系)对盐浓度敏感程度存在差异。 展开更多
关键词 马铃薯试管苗 盐胁迫 POD酶活性 同工酶
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一种改进的大麦根尖染色体压片法及其应用 认领
2
作者 李淑洁 《甘肃农业科技》 2020年第5期32-35,共4页
以大麦根尖为实验材料,采用改良的苯酚品红为染色液,在《遗传学实验》的基础上探索适宜的预处理时间、解离时间和染色时间,省略了纤维素酶和果胶酶处理步骤,形成了一套快速、简单的大麦根尖压片方法,该方法获得的染色体图像清晰,便于计... 以大麦根尖为实验材料,采用改良的苯酚品红为染色液,在《遗传学实验》的基础上探索适宜的预处理时间、解离时间和染色时间,省略了纤维素酶和果胶酶处理步骤,形成了一套快速、简单的大麦根尖压片方法,该方法获得的染色体图像清晰,便于计数,可用于大麦倍性鉴定和染色体变异方面的研究。 展开更多
关键词 大麦 根尖染色体 压片方法
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兰州食用百合不同种植区干物质累积和粗淀粉、粗蛋白含量分析 认领
3
作者 林玉红 裴怀弟 +1 位作者 李淑洁 石有太 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1295-1304,共10页
【目的】研究兰州食用百合不同种植区干物质累积和粗淀粉、粗蛋白含量变化规律,分析地域差异。【方法】采用生长分析方法,检测百合鳞茎干物质累积和粗淀粉、粗蛋白含量变化特征。【结果】不同生长年限永靖县、渭源县、临洮县种植区兰州... 【目的】研究兰州食用百合不同种植区干物质累积和粗淀粉、粗蛋白含量变化规律,分析地域差异。【方法】采用生长分析方法,检测百合鳞茎干物质累积和粗淀粉、粗蛋白含量变化特征。【结果】不同生长年限永靖县、渭源县、临洮县种植区兰州食用百合鳞茎干物质累积增长幅度不同,3个种植区相比较,百合鳞茎干物质累积量差异均达极显著水平(P<0.01)。3年生兰州食用百合鳞茎干物质累积量大小为临洮县>渭源县>永靖县。百合鳞茎粗淀粉含量临洮县高于永靖县(24.74%)和渭源县(68.02%),粗淀粉含量高低顺序为:临洮县>永靖县>渭源县;百合鳞茎粗蛋白含量临洮县高于永靖县(8.55%)和渭源县(11.09%),粗蛋白含量高低顺序为临洮县>永靖县>渭源县。3年生兰州食用百合,渭源县和临洮县种植区鳞茎干物质累积量与粗蛋白含量均呈极显著正相关(0.99**,1.00**,P<0.01)。【结论】不同种植区兰州食用百合营养物质含量不同,区域间差异显著。 展开更多
关键词 兰州食用百合 种植区 干物质 粗淀粉 粗蛋白 旱地
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基于响应面法优化兰州百合芽增殖培养基 认领
4
作者 裴怀弟 林玉红 +2 位作者 李琦 李淑洁 张艳萍 《甘肃农业科技》 2020年第7期7-12,共6页
以兰州百合鳞片为外植体获得的小鳞芽为材料,利用响应面法的Box-Behnken设计方法,对百合组培芽增殖进行试验优化。结果从响应面法优化模型得出的芽增殖最佳培养基为MS+1.25 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,在此条件下,增殖系数达3.82。
关键词 响应面法 兰州百合 芽增殖 增殖系数 培养基
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核苷酸适配体修饰的pH响应明胶纳米粒的制备 认领 被引量：1
5
作者 林汐 李淑洁 +1 位作者 刘媛媛 黄园 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2020年第2期139-143,共5页
目的制备核苷酸适配体修饰的pH响应明胶纳米粒,用以靶向递送抗癌药物阿霉素(Dox)至肿瘤细胞,对其进行表征并初步考察其体外抗肿瘤能力。方法通过二次去溶剂法制备明胶纳米粒,通过点击化学和酰胺反应分别修饰聚乙二醇2000(PEG2000)及核... 目的制备核苷酸适配体修饰的pH响应明胶纳米粒,用以靶向递送抗癌药物阿霉素(Dox)至肿瘤细胞,对其进行表征并初步考察其体外抗肿瘤能力。方法通过二次去溶剂法制备明胶纳米粒,通过点击化学和酰胺反应分别修饰聚乙二醇2000(PEG2000)及核苷酸适配体,并对纳米粒的粒径、电位、稳定性、载药量及药物释放进行评价,同时考察该递药体系对小鼠乳腺癌细胞的生长抑制作用。结果该纳米粒粒径为150.6±5.03 nm,PDI为0.205±0.4,电位呈近中性,载药量为6.72%±0.51%。在4℃下储存30 d,粒径无明显改变;在pH5.0下,24 h的药物累积释放量达到89%,是pH7.4下的4.23倍。核苷酸适配体修饰的载药明胶纳米粒对4T1细胞48 h的IC50值仅为0.99μg·mL-1,显著低于PEG修饰的载药明胶纳米粒的3.42μg·mL-1,细胞毒性提高3.435倍。结论核苷酸适配体修饰的pH响应明胶纳米粒的粒径大小适宜、分布均匀,具有良好的pH响应释药能力,能显著提高载阿霉素明胶纳米粒的体外抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 核苷酸适配体 明胶纳米粒 肿瘤靶向 PH响应 阿霉素 乳腺癌 纳米技术 二次去溶剂法
不同胡麻品种TAG合成途径关键基因表达与含油量、脂肪酸组分的相关性分析 认领 被引量：2
6
作者 李闻娟 齐燕妮 +7 位作者 王利民 党照 赵利 赵玮 谢亚萍 王斌 张建平 李淑洁 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期138-149,共12页
胡麻是一种富含不饱和脂肪酸尤其是α-亚麻酸的油料作物,明晰TAG合成途径中与胡麻含油量和脂肪酸组分相关的基因具有重要的理论意义。以3个含油量和脂肪酸组分有显著差异的胡麻品种(系)为材料,分析了不同品种(系)、不同组织和不同发育... 胡麻是一种富含不饱和脂肪酸尤其是α-亚麻酸的油料作物,明晰TAG合成途径中与胡麻含油量和脂肪酸组分相关的基因具有重要的理论意义。以3个含油量和脂肪酸组分有显著差异的胡麻品种(系)为材料,分析了不同品种(系)、不同组织和不同发育阶段胡麻油脂和脂肪酸组分的动态积累模式和TAG合成途径中7个关键基因的动态表达模式,以及含油量和不饱和脂肪酸与7个关键基因表达的相关性。结果表明,胡麻开花后10~20d,是种子油脂和亚麻酸的快速积累期,且不同胡麻品种(系)油脂和亚麻酸的动态积累模式差异显著。TAG合成途径中的7个关键基因(GPAT9、DGAT1、DGAT2、PDAT1、PDAT2、FAD2A和FAD3A)在胡麻不同发育阶段的不同组织中均有表达,在不同品种(系)间的表达模式各不相同。其中PDAT1、DGAT1和DGAT2基因的动态表达模式与含油量的动态积累模式显著正相关,PDAT1的动态表达模式与亚麻酸的动态积累模式显著正相关,且在高油高亚麻酸材料的种子动态发育阶段中PDAT1基因的累积表达量也显著高于低油低亚麻酸材料。因此,PDAT1可能是影响胡麻不同品种(系)中含油量和亚麻酸含量的关键基因。 展开更多
关键词 胡麻 含油量 亚麻酸 基因表达分析 相关性分析
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“一带一路”背景下兰州食用百合的新机遇、新挑战 认领
7
作者 林玉红 裴怀弟 +1 位作者 石有太 李淑洁 《甘肃农业》 2019年第10期51-53,共3页
兰州食用百合种植历史悠久,种植生态区域广泛,独特的产品风味,赢得了区域公共品牌的各项殊荣。在“一带一路”发展机遇面前,还面临种球脱毒繁育滞后、种植生产标准化程度低、产品质量控制和监管缺失、品牌意识淡薄等挑战。要赢得国际市... 兰州食用百合种植历史悠久,种植生态区域广泛,独特的产品风味,赢得了区域公共品牌的各项殊荣。在“一带一路”发展机遇面前,还面临种球脱毒繁育滞后、种植生产标准化程度低、产品质量控制和监管缺失、品牌意识淡薄等挑战。要赢得国际市场的认可,就需要由政府引导,完善相关质量管控和监督体系,加强标准化基地建设,提升兰州食用百合产品的内涵和竞争力,通过营销推广,展现兰州百合品牌的品质特色,以赢得未来市场。 展开更多
关键词 兰州百合 一带一路 挑战
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兰州百合组培小鳞茎诱导技术研究 认领 被引量：5
8
作者 裴怀弟 林玉红 +3 位作者 李淑洁 厚毅清 叶春雷 张海林 《甘肃农业科技》 2019年第7期29-32,共4页
采用组织培养方法对兰州百合鳞片不同部位芽诱导和试管小鳞茎生根膨大进行研究。结果表明,兰州百合最佳外植体为鳞片下部,其次为鳞片中部,鳞片上部不适于作外植体材料。组培小鳞茎一次膨大和二次膨大分别处理60、90、120d的鲜重和横径... 采用组织培养方法对兰州百合鳞片不同部位芽诱导和试管小鳞茎生根膨大进行研究。结果表明,兰州百合最佳外植体为鳞片下部,其次为鳞片中部,鳞片上部不适于作外植体材料。组培小鳞茎一次膨大和二次膨大分别处理60、90、120d的鲜重和横径均随着处理时间的增加而增大,且二次膨大比一次膨大效果显著。 展开更多
关键词 兰州百合 组织培养 诱导 小鳞茎
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密度对旱地兰州百合干物质和养分累积的影响 认领
9
作者 林玉红 裴怀弟 +2 位作者 李淑洁 石有太 陈军 《北方农业学报》 2019年第6期9-14,共6页
为保证旱地大田条件下兰州百合种球的商品性和质量,需科学明确其种植密度。文章采用生长分析方法,研究2个种植密度对兰州百合种球干物质及养分吸收累积的影响。结果表明:密度显著影响不同生长年限种球生育期干物质和氮、磷、钾素吸收累... 为保证旱地大田条件下兰州百合种球的商品性和质量,需科学明确其种植密度。文章采用生长分析方法,研究2个种植密度对兰州百合种球干物质及养分吸收累积的影响。结果表明:密度显著影响不同生长年限种球生育期干物质和氮、磷、钾素吸收累积变化动态特征。密度增加可使苗期至现蕾期地上植株、地下鳞茎干物质累积速度增大,干物质累积增多,但干物质快速持续累积的时间缩短,干物质累积峰值提前。单位面积单位时间兰州百合种球氮、磷、钾素养分吸收累积量随种植密度的增大而增加。高密度与低密度相比较,第1年枯萎期(192 d)种球磷、钾素累积量差异达极显著水平(P<0.01),氮素累积量差异不显著(P>0.05);第2年枯萎期(533 d)种球氮、磷、钾素累积量差异均不显著(P>0.05)。枯萎期第2年比第1年,低密度种植种球氮、磷、钾素累积增长均高于高密度种植,种球氮、磷、钾素累积量分别增长79.11%,72.48%,21.45%,而高密度下分别增长48.34%,11.56%,-20.09%。建议旱地大田生产,兰州百合种球的合理种植密度以60万~65万株/hm^2为宜。 展开更多
关键词 兰州百合 密度 旱地 干物质 养分累积 种球
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农杆菌介导的胡麻转化因子的优化 认领
10
作者 李淑洁 罗俊杰 +2 位作者 林玉红 裴怀弟 李闻娟 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期970-976,共7页
农杆菌介导法是植物遗传转化的重要方法之一,为了提高农杆菌介导的胡麻遗传转化效率,以‘陇亚10号’和‘定亚22号’下胚轴为基因转化受体,以pCAMBIA3301为转化质粒,分析草铵膦选择压、下胚轴预处理（剥表皮、预培养）、农杆菌菌株、侵... 农杆菌介导法是植物遗传转化的重要方法之一,为了提高农杆菌介导的胡麻遗传转化效率,以‘陇亚10号’和‘定亚22号’下胚轴为基因转化受体,以pCAMBIA3301为转化质粒,分析草铵膦选择压、下胚轴预处理（剥表皮、预培养）、农杆菌菌株、侵染时间和乙酰丁香酮对gus表达率/频率和抗性苗率的影响,优化以上转化因子参数,建立高效的胡麻遗传转化体系,为后续的胡麻功能基因组学研究和遗传改良奠定基础。结果表明：下胚轴愈伤组织诱导、分化和再生苗生根阶段的草铵膦选择压分别是10mg/L、5mg/L和2mg/L;下胚轴预处理对gus表达率/频率无显著影响,却显著影响抗性苗分化率,不剥表皮和预培养3d抗性苗率分别提高5倍和9倍;农杆菌菌株和侵染时间都显著影响gus表达率/频率和抗性苗率,C58c1侵染60min时gus表达频率最高,为7.5,抗性苗率为60.3%。乙酰丁香酮能显著提高C58c1和GV3101介导转化时gus表达频率。 展开更多
关键词 胡麻 农杆菌介导法 转化因子 抗性苗率 gus表达率
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京津冀地区农村建筑节能方案探究 认领 被引量：2
11
作者 李淑洁 郝学军 +1 位作者 李宇航 尹婧 《区域供热》 2018年第4期73-78,共6页
随着能源形式的逐渐严峻,建筑节能成为了世界各国的关注重点,我国自推广建筑节能工作以来,已经在城市地区获得了许多成果,但是农村地区低密度住宅的节能减排工作尚在起步阶段。本文根据农村地区的居住建筑特点,结合＂煤改电＂工作,对京... 随着能源形式的逐渐严峻,建筑节能成为了世界各国的关注重点,我国自推广建筑节能工作以来,已经在城市地区获得了许多成果,但是农村地区低密度住宅的节能减排工作尚在起步阶段。本文根据农村地区的居住建筑特点,结合＂煤改电＂工作,对京津冀农村地区的住宅建筑节能方案进行探究,探讨建筑外围护结构保温与二次能源利用等节能技术的结合运用方式。 展开更多
关键词 建筑节能 外围护结构 热泵技术
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奥氮平抑制Aβ淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用 认领 被引量：3
12
作者 陈秀娟 吴海燕 +1 位作者 李云霞 李淑洁 《中国临床药理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期718-721,共4页
目的探讨奥氮平对Aβ淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法将PC12细胞随机分为对照组、模型组、低中高3个剂量实验组。模型组和实验组用10μmol·L^-1Aβ25-35导PC12细胞,构建氧化应激模型。低、中、高剂量... 目的探讨奥氮平对Aβ淀粉样蛋白25-35（Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法将PC12细胞随机分为对照组、模型组、低中高3个剂量实验组。模型组和实验组用10μmol·L^-1Aβ25-35导PC12细胞,构建氧化应激模型。低、中、高剂量实验组分予以10,30,100μg·mL-（-1）奥氮平培养,对照组和模型组予以不含任何药物的培养基。用噻唑蓝法检测细胞活力,用Hoechst染色法检测细胞凋亡情况,用分光光度法检测Caspase 3活性,用Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）含量及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）通路的激活状况。结果对照组、模型组和低中高3个剂量实验组的细胞活力分别为（100.00±9.35）%,（58.46±5.59）%,（67.43±6.52）%,（76.31±7.60）%,（89.21±8.85）%;Caspase 3活性分别为（1.00±0.12）,（3.48±0.35）,（2.85±0.28）,（2.03±0.20）,（1.34±0.13）U·mg^-1;Bcl-2表达量分别为（0.68±0.06）,（0.24±0.02）,（0.38±0.04）,（0.63±0.06）,（0.69±0.07）;Bax表达量分别为（0.27±0.02）,（0.82±0.08）,（0.63±0.06）,（0.43±0.04）,（0.30±0.03）;PI3K表达量分别为（0.89±0.08）,（0.22±0.02）,（0.34±0.03）,（0.50±0.05）,（0.54±0.05）;p-AKT表达量分别为（2.32±0.22）,（0.28±0.02）,（0.27±0.02）,（1.88±0.18）,（2.00±0.20）;p-CREB表达量分别为（2.79±0.24）,（0.18±0.01）,（0.14±0.01）,（0.47±0.04）,（0.50±0.05）;其中模型组的上述指标与对照组比较,差异均均有统计学意义（均P〈0.01）,低中高3个剂量实验组的细胞活力、Caspase 3活性、Bcl-2、Bax及PI3K表达量与模型组比较,差异均有统计学意义（均P〈0.01）,中、高剂量组p-AKT及p-CREB表达量与模型组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论奥氮平对Aβ25-35导PC12细胞损伤具有显著的保护作用,可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 奥氮平 PC12细胞 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
苏浙教育类非公募基金会研究 认领
13
作者 高力克 李淑洁 《浙江社会科学》 CSSCI 北大核心 2017年第5期87-93,共7页
非公募基金会是转型中国最活跃的民间公益组织,教育是它们开展公益活动的重要领域。江苏、浙江两省的这类组织在全国处于领先水平,它们在支持教育发展的活动中呈现出明显的区域特色：既有活动方式的灵活多样,又有面向长远和注重实效的... 非公募基金会是转型中国最活跃的民间公益组织,教育是它们开展公益活动的重要领域。江苏、浙江两省的这类组织在全国处于领先水平,它们在支持教育发展的活动中呈现出明显的区域特色：既有活动方式的灵活多样,又有面向长远和注重实效的务实特征;不仅充实了教育资源,也推动了教育模式的变革,带动了总体社会力量的参与,引导人们重视基础教育和不同阶段教育的均衡发展,其经验对其他地区有一定的借鉴意义。 展开更多
关键词 非公募基金会 教育参与 特征与经验
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弘扬雷锋精神在大学生思想政治教育中的价值 认领
14
作者 李淑洁 《太原城市职业技术学院学报》 2017年第7期87-88,共2页
雷锋精神是中华民族宝贵的精神财富,包含着十分丰富的内涵。弘扬雷锋精神,对提高大学生的思想道德素质和促进大学生的全面发展具有十分重要的意义。文章概括了雷锋精神的内涵,进一步探索了弘扬雷锋精神在大学生思想政治教育中的价值,以... 雷锋精神是中华民族宝贵的精神财富,包含着十分丰富的内涵。弘扬雷锋精神,对提高大学生的思想道德素质和促进大学生的全面发展具有十分重要的意义。文章概括了雷锋精神的内涵,进一步探索了弘扬雷锋精神在大学生思想政治教育中的价值,以期能够增强大学生思想政治教育的实效性。 展开更多
关键词 雷锋精神 大学生 思想政治教育
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提高非市场评估有效性和可靠性的方法分析 认领
15
作者 李淑洁 赵晓丽 《管理观察》 2016年第36期41-43,共3页
非市场评估法是定量化评估环境外部成本的重要技术。该方法主要通过问卷询问公众愿意为环境品质的改善所支付的金额（WTP）或者对于环境品质的恶化所接受的补偿（wTA），从而推导环境物品的价值。由于问卷内容基于假想情景进行，因此，... 非市场评估法是定量化评估环境外部成本的重要技术。该方法主要通过问卷询问公众愿意为环境品质的改善所支付的金额（WTP）或者对于环境品质的恶化所接受的补偿（wTA），从而推导环境物品的价值。由于问卷内容基于假想情景进行，因此，提高评估结果的有效性和可靠性一直是备受关注的问题。本文认为影响非市场评估有效性和可靠性的因素包括调查方式、问卷设计和个体偏好，并分析了提高有效性和可靠性的检验方法，提出了相关研究假设。 展开更多
关键词 非市场评估 有效性 可靠性 调查方式 检验方法
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材料作文“为鹿打伞”素材运用指导 认领
16
作者 李淑洁 《中学生博览》 2016年第19期I0185-I0188,共4页
【仿真试题】 阅读下面的材料，从中选择一个角度构思立意，自拟题目，写一篇文章，可叙述经历，可抒发情感，可发表议论。 鹿是日本奈良的“永久居民”，也是那里的旅游看点。鹿之于奈良，恰如猴与花果山。据统计，目前生活在奈良的... 【仿真试题】 阅读下面的材料，从中选择一个角度构思立意，自拟题目，写一篇文章，可叙述经历，可抒发情感，可发表议论。 鹿是日本奈良的“永久居民”，也是那里的旅游看点。鹿之于奈良，恰如猴与花果山。据统计，目前生活在奈良的鹿总计约12O0头左右，全都是野生鹿。 展开更多
关键词 材料作文 鹿 素材 自拟题目 永久居民 奈良 花果山 文章
材料作文“为鹿打伞”素材运用指导 认领
17
作者 李淑洁 《作文与考试：初中版》 2016年第19期119-122,共4页
【仿真试题】阅读下面的材料，从中选择一个角度构思立意，自拟题目，写一篇文章，可叙述经历，可抒发情感，可发表议论。鹿是日本奈良的“永久居民”，也是那里的旅游看点。鹿之于奈良，恰如猴与花果山。据统计，目前生活在奈良的鹿总... 【仿真试题】阅读下面的材料，从中选择一个角度构思立意，自拟题目，写一篇文章，可叙述经历，可抒发情感，可发表议论。鹿是日本奈良的“永久居民”，也是那里的旅游看点。鹿之于奈良，恰如猴与花果山。据统计，目前生活在奈良的鹿总计约1200头左右，全都是野生鹿。它们不仅成了奈良的特色与标志，还被日本政府指定为“天然国宝”。 展开更多
关键词 材料作文 鹿 素材 日本政府 自拟题目 永久居民 奈良 花果山
牛膝提取物对碘乙酸钠诱导的软骨细胞保护作用 认领 被引量：6
18
作者 李淑洁 陈秀娟 +1 位作者 任艳红 王伟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期132-135,共4页
目的：探讨牛膝提取物对碘乙酸钠（MIA）诱导的软骨细胞保护作用。方法：通过Ⅱ型胶原酶消化SD大鼠软骨,获得软骨细胞,实验分为5组,分别为正常组,模型组（4μmol·L-1MIA）,牛膝提取物低剂量组（10 mg·L-1＋4μmol·L-1MIA... 目的：探讨牛膝提取物对碘乙酸钠（MIA）诱导的软骨细胞保护作用。方法：通过Ⅱ型胶原酶消化SD大鼠软骨,获得软骨细胞,实验分为5组,分别为正常组,模型组（4μmol·L-1MIA）,牛膝提取物低剂量组（10 mg·L-1＋4μmol·L-1MIA）,牛膝提取物中剂量组（30 mg·L-1＋4μmol·L-1MIA）,牛膝提取物高剂量组（100 mg·L-1＋4μmol·L-1MIA）,造模与给药分别为24 h;MTT法检测各组软骨细胞活力;Hoechst 33258染色法检测各组软骨细胞形态变化;分光光度法检测各组软骨细胞中Caspase-3活性;Western blot分析各组AKT激活状况及下游靶分子Bax,Bcl-2的表达。结果：与正常组比较,模型组中软骨细胞活力下降,细胞核发生皱缩或裂解,细胞中Caspase-3活性和Bax表达量上升,Bcl-2表达量下降,AKT磷酸化程度降低,差异均具有显著性意义（P〈0.01）。与模型组比较,牛膝提取物中、高剂量组可改善软骨细胞活力,恢复软骨细胞形态并抑制Bax表达;牛膝提取物低、中、高剂量组皆能降低大鼠软骨细胞中Caspase-3活性,提高Bcl-2表达,并促进AKT磷酸化,差异具有显著性意义（P〈0.01）。结论：牛膝提取物具有保护MIA诱导的软骨细胞作用,是通过抑制软骨细胞凋亡实现的,可能与PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 牛膝提取物 骨关节炎 软骨细胞 凋亡
利用RNAi抑制B-hordein合成降低大麦籽粒蛋白质含量 认领 被引量：4
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作者 李静雯 张正英 +1 位作者 令利军 李淑洁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第19期3746-3756,共11页
【目的】通过RNAi策略抑制大麦籽粒B-hordein的表达,获得高氮肥水平下籽粒蛋白质含量降低的转基因大麦新种质,探索大麦品质改良新途径。【方法】采用同源PCR技术克隆大麦B-hordein核心保守序列,通过Gateway技术构建大麦B-hordein的RNAi... 【目的】通过RNAi策略抑制大麦籽粒B-hordein的表达,获得高氮肥水平下籽粒蛋白质含量降低的转基因大麦新种质,探索大麦品质改良新途径。【方法】采用同源PCR技术克隆大麦B-hordein核心保守序列,通过Gateway技术构建大麦B-hordein的RNAi植物表达载体pBract207-zz-gp4,利用农杆菌介导法转化大麦Golden Promise幼胚,获得转基因植株。通过PCR检测、Southern杂交验证RNAi构件在转基因大麦及其后代基因组的整合情况。采用半定量RT-PCR分析转基因大麦花后不同发育时期B-hordein转录表达情况。基于近红外谷物分析仪测定蛋白质含量,并进行醇溶蛋白SDS-PAGE检测,以筛选蛋白质含量降低的转基因大麦株系。开展氮肥运筹相关试验,检验RNAi效率及高氮肥水平下转基因大麦蛋白质含量变化情况。【结果】获得大麦B-hordein片段2条（Gp4和Gp5）,测序结果表明该片段大小为349 bp,聚类分析表明该序列跟已知大麦醇溶蛋白基因同源性最高达92%,与该基因已登录的mRNA序列同源性高于98%,确认所得片段为大麦B醇溶蛋白基因片段。利用Gateway技术将Gp4片段正反向插入载体pBract207,反向重复序列用i18和iv2 intron连接,构建了Ubi启动子驱动的大麦B-hordein RNAi植物表达载体pBract207-zz-gp4。通过农杆菌介导转化大麦Golden Promise幼胚,结合目标基因及筛选标记基因的PCR验证,获得含有RNAi构件及筛选标记基因的转基因大麦株系11个。Southern杂交检测表明RNAi构件已经稳定整合到T2/T3转基因大麦基因组。随机选取6个T3转基因大麦株系,半定量RT-PCR结果表明花后不同发育时期转基因大麦籽粒B-hordein表达水平明显低于非转基因对照,20 d时转基因株系表达量不仅相比同期对照降低28.19%—55.19%,而且在各时期中也最低。利用随机选取的T1和T3籽粒进行蛋白质含量测定表明8个转基因大麦株系的蛋白质含量相比非转基因对照显著降� 展开更多
关键词 大麦 B醇溶蛋白基因 蛋白质含量 RNAI
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Ta6-SFT 在烟草中的逆境诱导型表达及抗旱性 认领 被引量：5
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作者 李淑洁 李静雯 张正英 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期994-1001,共8页
分别构建CaMV35S启动子驱动的Ta6-SFT组成型植物表达载体和rd29A启动子驱动的逆境诱导型表达载体。利用农杆菌介导法分别导入烟草中，获得转基因株系，Southern杂交和Northern点杂交确定Ta6-SFT整合进转基因株系基因组中，并正常转录。... 分别构建CaMV35S启动子驱动的Ta6-SFT组成型植物表达载体和rd29A启动子驱动的逆境诱导型表达载体。利用农杆菌介导法分别导入烟草中，获得转基因株系，Southern杂交和Northern点杂交确定Ta6-SFT整合进转基因株系基因组中，并正常转录。以非转基因株系作对照，对2种转基因烟草株系进行干旱胁迫处理，采用半定量RT-PCR分析Ta6-SFT在转基因株系中的表达，同时测定胁迫0 d和18 d果聚糖含量及部分农艺性状。结果表明，含有rd29A启动子的逆境诱导型株系中Ta6-SFT相对表达量比在含CaMV35S启动子的组成型株系中高，而且积累更多的果聚糖；从株高、1/2株高处茎粗、叶面积数据来看，逆境诱导型转基因株系的生长势优于组成型株系，对干旱表现强的耐性。因此，在转基因植物中逆境诱导型表达Ta6-SFT基因将发挥更好的抗逆功能。 展开更多
关键词 Ta6-SFT 果聚糖 干旱胁迫 逆境诱导型表达 组成型表达
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