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免疫磁珠法结合条件培养基进行低密度条件下的神经元原代培养 预览
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作者 李玉 颜慧 苏瑞斌 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期295-299,共5页
目的利用免疫磁珠(IMB)细胞分选技术结合星形胶质细胞条件培养基(A-CM)进行低密度条件下原代神经元培养。方法取新生(24 h)内昆明小鼠取大脑半球,通过机械分离与胰酶消化制备细胞悬液进行原代培养。培养10 d后,利用恒温振荡法去除小胶... 目的利用免疫磁珠(IMB)细胞分选技术结合星形胶质细胞条件培养基(A-CM)进行低密度条件下原代神经元培养。方法取新生(24 h)内昆明小鼠取大脑半球,通过机械分离与胰酶消化制备细胞悬液进行原代培养。培养10 d后,利用恒温振荡法去除小胶质细胞等杂细胞,抗胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞纯度。利用达到纯度要求的细胞培养物制备A-CM。分别取新生(24 h)内昆明小鼠大脑皮质和海马,通过机械分离与胰酶消化制备细胞悬液,经IMB细胞分选获得高纯度神经元,加入A-CM进行低密度条件下神经元的原代培养。观察培养过程中神经元的形态学指标,以抗160 ku神经丝抗体免疫荧光染色鉴定神经元纯度。结果细胞免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞的纯度>95%。小鼠皮质和海马神经元形态学观察与细胞免疫荧光染色结果表明,神经元在低密度培养条件下生长良好,不同发育阶段的形态学特征明显,纯度较高。结论低密度条件下成功培养了小鼠大脑皮质和海马原代神经元。 展开更多
关键词 神经元 大脑皮质 海马 免疫磁珠 原代培养 条件培养基
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“一带一路”背景下镇江跨境电商的发展研究 预览 被引量:1
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作者 李玉 池方圆 《中国商论》 2017年第21期13-14,共2页
本文以跨境电商为主体,深入研究了"一带一路"背景为镇江跨境电商发展面临的契机。通过对镇江跨境电商的发展现状进行实地调研,运用SWOT定性与定量分析方法归纳出适合镇江跨境电商发展的个性化运营模式和体制机制。
关键词 “一带一路” 镇江 跨境电商
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稳定表达人源α2A-肾上腺素受体细胞系的建立 预览 被引量:1
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作者 杨怿 李玉 +3 位作者 刘梦 周培岚 苏瑞斌 宫泽辉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期576-581,共6页
目的建立稳定表达人源α2A-肾上腺素能受体(α2A-AR)的细胞系。方法将带有潮霉素B(Hygro)抗性的α2A-AR(pc DNA3.1/Hygro-HA-α2A-AR)重组质粒通过脂质体介导转染至已表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(PKA... 目的建立稳定表达人源α2A-肾上腺素能受体(α2A-AR)的细胞系。方法将带有潮霉素B(Hygro)抗性的α2A-AR(pc DNA3.1/Hygro-HA-α2A-AR)重组质粒通过脂质体介导转染至已表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的蛋白激酶A催化亚基(PKAcat)的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞(以Hygro 200 mg·L^-1进行压力筛选后,采用PKA重分布实验筛选阳性克隆),然后使用实时定量PCR验证α2A-AR受体在转录水平的表达,最后以时间分辨荧光共振能量转移免疫实验检测c AMP含量以鉴定受体功能。结果 PKA重分布实验结果表明,CHO-PKAcat-α2A-AR 7号克隆反应性良好;与CHO-PKAcat-EGFP细胞相比,该细胞系α2A-AR m RNA表达水平较高(P〈0.01),且多次传代能保持稳定;在α2A-AR激动剂作用后,能显著抑制forskolin引起的c AMP水平升高(P〈0.01)。结论成功构建稳定表达α2A-AR的CHO-PKAcat-α2A-AR细胞系,可用于药物筛选及机制研究。 展开更多
关键词 中国仓鼠卵巢细胞 受体 肾上腺素α2A 蛋白激酶A c AMP
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芳香环并咪唑环类凋亡抑制蛋白抑制剂的设计、合成与抗肿瘤活性评价
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作者 王鑫 李玉 +2 位作者 宫泽辉 顾为 聂爱华 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期341-352,共12页
目的设计并合成新的小分子凋亡抑制蛋白抑制剂。方法运用计算机辅助药物设计模拟靶蛋白与目标分子的结合作用,设计并合成新结构的化合物,以紫杉醇作为阳性对照,进行与多个凋亡抑制蛋白的结合实验和多个细胞系的抗肿瘤细胞增殖抑制活... 目的设计并合成新的小分子凋亡抑制蛋白抑制剂。方法运用计算机辅助药物设计模拟靶蛋白与目标分子的结合作用,设计并合成新结构的化合物,以紫杉醇作为阳性对照,进行与多个凋亡抑制蛋白的结合实验和多个细胞系的抗肿瘤细胞增殖抑制活性评价,并比较目标物对癌细胞的抑制率。结果合成两个系列共21个目标化合物,部分化合物表现出对多个凋亡抑制蛋白有强烈的抑制活性(纳摩尔级)和对多种肿瘤细胞的抑制能力,其中,ⅡA-1活性最为突出,对XIAPL-BIR2-BIR3抑制作用的IC50值为77.2nmol·L^-1;对乳腺癌细胞系MDA-MB-231的抑制率为70.9%,相同条件下紫杉醇的抑制率仅为38.5%。结论合成的部分化合物有较好的活性,将为今后此类凋亡抑制蛋白抑制剂的研究奠定基础。 展开更多
关键词 凋亡抑制蛋白 抑制剂 设计 合成 抗肿瘤活性
家用空调外机生产线节能降耗研究 预览
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作者 杨波 王保华 李玉 《华北水利水电学院学报》 2013年第3期90-91,共2页
从3个方面对家用空调外机生产线的节能和提效做了改善和提高:在空调生产线的灌注环线上,设计了冷媒回收利用;对商检测试环线上的运行节拍进行了计算和总结,找出了制约运行节拍的因素并做了改进;对生产线上的减速电机选型做了对比... 从3个方面对家用空调外机生产线的节能和提效做了改善和提高:在空调生产线的灌注环线上,设计了冷媒回收利用;对商检测试环线上的运行节拍进行了计算和总结,找出了制约运行节拍的因素并做了改进;对生产线上的减速电机选型做了对比,得出了更适合生产线使用的型号. 展开更多
关键词 家用空调 外机生产线 节能降耗
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凋亡抑制蛋白抑制剂的设计合成与抗肿瘤活性评价 被引量:1
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作者 顾为 王鑫 +3 位作者 李玉 李斐 苏瑞斌 聂爱华 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期81-91,共11页
目的设计并合成具有抗肿瘤活性的小分子凋亡抑制蛋白广泛性抑制剂。方法运用基于靶点结构的药物设计策略改造前期得到的苗头化合物,设计合成新结构化合物,并进行多靶点的凋亡抑制蛋白家族(IAPs)结合实验和多个细胞系的肿瘤细胞增殖... 目的设计并合成具有抗肿瘤活性的小分子凋亡抑制蛋白广泛性抑制剂。方法运用基于靶点结构的药物设计策略改造前期得到的苗头化合物,设计合成新结构化合物,并进行多靶点的凋亡抑制蛋白家族(IAPs)结合实验和多个细胞系的肿瘤细胞增殖抑制活性评价。结果合成了25个新结构化合物,部分表现出较强的IAPs抑制活性和多种肿瘤细胞增殖抑制能力(微摩尔级别),Ⅱc系列化合物显示出较强的ciAP1选择性(〉1000)。结论五元杂环烷当中的4s-甲基是化合物对两类IAPs产生选择性差异的结构基础。 展开更多
关键词 凋亡抑制蛋白 设计 合成 抑制剂
企业绩效考评中的推定原则与逆向选择
7
作者 李玉 袁乐平 《系统工程》 CSSCI CSCD 北大核心 2013年第8期106-111,共6页
本文旨在将对逆向选择问题的研究延伸到企业绩效考评过程中。在信息不对称条件下,考评主体不得不在企业绩效考评中引入合格推定原则。在基于合格推定的考评对象的行为决策模型中,考评主体认定的绩效与绩效的自然状态发生偏离,一部分... 本文旨在将对逆向选择问题的研究延伸到企业绩效考评过程中。在信息不对称条件下,考评主体不得不在企业绩效考评中引入合格推定原则。在基于合格推定的考评对象的行为决策模型中,考评主体认定的绩效与绩效的自然状态发生偏离,一部分事实不迭标绩效被推定为达标绩效。将不达标绩效推定为达标的可能性驱使考评对象有可能选择偷懒策略,即生成逆向选择。按照完全理性假定,考评对象按后悔值最小原则进行行为策略抉择。走出绩效推定情境中逆向选择困境的基本思路是提高考评对象采用偷懒策略的后悔值。为此,一方面要提高考评主体认知考评对象实施偷懒策略的概率;另一方面要增大考评对象实施偷懒策略的或有损失。 展开更多
关键词 绩效考评 推定原则 逆向选择 后悔值
论企业绩效考评激励效应的分化与优化 被引量:2
8
作者 李玉 金倩 《求索》 CSSCI 2013年第6期28-30,共3页
企业绩效考评通过驱动考评对象的行为对企业目标的实现产生影响。绩效考评的激励功能机的实现制是:考评绩效与考评对象的利益挂钩;利益驱动考评对象的工作行为:考评对象的工作努力产出工作成果;考评对象的工作成果促进企业价值实现... 企业绩效考评通过驱动考评对象的行为对企业目标的实现产生影响。绩效考评的激励功能机的实现制是:考评绩效与考评对象的利益挂钩;利益驱动考评对象的工作行为:考评对象的工作努力产出工作成果;考评对象的工作成果促进企业价值实现。信息不完全一方面引致绩效考评系统产生缺失和污染.降低其效度:另一方面引致考评过程出现隐成果和虚成果,降低其信度。两个方面的影响使考评的激励效应分化为正效应、零效应和负效应三种类型。优化绩效考评的激励效应必须从提高绩效考评系统的效度和信度两个方面着手。 展开更多
关键词 绩效考评激励效度 信度
战略人力资源管理对企业绩效的影响研究 预览 被引量:101
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作者 李玉 袁乐平 《统计研究》 CSSCI 北大核心 2013年第10期92-96,共5页
人力资源是企业核心战略资源,人力资源的战略价值和战略人力资源管理受到越来越多的学者的关注.本研究对战略人力资源管理提升企业绩效的机制进行了探讨,认为职业发展及员工培训计划、绩效工资、临时员工管理等能够让员工参与到企业管... 人力资源是企业核心战略资源,人力资源的战略价值和战略人力资源管理受到越来越多的学者的关注.本研究对战略人力资源管理提升企业绩效的机制进行了探讨,认为职业发展及员工培训计划、绩效工资、临时员工管理等能够让员工参与到企业管理决策,这是战略人力资源管理与企业绩效关系的潜在调节剂.在此基础上,以874家中国企业的人力资源管理数据对战略人力资源管理、职业发展及员工培训计划、绩效工资、临时员工管理与企业绩效之间的关系进行了实证研究,发现战略人力资源管理会对企业绩效产生正向的积极影响,职业发展及员工培训计划、绩效工资、临时员工管理对战略人力资源管理与企业绩效的正向影响关系有调节效用. 展开更多
关键词 战略人力资源管理 职业发展及员工培训计划 企业绩效 调节效应 结构方程模型
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感觉神经元特异性受体rMrgE基因的克隆与表达
10
作者 范晓思 周培岚 +1 位作者 李玉 宫泽辉 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 35-39,共5页
目的克隆感觉神经元特异性受体rMrgE基因并于HEK293细胞中表达。方法利用聚合酶链式反应技术,从大鼠背根神经节总RNA中扩增出目的基因rMrgE,克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisB中,构建真核表达rMrgE载体,瞬时转染人胚肾293细胞得到重... 目的克隆感觉神经元特异性受体rMrgE基因并于HEK293细胞中表达。方法利用聚合酶链式反应技术,从大鼠背根神经节总RNA中扩增出目的基因rMrgE,克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisB中,构建真核表达rMrgE载体,瞬时转染人胚肾293细胞得到重组质粒表达细胞株。采用RT-PCR、免疫荧光和Western印迹检测对表达产物进行鉴定。结果与结论含有rMrgE基因的重组质粒在人胚肾293细胞中获得表达,主要定位于细胞膜上。本研究为进一步探究rMrgE受体的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 感觉神经元特异性受体 rMrgE基因 基因表达
A20结合核因子抑制蛋白的抗体制备及鉴定 被引量:1
11
作者 王萧 周培岚 +1 位作者 李玉 宫泽辉 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期111-114,共4页
目的获得A20结合核因子抑制蛋白(A20 binding inhibitor of NF-κB activation,ABIN1)的多克隆抗体。方法利用钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联肽段为抗原免疫新西兰兔,获得抗血清。分别用ELISA、免疫荧光法和Western印迹检测对抗体进行... 目的获得A20结合核因子抑制蛋白(A20 binding inhibitor of NF-κB activation,ABIN1)的多克隆抗体。方法利用钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联肽段为抗原免疫新西兰兔,获得抗血清。分别用ELISA、免疫荧光法和Western印迹检测对抗体进行鉴定。结果与结论成功制备出兔抗人ABIN1抗血清,为进一步研究ABIN1的生物学功能提供了工具。 展开更多
关键词 A20结合核因子抑制蛋白 钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联肽 抗体制备
物流外包的非系统性风险及其防范 预览 被引量:2
12
作者 李玉 邓海龙 《商业时代》 北大核心 2011年第5期 39-40,共2页
物流外包在给企业带来收益机会的同时,也蕴含着一定的风险。本文分析了物流外包的非系统性风险,并提出了相应的防范措施。
关键词 物流外包 非系统性 风险防范
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阿片κ-受体和ORL1受体二聚化的初步研究 被引量:1
13
作者 温泉 颜玲娣 +1 位作者 李玉 宫泽辉 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1078-1083,共6页
为探讨κ-受体(κ-opioid receptor,KOR)和阿片受体样受体(opioid receptor like-1 receptor,ORL1 receptor)是否能够形成异源性受体二聚体,在原代培养的大鼠神经元细胞和用带有HA(hemagglutinin,血细胞凝集素)、Myc或Flag标签的... 为探讨κ-受体(κ-opioid receptor,KOR)和阿片受体样受体(opioid receptor like-1 receptor,ORL1 receptor)是否能够形成异源性受体二聚体,在原代培养的大鼠神经元细胞和用带有HA(hemagglutinin,血细胞凝集素)、Myc或Flag标签的KOR和ORL1质粒共同转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、人胚肾上皮(HEK293)细胞上,采用免疫荧光和免疫共沉淀的方法,研究KOR和ORL1之间的共定位以及是否存在相互作用。结果表明:在原代培养的海马和皮质神经元上,KOR和ORL1的免疫荧光在细胞膜上有重叠。同样,在HA-KOR和Myc-ORL1共同瞬时转染的CHO和HEK293细胞上也有类似的发现。另外,在共同表达Flag-KOR和Myc-ORL1的CHO细胞裂解液中,KOR与ORL1的受体蛋白能够被相互免疫共沉淀。这些研究结果提示,作为阿片受体不同亚型的KOR和ORL1受体之间有可能存在着异源二聚体,这也为进一步解释阿片受体结构的多样性和功能的复杂性提供了新的实验依据。 展开更多
关键词 κ-受体 阿片受体样受体 异源二聚化
感觉神经元特异性受体rMrgD基因的克隆与表达 被引量:1
14
作者 张向锋 周培岚 +2 位作者 王萧 李玉 宫泽辉 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2010年第4期309-312,共4页
目的克隆rMrgD基因并于HEK293细胞中表达。方法利用聚合酶链反应技术,从总RNA中扩增出目的基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核表达rMrgD载体,瞬时转染人胚肾293细胞得到重组质粒表达细胞株。通过免疫荧光和Western印迹检测对... 目的克隆rMrgD基因并于HEK293细胞中表达。方法利用聚合酶链反应技术,从总RNA中扩增出目的基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,构建真核表达rMrgD载体,瞬时转染人胚肾293细胞得到重组质粒表达细胞株。通过免疫荧光和Western印迹检测对表达产物进行鉴定。结果直接和间接免疫荧光实验皆表明rMrgD主要定位于细胞膜上,Western印迹检测证实rMrgD在HEK293细胞主要以单体和二聚体形式存在。结论含有rMrgD基因的重组质粒在人胚肾293细胞中获得表达,主要定位于细胞膜上。本研究为进一步探究rMrgD受体的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 感觉神经元特异性受体 rMrgD基因 基因表达
战略地图在实际企业中的运用 预览
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作者 李玉 《中国商界》 2010年第1期,共2页
战略地图发端于BSC平衡计分卡,为我们描述了企业战略的清晰框架.本文探讨了战略地图在实际企业中运用的基础、成果、障碍及趋势,意在揭示当前战略地图实践的状况,并求的一定的规律.
关键词 战略地图 企业战略 平衡计分卡 障碍 实践 描述 框架 基础 规律 成果 BSC
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人重组阿片受体样受体在CHO细胞稳定表达系统的建立 被引量:2
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作者 李玉 颜玲娣 +2 位作者 李素燕 温泉 宫泽辉 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2009年第5期409-411,485共4页
目的:在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上稳定转染人重组阿片受体样受体(hORL1),为体外高通量筛选hORL1受体作用药物及相关药物分子机制研究奠定基础。方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1(+)-hORL1重组质粒稳定转染到缺乏hORL1的CHO细胞中... 目的:在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上稳定转染人重组阿片受体样受体(hORL1),为体外高通量筛选hORL1受体作用药物及相关药物分子机制研究奠定基础。方法:用脂质体介导法将pcDNA3.1(+)-hORL1重组质粒稳定转染到缺乏hORL1的CHO细胞中,然后用含G418的选择性培养液进行筛选,挑取耐药克隆;用放射性配体-受体结合实验进一步筛选阳性克隆,对阳性克隆受体亲和力和表达量进行分析,用[35S]GTPγS结合实验分析表达受体的功能。结果与结论:在稳定转染hORL1的克隆细胞中,[3H]伤害感受肽的Kd和Bmax值分别为(0.44±0.21)nmol/L和(0.35±0.06)pmol/mg蛋白。伤害感受肽刺激受体结合[35S]GTPγS的EC50值为3.45nmol/L。以上结果与文献报道的天然hORL1受体的特性相似,说明该细胞株表达的hORL1受体与天然的hORL1受体具有基本一致的生物学特性,证实成功建立了稳定表达人阿片受体样受体的细胞模型。 展开更多
关键词 阿片受体样受体 CHO细胞 转染 放射性配体-受体结合
脊髓谷氨酸转运体1对大鼠坐骨神经慢性压迫损伤及吗啡耐受的影响 被引量:3
17
作者 颜慧 李成敏 +1 位作者 李玉 宫泽辉 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期581-585,共5页
为了探讨脊髓谷氨酸转运体1(GLT-1)的表达量和活性状态与吗啡耐受和神经源性痛的关系,利用大鼠坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)模型,以机械性缩足痛阈值(MWT)为评估指标,谷氨酸转运体激动剂β内酰胺类抗生素头孢曲松钠为工具药,观察对... 为了探讨脊髓谷氨酸转运体1(GLT-1)的表达量和活性状态与吗啡耐受和神经源性痛的关系,利用大鼠坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)模型,以机械性缩足痛阈值(MWT)为评估指标,谷氨酸转运体激动剂β内酰胺类抗生素头孢曲松钠为工具药,观察对大鼠机械痛敏和吗啡耐受的影响;以实时定量PCR及Western blotting考察脊髓GLT-1表达水平的变化。结果表明,CCI大鼠在术后1周与对照组相比MWT值下降约80%;CCI大鼠单独使用吗啡产生快速耐受,给药第3天与CCI模型对照组大鼠比较MWT值已无明显差异,脊髓GLT-1表达也明显下调;单独使用头孢曲松钠对痛敏有改善作用,脊髓GLT-1表达明显上调;吗啡伴随头孢曲松钠给药组耐受速度明显减慢,给药6天后MWT值仍保持在较高水平,与CCI吗啡耐受组比较有显著性差异,GLT-1表达明显上调。因此,脊髓GLT-1活性变化与神经源性痛及吗啡耐受的形成密切相关,促进GLT-1功能可显著延缓吗啡耐受与痛敏形成。 展开更多
关键词 谷氨酸转运体 神经源性痛 吗啡耐受 头孢曲松钠
变温层积处理对南方红豆杉种子生理生化特性的影响 预览 被引量:32
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作者 黄儒殊 郭祥泉 +1 位作者 方兴添 李玉 《福建师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 95-98,共4页
脱除外被蜡质层的南方红豆杉种子,经低-暖-低变温层积结合植物生长调节剂及微量元素处理,120d休眠解除.未层积处理的种子可供胚呼吸直接利用的可溶性糖等含量低.变温层积处理后,种子蛋白质、氨基酸和可溶性糖含量分别比对照提高了2... 脱除外被蜡质层的南方红豆杉种子,经低-暖-低变温层积结合植物生长调节剂及微量元素处理,120d休眠解除.未层积处理的种子可供胚呼吸直接利用的可溶性糖等含量低.变温层积处理后,种子蛋白质、氨基酸和可溶性糖含量分别比对照提高了27.6%、80.0%和107.1%,脂肪含量降低了16.4%;种子脱氢酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活性分别比对照提高了7.6%、129.3%和119.6%,蛋白酶活性降低了13.3%;解剖学特征表明,经变温层积处理,种子胚的发育渐进完善.实验结果提示种子贮藏物质特别是脂类物质的分解、转化和利用可能是南方红豆杉种子休萌解除的关键. 展开更多
关键词 南方红豆杉 种子 变温层积处理 生理生化
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我国现代农村基层党组织建设困境及其对策研究
19
作者 易强 李玉 潘瑾 《福建党史月刊》 2006年第8期 83-84,共2页
中国共产党第十六届五中全会提出了建设社会主义新农村这一重大历史任务,作为党在农村全部工作和战斗力的基础,农村基层党组织是新农村建设的组织者、推动者和实践者,肩负着重要的历史使命,必须大力加强其自身建设。本文围绕农村基... 中国共产党第十六届五中全会提出了建设社会主义新农村这一重大历史任务,作为党在农村全部工作和战斗力的基础,农村基层党组织是新农村建设的组织者、推动者和实践者,肩负着重要的历史使命,必须大力加强其自身建设。本文围绕农村基层党组织建设这一主题,探讨在新的历史条件下基层党组织的重要作用、基层党组织建设面临的主要困境及其对策。 展开更多
关键词 农村 党组织 作用 困境 对策
芳香樟优良单株的选择方法 预览 被引量:13
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作者 刘雁 李春林 李玉 《林业科技开发》 2002年第1期 26-28,共3页
利用直接水蒸汽蒸馏法和气相色谱法测定芳香樟单株鲜叶中出油率及芳樟醇含量、品质,从中选取优良单株为营造高得率芳樟醇的原料基地提供优良无性系.
关键词 直接水蒸汽蒸馏法 气相色谱法 芳樟醇 芳香樟 优良单株选择
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