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Sandwich教学法促进《感染病学基础》课程整合的探索 预览 被引量:2
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作者 关飞 雷家慧 +3 位作者 陆盛军 王婷 李雍 刘文琪 《继续医学教育》 2016年第10期24-25,共2页
目的 探讨《感染病学基础》课程整合的可行性。方法 首先在《感染病学基础》课程中人体寄生虫学部分,改变原有的课程教学体系,采用器官系统的顺序,同时采用传统讲授法和Sandwich教学法结合式教学。通过对学生问卷调查和形成性评价评估... 目的 探讨《感染病学基础》课程整合的可行性。方法 首先在《感染病学基础》课程中人体寄生虫学部分,改变原有的课程教学体系,采用器官系统的顺序,同时采用传统讲授法和Sandwich教学法结合式教学。通过对学生问卷调查和形成性评价评估教学效果。结果 系统教学更有助于临床思维的训练,学习兴趣的提高,也促进学习能力的培养和提高。结论 Sandwich教学法能够促进学生学习兴趣和提高能力,有利于课程整合。 展开更多
关键词 感染病学基础 课程整合 Sandwich教学法
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树突状细胞多价核酸疫苗抗血吸虫感染作用及机制研究 预览 被引量:2
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作者 沈定文 罗金萍 +4 位作者 王若愚 许培培 戴波 余军林 李雍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期406-411,共6页
目的探讨基因转染对树突状细胞(DC)功能的影响及DC多价核酸疫苗抗血吸虫感染作用及机制。方法利用脂质体介导的基因转染技术将Sj26、Sj23和Sj14基因分别转染DC,流式细胞术(FCM)检测DC摄取抗原能力,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC对... 目的探讨基因转染对树突状细胞(DC)功能的影响及DC多价核酸疫苗抗血吸虫感染作用及机制。方法利用脂质体介导的基因转染技术将Sj26、Sj23和Sj14基因分别转染DC,流式细胞术(FCM)检测DC摄取抗原能力,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC对同种异体T淋巴细胞的刺激作用。Sj26、Sj23和Sj14基因转染DC分别和联合免疫BALB/c小鼠3次,末次免疫2周后,每只小鼠感染日本血吸虫尾蚴40条,小鼠感染血吸虫6周后,计数成虫和虫卵。ELISA法检测血清特异性IgG、血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)及脾淋巴细胞培养上清IFN-γ、IL-4水平,噻唑蓝(MTT)法检测脾淋巴细胞的增殖。结果与真核表达载体pcDNA3转染DC和未处理DC相比较,基因转染DC摄取抗原的荧光强度明显降低(P〈0.01),对同种异体T淋巴细胞的刺激指数明显升高(P〈0.01)。各免疫组小鼠诱导的减虫率和减卵率均高于对照组(P〈0.01),而基因转染DC联合免疫组小鼠抗血吸虫感染作用高于单一基因转染DC免疫组(P〈0.001)。基因转染DC免疫组小鼠末次免疫2周后血清特异性IgG水平较免疫前显著升高(P〈0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P〈0.01),而血清IL-4的水平无明显变化。与对照组比较,基因转染DC免疫组小鼠脾淋巴细胞经ConA和SEA刺激后培养上清IFN-γ水平显著增高,IL-4水平显著降低,刺激指数(SI)显著增高(P〈0.001)。结论基因转染能促进DC的成熟,增强DC的活性,DC多价核酸疫苗可增强抗血吸虫感染作用,其作用机制以Th1型免疫应答为主。 展开更多
关键词 日本血吸虫 树突状细胞 多价核酸疫苗 保护性免疫
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日本血吸虫病的诊治——湘鄂赣专家共识 被引量:10
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作者 邓维成 杨镇 +9 位作者 谢慧群 李雍 刘佳新 丁国建 朱永辉 荆群山 孔国庆 林丹丹 刘建兵 任光辉 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期451-456,共6页
为进一步规范日本血吸虫病的诊断与治疗,湖南、湖北、江西3省部分专家以循证医学为基础,参考《血吸虫病诊断标准》(WS261-2006),并结合我国血吸虫病诊疗进展与现状,对日本血吸虫病的诊断与治疗进行了归纳和总结,旨在为制定我国血吸虫... 为进一步规范日本血吸虫病的诊断与治疗,湖南、湖北、江西3省部分专家以循证医学为基础,参考《血吸虫病诊断标准》(WS261-2006),并结合我国血吸虫病诊疗进展与现状,对日本血吸虫病的诊断与治疗进行了归纳和总结,旨在为制定我国血吸虫病的诊疗标准或指南提供参考。 展开更多
关键词 日本血吸虫病 急性血吸虫病 慢性血吸虫病 晚期血吸虫病 异位血吸虫病 诊断 治疗 共识
抗Trx单克隆抗体用于血吸虫病诊断的研究
4
作者 吴玉 程梅 +5 位作者 刘春会 耿丽 张珍 杜镇镇 李波清 李雍 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第6期1057-1061,共5页
目的:建立双抗体夹心ELISA 法检测日本血吸虫硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)。方法:用重组日本血吸虫Trx(rTrx)蛋白免疫BALB/c 小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法。通过检测日本血吸虫排泄- 分泌物(exc... 目的:建立双抗体夹心ELISA 法检测日本血吸虫硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)。方法:用重组日本血吸虫Trx(rTrx)蛋白免疫BALB/c 小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法。通过检测日本血吸虫排泄- 分泌物(excretorysecretions,ES)与rTrx的浓度评价该方法的敏感性;通过对健康人血清的检测确定其特异性;通过对布氏姜片吸虫病、华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、囊虫病患者血清进行交叉反应试验,评价该方法的特异性。结果:获得2 株稳定分泌抗rTrx 蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为McTrx1 和McTrx2。以McTrx1 为包被抗体,HRP-McTrx2 为酶标抗体,建立的双抗体夹心ELISA 可检测出ES的最低浓度为4.8 μg/ml,检测出rTrx 的最低浓度为1.2 滋g/ml。该方法的特异性为96 %。结论:以抗rTrx 蛋白单克隆抗体McTrx1 与McTrx2为基础建立的双抗体夹心ELISA 法具有较高的特异性。 展开更多
关键词 日本血吸虫 单克隆抗体 硫氧还蛋白 双抗夹心ELISA
武汉市美洲大蠊体内蠊缨滴虫感染情况调查 预览 被引量:3
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作者 杨杰熙 唐悠远 +3 位作者 方正明 童贞珍 李雍 王婷 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期161-162,共2页
为调查武汉市美洲大蠊感染蠊缨滴虫(Lophomomas blattarum)的情况,解剖镜下分离110只美洲大蠊成虫肠道,用0.6%氯化钠溶液洗涤剪开的肠道,收集洗涤液,涂片并作吉氏染色,显微镜(x1000)下鉴定。结果显示,共44份肠道洗涤液涂片... 为调查武汉市美洲大蠊感染蠊缨滴虫(Lophomomas blattarum)的情况,解剖镜下分离110只美洲大蠊成虫肠道,用0.6%氯化钠溶液洗涤剪开的肠道,收集洗涤液,涂片并作吉氏染色,显微镜(x1000)下鉴定。结果显示,共44份肠道洗涤液涂片中发现蠊缨滴虫疑似物。虫体呈卵圆形或梨形,体长20-40μm,一端有成簇的多根鞭毛。经固定、染色后,可见虫体胞浆呈蓝色;细胞核1个,呈紫褐色,靠近虫体前端;轴柱在虫体前端呈萼状(轴罩),胞核位于其中,轴柱向后延伸至虫体末端,经鉴定确认为副基体门动鞭毛纲超鞭毛目中的蠊缨滴虫。提示武汉市美洲大蠊的蠊缨滴虫感染率为40.0%(44/110)。 展开更多
关键词 蠊缨滴虫 美洲大蠊 感染率
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日本血吸虫感染兔尿液中具有诊断价值的循环抗原组分分析 预览 被引量:2
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作者 孙成松 汪奇志 +6 位作者 尹晓梅 汪峰峰 刘晓明 张世清 汪天平 雷家慧 李雍 《热带病与寄生虫学》 2013年第1期共5页
目的 分析日本血吸虫感染兔尿液中具有诊断价值的循环抗原(CAg) 组分,为建立尿液CAg 免疫学诊断方法 奠定基础.方法 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析尿液中蛋白抗原组分;甘氨酸盐酸缓冲液(简称甘盐液)解离尿液中循环... 目的 分析日本血吸虫感染兔尿液中具有诊断价值的循环抗原(CAg) 组分,为建立尿液CAg 免疫学诊断方法 奠定基础.方法 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析尿液中蛋白抗原组分;甘氨酸盐酸缓冲液(简称甘盐液)解离尿液中循环免疫复合物(CIC),通过抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Solube egg antigen,SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),采用免疫印渍技术(Westernblot)对解离后的CAg 组分进行分析.结果 SDS-PAGE 结果 显示,正常兔尿液中未见明显蛋白条带;感染兔尿液在未作CIC 解离前,有2 条主带和3 条次带,主带分子量为146kDa 和60kDa,次带分子量为108kDa、72 kDa 和67 kDa;而利用甘盐液解离感染兔尿液中的CIC 后,仅见1 条主带和1 条次带,分子量分别为68kDa 和86kDa.对甘盐液处理后的感染兔尿液作Western blot 分析,结果 显示其与日本血吸虫感染兔血清和抗日本血吸虫SEA 特异性IgY 抗体反应的蛋白条带均为68kDa,而与正常兔血清和免疫前IgY 反应不产生条带.结论 日本血吸虫感染兔尿液中存在具有诊断价值的CAg 组分,有望建立基于IgY 的尿液CAg 免疫学诊断方法. 展开更多
关键词 日本血吸虫 尿液循环抗原 卵黄免疫球蛋白 免疫印渍技术
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一种由蠊缨滴虫感染引起的新现寄生虫病 预览 被引量:4
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作者 王婷 李雍 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2012年第4期256-260,共5页
蠊缨滴虫是一种寄生于白蚁和蟑螂肠道内的寄生虫,以往认为该虫对人类无致病性,但自1992年首次报道人体蠊缨滴虫感染以来,相关报道日益增多。蠊缨滴虫感染通常导致呼吸系统的炎症,但咽、上颌窦和尿道的感染也偶见报道。由于蠊缨滴虫... 蠊缨滴虫是一种寄生于白蚁和蟑螂肠道内的寄生虫,以往认为该虫对人类无致病性,但自1992年首次报道人体蠊缨滴虫感染以来,相关报道日益增多。蠊缨滴虫感染通常导致呼吸系统的炎症,但咽、上颌窦和尿道的感染也偶见报道。由于蠊缨滴虫感染无特征性的临床表现,因此诊断比较困难,确诊依赖发现病原体。本文根据国内的76例报道,对蠊缨滴虫的形态、生活史及其感染特点进行了综述。 展开更多
关键词 蠊缨滴虫 蟑螂 蠊缨滴虫感 病例报道
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IgY作为抗日本血吸虫治疗性疫苗的初步研究 预览
8
作者 李宋 侯晓 +2 位作者 刘文琪 李雍 雷家慧 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2012年第4期193-198,共6页
为探讨抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原的卵黄免疫球蛋白(anti—SEAIgY)作为抗血吸虫治疗性疫苗的可行性,将实验鼠分为5组,每组8只小鼠,分别在感染后2h、4天、7天和15天进行IgY口服被动免疫,并以PBS作为对照。每鼠经腹部皮肤感染日本... 为探讨抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原的卵黄免疫球蛋白(anti—SEAIgY)作为抗血吸虫治疗性疫苗的可行性,将实验鼠分为5组,每组8只小鼠,分别在感染后2h、4天、7天和15天进行IgY口服被动免疫,并以PBS作为对照。每鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴40±1条,感染后6周剖杀小鼠,从门脉中收集成虫和记数肝组织中的虫卵数,计算减虫率和减卵率。并做肝脏连续病理切片观察病变程度,测量并比较各组平均虫卵肉芽肿的体积大小。结果表明,感染后2h、4天、7天和15天IgY被动免疫组的减虫率分别为19.59%、18.19%、32.58%和6.31%;减卵率分别为58.33%、49.56%、82.46%和5.26%。感染后7天IgY被动免疫组的减虫率和减卵率均明显高于其他实验组,并有统计学差异(P〈0.05)。感染后2h、4天、7天和15天IgY被动免疫组的平均单卵肉芽肿体积分别为(38.04±20.97)×10^-3、(30.05±15.42)×10^-3、(21.55±13.35)×10^-3、(39.67±13.87)×10^-3和(40.12±24.13)×10^-3mm^3,血清中血吸虫特异性IgG滴度分别为0.16±0.10、0.30±0.15、0.58±0.15、0.38±0.16。与对照组和其他实验组相比,感染后7天IgY被动免疫组的肝脏平均单卵肉芽肿体积明显减小,血清中日本血吸虫特异性抗体IgG水平明显升高(P〈0.05)。研究结果提示,特异性IgY被动免疫可诱导小鼠产生一定水平的抗血吸虫感染作用,但以感染后第7天的免疫效果最好,其相关机制值得进一步研究。 展开更多
关键词 卵黄免疫球蛋白 被动免疫 日本血吸虫 时间点
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不同地域株华支睾吸虫基因差异的研究
9
作者 刘娟 李雍 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第6期443-445,I0002共4页
目的探讨湖北、广东、辽宁和韩国4地华支睾吸虫的基因差异,为华支睾吸虫种下分型提供依据。方法取湖北、广东两地的华支睾吸虫,提取基因组DNA,PCR特异性扩增18S rDNA V4区并测序;登陆GenBank,检索中国辽宁(AF217100)和韩国(AF408144... 目的探讨湖北、广东、辽宁和韩国4地华支睾吸虫的基因差异,为华支睾吸虫种下分型提供依据。方法取湖北、广东两地的华支睾吸虫,提取基因组DNA,PCR特异性扩增18S rDNA V4区并测序;登陆GenBank,检索中国辽宁(AF217100)和韩国(AF408144)的华支睾吸虫18S rDNA的登录序列,应用系统发生学分析法对所有序列进行排列比较,分析4地华支睾吸虫的基因差异,并构建系统发生树,分析其亲缘关系。结果获得的湖北和广东两地华支睾吸虫18S rDNA V4区的碱基数分别为392 bp和440 bp。通过对18S rDNA V4区基因序列的比较与进化树的构建,证实4个地域株华支睾吸虫的18S rDNA V4区具有较高的同源性(98%~100%),彼此间遗传距离较小(0~0.013);在系统发生树中,湖北株和广东株华支睾吸虫形成一个支系,韩国株和辽宁株华支睾吸虫形成另外一个支系。结论以18S rDNA V4区为分子标记的DNA序列分析表明,湖北、广东、辽宁和韩国4地华支睾吸虫存在基因差异,但亲缘关系较近,即起源于共同的祖先。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 DNA序列分析 系统发生学 分类 18SrDNA
衰老下调小鼠对日本血吸虫感染的免疫应答 预览
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作者 杨云帆 孙谦 +7 位作者 苏斌涛 林琳 李曼君 陈琳 徐宏 雷家慧 刘文琪 李雍 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期101-104,共4页
目的研究衰老对小鼠感染日本血吸虫后免疫应答的影响。方法幼龄(2月龄)和老龄(18月龄)雌性BALB/c小鼠各8只,每鼠感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条。感染后6周剖杀小鼠,经门静脉灌注收集成虫,计数虫荷;KOH消化法收集肝脏中的虫卵,... 目的研究衰老对小鼠感染日本血吸虫后免疫应答的影响。方法幼龄(2月龄)和老龄(18月龄)雌性BALB/c小鼠各8只,每鼠感染日本血吸虫尾蚴(40±1)条。感染后6周剖杀小鼠,经门静脉灌注收集成虫,计数虫荷;KOH消化法收集肝脏中的虫卵,并计数。制作肝脏连续病理切片,测量两组小鼠肝脏增生期平均单卵肉芽肿的大小,计算单卵肉芽肿体积。常规法制备脾淋巴细胞悬液进行T淋巴细胞增殖实验,计算刺激指数(SI)。ELISA法检测脾淋巴细胞中γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达水平。结果幼龄组小鼠体内的虫荷和每克肝组织虫卵数分别为26.00±2.42和(2.08±0.87)×104,老龄组虫荷和每克肝脏虫卵数分别为19.75±1.95和(1.59±1.05)×104,两组间的差异有统计学意义(P〈0.05)。幼龄组肝脏单卵肉芽肿平均体积[(47.02±24.13)×10-3 mm3]明显大于老龄组[(30.13±10.97)×10-3 mm3](P〈0.05)。T淋巴细胞增殖实验结果显示,老龄组脾淋巴细胞对ConA的增殖反应(SI:1.08±0.12)低于幼龄组(SI:1.31±0.14),其脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的含量[(24.05±6.24)、(4.15±0.68)pg/ml]也明显低于幼龄组[(34.25±8.69)、(7.25±0.83)pg/ml](P〈0.05)。结论衰老引起小鼠对日本血吸虫感染的免疫应答下降,从而减轻了日本血吸虫感染引起的免疫病理损害。 展开更多
关键词 衰老 小鼠 日本血吸虫 免疫反应
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STAT4和STAT6对日本血吸虫发育生殖及虫卵肉芽肿形成的影响 被引量:1
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作者 程喻力 宋文剑 +4 位作者 孔争 王婷 刘文琪 雷家慧 李雍 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期61-64,I0002共5页
目的观察STAT4或STAT6缺陷对日本血吸虫发育生殖及宿主虫卵肉芽肿形成的影响。方法设正常BALB/cJ小鼠及遗传背景相同的STAT4-/-、STAT6-/-小鼠3组,每组10只,每只感染日本血吸虫尾蚴25条。于感染后第42天剖杀小鼠,收集虫体,计数总虫荷及... 目的观察STAT4或STAT6缺陷对日本血吸虫发育生殖及宿主虫卵肉芽肿形成的影响。方法设正常BALB/cJ小鼠及遗传背景相同的STAT4-/-、STAT6-/-小鼠3组,每组10只,每只感染日本血吸虫尾蚴25条。于感染后第42天剖杀小鼠,收集虫体,计数总虫荷及雌、雄虫荷;另取小鼠肝组织,计数肝内虫卵;制作肝组织切片,观察虫卵肉芽肿病理学变化,测量单个虫卵肉芽肿直径。结果 STAT4-/-和STAT6-/-小鼠体内总虫荷、雌雄虫配对数及肝组织中每对虫体平均产卵数与正常BALB/cJ小鼠无明显差异(P均〉0.05)。STAT6-/-小鼠肝脏中单个虫卵肉芽肿直径为(213.3±68.6)μm,与感染组BALB/cJ小鼠(319.5±71.9)μm比较,差异有统计学意义(P〈0.05),且虫卵肉芽肿较不典型、纤维化较不明显。STAT4-/-小鼠肝脏单个虫卵肉芽肿直径及其病理学改变与正常BALB/cJ小鼠相比无明显差异。结论 STAT4或STAT6缺陷对日本血吸虫发育生殖无明显影响。STAT6缺陷不利于虫卵肉芽肿的形成及纤维化,STAT4缺陷对虫卵肉芽肿的形成无明显影响。 展开更多
关键词 日本血吸虫 发育 生殖 STAT4 STAT6
树突状细胞与寄生虫感染 预览
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作者 沈定文 罗金萍 李雍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期 676-679,683,共5页
自1973年Steinman和Cohn首次报道树突状细胞(dendritic cell,DC)以来,人们对DC的认识不断深入。DC是目前已知的体内功能最强的一类专职抗原提呈细胞,同时也是初次免疫应答的始动者,能强有力地激活初始T细胞,并决定机体免疫应答... 自1973年Steinman和Cohn首次报道树突状细胞(dendritic cell,DC)以来,人们对DC的认识不断深入。DC是目前已知的体内功能最强的一类专职抗原提呈细胞,同时也是初次免疫应答的始动者,能强有力地激活初始T细胞,并决定机体免疫应答的方向,其在寄生虫感染中的作用越来越受到人们的重视。本文就DC的来源、主要功能及其在寄生虫感染免疫中的作用综述如下。 展开更多
关键词 寄生虫感染 树突状细胞 专职抗原提呈细胞 机体免疫应答 初始T细胞 cell 感染免疫 DC
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抗SEA鸡卵黄抗体用于血吸虫循环抗原检测的初步研究 被引量:4
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作者 吴玉 张炜明 +4 位作者 刘文琪 仇镇宁 冯振卿 李雍 管晓虹 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第12期2416-2418,共3页
目的:探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)鸡卵黄抗体(Immunoglobulin Y,IgY)用于血吸虫循环抗原检测的可行性。方法:以纯化的鸡抗SEA卵黄抗体为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B进行双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急... 目的:探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)鸡卵黄抗体(Immunoglobulin Y,IgY)用于血吸虫循环抗原检测的可行性。方法:以纯化的鸡抗SEA卵黄抗体为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B进行双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病病人和健康人血清,并与常规检测抗体的酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA)法做比较。结果:S-ELISA法测得SEA浓度(y)与A450值(x)呈明显的正相关(r=0.9481,y=459.22x-108.14)。S-ELISA法检测急性血吸虫病人循环抗原的阳性率为100%,慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率为84.40%,健康人的特异性为96%。两种方法对血吸虫病的检出率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:S-ELISA可用于血吸虫病的免疫诊断。 展开更多
关键词 血吸虫 免疫诊断 循环抗原 IGY
Sj26和Sj23基因转染树突状细胞联合抗血吸虫感染的研究 预览 被引量:2
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作者 沈定文 罗金萍 +1 位作者 李雍 刘文琪 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 901-904,共4页
目的探讨Sj26和却23基因转染树突状细胞(DC)联合抗日本血吸虫感染保护性免疫机制。方法BALB/c小鼠耳廓分别注射Sj26和Sj23基因转染DC(A组)、Sj26基因转染DC(B组)、研23基因转染DC(C组)、pcDNA3转染DC(D组)、未处理DC(E组)... 目的探讨Sj26和却23基因转染树突状细胞(DC)联合抗日本血吸虫感染保护性免疫机制。方法BALB/c小鼠耳廓分别注射Sj26和Sj23基因转染DC(A组)、Sj26基因转染DC(B组)、研23基因转染DC(C组)、pcDNA3转染DC(D组)、未处理DC(E组)和RPMI-1640(F组).免疫3次,间隔2周,末次免疫后2周,每鼠经皮肤感染40条日本血吸虫尾蚴。ELISA法检测血清特异性IgG抗体、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,双夹心ELISA法检测脾淋巴细胞经ConA和可溶性虫卵抗原(SEA)刺激后培养上清中IFN-γ和IL-4水平,噻唑蓝(MTT)法检测脾淋巴细胞增殖情况。结果末次免疫后第2周,A组小鼠血清IgG抗体水平显著升高(P〈0.001)。血清IL-4的水平,各组免疫前、后无明显变化。血清IFN-γ水平,A组小鼠免疫后明显升高(P〈0.01)。经ConA和SEA刺激后,A组小鼠脾淋巴细胞诱生的IFN-γ水平显著增高.而IL4水平显著降低(与F组比较,P〈0.001)。A组小鼠脾淋巴细胞经ConA和SEA刺激后的刺激指数均高于其他各组(与F组比较,P〈0.001)。结论体液免疫和细胞免疫共同参与了函26和却23基因转染DC诱导的保护性免疫作用,其中Th1型免疫应答在抗日本血吸虫感染的保护性免疫中起主要作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 树突状细胞 SJ26 SJ23 基因转染 保护性免疫
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血吸虫Sj23基因转染对树突状细胞功能影响 预览 被引量:1
15
作者 沈定文 罗金萍 +2 位作者 李雍 陈喜 覃金红 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期 1098-1099,共2页
目的探讨日本血吸虫23kDa膜蛋白(Sj23)基因转染对树突状细胞(DC)功能的影响。方法利用脂质体介导的基因转染技术将Si23基因转染DC,流式细胞术(FCM)检测Sj23基因转染的DC摄取抗原的能力,混合淋巴细胞反应(MLR)检测Sj23基因转染... 目的探讨日本血吸虫23kDa膜蛋白(Sj23)基因转染对树突状细胞(DC)功能的影响。方法利用脂质体介导的基因转染技术将Si23基因转染DC,流式细胞术(FCM)检测Sj23基因转染的DC摄取抗原的能力,混合淋巴细胞反应(MLR)检测Sj23基因转染的DC对同种异体T淋巴细胞的刺激作用。结果Sj23基因转染后Sj23蛋白在DC中高表达,与pcDNA3转染的DC和未转染的DC相比,Sj23基因转染的DC摄取抗原的能力降低,能明显刺激混合淋巴细胞反应。结论Sj23基因转染DC后能促进DC的活化,增强DC的生物学活性。 展开更多
关键词 树突状细胞 基因转染 日本血吸虫 SJ23
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日本血吸虫不同阶段抗原免疫抑制过敏性哮喘小鼠气道炎症的实验观察 预览 被引量:2
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作者 蒋自卫 莫红梅 +5 位作者 王磊 程喻力 王淇泓 雷家慧 刘文琪 李雍 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期 428-431,437,共5页
目的观察日本血吸虫不同生活史阶段抗原对过敏性哮喘小鼠气道炎症的影响。方法雌性BALB/c小鼠48只,随机均分8组,A组为健康对照组;B组为哮喘模型组,以鸡卵白蛋白(OVA)抗原腹腔注射致敏,OVA滴鼻诱发哮喘;C、D和E组小鼠分别用可... 目的观察日本血吸虫不同生活史阶段抗原对过敏性哮喘小鼠气道炎症的影响。方法雌性BALB/c小鼠48只,随机均分8组,A组为健康对照组;B组为哮喘模型组,以鸡卵白蛋白(OVA)抗原腹腔注射致敏,OVA滴鼻诱发哮喘;C、D和E组小鼠分别用可溶性虫卵抗原(SEA)、可溶性成虫抗原(SWA)和童虫抗原(SSA)经腹部皮下免疫,共4次,每次间隔1周,末次免疫后1周再按B组方法诱发哮喘;F、G和H组分别用SEA、SWA和SSA免疫接种小鼠(免疫方法及剂量分别同C、D、E组),末次免疫后1周用等量生理盐水代替OVA处理小鼠,不诱发哮喘。诱发哮喘后48h剖杀各组小鼠,观察各组小鼠肺组织的病理变化和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的相关细胞成分及细胞因子的变化。结果A组小鼠气道肺组织无明显炎症变化;B组小鼠气道肺组织可见明显的炎性细胞,尤其是嗜酸粒细胞的浸润;C、D和E组小鼠气道肺组织炎症明显轻于B组小鼠。B组小鼠BALF中白细胞总数[(98.4±16.1)×10^4/ml]、嗜酸粒细胞百分数f(17.6±4.3)×10^4/mll和白细胞介素.5(IL-5)水平[(197.9±36.5)pg/m1]均明显高于A组[分别为(8.2±1.1)×10^4/ml、(0.02±0.01)×10^4/ml和(12.3±7.4)pg/m1],而IL-10和γ干扰素(IFN-γ)水平明显低于A组。C、D和E组小鼠BALF中自细胞总数、嗜酸粒细胞百分数和IL-5水平均明显低于B组,而IL-10,IFN-γ水平则明显高于B组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论日本血吸虫不同抗原免疫后能有效调节过敏性哮喘小鼠的细胞因子平衡.同时对哮喘小鼠嗜酸粒细胞在肺组织中的浸润及肺组织炎症都有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗原 哮喘 细胞因子
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卵黄抗体用于血吸虫循环抗原检测的可行性研究 预览 被引量:1
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作者 吴玉 张炜明 +4 位作者 刘文琪 仇镇宁 冯振卿 李雍 管晓虹 《滨州医学院学报》 2008年第6期 401-403,共3页
目的探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)鸡卵黄抗体(Immunoglobulin Y,IgY)用于血吸虫循环抗原检测的可行性。方法以纯化的鸡抗SEA卵黄抗体为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B进行双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、... 目的探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)鸡卵黄抗体(Immunoglobulin Y,IgY)用于血吸虫循环抗原检测的可行性。方法以纯化的鸡抗SEA卵黄抗体为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B进行双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病病人和健康人血清,并与常规检测抗体的酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA)法做比较。结果S-ELISA法测得SEA浓度(y)与A450值(x)呈明显的正相关(r=0.9481,Y=459.22x-108.14);S-ELISA法检测急性血吸虫病人循环抗原的阳性率为100%,慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率为84.4%,健康人的特异性为96.0%;两种方法对血吸虫病的检出率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论S-ELISA可用于血吸虫病的免疫诊断。 展开更多
关键词 血吸虫 免疫诊断 循环抗原 卵黄抗体
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日本血吸虫可溶性虫卵抗原和可溶性雄虫抗原免疫小鼠PD-1-PD-L的表达 预览 被引量:3
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作者 王磊 莫红梅 +4 位作者 王淇泓 蒋自卫 程喻力 刘文琪 李雍 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期 170-173,共4页
目的探讨日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和可溶性雄虫抗原(SMWA)免疫小鼠PD-1-PD-L的表达,及其与相关细胞因子的关系。方法18只BALB/c雌性小鼠随机分为3组,健康对照组(A组)、SEA免疫组(B组)和SMWA免疫组(C组),B、C两组分别用... 目的探讨日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)和可溶性雄虫抗原(SMWA)免疫小鼠PD-1-PD-L的表达,及其与相关细胞因子的关系。方法18只BALB/c雌性小鼠随机分为3组,健康对照组(A组)、SEA免疫组(B组)和SMWA免疫组(C组),B、C两组分别用日本血吸虫SEA和SMWA腹部皮下多点注射免疫,剂量均为50μg/次,免疫4次,每次间隔1周;健康对照组用PBS代替。末次免疫4周后收集脾细胞及其培养上清,刀豆球蛋白A(ConA)刺激后,流式细胞术检测淋巴细胞表面表达的程序性死亡-1(PD-1)、树突状细胞(DCs)表面表达的程序性死亡配体-1(PD-L1)和PD-L2。双抗夹心ELISA测定脾细胞分泌的白细胞介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)的表达水平。结果A组小鼠脾T细胞的PD-1及DC的PD-L1和PD-L2的表达率分别为(1.19±0.15)%、(0.64±0.11)%和(1.12±0.21)%。两种抗原免疫均可使这些分子表达上调(P〈0.01)。SEA免疫后,PD-1的表达[(8.24±1.31)%]高于SMWA免疫[(6.08±1.28)%],且主要使PD-L2表达上调[(5.26±1.73)%];而SMWA免疫后,主要表现为PD-L1表达上调[(10.82±2.33)%]。其中PD-L1的表达上调与脾细胞分泌的IFN-γ呈正相关,而PD-L2的表达上调与IL-4的分泌呈正相关。结论日本血吸虫SEA和SMWA抗原免疫可诱导BALB/c雌性小鼠PD-1-PDL的表达上调。 展开更多
关键词 日本血吸虫 程序性死亡-1 程序性死亡配体 白细胞介素-4 Γ-干扰素
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卵黄抗体IgY检测血吸虫病人循环抗原的初步研究 预览 被引量:8
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作者 张炜明 吴玉 +4 位作者 刘文琪 仇镇宁 冯振卿 李雍 管晓虹 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2008年第1期 16-19,共4页
目的 探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)卵黄抗体(IgY)检测血吸虫循环抗原的应用价值。方法以纯化的鸡IgY作为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B为检测抗体的双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病人和健康... 目的 探讨抗可溶性虫卵抗原(SEA)卵黄抗体(IgY)检测血吸虫循环抗原的应用价值。方法以纯化的鸡IgY作为捕捉抗体,以酶标抗SEA单克隆抗体NP28-5B为检测抗体的双抗体夹心酶联免疫吸附试验法(S-ELISA)检测急、慢性血吸虫病人和健康人血清,并与常规检测抗体的酶联免疫吸附试验法(SEA-ELISA)作比较。结果S-ELISA测得SEA浓度(y)与吸光度(A450)值(x)呈明显的正相关(y=459.22x-108.14,r=0.9481)。急性血吸虫病人循环抗原的阳性率为100.00%(9/9),慢性血吸虫病人循环抗原的阳性率为84.44%(38/45),健康人的特异性为96.00%(48/50)。两种方法对血吸虫病的检出率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论S-ELISA具有较好的敏感性和特异性,可用于血吸虫病免疫诊断。 展开更多
关键词 血吸虫病 免疫诊断 循环抗原 IGY 可溶性虫卵抗原 酶联免疫吸附试验
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基因转染树突状细胞联合免疫抗血吸虫感染作用 预览 被引量:5
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作者 沈定文 罗金萍 李雍 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 1216-1217,共2页
目的探讨日本血吸虫Sj26和Sj23基因转染树突状细胞(DC)联合免疫抗血吸虫感染保护性免疫作用。方法利用Sj26-Sj23基因转染、Sj26基因转染、Sj23基因转染、空质粒pcDNA3转染和未处理DC分别免疫BALB/c小鼠3次,攻击感染后计数成虫和虫卵... 目的探讨日本血吸虫Sj26和Sj23基因转染树突状细胞(DC)联合免疫抗血吸虫感染保护性免疫作用。方法利用Sj26-Sj23基因转染、Sj26基因转染、Sj23基因转染、空质粒pcDNA3转染和未处理DC分别免疫BALB/c小鼠3次,攻击感染后计数成虫和虫卵。结果Sj26-Sj23基因转染DC联合免疫小鼠诱导40.5%的减虫率和58.9%和减卵率,高于单独Sj26基因转染DC免疫组(34.5%和48.5%)和Sj23基因转染DC免疫组(32.6%和40.6%),亦明显高于空质粒pcDNA3转染DC组(16.8%和15.8%)和未处理DC组(14.6%和14.4%),Sj26基因转染DC免疫组和Sj23基因转染DC免染组的减卵率有差异有统计学意义。结论Sj26-Sj23基因转染DC联合免疫可增强抗血吸虫感染的保护性免疫作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 树突状细胞 SJ26 SJ23 基因转染 保护性免疫
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