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东方肉座菌EU7-22纤维素内切酶Ⅰ的异源表达
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作者 林俊涵 林谢榕 +4 位作者 魏瑜 王娜 龙敏南 《生物技术》 CAS 2019年第1期1-6,38共7页
[目的]实现东方肉座菌纤维素内切酶EGⅠ在毕赤酵母中的表达,获得重组EGⅠ。[方法]通过RT-PCR获得EGⅠ开放阅读框。将EGⅠ成熟肽和PHO1信号肽的DNA片段插入p PIC3. 5K后,重组表达载体电转化毕赤酵母。通过甲醇诱导表达和镍柱纯化获得EG... [目的]实现东方肉座菌纤维素内切酶EGⅠ在毕赤酵母中的表达,获得重组EGⅠ。[方法]通过RT-PCR获得EGⅠ开放阅读框。将EGⅠ成熟肽和PHO1信号肽的DNA片段插入p PIC3. 5K后,重组表达载体电转化毕赤酵母。通过甲醇诱导表达和镍柱纯化获得EGⅠ。以羟甲基纤维素钠检测活性,以肽N-糖苷酶F分析N-糖基化,以SDSPAGE分析表达情况和糖基化修饰。[结果]获得EGⅠ分泌表达菌株,诱导96 h后上清液活性为0. 513±0. 002 U/m L,纯化后的EGⅠ活性为0. 558±0. 012 U/mg。SDS-PAGE表明EGⅠ分子量在100~180 k Da,远高于预测值47. 3k Da,经肽N-糖苷酶F处理后,降至63~75 k Da。[结论]实现了EGⅠ的分泌表达,获得活性为0. 558±0. 012 U/mg的糖基化重组EGⅠ。 展开更多
关键词 东方肉座菌 纤维素内切酶 毕赤酵母 PHO1信号肽 糖基化
不同附生树种对金钗石斛石斛碱含量的影响 预览
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作者 李志平 郑若男 +2 位作者 陈梁军 翁培金 《安徽农业科学》 CAS 2018年第10期106-108,共3页
[目的]测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。[方法]以贵州赤水仿野生3年苗为试验材料,不同树种继续附生生长1年,采用气相色谱内标法,测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。色谱柱:DB-1(30 m×0.25 mm×0.25μ... [目的]测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。[方法]以贵州赤水仿野生3年苗为试验材料,不同树种继续附生生长1年,采用气相色谱内标法,测定不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量。色谱柱:DB-1(30 m×0.25 mm×0.25μm);程序升温:初始温度80℃,10℃/min升温至250℃,保持5 min;进样口温度250℃;FID检测器温度250℃。[结果]不同附生树种金钗石斛中石斛碱的含量有明显差异,其中,杉木附生金钗石斛的石斛碱含量最高,为0.932%,枇杷、杨梅、龙眼附生金钗石斛石斛碱含量分别为0.825%、0.790%和0.601%。[结论]不同附生树种的金钗石斛石斛碱含量均符合2015版《中国药典》限量要求,该研究为确定适宜的附生树种提供参考依据。 展开更多
关键词 金钗石斛 石斛碱 附生树种
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在肝癌细胞SK-Hep1中沉默STAT3基因增强sorafenib疗效的初步研究
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作者 谢琳娜 曾燕华 +3 位作者 何文胜 郑敏 林德馨 《中国生物工程杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期8-13,共6页
目的:研究STAT3在肝癌细胞SK-Hep1对sorafenib抗性中的作用,并探讨STAT3基因沉默在增强sorafenib肝癌疗效中的作用。方法:应用基于shRNA的基因沉默技术在肝癌细胞SK-Hep1中敲减STAT3;用CCK8法检测细胞的生长情况与对sorafenib的敏感性... 目的:研究STAT3在肝癌细胞SK-Hep1对sorafenib抗性中的作用,并探讨STAT3基因沉默在增强sorafenib肝癌疗效中的作用。方法:应用基于shRNA的基因沉默技术在肝癌细胞SK-Hep1中敲减STAT3;用CCK8法检测细胞的生长情况与对sorafenib的敏感性;蛋白印迹法(Western blot)检测STAT3、p-STAT3(Y705)、p-STAT3(S727)以及其下游蛋白的表达变化。结果:成功构建了STAT3敲减的细胞株SK-Hep1-shSTAT3。该细胞中STAT3蛋白表达降低,细胞增殖明显受到抑制。Sorafenib的处理下调了STAT3的磷酸化水平及其下游蛋白Mcl-1和CyclinD1的表达。STAT3基因敲减的SK-Hep1细胞,对sorafenib的敏感性增强。结论:基于shRNA的STAT3基因沉默能明显抑制SK-Hep1细胞增殖,提高细胞对sorafenib的敏感性,有望成为提高sorafenib抗肝癌疗效的一种新手段。 展开更多
关键词 肝癌 SORAFENIB STAT3 基因沉默
基于翻转课堂理念的高职新型PBL课堂教学模型效果研究 预览 被引量:7
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作者 谢琳娜 林蔚 +3 位作者 踯敏 何文胜 林晨 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第22期3154-3156,共3页
以问题为基础的学习方式(PBL)是1969年美国神经病学教授Barrows首创并广泛应用于医学高等教育的教学方式。它强调教学过程中以学生为主导,教师引导与控场,注重学生自学能力、沟通能力、文字和表达能力、协调与组织能力等各方面的培... 以问题为基础的学习方式(PBL)是1969年美国神经病学教授Barrows首创并广泛应用于医学高等教育的教学方式。它强调教学过程中以学生为主导,教师引导与控场,注重学生自学能力、沟通能力、文字和表达能力、协调与组织能力等各方面的培养。属于“建构主义”的一种教学方式,也可以说是近年来流行的“翻转课堂”的一种雏形。近十几年来, 展开更多
关键词 教学模型 课堂 PBL 高职 医学高等教育 以问题为基础 教学方式 神经病学
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多粘菌素E检测方法的研究新进展 预览 被引量:3
5
作者 吴水华 尤洁 +2 位作者 王翠 陈梁军 《海峡药学》 2014年第4期15-17,共3页
本文通过查阅了近15年国内外对多粘菌素E检测方法的相关文献报道,综述了检测多粘菌素 E 的新方法,分析了检测多粘菌素 E存在的主要问题,并比较了各方法的特点,并对今后的研究方向提出了建议,为进一步开发新的检测方法提供参考。
关键词 检测方法 研究进展
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玉米浆对多粘菌素E发酵的影响研究 预览 被引量:2
6
作者 陈梁军 王翠 《北方药学》 2014年第10期70-71,共2页
目的:试验比较及评价不同组分玉米浆对多粘菌素E发酵生产的影响。方法:以多粘芽孢杆菌为对象,通过不同产地玉米浆对比试验和四因素三水平正交试验确定多粘菌素E发酵配方中玉米浆原材料最佳组分及配比。结果:该菌种使用的原材料玉米... 目的:试验比较及评价不同组分玉米浆对多粘菌素E发酵生产的影响。方法:以多粘芽孢杆菌为对象,通过不同产地玉米浆对比试验和四因素三水平正交试验确定多粘菌素E发酵配方中玉米浆原材料最佳组分及配比。结果:该菌种使用的原材料玉米浆最佳组分及配比条件:胱氨酸1700mg/100g,异亮氨酸1050mg/100g,丝氨酸950mg/100g,组氨酸1300mg/100g。结论:玉米浆质量的波动是引起多粘菌素E发酵单位波动的重要原因之一,要保持稳定的发酵水平就必须对不同产地生产的玉米浆进行摇瓶试验,以确定最合适的玉米浆用于生产。 展开更多
关键词 玉米浆 发酵 正交试验
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复合诱变选育多黏菌素E高产菌株 预览 被引量:1
7
作者 陈梁军 王翠 《中国医药指南》 2013年第25期352-354,共3页
以多黏芽胞杆菌(Bacillus polymyxa)090918为出发菌株,经60-Co-r射线照射(剂量为22Gy)、甲磺酸乙酯(EMS)诱变处理、多粘菌素E耐受等处理,得到一株多粘菌素E突变株120116,其摇瓶发酵效价较出发菌株提高26%。
关键词 多黏菌素E 60-Co照射 甲磺酸乙酯 发酵
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金针菇菌株的SCAR标记分子鉴别 预览 被引量:4
8
作者 王翠 谢宝贵 +2 位作者 陈梁军 《福建农业学报》 CAS 2013年第10期966-970,共5页
利用前期开发的16个SCAR分子标记对不同来源的30株金针菇Flammulina velutipes菌株进行扩增分析。基于SCAR标记在检测菌株中的存在与缺失差异,F0026、F0114菌株被首先鉴别出来,其次F0030+1、F0102、F0118这3个菌株被鉴别出来,其余2... 利用前期开发的16个SCAR分子标记对不同来源的30株金针菇Flammulina velutipes菌株进行扩增分析。基于SCAR标记在检测菌株中的存在与缺失差异,F0026、F0114菌株被首先鉴别出来,其次F0030+1、F0102、F0118这3个菌株被鉴别出来,其余25株菌株除F0050与F0148、F0014与F0149两对菌株外,21株菌株被依次鉴别出来。结果表明,利用SCAR分子标记可以高效、快速、准确地用于金针菇生产菌株的分类鉴别。 展开更多
关键词 金针菇 SCAR分子标记 分子鉴定
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荧光光度法测定福建组培金线莲中总黄酮含量 预览 被引量:9
9
作者 罗明可 吴水华 《中国医药科学》 2012年第2期 121-123,共3页
目的建立测定福建组培金线莲中总黄酮含量的荧光光度法。方法根据黄酮类化合物与A13+能形成稳定的荧光络合物,采用95%乙醇超声提取福建组培金线莲中的总黄酮,以槲皮素为对照品,用荧光光度法测定总黄酮含量。结果在选定的实验条件... 目的建立测定福建组培金线莲中总黄酮含量的荧光光度法。方法根据黄酮类化合物与A13+能形成稳定的荧光络合物,采用95%乙醇超声提取福建组培金线莲中的总黄酮,以槲皮素为对照品,用荧光光度法测定总黄酮含量。结果在选定的实验条件卞,槲皮素浓度与荧光强度具有良好的线性关系,线性范围为0.002~0.400ug/mL,检出限为0.0004ug/mL,线性方程F=2002.6C+5.5296,相关系数r=O.9995,测得福建组培金线莲中总黄酮含量(按干燥品计算)为73.98ug/g,平均回收率为99.95%,相对标准偏差为0.92%(n=5)。结论本法操作简便、快速、准确,适用于福建组培金线莲中总黄酮的含量测定。 展开更多
关键词 金线莲 福建组培 总黄酮 荧光光度法
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原子分光光度法测定不同来源金线莲中的微量元素Na与Cd 预览 被引量:1
10
作者 程伟青 《海峡药学》 2012年第1期 64-65,共2页
目的了解不同来源金线莲中微量元素Na与Cd含量的差异。方法采用原子分光光度法对不同产地金线莲中的微量元素以湿法消化进行含量测定。结果不同来源金线莲中微量元素Na含量有一定差异,重金属Cd在各种金线莲中均未检出。结论以人工组培... 目的了解不同来源金线莲中微量元素Na与Cd含量的差异。方法采用原子分光光度法对不同产地金线莲中的微量元素以湿法消化进行含量测定。结果不同来源金线莲中微量元素Na含量有一定差异,重金属Cd在各种金线莲中均未检出。结论以人工组培的方法可以控制金线莲中重金属的含量,为确立金线莲的质量标准提供依据。 展开更多
关键词 金线莲 原子分光光度法 湿法消化 微量元素
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不同来源金线莲中水分灰分及微量元素的测定 预览 被引量:4
11
作者 吴水华 程伟青 +2 位作者 陈文娟 罗明可 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期,共2页
目的了解不同来源金线莲中水分、灰分及微量元素含量的差异。方法分别采用了常压烘干法、灰化法及原子吸收光谱法对不同来源金线莲中水分、灰分及微量元素进行测定。结果不同来源金线莲中的水分和灰分含量差别不大,但微量元素的含量有... 目的了解不同来源金线莲中水分、灰分及微量元素含量的差异。方法分别采用了常压烘干法、灰化法及原子吸收光谱法对不同来源金线莲中水分、灰分及微量元素进行测定。结果不同来源金线莲中的水分和灰分含量差别不大,但微量元素的含量有较大的差异。结论为进一步规范组培种植金线莲、正确制定其质量标准及开发利用提供依据。 展开更多
关键词 金线莲 水分 灰分 微量元素
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气相色谱-质谱对不同溶剂萃取福建组培金线莲挥发油的分析 预览 被引量:3
12
作者 罗明可 陈文娟 +1 位作者 吴水华 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期 2192-2194,共3页
目的探讨不同溶剂萃取福建组培金线莲挥发油的化学成分差异。方法采用水蒸气蒸馏法提取福建组培金线莲中的挥发油,用气相色谱-质谱对化学成分进行鉴定,用归一化法确定相对百分含量。结果正己烷萃取的挥发油中分离出35种成分,鉴定出32种... 目的探讨不同溶剂萃取福建组培金线莲挥发油的化学成分差异。方法采用水蒸气蒸馏法提取福建组培金线莲中的挥发油,用气相色谱-质谱对化学成分进行鉴定,用归一化法确定相对百分含量。结果正己烷萃取的挥发油中分离出35种成分,鉴定出32种组分,占挥发油总量的95.704%;乙醚萃取的挥发油中分离出40种成分,鉴定出31种组分,占挥发油总量的90.858%。主要成分为:亚油酸、棕榈酸和亚油酸甲酯等。结论可为金线莲的进一步研究提供理论依据。 展开更多
关键词 金线莲 挥发油 化学成分 气相色谱-质谱分析
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GC—MS法分析台湾组培金线莲挥发油化学成分 预览 被引量:3
13
作者 陈文娟 +1 位作者 吴水华 罗明可 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期2014-2017,共4页
目的:利用色谱联用技术(GC-MS)对台湾组培金线莲中挥发油的化学成分进行测定。方法:利用水蒸汽蒸馏法提取挥发油,正己烷萃取后浓缩,所得部分通过GC-MS分析,进行相似性检索,实现对组分的鉴定,同时用峰面积归一化法计算它们的相对含... 目的:利用色谱联用技术(GC-MS)对台湾组培金线莲中挥发油的化学成分进行测定。方法:利用水蒸汽蒸馏法提取挥发油,正己烷萃取后浓缩,所得部分通过GC-MS分析,进行相似性检索,实现对组分的鉴定,同时用峰面积归一化法计算它们的相对含量。结果:乙醚萃取的挥发油中分离出42种成分,鉴定出39种组分,占挥发油总量的98.479%,主要成分为烷烃类化合物;正己烷萃取的挥发油中分离出24种成分,鉴定出23种组分,占挥发油总量的99.147%,主要成分为:2-甲氧基-3-烯丙基苯酚、亚油酸、棕榈酸和亚麻酸甲酯等。结论:为国家中药材规范化种植基地中药材质量评价提供基础数据。 展开更多
关键词 金线莲 挥发油 气相色谱-质谱联用法
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不同溶剂萃取野生金线莲挥发油的GC-MS分析 被引量:2
14
作者 陈文娟 吴水华 +1 位作者 缪存信 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2010年第10期42-45,共4页
目的:对野生金线莲挥发油化学成分进行提取和分析,比较不同溶剂萃取野生金线莲挥发油化学成分的差异。方法:采用超声波辅助水蒸汽蒸馏法提取挥发油,分别用正己烷、乙醚萃取后浓缩,通过GC-MS分析,实现对组分的鉴定,同时用峰面积归一化... 目的:对野生金线莲挥发油化学成分进行提取和分析,比较不同溶剂萃取野生金线莲挥发油化学成分的差异。方法:采用超声波辅助水蒸汽蒸馏法提取挥发油,分别用正己烷、乙醚萃取后浓缩,通过GC-MS分析,实现对组分的鉴定,同时用峰面积归一化法计算它们的相对含量。结果:乙醚萃取的挥发油中检出46个成分,鉴定出38个化合物,占挥发油总量的95.12%,主要成分为:亚油酸(20.570%)、1-辛烯-3-醇(18.460%)、棕榈酸(17.616%)和亚麻酸(4.849%)。正己烷萃取的挥发油中检出35个成分,鉴定出27个化合物,占挥发油总量的93.68%,主要成分为:1-辛烯-3-醇(22.385%)、棕榈酸(19.573%)、亚油酸(16.725%)和亚麻酸(4.488%)。结论:为金线莲的进一步开发研究提供基础数据。 展开更多
关键词 金线莲 挥发油 气相色谱-质谱联用法
AAS法测定不同来源金线莲中的Fe、Mn、Zn含量 预览
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作者 程伟青 罗明可 《海峡药学》 2010年第12期 45-47,共3页
目的了解不同产地金线莲中微量元素含量的差异。方法采用原子分光光度法对不同产地金线莲中的Fe、Mn、Zn进行测定。结果不同产地金线莲中的微量元素Fe、Mn、Zn的含量有一定差异。结论为金线莲的规范化种植和确立金线莲的质量标准提供依据。
关键词 金线莲 原子分光光度法 微量元素
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原子吸收光谱法测定不同产地金线莲中的微量元素 预览 被引量:5
16
作者 陈文娟 《海峡药学》 2009年第12期 81-82,共2页
目的了解不同产地金线莲中微量元素含量的差异。方法采用原子吸收光谱法对不同产地金线莲中的微量元素进行测定。结果不同产地金线莲中的微量元素钾、钙、铅、铬的含量差异较大。结论为金线莲的进一步研究提供了基础数据。
关键词 金线莲 微量元素 原子吸收光谱法
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聚合硅酸硫酸铝絮凝剂合成与应用 预览
17
作者 《化学工程与装备》 2007年第2期 46-48,共3页
以硫酸铝渣(SiO2浓度4.0%)为原料,在pH=4条件下合成了聚硅酸硫酸铝.并将合成的聚硅酸硫酸铝应用于模拟浊水样的处理.结果表明:当合成的聚硅酸硫酸铝中nAl/nsi为0.5,其用量为水样0.04~0.09%(体积比)时,当体系pH范围为6.0~9.0,除浊率均... 以硫酸铝渣(SiO2浓度4.0%)为原料,在pH=4条件下合成了聚硅酸硫酸铝.并将合成的聚硅酸硫酸铝应用于模拟浊水样的处理.结果表明:当合成的聚硅酸硫酸铝中nAl/nsi为0.5,其用量为水样0.04~0.09%(体积比)时,当体系pH范围为6.0~9.0,除浊率均为98%以上. 展开更多
关键词 聚硅酸硫酸铝 硫酸铝渣 浊水样
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环丙沙星片剂的尿药浓度测定及药代动力学研究 预览 被引量:1
18
作者 《海峡药学》 2007年第12期 106-108,共3页
目的通过测定环丙沙星片剂的尿药浓度来研究其药动学参数,以指导临床合理用药。方法采用双波长法测定环丙沙星片剂的尿药浓度。结果环丙沙星在2~7μg·mL^-1浓度范围内线性良好,r=0.9999;平均回收率为99.9%,RSD=1.65%(n=... 目的通过测定环丙沙星片剂的尿药浓度来研究其药动学参数,以指导临床合理用药。方法采用双波长法测定环丙沙星片剂的尿药浓度。结果环丙沙星在2~7μg·mL^-1浓度范围内线性良好,r=0.9999;平均回收率为99.9%,RSD=1.65%(n=5),在室温条件下稳定性良好;T1/2=3.96h。结论该法灵敏、准确、迅速;重复性好;尿样品处理方法简单。 展开更多
关键词 环丙沙星 尿药浓度 双波长法
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色谱技术在手性药物对映体拆分中的应用及其进展 预览 被引量:4
19
作者 罗明可 《海峡药学》 2007年第2期 56-58,共3页
手性药物对映体拆分方法研究是目前药学领域研究的热点之一。本文笔者就色谱拆分理论、色谱拆分技术在手性药物对映体拆分中的应用及进展状况.作了较为全面的分析综述。
关键词 色谱 拆分 应用 进展
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医药、卫生中专学校《分析化学》教学教法研究 预览
20
作者 《海峡药学》 2002年第1期 58-60,共3页
目的研究、探讨《分析化学》学科切实有效的教学教法方法针对目前中专学生生理、心理特点及所受基础教育实际程度,在实施理论教学与实验指导中,从四个侧面加以分析、总结.结果课堂教学生动有趣、重点突出、层次分明、逻辑性强、效果良好... 目的研究、探讨《分析化学》学科切实有效的教学教法方法针对目前中专学生生理、心理特点及所受基础教育实际程度,在实施理论教学与实验指导中,从四个侧面加以分析、总结.结果课堂教学生动有趣、重点突出、层次分明、逻辑性强、效果良好.结论 《分析化学》在医药、卫生中专学校的专业课程设置中占有相当重要的地位.优秀的教学教法有利于增进课堂中师生间教、学交流,提高教学质量,促进学生全面掌握学科知识,并能将其充分应用到其它专业理论、专业技能的学习中.上好这门专业基础课程,尤为重要. 展开更多
关键词 课堂教学 课堂设置 《分析化学》 中等医学教育
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