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不同处理方式对蔬菜种传病毒病的消毒效果评价 认领
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作者 周玉忠 王忠全 +2 位作者 夏世龙 李彦辉 文星 《中国果菜》 2020年第3期61-64,87共5页
为了研究不同种子处理对种子传播病毒的灭活效果,试验以番茄、辣椒、甜瓜、南瓜种子样本中被番茄花叶病毒(ToMV)、烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶瓜病毒(CMV)感染的种子为研究对象,经过酶联免疫吸附测定(ELISA)和逆转录聚合酶链反应(RT-P... 为了研究不同种子处理对种子传播病毒的灭活效果,试验以番茄、辣椒、甜瓜、南瓜种子样本中被番茄花叶病毒(ToMV)、烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶瓜病毒(CMV)感染的种子为研究对象,经过酶联免疫吸附测定(ELISA)和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测试选择出研究材料,采用7种病毒失活处理方法,分别为醋酸、过氧化氢、盐酸、次氯酸钠浸种,干热处理,温汤浸种和臭氧熏蒸处理。结果发现,能有效减少病毒浓度的处理为盐酸浸种、干热处理、温汤浸种(65℃)和臭氧(10 g/m3)处理,分别能将种子传播病毒的浓度平均降低51%、50%、42%和32%。其他灭活方法治疗效果较差,病毒浓度平均降低了12%~27%。盐酸浸种和干热处理是最有效的方法,对种子出芽率和活力没有影响。 展开更多
关键词 种子处理 蔬菜 种子传播 病毒 灭活
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八面来风 认领
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作者 杨鸣涛 +1 位作者 文星 李广文 《党风》 2020年第4期70-71,共2页
东莞市:耕准监骨防疫复工两促进当前新冠肺炎疫情防控工作进入一个新阶段,东莞市各级纪检监察机关紧盯重点工作环节,充分发挥监督保障作用,推动复工复产工作落实落细。驻市市场监管局纪检监察组督促驻在单位启用防控生产应急审批机制,... 东莞市:耕准监骨防疫复工两促进当前新冠肺炎疫情防控工作进入一个新阶段,东莞市各级纪检监察机关紧盯重点工作环节,充分发挥监督保障作用,推动复工复产工作落实落细。驻市市场监管局纪检监察组督促驻在单位启用防控生产应急审批机制,对疫情防控物资生产企业开通许可登记“绿色通道”。驻市工信局纪检监察组加强对驻在单位12个督导组履行防疫物资保障职责的监督检查,督促做好企业现场驻点工作。 展开更多
关键词 疫情防控 纪检监察 八面来风 监督检查 落细 绿色通道 审批机制 物资保障
蓝莓叶斑病病原菌鉴定及其生物学特性 认领 被引量:7
3
作者 薛德胜 李保华 +2 位作者 练森 文星 王彩霞 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期323-329,共7页
为明确山东省蓝莓叶斑病病原菌的种类及其生物学特性,采用组织分离法获得菌株B1,通过形态学特征并结合r DNA-ITS序列分析对该菌株B1进行鉴定,以离体和活体叶片接种法测定菌株B1的致病性,并对其生物学特性进行研究。结果表明,菌株B1菌落... 为明确山东省蓝莓叶斑病病原菌的种类及其生物学特性,采用组织分离法获得菌株B1,通过形态学特征并结合r DNA-ITS序列分析对该菌株B1进行鉴定,以离体和活体叶片接种法测定菌株B1的致病性,并对其生物学特性进行研究。结果表明,菌株B1菌落呈白色绒毛状,背面淡黄色,分生孢子纺锤形,5个细胞,中间3个细胞为褐色,具有2~4根顶端附属丝;菌株B1的ITS序列与GenBank中棒状拟盘多毛孢Pestalotiopsis clavispora的相似性达99%以上,结合形态特征与rDNAITS序列分析将病原菌鉴定为棒状拟盘多毛孢,GenBank登录号为MG009201。菌株B1接种蓝莓叶片后产生褐色病斑,后期密生黑色分生孢子盘,与蓝莓田间自然发病症状一致。该菌株在5~35℃、pH5~11范围内均可生长,最适温度范围为25~30℃,最适pH范围为5~9;但仅在25~30℃时产生分生孢子,最适产孢温度为25℃;光照条件对菌丝生长无明显影响,但连续黑暗有利于产孢;以葡萄糖为碳源时利用率最高,对乳糖利用效果最差;最适氮源为硝酸钠、硫酸铵和蛋白胨,几乎不能利用尿素。 展开更多
关键词 蓝莓 叶斑病 棒状拟盘多毛孢 病原菌鉴定 生物学特性
BHT对苹果采后灰霉病的防效及防御酶活性和丙二醛含量的影响 认领 被引量:1
4
作者 孟璐璐 于春蕾 +3 位作者 薛德胜 李保华 文星 王彩霞 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期686-692,共7页
为探究2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol,BHT)对苹果采后灰霉病的防效和防病机制,采用平板法和刺伤接种法测定了BHT对灰霉病菌Botrytis cinerea的抑制作用及果实内防御酶活性和丙二醛含量的影响。结果表明,0.1... 为探究2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol,BHT)对苹果采后灰霉病的防效和防病机制,采用平板法和刺伤接种法测定了BHT对灰霉病菌Botrytis cinerea的抑制作用及果实内防御酶活性和丙二醛含量的影响。结果表明,0.1 mmol/L BHT对苹果灰霉病的防效最佳,处理苹果后间隔48~96 h接种灰霉病菌,其防效可达68.59%~73.55%,其次为0.2、1.0 mmol/LBHT处理,但防效均低于52.94%。0.1 mmol/L BHT处理对灰霉病菌菌丝生长和分生孢子萌发无显著抑制作用,但可显著增强果实内超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性以及总抗氧化能力,其峰值是对照的1.82~5.28倍,且均显著高于单独接种灰霉病菌的处理。此外,单独接种灰霉病菌的苹果果实内丙二醛含量快速升高,最大增幅达251.49%,而BHT处理后丙二醛含量变幅较小,最大增幅仅为83.95%。表明BHT可通过增强苹果果实内防御酶活性水平和总抗氧化能力来降低丙二醛的积累,从而提高果实对灰霉病的抗性。 展开更多
关键词 2 6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT) 灰霉病菌 防御酶 丙二醛 诱导抗性
苹果树腐烂病菌木聚糖酶VmXyl1基因的原核表达及多克隆抗体制备 认领 被引量:2
5
作者 孟璐璐 于春蕾 +3 位作者 练森 李保华 文星 王彩霞 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期315-322,共8页
木聚糖酶(xylanase)基因VmXyl1在苹果树腐烂病菌—黑腐皮壳菌(Valsa mali)致病过程中发挥重要作用。为了揭示VmXyl1在腐烂病菌与寄主互作过程中的作用机制,本研究构建了原核表达载体pET-32a-VmXyl1,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopro... 木聚糖酶(xylanase)基因VmXyl1在苹果树腐烂病菌—黑腐皮壳菌(Valsa mali)致病过程中发挥重要作用。为了揭示VmXyl1在腐烂病菌与寄主互作过程中的作用机制,本研究构建了原核表达载体pET-32a-VmXyl1,利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)进行诱导,在大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌株Rosetta (DE3)中成功表达了VmXyl1融合蛋白;利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)检测融合蛋白的可溶性和纯化效果,免疫新西兰白兔(Oryctolagus cuniculus)制备多克隆抗体,并对其效价和特异性进行分析。结果显示,该蛋白主要以包涵体形式存在,且0.5 mmol/L IPTG、30℃诱导8 h融合蛋白高效表达;经NiNTA柱亲和层析纯化后,获得了预期大小的融合蛋白。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和Western blot分析表明,所制备抗体效价达1∶102 400,且抗体能特异性识别VmXyl1融合蛋白及发病苹果(Malus pumila)树皮组织中的木聚糖酶蛋白,说明所制备的抗体具有高效性和特异性。研究结果为深入探究腐烂病菌木聚糖酶的致病机理及其与寄主的互作机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 苹果树腐烂病菌 木聚糖酶基因 原核表达 多克隆抗体
冰淇淋酸奶的研究与开发 认领
6
作者 朱雅丽 文星 李启明 《食品与发酵科技》 CAS 2019年第1期59-61,共3页
冰淇淋酸奶是以牛奶、白糖、奶油、变性淀粉、明胶、甜味剂和食品用香精等为原料,经过配料、均质、杀菌、发酵、冷却、后熟、充气、冷冻等工艺制备的乳制品。本文主要研究了其发酵冷却后的后熟和充气率对最终产品风味的影响,以及冷冻储... 冰淇淋酸奶是以牛奶、白糖、奶油、变性淀粉、明胶、甜味剂和食品用香精等为原料,经过配料、均质、杀菌、发酵、冷却、后熟、充气、冷冻等工艺制备的乳制品。本文主要研究了其发酵冷却后的后熟和充气率对最终产品风味的影响,以及冷冻储存时间对产品中乳酸菌活性的影响。试验表明,当后熟时间为15h、充气率50%时产品达到最佳口感;产品中乳酸菌活性在6个月-18℃保存期内得到较好保留。 展开更多
关键词 冰淇淋 酸奶 工艺
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苹果N-乙酰基-5-羟色胺-O-甲基转移酶基因的克隆及原核表达 认领
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作者 吴成成 李保华 +2 位作者 练森 文星 王彩霞 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期173-181,共9页
以‘富士’和‘嘎啦’苹果(Malus pumila)叶片总RNA为模板,利用反转录PCR(RT-PCR)技术,克隆N-乙酰基-5-羟色胺-O-甲基转移酶(ASMT)基因,通过DNAMAN、MEGA 5.1、Prot Param等生物信息学软件对基因cDNA序列、系统进化关系、理化性... 以‘富士’和‘嘎啦’苹果(Malus pumila)叶片总RNA为模板,利用反转录PCR(RT-PCR)技术,克隆N-乙酰基-5-羟色胺-O-甲基转移酶(ASMT)基因,通过DNAMAN、MEGA 5.1、Prot Param等生物信息学软件对基因cDNA序列、系统进化关系、理化性质等进行分析,将克隆的苹果ASMT基因与表达载体pET32a连接,构建原核表达载体并转入大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌株Rosetta(DE3)中,优化原核表达条件,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测融合蛋白的可溶性,用蛋白免疫印迹法(western blot)和酶活性测定验证目的蛋白的表达。结果表明,获得了苹果ASMT的全长cDNA序列,命名为MpASMT1(Gen Bank登记号MF135479)。该基因开放阅读框(ORF)为1 077 bp,编码358个氨基酸。MpASMT1编码蛋白的理论分子量约为39.7 kDa,等电点为5.42,是非分泌型、疏水的稳定蛋白;其263位组氨酸(His)为催化位点,225位谷氨酸为底物S-腺苷甲硫氨酸结合位点。多序列比对及系统发生树分析表明,MpASMT1编码的氨基酸序列与珠美海棠(M.zumi)MzASMT1(KJ123721)同源性最高,相似性达99.2%,其次为葡萄(Vitis vinifera)ASMT(LOC100248671),氨基酸序列相似性为66.4%。原核表达结果显示,经0.25~2.0 mmol·L~(-1)异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导的重组质粒可特异性表达分子量约58 kDa的融合蛋白,且低温条件(15和25°C)能够提高该蛋白的可溶性表达;western blot分析表明融合表达蛋白能与His单克隆抗体特异性结合,纯化蛋白的酶活性为7.8 pmol·mg~(-1)(蛋白),进一步证实MpASMT1编码蛋白成功表达。 展开更多
关键词 苹果 MpASMT1 克隆 生物信息学 原核表达
BHT对苹果果实轮纹病的防效及防御酶活性的影响 认领 被引量:3
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作者 于春蕾 孟璐璐 +3 位作者 练森 李保华 文星 王彩霞 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期819-826,共8页
以‘富士’苹果果实为材料,采用刺伤接种法,测定了2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)对苹果果实轮纹病的防效及其防病机制。结果表明:0.1 mmol·L^-1的BHT处理后间隔48-72 h接种轮纹病菌,其防效最高达74%以上,而该浓度BHT对轮纹病菌... 以‘富士’苹果果实为材料,采用刺伤接种法,测定了2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)对苹果果实轮纹病的防效及其防病机制。结果表明:0.1 mmol·L^-1的BHT处理后间隔48-72 h接种轮纹病菌,其防效最高达74%以上,而该浓度BHT对轮纹病菌菌丝生长和分生孢子萌发均无明显的抑制作用。BHT处理后接种或不接种轮纹病菌,果实内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及总抗氧化能力(T-AOC)均显著升高,其峰值是对照的1.82-4.56倍,且在测定时间内始终显著高于对照。同时,BHT处理的果实内丙二醛(MDA)含量变化较小,最高增幅仅为78.94%,而接种轮纹病菌的处理,MDA含量急速上升,最大增幅为316.77%。表明BHT通过持续提高‘富士’果实内防御酶活性和总抗氧化能力,同时降低膜脂过氧化产物MDA的积累,从而诱导果实对轮纹病的抗性。 展开更多
关键词 BHT 果实轮纹病 诱导抗性 防御酶 丙二醛
苹果MpSNAT1的克隆与表达特性分析 认领
9
作者 吴成成 李婷 +3 位作者 赵芮嘉 李保华 文星 王彩霞 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期872-878,共7页
以‘富士’和‘嘎啦’苹果(Malus pumila)叶片总RNA为模板,克隆5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(SNAT)基因,利用DNAMAN、MEGA 5.1等软件对该基因进行生物信息学分析,采用荧光定量PCR技术测定SNAT的表达水平。结果表明,获得的苹果SNAT全长c ... 以‘富士’和‘嘎啦’苹果(Malus pumila)叶片总RNA为模板,克隆5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(SNAT)基因,利用DNAMAN、MEGA 5.1等软件对该基因进行生物信息学分析,采用荧光定量PCR技术测定SNAT的表达水平。结果表明,获得的苹果SNAT全长c DNA序列为750 bp,编码249个氨基酸,命名为MpSNAT1(登录号MF443136)。MpSNAT1编码蛋白的理论分子量约27.8 k Da,为非分泌型、亲水的不稳定蛋白,具有乙酰基转移酶(GNAT)功能结构域。序列多重比对及系统进化树分析表明,MpSNAT1编码氨基酸序列与桃和拟南芥的同源性高,一致性分别为91.2%和63.6%。炭疽叶枯病菌接种后,苹果叶中MpSNAT1表达量升高,但‘富士’和‘嘎啦’中基因上调水平和持续时间存在显著差异。此外,外源褪黑素处理后,苹果叶中MpSNAT1显著上调表达,但外源水杨酸(SA)处理后,MpSNAT1表达量均不同程度降低,表明该基因表达不受SA诱导。 展开更多
关键词 苹果 MpSNAT1 克隆 生物信息学 基因表达
植物病理学领域蛋白乙酰化修饰研究进展 认领
10
作者 郭倩倩 杨倩倩 +1 位作者 宋丽敏 文星 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期96-101,共6页
蛋白质乙酰化是一种普遍存在于真核与原核生物中且可逆的翻译后修饰方式,由乙酰基转移酶和去乙酰化酶共同调控,参与了转录、新陈代谢、细胞信号转导、细胞凋亡等多个生物学过程。随着检测技术的不断发展,目前已发现了大量的组蛋白及非... 蛋白质乙酰化是一种普遍存在于真核与原核生物中且可逆的翻译后修饰方式,由乙酰基转移酶和去乙酰化酶共同调控,参与了转录、新陈代谢、细胞信号转导、细胞凋亡等多个生物学过程。随着检测技术的不断发展,目前已发现了大量的组蛋白及非组蛋白的乙酰化修饰,对其功能的研究也取得一定的进展。本文从乙酰化修饰研究进程出发,对植物病理学领域,包括植物抗病相关过程、植物病原菌和生防菌三个方面的乙酰化研究进展进行总结归纳,并对今后乙酰化修饰研究所需解决的问题进行了展望和讨论。 展开更多
关键词 蛋白质乙酰化修饰 组蛋白乙酰化 植物病原菌 生防菌
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水解蛇蜕的几种方法及水解产物的生物活性研究 认领
11
作者 蒋凯 严发展 +3 位作者 丁秦超 陈鑫珉 文星 丁滨 《科技创新与应用》 2018年第29期32-34,共3页
目的比较几种蛇蜕水解方法的水解效率,并以HaCaT细胞评价水解产物的生物活性.方法利用乙酸、NaOH、氧化还原两步法在不同温度和时间条件下水解蛇蜕;利用茚三酮法、考马斯亮蓝法检测水解产物中氨基酸及多肽的含量;用HPLC测定提水解产物... 目的比较几种蛇蜕水解方法的水解效率,并以HaCaT细胞评价水解产物的生物活性.方法利用乙酸、NaOH、氧化还原两步法在不同温度和时间条件下水解蛇蜕;利用茚三酮法、考马斯亮蓝法检测水解产物中氨基酸及多肽的含量;用HPLC测定提水解产物分子量;利用HaCaT评价水解产物的生物活性.结果酸水解的最适条件为80℃、2.5mol/L乙酸反应6h;碱水解的最适条件为80益、0.625mol/LNaOH反应6h;氧化还原水解法最适试剂浓度分别为6%过硫酸氢钾、4mol/L尿素、1.25%亚硫酸氢钠;通过上述方法获得的胶原蛋白多肽分子量约为1kDa.该多肽能够促进细胞体外增殖. 展开更多
关键词 蛇蜕 多肽 水解 生物活性
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苹果木葡聚糖酶抑制蛋白基因的克隆与表达分析 认领
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作者 李婷 吴成成 +3 位作者 李保华 练森 文星 王彩霞 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1245-1252,共8页
以‘富士’苹果(Malus pumila)树皮总RNA为模版,利用RT-PCR技术克隆木葡聚糖酶抑制蛋白基因,命名为MpXEGIP1。通过生物信息学软件对基因cDNA序列、系统进化关系及理化性质进行分析,采用荧光定量PCR技术测定MpXEGIP1的表达量。构建原... 以‘富士’苹果(Malus pumila)树皮总RNA为模版,利用RT-PCR技术克隆木葡聚糖酶抑制蛋白基因,命名为MpXEGIP1。通过生物信息学软件对基因cDNA序列、系统进化关系及理化性质进行分析,采用荧光定量PCR技术测定MpXEGIP1的表达量。构建原核表达载体p ET-MpXEGIP1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),利用SDSPAGE和western blot检测和验证融合蛋白的表达。结果表明,获得了MpXEGIP1的全长cDNA序列(登录号MG515243),开放阅读框1 344 bp,编码447个氨基酸。MpXEGIP1编码蛋白的理论分子量约48.77 kDa,为亲水的不稳定蛋白;57-419位氨基酸为木聚糖酶抑制蛋白保守域。序列多重比对及系统进化树分析表明,MpXEGIP1编码氨基酸序列与‘金冠’苹果XEGIP完全一致,其次与梨XEGIP序列相似性81%,三者亲缘关系较近。‘富士’枝条接种腐烂病菌后,MpXEGIP1显著上调表达。原核表达和western blot分析表明,该蛋白以包涵体形式存在,能与HIS抗体特异性结合,证实MpXEGIP1编码蛋白得到成功表达。 展开更多
关键词 苹果 木葡聚糖酶抑制蛋白基因 克隆 生物信息学分析 表达分析
土壤湿度对大豆孢囊线虫侵染和繁殖的影响 认领
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作者 赵洪海 +1 位作者 许冠堂 文星 《青岛农业大学学报:自然科学版》 2017年第1期9-12,共4页
为探讨土壤湿度对大豆孢囊线虫(Heterodera glycines,SCN)侵染和繁殖的影响,采用定量接种和钵栽试验方法,通过定期取样、土壤中线虫分离和根组织中线虫染色后镜检,测定了3种土壤湿度—低湿度(重量含水量MCW 2%-5%)、中湿度(MCW 10%... 为探讨土壤湿度对大豆孢囊线虫(Heterodera glycines,SCN)侵染和繁殖的影响,采用定量接种和钵栽试验方法,通过定期取样、土壤中线虫分离和根组织中线虫染色后镜检,测定了3种土壤湿度—低湿度(重量含水量MCW 2%-5%)、中湿度(MCW 10%-18%)和高湿度(MCW 20%-28%)状况下SCN不同虫态群体密度及其动态变化。结果表明,与中湿度处理相比,低和高湿度处理下,SCN 2龄幼虫根系侵入量、3龄和4龄幼虫根内发育数量均较少。中湿度处理的SCN繁殖系数(Rf)为1.5,而低和高湿度处理的分别为0.7和0.4,比高湿度处理的分别减少了53%和83%。可见,土壤湿度过低和过高均不利于SCN的侵染,并明显抑制SCN的繁殖。 展开更多
关键词 大豆孢囊线虫 湿度处理 侵染 繁殖系数
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一种高效构建多位点突变重组质粒的方法 认领
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作者 孙晓梅 赵彦翔 +2 位作者 文星 刘俊峰 黄金光 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期289-295,共7页
定点突变技术是蛋白质结构与功能研究的必要手段之一,随着蛋白质结构生物学深入发展,研究中要同时构建多位点、批量表达载体,研究者基于重叠延伸PCR和双接头PCR方法,优化建立一种高效构建多位点突变重组表达质粒的方法。
关键词 定点突变 重叠延伸PCR 双接头PCR 表达载体
外源褪黑素对苹果采后灰霉病的防效及防御酶活性的影响 认领 被引量:10
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作者 曹晶晶 于子超 +3 位作者 张颖 李保华 文星 王彩霞 《植物生理学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1753-1760,共8页
以‘富士’果实为材料,采用刺伤接种法,研究外源褪黑素对苹果采后灰霉病的防效及其防病机制,结果表明外源褪黑素处理后再接种灰霉病菌,病斑面积显著降低,0.2 mmol·L-1褪黑素处理后间隔72 h以上接种病原菌的处理,防效高达83%以上。... 以‘富士’果实为材料,采用刺伤接种法,研究外源褪黑素对苹果采后灰霉病的防效及其防病机制,结果表明外源褪黑素处理后再接种灰霉病菌,病斑面积显著降低,0.2 mmol·L-1褪黑素处理后间隔72 h以上接种病原菌的处理,防效高达83%以上。0.1~0.4 mmol·L-1褪黑素对灰霉病菌分生孢子萌发和菌丝生长均无明显的抑制作用,但褪黑素可显著提高果实内过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,其峰值是对照的1.86~8.73倍,且在测定时间内始终显著高于对照。表明外源褪黑素通过持续提高果实内防御酶活性诱导苹果对灰霉病的抗性。 展开更多
关键词 褪黑素 苹果 灰霉病菌 防御酶 诱导抗性
苹果树腐烂病菌β-葡萄糖苷酶基因的克隆及表达分析 认领 被引量:4
16
作者 李婷 练森 +2 位作者 李保华 文星 王彩霞 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期78-84,共7页
为探究苹果树腐烂病菌β-葡萄糖苷酶基因VmGluI的序列特征及其在病菌侵染致病过程中的表达,以强致病力菌株LXS080601为材料,利用RT-PCR技术克隆基因c DNA序列,通过生物信息学软件对VmGluI编码蛋白的系统进化关系、理化性质和二级结构进... 为探究苹果树腐烂病菌β-葡萄糖苷酶基因VmGluI的序列特征及其在病菌侵染致病过程中的表达,以强致病力菌株LXS080601为材料,利用RT-PCR技术克隆基因c DNA序列,通过生物信息学软件对VmGluI编码蛋白的系统进化关系、理化性质和二级结构进行分析,采用实时荧光定量PCR技术测定VmGluI的表达量。结果显示,苹果树腐烂病菌VmGluI的开放阅读框为1 689 bp(GenBank登录号KY646110),编码562个氨基酸,蛋白分子量62.7 k Da。VmGluI编码的蛋白具有糖基水解酶1家族的保守功能域,其二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,β-转角较少。VmGluI编码氨基酸序列与苹果和梨树腐烂病菌β-葡萄糖苷酶基因(KUI68239.1和KUI56905.1)同源性最高,分别为98.7%和87.8%,而与非植物病原真菌β-葡萄糖苷酶基因亲缘关系较远。接种苹果树腐烂病菌的富士枝条中,VmGluI显著上调表达,推测其在腐烂病菌侵染致病过程中起重要作用。离体枝条接种48 h后基因表达量开始显著升高,72 h时表达量最高为对照6.3倍;活体枝条接种12 h后,基因表达量已为对照的11.2倍,接种后48 h基因表达出现低谷,但96 h时表达量为对照的16.8倍,表明苹果树腐烂病菌在侵染离体和活体枝条过程中,VmGluI表达水平和时序变化存在明显差异。 展开更多
关键词 苹果树腐烂病菌 Β-葡萄糖苷酶基因 基因克隆 生物信息学分析 基因表达
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马铃薯纺锤块茎类病毒内蒙古分离株的克隆及序列分析 认领 被引量:1
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作者 王建 迟胜起 +2 位作者 韩磊 张剑峰 文星 《中国马铃薯》 2016年第1期31-38,共8页
采用内蒙古自治区采集的感染马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd)的马铃薯材料,克隆了PSTVd的全长基因,命名为内蒙古分离株(PSTVd-IM),对其序列进行分析。结果表明,该序列大小为359 bp,其与俄罗斯的PSTVd分离... 采用内蒙古自治区采集的感染马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd)的马铃薯材料,克隆了PSTVd的全长基因,命名为内蒙古分离株(PSTVd-IM),对其序列进行分析。结果表明,该序列大小为359 bp,其与俄罗斯的PSTVd分离株(EF044305.1)序列吻合。将该分离物与国内外已经报道的PSTVd株系进行了比较,构建了系统进化树,确定了其分类地位;通过序列比对和二级结构分析,发现PSTVd-IM与已报道的PSTVd三类致病类型株系:强株系(U23058.1)、中间株系(AY937179.1)和弱株系(M14814.1)的同源性分别为97.78%,98.61%和99.44%;且与这三种类型株系在中央保守区、致病区和可变区结构域存在差异,说明这些结构域可能与其致病性相关。PSTVd-IM的序列与二级结构分析有利于明确其来源及致病性的差异位点,对于PSTVd的致病机制的研究具有重要意义。 展开更多
关键词 马铃薯纺锤块茎类病毒 反转录-聚合酶链式反应 序列分析
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不同杀菌剂对苹果果实疫腐病的防治效果 认领 被引量:2
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作者 刘芳 李保华 +3 位作者 刘家生 董向丽 王彩霞 文星 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1269-1276,共8页
【目的】筛选防治苹果疫腐病的有效杀菌剂。【方法】采用先施药后接种和先接种后施药的方法,在室内离体‘富士’苹果果实上测试了13种杀菌剂保护果实免受疫腐病菌侵染的保护效果和抑制病菌在果实内生长扩展的内吸治疗效果。【结果】所... 【目的】筛选防治苹果疫腐病的有效杀菌剂。【方法】采用先施药后接种和先接种后施药的方法,在室内离体‘富士’苹果果实上测试了13种杀菌剂保护果实免受疫腐病菌侵染的保护效果和抑制病菌在果实内生长扩展的内吸治疗效果。【结果】所测试的13种杀菌剂都能有效保护果实防止疫腐病菌侵染,保护效果达100%;其中,氟菌·霜霉威、噁霜·锰锌、烯酰吗啉、氰霜唑、吡唑醚菌酯、双炔酰菌胺和霜脲·锰锌7种杀菌剂的保护效果可维持10 d以上,其余6种药剂的保护效果可维持5 d以上;当疫腐病菌侵入果实后,13种杀菌剂都不能有效抑制病菌的生长扩展,防止果实发病,没有内吸治疗效果。【结论】所测试的13种杀菌剂在病菌侵染之前喷施都能有效阻止病菌侵染,持效期不短于5 d,在病菌侵染之后施用则都不能有效抑制病菌扩展致病。 展开更多
关键词 苹果疫腐病 保护作用 内吸治疗 持效期 施药适期
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白花前胡营养器官结构及其分泌道分布规律的研究 认领 被引量:2
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作者 宋丽敏 韩邦兴 +2 位作者 文星 胡正海 谭玲玲 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期696-699,共4页
运用石蜡切片方法,观察白花前胡营养器官的显微结构及其分泌道的分布特征,以明确营养器官内分泌结构的分布规律,为揭示白花前胡次生代谢产物的积累提供解剖学依据。结果表明,(1)白花前胡成长根从外到内由周皮、中柱鞘薄壁组织和次生... 运用石蜡切片方法,观察白花前胡营养器官的显微结构及其分泌道的分布特征,以明确营养器官内分泌结构的分布规律,为揭示白花前胡次生代谢产物的积累提供解剖学依据。结果表明,(1)白花前胡成长根从外到内由周皮、中柱鞘薄壁组织和次生维管组织组成,而且中柱鞘薄壁组织不同于一般双子叶植物根的结构;茎从外到内由表皮、皮层和维管柱组成;叶为异面叶结构。(2)白花前胡根、茎及叶中均有分泌道存在,分泌道在根中分布于中柱鞘薄壁组织和次生韧皮部中,茎中分布于皮层和髓中,叶中分布于维管束上下两侧的薄壁组织中。 展开更多
关键词 白花前胡 营养器官 结构 分泌道 分布规律
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不同品种苹果叶片对外源水杨酸的生理响应 认领 被引量:4
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作者 张颖 李保华 +3 位作者 董向丽 文星 李桂舫 王彩霞 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1005-1012,共8页
为探究富士和嘎啦对外源水杨酸的生理响应机制,采用叶片喷雾法,测定外源水杨酸(SA)对苹果叶片中丙二醛(MDA)含量、防御酶活性及病程相关蛋白(PR)基因表达的影响。结果表明,0.2mmol·L-(-1)SA处理后,富士和嘎啦叶片中MDA含... 为探究富士和嘎啦对外源水杨酸的生理响应机制,采用叶片喷雾法,测定外源水杨酸(SA)对苹果叶片中丙二醛(MDA)含量、防御酶活性及病程相关蛋白(PR)基因表达的影响。结果表明,0.2mmol·L-(-1)SA处理后,富士和嘎啦叶片中MDA含量变幅较小且均与对照无显著差异;SA处理显著提高了叶片中过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性,富士和嘎啦叶片中各酶活性峰值分别是对照的1.31倍-2.06倍和1.16倍-3.13倍。SA诱导后苹果叶片中PR5和PR8的表达明显上调,富士于处理后第3天基因表达量达到高峰,而嘎啦于处理后第1天基因表达量最高。研究表明,外源SA可提高苹果叶片中防御酶活性并诱导PR基因上调表达,但富士和嘎啦中酶活性水平和持续时间及PR基因的应答反应存在差异。本研究为利用植物诱导抗病性防治苹果叶部病害提供了科学依据。 展开更多
关键词 苹果 外源水杨酸 丙二醛 防御酶 病程相关蛋白基因
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