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IL-6过表达慢病毒稳转细胞系构建及其对HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达影响 预览
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作者 潘正兰 管世鹤 +6 位作者 陈礼文 杨凯 张浩 王兆飞 王秀 侯舒文 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期594-599,604共7页
目的构建白介素-6(IL-6)过表达慢病毒稳转细胞系,探讨其对乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)表达的影响。方法以Huh7细胞gDNA为模板,通过PCR技术扩增获得IL-6片段并克隆到pMIGR1载体上,测序鉴定正确后,分别... 目的构建白介素-6(IL-6)过表达慢病毒稳转细胞系,探讨其对乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)表达的影响。方法以Huh7细胞gDNA为模板,通过PCR技术扩增获得IL-6片段并克隆到pMIGR1载体上,测序鉴定正确后,分别用pMIGR1质粒和pMIGR1-IL-6质粒与慢病毒包装质粒pCL-10A1共转染293T细胞,获得重组慢病毒颗粒,分别感染Huh7细胞,嘌呤霉素筛选出成功表达目的质粒的阳性细胞,分别命名为Huh7/con和Huh7/IL-6,电化学发光法检测细胞培养上清液中IL-6表达水平;qRT-PCR技术检测细胞中IL-6 mRNA表达水平;化学发光微粒子免疫检测法检测HBsAg、HBeAg表达水平,PCR-荧光探针法检测HBV-DNA表达水平。结果通过测序验证成功构建pMIGR1-IL-6质粒;通过慢病毒介导成功筛选出Huh7/con和Huh7/IL-6细胞系;电化学发光法及qRT-PCR结果显示,与对照组Huh7/con细胞系比较,Huh7/IL-6细胞系培养上清液IL-6水平及细胞中IL-6 mRNA水平显著升高;pcDNA1.3质粒转染Huh7、HepG2、Huh7/IL-6细胞6、12、24、48 h后上清液中IL-6表达水平显著升高;20 ng/ml IL-6处理pcDNA1.3质粒转染后的Huh7和HepG2细胞6、12、24、48 h后上清液中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平显著下降;pcDNA1.3质粒转染Huh7/IL-6细胞6、12、24、48 h后上清液中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平显著下降。结论成功构建IL-6慢病毒表达载体,并建立稳定过表达IL-6的Huh7细胞系;pcDNA1.3质粒转染可使IL-6表达上调;IL-6可使HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平下降。 展开更多
关键词 白介素-6 慢病毒表达载体 稳定转染 乙肝表面抗原 乙肝E抗原 乙肝病毒DNA
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干扰素λ3在慢性乙型肝炎患者血清中的表达及临床意义 预览
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作者 管世鹤 +6 位作者 杨凯 陈礼文 张浩 王秀 潘正兰 侯舒文 王兆飞 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期315-318,共4页
目的了解慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平,探究其临床意义及其与核苷和核苷酸类药物治疗的关系。方法 选取2017年1月-2018年5月在安徽医科大学第二附属医院就诊的慢性乙型肝炎患者119例,收集同期HBsAg阴性的22例健康体检者作为健康对照... 目的了解慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平,探究其临床意义及其与核苷和核苷酸类药物治疗的关系。方法 选取2017年1月-2018年5月在安徽医科大学第二附属医院就诊的慢性乙型肝炎患者119例,收集同期HBsAg阴性的22例健康体检者作为健康对照。采用ELISA法检测血清中IFNλ3的表达水平,比较慢性乙型肝炎患者与健康人血清IFNλ3水平差异,分析慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平与HBeAg的关系,观察不同核苷和核苷酸类药物治疗慢性乙型肝炎患者的血清IFNλ3水平,以及核苷和核苷酸类药物对外周血单个核细胞培养上清中IFNλ3水平的影响。满足正态性和方差齐性的计量资料多组间比较采用方差分析;对非正态或方差不齐的计量资料,两组比较采用Wilcoxon秩和检验,多组比较采用Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Nemenyi法检验。相关性分析用Spearman相关性分析法。结果 慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平明显低于健康对照组[14.7(5.9~28.5)pg/ml vs 76.1(39.4~112.0)pg/ml,Z=-10.114,P<0.001]。未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平与log HBV DNA呈负相关(r=-0.621,P<0.001)。HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平高于HBeAg阳性患者,2组间差异有统计学意义[16.4(9.0~31.3)pg/ml vs 8.7(2.9~23.2)pg/ml,Z=-2.205,P=0.02]。服用阿德福韦酯抗病毒治疗的患者血清IFNλ3水平显著高于服用恩替卡韦、替诺福韦、替比夫定、拉米夫定治疗的患者,差异均有统计学意义(P值均<0.05);体外实验核苷和核苷酸类药物处理的外周血单个核细胞培养上清中未见IFNλ3水平明显升高。结论 慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3显著低于健康人群,阿德福韦酯抗病毒治疗患者具有较高的血清IFNλ3水平。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 干扰素类
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三类中药复方对侧脑室内注射IL—1大鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴反应状态的影响 预览 被引量:9
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作者 张新民 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期 59-62,共4页
目的:探索补肾、健脾、活血三类中药复方对免疫因子引起下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴反应状态的不同影响。方法:采用侧脑室注射白细胞介素-1β(IL-1β),观察大鼠下丘脑单胺类神经递质、血浆促肾上腺皮质激系(ACTH)、皮质酮(COR... 目的:探索补肾、健脾、活血三类中药复方对免疫因子引起下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴反应状态的不同影响。方法:采用侧脑室注射白细胞介素-1β(IL-1β),观察大鼠下丘脑单胺类神经递质、血浆促肾上腺皮质激系(ACTH)、皮质酮(CORT)的含量,建立下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴对免疫因子的反应状态,以此来观察三类中药对这一反应状态是否有不同的影响。结果:侧脑室内注射IL-1β能使下丘脑去甲肾上腺素(NE)含量明显下降;血浆ACTH、CORT浓度明显升高,与国外文献报道相似。补肾的右归饮能使因侧脑室注射IL-1β而降低的下丘脑NE含量进一步降低、能使升高的血浆ACTH、CORT含量进一步明显升高;健脾的四君子汤也有这一作用趋势;活血的桃红四物汤则无明显差异。结论:补肾中药能提高机体下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴对免疫因子的反应性或反应能力,活血中药则无这一作用。 展开更多
关键词 中药复方 下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴系统 药理作用 IL-1 大鼠
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补肾,健脾,活血3类中药复方对脑室内注射IL—Iβ大鼠肾上腺皮质轴... 预览 被引量:1
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作者 张新民 《中医杂志》 CSCD 北大核心 1999年第7期 435-436,共2页
在大鼠侧脑室内注射白细胞介素-1β(IL-Iβ)后30分钟观察血液中促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮的浓度,建立一个肾上腺皮质轴对免疫因子的反应状态,以此来观察3类中药对这一反应状态是否有不同的影响。结果显示,侧... 在大鼠侧脑室内注射白细胞介素-1β(IL-Iβ)后30分钟观察血液中促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮的浓度,建立一个肾上腺皮质轴对免疫因子的反应状态,以此来观察3类中药对这一反应状态是否有不同的影响。结果显示,侧脑室内注射IL-Iβ后血中ACTH、皮质酮明显升高,与国外文献报道相似 肾中药能使因IL-Iβ诱导而升高了的血中ACTH、皮质酮进一步明显升高;健脾中药也有升高趋势;活血化瘀中药则未风 展开更多
关键词 脑室内注射 补肾药 健脾药 活血药 肾上腺皮质轴
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补肾,健脾,活血三类中药复方对脑室内注射白细胞介素—1 … 预览 被引量:8
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作者 张新民 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期 164-166,共3页
目的:探索补肾,健脾,活血三类中药复方对免疫因子引起的下丘脑单胺类神经递质的不同影响。方法:用侧脑室注射白细胞介素-1β(IL-1β),观测大鼠下丘脑匀浆液中单胺类神经递质的变化,建立一个下丘脑单胺类神经细胞功能对免... 目的:探索补肾,健脾,活血三类中药复方对免疫因子引起的下丘脑单胺类神经递质的不同影响。方法:用侧脑室注射白细胞介素-1β(IL-1β),观测大鼠下丘脑匀浆液中单胺类神经递质的变化,建立一个下丘脑单胺类神经细胞功能对免疫因子的反应状态,以此观察三类中经对这一反应状态的不同影响。结果:侧脑室内注射IL-1β能使下丘脑匀浆液中去甲肾上腺素(NE)含量明显降低;补肾的右归饮能使因侧脑室注射IL-1β引起下 展开更多
关键词 中药复方 IL-1β 脑内注射 下丘脑 药理
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健骨冲剂对去势大鼠骨质疏松作用的研究 预览 被引量:1
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作者 张新民 沈自尹 +6 位作者 王文健 陈素珍 陈伟华 张卫东 张万年 陈万生 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S1期279-281,399共4页
目的:研究健骨冲剂防治骨质疏松的作用。方法:观察去势大鼠骨密度、生物力学和血雌二醇、甲状旁腺素、降钙素、血钙、骨钙素的变化。结果:健骨冲剂能明显升高去势大鼠全身、腰椎和股骨骨密度;能增加股骨三点弯曲试验的屈服强度、最大... 目的:研究健骨冲剂防治骨质疏松的作用。方法:观察去势大鼠骨密度、生物力学和血雌二醇、甲状旁腺素、降钙素、血钙、骨钙素的变化。结果:健骨冲剂能明显升高去势大鼠全身、腰椎和股骨骨密度;能增加股骨三点弯曲试验的屈服强度、最大载荷和断裂载荷;但不能提高去势大鼠血雌二醇的水平。结论:表明健骨冲剂能防治因雌二醇下降所致的骨质疏松症,但其作用机制不一定通过提高卵巢功能来实现。 展开更多
关键词 健骨冲剂 去势大鼠 骨质疏松 生物力学 骨密度
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补肾法对雌性老年大鼠骨质疏松作用的探讨 预览 被引量:9
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作者 张新民 沈自尹 +3 位作者 王文健 陈素珍 陈伟华 《中医杂志》 CSCD 北大核心 1998年第6期 366-368,共3页
以老年大鼠为实验对象,用龙牡壮骨冲剂、健骨冲剂和骨密片作防治原发性骨质疏松症地对比研究,结果表明:D一种补肾健骨方对不同的对象有不同疗效,进而再一次说明“辨下施治”原则在中医、中西医结合临床中的关键地位和基础研究中的... 以老年大鼠为实验对象,用龙牡壮骨冲剂、健骨冲剂和骨密片作防治原发性骨质疏松症地对比研究,结果表明:D一种补肾健骨方对不同的对象有不同疗效,进而再一次说明“辨下施治”原则在中医、中西医结合临床中的关键地位和基础研究中的重要性。 展开更多
关键词 骨质疏松 中医药疗法 补肾
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琴声俊雅 韵满港城
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作者 许淳 《中国音乐》 CSSCI 北大核心 2008年第1期232-232,共1页
2007年12月31日,“张尊连师生二胡音乐会”于山东省日照市广播电视台演播大厅上演,本次音乐会由中共日照市委宣传部、日照市文化局、日照市广播电视局主办。这是一场日照市首次举办的二胡名家专场音乐会,也是截止目前莅临日照市民乐... 2007年12月31日,“张尊连师生二胡音乐会”于山东省日照市广播电视台演播大厅上演,本次音乐会由中共日照市委宣传部、日照市文化局、日照市广播电视局主办。这是一场日照市首次举办的二胡名家专场音乐会,也是截止目前莅临日照市民乐演奏最高水准的一场音乐会。 展开更多
关键词 专场音乐会 琴声 日照市 广播电视台 广播电视局 民乐演奏 山东省
脑桥中央髓鞘溶解症2例 预览 被引量:1
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作者 刘富刚 庆春 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2003年第1期 47,共1页
脑桥中央髓鞘溶解症(central pontile myelolysis,CPM)是一种继发脱髓鞘疾病,临床少见,易误诊.现报道2例如下.
关键词 脑桥 中央髓鞘溶解症 病例报告 CPM
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脑出血并发多器官衰竭36例分析 预览
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作者 庆春 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2001年第17期 781,共1页
脑出血(CH)并发多器官衰竭(MOF)病情复杂、多变、凶险,病死率高,现就我院6年来收治36例进行分析,报道如下. 1 临床资料 1.1 一般资料男24例,女12例,年龄40~86岁,平均65.6岁.符合第二次全国脑血管病学术会议诊断标准[1],并经CT检查确诊.... 脑出血(CH)并发多器官衰竭(MOF)病情复杂、多变、凶险,病死率高,现就我院6年来收治36例进行分析,报道如下. 1 临床资料 1.1 一般资料男24例,女12例,年龄40~86岁,平均65.6岁.符合第二次全国脑血管病学术会议诊断标准[1],并经CT检查确诊. 1.2 出血部位及例数基底出血15例,丘脑出血6例,脑叶出血5例,小脑出血4例,脑干出血4例,脑室出血2例. 1.3 MOF受累器官分布与发生率脑衰竭24例(66.7%),胃肠衰竭19例(52.8%),肺衰竭18例(50%),心血管衰竭16例(44.4%),肾衰竭12例(33.3%),血液系统衰竭7例(19.4%),电解质紊乱29例(80.6%). 1.4 衰竭器官数与病死率 2个器官衰竭19例,死亡8例(42.1%),3个器官衰竭10例,死亡6例(60%),4个以上器官衰竭者7例,全部死亡(100%),本组死亡21例(58.3%),以脑、胃肠、肺组合的衰竭综合征最多见,肾衰竭发生较晚. 1.5 CH致MOF发生时间与例数 CH 1、2、3、4、5天以后并发MOF依次为14、9、7、4、2例. 展开更多
关键词 脑出血 并发症 多器官衰竭
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Effect of Three Composite Recipes on Content of MonoamineTransmitters in Hypotpalamus Induced by Intracerebroventricular Injection of Interleukin-1 in Rats
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作者 张新民 +2 位作者 沈自尹 王文建 陈伟华 《中国结合医学杂志:英文版》 SCIE CAS 1999年第2期130-130,共1页
关键词 右归饮 四君子汤 桃红四物汤
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