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重组P128蛋白的表达纯化及其对抗牛源葡萄球菌活性研究 预览
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作者 肖真真 汤明 +2 位作者 张鑫宇 夏晓莉 孙怀昌 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第10期16-19,24共5页
为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切... 为了制备重组P128蛋白用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。将引入烟草蚀纹病毒蛋白酶(TEVp)识别位点的P128编码序列插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,转化大肠杆菌后用IPTG诱导融合蛋白表达,用温度敏感相变循环纯化,用TEVp活性包涵体切割融合标签,用最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)试验测定重组P128对奶牛乳房炎葡萄球菌抗菌活性。结果显示,融合蛋白以可溶性蛋白表达,两次相变循环纯化后的纯度达90%,产量为400 mg/mL;TEVp活性包涵体切割融合标签的效率接近100%,回收的重组P128纯度达98%,对牛源葡萄球菌的MIC和MBC分别为0.47μg/mL和1.88μg/mL;除个别多重耐药菌株外,重组P128蛋白对多数金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的溶(杀)作用很强。这些研究结果表明,重组P128可用于葡萄球菌性奶牛乳房炎治疗。 展开更多
关键词 重组P128蛋白 融合表达 纯化 抗葡萄球菌活性
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嵌合蛋白P128的表达、纯化与抗牛源葡萄球菌活性研究 预览 被引量:3
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作者 汤明 刘文俊 +2 位作者 张鑫宇 夏晓莉 孙怀昌 《扬州大学学报:农业与生命科学版》 CAS 北大核心 2016年第1期1-5,共5页
将抗葡萄球菌嵌合蛋白P128编码序列优化成大肠埃希菌偏爱密码子序列,插入脑膜炎奈瑟氏菌FrpC蛋白自加工元件(SPM)与类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,将重组载体pP128-SPM-ELP转化大肠埃希菌进行诱导表达,利用ELP的温度敏感可逆相... 将抗葡萄球菌嵌合蛋白P128编码序列优化成大肠埃希菌偏爱密码子序列,插入脑膜炎奈瑟氏菌FrpC蛋白自加工元件(SPM)与类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,将重组载体pP128-SPM-ELP转化大肠埃希菌进行诱导表达,利用ELP的温度敏感可逆相变循环(ITC)进行融合蛋白纯化,利用SPM自切割活性进行融合蛋白切割和目的蛋白回收;以牛源金黄葡萄球菌为指示菌,对回收的嵌合蛋白P128进行溶(杀)菌活性测定。结果表明:P128-SPM-ELP融合蛋白获得高水平、可溶性表达,经过两轮ITC获得的融合蛋白纯度大于90%,其自切割效率接近100%,回收的嵌合蛋白P128对金黄葡萄球菌的最小抑菌浓度为8.4μg·mL-1,且有很强的杀菌作用。证明SPM-ELP融合表达与纯化系统是简单、经济、有效的重组蛋白表达与纯化系统,获得的嵌合蛋白P128可用于葡萄球菌性奶牛疾病防治。 展开更多
关键词 嵌合蛋白P128 融合表达 纯化 抗葡萄球菌活性
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大规格铸带式炉热处理机组的研制 预览
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作者 汤明 《铸锻热:热处理实践》 1995年第4期 6-10,共5页
本文介绍了目前国内首先研制成功的最大规格、机电一体化、保护气氛铸带式炉热处理机组。其结构性能及工艺,经过现场测试及连续运行证明,其各项性能指标均达到了国际上同类产品八十年代末的先进水平。
关键词 热处理 铸带式炉 研制
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高压真空气淬炉 预览
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作者 汤明 《电炉技术》 1995年第3期 1-11,共11页
多年来工具行业,热处理都沿用盐浴法,但这种方法,在产品的质量,变形、寿命、能源以及环境保护等方面都存在一定问题,为满足工具行业处理技术发展的需要,在引进设备安装调试,吸收了国外同类产品先进技术的基础上,结合国内实际,... 多年来工具行业,热处理都沿用盐浴法,但这种方法,在产品的质量,变形、寿命、能源以及环境保护等方面都存在一定问题,为满足工具行业处理技术发展的需要,在引进设备安装调试,吸收了国外同类产品先进技术的基础上,结合国内实际,自行设计开发了GZC13-45×60×37型真空高压气淬炉,其性能结构作介绍。 展开更多
关键词 高压 真空气淬炉 淬火
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大规模铸带式炉处理机组 预览
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作者 汤明 《电炉技术》 1994年第2期 5-16,共12页
关键词 控制气氛 铸带式炉 热处理机组
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