期刊文献+
共找到118篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
家蚕品种秋丰×白玉耐氟性状的遗传分析及耐氟主效基因的初步定位
1
作者 裘智勇 东旭 +3 位作者 王宝林 夏定国 赵巧玲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-45,共6页
家蚕品种秋丰×白玉是一对耐氟性较强的夏秋用蚕品种,其中以亲本白玉A的耐氟性最强。以白玉A与耐氟性较弱的皓月B为亲本组配各种杂交世代进行耐氟性的遗传分析,结果表明在一定浓度的氟化物添食范围内,其耐氟性遗传呈显性遗传,受主... 家蚕品种秋丰×白玉是一对耐氟性较强的夏秋用蚕品种,其中以亲本白玉A的耐氟性最强。以白玉A与耐氟性较弱的皓月B为亲本组配各种杂交世代进行耐氟性的遗传分析,结果表明在一定浓度的氟化物添食范围内,其耐氟性遗传呈显性遗传,受主效基因控制,并且具有部分伴性遗传效应和明显的杂种优势。利用SSR分子标记对耐氟性状进行连锁分析,初步确定耐氟主效基因与第12连锁群中的2个标记(chr12-2990-1和chr12-2990-2)紧密连锁。 展开更多
关键词 家蚕 耐氟性 遗传分析 连锁分析
一个二化性家蚕醛酮还原酶基因的克隆及序列与表达分析
2
作者 陈艳荣 朱娟 +4 位作者 蒋涛 谭志承 陈艳花 唐顺明 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期187-194,共8页
醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用。以二化性... 醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用。以二化性家蚕品系秋丰为材料,利用RT-PCR分别从滞育命运组和非滞育命运组克隆出AKR蛋白的cDNA序列。AKR蛋白序列由343个氨基酸组成,与黑腹果蝇和人的AKR分别有43%和38%的序列一致性。基于蛋白质序列构建的系统发育树显示,家蚕AKR蛋白属于AKR2E亚家族,其氨基酸序列与该家族成员序列一致性超过30%,故命名为AKR2E-like。将akr2e-like基因的cDNA序列克隆进表达载体pET-28a(+)中进行原核重组表达,SDS-PAGE电泳和Western blot分析显示重组蛋白被成功表达。qRT-PCR分析表明,ark2e-like基因表达受发育环境调节:在滞育诱导条件下,该基因在家蚕化蛹早期的表达量持续增加,在化蛹后第4天mRNA丰度达到最高值;而在非滞育诱导条件下,化蛹后ark2e-like基因表达量并无明显波动。上述结果表明,ark2e-like基因有可能在家蚕二化性品系的滞育准备期起关键作用。 展开更多
关键词 醛酮还原酶 滞育准备 家蚕 表达
m^6A修饰及其对病毒复制过程调控研究进展 预览
3
作者 薛鹏 蒋涛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期404-412,共9页
N^6-甲基腺嘌呤(N^6-methyladenosine,m^6A)修饰是一种在真核生物中普遍存在的RNA修饰方式,在mRNA转运、稳定、翻译等过程中具有重要作用。m^6A修饰在病毒复制周期中扮演不同的角色,病毒的复制和宿主对病毒的免疫反应都受到m^6A甲基化... N^6-甲基腺嘌呤(N^6-methyladenosine,m^6A)修饰是一种在真核生物中普遍存在的RNA修饰方式,在mRNA转运、稳定、翻译等过程中具有重要作用。m^6A修饰在病毒复制周期中扮演不同的角色,病毒的复制和宿主对病毒的免疫反应都受到m^6A甲基化的影响。本文总结了近年来关于m^6A修饰方面的分子作用机制及其对病毒复制以及宿主免疫反应的影响相关研究,以期为病毒生命周期中的表观遗传调控研究提供一定的参考。 展开更多
关键词 N^6-甲基腺嘌呤 RNA修饰 病毒 复制 免疫
在线阅读 下载PDF
家蚕bmo-miR-0031-3p体内下调丝素轻链基因BmFib-L的表达 预览
4
作者 陈艳花 蒋涛 +3 位作者 王雪珍 钱平 唐顺明 《浙江大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期229-236,共8页
为了研究家蚕微RNA(microRNA,miRNA)对丝素轻链基因BmFib-L表达的调控作用,以BmFib-LmRNA的3'非翻译区(3'untranslatedregion,3?UTR)为靶标,通过RNAhybrid软件分析,筛选出种子序列与BmFib-L3'TR完全互补的家蚕miRNA-bmo-miR... 为了研究家蚕微RNA(microRNA,miRNA)对丝素轻链基因BmFib-L表达的调控作用,以BmFib-LmRNA的3'非翻译区(3'untranslatedregion,3?UTR)为靶标,通过RNAhybrid软件分析,筛选出种子序列与BmFib-L3'TR完全互补的家蚕miRNA-bmo-miR-0031-3p(简称"miR-0031-3p")。分别构建miR-0031-3p表达载体pcDNA3.0[ie1-egfp-pre-miR-0031-3p-SV40]和BmFib-L3'UTR融合萤光素酶报告基因重组表达质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3'UTR-SV40],以海肾萤光素酶表达载体pRL-CMV为内参,共转染BmN细胞,通过检测双萤光素酶活性验证miR-0031-3p的功能;人工合成miR-0031-3p的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor),再进一步验证miR-0031-3p对BmFib-L的调控功能。结果显示,在BmN细胞中,miR-0031-3p显著抑制BmFib-L的表达。为了进一步验证miR-0031-3p在家蚕体内对BmFib-L表达的调控作用,在5龄第2天幼虫体腔内注射转染物,分别在体内过表达和抑制内源性miR-0031-3p,荧光定量分析靶基因表达水平。结果显示,miR-0031-3p在幼虫体内能够下调BmFib-L的表达。该研究结果有利于阐明家蚕miRNA功能和蚕丝蛋白表达调控的分子机制。 展开更多
关键词 微RNA 家蚕 bmo-miR-0031-3p 丝素轻链基因 转录后调控
在线阅读 下载PDF
限食对家蚕寿命和繁殖性能及部分生理指标的影响 预览
5
作者 谭志承 薛鹏 +2 位作者 许瑾 唐顺明 《中国蚕业》 2019年第2期12-19,共8页
为了探讨限食对模式昆虫家蚕寿命等的影响,以二化性家蚕品系秋丰为对象,设置自由采食组(AL组)--每日给桑2次、24 h自由进食,限制给食组(DR组)--每日给桑1次,16 h自由进食、停食8 h,调查了幼虫期和蛹期经过时间、成虫交配繁殖性能和存活... 为了探讨限食对模式昆虫家蚕寿命等的影响,以二化性家蚕品系秋丰为对象,设置自由采食组(AL组)--每日给桑2次、24 h自由进食,限制给食组(DR组)--每日给桑1次,16 h自由进食、停食8 h,调查了幼虫期和蛹期经过时间、成虫交配繁殖性能和存活时间,利用qRT-PCR技术分析了限食对家蚕3个果蝇寿命相关基因的同源基因Bmchico、Bmrpd3和BmAkh2在5龄3 d幼虫不同组织的表达水平;分析了血淋巴超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活力,可溶性蛋白含量和海藻糖水平。结果显示, DR组的给食量为AL组的61.03%,限食后蛹期3 d雌、雄蛹平均体质量分别为AL组的63.34%和63.52%;雌雄平均寿命955 h,比AL组延长131 h,差异达到显著水平(P<0.05);限食后雌蚕的造卵数没有明显变化(P>0.05),雄蛾交尾正常。3个寿命相关基因在DR组与AL组的不同组织中均呈现不同程度的表达差异。限食后血淋巴中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力整体水平提高,可溶性蛋白含量降低,海藻糖水平发生改变。该结果可为研究限食对人体的影响提供思路和借鉴。 展开更多
关键词 限食 寿命 长寿基因 健康 家蚕 模型
在线阅读 下载PDF
一种家蚕丝腺体外培养和基因瞬时表达分析的方法 预览
6
作者 陈艳花 《中国蚕业》 2018年第4期32-34,共3页
家蚕是鳞翅目重要的模式生物,但是目前家蚕培养细胞系少,给家蚕基础研究带来不便,也影响了家蚕作为模式生物的应用。组织体外培养在一定程度上可以代表体内环境,且操作相对简单。我们尝试并建立了一种采用TC-100培养基体外培养丝腺... 家蚕是鳞翅目重要的模式生物,但是目前家蚕培养细胞系少,给家蚕基础研究带来不便,也影响了家蚕作为模式生物的应用。组织体外培养在一定程度上可以代表体内环境,且操作相对简单。我们尝试并建立了一种采用TC-100培养基体外培养丝腺组织的方法,取健康家蚕5龄2 d的幼虫,用75%乙醇进行表面消毒,灭菌水冲洗,剪开腹部表皮固定,用镊子轻轻拉出丝腺组织,用75%乙醇快速漂洗、PBS缓冲液冲洗2-3次,放入含有800 μL TC-100培养基的12孔细胞培养板的培养孔中,每孔4条丝腺组织,27 ℃培养;将0.64 μg增强荧光蛋白基因表达载体pcDNA3.0[ ie1-egfp- SV40]加入到25 μL不完全TC-100培养基中孵育15 min后转染丝腺组织,48 h后用荧光显微镜观察,培养基清澈,丝腺组织外形完好、发出亮绿色荧光,表明 egfp 在丝腺中得到了表达。为进一步验证体外培养丝腺的转染效果,将家蚕miR-0031 的抑制物(inhibitor)和阴性对照(inhibitor negetive control)各10 μL按照同样方法配成转染液,加入到放有丝腺组织的培养孔中,48 h收集丝腺组织,提取总RNA,荧光定量PCR检测靶基因 BmFib-L 的表达量,结果显示,inhibitor抑制miR-0031 的表达,促使 BmFib-L 的表达量上升,表明用体外培养丝腺进行转染等试验是可行的。该方法的建立为研究蚕丝蛋白基因表达调控的分子。 展开更多
关键词 家蚕 丝腺 体外培养 转染 瞬时表达
在线阅读 下载PDF
家蚕滞育关联山梨醇脱氢酶基因的启动子活性分析 预览
7
作者 朱娟 谢雨辰 +3 位作者 陈艳荣 唐顺明 易咏竹 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期391-397,共7页
【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启动... 【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启动子区序列,分别构建带有萤火虫荧光素酶报告基因的载体pGL3-BmSDH-P-luc,并与pRL-CMV报告质粒(含海肾荧光素酶报告基因)共转染家蚕BmN细胞,通过双荧光素酶检测系统检测BmSDH基因启动子活性;分别在BmN细胞培养基中添加昆虫保幼激素、蜕皮激素和滞育激素,通过双荧光素酶检测系统检测不同浓度激素处理对BmSDH-2a基因启动子活性的影响。【结果】BmSDH-1的转录起始位点为A(-41),BmSDH-2a的转录起始位点为C(-41),BmSDH-2b的转录起始位点为A(-40)(翻译起始位点为+1)。双荧光素酶检测结果表明,BmSDH-2a启动子活性极显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,BmSDH-2a 355 bp长度片段的启动子活性极显著高于674 bp和1 117 bp长度片段。用不同浓度滞育激素处理BmN细胞后,BmSDH-2a的1 117 bp启动子活性随着滞育激素浓度的升高有上升的趋势,当浓度高于100 ng/mL时启动子活性有所降低但仍保持在较高水平;用保幼激素进行处理后,随着激素浓度的升高启动子活性逐渐降低;蜕皮激素处理后,0.1 ng/mL激素显著增强启动子活性,当激素浓度继续升高启动子活性逐渐降低。【结论】确定了BmSDH基因的转录起始位点。BmSDH-2a启动子活性显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,一定浓度的蜕皮激素能显著提高BmSDH-2a启动子活性。研究结果有助于阐明BmSDH基因在家蚕滞育中的功能。 展开更多
关键词 家蚕 启动子 山梨醇脱氢酶 滞育 转录起始位点 表达调控
在线阅读 下载PDF
色素代谢相关基因在家蚕褐色类鹑斑突变品系q-l^b4龄眠蚕表皮中的表达分析
8
作者 裘智勇 王平阳 +2 位作者 夏定国 赵巧玲 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期841-848,共8页
家蚕体表色素主要有黑色素、蝶啶类色素和眼色素,不同家蚕品种的体色和斑纹都是表皮中黑色素、眼色素和蝶啶类色素等相互作用的结果。为了解家蚕褐色类鹑斑突变体(brown quail-like,q-l^b)幼虫表皮色素的代谢情况,利用qRT-PCR 技术分别... 家蚕体表色素主要有黑色素、蝶啶类色素和眼色素,不同家蚕品种的体色和斑纹都是表皮中黑色素、眼色素和蝶啶类色素等相互作用的结果。为了解家蚕褐色类鹑斑突变体(brown quail-like,q-l^b)幼虫表皮色素的代谢情况,利用qRT-PCR 技术分别检测q-l^b突变体和其对应的野生型品种0223金黄(0223JH)在4龄入眠后18 h新生表皮中37个色素代谢相关的基因的表达水平。结果表明,相对于野生型品种,大多数与黑色素、蝶啶类色素合成相关的关键基因在q-l^b突变体中表达上调,而与眼色素合成相关的关键基因表达下调,表明黑色素、蝶啶类色素在q-l^b突变体表皮中的含量都增加,而眼色素在q-l^b突变体表皮中的含量相对减少;与几丁质合成及尿酸转运相关的基因在q-l^b突变体表皮中也存在表达差异,其中大部分关键基因表达上调,表明更多的几丁质在q-l^b突变体新生表皮中合成,并伴随更多的尿酸被转运到表皮,与其他色素一起参与表皮构建,形成q-l^b突变体特殊的体色斑纹。此外,部分保幼激素代谢和核受体基因差异表达也可能影响了相关色素的合成及代谢。q-l^b突变体相对于野生型具有更复杂的体色和斑纹,这些基因的差异表达可能与此有关。研究结果为进一步阐述家蚕褐色类鹑斑产生的分子机制打下了基础。 展开更多
关键词 家蚕 褐色类鹑斑 差异表达基因 色素
家蚕orcokinin基因的选择性剪接与表达分析
9
作者 王平阳 赵巧玲 +2 位作者 裘智勇 夏定国 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期849-858,共10页
Orcokinin(OK)是节肢动物门特有的一种神经肽,该神经肽自从在小龙虾中发现以来,便陆续在节肢动物门其他物种中鉴定到,然而由于其结构的复杂性和功能的多样性,对OK基因的结构与作用机制知之甚少。利用RACE克隆、qRT-PCR等方法对家蚕OK基... Orcokinin(OK)是节肢动物门特有的一种神经肽,该神经肽自从在小龙虾中发现以来,便陆续在节肢动物门其他物种中鉴定到,然而由于其结构的复杂性和功能的多样性,对OK基因的结构与作用机制知之甚少。利用RACE克隆、qRT-PCR等方法对家蚕OK基因(BmOK)的结构与表达进行分析。结果表明BmOK存在选择性剪接,形成2个转录本BmOKA和BmOKB;BmOKA由外显子exon1、exon2、exon3、exon5、exon6、exon7和exon8组成,全长BmOKB由外显子exon1、exon2、exon3和exon4组成。BmOKA由于选择性剪接又有4个亚型,分别为BmOKA1(CDS长度为534 bp)、BmOKA2(CDS长度为564 bp)、BmOKA3(CDS长度为570 bp)和BmOKA4(CDS长度为600 bp),占比为22∶13∶5∶1,4个亚型有相同的5′ UTR(62 bp)和3′ UTR(188 bp);BmOKB只有一种CDS(864 bp),5′ UTR序列与BmOKA相同(62 bp),但3′ UTR(168 bp)不同。BmOKA主要在家蚕腹神经索表达,在4龄眠后18 h表达量最低;BmOKB在头部和中肠的表达量相对较高,眠期表达量高于其他时期。BmOKA与斜纹夜蛾Orcokinin同源性最高,完整蛋白质前体的同源性为33.80%。本研究清晰地展示了家蚕BmOK基因的结构与表达模式,为后续分析BmOK基因的功能奠定了理论基础并提供实验依据。 展开更多
关键词 BmOK基因 选择性剪接 神经肽 家蚕
T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》标准简介 预览 被引量:1
10
作者 高庆国 +4 位作者 王建民 李龙 周晓杰 陈薇伊 刘挺 《中国蚕业》 2018年第3期66-69,共4页
近年来,桑椹酒的研究得到了较快的发展,市场上出现了桑椹浸泡酒、桑椹发酵酒、桑椹蒸馏酒和桑椹白兰地等多种类型的桑椹酒。但是,桑椹酒标准研究相对滞后。2018年5月1日中国食品工业协会发布了首个桑椹酒标准T/CNFIA 104—2018《桑椹(... 近年来,桑椹酒的研究得到了较快的发展,市场上出现了桑椹浸泡酒、桑椹发酵酒、桑椹蒸馏酒和桑椹白兰地等多种类型的桑椹酒。但是,桑椹酒标准研究相对滞后。2018年5月1日中国食品工业协会发布了首个桑椹酒标准T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》。介绍了T/CNFIA 104—2018《桑椹(果)酒》标准规定的桑椹(果)酒的定义、分类、感官要求和主要理化指标,以及各指标的分析方法;阐述了该标准发布与实施的意义,有助于更好地理解和执行该标准。 展开更多
关键词 桑椹 果酒 质量标准 感官要求 理化指标
在线阅读 下载PDF
家蚕淡红卵突变体(rep-1)的发现及卵色相关基因MFS的结构分析
11
作者 何芬 赵巧玲 +5 位作者 王明磊 王平阳 夏定国 裘智勇 唐顺明 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2017年第6期913-921,共9页
在家蚕品种C1(H)中发现了一种新的卵色突变体。该突变体卵色为淡红色,成虫复眼为红色,遗传分析表明该突变性状由1个隐性基因控制,可能与红卵突变基因re互为等位基因,命名为淡红卵突变体(pale red egg,re~p-1)。红卵突变体(re)被... 在家蚕品种C1(H)中发现了一种新的卵色突变体。该突变体卵色为淡红色,成虫复眼为红色,遗传分析表明该突变性状由1个隐性基因控制,可能与红卵突变基因re互为等位基因,命名为淡红卵突变体(pale red egg,re~p-1)。红卵突变体(re)被认为是MFS(major facilitator superfamily)基因的序列发生了改变,故对re~p-1突变体MFS基因的结构及表达进行分析。与C1(H)卵色正常型品系的MFS基因比较,re~p-1突变体的MFS基因在第6外显子中的一段长59 bp片段被长14 bp的片段所替换,但编码蛋白质的跨膜结构未发生根本改变,而re突变体中MFS基因的结构变化对表达产物的功能有显著影响。此外,利用qRT-PCR检测MFS基因在C1(H)的卵色正常型品系、re~p-1突变体和re突变体3个家蚕品系5龄幼虫各个组织中均有表达,但表达水平存在差异:相较于C1(H)卵色正常型品系和re~p-1突变体,re突变体所有组织中MFS基因的表达量普遍偏低;相较于C1(H)卵色正常型品系,re~p-1突变体的后部丝腺和精巢中MFS基因具有较高的表达量,在其他组织中的表达量无明显差异。上述结果将有助于对re~p-1突变基因定位分析和卵色突变形成机制的研究。 展开更多
关键词 家蚕 卵色突变 淡红色卵突变体 遗传分析 MFS基因 序列组成 组织表达
家蚕miR-0047对丝胶蛋白基因BmSer-1表达的调控作用研究
12
作者 钱平 蒋涛 +4 位作者 何平 陈晨 唐旭东 唐顺明 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2017年第6期922-928,共7页
对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA,生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因Bm Ser-1有调控作用。设计特异性茎环引物,利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺(包括前、中、后部丝腺)、头部、脂肪体... 对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA,生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因Bm Ser-1有调控作用。设计特异性茎环引物,利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺(包括前、中、后部丝腺)、头部、脂肪体、表皮、中肠、马氏管、精巢/卵巢、血淋巴细胞和气管等12个器官组织中Bmo-miR-0047的表达情况。结果显示,中部丝腺中Bmo-miR-0047的相对表达量明显高于其他组织,说明在家蚕5龄幼虫期Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因的表达调控存在时空特异性。为了进一步分析Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因表达的调控作用,构建重组表达载体pc DNA3.0(ie1-egfp-pri-miR-0047-SV40)和p GL3(A3-luc-Bm Ser-1 3'UTR-SV40),并以海肾荧光素酶报告质粒pRL-CMV为内参,利用家蚕卵巢培养细胞Bm N进行共转染。转染后检测发现实验组Bm N细胞中的荧光素酶活性与对照组相比显著减弱,表明Bmo-miR-0047在体外培养细胞中对Bm Ser-1基因的表达具有负调控作用。 展开更多
关键词 家蚕 微小RNA Bmo-miR-0047 丝胶蛋白基因Ser-1 转录后调控
家蚕bmo-miR-217对核型多角体病毒(BmNPV)lef-1基因表达的调控作用
13
作者 王明磊 何芬 +4 位作者 王平阳 唐顺明 夏定国 赵巧玲 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2017年第2期217-224,共8页
昆虫的单链小分子RNA(microRNAs)不仅通过与自身的靶基因互补进行转录后水平调控,从而参与重要的生命过程,并且还可以与病原体靶基因相互作用,在免疫防御方面发挥重要功能。给家蚕5龄眠起幼虫接种家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)后72 h... 昆虫的单链小分子RNA(microRNAs)不仅通过与自身的靶基因互补进行转录后水平调控,从而参与重要的生命过程,并且还可以与病原体靶基因相互作用,在免疫防御方面发挥重要功能。给家蚕5龄眠起幼虫接种家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)后72 h,收集蚕体血淋巴提取总RNA用于高通量测序,经克隆验证获得一条由Bm NPV诱导上调表达的家蚕miRNA(bmo-miR-217),用生物信息学方法预测到bmo-miR-217对应的一个病毒靶基因为lef-1。构建bmo-miR-217及Bm NPV lef-1 3'-UTR的表达载体,并共转染家蚕卵巢培养细胞Bm N,于48 h后通过检测细胞的双荧光素酶相对活性,显示出bmo-miR-217可显著下调Bm NPV lef-1基因的表达(P〈0.05)。已知lef-1是Bm NPV侵染复制的必需基因之一,因此抑制其表达是家蚕先天免疫的一种有效策略。 展开更多
关键词 家蚕 微小RNA bmo-miR-217 家蚕核型多角体病毒 lef-1基因
家蚕滞育生理及其分子调控机制研究进展
14
作者 蒋涛 +1 位作者 唐顺明 钱平 《蚕业科学》 CSCD 北大核心 2017年第6期1031-1038,共8页
滞育是昆虫等动物应对周期性不利环境表现出的一种发育停滞的生理过程。家蚕既是重要的经济昆虫,也是鳞翅目模式生物,研究家蚕滞育生理及分子调控机制,对于理解昆虫的发育生理与适应性进化以及制定农林害虫防治策略等都有重要的理论和... 滞育是昆虫等动物应对周期性不利环境表现出的一种发育停滞的生理过程。家蚕既是重要的经济昆虫,也是鳞翅目模式生物,研究家蚕滞育生理及分子调控机制,对于理解昆虫的发育生理与适应性进化以及制定农林害虫防治策略等都有重要的理论和实践意义。国内外学者的研究证实,家蚕滞育是环境因素与遗传因素共同作用的结果,当环境信号被蚕体感知后转化形成滞育信号,再经复杂的信号转导途径,通过激素调节和营养物质储备与代谢的调控,使家蚕体内建立起适应滞育的生理代谢体系。近年来的研究进一步表明,家蚕滞育激素受体蛋白、热休克蛋白以及磷酸化作用参与的基因表达调控是家蚕滞育重要的分子调控机制,与滞育的起始、维持、终止密切相关。本文系统概述了上述家蚕滞育生理机制与分子调控机制的研究成果。 展开更多
关键词 家蚕 昆虫 滞育 生理基础 分子机制
环介导等温扩增技术原理及其在农业中的应用 预览 被引量:1
15
作者 蒋涛 曾光远 +1 位作者 唐顺明 《江苏科技大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2017年第1期107-113,共7页
环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型的能在恒定温度条件下实现核酸序列快速扩增的技术.由于该技术具有快速、便捷、高效和低成本等优势,目前已被广泛应用于分子诊断方面.文中介绍了LAMP技术... 环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型的能在恒定温度条件下实现核酸序列快速扩增的技术.由于该技术具有快速、便捷、高效和低成本等优势,目前已被广泛应用于分子诊断方面.文中介绍了LAMP技术的原理、研究进展、分子检测方法,以及该技术在农业分子诊断与基因检测方面的应用. 展开更多
关键词 环介导等温扩增 检测 分子诊断 农业 应用
在线阅读 下载PDF
特殊蚕品种培育现状及审定指标探讨 预览 被引量:2
16
作者 王欣 《中国蚕业》 2017年第3期63-67,共5页
随着经济和社会的不断发展,蚕丝业对蚕品种的需求趋向多元化,特殊蚕品种应运而生。但是,目前尚未见特殊蚕品种审定的研究报道。概述了目前我国特殊蚕品种培育应用现状,包括抗性蚕品种、雄蚕品种、三眠蚕品种、粗纤度蚕品种、彩色茧蚕品... 随着经济和社会的不断发展,蚕丝业对蚕品种的需求趋向多元化,特殊蚕品种应运而生。但是,目前尚未见特殊蚕品种审定的研究报道。概述了目前我国特殊蚕品种培育应用现状,包括抗性蚕品种、雄蚕品种、三眠蚕品种、粗纤度蚕品种、彩色茧蚕品种等;提出了特殊蚕品种的鉴定方法,各类特殊蚕品种的审定指标,以期为开展特殊蚕品种的鉴定审定提供借鉴。 展开更多
关键词 家蚕 特殊品种 培育 推广 鉴定 审定 标准
在线阅读 下载PDF
Bmo-miR-375-3p对家蚕丝素蛋白轻链基因BmFib-L表达的调控作用
17
作者 范洋洋 钱平 +3 位作者 王欣 蒋涛 唐顺明 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1043-1049,共7页
【目的】探究家蚕Bombyx mori miRNAs对丝素蛋白轻链基因(fibroin light chain gene,Bm FibL)和P25蛋白基因Bm P25表达的调控作用。【方法】分别以Bm Fib-L和Bm P25 mRNA 3'UTR为靶序列,应用在线预测软件RNAhybrid从前期家蚕4和5龄... 【目的】探究家蚕Bombyx mori miRNAs对丝素蛋白轻链基因(fibroin light chain gene,Bm FibL)和P25蛋白基因Bm P25表达的调控作用。【方法】分别以Bm Fib-L和Bm P25 mRNA 3'UTR为靶序列,应用在线预测软件RNAhybrid从前期家蚕4和5龄幼虫后部丝腺(posterior silk gland)sRNA高通量测序获得的29个差异表达bmo-miRNAs中,筛选对Bm Fib-L和Bm P25具有调控作用的候选bmo-miRNAs;采用半定量RT-PCR方法在mRNA水平分析候选bmo-miRNAs及其靶基因Bm Fib-L和Bm P25在4和5龄幼虫期以及5龄第3天幼虫不同组织的表达水平;利用双荧光报告基因检测系统在家蚕细胞Bm N中验证候选bmo-miRNAs对Bm Fib-L和Bm P25表达的调控作用。【结果】筛选到一个在Bm Fib-L和Bm P25 mRNA 3'UTR上都有靶位点的bmo-miR-375-3p(曾称bmo-miR-375*)。在后部丝腺中bmo-miR-375-3p和其预测靶基因Bm Fib-L和Bm P25都有较高的表达水平,提示bmo-miR-375-3p具备调控Bm Fib-L和Bm P25表达的时空条件。miR-375-3p重组表达载体与融合了Bm Fib-L 3'UTR的萤火虫荧光素酶(luciferase)报告基因(luc)表达载体共转染Bm N细胞,报告基因luc的表达水平显著下降;而在miR-375-3p重组表达载体与融合了Bm P25 3'UTR的luc表达载体共转染Bm N细胞中报告基因luc的表达水平下降不显著。【结论】miR-375-3p显著下调Bm Fib-L基因的表达,而对Bm P25基因的表达无明显调控作用。 展开更多
关键词 家蚕 MIRNA bmo-miR-375-3p 丝素轻链基因 P25基因 基因表达调控
对丝腺细胞因子SGF-1具有调控作用的家蚕miRNAs功能研究 预览 被引量:1
18
作者 王欣 陈晨 +4 位作者 范洋洋 谢雨辰 钱平 唐顺明 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第3期53-58,共6页
为了研究家蚕miRNAs对丝腺细胞因子SGF-1表达的调控作用,以SGF-1为靶基因,利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22预测对SGF-1具有潜在调控作用的候选家蚕miRNAs,经茎环PCR鉴定后分别构建重组表达载体,在细胞水平研究家蚕miRNAs的功能。结... 为了研究家蚕miRNAs对丝腺细胞因子SGF-1表达的调控作用,以SGF-1为靶基因,利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22预测对SGF-1具有潜在调控作用的候选家蚕miRNAs,经茎环PCR鉴定后分别构建重组表达载体,在细胞水平研究家蚕miRNAs的功能。结果表明,转染了bmo-miR-305*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P〈0.01);转染了bmo-miR-3327*重组质粒组的luc荧光素酶活性比未转染时极显著下调(P〈0.01);再各自转染了inhibitors后荧光蛋白表达量均上调(P〈0.05)。说明SGF-1 3'UTR上存在bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*的结合位点,且bmo-miR-305*和bmo-miR-3327*对SGF-1的转录后表达具有一定抑制作用。 展开更多
关键词 家蚕 MIRNAS 丝腺转录因子 SGF-1 功能鉴定
在线阅读 下载PDF
家蚕bmo-miR-34对BmE74基因表达的调控 预览 被引量:1
19
作者 王欣 范洋洋 +4 位作者 陈晨 谢雨辰 蒋涛 汪生鹏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期51-57,共7页
为了研究家蚕bmo-miR-34(一类高度保守的miRNA)对E74基因(BmE74)的表达调控作用,首先利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22进行结合位点预测,然后从家蚕丝腺组织中克隆了bmo-miR-34前体序列,分别构建bmo-miR-34表达载体和靶基因BmE7... 为了研究家蚕bmo-miR-34(一类高度保守的miRNA)对E74基因(BmE74)的表达调控作用,首先利用生物信息学软件RNAhybrid和RNA22进行结合位点预测,然后从家蚕丝腺组织中克隆了bmo-miR-34前体序列,分别构建bmo-miR-34表达载体和靶基因BmE74 3'UTR重组表达载体,利用双报告基因荧光检测系统在细胞水平研究bmo-miR-34对BmE74基因的转录后调控作用。生物信息学预测结果表明,BmE74 3'UTR具有bmo-miR-34潜在结合位点;体外转染试验结果显示,与对照相比,转染bmo-miR-34重组质粒的细胞荧光素酶活性极显著下调(P〈0.01),但是当加入人工合成的bmo-miR-34抑制物后荧光素酶活性显著上调(P〈0.01)。说明bmo-miR-34对BmE74的转录后表达具有抑制作用。 展开更多
关键词 miR-34 家蚕 BmE74基因 表达调控
在线阅读 下载PDF
人肠道病毒71型类病毒颗粒在家蚕BmN细胞及幼虫体内的表达
20
作者 黄金山 梁飞 +4 位作者 柳林 南文斌 程晨 郝碧芳 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期488-493,共6页
人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)是近年来暴发危害较严重的手足口病的病原。利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕卵巢培养细胞(Bm N)中共表达EV71病毒衣壳蛋白VP1与VP2,分析二者组装成病毒样颗粒(VLPs)的效率,比较用不同... 人肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)是近年来暴发危害较严重的手足口病的病原。利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕卵巢培养细胞(Bm N)中共表达EV71病毒衣壳蛋白VP1与VP2,分析二者组装成病毒样颗粒(VLPs)的效率,比较用不同启动子构建重组病毒的表达效果,并利用家蚕幼虫进行2种蛋白质的共表达及VLPs纯化条件的研究。结果表明,重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2与v Bm Bac-vp1-IRES-vp2均可介导EV71的VP1、VP2蛋白在Bm N细胞中表达,并能够组装成病毒样颗粒,但采用Pph及Pp10启动子的表达和组装效率明显高于Pph及IRES启动子组合;将重组病毒v Bm Bac-vp1-vp2以1×10^4TCID50/头的剂量注射5龄起蚕,Western blotting检测到VP1在幼虫血淋巴中特异性表达,并且随着感染时间的延长表达量增加;经蔗糖梯度密度离心能够有效地纯化蚕体血淋巴中的病毒样颗粒。研究结果为后续EV71疫苗研制奠定了一定的试验基础。 展开更多
关键词 人肠道病毒71型 病毒样颗粒 衣壳蛋白 家蚕杆状病毒表达系统 BM N细胞 5龄幼虫
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈