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中国水痘减毒活疫苗接种的成本效益初步分析 被引量:29
1
作者 殷大鹏 罗林云 +9 位作者 宋立志 张晓曙 李放军 过琴媛 曹玲生 刘燕敏 夏伟 高青林 梁晓峰 《中国疫苗和免疫》 CAS 2011年第1期1-4,共4页
目的了解中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)水痘减毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,VarV)接种的成本效益。方法采用Halloran(哈罗)建立的模型,通过查阅文献,对模型参数进行修正,推算中国在2007年后进行Var... 目的了解中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)水痘减毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,VarV)接种的成本效益。方法采用Halloran(哈罗)建立的模型,通过查阅文献,对模型参数进行修正,推算中国在2007年后进行VarV常规免疫后的水痘流行病学规律。并利用既往疾病负担数据,对中国VarV接种的成本效益进行初步分析。结果一剂VarV常规免疫的成本效益比是1:4.19,常规免疫和强化免疫相结合的免疫策略成本效益比是1:3.57。结论考虑到接种对费用和死亡病例的影响,中国进行VarV的常规免疫是有价值的。 展开更多
关键词 水痘减毒活疫苗 成本效益分析
单纯疱疹病毒的研究现状与展望 预览 被引量:11
2
作者 陈爱荣 《微生物学免疫学进展》 2003年第2期 62-65,共4页
本文对单纯疱疹病毒潜伏与复发机理、疫苗的研究现状以及它在基因治疗载体方面的应用等,就近年来国内外单纯疱疹病毒研究的现状与进展作简要综述.
关键词 单纯疱疹病毒 潜伏与复发 疫苗 载体
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神经生长因子应用研究进展 预览 被引量:12
3
作者 程夷 《微生物学免疫学进展》 1998年第3期 68-71,共4页
神经生长因子的研究已经进入应用阶段,国内外科学工作者完成了天然神经生长因子及其基因重组表达神经生长因子的中试研究和药理学研究,结果显示,NGF在外周神经损伤后有肯定的促进再生作用,毒理学研究方面尚未见到NGF有何严重... 神经生长因子的研究已经进入应用阶段,国内外科学工作者完成了天然神经生长因子及其基因重组表达神经生长因子的中试研究和药理学研究,结果显示,NGF在外周神经损伤后有肯定的促进再生作用,毒理学研究方面尚未见到NGF有何严重不良反应的报道。目前,国内外正进行了临床研究工作,初步结果表明神经生长因子可能成为治疗周围神经病的潜在药物之一。 展开更多
关键词 神经生长因子 药理学 毒理学
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人肠道病毒71型中和抗体检测方法的实验室评价 被引量:20
4
作者 毛群颖 何鹏 +8 位作者 于祥 李楠 郝春生 高强 董承红 梁争论 李凤翔 王军志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第8期885-888,共4页
目的对人肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)中和抗体检测方法进行实验室评价,为该方法的标准化提供依据。方法 5个实验室按照统一制定的EV71中和抗体检测操作细则(SOP),应用A、B和C基因型的10株EV71病毒株,分别测定10份人免疫球蛋白... 目的对人肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)中和抗体检测方法进行实验室评价,为该方法的标准化提供依据。方法 5个实验室按照统一制定的EV71中和抗体检测操作细则(SOP),应用A、B和C基因型的10株EV71病毒株,分别测定10份人免疫球蛋白、20份健康成人血浆和15份EV71动物高效价免疫血清样品中EV71中和效价,检测实验室内、实验室间重复性及不同EV71病毒株对中和抗体检测的影响。结果相同实验室应用各病毒株重复测定中和效价的最大值与最小值(Max-Min)倍数差均在4倍以内,3次重复试验结果间差异无统计学意义(P值均〉0.05);不同实验室应用相同病毒株检测结果的Max-Min倍数差在4倍以内;不同实验室应用不同病毒株检测结果为:A型株与其他基因型病毒株中和效价的Max-Min差在192倍以内,B3与C4亚型的病毒株中和效价的Max-Min倍数差在64倍以内,C4亚型不同病毒株之间中和效价的Max-Min倍数差在16倍以内。结论按统一SOP操作后,EV71中和抗体检测方法应用相同毒株在实验室内和实验室间具有较好的重复性,而不同病毒株对中和效价的测定结果有较大影响。 展开更多
关键词 肠道病毒A型 手足口病 中和抗体 基因型
冻干水痘减毒活疫苗现场流行病学保护效果研究(Ⅱ) 被引量:17
5
作者 宋立志 陈海平 +9 位作者 肖作奎 罗林云 李明 张洪祥 吕静静 王菲 封多佳 徐爱强 过琴媛 《中国疫苗和免疫》 CAS 2011年第1期7-9,共3页
目的评价长春祈健生物制品有限公司生产的冻干水痘減毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,Freeze-dried;VarV-Fd)的安全性及流行病学效果。方法选择未患过水痘、流行性腮腺炎等传染病,无接种禁忌证,过去未接种过水痘、麻疹、... 目的评价长春祈健生物制品有限公司生产的冻干水痘減毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,Freeze-dried;VarV-Fd)的安全性及流行病学效果。方法选择未患过水痘、流行性腮腺炎等传染病,无接种禁忌证,过去未接种过水痘、麻疹、流行性腮腺炎减毒活疫苗,且近一个月内未接种过其他预防性生物制品,年龄在3~6岁的托幼机构儿童和年龄在7~9岁在校小学生5192人作为观察对象。按照随机双盲对照临床试验原则,将入选的观察对象分为试验组和对照组,其中试验组2593人接种VarV-Fd,对照组2599人接种麻疹-流行性腮腺炎联合减毒活疫苗。结果经追踪随访,试验组水痘发病率为2.70‰,对照组为14.24‰,经Fisher's确切概率法检验,差异有统计学意义(P〈0.001),VarV-Fd的保护率为81.04%,95%可信区间为65.75%~96.33%。结论长春祈健生物制品有限公司生产的VarV-Fd具有良好流行病学保护效果。 展开更多
关键词 冻干水痘减毒活疫苗 随机双盲对照临床试验 疫苗效果
冻干水痘减毒活疫苗现场流行病学效果研究(Ⅰ) 被引量:15
6
作者 马福宝 罗林云 +7 位作者 张龙华 陈海平 封多佳 高君 郜晓智 付方 过琴媛 《中国疫苗和免疫》 CAS 2009年第3期193-195,共3页
目的评价冻干水痘减毒活疫苗(Varicella Freeze—dried Attenuated Live Vaccine,VarV)的现场流行病学效果和疫苗安全性。方法选择近3年未发生过水痘流行、无水痘患病史、未接种过VarV的小学生和托幼机构儿童作为观察对象。采取随机... 目的评价冻干水痘减毒活疫苗(Varicella Freeze—dried Attenuated Live Vaccine,VarV)的现场流行病学效果和疫苗安全性。方法选择近3年未发生过水痘流行、无水痘患病史、未接种过VarV的小学生和托幼机构儿童作为观察对象。采取随机、盲法、对照的方法,将入选的观察对象分成试验组2476人,接种VarV;对照组2534人,接种流行性腮腺炎减毒活疫苗。结果经追踪随访,水痘发病率试验组为0.8‰,对照组为8.7‰。根据二项分布概率法检验,差异有非常显著的统计学意义(B.P=0.000017)。疫苗效果(Vaccine Efficacy,VE)为90.8%,VE95%可信限下限为88.8%。结论VarV具有良好的现场流行病学保护效果和安全性。 展开更多
关键词 冻干水痘减毒活疫苗 随机对照 疫苗效果
冻干水痘减毒活疫苗的安全性和免疫原性研究 被引量:12
7
作者 肖作奎 过琴媛 +10 位作者 宋立志 付方 李明 杨倩 陈海平 许青 吕静静 张洪祥 红杰 徐爱强 《中国疫苗和免疫》 CAS 2011年第1期5-6,53共3页
目的观察长春祈健生物制品有限公司生产的冻干水痘减毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,Freeze-dried;VarV-Fd)的临床反应及免疫原性。方法选择年龄在3~9岁的托幼机构儿童和在校小学生作为观察对象。按照随机双盲对照临床... 目的观察长春祈健生物制品有限公司生产的冻干水痘减毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,Freeze-dried;VarV-Fd)的临床反应及免疫原性。方法选择年龄在3~9岁的托幼机构儿童和在校小学生作为观察对象。按照随机双盲对照临床试验原则,将入选的5192名观察对象分为试验组和对照组,其中试验组2593人,接种VarV-Fd;对照组2599人,接种麻疹-流行性腮腺炎联合减毒活疫苗。于接种后30min和6、24、48、72h及7、14、21、28d进行随访,并记录一般反应和异常反应。采用膜抗原免疫荧光抗体试验检测77名儿童血清水痘抗体,计算抗体阳性率、抗体几何平均滴度(Geometric MeanTiter,GMT)及增长倍数。结果接种VarV-Fd的2593人中,有2人注射部位局部出现轻微红晕,其他受种者无其他反应或不适;77名受种者在接种时和接种后1个月采集了静脉血,血清水痘抗体全部阳转或≥4倍升高,阳转率100%;免疫前抗体GMT为1:2.64,免疫后GMT为1:52.98,差异有统计学意义。结论长春祈健生物制品有限公司生产的VarV-Fd具有良好的安全性和免疫原性。 展开更多
关键词 冻干水痘减毒活疫苗 随机双盲对照临床试验 安全性 免疫原性
冻干神经生长因子活性稳定性试验研究 预览 被引量:6
8
作者 翟雷 《微生物学免疫学进展》 1998年第3期 54-56,共3页
用不同的物质作保护剂冻干纯化鼠神经生长因子,经检定以人血白蛋白作为赋形剂和保护剂冻干神经生长因子制品外观洁白细腻,结构强度良好,生物活性符合要求,残存水分低于3%。采用留样观察法检测其稳定性,将制品放置4℃ ̄8℃,在... 用不同的物质作保护剂冻干纯化鼠神经生长因子,经检定以人血白蛋白作为赋形剂和保护剂冻干神经生长因子制品外观洁白细腻,结构强度良好,生物活性符合要求,残存水分低于3%。采用留样观察法检测其稳定性,将制品放置4℃ ̄8℃,在0、0.5、1、2、3、6、9、12、18、24、25个月分别测定其各自的活性。结果表明神经生长因子冻干制品在4℃ ̄8℃保存,25个月仍然保持原有生物活性。 展开更多
关键词 神经生长因子 活性 冻干保护剂 稳定性
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中华仓鼠卵巢(CHO)工程细胞无血清培养的研究 预览 被引量:5
9
作者 李萍 蒋琳 +3 位作者 黄思扬 杨军 李薇 《微生物学免疫学进展》 2004年第4期 46-50,共5页
以DMEM:F12(1:1)为基础培养基,通过观察细胞生长状态和检测乙肝表面抗原的表达量作为评价指标,筛选适合于CHO工程细胞生长的生长因子,如:胰岛素、转铁蛋白、氢化可的松、硒酸钠,丁二胺等。并且建立了J5SFM培养基。该培养基与商... 以DMEM:F12(1:1)为基础培养基,通过观察细胞生长状态和检测乙肝表面抗原的表达量作为评价指标,筛选适合于CHO工程细胞生长的生长因子,如:胰岛素、转铁蛋白、氢化可的松、硒酸钠,丁二胺等。并且建立了J5SFM培养基。该培养基与商品化的无血清培养基比较,能够使细胞生长维持较长的时间,表达产物分泌量也相对较高。 展开更多
关键词 中华仓鼠卵巢细胞 无血清培养基 乙肝表面抗原 重组人神经生长因子
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中国疫苗应用现状与发展趋势 预览 被引量:4
10
作者 蒋韬 《微生物学免疫学进展》 2003年第4期 60-66,共7页
本文从不同角度和层面对中国疫苗应用现状与发展趋势进行了分析和比较.随着现代生物技术的发展,疫苗产品一直在更新换代,从我国正在研究和使用的疫苗来看,理论研究有一定的差距,应用研究与国际先进水平差距不大.我国正在使用的疫苗,正... 本文从不同角度和层面对中国疫苗应用现状与发展趋势进行了分析和比较.随着现代生物技术的发展,疫苗产品一直在更新换代,从我国正在研究和使用的疫苗来看,理论研究有一定的差距,应用研究与国际先进水平差距不大.我国正在使用的疫苗,正在更新换代的疫苗和正在研发的新疫苗,代表着我国现实状况疫苗发展的趋势. 展开更多
关键词 疫苗 发展 生物技术 中国
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鲁甘湘三省2007年水痘住院病例经济负担调查 被引量:6
11
作者 殷大鹏 罗林云 +6 位作者 宋立志 张晓曙 李放军 过琴媛 封多佳 梁晓峰 《中国疫苗和免疫》 CAS 2009年第5期438-442,共5页
目的了解中国住院水痘病例的疾病负担。方法在山东、湖南、甘肃省,按照经济水平在市、县、乡分层抽样,抽取≤14岁住院临床诊断水痘185例,进行入户调查。结果≤14岁住院临床诊断水痘平均费用是4025.86元(直接费用2952.60元,间接费用为10... 目的了解中国住院水痘病例的疾病负担。方法在山东、湖南、甘肃省,按照经济水平在市、县、乡分层抽样,抽取≤14岁住院临床诊断水痘185例,进行入户调查。结果≤14岁住院临床诊断水痘平均费用是4025.86元(直接费用2952.60元,间接费用为1073.26元)。全国水痘住院病例的疾病负担总计1.03亿元(按照住院病例占总病例的0.54%测算)。结论中国目前水痘的经济负担较重。 展开更多
关键词 水痘 住院病例 疾病负担
人β-NGF真核表达载体的构建及其表达产物的生物活性 预览 被引量:6
12
作者 陈勇 蒋琳 +4 位作者 杨军 李萍 梁凌宇 谢云飞 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期 457-460,共4页
目的在CHO细胞中共表达二氢叶酸还原酶(DHFR)基因及人神经生长因子β亚基(β-hNGF)基因,并对表达产物进行鉴定和生物活性分析.方法克隆DHFR和β-hNGF基因,测序,酶切,连接到真核表达载体pBudCE4.1中,构建人NGF基因重组表达质粒pBudCE4.1/... 目的在CHO细胞中共表达二氢叶酸还原酶(DHFR)基因及人神经生长因子β亚基(β-hNGF)基因,并对表达产物进行鉴定和生物活性分析.方法克隆DHFR和β-hNGF基因,测序,酶切,连接到真核表达载体pBudCE4.1中,构建人NGF基因重组表达质粒pBudCE4.1/DHFR/β-hNGF,经电转染法导入二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-DHFR-)中,经添加Zeocin抗生素和撤除H、T(次黄嘌呤、胸腺嘧啶脱氧核苷)双筛选,获得了DHFR+细胞克隆.经MTX加压筛选高表达β-hNGF的CHO细胞株.SDS-PAGE、ELISA和Western blot对表达产物进行鉴定,并利用鸡胚背根神经节法检测表达蛋白的生物活性.结果人神经生长因子在CHO细胞中得到较高表达,表达量达0.3μg/ml,且表达产物具有良好的生物活性.结论为大规模工业化生产重组人神经生长因子奠定了基础. 展开更多
关键词 真核表达载体 基因表达 生物活性 二氢叶酸还原酶 人神经生长因子β亚基
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冻干水痘减毒活疫苗现场流行病学保护效果研究(Ⅲ) 被引量:7
13
作者 张迟 罗林云 +8 位作者 叶建君 陈海平 徐顺平 余林生 蔡碧 李书华 赵明江 付方 《中国疫苗和免疫》 CAS 2012年第2期 101-104,共4页
目的评价冻干水痘溅毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,Freeze.dried;VarV.Fd)的安全性及流行病学效果。方法选择未患过水痘、流行性腮腺炎(腮腺炎),无接种禁忌证,且近一个月内未接种过其他预防性生物制品,年龄在3... 目的评价冻干水痘溅毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,Freeze.dried;VarV.Fd)的安全性及流行病学效果。方法选择未患过水痘、流行性腮腺炎(腮腺炎),无接种禁忌证,且近一个月内未接种过其他预防性生物制品,年龄在3~9岁的托幼机构儿童和在校小学生4800人作为观察对象。按照随机、盲法、对照原则,将入选的观察对象分为试验组和对照组,各2400人,分别接种VarV-Fd和腮腺炎减毒活疫苗。结果经追踪随访,试验组水痘发病率为0.83‰,对照组为11.67‰,据二项分布概率法检验,差异有统计学意义(P〈0.001)。VarV-Fd的保护率为92.89%,95%可信区间下限为82.68%。结论VarV-Fd具有良好的安全性和现场流行病学保护作用。 展开更多
关键词 冻干水痘减毒活疫苗 随机对照临床试验 安全性 流行病学保护效果
肠道病毒71型灭活疫苗的免疫原性和保护性效果评价研究 被引量:7
14
作者 李秀玲 张中洋 +15 位作者 王潇潇 郝春生 杨永娟 李懿 马淑花 刘宇 郭会杰 吴蕴怡 张晨 张冲 陈明 赵敏 宁海京 田龙 刘松友 《中国病毒病杂志》 2012年第6期415-418,共4页
目的评价研制的肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗的免疫原性和保护性效果。方法 EV71FY7VP5/AH/CHN/2008株感染Vero细胞后,收获病毒培养液,经灭活、浓缩和纯化后制备EV71灭活疫苗,并通过高效液相色谱法(HPLC)进行纯度分析、Western blot... 目的评价研制的肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗的免疫原性和保护性效果。方法 EV71FY7VP5/AH/CHN/2008株感染Vero细胞后,收获病毒培养液,经灭活、浓缩和纯化后制备EV71灭活疫苗,并通过高效液相色谱法(HPLC)进行纯度分析、Western blot进行特异性鉴定。采用不同剂量疫苗免疫食蟹猴,间隔1周采集血清,连续采集9周,采用微量细胞病变抑制法对血清中和抗体进行检测。疫苗免疫动物血清通过腹腔注射至乳鼠后,对乳鼠进行病毒攻击,计算乳鼠生存率及半数动物保护性抗体水平。结果 HPLC分析结果提示,制备的纯化EV71灭活疫苗纯度可达96.6%;Western blot检测结果显示,其可与EV71特异性多抗结合。不同剂量的EV71灭活疫苗免疫食蟹猴,可诱导产生较高水平的EV71特异性中和抗体,中和抗体水平于第2剂接种后1周达到高峰,随后中和抗体维持在一定的水平,中和抗体水平与疫苗剂量存在明显的量效关系;采集小鼠免疫血清,测定中和抗体效价为1∶512,将其进行4、16、64、256倍系列稀释,经腹腔注射乳鼠后,进行病毒攻击,连续观察14d,乳鼠生存率分别为100.0%、100.0%、50.0%、28.6%;对照组乳鼠于病毒攻击后5~7d全部死亡。采用寇氏法计算,平均半数动物保护中和抗体效价为1∶11。结论制备的EV71灭活疫苗可诱导产生高水平的中和抗体,并可保护乳鼠免受EV71感染。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒71型 灭活疫苗 免疫原性 保护效果
鼠疫菌V抗原基因在大肠杆菌中的克隆及表达 预览 被引量:4
15
作者 傅林锋 王秉翔 +3 位作者 李启明 雷清 蒋琳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期 430-433,共4页
从鼠疫杆菌野毒株总DNA中利用PCR方法扩增出V抗原编码基因,将此基因克隆到大肠杆菌的表达质粒pET-42b(+)中,经IPTG诱导后,在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中成功地表达出鼠疫菌V抗原蛋白.目的蛋白表达量占菌体总蛋白的32.8%.
关键词 鼠疫菌 V抗原基因 大肠杆菌 克隆 表达
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抗肠道病毒71型单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:4
16
作者 崔文禹 徐静 +5 位作者 李树香 刘敬 王欣怡 赵玉秀 陈蕾 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第12期1210-1212,共3页
目的制备肠道病毒71型(EV71)单克隆抗体,并进行初步鉴定。方法将RD细胞和Vero细胞培养的EV71原液通过氯化铯超速离心纯化,分别作为免疫抗原和检测抗原,制备单克隆抗体。通过Westernblot分析、间接免疫荧光试验和ELISA法鉴定单抗的特... 目的制备肠道病毒71型(EV71)单克隆抗体,并进行初步鉴定。方法将RD细胞和Vero细胞培养的EV71原液通过氯化铯超速离心纯化,分别作为免疫抗原和检测抗原,制备单克隆抗体。通过Westernblot分析、间接免疫荧光试验和ELISA法鉴定单抗的特异性。采用间接ELISA法测定单抗的酶标效价,微量细胞培养中和试验测定单抗的中和效价。结果获得1株可稳定分泌抗EV71单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌的单抗可与EV71特异性结合,酶标效价为1∶204800,中和效价为1∶28。结论已成功筛选出1株分泌抗EV71的单抗细胞株,为建立EV71疫苗抗原含量测定方法奠定了基础。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 单克隆抗体 制备 鉴定
大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的克隆、表达及初步纯化 预览 被引量:3
17
作者 黄思扬 马超 +3 位作者 雷清 蒋琳 王锐 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第6期 17-20,共4页
为研究大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的佐剂活性.从大肠杆菌中调出LTB的原始基因,将该基因克隆、构建pET21b-LTB表达载体、转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,并对表达产物进行初步纯化;经DNA测序、SDS-PAGE、ELISA检测,结果表明成功... 为研究大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的佐剂活性.从大肠杆菌中调出LTB的原始基因,将该基因克隆、构建pET21b-LTB表达载体、转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,并对表达产物进行初步纯化;经DNA测序、SDS-PAGE、ELISA检测,结果表明成功构建了能够稳定表达可溶性LTB的菌株,并获得初步纯化LTB的方法.为今后LTB的研究及应用奠定了基础. 展开更多
关键词 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 表达 纯化 粘膜佐剂
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2.5sNGF酶联免疫检测试剂盒的研制 预览 被引量:1
18
作者 饶春明 +2 位作者 谢溱 高凯 王军志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期 219-220,237,共3页
用成年雄性小鼠颌下腺提纯的2.5sNGF名次家兔得到兔抗NGF抗体,研制出2.5sNGF ELISA试剂盒。灵敏度达到1ng/ml,在0.85 ̄6.7ng/ml范围内线性良好(r〉0.99)。对人、小鼠、大鼠血浆无非... 用成年雄性小鼠颌下腺提纯的2.5sNGF名次家兔得到兔抗NGF抗体,研制出2.5sNGF ELISA试剂盒。灵敏度达到1ng/ml,在0.85 ̄6.7ng/ml范围内线性良好(r〉0.99)。对人、小鼠、大鼠血浆无非特异反应,在大鼠血浆中NGF样品回收率在91% ̄107%之间,变异系数小于10%(n=4)。对NF参比品进行6次标定,平均值为13.4±1.13ng/支,间CV为8.43%(n=6), 展开更多
关键词 ELISA 试剂盒 定量检测 药物动力学 NGF
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乙型肝炎病毒包膜M蛋白在巴斯德毕德毕赤酵母中的表达 预览
19
作者 谢云飞 《微生物学免疫学进展》 2000年第3期 8-10,共3页
转化了乙肝病毒preS2-2基因的重组巴斯德毕赤酵母菌株经甘油培养基充分增殖,然后转移到甲醇培养基中进行诱导表达,破碎细胞并提胞内蛋白,经ELISA和WestenBlot检测证明有4株GS115/HI^+MUT^+表... 转化了乙肝病毒preS2-2基因的重组巴斯德毕赤酵母菌株经甘油培养基充分增殖,然后转移到甲醇培养基中进行诱导表达,破碎细胞并提胞内蛋白,经ELISA和WestenBlot检测证明有4株GS115/HI^+MUT^+表达了HBV M蛋白。 展开更多
关键词 乙肝病毒 包膜M蛋白 巴斯德毕赤酵母 重组表达
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肠病毒71型空斑检测方法的建立 被引量:4
20
作者 郝春生 赵敏 +6 位作者 张晨 何薇薇 王潇潇 杨永娟 张中洋 李秀玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第10期1023-1025,共3页
目的建立肠病毒71型(EV71)空斑检测方法,为EV71生物学特性及疫苗的研究提供手段。方法将不同稀释度的5株EV71分别接种至单层RD细胞和Vero细胞,加入甲基纤维素覆盖,计数空斑,并计算病毒滴度。通过3次连续检测,验证空斑法的精密性,并对... 目的建立肠病毒71型(EV71)空斑检测方法,为EV71生物学特性及疫苗的研究提供手段。方法将不同稀释度的5株EV71分别接种至单层RD细胞和Vero细胞,加入甲基纤维素覆盖,计数空斑,并计算病毒滴度。通过3次连续检测,验证空斑法的精密性,并对空斑法与微量细胞病变法检测病毒滴度的结果进行比较。结果采用RD细胞和Vero细胞,通过空斑法对EV71病毒滴度进行检测,96h后均能规律地出现边缘整齐、清晰的空斑,RD细胞和Vero细胞检测的空斑直径分别为1-2mm和0.5-1mm。连续3次重复试验结果显示,试验间变异系数的平均值Vero细胞为2.52%,RD细胞为4.49%。空斑法与微量细胞病变法比较,其检测结果具有良好的线性相关性,相关系数为r=0.972,P=0.006。结论已建立了精密性好、出斑规律的EV71病毒空斑检测方法。 展开更多
关键词 肠病毒71型 空斑试验 病毒滴定
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