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基于Notch通路研究一贯煎逆转肝纤维化的作用机制 预览
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作者 孙福慧 车念聪 +4 位作者 唐佐青 付修文 杨铮 刘文兰 《环球中医药》 CAS 2019年第9期1308-1312,共5页
目的研究一贯煎对肝纤维化大鼠的治疗机制。方法大鼠分为正常对照组、模型组、阳性对照组和中药组。通过肝功能检测、HE染色、Masson染色评测各组大鼠的肝纤维化程度。通过免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织中Notch1蛋白在细胞质中表达... 目的研究一贯煎对肝纤维化大鼠的治疗机制。方法大鼠分为正常对照组、模型组、阳性对照组和中药组。通过肝功能检测、HE染色、Masson染色评测各组大鼠的肝纤维化程度。通过免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织中Notch1蛋白在细胞质中表达量的变化。结果与正常对照组相比,模型组大鼠肝功能指标谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminusei,AST)明显增高(P<0.05),Notch1表达增加(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组和中药组大鼠肝功能指标ALT、AST明显降低(P<0.05),Notch1表达降低(P<0.05),肝组织纤维化明显好转。结论一贯煎能明显改善肝纤维化,可通过抑制Notch1的表达达到治疗肝纤维化的效果。 展开更多
关键词 肝纤维化 一贯煎 HE染色 MASSON染色 免疫组织化学
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中医药专业医学分子生物学教学方法的探索与实践 预览
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作者 付慧芳 牛静 +2 位作者 周妍 孔璐 《继续医学教育》 2015年第9期39-40,共2页
医学分子生物学是一门基础医学理论课,根据中医药的学科特点和培养要求,优化教学内容,采取互动式教学激发学生自主学习能力,充分利用丰富教学资源,调动学生学习积极性,教学效果得到明显改善。
关键词 医学分子生物学 中医药 教学方法
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肝纤维化大鼠阴虚证表征的观察及一贯煎的干预作用 预览 被引量:5
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作者 刘文兰 +4 位作者 赵青舟 欧阳罗丹 高变娥 张欣 车念聪 《中国医药导报》 2015年第7期7-10,18共5页
目的检测肝纤维化大鼠的阴虚证表征,观察滋补肝肾中药一贯煎对阴虚证表征的影响。方法将48只雄性Sprague-Dawlay大鼠随机分为4组,正常对照组、模型组、阳性对照组、一贯煎组,每组12只。除正常对照组外,均建立CCl4致肝纤维化大鼠模型,在C... 目的检测肝纤维化大鼠的阴虚证表征,观察滋补肝肾中药一贯煎对阴虚证表征的影响。方法将48只雄性Sprague-Dawlay大鼠随机分为4组,正常对照组、模型组、阳性对照组、一贯煎组,每组12只。除正常对照组外,均建立CCl4致肝纤维化大鼠模型,在CCl4停止注射后3 d,一贯煎组每只动物给予相应浓度的一贯煎浓缩液2 m L/200 g灌胃,1次/d。阳性对照组给予秋水仙碱灌胃,0.25 mg/kg,1次/d。正常对照组和模型组按相同方法灌服等量生理盐水。4周后,检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等肝功能指标;通过HE染色评价肝脏炎症活动度(G)和纤维化程度(S);检测大鼠体重、舌面干湿度、舌面温度、舌微循环血流速度、饮水、大小便等阴虚证表征。结果 1一贯煎在改善肝功能、减轻炎症、抗肝纤维化方面作用较好:一贯煎组ALT[(41.66±3.72)U]较模型组[(61.00±0.00)U]降低,差异有统计学意义(P〈0.05);一贯煎组AST[(146.03±46.41)U]较模型组[(218.90±12.56)U]降低,差异有统计学意义(P〈0.05);一贯煎组炎症活动度[(1.00±0.00)]较模型组[(3.00±0.00)]降低,差异有统计学意义(P〈0.05);一贯煎组纤维化程度[(1.00±0.00)]较模型组[(2.00±0.00)]降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。2肝纤维化大鼠具有阴虚证的表征,一贯煎能够改善阴虚证的症状。体重:模型组的体重[(380.66±37.29)g]较正常对照组[(507.00±17.69)g]减少(P〈0.05);一贯煎组体重[(473.66±13.86)g]较模型组增高(P〈0.05)。舌面干湿度:模型组的舌面干湿度[(0.000 36±0.000 28)g]较正常对照组[(0.007 32±0.001 26)g]减少(P〈0.05);一贯煎组舌面干湿度[(0.012 83±0.005 85)g]较模型组增高(P〈0.05)。舌面温度:模型组的舌温度[(34.48±1.24)℃]较正常对照组[(30.63±0.80)℃]增高(P〈0.05 展开更多
关键词 肝纤维化 阴虚证 一贯煎
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基于云计算的医学教育模式的探讨 预览
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作者 常灿 孔璐 《继续医学教育》 2015年第2期55-57,共3页
现在医学的教育模式仍然是以教师为中心的传统教育模式,学生被动的学习知识,学生们的思维受到很大限制,教学效果不太乐观。但是云计算的出现将会改变这种情形。根据云计算原理和特点,探讨了云计算下的医学教育模式。云计算将以学生为学... 现在医学的教育模式仍然是以教师为中心的传统教育模式,学生被动的学习知识,学生们的思维受到很大限制,教学效果不太乐观。但是云计算的出现将会改变这种情形。根据云计算原理和特点,探讨了云计算下的医学教育模式。云计算将以学生为学习的主体,极大的调动学生学习的积极性,摆脱应试教育的枷锁。 展开更多
关键词 云计算 医学教育模式 原理和特点
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一贯煎促进骨髓间充质干细胞逆转肝纤维化的实验研究 预览 被引量:7
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作者 刘文兰 +2 位作者 车念聪 白辰 唐佐青 《环球中医药》 CAS 2014年第6期401-405,共5页
目的:该研究观察骨髓间充质干细胞对肝纤维化的逆转作用,了解一贯煎对该过程的作用,阐释一贯煎逆转肝纤维化的机制。方法60只雄性Sprague-Dawlay大鼠随机分为5组,即正常对照组、模型组、阳性对照组、骨髓间充质干细胞组、一贯煎加骨髓... 目的:该研究观察骨髓间充质干细胞对肝纤维化的逆转作用,了解一贯煎对该过程的作用,阐释一贯煎逆转肝纤维化的机制。方法60只雄性Sprague-Dawlay大鼠随机分为5组,即正常对照组、模型组、阳性对照组、骨髓间充质干细胞组、一贯煎加骨髓间充质干细胞组,每组12只。除正常对照组外,均建立肝纤维化恢复模型,分离、培养和标记骨髓间充质干细胞,在CCl4停止注射后3天,骨髓间充质干细胞组每只动物经尾静脉注射5×10^6 mmol/L浓度1 mol骨髓间充质干细胞;一贯煎加骨髓间充质干细胞组每只大鼠尾静脉注射等量的骨髓间充质干细胞外,给予一贯煎浓缩液2 ml/200 g灌胃,每天1次。阳性对照组给予秋水仙碱灌胃,0.25 mg/kg,每天1次。正常对照组和模型组按相同方法灌服等量生理盐水。阳性对照组、正常对照组和模型组经尾静脉注射等量生理盐水。4周后,检测各组大鼠血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶等肝功能指标;通过HE染色评价肝脏炎症活动度(G)和纤维化程度(S);荧光显微镜下示踪肝组织中骨髓间充质干细胞。结果(1)骨髓间充质干细胞组和一贯煎加骨髓间充质干细胞组较模型组和阳性组在改善肝功能、减轻炎症、逆转肝纤维化的作用较好,P〈0.05。一贯煎加骨髓间充质干细胞组较骨髓间充质干细胞组在改善肝功能、逆转纤维化的作用更明显,P〈0.05。(2)骨髓间充质干细胞组和一贯煎加骨髓间充质干细胞组骨髓间充质干细胞在肝脏分布面积较模型组增大,P〈0.05;一贯煎加骨髓间充质干细胞组较其他组差异显著,P〈0.05。结论骨髓间充质干细胞具有逆转肝纤维化的作用,一贯煎对该过程具有促进作用;一贯煎能够促进骨髓间充质干细胞募集到肝脏,从而发挥逆转肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 骨髓间充质干细胞 肝损伤 一贯煎 肝肾阴虚
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四氯化碳性肝损伤小型猪肝脏微循环与舌色关系的研究 被引量:4
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作者 刘文兰 车念聪 +5 位作者 唐佐青 高连印 杨铮 王敏 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2011年第11期 111-114,共4页
目的:研究四氯化碳性肝损伤小型猪肝脏微循环和舌色的关系,以阐释舌色在肝损伤疾病中的诊断意义。方法:6只中国实验用小型猪,雌雄各半,随机分为两组(每组3只):正常组、模型组,模型组动物按1mg/kg的剂量用CCl4原液一次性腹腔内注射... 目的:研究四氯化碳性肝损伤小型猪肝脏微循环和舌色的关系,以阐释舌色在肝损伤疾病中的诊断意义。方法:6只中国实验用小型猪,雌雄各半,随机分为两组(每组3只):正常组、模型组,模型组动物按1mg/kg的剂量用CCl4原液一次性腹腔内注射,复制CCl4急性肝损伤模型。正常组动物给予等量生理盐水。动物禁食,但可自由饮水,20h后使用2.5%戊巴比妥钠9mL;速眠新3.0进行动物麻醉,拍摄舌象,使用激光多普勒血流仪进行舌和肝脏微血管血流检测,前腔静脉采血,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、天门冬氨酸氨基转移酶与丙氨酸氨基转移酶比值(AST/ALT)、总胆红素(Tbil)、直接胆红素(Dbil);HE染色观察肝组织病理变化。结果:四氯化碳性肝损伤小型猪符合急性肝损伤的病理特点。该模型舌色表现黯红色,其形成机制与微循环障碍有关。四氯化碳性肝损伤模型存在肝脏和舌的微循环障碍,通过舌色可间接了解肝脏微循环情况。结论:四氯化碳性肝损伤小型猪的舌色呈黯红色,其形成机制与微循环障碍有关,可间接反应该病肝脏微循环状况。 展开更多
关键词 肝损伤 舌色 颜色空间 微循环障碍 激光多普勒血流仪技术
HBV转基因小鼠的舌色改变及血流变化 预览 被引量:1
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作者 刘文兰 车念聪 +2 位作者 唐佐青 杨铮 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第35期 3574-3578,共5页
目的:研究HBV转基因小鼠的舌色表现和微血管血流变化.方法:10只C57BL/6J-HBV转基因小鼠和10只正常小鼠(C57BL/6J非转基因小鼠),均雌雄各半,采用小鼠舌象观察装置对小鼠舌色进行观察;使用激光多普勒血流仪进行舌和肝脏微血管血流检测... 目的:研究HBV转基因小鼠的舌色表现和微血管血流变化.方法:10只C57BL/6J-HBV转基因小鼠和10只正常小鼠(C57BL/6J非转基因小鼠),均雌雄各半,采用小鼠舌象观察装置对小鼠舌色进行观察;使用激光多普勒血流仪进行舌和肝脏微血管血流检测;断头采血,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;HE染色观察肝和舌组织病理变化.结果:HBV转基因小鼠中,6只小鼠舌色呈紫色,4只舌色呈暗红色,而正常小鼠的舌色均为淡红色.HBV转基因小鼠舌色色调(H值)变深,有显著性差异(P〈0.01);舌色亮度(V值)变弱,有极显著性差异(P〈0.001).和正常鼠相比,紫舌HBV转基因小鼠微血管血流灌注量和血流速度显著降低(0.206±0.13vs0.794±0.13;0.479±0.07vs0.331±0.04,P〈0.01,P〈0.001),该模型肝脏微血管血流灌注量和血流速度显著降低,HBV转基因小鼠肝脏和舌存在明显的炎性改变.结论:HBV转基因小鼠舌色以紫色多见,其形成机制与微循环障碍有关.该模型存在肝脏和舌的炎症病理,提示炎性微环境是形成其肝脏和舌微循环障碍的重要原因. 展开更多
关键词 HBV转基因 舌色 微循环 激光多普勒血流仪技术
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一贯煎治疗肝炎药理机制的研究 被引量:11
8
作者 刘文兰 +6 位作者 高连印 穆阳 车念聪 杨铮 王欢 任晓萌 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2010年第5期192-194,共3页
目的:观察中药一贯煎对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)致肝炎小鼠模型的干预作用。方法:24只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组每日每只小鼠ig2mL生理盐水;中药组给予一贯煎汤药ig,12.6g·kg-1,1次/d,连续1周;阳性对照组给... 目的:观察中药一贯煎对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)致肝炎小鼠模型的干预作用。方法:24只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组:正常组、模型组每日每只小鼠ig2mL生理盐水;中药组给予一贯煎汤药ig,12.6g·kg-1,1次/d,连续1周;阳性对照组给予联苯双酯滴丸ig,7.5×10-3g·kg-1,1次/d,连续1周。实验第8天晚10时给予模型组、中药组、阳性对照组每只小鼠0.1μgTNF/12mgGaINip,进行肝损伤造模,观察小鼠状态,于次日上午9时处死所有小鼠,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST);HE染色观察肝组织病理变化;WesternBlot方法对肝组织cIAP1蛋白检测。结果:一贯煎组小鼠血清ALT、AST较模型组显著降低,小鼠肝组织病理改变较模型组显著减轻,cIAP1蛋白表达较模型组显著增高,说明一贯煎能够促进肝组织cIAP1蛋白的表达。结论:一贯煎可能通过调节TNF-α信号通路cIAP1蛋白的表达,从而有效减轻炎症反应,达到保肝、降酶的目的。 展开更多
关键词 一贯煎 肝功能 凋亡抑制 蛋白1
一贯煎对肝炎小鼠模型TNF-α信号通路的影响 被引量:2
9
作者 刘文兰 +6 位作者 高连印 穆阳 车念聪 杨铮 王欢 任晓萌 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期597-599,共3页
目的:探讨中药一贯煎对肿瘤坏死因子α(TNF-α)致肝炎小鼠模型TNF-α信号通路的干预作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分成4组,正常组、模型组、中药组、阳性对照组。正常组及模型组小鼠灌服生理盐水。中药组给予一贯煎汤药灌胃。阳性... 目的:探讨中药一贯煎对肿瘤坏死因子α(TNF-α)致肝炎小鼠模型TNF-α信号通路的干预作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分成4组,正常组、模型组、中药组、阳性对照组。正常组及模型组小鼠灌服生理盐水。中药组给予一贯煎汤药灌胃。阳性对照组给予联苯双酯滴丸灌胃。均每天1次,持续1周。模型组、中药组、阳性对照组小鼠腹腔注射0.1μgTNF/12mgD-氨基半乳糖(GaIN)制造肝炎小鼠模型,进行肝功能、肝组织病理、WesternBlot检测TNF-α信号通路相关蛋白cIAP1。结果:一贯煎能减轻肝细胞炎症反应、抑制肝细胞的凋亡、坏死,使小鼠体内ALT和AST水平显著下降(P〈0.05);能促进肝细胞cIAP1蛋白的表达(P〈0.05)。结论:一贯煎治疗肝炎的药理机制之一在于调节TNF-α信号通路相关蛋白的表达,从而有效减轻炎症反应,达到保肝、降酶的目的。 展开更多
关键词 肝炎 一贯煎 TNF-Α 信号传导途径 信号通路 模型组 小鼠模型 正常组 肝细胞 阳性对照
医学留学生生物化学全英语教学的探索 被引量:6
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作者 程杉 余和芬 +4 位作者 韩玉英 王雅梅 文朝阳 郑少鹏 《中华医学教育杂志》 2010年第5期713-715,共3页
近年来,留学生教育已经逐渐成为我国高等教育的组成部分,保证教学质量是留学生高等教育的重要任务.本文以首都医科大学招收的首届外国留学生为研究对象,从师资、教学计划与内容、教学过程及考核等方面,对留学生的医学生物化学的教学工... 近年来,留学生教育已经逐渐成为我国高等教育的组成部分,保证教学质量是留学生高等教育的重要任务.本文以首都医科大学招收的首届外国留学生为研究对象,从师资、教学计划与内容、教学过程及考核等方面,对留学生的医学生物化学的教学工作进行了分析,针对发现的问题提出了改进的建议,期望有助于促进留学生教学水平的提高. 展开更多
关键词 留学生 生物化学 医学生
pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体的构建及在大鼠心肌细胞的表达 预览 被引量:1
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作者 马立权 曾翔俊 +4 位作者 芦玲巧 张立克 郑少鹏 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期,共4页
目的克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA3.... 目的克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体。转染大鼠心肌细胞,用RT-PCR的方法鉴定其在大鼠心肌细胞的表达。结果得到CYP2J3基因全长序列和真核表达载体pcDNA3.1(+)-CYP2J3。RT-PCR结果显示,转染pcDNA3.1(+)-CYP2J3后的大鼠心肌细胞CYP2J3基因有稳定表达。结论克隆大鼠CYP2J3基因、pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体构建及在大鼠心肌细胞的表达均获成功,为进一步研究CYP2J3基因在细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 CYP2J3 载体构建 心肌细胞 转染
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脂肪因子visfatin的调节与功能多样性 预览 被引量:7
12
作者 闫韶飞 丁卫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第12期 1351-1357,共7页
内脏脂肪素(visfatin)是一种由内脏脂肪细胞分泌的分子质量为52ku的蛋白质细胞因子.基因序列分析显示其cDNA编码序列与前B细胞集落增强因子(PBEF)同源且在进化中高度保守.Visfatin被发现具有多种迥然不同的生物活性:通过与胰岛... 内脏脂肪素(visfatin)是一种由内脏脂肪细胞分泌的分子质量为52ku的蛋白质细胞因子.基因序列分析显示其cDNA编码序列与前B细胞集落增强因子(PBEF)同源且在进化中高度保守.Visfatin被发现具有多种迥然不同的生物活性:通过与胰岛素受体相互作用,在不同的情况下visfatin可表现出类胰岛素或抗胰岛素样作用;在细胞质中,visfatin具有烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)活性,能够催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的生物合成;作为分泌型的细胞因子,visfatin还可以诱导多种炎性因子的表达,如TNFα、IL-1β和IL-6.Visfatin与一些代谢疾病和急、慢性炎性疾病的关系日益受到重视,如糖尿病、肥胖、急性肺损伤、类风湿性关节炎、败血症、心肌梗塞和炎性肠病等.最近,对visfatin的启动子区及其单核苷酸多态性(SNP)的研究,进一步深化了人们对其在疾病发病机制中作用的认识.重点讨论visfatin的结构、功能多态性以及它与多种疾病的关系. 展开更多
关键词 内脏脂肪素 启动子 单核苷酸多态性 沉默信息调节因子
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缺血后处置缓解离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤 预览 被引量:6
13
作者 马立权 +5 位作者 邱笑违 王晓燕 芦玲巧 郑少鹏 张立克 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第3期 259-262,共4页
目的 观察缺血后处置对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响,并初步探讨其作用机制。方法 复制离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型及缺血后处置模型。记录±dp/dtmax和LVEDP。用比色法检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水... 目的 观察缺血后处置对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响,并初步探讨其作用机制。方法 复制离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型及缺血后处置模型。记录±dp/dtmax和LVEDP。用比色法检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot方法检测心脏eNOS及ERK1/2的表达,RT-PCR方法测定心脏细胞色素P4502J3(CYP2J3)mRNA表达。结果 与缺血/再灌注组(IR)相比,缺血后处置组(IPo)±dp/dtmax均增高(P〈0.01),而LVEDP、LDH降低(P〈0.05);IR组MDA水平高于对照组(CON)及IPo组(P〈0.01),SOD活性低于IPo组(P〈0.01);IR组大鼠心肌eNOS及磷酸化ERK1/2的表达均高于CON组和IPo组;1Po组大鼠心脏CYP2J3 mRNA的表达明显高于CON组和IR组。结论 缺血后处置可能通过提高再灌注心肌SOD活性,增加氧自由基清除,而改善缺血/再灌注引起的心功能障碍及细胞损伤;CYP2J3/EET系统有可能参与其保护作用。 展开更多
关键词 缺血后处置 缺血/再灌注损伤 心脏 一氧化氮合酶 细胞色素P450表氧化酶
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心钠素及内皮素对心肌细胞肥大及心脏成纤维细胞增殖的影响 预览 被引量:10
14
作者 陈曦 +3 位作者 张宇清 蔡艳 刘国仗 《高血压杂志》 CSCD 北大核心 2006年第5期 375-378,共4页
目的 观察心钠素(ANP)、内皮素-1(ET-1)对心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖的调节作用。方法采用体外乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞培养,一定浓度的ET-1、ANP单独或联合作用细胞24h,以^3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(^3H-TdR)、^3H-亮... 目的 观察心钠素(ANP)、内皮素-1(ET-1)对心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖的调节作用。方法采用体外乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞培养,一定浓度的ET-1、ANP单独或联合作用细胞24h,以^3H-胸腺嘧啶脱氧核苷(^3H-TdR)、^3H-亮氨酸(^3H—Leu)掺人法测定细胞DNA、蛋白合成,Bradford法测细胞总蛋白含量,RT—PCR法测心肌细胞心钠索ANP mRNA的表达,评价ET-1、ANP对心肌细胞和成纤维细胞的作用。结果对于心肌细胞,ET-1显著促进。H—TdR、^3H—Leu掺人,总蛋白含量增加,呈剂量依赖性,ANP mRNA表达明显增加;对于心脏成纤维细胞,ET-1促进^3H—TdR、^3H—Leu掺人,总蛋白含量增加,以上作用可被ANP明显抑制。结论ET-1促进ANP分泌的同时也促进心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖,ANP反之抑制ET-1的促心肌肥厚作用。 展开更多
关键词 内皮素-1 心钠素 心肌细胞 心脏成纤维细胞 心肌肥厚
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内皮素及其受体对心脏细胞肥大与增殖的作用 预览 被引量:16
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作者 陈曦 +3 位作者 张宇清 蔡艳 刘国仗 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 520-523,共4页
目的 观察内皮素-1(ET-1)及其受体(ETR)对心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖的作用。方法 体外乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞培养,一定浓度的ET-1作用细胞24h,以^3H-胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)、^3H-亮氨酸(^3H-Leu)掺入法测定细... 目的 观察内皮素-1(ET-1)及其受体(ETR)对心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖的作用。方法 体外乳鼠心肌细胞和心脏成纤维细胞培养,一定浓度的ET-1作用细胞24h,以^3H-胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)、^3H-亮氨酸(^3H-Leu)掺入法测定细胞DNA、蛋白质合成,Bradford法测定细胞总蛋白含量,RT-PCR法测定心肌细胞心钠素(ANP)mRNA的表达;用针对ETA受体(ETAR)、ETB受体(ETBR)的特异性拮抗剂BQ123、BQ788分别阻断两个受体,观察两种受体的作用。结果 ET-1显著促进心肌细胞和心脏成纤维细胞^3H-TdR,^3H-Leu掺入,总蛋白含量增加,ET-1的作用呈剂量依赖性,并且使心肌细胞ANPmRNA表达明显增加,ET.1的作用可被ET-R拮抗剂BQ123明显抑制,ETBR拮抗剂BQ788对此无影响。结论 ET-1促进心肌细胞肥大和心脏成纤维细胞增殖,ET-1的作用通过ET-R介导,ETBR对此无明显作用。 展开更多
关键词 内皮素-1 心肌细胞 成纤维细胞 内皮素受体
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HSP70-GST融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 预览
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作者 王泽生 《中国分子心脏病学杂志》 2006年第2期 85-87,共3页
目的 构建小鼠热休克蛋白70(HSP70)重组原核表达质粒,获取小鼠HSP70-GST融合蛋白。方法 先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出HSP70基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到... 目的 构建小鼠热休克蛋白70(HSP70)重组原核表达质粒,获取小鼠HSP70-GST融合蛋白。方法 先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出HSP70基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中进行表达。结果 表达产物经Western Blot分析,在109KD处有一明显特异带,与预期结果相符。结论 构建重组融合表达载体pGEX-HSP70,用基因工程的方法在原核细胞中成功表达出小鼠HSP70-GST融合蛋白。 展开更多
关键词 RT-PCR 热休克蛋白70 基因表达
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嗜铬颗粒蛋白B-GST融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达 预览
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作者 毋晓涛 +1 位作者 潘颖 王泽生 《首都医科大学学报》 CAS 2006年第2期 206-209,共4页
目的 构建小鼠嗜铬颗粒蛋白B(chromogranin B,cgB)重组原核表达载体。方法 先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出CgB基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGE... 目的 构建小鼠嗜铬颗粒蛋白B(chromogranin B,cgB)重组原核表达载体。方法 先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出CgB基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中进行表达。结果 表达产物经Western Blot分析,在140处有一明显特异带,与预期结果相符。结论 构建重组融合表达载体pGEX-CgB,在原核细胞中成功表达出小鼠CgB-GST融合蛋白。 展开更多
关键词 RT-PCR 嗜铬颗粒蛋白B 基因表达
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嗜铬颗粒蛋白B与热休克同源蛋白70相互作用的研究 预览
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作者 王泽生 《首都医科大学学报》 CAS 2005年第6期 699-702,共4页
目的分离和鉴别在肾上腺髓质嗜铬颗粒细胞分泌囊泡中,与嗜铬颗粒蛋白B(CgB)相互作用的蛋白质.方法采用蛋白质捕获、免疫共沉淀和质谱等技术进行研究.结果在嗜铬颗粒细胞内,CgB与热休克同源蛋白70(Hsc70)相互作用.一个Hsc70结合序列定位... 目的分离和鉴别在肾上腺髓质嗜铬颗粒细胞分泌囊泡中,与嗜铬颗粒蛋白B(CgB)相互作用的蛋白质.方法采用蛋白质捕获、免疫共沉淀和质谱等技术进行研究.结果在嗜铬颗粒细胞内,CgB与热休克同源蛋白70(Hsc70)相互作用.一个Hsc70结合序列定位在CgB的羧基末端区(Ser586-Arg602,SR-17),而且SR-17内的Ser595磷酸化可增强其与Hsc70结合.磷酸化修饰的SR-17可从ATP-Sepharose上洗脱Hsc70.用免疫印迹和免疫组化方法可证实CgB和Hsc70均存在于嗜铬颗粒细胞的胞质和细胞核中.结论 Hsc70可能参与CgB的细胞核转位过程. 展开更多
关键词 嗜铬颗粒蛋白B 热休克同源蛋白70 磷酸化修饰 细胞核转位
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一种抑制蛋白激酶CK2活性的新多肽的分离和鉴别 预览
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作者 王泽生 杨晓梅 +2 位作者 杜毅峰 Etienne J.Nouwen 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第4期 450-453,共4页
从猪肾上腺髓质嗜铬细胞分泌颗粒裂解物中纯化出3种新多肽,经N-末端降解分析和质谱测定,它们分别位于猪嗜铬颗粒蛋白A(CgA) 308-324、308-328及308-329肽段,具有相同N-端区,而C-端长度不同.合成的CgA 308-324肽段,即GN-17在浓度低于6 μ... 从猪肾上腺髓质嗜铬细胞分泌颗粒裂解物中纯化出3种新多肽,经N-末端降解分析和质谱测定,它们分别位于猪嗜铬颗粒蛋白A(CgA) 308-324、308-328及308-329肽段,具有相同N-端区,而C-端长度不同.合成的CgA 308-324肽段,即GN-17在浓度低于6 μmol/L时即可竞争性抑制CK2活性,IC50为50 μmol/L. 展开更多
关键词 嗜铬颗粒蛋白A 活性肽 质谱 蛋白激酶CK2
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谷氨酸脱羧酶重组杆状病毒表达载体的构建 预览
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作者 郭善一 《天津医科大学学报》 2002年第2期 233-234,共2页
谷氨酸脱羧酶(GAD)是胰岛β细胞的一种主要的自身抗原,与1型糖尿病细胞免疫和体液免疫均有密切关系.由于抗GAD抗体是最重要的免疫学标志之一和可靠的早期诊断指标[1],所以GAD抗原的制备对1型糖尿病的早期诊断及其病因和机制的研究都具... 谷氨酸脱羧酶(GAD)是胰岛β细胞的一种主要的自身抗原,与1型糖尿病细胞免疫和体液免疫均有密切关系.由于抗GAD抗体是最重要的免疫学标志之一和可靠的早期诊断指标[1],所以GAD抗原的制备对1型糖尿病的早期诊断及其病因和机制的研究都具有重要意义.本实验将GAD65基因在真核细胞中的表达打下基础. 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 杆状病毒表达载体 基因克隆
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