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雷帕霉素预处理对Sprague Dawley大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响及相关机制 认领
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作者 张旭阳 宁波 +6 位作者 张玉 杨龙灿 余曦 李继维 黄平 彭学勤 张莹 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期378-382,共5页
目的探讨雷帕霉素预处理对Sprague Dawley(SD)大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的影响及可能机制。方法48只无特定病原体雄性SD大鼠体质量180~200 g,鼠龄4~8周,随机分为3组,各16只。雷帕霉素组术前每天腹腔注射雷帕霉素,连续3 d,模型组及... 目的探讨雷帕霉素预处理对Sprague Dawley(SD)大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的影响及可能机制。方法48只无特定病原体雄性SD大鼠体质量180~200 g,鼠龄4~8周,随机分为3组,各16只。雷帕霉素组术前每天腹腔注射雷帕霉素,连续3 d,模型组及假手术组注射生理盐水。雷帕霉素组和模型组制备HIRI模型。术后2、24 h每组随机取8只大鼠,留取血清检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素、乳酸脱氢酶;留取肝组织行HE染色,酶联免疫吸附试验检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽、己糖激酶2、磷酸果糖激酶1(PFK1)、三磷酸腺苷。聚合酶链反应和蛋白质电泳检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)、蛋白激酶B及其磷酸化水平。结果术后2 h,模型组血清ALT(150.9±18.7)U/L、总胆红素(5.15±0.69)μmol/L、乳酸脱氢酶(9547±365)U/L,均高于假手术组(42.4±10.7)U/L、(2.48±0.24)μmol/L、(4424±376)U/L和雷帕霉素组(87.7±11.2)U/L、(3.09±0.12)μmol/L、(8268±264)U/L,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HE染色和血清检测结果术后2、24 h模型组肝组织和功能损伤严重,雷帕霉素组损伤减轻。术后2 h和24 h模型组SOD、谷胱甘肽、己糖激酶2、PFK1、三磷酸腺苷低于假手术组和雷帕霉素组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后2 h和24 h模型组mTOR、S6K1及其磷酸化相对表达水平高于假手术组和雷帕霉素组,蛋白激酶B及磷酸化蛋白激酶B相对表达低于假手术组和雷帕霉素组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论雷帕霉素通过抑制mTOR信号通路,上调磷酸化蛋白激酶B,改善糖代谢,降低氧化应激,减轻大鼠HIRI。 展开更多
关键词 再灌注损伤 雷帕霉素 肝脏 糖代谢 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
肝细胞癌相关性骨骼肌减少症的研究近况 认领
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作者 沈素雅 黄建钊 +4 位作者 刘延 刘江伟 张旭阳 叶琨琦 宁波 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2020年第7期1639-1642,共4页
肝细胞癌(HCC)是常见的恶性肿瘤之一,HCC患者通常合并肝硬化,即使经过治愈性治疗,5年复发率仍然很高,预后较差。近年来,骨骼肌减少症作为各类恶性肿瘤的预后不良因素而备受关注。然而,国内对骨骼肌指数与HCC预后之间的相关性研究较少。... 肝细胞癌(HCC)是常见的恶性肿瘤之一,HCC患者通常合并肝硬化,即使经过治愈性治疗,5年复发率仍然很高,预后较差。近年来,骨骼肌减少症作为各类恶性肿瘤的预后不良因素而备受关注。然而,国内对骨骼肌指数与HCC预后之间的相关性研究较少。国外研究表明,骨骼肌减少症可能是HCC患者预后不良的危险因素。对HCC相关性骨骼肌减少症病因及可能的发生机制、干预措施如营养补充、适当的运动、药物治疗等进行详细综述,以期为国内开展相关研究提供借鉴。 展开更多
关键词 肝细胞 骨骼肌减少症 预后
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雷帕霉素在肝脏缺血再灌注损伤中对自噬相关蛋白ULK1、LC3表达的影响 认领
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作者 杨龙灿 张旭阳 +3 位作者 宁波 余曦 李继维 张莹 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期2261-2265,共5页
目的研究雷帕霉素在肝脏缺血再灌注损伤中对自噬相关蛋白ULK1、LC3表达的影响及意义。方法建立3组大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,实验组(n=10)、对照组(n=10)、假手术组(n=10)。分别于术后24、72h取材:检测血清ALT和AST水平、肝脏病理以及... 目的研究雷帕霉素在肝脏缺血再灌注损伤中对自噬相关蛋白ULK1、LC3表达的影响及意义。方法建立3组大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型,实验组(n=10)、对照组(n=10)、假手术组(n=10)。分别于术后24、72h取材:检测血清ALT和AST水平、肝脏病理以及ULK1、LC3mRNA水平、蛋白水平。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果肝脏缺血再灌注损伤24h后血清ALT、AST水平升高,肝脏病理结构损伤(F值分别为1531.83、1799.97,P值均<0.05),实验组血清ALT[(354.58±28.40)U/Lvs(556.15±19.32)U/L]、AST[(384.37±8.98)U/Lvs(575.96±30.21)U/L]水平较对照组降低(P值均<0.05),肝脏病理结构损伤减轻;术后72h后实验组血清ALT[(271.81±8.63)U/Lvs(466.33±30.00)U/L]、AST[(358.92±13.20)U/Lvs(497.05±40.14)U/L]水平低于对照组(P值均<0.05)。而术后72h实验组、对照组血清ALT、AST水平均低于术后24h(ALT:t=8.87、7.92;AST:t=5.04、5.34,P值均<0.05)。术后24h和72h实验组ULK1、LC3mRNA水平、蛋白水平较假手术组升高(P值均<0.05),24h实验组ULK1mRNA水平(13.23±6.58vs4.91±1.64)、LC3mRNA水平(7.82±1.65vs3.70±1.10)、ULK1蛋白水平(1.62±0.19vs1.17±0.33)、LC3蛋白水平(1.62±0.19vs0.84±0.10)较对照组增加(P值均<0.05);72h实验组ULK1mRNA水平(10.58±3.31vs4.83±2.66)、LC3mRNA水平(6.42±1.13vs2.71±0.81)、ULK1蛋白水平(1.29±0.24vs0.90±0.29)、LC3蛋白水平(1.40±0.73vs0.64±0.08)较对照组增加(P值均<0.05)。肝脏缺血再灌注损伤72h后实验组、对照组血清ALT、AST水平较术后24h降低,并且肝脏病理结构损伤减轻,ULK1、LC3mRNA水平、蛋白水平降低(P值均<0.05)。结论肝脏缺血再灌注损伤后ULK1、LC3表达增加,雷帕霉素可能在肝脏缺血再灌注损伤过程中通过上调细胞自噬保护肝脏功能。 展开更多
关键词 再灌注损伤 自噬相关同源蛋白1 微管相关蛋白1轻链3 西罗莫司 大鼠 Sprague-Dawley
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雷帕霉素对肝脏缺血再灌注损伤大鼠的影响及相关机制 认领
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作者 杨龙灿 张莹 +5 位作者 张玉 余曦 李继伟 张旭阳 宁波 黄平 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期215-219,共5页
目的分析不同剂量雷帕霉素对肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠的影响及可能机制。方法48只Sprague-Dawley大鼠随机分为四组,各12只,低剂量组(术前注射低剂量雷帕霉素+缺血),高剂量组(术前注射高剂量雷帕霉素+缺血),模型组(术前注射0.9%氯... 目的分析不同剂量雷帕霉素对肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)大鼠的影响及可能机制。方法48只Sprague-Dawley大鼠随机分为四组,各12只,低剂量组(术前注射低剂量雷帕霉素+缺血),高剂量组(术前注射高剂量雷帕霉素+缺血),模型组(术前注射0.9%氯化钠溶液+缺血),假手术组(术前注射0.9%氯化钠溶液,仅解剖出第一肝门)。术后24、72 h留取血清,检测ALT、AST、TNF-α、IL-6浓度,Western印迹以及PCR检测肝组织自噬相关蛋白表达,肝组织行HE染色。结果术后24 h,假手术组肝组织基本正常,模型组肝小叶结构消失,肝细胞大量水肿,空泡样变性、坏死,低剂量组和高剂量组损伤减轻。术后24 h,模型组、低剂量组、高剂量组ALT、AST、TNF-α、IL-6水平呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。术后24 h,假手术组、模型组、低剂量组和高剂量组ULK1(1.00±0比4.76±2.62比8.26±3.46比12.95±6.45)、微管相关蛋白1轻链3(LC3,1.00±0比2.88±0.59比4.66±1.22比7.10±0.85) mRNA相对表达量呈升高趋势,而哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR,1.00±0比0.31±0.09比0.18±0.04比0.02±0.01)、P70核糖体蛋白激酶(S6K1,1.00±0比0.57±0.34比0.27±0.14比0.03±0.01)mRNA相对表达量呈降低趋势,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。术后24 h,假手术组、模型组、低剂量组和高剂量组ULK1、LC3蛋白相对表达呈升高趋势,而磷酸化mTOR、磷酸化S6K1及磷酸化ULK1呈降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。术后72 h,各数据结果与术后24 h基本一致。结论雷帕霉素通过mTORC1-ULK1信号通路激活细胞自噬减轻HIRI,且高剂量保护作用优于低剂量。 展开更多
关键词 自噬 再灌注损伤 西罗莫司
细胞自噬与ULK1蛋白关系的研究进展 认领 被引量:3
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作者 杨龙灿 张莹 +4 位作者 余曦 孙家维 李继伟 张旭阳 宁波 《医学综述》 2018年第23期4635-4639,4646共6页
细胞自噬是生物体重要的代谢过程,在各个生理、病理过程中扮演重要角色。它由自噬相关蛋白控制,受多条信号通路调控。细胞自噬在神经退行性病变、肿瘤发生、缺血/再灌注损伤、糖尿病、循环系统疾病等方面有重要作用,其可以清除细胞内受... 细胞自噬是生物体重要的代谢过程,在各个生理、病理过程中扮演重要角色。它由自噬相关蛋白控制,受多条信号通路调控。细胞自噬在神经退行性病变、肿瘤发生、缺血/再灌注损伤、糖尿病、循环系统疾病等方面有重要作用,其可以清除细胞内受损的物质或细胞器,为细胞提供原料和良好的细胞环境。而在细胞自噬的形成过程中,unc-51样激酶1(ULK1)蛋白发挥重要作用,它是细胞自噬的起始开关。因此,通过对ULK1蛋白上下游信号的深入研究,以ULK1蛋白为治疗靶点,干预和调控细胞自噬,将为疾病的治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 细胞自噬 Unc-51样激酶1蛋白 缺血/再灌注
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农机管理的问题与应对措施浅谈 认领 被引量:1
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作者 宁波 《南方农业》 2016年第9期212-213,共2页
随着我国的全面改革的进一步加强,对农业领域的改革步伐也进一步加快,农业机械化程度的提升,使农机管理也面临着愈来愈多的挑战。农机管理对农民自身的利益比较密切,对提高农业生产也有着诸多积极的作用。就农机管理的重要性和管理问题... 随着我国的全面改革的进一步加强,对农业领域的改革步伐也进一步加快,农业机械化程度的提升,使农机管理也面临着愈来愈多的挑战。农机管理对农民自身的利益比较密切,对提高农业生产也有着诸多积极的作用。就农机管理的重要性和管理问题进行详细分析,然后结合实际探究农机管理的影响因素和应对策略。希望通过此次研究,能对农机管理水平提升起到促进作用。 展开更多
关键词 农机管理 问题 措施
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糖代谢在缺血再灌注损伤中的研究进展 认领
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作者 张旭阳 王容 +4 位作者 余曦 李继维 杨龙灿 宁波(综述) 张莹(审校) 《重庆医学》 CAS 2020年第10期1702-1705,1714共5页
缺血再灌注损伤一直是临床面临的重大难题之一。在诸多疾病及外科手术中缺血再灌注损伤都有可能出现,并导致靶器官功能紊乱、移植器官功能丧失,甚至死亡等严重后果。然而,缺血再灌注损伤的作用机制目前尚不清楚,现有观点认为缺血再灌注... 缺血再灌注损伤一直是临床面临的重大难题之一。在诸多疾病及外科手术中缺血再灌注损伤都有可能出现,并导致靶器官功能紊乱、移植器官功能丧失,甚至死亡等严重后果。然而,缺血再灌注损伤的作用机制目前尚不清楚,现有观点认为缺血再灌注损伤与钙超载、线粒体损伤、炎性反应、氧化应激反应等有关。而糖代谢又被证实与能量代谢有关,参与调控炎症和氧化应激等反应,因此,在缺血再灌注损伤过程中必然伴随着糖代谢状态的改变。本文通过对缺血再灌注损伤中糖代谢的变化、作用研究现状及进展进行总结,期望为治疗缺血再灌注损伤提供新的方法和策略。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 糖代谢 活性氧 氧化应激
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腺苷酸活化蛋白激酶与缺血再灌注损伤的研究进展 认领
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作者 宁波 张莹 +2 位作者 杨龙灿 张旭阳 余曦 《现代医学》 2020年第1期141-145,共5页
腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated kinase,AMPK)存在于真核生物各组织、细胞中,是一种突变率低且相对保守的丝氨酸-苏氨酸激酶,是生物体内一种重要的信号通路,是维持生物能量稳定、平衡的重要调节器,被称为"能量调控枢纽站"... 腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated kinase,AMPK)存在于真核生物各组织、细胞中,是一种突变率低且相对保守的丝氨酸-苏氨酸激酶,是生物体内一种重要的信号通路,是维持生物能量稳定、平衡的重要调节器,被称为"能量调控枢纽站"。目前研究显示:AMPK信号通路在能量代谢、糖代谢、脂肪代谢、蛋白质代谢中发挥着重要的作用,但其具体的病理生理过程及确切的机制尚未明确。近年来发现,AMPK与衰老、肥胖、心血管病、肿瘤等疾病有着密切的关系,尤其在心[1]、脑[2]、肾[3]、肝[4]等重要器官的缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)中备受研究。有研究表明[5]:当机体发生缺血再灌注损伤而引起组织、细胞能量供给不足及代谢紊乱等改变时,AMPK将作为一种重要的保护机制系统而被激活,保证机体内环境维持在一个动态平衡状态。因此,以AMPK信号通路为中心作为重要器官IRI的治疗靶点,将会是一个突破性的研究。 展开更多
关键词 腺苷酸活化蛋白激酶 缺血再灌注损伤 能量代谢
内质网应激与肝脏缺血再灌注损伤的研究进展 认领
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作者 宁波(综述) 张旭阳 +2 位作者 杨龙灿 余曦 张莹(审校) 《重庆医学》 CAS 2020年第12期2029-2033,共5页
内质网应激(ERS)是一种重要的信号反应通路,属于细胞自我保护机制。ERS时,首先启动生存途径——未折叠蛋白反应(UPR),而长时间的ERS将会启动细胞凋亡途径。肝脏组织中包含着丰富的内质网结构,肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)时,低氧、缺血、... 内质网应激(ERS)是一种重要的信号反应通路,属于细胞自我保护机制。ERS时,首先启动生存途径——未折叠蛋白反应(UPR),而长时间的ERS将会启动细胞凋亡途径。肝脏组织中包含着丰富的内质网结构,肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)时,低氧、缺血、氧化应激等因素会引起ERS。近年来研究发现,ERS与HIRI关系密切,并且适宜的ERS对HIRI有一定的保护作用,还与肝纤维化、病毒性肝炎等疾病有关,进一步研究ERS机制,将为临床工作中肝病的治疗提供新方向。 展开更多
关键词 内质网应激 肝脏缺血再灌注损伤 未折叠蛋白反应
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