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大鼠滑膜间充质干细胞的鉴定及定向分化 预览
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作者 +4 位作者 周渊 宋登新 何小文 曹云 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期375-380,共6页
目的体外分离培养及扩增SD大鼠滑膜间充质干细胞,鉴定其多向分化潜能。方法制作SD大鼠创伤性骨关节炎模型,无菌条件下获取炎性的滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离滑膜间充质干细胞,有限稀释单克隆培养法纯化。体外扩增培养至第3代后,进行... 目的体外分离培养及扩增SD大鼠滑膜间充质干细胞,鉴定其多向分化潜能。方法制作SD大鼠创伤性骨关节炎模型,无菌条件下获取炎性的滑膜组织,Ⅰ型胶原酶消化法分离滑膜间充质干细胞,有限稀释单克隆培养法纯化。体外扩增培养至第3代后,进行生长曲线测定、成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导,Real-timeq PCR和Western Blot检测成软骨分化后蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的表达含量。结果分离纯化培养大鼠滑膜来源的间充质干细胞,在体外传代后表现出均匀的成纤维细胞样的纺锤形形态。将滑膜间充质干细胞进行成脂诱导、成骨诱导和成软骨诱导并加以鉴定。在炎性因子的作用下,用Real-time qPCR和Western Blot检测成软骨诱导分化后细胞中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖mRNA呈阳性表达。结论在炎性环境中大鼠来源的滑膜间充质干细胞具有良好的成软骨能力. 展开更多
关键词 滑膜间充质干细胞 成软骨分化潜能 骨关节炎 炎症因子
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一株可裂解阴沟肠杆菌的T7样噬菌体的分离鉴定及基因组分析 预览
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作者 单文雅 +4 位作者 杨登辉 刘云霞 恒安 严亚贤 孙建和 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第1期74-80,86共8页
利用双层琼脂平板法,从上海地区某奶牛养殖场环境样品中分离、纯化一株针对阴沟肠杆菌的裂解性噬菌体,命名为vB_Ecop_S523(S523),可形成圆形、透明、边缘整齐的噬菌斑。透射电镜(TEM)观察显示,噬菌体头部直径约为58~59nm,尾部较短,属于P... 利用双层琼脂平板法,从上海地区某奶牛养殖场环境样品中分离、纯化一株针对阴沟肠杆菌的裂解性噬菌体,命名为vB_Ecop_S523(S523),可形成圆形、透明、边缘整齐的噬菌斑。透射电镜(TEM)观察显示,噬菌体头部直径约为58~59nm,尾部较短,属于Podoviridae科。该噬菌体最佳感染复数为0.1,潜伏期为5min,裂解量为90PFU/感染细胞。酶切鉴定S523的核酸类型为双链DNA。测序结果表明,其基因组大小为39,825bp,G+C含量为48.8%。同源进化分析显示该噬菌体属于T7样噬菌体新成员。上述结果为研究阴沟肠杆菌抑菌制剂提供了新的实验材料。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 T7样噬菌体 生物学特性 基因组分析
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IL-6过表达慢病毒稳转细胞系构建及其对HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达影响 预览
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作者 潘正兰 管世鹤 +6 位作者 陈礼文 杨凯 张浩 段元丽 侯舒文 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期594-599,604共7页
目的构建白介素-6(IL-6)过表达慢病毒稳转细胞系,探讨其对乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)表达的影响。方法以Huh7细胞gDNA为模板,通过PCR技术扩增获得IL-6片段并克隆到pMIGR1载体上,测序鉴定正确后,分别... 目的构建白介素-6(IL-6)过表达慢病毒稳转细胞系,探讨其对乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝病毒DNA(HBV-DNA)表达的影响。方法以Huh7细胞gDNA为模板,通过PCR技术扩增获得IL-6片段并克隆到pMIGR1载体上,测序鉴定正确后,分别用pMIGR1质粒和pMIGR1-IL-6质粒与慢病毒包装质粒pCL-10A1共转染293T细胞,获得重组慢病毒颗粒,分别感染Huh7细胞,嘌呤霉素筛选出成功表达目的质粒的阳性细胞,分别命名为Huh7/con和Huh7/IL-6,电化学发光法检测细胞培养上清液中IL-6表达水平;qRT-PCR技术检测细胞中IL-6 mRNA表达水平;化学发光微粒子免疫检测法检测HBsAg、HBeAg表达水平,PCR-荧光探针法检测HBV-DNA表达水平。结果通过测序验证成功构建pMIGR1-IL-6质粒;通过慢病毒介导成功筛选出Huh7/con和Huh7/IL-6细胞系;电化学发光法及qRT-PCR结果显示,与对照组Huh7/con细胞系比较,Huh7/IL-6细胞系培养上清液IL-6水平及细胞中IL-6 mRNA水平显著升高;pcDNA1.3质粒转染Huh7、HepG2、Huh7/IL-6细胞6、12、24、48 h后上清液中IL-6表达水平显著升高;20 ng/ml IL-6处理pcDNA1.3质粒转染后的Huh7和HepG2细胞6、12、24、48 h后上清液中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平显著下降;pcDNA1.3质粒转染Huh7/IL-6细胞6、12、24、48 h后上清液中HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平显著下降。结论成功构建IL-6慢病毒表达载体,并建立稳定过表达IL-6的Huh7细胞系;pcDNA1.3质粒转染可使IL-6表达上调;IL-6可使HBsAg、HBeAg、HBV-DNA表达水平下降。 展开更多
关键词 白介素-6 慢病毒表达载体 稳定转染 乙肝表面抗原 乙肝E抗原 乙肝病毒DNA
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干扰素λ3在慢性乙型肝炎患者血清中的表达及临床意义 预览
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作者 段元丽 管世鹤 +6 位作者 杨凯 陈礼文 张浩 潘正兰 侯舒文 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期315-318,共4页
目的了解慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平,探究其临床意义及其与核苷和核苷酸类药物治疗的关系。方法 选取2017年1月-2018年5月在安徽医科大学第二附属医院就诊的慢性乙型肝炎患者119例,收集同期HBsAg阴性的22例健康体检者作为健康对照... 目的了解慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平,探究其临床意义及其与核苷和核苷酸类药物治疗的关系。方法 选取2017年1月-2018年5月在安徽医科大学第二附属医院就诊的慢性乙型肝炎患者119例,收集同期HBsAg阴性的22例健康体检者作为健康对照。采用ELISA法检测血清中IFNλ3的表达水平,比较慢性乙型肝炎患者与健康人血清IFNλ3水平差异,分析慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平与HBeAg的关系,观察不同核苷和核苷酸类药物治疗慢性乙型肝炎患者的血清IFNλ3水平,以及核苷和核苷酸类药物对外周血单个核细胞培养上清中IFNλ3水平的影响。满足正态性和方差齐性的计量资料多组间比较采用方差分析;对非正态或方差不齐的计量资料,两组比较采用Wilcoxon秩和检验,多组比较采用Kruskal-Wallis H检验,进一步两两比较采用Nemenyi法检验。相关性分析用Spearman相关性分析法。结果 慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平明显低于健康对照组[14.7(5.9~28.5)pg/ml vs 76.1(39.4~112.0)pg/ml,Z=-10.114,P<0.001]。未抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平与log HBV DNA呈负相关(r=-0.621,P<0.001)。HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3水平高于HBeAg阳性患者,2组间差异有统计学意义[16.4(9.0~31.3)pg/ml vs 8.7(2.9~23.2)pg/ml,Z=-2.205,P=0.02]。服用阿德福韦酯抗病毒治疗的患者血清IFNλ3水平显著高于服用恩替卡韦、替诺福韦、替比夫定、拉米夫定治疗的患者,差异均有统计学意义(P值均<0.05);体外实验核苷和核苷酸类药物处理的外周血单个核细胞培养上清中未见IFNλ3水平明显升高。结论 慢性乙型肝炎患者血清IFNλ3显著低于健康人群,阿德福韦酯抗病毒治疗患者具有较高的血清IFNλ3水平。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 干扰素类
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猪链球菌保护性抗原表位串联亚单位疫苗设计及小鼠免疫保护效力分析 预览
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作者 孔里程 孙建和 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第3期1-8,共8页
为了筛选和鉴定猪链球菌3个保护性抗原GAPDH、MRP、DLDH的优势B细胞抗原表位,设计表位串联方案,研究重组串联表位蛋白(简称GMD蛋白)免疫小鼠后对猪链球菌攻击的免疫保护效力。采用生物信息学分析工具对优势B细胞抗原表位进行筛选,并将... 为了筛选和鉴定猪链球菌3个保护性抗原GAPDH、MRP、DLDH的优势B细胞抗原表位,设计表位串联方案,研究重组串联表位蛋白(简称GMD蛋白)免疫小鼠后对猪链球菌攻击的免疫保护效力。采用生物信息学分析工具对优势B细胞抗原表位进行筛选,并将表位串联并构建重组质粒pET28a-GMD,诱导表达且纯化后将GMD蛋白配合弗氏佐剂免疫BALB/c小鼠,并评价该蛋白对2型猪链球菌的免疫保护效力。发现经SDS-PAGE鉴定该重组蛋白大小为43.3kDa;小鼠免疫保护实验结果显示,免疫小鼠血清中针对猪链球菌HA9801菌株抗体效价最高可达1∶102400,GMD蛋白对小鼠的免疫保护率可达90%。上述结果表明面对猪链球菌HA9801菌株的攻击,GMD蛋白可以为机体提供良好的免疫保护,本研究结果为猪链球菌新型表位亚单位疫苗的研制提供了基础数据。 展开更多
关键词 猪链球菌 B细胞抗原表位 亚单位疫苗 免疫保护
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猪链球菌9型噬菌体裂解酶Ply5218最小功能域及关键氨基酸位点的鉴定 预览
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作者 刘洋 +2 位作者 孔里程 严亚贤 孙建和 《上海交通大学学报:农业科学版》 2019年第1期41-46,共6页
为了鉴定猪链球菌9型噬菌体裂解酶Ply5218的最小活性功能域及关键氨基酸位点,利用PCR技术对全长裂解酶Ply5218进行截短并对可能与活性相关的关键氨基酸位点进行定点突变,研究截短与突变后各个蛋白的活性并与全长蛋白活性对比。结果显示... 为了鉴定猪链球菌9型噬菌体裂解酶Ply5218的最小活性功能域及关键氨基酸位点,利用PCR技术对全长裂解酶Ply5218进行截短并对可能与活性相关的关键氨基酸位点进行定点突变,研究截短与突变后各个蛋白的活性并与全长蛋白活性对比。结果显示,截短片段Ply52181-147可在平板上形成裂菌圈,仍保持裂菌活性,而比该片段更短的截短片段则失去裂菌活性,推测Ply52181-147为Ply5218的最小活性相关功能域;第8、58、136和142位点的氨基酸突变后,裂菌活性部分降低,第34和144位点的氨基酸突变后,则彻底失去裂菌活性。研究结果为深入揭示Ply5218的裂菌机制和进一步改造裂解酶提供了基础数据。 展开更多
关键词 猪链球菌 裂解酶 最小活性功能域 关键氨基酸位点
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微创双切口解剖重建喙锁韧带手术治疗老年肩锁关节完全脱位
7
作者 孙以光 陶海荣 《中国骨与关节损伤杂志》 2018年第9期987-989,共3页
目的 探讨微创双切口双Endobutton钢板解剖重建喙锁韧带治疗老年肩锁关节完全脱位的临床疗效。方法 回顾性分析自2009-12—2016-12采用微创双切口双Endobutton钢板解剖重建喙锁韧带治疗21例老年RockwoodⅢ、Ⅴ型肩锁关节脱位。结果 21... 目的 探讨微创双切口双Endobutton钢板解剖重建喙锁韧带治疗老年肩锁关节完全脱位的临床疗效。方法 回顾性分析自2009-12—2016-12采用微创双切口双Endobutton钢板解剖重建喙锁韧带治疗21例老年RockwoodⅢ、Ⅴ型肩锁关节脱位。结果 21例均获得随访,随访时间平均50(12-79)个月。术后所有患者肩关节上举及负重运动时无明显疼痛,其中19例肩关节外展活动度良好,可上举过头顶且与健侧无明显差异。末次随访时UCLA评分平均26.4(17-30)分,疼痛VAS评分平均1.6(0-4)分,肩关节功能Constant评分平均92.5(64-100)分;术后1年按Karlsson标准评定疗效:优18例,良3例。结论 采用微创双切口双Endobutton钢板解剖重建喙锁韧带治疗老年RockwoodⅢ、Ⅴ型肩锁关节脱位可取得良好的疗效,手术操作简单、软组织损伤小、术后患者康复时间明显缩短,无需二次手术取出内固定。 展开更多
关键词 RockwoodⅢ、Ⅴ型肩锁关节脱位 微创 双切口 解剖重建 双Endobutton钢板 老年
卡特C27发动机配气机构异常磨损原因分析 预览
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作者 董晓晖 范旭志 《内燃机与配件》 2018年第22期35-36,共2页
本文针对我公司卡特C27发动机配气机构(凸轮轴、摇臂)出现的异常磨损现象,总结了其异常磨损的原因和可能性,并提出相应整改意见及如何降低磨损的措施。对如何做好发动机日常维护和管理提供一定的参考与借鉴。
关键词 发动机 磨损 原因 措施
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治疗耐药金黄色葡萄球菌感染的新策略——噬菌体裂解酶 预览
9
作者 单文雅 孙建和 《中国抗生素杂志》 CSCD 2018年第8期958-965,共8页
金黄色葡萄球菌是一种重要的人畜共患病原菌,可引起人和动物的多种感染性疾病。耐药菌的出现大大增加了临床治疗难度。裂解酶是噬菌体侵染细菌后期合成的细菌细胞壁肽聚糖水解酶,不仅具有高效的裂菌活性且不易诱导细菌产生对抗生素的耐... 金黄色葡萄球菌是一种重要的人畜共患病原菌,可引起人和动物的多种感染性疾病。耐药菌的出现大大增加了临床治疗难度。裂解酶是噬菌体侵染细菌后期合成的细菌细胞壁肽聚糖水解酶,不仅具有高效的裂菌活性且不易诱导细菌产生对抗生素的耐受。这些特性使其成为近年来研发新型抗菌制剂的热点。本文将重点阐述裂解酶的作用机制和抗菌活性的最新研究进展,旨在为防控耐药金黄色葡萄球菌感染提供新思路。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 噬菌体 裂解酶 生物被膜
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外墙岩棉板保温施工技术分析 预览
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作者 《科技创新与应用》 2018年第17期158-159,共2页
近年来,我国的经济正在飞速发展,随之而来的是能源消耗的越来越大,中国正在走可持续发展之路,然而与之相适应的能源节约问题正在面临着巨大的挑战。因此,建筑节能问题也越来越引起社会各界的重视。现如今,外墙岩棉板保温施工技术正在被... 近年来,我国的经济正在飞速发展,随之而来的是能源消耗的越来越大,中国正在走可持续发展之路,然而与之相适应的能源节约问题正在面临着巨大的挑战。因此,建筑节能问题也越来越引起社会各界的重视。现如今,外墙岩棉板保温施工技术正在被广泛的应用,在建筑节能方面,它是一项十分重要的技术。但是,这项技术在具体的施工环节中却存在很多的问题,需要进行具体的规范。文章从施工前的准备,施工要求以及施工技术要点等方面进行了探讨,以期为未来的行业发展提供参考。 展开更多
关键词 外墙岩棉板 保温施工 施工技术
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设备委外维修的评价与改革 预览
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作者 《建设机械技术与管理》 2018年第11期74-77,共4页
胜利露天矿作为一座现代化露天煤矿,机械设备在生产经营中起着举足轻重的作用,直接影响矿山的安全生产和经济效益。近几年来,我公司设备维修基本上采用定期计划大修理和临时故障维修的相结合的方式,设备的整机、发动机、变速箱大修理工... 胜利露天矿作为一座现代化露天煤矿,机械设备在生产经营中起着举足轻重的作用,直接影响矿山的安全生产和经济效益。近几年来,我公司设备维修基本上采用定期计划大修理和临时故障维修的相结合的方式,设备的整机、发动机、变速箱大修理工作一般以招标方式委拖外协单位完成,而故障维修和小修由公司内部检修单位自行完成。通过这种方式,有效的降低了维修费用和设备故障率,缩短了维修停机时间,保障了露天生产的顺利进行。本文就设备委外维修的意义和存在的问题具体分析。 展开更多
关键词 设备 大修理 委外维修 措施
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玻璃幕墙施工质量控制及安装技术 预览 被引量:1
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作者 《建材与装饰》 2018年第22期3-4,共2页
随着我国城市的发展,越来越多的人使用房屋装饰玻璃幕墙。但在应用时,必须采取科学合理的施工技术才可以想要的建设效果。本文主要研究玻璃幕墙的安装技术及质量控制措施。
关键词 玻璃幕 质量控制 安装技术
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一株强裂解性大肠杆菌T1样噬菌体新成员的分离与鉴定 被引量:1
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作者 傅强 单文雅 +4 位作者 李世雨 恒安 孙建和 严亚贤 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2017年第12期2782-2794,共13页
【目的】自然界中噬菌体种类繁多,其裂菌功能在针对细菌耐药方面具有潜在应用价值。不同噬菌体也呈现出显著的基因多样性及宿主特异性。从上海某猪场仔猪肠内容物样品中分离、纯化大肠杆菌的裂解性噬菌体,分析其生物学特性和病毒学特征... 【目的】自然界中噬菌体种类繁多,其裂菌功能在针对细菌耐药方面具有潜在应用价值。不同噬菌体也呈现出显著的基因多样性及宿主特异性。从上海某猪场仔猪肠内容物样品中分离、纯化大肠杆菌的裂解性噬菌体,分析其生物学特性和病毒学特征,为探索应用噬菌体治疗细菌性感染提供研究材料。【方法】采用双层琼脂平板法分离、纯化噬菌体,观察噬菌斑特征,通过电镜观察噬菌体形态特征,测定其裂菌谱、最佳感染复数、一步生长曲线和生物学特性,进行噬菌体全基因组测序和遗传进化分析。【结果】分离、纯化获得一株能高效裂解大肠杆菌K-12菌株的噬菌体,命名为v B_Eco S_SH2(SH2),噬菌斑呈圆形、大而透明、边缘整齐。电镜观察SH2的头部呈二十面体立体对称,尾部较长。噬菌体的潜伏期为10 min,暴发期为60 min,裂解量高达121 PFU/感染细胞,其最佳感染复数为0.1。基因组测序和比对结果表明,SH2的核酸类型为ds DNA,基因组全长为49 088 bp,G+C%含量为45%,Gen Bank登录号为KY985004,结合电镜观察及BLASTp分析,确定其属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科成员。同源性及进化分析表明,该噬菌体为大肠杆菌T1样噬菌体的新成员。【结论】分离鉴定了一株裂解效率极高的大肠杆菌T1样噬菌体,并确认其为T1样噬菌体新成员,为研究大肠杆菌噬菌体及其抗菌应用提供了新的实验材料。 展开更多
关键词 大肠杆菌 T1样噬菌体 生物学特性 基因组分析
姜黄素抑制大鼠创伤性骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB P65核转位的实验研究 预览 被引量:1
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作者 马捷 +5 位作者 顾剑华 富勇 尚修帅 陶海荣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第15期2163-2170,共8页
背景:骨关节炎软骨细胞的退化是由于一系列的机械因素、炎性递质、生化因素,尤其是基质金属蛋白酶和活性氧等共同作用导致的。姜黄素在体外已被证明是一种有效地活性氧清除剂和活性氮提供剂,但保护关节软骨抑制骨关节炎作用和机制尚不... 背景:骨关节炎软骨细胞的退化是由于一系列的机械因素、炎性递质、生化因素,尤其是基质金属蛋白酶和活性氧等共同作用导致的。姜黄素在体外已被证明是一种有效地活性氧清除剂和活性氮提供剂,但保护关节软骨抑制骨关节炎作用和机制尚不明确。目的:分析姜黄素防止骨关节炎中软骨损伤的作用机制。方法:SD大鼠30只随机分为假手术组15只和模型组15只。模型组建立大鼠创伤性骨关节炎模型(阳性对照组),分离软骨细胞进行体外培养,使用姜黄素(姜黄素组)和特异性的核因子κB抑制剂(PDTC组)共培养软骨细胞24 h,Western Blotting和免疫荧光检测核因子κB P65核内外表达情况。RT-q PCR检测细胞Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13的表达。结果与结论:Western Blotting检测显示阳性对照组P65主要在细胞核中表达,细胞浆中表达较少;姜黄素组P65主要在细胞浆中表达,细胞核中表达较少。免疫荧光观察阳性对照组核因子κB均有不同程度的核转位,核转位细胞的核因子κB P65荧光标记主要浓集于核区;阴性对照组、姜黄素组和PDTC组核转位细胞的核因子κB P65荧光标记主要浓集于胞质区。实时荧光定量RT-q PCR检测显示姜黄素组基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13的表达显著低于阳性对照组,而Ⅱ型胶原的表达显著高于阳性对照组。结果说明,姜黄素能够通过抑制骨关节炎模型中软骨细胞核因子κB信号通路活化,抑制核因子κB P65核转位,抑制软骨细胞释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶13的表达,增加Ⅱ型胶原的含量,保护软骨细胞,延缓软骨退变。 展开更多
关键词 姜黄素 骨关节炎 NF-κB 基质金属蛋白酶类 Ⅱ型胶原 组织工程 组织构建 软骨组织工程 基质金属蛋白酶
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腕关节滑膜骨软骨瘤伴脊髓空洞症一例
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作者 陶海荣 《中华手外科杂志》 CSCD 北大核心 2016年第6期437-438,共2页
患者男,41岁。右腕部肿痛无力10年,进展加重1年。10年前无明显诱因出现右腕部肿痛无力,曾于多家医院就诊,予消肿等对症治疗(具体不详),右腕部肿痛症状可缓解,近一年症状突然加重。临床检查:右腕皮肤肿胀明显,右腕桡骨茎突下... 患者男,41岁。右腕部肿痛无力10年,进展加重1年。10年前无明显诱因出现右腕部肿痛无力,曾于多家医院就诊,予消肿等对症治疗(具体不详),右腕部肿痛症状可缓解,近一年症状突然加重。临床检查:右腕皮肤肿胀明显,右腕桡骨茎突下可触及1.5cm×1.0cm不规则实质性肿物,质地硬,边界清楚,轻压痛,活动度稍差,局部皮温较对侧稍高。右腕伸屈无力,手指活动及感觉较对侧减弱。 展开更多
关键词 滑膜骨软骨瘤 脊髓空洞症 腕关节 右腕部 实质性肿物 医院就诊 对症治疗 皮肤肿胀
无乳链球菌透明质酸酶的可溶性表达及其对小鼠的致病作用 被引量:1
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作者 罗素 马可 +2 位作者 陆承平 刘永杰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期997-1002,共6页
为了明确透明质酸酶(Hyl)在鱼源无乳链球菌致病过程中的作用,根据Gen Bank上公布的罗非鱼源无乳链球菌Hyl的全基因序列设计引物,采用PCR方法扩增长度为3 156 bp的hyl B基因片段。经限制性内切酶Eco RⅠ和XhoⅠ消化后克隆至表达载体p E... 为了明确透明质酸酶(Hyl)在鱼源无乳链球菌致病过程中的作用,根据Gen Bank上公布的罗非鱼源无乳链球菌Hyl的全基因序列设计引物,采用PCR方法扩增长度为3 156 bp的hyl B基因片段。经限制性内切酶Eco RⅠ和XhoⅠ消化后克隆至表达载体p ET-32a(+),构建重组表达质粒p ET-32a(+)-hyl B,经双酶切、测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,进行原核表达。结果显示,137.1 ku的目的蛋白获得成功表达,平板法证实该重组蛋白具有良好的降解透明质酸的活性;用纯化的重组蛋白注射ICR小鼠,病理组织学观察显示,肺和脑组织出现明显的出血和炎性细胞浸润等病理变化。结果表明,Hyl在鱼源无乳链球菌引致肺炎和破坏血脑屏障引起脑膜炎过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 无乳链球菌 透明质酸酶 原核表达 毒力
组织工程学技术在创伤性骨髓炎治疗中的研究进展 预览 被引量:3
17
作者 陶海荣 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第14期2415-2417,共3页
随着工业现代化的快速发展,高能量损伤造成的创伤日趋增多,开放性骨折患者较前更为多见。高能量的开放骨折往往软组织损伤严重,血运破坏严重,骨折处细菌进入髓腔后由于血运的降低,易于形成感染,最终将导致创伤性骨髓炎的发生。创伤性骨... 随着工业现代化的快速发展,高能量损伤造成的创伤日趋增多,开放性骨折患者较前更为多见。高能量的开放骨折往往软组织损伤严重,血运破坏严重,骨折处细菌进入髓腔后由于血运的降低,易于形成感染,最终将导致创伤性骨髓炎的发生。创伤性骨髓炎已成为骨科常见继发病。目前针对创伤性骨髓炎治疗方法多种多样,但手术治疗与抗生素治疗仍是所有疗法的根本。 展开更多
关键词 创伤性骨髓炎 开放性骨折 开放骨折 高能量损伤 生物活性玻璃 继发病 缓释载体 羟基磷灰石 组织工程学技术 工业现代化
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谈围海保滩工程质量安全监督关键内容 预览
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作者 张银龙 《山西建筑》 2016年第10期223-224,共2页
结合金山区城市沙滩以西保滩工程实例,介绍了围海保滩工程质量安全监督计划的编制方法,阐述了现场质量与安全监督的关键内容,旨在有效发挥监督的职能,充分保证工程的质量与安全。
关键词 围海保滩工程 质量监督 安全监督 监督计划
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简析城市沙滩以西保滩工程几项结构优化措施 预览
19
作者 《山西建筑》 2015年第31期204-205,共2页
结合金山区城市沙滩以西保滩工程的概况,对该工程在施工期所采取的几项结构优化措施进行了介绍,简要分析了加宽内平台、变单棱体为双棱体结构、设置高压喷射灌浆防渗墙等措施的优点,为提高保滩圈围类工程综合效益提供借鉴。
关键词 保滩工程 结构优化 防渗
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鱼源无乳链球菌透明质酸酶的表达及抗原性分析 被引量:1
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作者 郭长明 +1 位作者 陆承平 刘永杰 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第1期24-27,共4页
透明质酸酶(HylB)是无乳链球菌重要的毒力因子。根据本实验室分离并公布在GenBank上的罗非鱼源无乳链球菌GD201008-001全基因组序列,PCR扩增获得长为2 346 bp,覆盖hylB保守功能区的基因片段。将该片段采用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ... 透明质酸酶(HylB)是无乳链球菌重要的毒力因子。根据本实验室分离并公布在GenBank上的罗非鱼源无乳链球菌GD201008-001全基因组序列,PCR扩增获得长为2 346 bp,覆盖hylB保守功能区的基因片段。将该片段采用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ消化后亚克隆至表达载体pET28a(+),经双酶切、测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,进行体外原核表达,获得88.5 ku的目的蛋白。将纯化后的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,经ELISA和Western blot鉴定该蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 鱼源无乳链球菌 透明质酸酶 hylB 表达 免疫原性
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