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热应激对小鼠早期囊胚细胞骨架的影响
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作者 屈平平 李涛 文儒 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期142-145,149共5页
为了探索热应激降低小鼠早期囊胚后续发育能力的作用机理,试验采用形态学分析的方法,将试验动物昆明种小鼠分为39℃热应激组、41℃热应激组和对照组(37℃),从亚细胞水平观察体外热应激处理后小鼠早期囊胚细胞骨架的变化。结果表明:对照... 为了探索热应激降低小鼠早期囊胚后续发育能力的作用机理,试验采用形态学分析的方法,将试验动物昆明种小鼠分为39℃热应激组、41℃热应激组和对照组(37℃),从亚细胞水平观察体外热应激处理后小鼠早期囊胚细胞骨架的变化。结果表明:对照组和39℃热应激组小鼠早期囊胚紧密连接,桥粒未发生明显变化;而41℃热应激组小鼠早期囊胚桥粒连接结构不完整,两侧附着微丝减少,可见到明显的缝隙,卵周隙明显增大,微绒毛减少、弯曲,且细胞器的修复能力变差。说明细胞骨架的破坏是热应激降低小鼠早期囊胚后续发育能力的作用机理之一。 展开更多
关键词 热应激 早期囊胚 细胞骨架 紧密连接 桥粒 卵周隙
犬DEA1.1血型抗体间接Dot-ELISA检测方法建立 预览
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作者 王娟 姜忠玲 +4 位作者 丰艳妮 丛霞 曹荣峰 文儒 李华涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期85-89,I0005共6页
为了建立一个更为简单和敏感的方法,以作为不使用试剂红细胞检测犬DEA1.1血型抗体的替代方法,从犬DEA1.1阳性红细胞中分离出细胞膜。将携带DEA1.1阳性抗原的膜置于硝酸纤维素膜上,加入初级抗体和辣根过氧化物酶标记的二级抗体,采用TMB... 为了建立一个更为简单和敏感的方法,以作为不使用试剂红细胞检测犬DEA1.1血型抗体的替代方法,从犬DEA1.1阳性红细胞中分离出细胞膜。将携带DEA1.1阳性抗原的膜置于硝酸纤维素膜上,加入初级抗体和辣根过氧化物酶标记的二级抗体,采用TMB显色试剂盒检测。对照试验采用凝聚胺抗球蛋白试验检测DEA1.1抗体。用DEA1.1阳性和阴性血型抗原检测Dot-ELISA的灵敏度、稳定性和特异性。用158只犬的血清样本检测Dot-ELISA的准确性。结果显示,Dot-ELISA方法比凝聚胺抗球蛋白试验灵敏8倍以上。即使细胞膜反复冻融20次,其抗原稳定性也不受影响,并且可在-20℃时长期稳定保存。在对158只犬血清检测的过程中,该方法展现了与凝聚胺抗球蛋白试验较高的相关性。表明本研究成功建立了犬DEA1.1血型抗体Dot-ELISA检测方法,并且方法稳定、灵敏、无需试剂红细胞,可以作为输血前传统抗体检测的一种有效替代方法。 展开更多
关键词 犬DEA1.1 红细胞膜 DOT-ELISA 凝聚胺抗球蛋白试验
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葛根素通过抑制线粒体凋亡通路和调节HSP72表达缓解热应激诱导的LLC-PK1细胞凋亡
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作者 王若冰 朱雨凝 +5 位作者 丰艳妮 李华涛 丛霞 曹荣峰 姜忠玲 文儒 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2004-2012,共9页
葛根素对动物具有解热作用,但其作用机制尚不清楚。本研究目的在于明确葛根素是否对受热应激猪(Sus scrofa)近端肾小管细胞(pig kidney proximal tubular cells,LLC-PK1)具有保护作用及其潜在机制。本研究将LLC-PK1细胞分为对照(C)组,... 葛根素对动物具有解热作用,但其作用机制尚不清楚。本研究目的在于明确葛根素是否对受热应激猪(Sus scrofa)近端肾小管细胞(pig kidney proximal tubular cells,LLC-PK1)具有保护作用及其潜在机制。本研究将LLC-PK1细胞分为对照(C)组,热应激(HS,42℃)组,葛根素(Pue,10μmol/L)组和热应激加葛根素(HS+Pue)组。分别用CCK-8和流式细胞术检测细胞生存率和凋亡率,使用qRT-PCR和Western blot分别检测B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma,Bcl),Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、细胞色素c(cytochrome c,Cyto c)和细胞凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)mRNA和蛋白表达水平,用相应试剂盒检测半胱天冬酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)Caspase-9和Caspase-3活性及热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)HSP72和HSP90的含量。结果发现,葛根素抑制LLC-PK1线粒体Cyto c的释放和AIF mRNA的表达,并降低热应激条件下LLC-PK1细胞中Caspase-9和Caspase-3的活性。同时,热应激加葛根素组细胞中Bcl与Bax的比率以及HSP72的表达增加,HSP90的表达降低。上述结果表明,葛根素能降低热应激诱导的LLC-PK1细胞损伤,其机制是通过抑制线粒体凋亡通路的激活,上调细胞HSP72的表达来实现的。本研究揭示了葛根素抑制热应激诱导的LLC-PK1细胞损伤的部分机制,为临床上使用葛根素作为抗热应激的有效药物提供了基础资料。 展开更多
关键词 葛根素 猪近端肾小管细胞(LLC-PK1) 热应激 凋亡 热休克蛋白(HSPs)
黄芩苷经Nrf2/Keap1信号通路调控热应激小鼠子宫氧化损伤
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作者 高善颂 王磊 +5 位作者 李华涛 曹荣峰 丛霞 文儒 丰艳妮 姜忠玲 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2013-2022,共10页
哺乳动物各种生理功能中,生殖功能最易受热应激损伤。为探讨黄芩苷(baicalin)对受热应激小鼠(Mus musculus)子宫组织氧化损伤的影响及黄芩苷的抗热应激作用机制,本研究将性成熟雌性小鼠分为空白对照(C)组、黄芩苷(Bai)组、热应激(H)组... 哺乳动物各种生理功能中,生殖功能最易受热应激损伤。为探讨黄芩苷(baicalin)对受热应激小鼠(Mus musculus)子宫组织氧化损伤的影响及黄芩苷的抗热应激作用机制,本研究将性成熟雌性小鼠分为空白对照(C)组、黄芩苷(Bai)组、热应激(H)组和黄芩苷加热应激(H+Bai)组,采用TUNEL法、分光光度法、Western blot和免疫组化法检测子宫组织结构、细胞凋亡和信号转导的相关指标。结果显示,与H组相比,H+Bai组小鼠子宫组织损伤减轻、细胞凋亡水平降低,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量极显著(P<0.01)降低,总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase dismutase,T-SOD)活性极显著升高(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性均显著升高(P<0.05),胞浆蛋白伴侣分子kelch-like ECH-associated protein-1(Keap1)和转录因子NF-E2相关因子2(NFE2-related factor 2,Nrf2)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),子宫内膜上皮细胞及子宫腺上皮细胞中B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl2-关联X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、凋亡蛋白酶激活因子(apoptotic protease activating factor-1,Apaf-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9)和Caspase-3蛋白表达量减少,Caspase-9变化最明显。上述结果表明,黄芩苷减少热应激诱导的小鼠子宫组织氧化损伤和子宫内膜上皮细胞凋亡,其作用机制可能是通过激活Keap1/Nrf2信号通路进而调控抗氧化酶的活力实现的。本研究结果可为寻找缓解动物热应激方法提供理论依据,还可为抗热应激药物的筛选以及夏季奶牛(Bos taurus)繁殖力降低问题的解决提供基础资料。 展开更多
关键词 黄芩苷 热应激 小鼠子宫 Keap1/Nrf2信号通路
一例犬桡尺骨骨折的诊治
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作者 姜连炜 姜忠玲 +2 位作者 曹荣峰 文儒 李华涛 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第20期127-129,共3页
为了对一例小型博美犬撞伤进行诊断并治疗,试验采用临床检查及X射线检查进行确诊。结果表明:患犬为桡尺骨中部横断骨折,手术采用了桡尺骨横断骨折内固定术进行治疗,患犬恢复良好。说明小型犬适合桡尺骨骨折内固定手术治疗,治疗效果较好。
关键词 桡尺骨 骨折 内固定 X射线
黄芩苷对热应激小鼠卵巢氧化损伤的保护作用 预览
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作者 周颖璐 高琛 +5 位作者 姜忠玲 王新 丛霞 曹荣峰 李华涛 文儒 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第1期21-24,I0002共5页
研究旨在探讨黄芩苷对热应激小鼠卵巢抗氧化和细胞凋亡的作用机制。将小鼠分为常温对照组(生理盐水)(C组)、黄芩苷(50 mg/kg体重)组(C+B组)、41℃热应激组(H组)和热应激加黄芩苷(50 mg/kg体重)组(H+B组),连续注射7 d,第... 研究旨在探讨黄芩苷对热应激小鼠卵巢抗氧化和细胞凋亡的作用机制。将小鼠分为常温对照组(生理盐水)(C组)、黄芩苷(50 mg/kg体重)组(C+B组)、41℃热应激组(H组)和热应激加黄芩苷(50 mg/kg体重)组(H+B组),连续注射7 d,第8天41℃热应激2 h,立即处死,取卵巢组织进行切片观察并检测丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活力。Western Blot检测Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达。免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase 3蛋白表达。结果显示,热应激引起小鼠卵巢组织氧化损伤。黄芩苷能显著降低组MDA和NO含量,显著或极显著增加SOD、CAT和GSH-Px活力。此外,热应激可显著增加Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达,黄芩苷干预后Nrf2等蛋白的表达降低。黄芩苷干预后Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2、Caspase 3蛋白表达显著升高。上述表明,黄芩苷能缓解热应激下小鼠卵巢组织的氧化损伤及细胞凋亡,其机制可能与提高抗氧化能力及Nrf2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 黄芩苷 热应激 小鼠卵巢 氧化损伤 细胞凋亡
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围产期奶牛低钙血症发病机制研究进展 预览
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作者 隋君霞 丰艳妮 +3 位作者 文儒 孙鑫鹏 姜忠玲 李华涛 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第11期61-63,共3页
随着奶牛养殖业集约化程度的不断提升以及奶产量的增加,围产期奶牛低钙血症和产乳热的发生率不断升高,已成为围产期高产奶牛最高发疾病之一,尤其是生产瘫痪病牛淘汰率极高,如不及时治疗,并能继发其他产科疾病。因此,防治围产期奶牛低钙... 随着奶牛养殖业集约化程度的不断提升以及奶产量的增加,围产期奶牛低钙血症和产乳热的发生率不断升高,已成为围产期高产奶牛最高发疾病之一,尤其是生产瘫痪病牛淘汰率极高,如不及时治疗,并能继发其他产科疾病。因此,防治围产期奶牛低钙血症和产乳热也越来越受到重视。由于该病的发病原因复杂,影响因素众多,发病机制尚不十分清楚。本文将对奶牛低钙血症发病机制(图1)加以综述,旨在对临床实践中有效防治该病提供参考。 展开更多
关键词 围产期奶牛 低钙血症 发病机制 产科疾病 集约化程度 奶牛养殖业 高产奶牛 生产瘫痪
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犬DEA1.1血型抗原保存的研究 预览
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作者 朱雨凝 丛霞 +4 位作者 姜忠玲 丰艳妮 曹荣峰 文儒 李华涛 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第11期70-74,I0003共6页
本试验采用甘油化冻存红细胞及醛化固定红细胞的方法探索适合犬DEA1.1血型抗原保存方法,用3%、6%、10%、20%、30%和40%(w/v)浓度的甘油溶液保存犬DEA1.1血型红细胞,分快速冻存、程序降温两组处理,并对甘油化红细胞进行溶血情况、回收率... 本试验采用甘油化冻存红细胞及醛化固定红细胞的方法探索适合犬DEA1.1血型抗原保存方法,用3%、6%、10%、20%、30%和40%(w/v)浓度的甘油溶液保存犬DEA1.1血型红细胞,分快速冻存、程序降温两组处理,并对甘油化红细胞进行溶血情况、回收率、物理性状、保存期及抗原效价的测定;用0.25%、0.5%戊二醛,1.5%、3%甲醛和0.5%、1%多聚甲醛分别固定犬DEA1.1血型红细胞,检测犬红细胞醛化稳定性,以及醛化红细胞与新鲜红细胞DEA1.1血型抗原效价符合率。结果显示,30%浓度甘油程序降温组去甘油化后红细胞溶血率、细胞破损率最低,回收率最高且物理性状新鲜红细胞相似,抗原性与新鲜红细胞符合率可达93%,保存期可达12个月;用戊二醛醛化固定120d的红细胞稳定性及犬DEA1.1抗原的敏感性不变,抗原滴度与新鲜红细胞的符合率可达到100%。表明30%浓度甘油的程序降温冻存与0.25%~0.5%戊二醛醛化固定都能较好保存犬DEA1.1抗原性。 展开更多
关键词 犬DEA1.1血型 甘油冻存 红细胞醛化
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稳定转染HSP72奶牛乳腺上皮细胞系建立与表达鉴定 预览
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作者 于文慧 展西振 +4 位作者 丰艳妮 曹荣峰 姜忠玲 李华涛 文儒 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期103-107,共5页
为了构建HSP72慢病毒表达载体,建立稳定表达HSP72的牛乳腺上皮细胞系。以牛HSP72基因序列为模板,设计并合成引物,PCR扩增目的基因,连接到慢病毒表达质粒中,用包装获得的慢病毒感染牛乳腺上皮细胞,经一定浓度的嘌呤霉素筛选,Hochest3334... 为了构建HSP72慢病毒表达载体,建立稳定表达HSP72的牛乳腺上皮细胞系。以牛HSP72基因序列为模板,设计并合成引物,PCR扩增目的基因,连接到慢病毒表达质粒中,用包装获得的慢病毒感染牛乳腺上皮细胞,经一定浓度的嘌呤霉素筛选,Hochest33342法对细胞核定位,倒置荧光显微镜下观察转染效率,用免疫组化和Western Blot方法验证感染细胞是否稳定表达HSP72。结果显示,携带HSP72基因的慢病毒滴度约为1.0×10^9TU/mL;确定嘌呤霉素的最佳筛选浓度为2μg/mL;牛HSP72慢病毒感染细胞表达HSP72,感染的奶牛乳腺上皮细胞在倒置荧光显微镜下可看到绿色荧光,转染效率可达90%以上;免疫组化结果表明,正常细胞和空载体感染细胞,HSP72呈现低表达,转染携带HSP72目的基因载体细胞,HSP72高表达,呈现颜色较深的棕色;Western Blot方法检测证实与正常转染细胞相比,慢病毒空载体转染的奶牛乳腺上皮细胞HSP72表达稍有降低,但无统计学差异,而携带HSP72基因的慢病毒载体转染的细胞HSP72呈现高表达,且差异极显著(P<0.01),与慢病毒空载体转染的奶牛乳腺上皮细胞相比,携带HSP72基因的慢病毒载体转染的细胞HSP72呈现高表达,且差异极显著(P<0.01)。成功建立稳定表达HSP72的牛乳腺上皮细胞系,可为研究奶牛乳腺炎分子调控机制以及抗性分子药物筛选提供新的理论依据和工作基础。 展开更多
关键词 HSP72 稳定转染 慢病毒载体 奶牛乳腺上皮细胞
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热应激对小鼠早期囊胚线粒体超微结构的影响 预览
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作者 屈平平 李涛 +1 位作者 胡士林 文儒 《中国牛业科学》 2018年第2期32-36,共5页
对小鼠早期囊胚分别进行39℃和41℃2h的体外热应激处理,观察热应激后小鼠早期囊胚线粒体结构的变化。结果发现,39℃热应激组小鼠早期囊胚线粒体发生轻微肿胀,经37℃再培养2h后线粒体肿胀减轻;41℃热应激组胚胎线粒体高度肿胀,经37℃再培... 对小鼠早期囊胚分别进行39℃和41℃2h的体外热应激处理,观察热应激后小鼠早期囊胚线粒体结构的变化。结果发现,39℃热应激组小鼠早期囊胚线粒体发生轻微肿胀,经37℃再培养2h后线粒体肿胀减轻;41℃热应激组胚胎线粒体高度肿胀,经37℃再培养2h后线粒体肿胀未减轻。上述结果说明,热应激后小鼠早期囊胚线粒体的损伤程度和修复能力决定了小鼠早期囊胚的后续发育能力。 展开更多
关键词 热应激 小鼠 早期囊胚 线粒体
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犬血型系统研究进展 预览 被引量:2
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作者 王雪 姜忠玲 +3 位作者 丛霞 曹荣峰 文儒 李华涛 《动物医学进展》 北大核心 2018年第1期85-89,共5页
输血疗法在兽医临床的使用范围和数量不断扩大,已经发展成为一种抢救重症犬和治疗病犬的重要手段。输血疗法可以迅速补充患病犬的循环血量和体液量,维持血压,起到补血、止血、解毒、提高机体耐受力的作用。犬输血疗法在提供生命保障的同... 输血疗法在兽医临床的使用范围和数量不断扩大,已经发展成为一种抢救重症犬和治疗病犬的重要手段。输血疗法可以迅速补充患病犬的循环血量和体液量,维持血压,起到补血、止血、解毒、提高机体耐受力的作用。犬输血疗法在提供生命保障的同时,也会带来危险与伤害,异体输血时,血型不符可能产生输血反应,严重时可以致死患犬。论文主要对犬血型的发现历程和命名、不同血型之间的差异和生化特性以及各种犬血型输血时可能出现的反应进行综述,探讨临床上如何对犬进行安全、有效输血以及当前存在问题,最后对DEA1.1血型频率研究现状以及犬血型检测方法进行介绍。 展开更多
关键词 血型系统 输血疗法 DEA1.1血型
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附植前胚胎耐热应激损伤的MAPKs信号通路调控的研究进展 预览
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作者 殷珂 文儒 李华涛 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2018年第A01期100-104,共5页
热应激(环境高温或热性疾病)致附植前胚胎发育阻滞/死亡是导致家畜(尤其是奶牛)夏季妊娠率低的主要因素,就热应激时附植前胚胎丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路的级联激活调节细胞增殖和分化,阻遏... 热应激(环境高温或热性疾病)致附植前胚胎发育阻滞/死亡是导致家畜(尤其是奶牛)夏季妊娠率低的主要因素,就热应激时附植前胚胎丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)信号通路的级联激活调节细胞增殖和分化,阻遏细胞凋亡,促进生长因子表达等研究和热应激时MAPKs信号通路对牛附植前胚胎的信号调控进行综述,重点阐述MAPKs通路对附植前胚胎的重要作用。通过对近年来国内外对附植前胚胎受热损伤和MAPKs信号通路的级联激活以及它们之间关联的研究进展的总结,并结合青岛农业大学产科实验室近年来对降低夏季由热应激引起的细胞凋亡的相关研究,来揭示附植前胚胎耐热应激损伤的MAPKs信号通路调控的研究进展。MAPKs信号通路在附植前胚胎的信号转导通路中占有重要位置。在热应激作用下,附植前胚胎经历氧化、凋亡和合成调节蛋白过程,胚胎能否存活,取决于其自身耐热能力及胚胎生存环境,并需要借助于信号通路的精细调控,不论是内因还是外因都可能通过MAPKs信号通路级联调控胚胎存亡。热应激时,MAPKs信号通路各成员在附植前胚胎中的生物学效应各不相同,并且相互联系,共同调控着附植前胚胎的分化、凋亡等过程,转导刺激信号,参与机体内的反应。热应激后胚胎细胞的生死取决于自身抗热能力(内因)和其在子宫/培养的生存环境(外因),并且内、外因素均与MAPKs信号转导通路有关。 展开更多
关键词 热应激 附植前胚胎 损伤 MAPKS信号通路
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犬DEA1.1血型犬源单链抗体库构建及筛选 被引量:1
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作者 丛霞 姜忠玲 +2 位作者 曹荣峰 文儒 李华涛 《农业生物技术学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期901-910,共10页
在我国缺乏用于犬(Canis lupus familiaris)血型鉴定的检测试剂,本研究目的在于制备犬DEA1.1血型鉴定抗体,为宠物犬输血前血型鉴定提供材料。本研究以比格犬为研究对象,以外周血淋巴细胞为抗体基因来源,设计犬抗体可变区基因简并引物... 在我国缺乏用于犬(Canis lupus familiaris)血型鉴定的检测试剂,本研究目的在于制备犬DEA1.1血型鉴定抗体,为宠物犬输血前血型鉴定提供材料。本研究以比格犬为研究对象,以外周血淋巴细胞为抗体基因来源,设计犬抗体可变区基因简并引物,用反转录聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-PCR)合成cDNA,扩增抗体重链可变区(heavy chain variable region gene,VH)和轻链可变区(light chain variable region gene,VL)基因,用重叠延伸PCR将VH和VL通过Linker连接重组单链抗体(single chain antibody variable fragment,scFv)的基因片段,将scFv基因连接至噬菌体载体pCANTAB 5E,构建犬源单链抗体scFv文库,用斑点酶联免疫吸附测定(dot enzyme-linked immunosorbent assay,Dot-ELISA)方法和犬红细胞抗原1.1(dog erythrocyte antigen 1.1,DEA1.1)血型免疫库为基础,进行3轮筛选。以鉴定阳性的克隆为基础,构建了原核表达重组单链抗体蛋白。结果表明,犬抗体可变区简并引物有效可用,并成功构建犬源单链抗体scFv文库。构建的免疫库实际库容量为7×10-5,具有多样性和足够大的库容量。最终筛选到3株能够与犬DEA1.1血型抗原相结合的单链抗体。检测鉴定原核表达的Clone16蛋白为可溶蛋白。亲和纯化获得Clone16单链抗体进一步用临床样本验证,具有较强结合特性。本研究为制备犬DEA1.1血型鉴定试剂提供了理论依据。 展开更多
关键词 犬DEA1.1血型 单链抗体(scFv) 噬菌体展示技术 犬源抗体库
热应激 脂多糖 谷氨酰胺 诱导牛睾丸支持细胞HSP72时效表达 预览
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作者 丛霞 曲明媚 +3 位作者 王龙光 张东君 文儒 李华涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期20-22,26共4页
为了探讨温和热应激、脂多糖(LPS)和谷氨酰胺(Gln)诱导牛睾丸支持细胞(b SCs)HSP72的时效表达规律,本试验将传至第3代b SCs分成热应激、LPS和Gln处理组,用CCK-8试剂盒检测细胞活性,用RT-PCR和Western-Blot方法分别检测处理后0、2... 为了探讨温和热应激、脂多糖(LPS)和谷氨酰胺(Gln)诱导牛睾丸支持细胞(b SCs)HSP72的时效表达规律,本试验将传至第3代b SCs分成热应激、LPS和Gln处理组,用CCK-8试剂盒检测细胞活性,用RT-PCR和Western-Blot方法分别检测处理后0、2、4、6、8、12、14h和16 h时细胞内HSP72 mRNA和蛋白表达。结果显示,3种方式均能诱导HSP72表达,且HSP72蛋白分别在热应激、Gln和LPS预处理后2、4h和12 h时表达量最高。结果表明,热应激或Gln均比LPS诱导牛睾丸支持细胞HSP72表达的时间早,提示可考虑用Gln减少由LPS诱导的细胞损伤。 展开更多
关键词 牛睾丸支持细胞 HSP72时效表达 脂多糖 谷氨酰胺 热应激
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黄芩苷对热应激小鼠睾丸氧化损伤的保护作用 被引量:3
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作者 高琛 隋君霞 +6 位作者 周颖璐 姜忠玲 王新 丛霞 曹荣峰 李华涛 文儒 《农业生物技术学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1470-1477,共8页
哺乳动物各种生理功能中,生殖功能最易受热应激损伤。热应激使组织产生氧化应激,破坏雄性动物精子生成,从而影响繁殖效率。为探究黄芩苷对热应激小鼠(Mus musculus)睾丸损伤的影响,探讨黄芩苷的抗氧化作用机制,本研究将小鼠分成4组,... 哺乳动物各种生理功能中,生殖功能最易受热应激损伤。热应激使组织产生氧化应激,破坏雄性动物精子生成,从而影响繁殖效率。为探究黄芩苷对热应激小鼠(Mus musculus)睾丸损伤的影响,探讨黄芩苷的抗氧化作用机制,本研究将小鼠分成4组,常温对照组(C组)、黄芩苷组(C+B组)、热应激组(H组)和热应激加黄芩苷组(H+B组)。C组和H组小鼠腹腔注射生理盐水,C+B组和H+B组小鼠腹腔注射黄芩苷(50 mg/kg),连续注射7 d,H组与H+B组于第8天热应激(41℃)2 h,热应激结束后立即用断颈法处死所有处理组和对照组小鼠,取睾丸及附睾检测脏器系数和制备睾丸组织切片,睾丸组织用于检测氧化损伤指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力。末端脱氧核苷酸转移酶检测法(Td T-mediated d UTP nick-end labeling,TUNEL)法检测睾丸组织细胞的凋亡。Western blot检测睾丸组织内Fas/Fas L蛋白的表达。结果显示,热应激能够显著降低睾丸和附睾脏器系数(P〈0.05)并使睾丸组织结构发生病理性损伤,而黄芩苷可以显著缓解热应激引起的睾丸脏器系数降低(P〈0.05)和组织损伤。与热应激组相比,热应激加黄芩苷组小鼠睾丸组织中MDA含量显著降低,SOD、CAT和GSH-Px活力则显著增加(P〈0.05)。黄芩苷组与热应激加黄芩苷组相比则无显著性差异。热应组小鼠睾丸组织细胞凋亡率与对照组相比显著增加(P〈0.05),而热应激黄芩苷组与热应激组相比,小鼠睾丸细胞凋亡率则显著降低(P〈0.05)。此外,与对照组相比,热应激可以显著增加小鼠睾丸组织Fas(P〈0.05)和/Fas L(P〈0.01)蛋白表达,而黄芩苷能显著降低热应激引起的小鼠睾丸组织中Fas/Fas L蛋白表达(P〈0.05)。 展开更多
关键词 黄芩苷 热应激 小鼠睾丸 细胞凋亡 氧化损伤 FAS/FASL
犬输血安全及血型检测问题探讨 预览 被引量:1
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作者 殷珂 姜忠玲 +3 位作者 丛霞 曹荣峰 文儒 李华涛 《中国兽医杂志》 北大核心 2017年第8期102-105,共4页
输血可迅速补充循环血量和体液量,增加有效血容量,维持血压,改善血液循环状态;并增加机体血细胞,增强携氧能力,同时增强机体抗感染能力和激发体内凝血因子及增强骨髓造血机能改善贫血等。
关键词 血型检测 输血安全 激发体 循环血量 血液循环 血液寄生虫 红细胞血型 血细胞 临床实践 骨髓造血
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黄芩苷抗热应激小鼠输卵管氧化损伤的研究 预览
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作者 王雪 姜忠玲 +5 位作者 王新 姜爱民 丛霞 曹荣峰 李华涛 文儒 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期147-153,共7页
为降低热应激引起的动物机体活性氧(ROS)增加,减少组织氧化损伤和细胞过度凋亡。利用小鼠模型研究热应激对输卵管组织和细胞的损伤作用以及黄芩苷(Bai)对损伤的保护作用。将小鼠分为对照(Ⅰ)组;Bai(Ⅱ)组;热应激(Ⅲ)组和热应... 为降低热应激引起的动物机体活性氧(ROS)增加,减少组织氧化损伤和细胞过度凋亡。利用小鼠模型研究热应激对输卵管组织和细胞的损伤作用以及黄芩苷(Bai)对损伤的保护作用。将小鼠分为对照(Ⅰ)组;Bai(Ⅱ)组;热应激(Ⅲ)组和热应激加Bai(Ⅳ)组。用试剂盒检测组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活力;用Western Blot检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、苯醌氧化还原酶(NQO1)和血红素氧合酶-l(HO-1)蛋白表达;用免疫组化方法检测凋亡因子Apaf-1和Caspase-9蛋白表达。结果显示,与对照组相比热应激后小鼠输卵管组织MDA含量显著增加(P〈0.05),CAT和GSH-Px活力显著降低;同时,Nrf2、Keap1蛋白表达量显著升高(P〈0.05),凋亡因子Apaf-1和Caspase-9蛋白表达明显增加。注射黄芩苷后可显著(P〈0.05)降低小鼠输卵管组织MDA含量和Nrf2和Keap1蛋白表达量,降低凋亡因子Apaf-1和Caspase-9蛋白表达,并且显著增加(P〈0.05)SOD、CAT和GSH-Px活力。结果表明,黄芩苷能降低热应激小鼠输卵管组织的氧化损伤和细胞凋亡,其机制可能与激活抗氧化信号通路Keap1-Nrf2/ARE有关。 展开更多
关键词 黄芩苷 热应激 输卵管 氧化损伤 细胞凋亡
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犬血型DEA1.1抗原生化特性的研究
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作者 王雪 姜忠玲 +2 位作者 曹荣峰 文儒 李华涛 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2017年第10期31-35,287共6页
为了研究犬血型DE1.1抗原生化特性,为犬输血前血型检测提供理论依据,试验采用凝聚胺介质试剂调查356只不同地区及品种犬的DEA1.1血型频率分布,用考马斯亮蓝法检测DEA1.1红细胞膜蛋白并通过免疫沉淀鉴定血型蛋白大小,观察多种酶... 为了研究犬血型DE1.1抗原生化特性,为犬输血前血型检测提供理论依据,试验采用凝聚胺介质试剂调查356只不同地区及品种犬的DEA1.1血型频率分布,用考马斯亮蓝法检测DEA1.1红细胞膜蛋白并通过免疫沉淀鉴定血型蛋白大小,观察多种酶处理对DEA1.1抗原性的影响,通过ABO血型检测试剂和ABO型微柱凝胶检测卡检测人类红细胞ABO血型与犬DEA1.1血型有无交叉反应。结果表明:不同品种犬的血型频率差异较大,DEA1.1血型为50ku和200ku膜蛋白;DEA1.1抗原在无花果酶、木瓜酶、链霉蛋白酶处理后抗原性增强,在菠萝酶、糜蛋白酶和胰蛋白酶处理后抗原性未增强;DEA1.1阴、阳性红细胞与ABO血型试剂均未发生凝集。说明为降低输血反应,最好采用DEA1.1血型频率低的犬种作为供血犬,并建议输血前采用木瓜酶介质交叉配血试验进行血型检测。 展开更多
关键词 血型 DEA1.1 频率 抗体 抗原
针灸治疗犬风湿性四肢瘫痪一例
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作者 殷珂 丛霞 +2 位作者 曹荣峰 文儒 李华涛 《黑龙江畜牧兽医:下半月》 北大核心 2017年第10期218-219,共2页
一只两岁德国牧羊犬因风寒湿邪,导致经络阻塞、血液循环障碍,肌肉关节屈伸不利,最终四肢瘫痪不能站立,采用针灸疗法、中西医药物治疗一个月及后期的康复训练最终该犬可行走,痊愈。
关键词 针灸 风湿性 四肢瘫痪 治疗
纺织工程实践教学体系的探索与实施 预览
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作者 文儒 《现代商贸工业》 2017年第9期171-172,共2页
我国自加入世贸以来,纺织产业快速发展。随着信息科技的日新月异,社会经济的快速发展,人们对纺织产品的需求也在不断提高。在这种新时代的新形势下,纺织企业和相关纺织部门机构对应用型高技能人才越来越重视,但是就目前情况来看,由于学... 我国自加入世贸以来,纺织产业快速发展。随着信息科技的日新月异,社会经济的快速发展,人们对纺织产品的需求也在不断提高。在这种新时代的新形势下,纺织企业和相关纺织部门机构对应用型高技能人才越来越重视,但是就目前情况来看,由于学生在学校接受纺织相关学习的时候没有注意对实践的练习,所以导致很多学生在毕业后就面临失业的窘境。针对现下纺织工程教学中存在的问题,就如何开展纺织工程实践教学提出一些看法。 展开更多
关键词 纺织工程 实践教学 问题 探索
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