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人铁氧还蛋白表达载体构建 预览
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作者 许兰 陈思航 +1 位作者 尚书凤 《科技创新导报》 2019年第7期82-84,86共4页
目的为了将人铁氧还蛋白(adrenodoxin,FDX)在293T细胞中表达,扩增FDX的ORF,将FDX的ORF插入到哺乳动物细胞表达载体pcDNA的NotI/KpnI,构建表达载体。方法以GeneBank报道的FDX的mRNA序列(NM004109.5)为模板设计引物,在5’和3’分别引入限... 目的为了将人铁氧还蛋白(adrenodoxin,FDX)在293T细胞中表达,扩增FDX的ORF,将FDX的ORF插入到哺乳动物细胞表达载体pcDNA的NotI/KpnI,构建表达载体。方法以GeneBank报道的FDX的mRNA序列(NM004109.5)为模板设计引物,在5’和3’分别引入限制性酶切位点NotI和KpnI,从HepG2的cDNA中扩增FDX的ORF,将FDX的PCR产物和空载体pcDNA3.1用NotI和KpnI双酶切4 h,酶切产物用DNA回收试剂盒回收。将FDX的PCR酶切产物分别连接到空载体NotI/KpnI,连接产物转化DH5α,培养过夜。挑单克隆,用PCR鉴定阳性克隆并测序。结果经1%琼脂糖凝胶电泳和EB染色,观察到一500 bp条带,阳性克隆的测序结果与GeneBank报道的核酸序列一致。结论应用常规分子克隆方法已成功构建了FDX的真核表达载体pcDNA-FDX。 展开更多
关键词 铁氧还蛋白 细胞色素P450 表达载体
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超声冲击处理焊接接头疲劳设计若干问题的探讨 预览 被引量:7
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作者 王东坡 +2 位作者 霍立兴 张玉凤 王婷 《机械工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期 173-178,共6页
对大量超声冲击处理焊接接头的试验结果进行分析总结,探讨超声冲击焊接接头疲劳设计与原始焊接接头的差异,并得到下述结论:①材料强度对超声冲击方法改善焊接接头疲劳性能的处理效果有一定影响,随着接头材料强度的提高改善效果也越... 对大量超声冲击处理焊接接头的试验结果进行分析总结,探讨超声冲击焊接接头疲劳设计与原始焊接接头的差异,并得到下述结论:①材料强度对超声冲击方法改善焊接接头疲劳性能的处理效果有一定影响,随着接头材料强度的提高改善效果也越好,因此采用低强钢超声冲击处理焊接接头的疲劳试验结果得到疲劳设计S-N曲线是安全的。②超声冲击处理焊接接头试件S-N曲线的斜率m远大于3(6-23),不能将试验结果硬性规定按m=3,0进行统计处理,推荐取m=10。③经过超声冲击处理后其疲劳强度不再与所外加的平均应力无关,而是随着应力比R的增加,接头所能够承受的疲劳应力幅度有所降低。因此建议采用最大应力对超声冲击处理焊接接头进行疲劳设计。④当采用最大应力对超声冲击处理焊接接头进行疲劳设计时,外载荷中所含平均戍力与超声冲击处理焊接接头在FAT(200万次循环次数下的特定疲劳强度,将其定为疲劳级FAT)下的疲劳强度(应力范围)之间的关系为:F(R):1.25-0.5R,-1≤R≤0.5。 展开更多
关键词 超声冲击 焊接接头 平均应力 疲劳设计 材料强度
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超声疲劳数据采集系统设计 预览
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作者 王东坡 霍立兴 《焊接技术》 北大核心 2006年第5期 47-49,共3页
对超声疲劳试验系统进行了技术分析。为了迭到在试验过程中能够对数据进行实时采集、实时处理的目的,在采集系统中采用USB进行数据采集和传输.使整个采集系统迭到高效、快捷、稳定。
关键词 USB 超声疲劳 数据采集
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