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2010-2016年河北省食源性疾病暴发事件流行特征分析
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作者 陈磊 牛蓓 +2 位作者 梁勇 刘长青 《医学动物防制》 2019年第4期377-379,382共4页
目的分析2010-2016年河北省食源性疾病暴发事件,了解暴发流行趋势和特征,提出针对性的防控措施。方法收集汇总2010年10月1日~2016年12月31日河北省报告的食源性疾病暴发事件,用描述性流行病学方法分析结果。结果 2010-2016年河北省共报... 目的分析2010-2016年河北省食源性疾病暴发事件,了解暴发流行趋势和特征,提出针对性的防控措施。方法收集汇总2010年10月1日~2016年12月31日河北省报告的食源性疾病暴发事件,用描述性流行病学方法分析结果。结果 2010-2016年河北省共报告食源性疾病暴发事件308起,发病3 152人,死亡25人,病死率0. 79%。第二、三季度是食源性疾病暴发的高发季节,微生物性和化学性是主要致病因素,分别占报告总数的24. 7%和24. 4%;以采食野生毒蘑菇为主的有毒动植物及真菌毒素中毒是死亡的主要原因,13人因食用野生毒蘑菇致死,占报告死亡人数的52. 0%。家庭和饮食服务单位是食源性疾病暴发的主要场所,分别占报告总数的45. 1%和35. 7%。结论应加强食源性疾病的监测报告,针对以上食源性疾病的发生特点开展针对性的预警提示和对公众的宣传教育。 展开更多
关键词 食源性疾病 暴发事件 流行特征
河北省一起误食黄盖鹅膏中毒事件的调查报告
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作者 陈磊 +2 位作者 牛蓓 宋立江 刘长青 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2018年第2期204-207,共4页
目的调查分析河北省一起食物中毒事件的流行病学特征,鉴定引起中毒的野生蘑菇种类,提出有效防控措施。方法运用现场流行病学调查、形态学鉴定和分子生物学鉴定等方法对本起中毒事件进行分析。结果本次误食野生毒蘑菇中毒事件发病11人,死... 目的调查分析河北省一起食物中毒事件的流行病学特征,鉴定引起中毒的野生蘑菇种类,提出有效防控措施。方法运用现场流行病学调查、形态学鉴定和分子生物学鉴定等方法对本起中毒事件进行分析。结果本次误食野生毒蘑菇中毒事件发病11人,死亡3人,病死率为27.27%。采集施工现场野生蘑菇,结合形态学和分子生物学鉴定方法,鉴定为黄盖鹅膏。结论该中毒事件为河北省首次明确报道的黄盖鹅膏中毒,今后工作应注重加强监测预警和宣传教育,提醒广大市民不要采食野生蘑菇,以防中毒。 展开更多
关键词 黄盖鹅膏 野生蘑菇 毒蘑菇 食物中毒 食品安全 调查 河北
河北省食源性急性胃肠炎流行特征和疾病负担研究 被引量:2
3
作者 陈磊 +2 位作者 牛蓓 梁勇 刘长青 《医学动物防制》 2017年第4期421-423,共3页
目的分析河北省急性胃肠炎社区人群调查和哨点医院监测数据,了解河北省急性胃肠炎发病及食源性疾病负担情况。方法 2012年6月~2013年5月,在河北省石家庄、唐山、廊坊、邯郸4个试点市开展为期12个月的哨点医院食源性疾病主动监测和社区... 目的分析河北省急性胃肠炎社区人群调查和哨点医院监测数据,了解河北省急性胃肠炎发病及食源性疾病负担情况。方法 2012年6月~2013年5月,在河北省石家庄、唐山、廊坊、邯郸4个试点市开展为期12个月的哨点医院食源性疾病主动监测和社区人群入户回顾性调查。结果共调查2 832人,急性胃肠炎患病率为2.3%,病例就诊率为46.2%,就诊病例中标本采集率为30.0%,推算河北省食源性疾病的疾病负担是825 117人/年。肉与肉制品、果蔬类是引起食源性疾病的重点食品,家庭和街头餐点是引起食源性疾病的重点场所。结论食源性疾病是河北省重要的疾病负担,应完善食源性疾病监测系统,强化食源性疾病负担研究。 展开更多
关键词 食源性疾病 急性胃肠炎 社区人群调查 疾病负担
河北省儿童青少年超重肥胖现状与影响因素分析 预览 被引量:1
4
作者 刘长青 罗晓燕 《首都公共卫生》 2017年第4期167-169,172共4页
目的 了解河北省儿童青少年超重肥胖现状及影响因素,为儿童超重肥胖干预提供参考。方法 从参加河北省2010-2012年中国居民营养与健康状况监测的人群中,选取6~17岁参加食物频率调查和体检的居民作为研究对象。结果 河北省6~17岁儿童青少... 目的 了解河北省儿童青少年超重肥胖现状及影响因素,为儿童超重肥胖干预提供参考。方法 从参加河北省2010-2012年中国居民营养与健康状况监测的人群中,选取6~17岁参加食物频率调查和体检的居民作为研究对象。结果 河北省6~17岁儿童青少年超重肥胖率为19.71%,男性(23.79%)显著高于女性(15.81%),城市(22.96%)显著高于农村(15.57%),蔬菜、坚果和肉类食品的食用频次对儿童青少年超重肥胖率有影响,差异具统计学意义(χ~2值分别为7.553、9.598和8.252,P值分别为0.023、0.008和0.016)。多因素Logistic回归显示,蔬菜类[OR值0.597(0.431~0.826)]、坚果类[OR值0.406(0.205~0.804)]的食用频次以及性别[OR值0.530(0.34~0.825)]是儿童青少年超重肥胖的保护因素,肉类食品食用频次[OR值1.619(1.172~2.235)]和在外就餐[OR值1.537(1.051~2.248)]是危险因素。结论 河北省儿童青少年超重肥胖率超过全国平均水平。应提倡平衡膳食模式,培养健康饮食行为,倡导家庭就餐,积极进行有效的体育运动。 展开更多
关键词 超重 肥胖 膳食调查 饮食习惯 儿童青少年
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河北省居民膳食铜暴露风险评估 预览 被引量:1
5
作者 罗晓燕 +1 位作者 刘长青 宋立江 《首都公共卫生》 2017年第4期170-172,共3页
目的 评估河北省居民膳食铜暴露量及其健康风险。方法 采用连续3 d 24 h回顾法和称量法收集河北省居民膳食摄入数据、利用中国食物成分表中铜含量数据,计算河北省居民铜暴露水平及其分布情况,并利用铜膳食参考摄入量对潜在健康风险进行... 目的 评估河北省居民膳食铜暴露量及其健康风险。方法 采用连续3 d 24 h回顾法和称量法收集河北省居民膳食摄入数据、利用中国食物成分表中铜含量数据,计算河北省居民铜暴露水平及其分布情况,并利用铜膳食参考摄入量对潜在健康风险进行评估。结果 2.68%的研究对象膳食铜摄入量不足(低于平均需要量)。水产品和饮料类食品食用者中膳食铜P97.5摄入量较高,分别为2.608 5和3.300 0 mg/d;2岁~年龄组和4岁~年龄组儿童铜摄入量超出可耐受最高摄入量的比例较高,分别为3.23%、3.05%;在儿童青少年中速食食品膳食铜贡献率较高,位于第4位。结论 河北省居民膳食铜暴露风险较低,但应关注儿童青少年和水产品、饮料的高消费人群。 展开更多
关键词 膳食暴露 风险评估
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河北省贫困县婴儿的营养与智力发育状况及影响因素分析 被引量:2
6
作者 王杰 刘长青 +4 位作者 庞学红 宋立江 张泽琛 赖建强 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期98-102,共5页
目的分析足月分娩的6~11月龄婴儿的营养与智力发育水平及影响因素。方法在某贫困县招募205名足月分娩的6-11月龄婴儿开展问卷调查、体格测量、血红蛋白检测和智力评价,分析婴儿的喂养情况、营养状况、贫血患病率和智力发育水平及影响... 目的分析足月分娩的6~11月龄婴儿的营养与智力发育水平及影响因素。方法在某贫困县招募205名足月分娩的6-11月龄婴儿开展问卷调查、体格测量、血红蛋白检测和智力评价,分析婴儿的喂养情况、营养状况、贫血患病率和智力发育水平及影响因素。结果婴儿平均月龄为(8.66±1.78)月,母乳喂养率为92.68%,辅食品种达到食物多样化的比例为30.24%。生长迟缓率、超重率和肥胖率分别为3.90%、10.24%和2.93%,出生体重≥3800g是超重和肥胖的风险因素,辅食多样化是超重和肥胖的保护因素。贫血患病率为42.93%,4月龄内基本纯母乳喂养和出生体重超过3000g是贫血发生的保护因素。智力发育商平均得分为(101.34±7.90)分,父亲教育水平高者发育商得分高。结论该贫困县婴儿的主要营养问题是辅食种类单一、体重增加过快、贫血患病率高。 展开更多
关键词 婴幼儿 营养 智力发育 贫血
河北省部分城乡居民维生素A营养状况分析 被引量:1
7
作者 陈磊 +4 位作者 宋立江 刘长青 石永亮 罗晓燕 朱小波 《医学动物防制》 2016年第5期488-490,共3页
目的了解河北省城乡居民维生素A营养状况。方法采用分层随机抽样的方法,在全省农村和城市随机抽取了1 678名居民,采集受试者清晨空腹静脉血,采用高效液相色谱法测定血浆中视黄醇(维生素A)含量,分析河北省城乡居民维生素A营养状况。结... 目的了解河北省城乡居民维生素A营养状况。方法采用分层随机抽样的方法,在全省农村和城市随机抽取了1 678名居民,采集受试者清晨空腹静脉血,采用高效液相色谱法测定血浆中视黄醇(维生素A)含量,分析河北省城乡居民维生素A营养状况。结果河北省居民血清维生素A平均水平为(47.43±20.42)μg/d1,不同性别、年龄维生素A平均水平差异有统计学意义(P〈0.01),城乡维生素A平均水平差异无统计学意义(P〉0.05);受试者中,维生素A缺乏和边缘缺乏的人群分别占2.2%和13.8%,不同年龄组维生素A营养状态差异有统计学意义(χ2=159.247,P〈0.001);除60~岁组外,其余各年龄组血清维生素A水平随年龄增加呈升高趋势(χ2趋势=119.619,P〈0.01),但6~岁组最低。不同性别和城乡间维生素A营养状态差异无统计学意义(P〉0.05)。结论河北省居民维生素A营养状况不容乐观,未成年人和女性是维生素A缺乏的高危人群,应引起足够重视,采取合理措施进行干预。 展开更多
关键词 维生素A 营养状况 营养调查
河北省部分城乡居民维生素D营养状况分析 预览
8
作者 陈磊 +4 位作者 宋立江 刘长青 石永亮 罗晓燕 朱小波 《河北医药》 CAS 2016年第4期606-608,共3页
目的了解河北省居民维生素D营养状况。方法采用分层随机抽样的方法,在全省农村和城市随机抽取了1675名居民,采集受试者清晨空腹静脉血,应用放射免疫分析法测定血清25-羟维生素D浓度,分析河北省居民维生素营养状况。结果河北省居民血... 目的了解河北省居民维生素D营养状况。方法采用分层随机抽样的方法,在全省农村和城市随机抽取了1675名居民,采集受试者清晨空腹静脉血,应用放射免疫分析法测定血清25-羟维生素D浓度,分析河北省居民维生素营养状况。结果河北省居民血清25(OH)D平均水平为(21.05±9.76)ng/ml,维生素D缺乏、不足和正常的人群分别占17.6%、35.9%和46.6%,维生素D营养状况呈现男性显著优于女性,农村显著优于城市的态势。25(OH)D平均水平存在显著的年龄差异:3个成年组之间无显著性差异,各成年组与各未成年组之间以及两个未成年组之间有显著差异。结论河北省居民维生素D营养状况不容乐观,未成年人和女性是维生素D缺乏的高危人群,应引起足够重视,采取合理措施进行干预。 展开更多
关键词 维生素D 25-羟维生素D 营养状况
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2014年河北贫困地区中小学生血清维生素D水平分析 被引量:3
9
作者 苗润晓 朱小波 +3 位作者 宋立江 刘长青 陈磊 《实用预防医学》 CAS 2016年第11期1358-1360,共3页
目的对河北承德、涞源两个贫困县中小学生血清维生素D水平与年龄、身高的相关性进行分析。方法2014年9月,采用分层抽样的方法抽取承德县、涞源县中小学生720名(男生364名,女生356名),采用串联质谱法测定血清25-羟基维生素D的含量... 目的对河北承德、涞源两个贫困县中小学生血清维生素D水平与年龄、身高的相关性进行分析。方法2014年9月,采用分层抽样的方法抽取承德县、涞源县中小学生720名(男生364名,女生356名),采用串联质谱法测定血清25-羟基维生素D的含量。结果两县中小学生(6—16岁)血清维生素D的均值为(16.59±5.21)ng/ml,血清维生素D不足及缺乏的比例高达74.7%(538例);在中小学生(6—16岁)范围内,年龄与血清维生素D含量成负相关(r=-0.430,P〈0.01),调整年龄、性别两个因素之后,血清维生素D浓度与身高无相关性(P〉0.05)。结论河北承德、涞源两县中小学生血清维生素D水平普遍较低,且随着年龄的增长呈下降趋势,血清维生素D水平与身高无必然联系。河北贫困地区中小学生营养状况应引起高度重视;政府需进一步加强中小学生营养改善和干预措施。 展开更多
关键词 贫困地区 学生 维生素D 年龄 身高
2004—2012 年河北省突发食物中毒事件分析 被引量:4
10
作者 朱小波 陈磊 +3 位作者 牛蓓 石永亮 叶坤 《职业与健康》 CAS 2014年第15期2187-2189,共3页
目的分析2004--2012年河北省突发食物中毒事件,了解暴发流行状况,探讨流行病学趋势和特征。方法通过突发公共卫生事件管理信息系统收集汇总2004--2012年河北省报告的突发食物中毒事件,利用相关软件进行流行病学分析。结果2004--2012... 目的分析2004--2012年河北省突发食物中毒事件,了解暴发流行状况,探讨流行病学趋势和特征。方法通过突发公共卫生事件管理信息系统收集汇总2004--2012年河北省报告的突发食物中毒事件,利用相关软件进行流行病学分析。结果2004--2012年河北省共报告食物中毒161起,中毒人数5059人,死亡46人,病死率为0.9%。结论第2、3季度是食物中毒的高发季节,细菌性食物中毒比例高,化学性及真菌毒素食物中毒是导致死亡的主要原因。学校和家庭是发生食物中毒的主要场所。应加强对食物中毒的监测报告和对公众的宣传教育,最大限度减少食物中毒的发生。 展开更多
关键词 突发食物中毒事件 流行病学特征
2009-2011年河北省食源性疾病暴发特点分析及控制策略 被引量:3
11
作者 朱小波 +4 位作者 陈磊 宋立江 梁勇 牛蓓 石永亮 《医学动物防制》 2014年第7期763-766,共4页
目的分析2009-2011年河北省食源性疾病暴发的流行病学特点,探讨其控制策略,为预防和控制食源性疾病暴发提供科学依据。方法对2009-2011年河北省食源性疾病暴发资料进行流行病学分析。结果 2009-2011年河北省共报告食源性疾病暴发39起,发... 目的分析2009-2011年河北省食源性疾病暴发的流行病学特点,探讨其控制策略,为预防和控制食源性疾病暴发提供科学依据。方法对2009-2011年河北省食源性疾病暴发资料进行流行病学分析。结果 2009-2011年河北省共报告食源性疾病暴发39起,发病902人,死亡16人。呈现季节性高峰,家庭和集体食堂是发病的主要场所,细菌是主要的致病因素,毒素和化学物质是主要致死因素。结论建议加强食品安全监管,强化食源性疾病监测、报告、处置机制建设,做好公众宣传教育。 展开更多
关键词 食源性疾病暴发 分析 策略
河北省突发公共卫生事件应急指挥系统信息化建设探讨 被引量:3
12
作者 朱小波 +1 位作者 陈磊 郝杰明 《医学动物防制》 2014年第1期112-115,共4页
目的探讨突发公共卫生事件综合应急指挥系统的信息化建设。方法从河北省卫生应急工作存在的问题人手,探讨系统建设的业务功能的实现。结果提出突发公共卫生事件应急指挥系统信息化建设的新思路。结论以信息化方式构建突发公共卫生应急... 目的探讨突发公共卫生事件综合应急指挥系统的信息化建设。方法从河北省卫生应急工作存在的问题人手,探讨系统建设的业务功能的实现。结果提出突发公共卫生事件应急指挥系统信息化建设的新思路。结论以信息化方式构建突发公共卫生应急综合指挥系统,实现卫生应急资源信息集中存储、共享、统一调配,为决策者能够及时、科学、高效地应对突发公共卫生事件提供技术平台。 展开更多
关键词 突发公共卫生事件 应急指挥系统 信息化建设
口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:6
13
作者 吴磊 +4 位作者 卢曾军 付元芳 孙普 刘在新 王建科 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期331-336,共6页
以原核表达并纯化的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3A免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得3株能稳定分泌抗3A蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为3H2、4B1、7... 以原核表达并纯化的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3A免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得3株能稳定分泌抗3A蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为3H2、4B1、7F5,并对这3株单抗进行了生物学鉴定。结果显示,单抗3H2和4B1为IgG2a亚型,7F5为IgG2b亚型。单抗7F5针对的表位与3H2和4B1两株单抗的表位不一致;这3株单抗均能够与FMDV特异性结合,且单抗4B1与所有3A相关蛋白均反应。稳定性鉴定结果表明,获得的3株杂交瘤细胞均能稳定分泌单克隆抗体。研究结果为进一步探索3A蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3A蛋白 单克隆抗体
单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用 预览
14
作者 李永亮 杨苏珍 +2 位作者 卢曾军 刘在新 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期 69-71,75,共4页
着重阐述了单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用现状,单克隆抗体在病毒抗原结构与抗原表位研究、以及在畜禽病毒性传染病诊断和抗病毒治疗方面的应用,对当前单克隆抗体研究所面临的一些问题和研究方向做了分析。
关键词 单克隆抗体 畜禽病毒性传染病 应用
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口蹄疫病毒非结构蛋白2C主要表位区的原核表达及其单克隆抗体的制备 预览 被引量:5
15
作者 李永亮 +4 位作者 付元芳 卢曾军 袁明 吴磊 刘在新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期 69-73,共5页
本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2c蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌... 本研究制备并鉴定了口蹄疫病毒非结构蛋白2C的单克隆抗体(mAb)。以纯化的原核表达2c蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,所获得的杂交瘤细胞经间接ELISA法筛选,有限稀释法克隆,直至所克隆的细胞能够100%的分泌抗体,用Dot-ELISA以及IFA对mAbs的特异性等进行鉴定。共获得4株抗重组蛋白2c的mAbs,其亚类鉴定结果3株为IgG1,1株为IgG2b,叠加ELISA初步判定4株单抗所识别表位相同或相近。Dot-ELISA显示这些mAbs与重组2C蛋白和(2C’3AB)蛋白以及口蹄疫病毒O/China99感染的BHK-21细胞中的2C抗原均可特异性结合,IFA结果显示所得单抗能与FMDV感染细胞中的2C蛋白特异性结合。本研究获得的针对2C蛋白的特异性mAb,为进一步研究2C蛋白的结构和功能以及诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白2C 大肠杆菌表达 单克隆抗体
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口蹄疫病毒非结构蛋白定量检测ELISA方法的建立 被引量:7
16
作者 李永亮 卢曾军 +3 位作者 杨苏珍 谢宝霞 刘在新 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期70-73,共4页
目的:利用口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体建立液相阻断ELISA检测方法,进行定量检测口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白含量。方法:首先将工作浓度的3B单抗与待测病毒培养液过夜结合反应,然后取结合液转移至用3B蛋白包被好的酶标板上,... 目的:利用口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体建立液相阻断ELISA检测方法,进行定量检测口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白含量。方法:首先将工作浓度的3B单抗与待测病毒培养液过夜结合反应,然后取结合液转移至用3B蛋白包被好的酶标板上,用标准3B蛋白做12个梯度做对照,同时设阴性对照和空白对照。通过回归分析算出口蹄疫病毒培养液中的非结构蛋白3B含量。结果:回归曲线呈典型的S形,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R=0.99,检测范围为5~1500ng/ml,半数抑制浓度(Ic50)为130ng/ml。结论:该方法能特异、敏感的检测到病毒培养液中的非结构蛋白3B成分,并进行定量。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 单克隆抗体 非结构蛋白 定量ELISA
FMDV非结构蛋白2C主要表位区与3AB基因的组合表达与活性分析 被引量:1
17
作者 张小丽 +4 位作者 卢曾军 付元芳 马小军 刘在新 谢庆阁 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期10-15,共6页
近年的研究表明,口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面具有潜在的价值,为了建立敏感性更高的鉴别诊断方法,将截取了2C蛋白N-端和C-端的主要B细胞表位区和完整3AB蛋白基因组合后,进行了... 近年的研究表明,口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)2C在区分灭活疫苗免疫动物与自然感染动物方面具有潜在的价值,为了建立敏感性更高的鉴别诊断方法,将截取了2C蛋白N-端和C-端的主要B细胞表位区和完整3AB蛋白基因组合后,进行了原核表达,得到了分子量约为47.6kD的目的蛋白2C’3AB。通过Western blotting分析证明,表达产物能被FMDV感染动物阳性血清识别,具有很好的反应性。以通过电泳纯化的目的蛋白作抗原进行间接ELISA检测不同来源的动物血清,结果表明,该抗原仅与感染动物血清具有很好的反应活性,而与健康动物与免疫动物血清无反应,说明重组蛋白2C’3AB可作为区分灭活疫苗免疫动物与感染动物的鉴别诊断抗原。用2C’3AB和3ABC为抗原进行间接ELISA,对比检测田间血清样品,结果显示2C’3AB—ELISA敏感性比3ABC—ELISA高。说明以重组蛋白2C’3AB作为鉴别诊断抗原,能进一步提高对临界值血清的检出率,这对区分灭活疫苗免疫动物与FMDV隐性感染动物与带毒动物具有非常重要的意义。 展开更多
关键词 FMDV 非结构蛋白 2C’3 AB 原核表达 活性分析
口蹄疫病毒非结构蛋白3B单克隆抗体的制备与鉴定 预览 被引量:2
18
作者 李永亮 +4 位作者 卢曾军 杨苏珍 付元芳 曹轶梅 刘在新 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第2期 296-300,共5页
用E.coli原核表达并纯化的口蹄疫病毒(Foot—and—mouth disease virus,FMDV)非结构蛋白3B免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA筛选出分泌鼠IgG的杂交瘤细胞株,将该杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹... 用E.coli原核表达并纯化的口蹄疫病毒(Foot—and—mouth disease virus,FMDV)非结构蛋白3B免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA筛选出分泌鼠IgG的杂交瘤细胞株,将该杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水,用间接ELISA法筛选获得6株能稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E5、4B1、4D7、4E11、782、8811。鉴定结果显示,4B1和4E11细胞分泌IgG1,其余4株细胞分泌IgG2b;纯化后6株腹水单抗的纯度达90%以上,对3B蛋白的ELISA滴度均可达到1:100000以上;6株单抗均不与FMDV结构蛋白VP1和3D非结构蛋白发生反应;间接免疫荧光试验证明所制备的单抗能够识别3B蛋白;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存6个月后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白 3B蛋白 单克隆抗体
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口蹄疫病毒非结构蛋白3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测 预览 被引量:6
19
作者 付元芳 卢曾军 +5 位作者 曹轶梅 郭建宏 张小丽 刘在新 才学鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期 790-795,共6页
【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型... 【目的】口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3A、3B和2C基因的表达及产物纯化与活性检测。【方法】利用原核表达系统表达了FMDV NSP 3A、3B和富含B细胞抗原位点序列的2C蛋白。利用高浓度尿素裂解包涵体,采用稀释法和氧化型、还原型谷胱甘肽系统相结合方法对2C蛋白进行复性。用金属鳌合亲合层析的方法对表达的FMDV NSP 3A、3B和2C进行纯化。采用ELISA方法对比检测了3种纯化蛋白在检测羊血清NSP抗体的效果。【结果】检测得知3A和3B为可溶性表达蛋白,2C以包涵体形式表达。通过Western-blot分析,表明纯化后蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。纯化的3A、3B和复性后的2C融合蛋白与3ABC抗原的检测结果具有很高的符合性。【结论】该研究为建立鉴别FMDV自然感染动物和灭活疫苗免疫动物的酶联免疫电转移印迹技术(EITB)提供了所需的材料。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 非结构蛋白 酶联免疫电转移印迹技术(EITB)
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口蹄疫病毒2C′3AB基因重组杆状病毒的构建及其表达 预览 被引量:4
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作者 张小丽 卢曾军 +6 位作者 孙普 曹轶梅 付元芳 马小军 刘在新 谢庆阁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期 483-488,共6页
将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C′3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C′3AB。将重组穿梭质粒pMel-2C′3AB与杆状病毒骨架共转... 将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C′3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C′3AB。将重组穿梭质粒pMel-2C′3AB与杆状病毒骨架共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选及PCR鉴定,构建了含有目的基因的重组杆状病毒。用该病毒感染High Five细胞,细胞裂解液的SDS-PAGE电泳结果显示,出现一约为43ku的蛋白带,与预期大小一致;Western-blotting结果表明,该表达产物能被FMDV阳性血清及2C′3AB单克隆抗体识别;间接ELISA结果显示,表达的目的蛋白能与牛、羊、猪的。型FMDV阳性血清发生特异性反应。证实,FMDV 2C′3AB基因在昆虫细胞中得到了表达,且表达产物具有良好的反应活性。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 2C′3AB基因 重组杆状病毒 表达
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