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猪免疫口蹄疫灭活疫苗后外周血细胞亚群变化的研究 预览 被引量:1
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作者 张柳 冯霞 +3 位作者 靳野 淑芸 张晓霞 马军武 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第4期1012-1016,共5页
为了解动物在注射口蹄疫灭活疫苗后机体免疫状态的变化情况,本试验选取口蹄疫阴性猪进行疫苗免疫,利用流式细胞术检测方法来测定外周血中免疫细胞亚群的变化。结果显示,树突状细胞在免疫后能够快速产生应答,在24h内其含量出现明显升高;... 为了解动物在注射口蹄疫灭活疫苗后机体免疫状态的变化情况,本试验选取口蹄疫阴性猪进行疫苗免疫,利用流式细胞术检测方法来测定外周血中免疫细胞亚群的变化。结果显示,树突状细胞在免疫后能够快速产生应答,在24h内其含量出现明显升高;B细胞和Th细胞含量在免疫后第10天都出现了明显升高,且两者之间的变化存在着高度相关性,而抗体水平的变化情况与这两种细胞含量的变化也高度相关;细胞毒性T细胞含量在免疫后也出现升高。这说明灭活疫苗免疫动物后不仅可以激活机体的体液免疫应答反应,产生高水平抗体,发挥免疫保护作用,更重要的是能够在短时间内激发机体的固有免疫应答,同时能够激活细胞免疫应答,全方位发挥免疫保护作用。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 TH细胞 CTL细胞 B细胞 树突状细胞
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口蹄疫病毒核酸试纸条检测方法的建立 预览 被引量:1
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作者 龚真莉 蒋韬 +3 位作者 淑芸 陈国栋 刘艳红 李勇 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第9期2292-2297,共6页
本研究通过核酸探针与免疫层析相结合的方法,建立了一种简单、敏感、特异的检测口蹄疫病毒的方法。试验利用RT-PCR方法获得口蹄疫病毒3D核苷酸片段,在引物中设计了灵敏度高、特异性好的核酸探针——生物素和地高辛,使扩增产物结合探针... 本研究通过核酸探针与免疫层析相结合的方法,建立了一种简单、敏感、特异的检测口蹄疫病毒的方法。试验利用RT-PCR方法获得口蹄疫病毒3D核苷酸片段,在引物中设计了灵敏度高、特异性好的核酸探针——生物素和地高辛,使扩增产物结合探针。利用胶体金的放大原理将链霉亲和素与金颗粒形成胶体金混合物,从而与RT-PCR产物中的生物素探针结合。硝酸纤维素膜上端标记生物素化山羊抗兔IgG作为指控条带,下端标记抗地高辛抗体以捕获RT-PCR产物中的地高辛探针。组装金标试纸条,检测RT-PCR产物,结果表明该核酸试纸条可以检测到0.3×10^-3-3×10^-3μg/μL,敏感性高于琼脂糖凝胶电泳,两种方法的符合率高,核酸试纸条检测方法是一种敏感性高、成本低且费时短的新型检测方法。该方法为口蹄疫病毒检测提供了一种新的思路。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3D基因 核酸试纸条 生物素探针 地高辛探针
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口蹄疫病毒部分免疫功能肽段的合成、鉴定及免疫功能评价 预览
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作者 龚真莉 蒋韬 +3 位作者 淑芸 陈国栋 李勇 刘艳红 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期35-39,48共6页
利用微波多肽合成仪Liberty,合成O型口蹄疫病毒VP1 140~160和200~213氨基酸序列的两条肽段,并用高压液相色谱仪及质谱分析仪就合成的多肽片段进行分析纯化和鉴定;将合成的多肽片段作为半抗原与载体蛋白BSA偶联,免疫小鼠,进行血清制备... 利用微波多肽合成仪Liberty,合成O型口蹄疫病毒VP1 140~160和200~213氨基酸序列的两条肽段,并用高压液相色谱仪及质谱分析仪就合成的多肽片段进行分析纯化和鉴定;将合成的多肽片段作为半抗原与载体蛋白BSA偶联,免疫小鼠,进行血清制备和抗体效价测定.结果表明:成功合成了口蹄疫2条免疫功能短肽,其纯度均达到80%以上.半抗原成功与载体蛋白偶联;小鼠抗血清经过抗体效价检测证明半抗原与载体蛋白偶联组的抗体水平高于其余2个对照组,但是达不到免疫保护的水平.同时说明Liberty是一种操作简单、方便,合成效率高的多肽合成仪,可高效合成研究用多肽. 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 微波多肽合成 免疫功能肽段
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口蹄疫病毒单链抗体基因的构建及其推导蛋白三维结构的分子模拟 预览
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作者 刘涛 周广青 +4 位作者 马军武 林密 淑芸 冯霞 马明仁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期 1035-1040,共6页
用口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株灭活抗原免疫家兔,从兔脾细胞中提取RNA作为模板,通过PCR及重叠PCR方法构建出FMDV的单链抗体基因。测序结果显示,序列中有重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因,经Blast比较,发现VH、VL的... 用口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株灭活抗原免疫家兔,从兔脾细胞中提取RNA作为模板,通过PCR及重叠PCR方法构建出FMDV的单链抗体基因。测序结果显示,序列中有重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)基因,经Blast比较,发现VH、VL的相似性最高分别可达81.0%和93.0%,且在序列中有连接VH及VL的柔性接头(Gly4Ser)3。用EXPASY软件包预测了推导蛋白的特性。运用Swiss-pdb viewer软件的SWISS-Model处理器对构建的单链抗体基因推导的蛋白序列进行了三维结构的分子模拟。拉马钱德兰图证明,所模拟的单链抗体的三维结构较为合理。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 单链抗体 重叠聚合酶链反应 序列分析 三维结构 分子模拟
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O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法的建立 预览 被引量:5
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作者 林密 马军武 +3 位作者 淑芸 冯霞 张峰 殷宏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期 627-630,共4页
本研究建立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法,确立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法检测O型口蹄疫血清阴阳性判定标准:抗体效价大于或等于1:32时判为O型口蹄疫抗体阳性;1:16~1:32时判为O型口蹄疫抗体可疑。检... 本研究建立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法,确立了O型口蹄疫病毒固相竞争ELISA抗体检测方法检测O型口蹄疫血清阴阳性判定标准:抗体效价大于或等于1:32时判为O型口蹄疫抗体阳性;1:16~1:32时判为O型口蹄疫抗体可疑。检测131份阴性血清、口蹄疫亚洲1型阳性血清和A型阳性血清,固相竞争ELISA方法和液相阻断ELISA方法的特异性分别是95.5%,84.7%。固相竞争ELISA方法检测口蹄疫亚洲1型、口蹄疫A型阳性血清时,无交叉反应,O型口蹄疫病毒感染牛、免疫牛和感染猪血清的阳性检出率均为100%,免疫猪检出率为86.7%。 展开更多
关键词 口蹄疫 固相竞争ELISA 抗体效价 血清
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液相阻断ELISA在口蹄疫病毒抗体水平检测中的应用 预览 被引量:14
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作者 刘俊林 淑芸 +1 位作者 马军武 崔燕 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第3期 18-20,共3页
分别利用口蹄疫病毒Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法,对健康猪、牛、羊血清,O型、Asia-I型免疫血清,以及人工感染Asia-I型FMDV的猪、羊血清和人工感染O型FMDV牛血清进行了抗体水平检测,同时利用3ABC-I-ELISA对液相阻断ELISA方法所选的... 分别利用口蹄疫病毒Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法,对健康猪、牛、羊血清,O型、Asia-I型免疫血清,以及人工感染Asia-I型FMDV的猪、羊血清和人工感染O型FMDV牛血清进行了抗体水平检测,同时利用3ABC-I-ELISA对液相阻断ELISA方法所选的部分阴性血清进行了验证试验.结果显示:利用Asia-I型和O型液相阻断ELISA方法筛选的阴性动物,在免疫和攻毒后,血清抗体水平显著升高,表明该法可完全用于口蹄疫阴性动物筛选及口蹄疫病毒抗体水平的检测. 展开更多
关键词 口蹄疫 抗体水平 液相阻断ELISA
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O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态的LPB-ELISA检测 预览 被引量:20
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作者 魏孔福 淑芸 +3 位作者 林密 冯霞 张峰 马军武 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期 787-790,共4页
分别按一次免疫、首免后第15d加强免疫和首免后第60d加强免疫程序,对3组试验牛(每组牛20头)用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA(LPB-ELISA)测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果,首免后第15d加强免疫牛... 分别按一次免疫、首免后第15d加强免疫和首免后第60d加强免疫程序,对3组试验牛(每组牛20头)用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA(LPB-ELISA)测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果,首免后第15d加强免疫牛和第60d加强免疫牛抗体水平较高,50%保护牛所占比例分别为56.3%和63.1%,完全受保护的牛所占比例分别为34.3%和29.5%。第60d加强免疫牛的保护率要高于第15d加强免疫牛和一次免疫牛的保护率。结果表明,首免后第60d加强免疫是最理想的免疫程序。 展开更多
关键词 O型口蹄疫 液相阻断ELISA 抗体检测 抗体消长
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鸡传染性鼻炎的诊断和治疗 预览
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作者 黄培莲 淑芸 张永贤 《中国兽药杂志》 2005年第11期 53-55,共3页
某鸡场产蛋鸡鸡群中部分鸡相继出现流鼻涕、打喷嚏、眼结膜发炎、一侧或两侧面部肿胀等症状.根据流行病学调查、临床观察、细菌学检查和分离菌株的生化及动物试验,确诊为鸡传染性鼻炎.通过药敏试验选用泰乐菌素和磺胺药治疗,并改善饲养... 某鸡场产蛋鸡鸡群中部分鸡相继出现流鼻涕、打喷嚏、眼结膜发炎、一侧或两侧面部肿胀等症状.根据流行病学调查、临床观察、细菌学检查和分离菌株的生化及动物试验,确诊为鸡传染性鼻炎.通过药敏试验选用泰乐菌素和磺胺药治疗,并改善饲养管理,迅速控制了该病. 展开更多
关键词 鸡传染性鼻炎 诊断 治疗
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