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新医学模式下生物化学实验教学改革实践探 预览
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作者 华娟 宜德 《科技创新导报》 2019年第9期210-212,共3页
生物化学与分子生物学是医学专业的一门重要的基础学科,又是生命科学领域的一门前沿课程。传统的生物化学与分子生物学实验教学模式多数侧重于老师对实验原理、实验步骤的讲解,而忽略了学生的积极性、主动性和创造性。这与新医学模式下... 生物化学与分子生物学是医学专业的一门重要的基础学科,又是生命科学领域的一门前沿课程。传统的生物化学与分子生物学实验教学模式多数侧重于老师对实验原理、实验步骤的讲解,而忽略了学生的积极性、主动性和创造性。这与新医学模式下,医学院校应培养面向社会、面向临床的复合型医学人才的目标大相径庭。因此需要不断对生物化学与分子生物学实验教学的方式、教学目标与教学内容进行深入的探索与改革,激发学生的学习热情,培养医学生的分析、解决问题的能力,提高医学院校生物化学与分子生物学实验教学质量。 展开更多
关键词 生物化学实验 创新能力 教学改革 新医学模式
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敲减EEF1D的人卵巢癌细胞的构建及其药物敏感性研究 预览
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作者 汪慎燚 徐恰 +4 位作者 阮昕 席浩 王鹏 陈曦 宜德 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第6期828-834,共7页
目的探讨RNA干扰真核生物翻译延长因子1δ(EEF1D)基因表达对人卵巢癌耐药细胞DDP、PGPIPN敏感性的影响。方法针对人EEF1D基因设计并筛选出下调基因表达效果最佳的siRNA,构建shRNA序列表达载体pLJM1-shRNA。通过慢病毒表达载体构建稳... 目的探讨RNA干扰真核生物翻译延长因子1δ(EEF1D)基因表达对人卵巢癌耐药细胞DDP、PGPIPN敏感性的影响。方法针对人EEF1D基因设计并筛选出下调基因表达效果最佳的siRNA,构建shRNA序列表达载体pLJM1-shRNA。通过慢病毒表达载体构建稳定转染pLJM1-shRNA-EEF1D的SKOV3、SKOV3/DDP细胞株。RT-PCR和Western blot检测稳定转染细胞株EEF1D基因的表达情况,MTT法测定PGPIPN、DDP、DDP/PGPIPN对稳定转染细胞株的增殖抑制率。结果成功构建重组慢病毒载体pLJM1-shRNA-EEF1D。RT-PCR和Western blot法均证实在SKOV3、SKOV3/DDP细胞中成功敲减EEF1D的表达。此外,MTT结果显示,与对照组和非特异性转染组相比,DDP/PGPIPN细胞的增殖均明显受到抑制,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论通过敲减EEF1D基因表达可以明显增强人卵巢癌SKOV3/DDP细胞对DDP/PGPIPN的敏感性。 展开更多
关键词 RNA干扰 人卵巢癌 EEF1D DDP PGPIPN
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乳源免疫调节肽通过泛素-蛋白酶体途径抑制卵巢癌耐药性及其机制研究 预览
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作者 阮昕 汪慎燚 +3 位作者 徐恰 席浩 薛绍礼 宜德 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第7期989-993,共5页
目的研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)抑制卵巢癌耐药性及其机制。方法 MTT法检测PGPIPN与抗癌药顺铂(DDP)联合用药抑制人卵巢癌敏感细胞株(SKOV_3)、耐药细胞株(SKOV_3-DDP)和原代卵巢癌细胞的半数抑制浓度(IC_(50))和细胞增殖... 目的研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)抑制卵巢癌耐药性及其机制。方法 MTT法检测PGPIPN与抗癌药顺铂(DDP)联合用药抑制人卵巢癌敏感细胞株(SKOV_3)、耐药细胞株(SKOV_3-DDP)和原代卵巢癌细胞的半数抑制浓度(IC_(50))和细胞增殖抑制率,PCR法和Western blot法检测人卵巢癌细胞株和原代卵巢癌细胞用药情况下泛素-蛋白酶体途径相关基因的表达。结果 PGPIPN和DDP联合用药细胞增殖抑制率显著高于单独DDP组或PGPIPN组,差异有统计学意义(P〈0.05),PCR和Western blot结果表明PGPIPN通过调节泛素-蛋白酶体途径相关基因表达降低卵巢癌细胞的耐药性。PGPIPN促进SIAH和PSMA1表达,降低β-catenin基因的表达(P〈0.05,P〈0.01),且有剂量依赖性。结论 PGPIPN通过泛素-蛋白酶体途径降低卵巢癌细胞对DDP的耐药性。 展开更多
关键词 卵巢癌 乳源免疫调节肽 顺铂 泛素-蛋白酶体途径
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腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术与经阴道全子宫切除术治疗子宫肌瘤的临床疗效观察 被引量:2
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作者 张丽丽 步仰高 +1 位作者 高静 宜德 《中国妇幼保健》 CAS 2018年第11期2581-2584,共4页
目的探讨腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术与经阴道全子宫切除术治疗子宫肌瘤的临床疗效,为临床治疗提供参考依据。方法分层抽取解放军第一零五医院2011年1月-2017年2月收治的子宫肌瘤患者106例,采用随机数字法将其分为对照组和观察组,每组... 目的探讨腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术与经阴道全子宫切除术治疗子宫肌瘤的临床疗效,为临床治疗提供参考依据。方法分层抽取解放军第一零五医院2011年1月-2017年2月收治的子宫肌瘤患者106例,采用随机数字法将其分为对照组和观察组,每组各53例。对照组患者行经阴道全子宫切除术,观察组患者行腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术。比较两组患者的手术情况、术后情况及不良反应发生情况,同时比较两组患者术后不同时段疼痛情况。结果观察组的手术时间、术中出血量、治疗费用、下床活动时间及住院时间均明显优于对照组,差异有统计学意义(均P〈0.05);两组患者术后首次排气时间比较差异无统计学意义(P〉0.05);观察组患者术后5 h、10 h、20 h的疼痛程度均明显低于对照组,差异有统计学意义(均P〈0.01);观察组患者并发症发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术治疗子宫肌瘤的临床疗效显著,能够明显降低患者疼痛及治疗费用,且治疗安全性较高。 展开更多
关键词 腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术 经阴道全子宫切除术 子宫肌瘤 临床疗效
乳源免疫调节肽对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用 预览 被引量:1
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作者 顾芳 席浩 +3 位作者 阮昕 徐恰 汪慎燚 宜德 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第5期712-716,共5页
目的研究乳源免疫调节肽对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法将60只清洁级♂昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、乳源免疫调节肽(PGPIPN)低、中、高剂量组和阳性对照谷胱甘肽(GSH)组。连续灌胃2周,最后3 d,采用白酒(56度)给小鼠连... 目的研究乳源免疫调节肽对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法将60只清洁级♂昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、乳源免疫调节肽(PGPIPN)低、中、高剂量组和阳性对照谷胱甘肽(GSH)组。连续灌胃2周,最后3 d,采用白酒(56度)给小鼠连续灌胃建立急性酒精性肝损伤模型,测定各组小鼠体质量、肝脏指数及相关生化指标;取肝脏制作组织切片HE染色,观察肝组织的病理学变化。结果模型组小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)明显高于正常对照组,肝组织出现了肝索排列紊乱,肝细胞坏死,炎性细胞浸润。与模型组相比,PGPIPN高剂量组肝脏指数、血清ALT、AST水平较模型组明显降低。PGPIPN高剂量组TNF-α含量较模型组明显减少,肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide 展开更多
关键词 乳源免疫调节肽 小鼠 急性酒精性肝损伤 生化指标 氧化应激 保护作用
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乳源六肽增加人卵巢癌细胞对顺铂的敏感性 预览
6
作者 徐恰 阮昕 +3 位作者 汪慎燚 席浩 韦文美 宜德 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第8期1221-1226,共6页
目的研究乳源六肽(PGPIPN)促进人卵巢癌细胞对顺铂(DDP)的敏感性及其机制。方法体外培养人卵巢癌敏感细胞株COC1和耐DDP的耐药细胞株COC1/DDP,用CCK8法检测其在DDP作用下的细胞增殖抑制率,计算DDP在作用24、48、72 h的半抑制浓度(... 目的研究乳源六肽(PGPIPN)促进人卵巢癌细胞对顺铂(DDP)的敏感性及其机制。方法体外培养人卵巢癌敏感细胞株COC1和耐DDP的耐药细胞株COC1/DDP,用CCK8法检测其在DDP作用下的细胞增殖抑制率,计算DDP在作用24、48、72 h的半抑制浓度(IC_(50))。不同浓度的PGPIPN联合DDP(IC_(50))分别作用COC1和COC1/DDP 24、48、72 h,CCK8法检测其对生长增殖的影响,用流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响。用RT-PCR和Western blot检测人卵巢癌细胞中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的表达情况。结果 PGPIPN联合DDP组同单独使用DDP组相比,人卵巢癌细胞敏感株COC1和人卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的抑制率与凋亡率均增加,增加的幅度与PGPIPN浓度在一定范围内成正比,PGPIPN对耐药株COC1/DDP效果高于敏感株COC1。PGPIPN增加人卵巢癌细胞对DDP敏感性在作用48 h时效果最好,对COC1/DDP和COC1的抑制率最高分别为76.8%和62.3%,凋亡率最高分别为67.4%和45.4%,显著高于单独DDP作用(P〈0.01)。PCR和Western blot检测COC1和COC1/DDP的ERCC1基因的表达,结果显示在DDP联合不同浓度PGPIPN作用下ERCC1基因的表达均低于单独使用DDP组,COC1/DDP中ERCC1基因表达量随着PGPIPN浓度的升高而显著降低,尤其是对耐药细胞株COC1/DDP的ERCC1基因表达最为显著,显著高于单独DDP作用(P〈0.05,P〈0.01)。敏感细胞株COC1细胞中ERCC1基因的表达受PGPIPN的影响不如COC1/DDP明显,只是在高剂量(1×10^(-2)g/L)时,ERCC1基因表达明显下降。结论 PGPIPN能增加人卵巢癌细胞对DDP敏感性,其可能是通过调低ERCC1的表达来实现的。 展开更多
关键词 PGPIPN 人卵巢癌细胞 ERCC1基因 细胞调亡
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微型制备型电泳比较从细胞中提取蛋白质的3种方法 预览
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作者 顾芳 汪慎燚 宜德 《实验室研究与探索》 北大核心 2017年第10期21-23,79共4页
为探索建立适用于从人卵巢癌细胞株SKOV3中提取蛋白质的最优化方法,通过培养人卵巢癌细胞株SKOV3,分别采用Pull-Down Lysis、RIPA裂解法和加有硫脲的细胞裂解液提取细胞总蛋白,使用Bradford法测定蛋白质浓度,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-P... 为探索建立适用于从人卵巢癌细胞株SKOV3中提取蛋白质的最优化方法,通过培养人卵巢癌细胞株SKOV3,分别采用Pull-Down Lysis、RIPA裂解法和加有硫脲的细胞裂解液提取细胞总蛋白,使用Bradford法测定蛋白质浓度,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,然后使用微型制备型电泳分离蛋白,根据色谱图上的吸收峰比较从人卵巢癌细胞株SKOV3细胞中提取蛋白质的3种方法。结果表明:不同方法提取人卵巢癌细胞株SKOV3总蛋白的丰度及色谱图存在差异,PullDown Lysis试剂法在分离相对分子质量为15~80 k Da的蛋白质方面具有明显的优势。3种方法中以Pull-Down Lysis试剂法为人卵巢癌细胞株SKOV3蛋白质提取的最优方法,与微型制备型电泳的兼容性更好。 展开更多
关键词 蛋白质提取 SKOV3细胞 制备型电泳 优化方法
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乳铁蛋白抗菌肽抑制胃癌细胞增殖诱导其凋亡的体外研究 预览
8
作者 杨雪 石皖荣 +5 位作者 杨伟杰 何韬 胡阳生 王珊珊 韦文美 宜德 《安徽医科大学学报》 北大核心 2017年第6期781-785,790共6页
目的探讨乳铁蛋白抗菌肽(Lfcin B)对人胃癌细胞株MGC803细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法用CCK-8法测定不同浓度Lfcin B对胃癌细胞株MGC803 24、48和72h细胞增殖影响。用流式细胞术检测胃癌MGC803细胞凋亡的变化。用RT-PCR检测凋亡相... 目的探讨乳铁蛋白抗菌肽(Lfcin B)对人胃癌细胞株MGC803细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法用CCK-8法测定不同浓度Lfcin B对胃癌细胞株MGC803 24、48和72h细胞增殖影响。用流式细胞术检测胃癌MGC803细胞凋亡的变化。用RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3 mRNA的变化情况。用Western blot检测MGC803细胞中的Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达。结果 Lfcin B对胃癌细胞株MGC803的增殖具有抑制作用,促进胃癌细胞株MGC803细胞凋亡,并且具有时间和剂量依赖性(P〈0.05,P〈0.01);Lfcin B能显著抑制胃癌细胞株MGC803 bcl-2 mRNA表达,同时促进bax和caspase-3 mRNA表达,并且随着Lfcin B浓度的增高相关基因下降或上升越明显(P〈0.05,P〈0.01);Western blot结果也显示,Lfcin B能抑制Bcl-2蛋白表达,促进Caspase-3和Bax蛋白表达,其变化规律与mRNA相同(P〈0.05,P〈0.01)。结论 Lfcin B通过调控相关基因,抑制胃癌细胞MGC803增殖,并诱导其细胞凋亡。 展开更多
关键词 LfcinB MGC803 增殖 凋亡
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乳源免疫调节肽提高DDP对卵巢癌细胞的影响 预览 被引量:2
9
作者 周娟 刘琛 +4 位作者 顾芳 赵梦静 杨雪 王晶 宜德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第10期1440-1444,共5页
目的观察体外实验中乳源免疫调节肽(PGPIPN)与抗癌药物顺铂(DDP)联合用药对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响。方法 MTS检测DDP联合PGPIPN对原代卵巢癌细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测DDP联合PGPIPN对原代卵巢癌细胞凋亡率和周期的影响... 目的观察体外实验中乳源免疫调节肽(PGPIPN)与抗癌药物顺铂(DDP)联合用药对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响。方法 MTS检测DDP联合PGPIPN对原代卵巢癌细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测DDP联合PGPIPN对原代卵巢癌细胞凋亡率和周期的影响,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 MTS实验表明PGPIPN联合DDP处理组对卵巢癌细胞抑制率显著高于单独用DDP组,差异有统计学意义(P〈0.05),且呈剂量和时间依赖性。流式细胞术显示PGPIPN可以协同DDP促进人原代卵巢癌细胞的凋亡,并使得肿瘤细胞停滞于G0/G1期。细胞划痕实验显示联合用药明显抑制细胞的运动能力,与单独用药差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 PGPIPN可以提高DDP对原代卵巢癌细胞的作用。 展开更多
关键词 人原代卵巢癌细胞 联合用药 免疫调节肽 顺铂
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分子动力学模拟技术 预览
10
作者 冯婷婷 宜德 《科技创新导报》 2015年第23期248-249,共2页
分子动力学是一门多学科且交叉学科,是物理、数学、化学、生物和医学的综合技术。随着计算机信息技术的发展和完善,计算机在生物化学,物理,医学各个领域都实现了技术的革新,发展出计算生物学1、计算化学等多门新兴学科,这些新技术和学... 分子动力学是一门多学科且交叉学科,是物理、数学、化学、生物和医学的综合技术。随着计算机信息技术的发展和完善,计算机在生物化学,物理,医学各个领域都实现了技术的革新,发展出计算生物学1、计算化学等多门新兴学科,这些新技术和学科的发展革新使得科学家们可以成功的获得在实验技术上尚无法获得或很难获得的很多重要的,分子动力学模拟研究为科学研究提供了重要的参考、指导实验、验证某些理论和假设,从而降低试验工作的盲目性。 展开更多
关键词 分子动力学 分子力场 分子动力学模拟
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蛋白酶体抑制剂诱导t(8;21)急性髓系白血病细胞凋亡
11
作者 冯婷婷 宜德 +1 位作者 刘莹 余贤军 《湖北医药学院学报》 CAS 2015年第5期443-446,451共5页
目的:探讨蛋白酶体抑制剂(PSI)对t(8;21)急性髓系白血病治疗的分子生物学机制。方法:t(8;21)白血病细胞Kasumi-1经5,8,10,25,50nmol/LPSI处理后,进行细胞计数和MTT检测,并且使用流式细胞分选和蛋白免疫印迹方法检测不... 目的:探讨蛋白酶体抑制剂(PSI)对t(8;21)急性髓系白血病治疗的分子生物学机制。方法:t(8;21)白血病细胞Kasumi-1经5,8,10,25,50nmol/LPSI处理后,进行细胞计数和MTT检测,并且使用流式细胞分选和蛋白免疫印迹方法检测不同浓度的药物处理下细胞的调亡情况。结果:蛋白酶体抑制剂PSI诱导t(8;21)白血病细胞Kasumi-1在5~50nmol/L时间浓度梯度的自血病细胞调亡,以及对患者细胞有抑制增长作用,并发现随着药物作用时间的延长,表征凋亡的caspase.3条带的切割随之愈加的显著。这些结果表明,PSI诱导的细胞凋亡是通过caspase-3激活凋亡途径。结论:PSI可能是一个潜在的治疗t(8;21)白血病,并通过靶向AML1-ETO蛋白和激活凋亡通路治疗白血病的有效药物。 展开更多
关键词 t(8 21)急性髓系白血病 蛋白酶体抑制剂 凋亡
RNA 干扰 ERCC1基因表达对人卵巢癌耐药细胞 DDP、PGPIPN 敏感性的影响 预览 被引量:3
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作者 雷婷 宜德 +2 位作者 刘琛 周娟 赵梦静 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第6期730-734,共5页
目的:探讨 RNA 干扰核苷酸剪切修复偶联因子1(ERCCl)基因表达对人卵巢癌耐药细胞 DDP、PGPIPN 敏感性的影响。方法实验分为空白对照组、特异性转染组和非特异性转染组。采用 MTT 法测定 PGPIPN、DDP 对3组细胞的增殖抑制率,RT-PCR ... 目的:探讨 RNA 干扰核苷酸剪切修复偶联因子1(ERCCl)基因表达对人卵巢癌耐药细胞 DDP、PGPIPN 敏感性的影响。方法实验分为空白对照组、特异性转染组和非特异性转染组。采用 MTT 法测定 PGPIPN、DDP 对3组细胞的增殖抑制率,RT-PCR 法检测 PGPIPN 对3组细胞乳腺癌易感基因1(BRCAl)基因表达的影响。结果 MTT 法结果显示,PGPIPN 作用人卵巢癌耐药细胞 SKOV3/ DDP 48 h,对其增殖有一定的抑制作用,在浓度为40、60 mg/ L 时,与浓度为0 mg/ L 比较,差异有统计学意义( P 〈0.05);DDP、PG-PIPN 分别作用特异性转染组细胞48 h,其增殖明显受到抑制,与0 mg/ L 比较,差异均有统计学意义( P 〈0.05);RT-PCR 法结果显示,PGPIPN 作用特异性转染组细胞48 h,其BRCAl 基因表达随着 PGPIPN 浓度升高而明显降低,在浓度为40、60 mg/ L 时,与 PGPIPN 浓度为0 mg/ L 比较,差异有统计学意义(P 〈0.01)。结论 PGPIPN 对 SKOV3/ DDP 细胞的增殖有一定的抑制作用,并且通过干扰 ERCCl 基因表达可以明显增强 SKOV3/ DDP 细胞对 DDP、PGPIPN 的敏感性,同时可增强 PGPIPN 对 BRCAl 基因的下调水平。 展开更多
关键词 RNA干扰 ERCC1 卵巢癌 DDP PGPIPN
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乳源免疫调节肽对酒精诱导性肝细胞损伤的干预机制 预览
13
作者 刘琛 雷婷 +2 位作者 周娟 赵梦静 宜德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第7期892-895,共4页
目的 研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对肝细胞酒精性脂肪变性的干预机制。方法 MTT法筛选正常肝细胞株(LO2)酒精诱导的最佳浓度和PGPIPN最佳用药范围,在肝细胞内加入酒精和不同浓度的PGPIPN进行干预,连续造模3个月,建立能稳定遗传的酒... 目的 研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对肝细胞酒精性脂肪变性的干预机制。方法 MTT法筛选正常肝细胞株(LO2)酒精诱导的最佳浓度和PGPIPN最佳用药范围,在肝细胞内加入酒精和不同浓度的PGPIPN进行干预,连续造模3个月,建立能稳定遗传的酒精诱导脂肪变性的肝细胞模型,观察PGPIPN对肝细胞脂肪变性的防治效果。油红O染色法观察LO2细胞脂肪变性程度,RT-PCR法检测脂肪合成相关基因(ACC、PPAR-γ)的表达。结果 成功建立了能稳定遗传的酒精诱导脂肪变性的肝细胞模型,并筛选出酒精诱导LO2脂肪变性的最佳浓度和PGPIPN最佳用药范围。PGPIPN可以防治和缓解脂肪变性,PGPIPN可能通过降低ACC的基因表达,升高PPAR-γ的基因表达来实现。结论 PGPIPN可防治和放缓肝细胞酒精性脂肪病变,机制可能是减少脂肪合成。 展开更多
关键词 PGPIPN LO2 脂肪变性 脂肪合成
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生物化学与分子生物学教学虚拟实验平台建设的思考 预览 被引量:4
14
作者 冯婷婷 宜德 +3 位作者 许功林 罗欣 顾芳 黄海良 《科技创新导报》 2014年第28期137-138,共2页
计算机支持的协作学习(CSCL)是近年来教育技术领域研究的热点之一,信息及多媒体技术深刻影响了高等医学教育,虚拟实验教学将很大程度地填补了传统实验教学的不足,对于深入理解生物化学与分子生物学实验的微观发生机制,扩展学生对... 计算机支持的协作学习(CSCL)是近年来教育技术领域研究的热点之一,信息及多媒体技术深刻影响了高等医学教育,虚拟实验教学将很大程度地填补了传统实验教学的不足,对于深入理解生物化学与分子生物学实验的微观发生机制,扩展学生对该学科的深入了解,对多学科领域知识的融会贯通,更重要的是,对生物化学与分子生物学实验教学的发展起到重要的推动作用。 展开更多
关键词 生物化学与分子生物学 实验教学 虚拟实验室
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分子生物学模拟实验室平台建设 预览
15
作者 冯婷婷 宜德 +3 位作者 许功林 罗欣 顾芳 黄海良 《高校实验室工作研究》 2014年第2期46-47,共2页
随着多学科科学技术的日益发展,以物理、化学、生物、数学和计算机科学多学科交叉融合的手段建立起来的分子模拟方法在分子生物学研究中占有重要地位。分子模拟方法是在分子、亚分子、原子甚至电子结构层次上了解基本生命现象和揭示生... 随着多学科科学技术的日益发展,以物理、化学、生物、数学和计算机科学多学科交叉融合的手段建立起来的分子模拟方法在分子生物学研究中占有重要地位。分子模拟方法是在分子、亚分子、原子甚至电子结构层次上了解基本生命现象和揭示生命的本质规律提供了强有力的技术手段,并能够从理论上有力地补充和说明实验结果。在医学院校研究生分子实验室建设中引入分子模拟实验平台已提上日程。 展开更多
关键词 分子生物学 模拟实验室 软件 平台建设
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乳源抗菌-免疫调节融合肽对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响 预览
16
作者 唐宜桂 李小勤 +2 位作者 刘琛 雷婷 宜德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第6期715-720,共6页
目的:研究乳源抗菌-免疫调节融合肽( AIFP)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用MTT法测定AIFP对卵巢癌细胞株SKOV3细胞和原代培养的卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞术测定AIFP对SKOV3细胞和原代卵巢癌细胞凋亡、周期的影响;并用... 目的:研究乳源抗菌-免疫调节融合肽( AIFP)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用MTT法测定AIFP对卵巢癌细胞株SKOV3细胞和原代培养的卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞术测定AIFP对SKOV3细胞和原代卵巢癌细胞凋亡、周期的影响;并用RT-PCR检测 AIFP 对 SKOV3细胞及原代癌细胞凋亡和周期相关基因表达水平的影响,以探讨其可能机制。结果 MTT法显示,AIFP对卵巢癌细胞的增殖具有抑制作用,且具有时间和剂量依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,AIFP诱导卵巢癌细胞的凋亡,具有剂量和时间依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。 RT-PCR结果表明,AIFP可以影响细胞凋亡和细胞周期相关基因(Akt、CDC25C 和cyclinB1)的表达。结论 AIFP 上调卵巢癌细胞凋亡和周期相关基因 Akt、CDC25C和cyclinB1的表达,对卵巢癌细胞株SKOV3具有抑制增殖和促进凋亡的作用。 展开更多
关键词 AIFP SKOV3 增殖 凋亡
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筛选和鉴定抗卵巢癌活性六肽的靶点蛋白 预览
17
作者 李小勤 唐宜桂 +2 位作者 刘琛 雷婷 宜德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第7期879-882,共4页
目的:采用 pull-down技术筛选乳源抗癌六肽( PG-PIPN)在人卵巢癌细胞株(SKOV3)上的靶点蛋白(受体)并进行鉴定。方法以 PGPIPN 的序列为参照,设计出 PG-PIPN基因,以BamH Ⅰ/Xho Ⅰ为酶切位点,将PGPIPN基因构建到表达质粒载体pG... 目的:采用 pull-down技术筛选乳源抗癌六肽( PG-PIPN)在人卵巢癌细胞株(SKOV3)上的靶点蛋白(受体)并进行鉴定。方法以 PGPIPN 的序列为参照,设计出 PG-PIPN基因,以BamH Ⅰ/Xho Ⅰ为酶切位点,将PGPIPN基因构建到表达质粒载体pGEX-4T-1中,转化到E. coli BL21中,用诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷( IPTG)低温诱导表达的谷胱甘肽S转移酶( GST)标签融合蛋白作为诱饵蛋白;从SKOV3中提取的总蛋白作为捕获蛋白,运用 GST pull-down技术,筛选出靶点蛋白质,运用SDS-PAGE电泳进行初步鉴定,并用异硫氰酸荧光素( FITC)标记的PGPIPN孵育鉴定。结果 SDS-PAGE 电泳中有两条条带,一条为诱饵蛋白,一条为目的条带,在免疫荧光显微镜下观察到荧光PG-PIPN结合到该条带上。结论筛选和鉴定了PGPIPN作用于卵巢癌细胞上的靶蛋白,为研究其抗癌的作用机制及其信号转导通路奠定了基础。 展开更多
关键词 乳源抗癌六肽 GST pull-down 诱饵蛋白 捕获蛋白 靶点蛋白
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高等教育过程中研究式实验教学课程的探讨 预览
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作者 都建 宜德 +3 位作者 罗欣 鲁云霞 张胜权 黄海良 《卫生职业教育》 2013年第2期113-114,共2页
针对大学实验的教育现状,在诸多教育工作者的研究基础上作系统分析,努力探索在实验教学中进行研究性教学的途径。
关键词 研究式实验教学 创新能力培养 高素质人才培养
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β-酪啡肽-7对小鼠酒精性肝损伤防治作用的研究 预览 被引量:7
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作者 顾芳 周艳 +4 位作者 杨浩然 魏彩 唐宜桂 李小勤 宜德 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期397-400,共4页
目的研究β-酪啡肽-7(β-CM-7)对小鼠酒精性肝损伤的防治作用。方法 60只昆明♂小鼠随机分为6组(每组10只):对照组、模型组、护肝片组(0.3 g.kg-1)、β-CM-7高剂量组(灌胃剂量:2.0×10-1g.L-1)、β-CM-7中剂量组(灌胃剂... 目的研究β-酪啡肽-7(β-CM-7)对小鼠酒精性肝损伤的防治作用。方法 60只昆明♂小鼠随机分为6组(每组10只):对照组、模型组、护肝片组(0.3 g.kg-1)、β-CM-7高剂量组(灌胃剂量:2.0×10-1g.L-1)、β-CM-7中剂量组(灌胃剂量:2.0×10-2g.L-1)和β-CM-7低剂量组(灌胃剂量:2.0×10-3g.L-1),除对照组外均采用梯度酒精灌胃的方法建立酒精性肝损伤动物模型,同时除模型组外各组分别给予药物治疗12周。观察用药前后各组小鼠生化指标血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平的变化。结果β-CM-7高剂量组能够明显降低酒精性肝损伤小鼠血清中ALT、AST、TG、LDL-C水平(P〈0.05或P〈0.01),提高血清HDL-C的含量,减少肝组织匀浆的MDA含量(P〈0.05或P〈0.01),升高肝匀浆SOD,GSH-Px的水平(P〈0.05或P〈0.01)。结论β-酪啡肽-7对小鼠酒精性肝损伤有防治作用,可能与其调节脂质代谢,抗脂质过氧化 展开更多
关键词 小鼠 β-酪啡肽-7 酒精性肝损伤 生化指标 自由基 防治作用
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乳源免疫调节肽对小鼠酒精性脂肪肝的防治作用 预览 被引量:2
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作者 杨浩然 魏彩 +4 位作者 唐宜桂 李小勤 刘琛 顾芳 宜德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第4期336-340,共5页
目的研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对小鼠酒精性脂肪肝的防治作用。方法60只昆明种雄性小鼠,随机均分为对照组、模型组、护肝片(0.3g/kg)组、PGPIPNI组、Ⅱ组和Ⅲ组。采用梯度乙醇溶液灌胃的方法建立小鼠酒精性脂肪肝(AFL)模型... 目的研究乳源免疫调节肽(PGPIPN)对小鼠酒精性脂肪肝的防治作用。方法60只昆明种雄性小鼠,随机均分为对照组、模型组、护肝片(0.3g/kg)组、PGPIPNI组、Ⅱ组和Ⅲ组。采用梯度乙醇溶液灌胃的方法建立小鼠酒精性脂肪肝(AFL)模型,造模的同时给予药物干预,共12周。实验结束后,处死小鼠,收集血清和肝脏。测定小鼠肝指数(L1)、脾指数(sI)、血清丙氨酸氨基转移酶(AIJT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL—C)及高密度脂蛋白(HDL—C)和肝组织中甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)含量,并观察肝脏病理组织学变化。结果PGPIPN各剂量组均能显著降低AFL小鼠LI和SI水平、血清中ALT和AST的活性,减少血清中TG、TC及LDL—C和肝组织中TG、MDA含量,升高HDL—C、SOD含量和GSH—PX活性水平;同时,病理组织学检查结果显示,PGPIPN各剂量组小鼠肝脏中小泡性脂肪变性程度明显减轻。结论PGPIPN对酒精性脂肪肝小鼠有防治作用,其机制可能与其调节脂质代谢,抗脂质过氧化有关。 展开更多
关键词 乳源免疫调节肽 酒精性脂肪肝 脂质过氧化 肝脏脂肪变性
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