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抗苗勒氏管激素受体的表达与人子宫内膜容受性的相关性研究
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作者 刘磊 刘依侬 +4 位作者 林秀英 王起来 王雪 方艳秋 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第3期617-619,共3页
目的探讨抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHR2)在人子宫内膜中的表达情况及其与子宫内膜容受性的相关性。方法选取2016年7-10月在吉林省人民医院生殖医学中心行IVF-ET助孕的患者42例为研究对象,分为正常对照组(22例)和薄型子宫内膜组(20例)。... 目的探讨抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHR2)在人子宫内膜中的表达情况及其与子宫内膜容受性的相关性。方法选取2016年7-10月在吉林省人民医院生殖医学中心行IVF-ET助孕的患者42例为研究对象,分为正常对照组(22例)和薄型子宫内膜组(20例)。检测患者子宫内膜厚度及雌激素水平,初步评价子宫内膜容受性。在月经后第5~7天进行内膜搔刮,留取内膜组织,提取子宫内膜组织总RNA,荧光定量PCR检测AMHR2、VEGF基因表达水平。采用h CG (100 ng/ml)处理人子宫内膜细胞株ishakawa细胞24 h,免疫印迹法检测AMHR2表达水平。结果薄型子宫内膜组患者子宫内膜组织中AMHR2和VEGF水平均低于正常对照组,分别下降至正常水平的64%和55%,差异有统计学意义(P<0. 05)。h CG处理24h后AMHR2蛋白水平显著增加,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 AMHR2和VEGF在薄型子宫内膜患者的子宫内膜中表达较低,h CG处理能够提高子宫内膜细胞中AMHR2的表达,其水平与子宫内膜容受性具有一定的相关性。 展开更多
关键词 抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体 子宫内膜容受性 人绒毛膜促性腺激素
重组hCG对人子宫内膜细胞AMHR2表达调控的研究 预览
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作者 杨天时 +2 位作者 刘磊 方艳秋 林秀英 《长春师范大学学报》 2019年第2期74-77,共4页
本文探讨了人绒毛膜促性腺激素(hCG)作用于子宫内膜细胞所引起的信号改变,以及抗苗勒试管激素受体AMHR2对子宫内膜容受性调控的作用机制。采集人子宫内膜组织,用胰酶消化的方法分离原代细胞并培养,用hCG处理细胞24 h后,采用荧光定量PCR... 本文探讨了人绒毛膜促性腺激素(hCG)作用于子宫内膜细胞所引起的信号改变,以及抗苗勒试管激素受体AMHR2对子宫内膜容受性调控的作用机制。采集人子宫内膜组织,用胰酶消化的方法分离原代细胞并培养,用hCG处理细胞24 h后,采用荧光定量PCR方法检测AMHR2基因表达水平,免疫印迹杂交方法检测AMHR2蛋白表达变化。结果表明,分离得到人原代子宫内膜细胞,能够正常传代培养,细胞中表达AMHR2基因和蛋白。用hCG处理细胞24 h后,AMHR2基因和蛋白表达水平均显著增加(P<0.05)。体外实验hCG能够促进子宫内膜细胞中AMHR2基因和蛋白的表达,可能通过AMHR2提高子宫内膜容受性。 展开更多
关键词 人绒毛膜促性腺激素 子宫内膜细胞 抗苗勒氏管激素二型受体
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人子宫内膜细胞基因表达谱研究
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作者 张强 +5 位作者 魏丽杰 林秀英 付建华 王雪 刘磊 方艳秋 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第2期394-396,共3页
目的通过研究人子宫内膜细胞基因表达谱,分析人子宫内膜特异表达基因的水平及相关信号通路。方法通过新一代测序数字基因表达谱(DGE)方法对人子宫内膜细胞进行转录组测序,与人脐带间充质干细胞基因表达谱对比获得子宫内膜特异表达基因,... 目的通过研究人子宫内膜细胞基因表达谱,分析人子宫内膜特异表达基因的水平及相关信号通路。方法通过新一代测序数字基因表达谱(DGE)方法对人子宫内膜细胞进行转录组测序,与人脐带间充质干细胞基因表达谱对比获得子宫内膜特异表达基因,进行GO注释富集分析和KEGG信号通路富集分析。结果人子宫内膜细胞表达基因17 485个。其中与人脐带间充质干细胞基因表达谱对比,子宫内膜细胞特异表达基因3 651个。选取转录本定量FPKM值大于10个拷贝的627个子宫内膜特异表达基因,进行GO注释富集分析发现,子宫内膜特异表达基因与细胞外区域的结构和细胞外基质、胶原蛋白代谢、细胞迁移的调控等功能相关;KEGG信号通路富集分析发现,子宫内膜特异表达基因与黏着斑、吞噬泡、脂肪酸代谢、细胞凋亡等信号通路相关。结论获取人原代子宫内膜细胞的基因表达谱,并对其差异基因进行GO注释和KEGG信号通路富集分析,可为进一步研究提高子宫内膜容受性的方法提供可靠依据。 展开更多
关键词 子宫内膜细胞 转录组测序 子宫内膜容受性 GO注释 KEGG信号通路
APS复发性流产患者血小板的活化及其对内皮细胞的影响 预览
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作者 马寅芙 刘磊 +5 位作者 王起来 孙牧男 林秀英 谭岩 方艳秋(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第19期2396-2399,共4页
目的:探讨APS复发性流产患者血小板活化状态及其对内皮细胞活化的作用。方法:流式细胞术分别检测23例APS患者和31例正常早孕人群血小板CD62P和CD40L的表达水平。洗涤血小板悬液与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养6 h,ELISA法分析HUVECs... 目的:探讨APS复发性流产患者血小板活化状态及其对内皮细胞活化的作用。方法:流式细胞术分别检测23例APS患者和31例正常早孕人群血小板CD62P和CD40L的表达水平。洗涤血小板悬液与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)共培养6 h,ELISA法分析HUVECs培养上清IL-8的水平,荧光定量PCR法检测HUVECs细胞ICAM-1的mRNA水平。结果:APS组血小板CD62P和CD40L阳性表达百分率为(10.27±3.76)%和(13.26±5.21)%,较正常早孕组显著升高(P<0.05);APS组血小板悬液能显著促进HUVEC细胞ICAM-1基因表达水平和分泌IL-8水平。特异性CD40L单抗可以显著抑制HUVEC细胞表达ICAM-1水平和分泌IL-8水平。结论:APS流产患者外周血血小板活化程度增加,血小板-内皮细胞反应参与APS导致高凝、炎症和流产的病理过程。 展开更多
关键词 复发性流产 血小板 内皮细胞 CD40L CD62P
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机械刺激对子宫内膜中整合素avβ3、VEGF、LIF的影响 预览
5
作者 林秀英 付建华 +2 位作者 刘磊 方艳秋 《中国实验诊断学》 2017年第12期2136-2138,共3页
子宫内膜容受性是胚胎植入的关键因素。控制性促排卵(controlled ovarian hypeistimulation COH)因为垂体降调、高水平雌激素的作用,导致种植窗提前、子宫内膜容受性下降。国内外大量临床资料研究表明:机械刺激能够提高IVF周期临床... 子宫内膜容受性是胚胎植入的关键因素。控制性促排卵(controlled ovarian hypeistimulation COH)因为垂体降调、高水平雌激素的作用,导致种植窗提前、子宫内膜容受性下降。国内外大量临床资料研究表明:机械刺激能够提高IVF周期临床妊娠率。但机制上不明确,而且对机械刺激的时间、次数存在很大争议。 展开更多
关键词 机械刺激 LIF VEGF av 子宫内膜容受性 控制性促排卵 临床妊娠率 种植窗 胚胎植入 获卵数
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血清和卵泡液抗苗勒管激素在IVF-ET中的检测价值 预览 被引量:3
6
作者 王起来 马寅芙 +5 位作者 付建华 林秀英 刘磊 方艳秋 谭岩 《中国实验诊断学》 2017年第12期2062-2064,共3页
目的探讨非多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中血清和卵泡液抗苗勒管激素(AMH)与临床结果的预测价值。方法选取进行IVF-ET患者(非PCOS原因不孕)共103例,根据获卵数分为低获卵组、正常组、高获卵组。检... 目的探讨非多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中血清和卵泡液抗苗勒管激素(AMH)与临床结果的预测价值。方法选取进行IVF-ET患者(非PCOS原因不孕)共103例,根据获卵数分为低获卵组、正常组、高获卵组。检测自然月经周期第3天、取卵日和移植日血清AMH值以及卵泡液AMH值。依据统计学方法分析获卵数及临床妊娠与AMH水平的关系。结果低获卵组、正常组、高获卵组三组间窦卵泡数、总胚胎数在各组间比较均具有统计学差异(P〈0.05);三组自然月经周期第3天、取卵日和移植日血清AMH值以及卵泡液AMH水平存在差异,均为低获卵组〈正常组〈高获卵组,组间成对比较差异具有统计学意义(P〈0.05);卵泡液AMH水平妊娠组高于非妊娠组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论血清和卵泡液AMH水平可作为预测获卵数的指标,而卵泡液AMH水平高低与临床妊娠具有相关性,可作为预测妊娠结局的指标。 展开更多
关键词 IVF-ET AMH 卵泡液
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机械刺激时间、方式对COH周期临床结局的影响 被引量:1
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作者 林秀英 付建华 +1 位作者 方艳秋 《中国妇幼保健》 CAS 2017年第24期6234-6236,共3页
目的 探讨不同时间、不同方式、对不同人群进行子宫内膜机械刺激提高子宫内膜容受性的最佳干预时间、干预方式、适应人群及临床结局.方法 根据刺激方式随机将254例患者分为A组(刮勺组)90例患者,B组(子宫内膜活检管组)94例患者,C组... 目的 探讨不同时间、不同方式、对不同人群进行子宫内膜机械刺激提高子宫内膜容受性的最佳干预时间、干预方式、适应人群及临床结局.方法 根据刺激方式随机将254例患者分为A组(刮勺组)90例患者,B组(子宫内膜活检管组)94例患者,C组(未刺激组)70例患者;根据刺激时间分为月经期组和黄体中期组;对于反复失败患者分为刺激组和非刺激组.统计各组患者的胚胎着床率、妊娠率、流产和异位妊娠率、不良反应等方面差异.结果 机械刺激术后A、B组与C组患者比较胚胎着床率、妊娠率略高,流产和异位妊娠率略低,差异均无统计学意义(P>0.05);月经期组和黄体中期组上述指标变化差异无统计学意义(P>0.05).但在反复种植失败患者中,刺激组比非刺激组胚胎着床率、妊娠率升高,流产和异位妊娠率降低,差异均有统计学意义(P<0.05).A组患者流血时间更短、B组患者疼痛程度更轻,差异有统计学意义(P<0.05).结论 结合妊娠结局、不良反应及患者接受度综合分析,子宫机械刺激时机应使用子宫内膜组织活检管在IVF前一周期的黄体中期施行比较适合. 展开更多
关键词 机械刺激 时机 方式 临床结局 不良反应
p21蛋白激活激酶4在乳腺癌上皮间质转化中的作用研究 预览 被引量:1
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作者 米旭光 李首庆 +3 位作者 刘磊 方艳秋 谭岩 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1771-1773,1778共4页
目的:探讨p21蛋白激活激酶4(PAK4)在乳腺癌细胞上皮间质转化中的作用.方法:在乳腺癌MCF7细胞中超表达PAK4,而在乳腺癌MDA-MB-231细胞中干扰PAK4表达,通过迁移和侵袭实验检测其对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响,荧光定量法和免疫印迹分析... 目的:探讨p21蛋白激活激酶4(PAK4)在乳腺癌细胞上皮间质转化中的作用.方法:在乳腺癌MCF7细胞中超表达PAK4,而在乳腺癌MDA-MB-231细胞中干扰PAK4表达,通过迁移和侵袭实验检测其对乳腺癌细胞迁移侵袭的影响,荧光定量法和免疫印迹分析检测PAK4、E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin mRNA和蛋白质表达量变化,免疫印迹法检测EMT相关转录激活因子Snail、Slug表达量变化.结果:MCF7细胞超表达PAK4后,细胞的迁移侵袭能力显著增加,并且上皮标志分子E-Cadherin蛋白表达下调,而间质标志分子N-Cadherin和Vimentin蛋白则表达上调,EMT相关转录激活因子Slug表达量增加;MDA-MB-231细胞中,抑制内源PAK4表达能显著降低细胞的迁移侵袭能力,上调E-Cadherin蛋白表达,下调N-Cadherin、Vimentin和Slug蛋白的表达.结论:PAK4通过上调Slug促进乳腺癌发生上皮间质转化,可作为抑制乳腺癌转移的分子靶点. 展开更多
关键词 乳腺癌 p21蛋白激活激酶4 上皮间质转化
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CEA迷你基因串联体疫苗免疫小鼠脾细胞对CEA阳性肿瘤细胞的杀伤作用及疫苗的安全性评价 预览
9
作者 方艳秋 魏海峰 +5 位作者 李丹 米旭光 李首庆 刘磊 谭岩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期217-219,225共4页
目的:观察CEA迷你基因串联体疫苗pcD NA-triC EA625-667免疫小鼠脾细胞对肿瘤细胞特异性杀伤作用并对疫苗免疫小鼠后的安全性进行评估。方法:BALB/c小鼠随机分为空白载体组(pcD NA3.0)、单倍体疫苗实验组(pcD NACEA625-667)、串... 目的:观察CEA迷你基因串联体疫苗pcD NA-triC EA625-667免疫小鼠脾细胞对肿瘤细胞特异性杀伤作用并对疫苗免疫小鼠后的安全性进行评估。方法:BALB/c小鼠随机分为空白载体组(pcD NA3.0)、单倍体疫苗实验组(pcD NACEA625-667)、串联体疫苗实验组(pcD NA-triC EA625-667),肌肉注射法免疫动物,每隔10 d免疫1次,共免疫4次,记录免疫小鼠的体重变化、存活情况以及检测血清ALT、肌酐水平。以疫苗免疫小鼠的脾细胞为效应细胞,以LDH释放法检测其对CEA阳性的小鼠肝癌细胞株(H22-CEA+)、胃癌细胞株(MFC-CEA+)、结肠癌细胞株(CT26-CEA+)以及CEA阴性小鼠肝癌细胞株(H22-CEA-)的特异性CTL的杀伤活性。结果:两种疫苗对CEA阳性的肝癌、胃癌及结肠癌细胞均具有较强的杀伤活性,与PcDNA3.0空载体组相比,差异有统计学意义(P〈0.01)。而对CEA阴性肿瘤细胞(H22-CEA-)则几乎无影响。迷你串联体基因疫苗pcD NA-triC EA+625-667对肝癌细胞H22-CEA及胃癌细胞MFC-CEA+的杀伤活性强于单倍体基因疫苗pcD NA-CEA625-667(P〈0.05)。疫苗免疫对小鼠的存活状态、体重变化及肝肾功能指标均无影响。结论:CEA迷你基因疫苗安全有效,能够诱导肿瘤特异性CTL产生,且三倍体串联体疫苗免疫效果优于单倍体疫苗。 展开更多
关键词 癌胚抗原 迷你基因 基因疫苗 体外实验 抗肿瘤
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miR-126对结肠癌细胞生物学行为的影响及其在调控结肠癌EMT转化中的作用 预览 被引量:3
10
作者 魏海峰 米旭光 +4 位作者 刘磊 李首庆 谭岩 方艳秋 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1658-1661,共4页
目的:观察miR-126在不同转移潜能的人结肠癌细胞系中的表达情况及其对结肠癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响并探讨可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测结肠癌细胞系(SW480、SW620及HCT116)中miR-126的表达量。通过脂质体... 目的:观察miR-126在不同转移潜能的人结肠癌细胞系中的表达情况及其对结肠癌细胞增殖、侵袭转移能力的影响并探讨可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR检测结肠癌细胞系(SW480、SW620及HCT116)中miR-126的表达量。通过脂质体瞬时转染法将miR-126过表达(miR-126 mimics),并设置阴性对照组,然后采用CCK8法检测细胞的增殖能力,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell侵袭小室实验检测细胞的侵袭能力,Western blot实验检测E-cadherin和Vimentin蛋白表达量的变化。结果:相对于低转移潜能的结肠癌细胞株SW480,miR-126在高转移潜能的SW620和HCT116细胞中的表达降低。过表达miR-126可使SW620细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,E-cadherin蛋白表达增加,Vimentin蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:低表达的miR-126与结肠癌的转移密切相关,miR-126影响结肠癌细胞生物学行为的作用可能是通过调控EMT进程实现的。 展开更多
关键词 MIR-126 结肠癌 上皮细胞-间充质转化 肿瘤生物治疗
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AMHR2在人子宫内膜组织中的表达及相关研究 预览 被引量:1
11
作者 刘磊 +4 位作者 林秀英 孙牧男 付建华 谭岩 方艳秋 《中国实验诊断学》 2016年第11期1856-1858,共3页
目的探讨抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHR2))在IVF-ET患者的子宫内膜组织着床窗口期的表达及意义。方法采用免疫组织荧光染色检测AMHR2在IVF-ET患者黄体期子宫内膜组织中的表达情况。分离培养原代子宫内膜间质细胞,用HCG处理细胞48h,荧... 目的探讨抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHR2))在IVF-ET患者的子宫内膜组织着床窗口期的表达及意义。方法采用免疫组织荧光染色检测AMHR2在IVF-ET患者黄体期子宫内膜组织中的表达情况。分离培养原代子宫内膜间质细胞,用HCG处理细胞48h,荧光定量PCR检测HCG处理前后AMHR2基因表达情况;细胞化学染色检测HCG处理前后AMHR2蛋白表达情况。结果 AMHR2在黄体中期人子宫内膜组织表达;HCG处理后子宫内膜细胞中AMHR2的基因和蛋白水平均显著升高。结论 AMHR2在着床窗期子宫内膜间质细胞膜上表达,HCG可以增加其表达量,AMHR2可能作为预测子宫内膜容受性的参考指标。 展开更多
关键词 抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体 子宫内膜容受性 体外受精移植技术
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人工常规精液分析与计算机辅助精液质量分析的相关研究 预览 被引量:6
12
作者 王起来 谭岩 +2 位作者 马寅芙 方艳秋 《中国实验诊断学》 2016年第12期2083-2084,共2页
精液质量是反映男性生育力最直接、最主要的指标,对于男性不育患者的精液质量进行分析是首要检测项目,可以提供较为直观的诊断依据。以往常常采用经典的人工常规精液分析(SRA)方法进行检测,近年来,计算机技术迅速发展,计算机辅... 精液质量是反映男性生育力最直接、最主要的指标,对于男性不育患者的精液质量进行分析是首要检测项目,可以提供较为直观的诊断依据。以往常常采用经典的人工常规精液分析(SRA)方法进行检测,近年来,计算机技术迅速发展,计算机辅助精子分析(CASA)技术也逐渐普及,为了对男性不育患者精液质量各项检测项目提供更准确的数据,本研究采用SRA法和CASA法对精液的主要指标进行分析,现报道如下。 展开更多
关键词 计算机辅助精子分析 精液质量分析 常规精液分析 人工 男性生育力 CASA法 不育患者 计算机技术
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HCG对反复种植失败患者种植窗期子宫内膜NK细胞亚型的影响 预览 被引量:1
13
作者 林秀英 付建华 +1 位作者 方艳秋 《中国继续医学教育》 2015年第27期99-100,共2页
目的通过观察反复种植失败患者种植窗期HCG宫腔灌注后CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞百分比的变化,探讨HCG改变母胎界面的免疫微环境,介导免疫耐受的机制,进而为反复种植失败患者宫腔灌注HCG治疗提供理论依据。方法随机选择2013年1月... 目的通过观察反复种植失败患者种植窗期HCG宫腔灌注后CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞百分比的变化,探讨HCG改变母胎界面的免疫微环境,介导免疫耐受的机制,进而为反复种植失败患者宫腔灌注HCG治疗提供理论依据。方法随机选择2013年1月~2015年1月在吉林省人民医院生殖中心行辅助助孕反复胚胎种植失败的患者共42例,实验组(宫腔灌注HCG组)21例:在自然周期/促排周期排卵后3 d或激素替代周期黄体酮注射后3 d用移植管宫腔灌注重组HCG 500 IU,3 d后取内膜组织,分离NK细胞。分别用流式细胞仪鉴定计数CD56+CD16-NK细胞和CD56+CD16+NK细胞。对照组21例(单纯机械刺激组):自然周期/促排周期排卵后3 d或激素替代周期黄体酮注射后3 d用移植管单纯行预移植,3 d后取内膜组织,分离NK细胞。分别用流式细胞计数CD56+CD16-NK细胞和CD56+CD16+NK细胞。结果实验组CD56+CD16-NK细胞百分比高于对照组,差异有统计学意义。结论宫腔灌注HCG能提高反复种植失败患者种植窗期子宫内膜局部CD56+CD16-NK细胞百分比,诱导免疫耐受、进而提高子宫内膜容受性,促进胚胎植入。 展开更多
关键词 HCG 反复胚胎种植失败 子宫内膜 CD56+CD16-/CD56+CD16+NK细胞
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血管内皮生长因子对卵巢颗粒细胞中抗苗勒氏管激素受体的调节作用 被引量:4
14
作者 周光宇 +4 位作者 刘磊 林秀英 魏海峰 谭岩 方艳秋 《中国妇幼保健》 CAS 2015年第24期4204-4205,共2页
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、抗苗勒氏管激素(AMH)及其受体在调节卵巢储备功能中的作用机制。方法培养人卵巢颗粒细胞瘤细胞株KGN,通过荧光定量PCR、Western Blot等方法检测人重组VEGF(100 ng/ml)对卵巢中抗苗勒氏管激素受体... 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、抗苗勒氏管激素(AMH)及其受体在调节卵巢储备功能中的作用机制。方法培养人卵巢颗粒细胞瘤细胞株KGN,通过荧光定量PCR、Western Blot等方法检测人重组VEGF(100 ng/ml)对卵巢中抗苗勒氏管激素受体(AMHR2)、卵泡刺激素受体(FSHR)、抑制素B(INHBB)等基因表达的影响。结果人重组VEGF处理细胞24 h后,检测基因表达水平发生的变化。VEGF基因表达水平比较,差异无统计学意义(P〉0.05);VEGFR2基因表达水平比对照组升高3.0倍(P〈0.01);AMH表达水平降低至对照组的0.3倍(P〈0.01);AMHR2基因表达水平增加为对照组的2.5倍(P〈0.01);FSHR基因表达水平降低至对照组的0.7倍(P〈0.05);TGFβ基因表达水平增加为对照组的1.4倍(P〈0.01)。人重组VEGF处理24 h后,AMHR2蛋白表达为对照组的2.0倍(P〈0.01);人重组VEGF处理48 h后,AMHR2蛋白表达为对照组的5.0倍(P〈0.05)。结论 VEGF对卵巢颗粒细胞中AMHR2的调节作用可能是其参与调节卵巢储备功能的机制。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 卵巢颗粒细胞 抗苗勒氏管激素 受体
可逆抑制血管内皮生长因子(VEGF)表达转基因小鼠子宫基因转录谱分析 被引量:1
15
作者 方艳秋 +2 位作者 纪艳 郑耀武 谭岩 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期446-451,共6页
目的:研究血管内皮生长因子(vEGF)对子宫中基因表达水平及信号通路的调控作用。方法:利用四环素可逆调节VEGF基因表达的转基因小鼠,通过新一代测序数字基因表达谱(DGE)方法分析在VEGF表达被抑制情况下的子宫基因表达水平。采用... 目的:研究血管内皮生长因子(vEGF)对子宫中基因表达水平及信号通路的调控作用。方法:利用四环素可逆调节VEGF基因表达的转基因小鼠,通过新一代测序数字基因表达谱(DGE)方法分析在VEGF表达被抑制情况下的子宫基因表达水平。采用实时定量PCR验证部分表达异常的基因。结果:检测到在小鼠子宫中表达的基因约6×10^6个。其中在VEGF基因表达被抑制条件下,表达水平变化比较明显的基因有2398个,其中上调的基因为1231个,主要包括调节细胞内激酶基因、细胞分裂的基因、蛋白折叠的基因等;下调的基因为1167个,主要包括调节肌肉发育的基因、细胞内基质形成的基因、血管形成的基因等。荧光定量PCR验证表日月’基因表达水平变化与转录谱结果高度相关,VEGF抑制后小鼠子宫内表达上调的基因有P2ry14、Eln、Rnf187、Oxtr、Inhbb、Pabpnl、Car2和Mifl(r=0.972),表达下调的基因VEGF、Acta2、Pcx、Tnc、Igfbp3、Cnn1和Hopx(r=0.931)。结论:VEGF表达水平与子宫功能的维持密切相关,为不明原因不孕的诊治提供了新思路。 展开更多
关键词 四环素可逆调节系统 血管内皮生长因子(VEGF) 子宫 转录谱
阴式与腹腔镜下子宫肌瘤剔除的对比分析 预览
16
作者 付建华 林秀英 +1 位作者 方艳秋 《中国继续医学教育》 2015年第27期154-155,共2页
目的观察腹腔镜子宫肌瘤剔除术与经阴道子宫肌瘤剔除术的临床疗效。方法随机选取阴式子宫肌瘤剔除术50例(阴式组)与腹腔镜下子宫肌瘤剔除术50例(腹腔镜组),观察并比较两组临床疗效。结果两组术中出血量及住院时间上差异均无统计学... 目的观察腹腔镜子宫肌瘤剔除术与经阴道子宫肌瘤剔除术的临床疗效。方法随机选取阴式子宫肌瘤剔除术50例(阴式组)与腹腔镜下子宫肌瘤剔除术50例(腹腔镜组),观察并比较两组临床疗效。结果两组术中出血量及住院时间上差异均无统计学意义(P〉0.05)。腹腔镜组在手术时间及住院费用上高于阴式组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论经阴道子宫肌瘤剔除术具有时间短,住院费用较低的优点,可根据患者的情况进行选择。 展开更多
关键词 子宫肌瘤剔除术 阴式手术 腹腔镜
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单宁酸对糖尿病模型大鼠肾脏氧化应激水平及炎性因子表达的抑制作用 被引量:2
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作者 魏海峰 李才 +4 位作者 刘磊 米旭光 谭岩 方艳秋 《中国医药》 2014年第10期1479-1484,共6页
目的 观察单宁酸对糖尿病模型大鼠抗氧化能力的影响及对机体微炎症状态的改善作用.方法 选择6周龄健康雄性Wistar大鼠68只,随机选取其中8只作为正常对照组,其余60只给予高糖高脂饲料喂养4周后以链脲佐菌素(STZ)按52 mg/kg单次腹腔注... 目的 观察单宁酸对糖尿病模型大鼠抗氧化能力的影响及对机体微炎症状态的改善作用.方法 选择6周龄健康雄性Wistar大鼠68只,随机选取其中8只作为正常对照组,其余60只给予高糖高脂饲料喂养4周后以链脲佐菌素(STZ)按52 mg/kg单次腹腔注射制造糖尿病大鼠模型,造模成功的大鼠进一步随机分为模型组、氨基胍组、单宁酸低剂量组、单宁酸高剂量组,各15只.氨基胍组及单宁酸低、高剂量组分别腹腔注射氨基胍40 mg/(kg·d)及单宁酸[20、30 mg/(kg·d)],正常对照组和模型组给予0.9%氯化钠注射液[30 mg/(kg·d)],10周后处死大鼠取材.化学比色法检测各组大鼠血清及肾皮质丙二醛含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;酶联免疫吸附测定法检测肾组织匀浆8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量、血清C反应蛋白(CRP)水平;免疫组织化学检测肾组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应检测肾组织ICAM-1、MCP-1 mRNA表达.结果 单宁酸低、高剂量组大鼠血清丙二醛含量明显低于模型组[(23.5±8.5)、(19.8±5.3) μmol/L比(35.5±14.6) μmol/L](P<0.05或P<0.01),GSH-Px、总SOD及CAT活性明显高于模型组[GSH-Px:(295 ±58)、(322±52) U/L比(232 ±72) U/L,总SOD:(75±13)、(86±15) U/ml比(49±13) U/ml,CAT:(6.9±2.2)、(7.2±2.9) U/ml比(3.7±1.4) U/ml](P<0.05或P<0.01);单宁酸低、高剂量组大鼠肾组织匀浆丙二醛含量明显低于模型组[(344±120)、(269±52) μmol/L比(464±62) μmol/L](P<0.05或P<0.01);单宁酸高剂量组GSH-Px活性明显高于模型组[(32 ±8)U/L比(17±4) U/L](P<0.01);单宁酸低剂量组总SOD活性明显高于模型组[(23±4)U/ml比(17±4) U/ml] (P<0.05);单宁酸高剂量组大鼠肾组织8-O 展开更多
关键词 糖尿病肾病 单宁酸 氧化应激 微炎症 8-羟基脱氧鸟苷
单宁酸对糖尿病大鼠肾组织和肾小球系膜细胞培养上清中8-OHdG及3-NT含量的影响 预览 被引量:3
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作者 魏海峰 刘磊 +4 位作者 米旭光 李首庆 谭岩 方艳秋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1040-1045,共6页
目的:观察单宁酸( TA)对糖尿病( DM)模型大鼠肾脏形态和功能的影响,并从氧化应激、亚硝基化应激角度探讨单宁酸改善作用的机制。方法:6周龄健康雄性Wistar大鼠68只,随机选取8只作为正常对照组,其余60只给予高糖高脂饲料喂养4... 目的:观察单宁酸( TA)对糖尿病( DM)模型大鼠肾脏形态和功能的影响,并从氧化应激、亚硝基化应激角度探讨单宁酸改善作用的机制。方法:6周龄健康雄性Wistar大鼠68只,随机选取8只作为正常对照组,其余60只给予高糖高脂饲料喂养4周后以链脲佐菌素( STZ)按52 mg/kg体重单次腹腔注射制造糖尿病大鼠模型,造模成功的大鼠进一步随机分为模型组、氨基胍( Aminoguanidine ,AG)组、单宁酸低剂量组、单宁酸高剂量组。氨基胍组及单宁酸低高剂量组分别腹腔注射AG[40 mg/(kg· d)]及单宁酸[20及30 mg/(kg· d)],正常对照组和模型组给予生理盐水[30 mg/(kg· d)],10周后处死大鼠取材。 HE染色观察DM大鼠肾脏形态学变化,进行肾脏功能相关生化指标检测,ELISA法检测各组大鼠肾组织匀浆8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)及3-硝基酪氨酸(3-NT)含量;同时体外培养肾小球系膜细胞,分别用高浓度葡萄糖(30 mmol/L)及AGEs (250 mg/L)处理,同时用不同浓度单宁酸(10、20、40及80μmol/L)进行干预,设立相应对照组,培养48 h后留取培养上清, ELISA法检测细胞各条件培养基中8-OHdG及3-NT的含量。结果:单宁酸可有效改善DM大鼠肾脏病理改变及改善肾功能。DM模型大鼠肾组织匀浆中以及高糖及AGEs作用下GMC培养上清中8-OHdG及3-NT的含量均显著增多。单宁酸可减少DM大鼠肾组织及高糖、AGEs作用下GMC培养上清中8-OHdG及3-NT的含量。结论:单宁酸可能通过降低肾脏氧化应激、亚硝基化应激机制从而改善糖尿病大鼠肾脏结构和功能的损害。 展开更多
关键词 糖尿病 氧化应激 亚硝基化应激 肾小球系膜细胞 8-羟基脱氧鸟苷 3-硝基酪氨酸
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Survivin在卵巢癌细胞顺铂耐药中的作用
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作者 姜艳丽 方艳秋 +3 位作者 魏海峰 米旭光 谭岩 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第35期5908-5910,共3页
目的:探讨Survivin在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法:应用RT-PCR和Western Blot检测卵巢癌顺铂敏感细胞株SKOV3和耐药株SKOV3/DDP中survivin表达,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞技术检测卵巢癌细胞的凋亡率,Survivin反义寡核苷酸被... 目的:探讨Survivin在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法:应用RT-PCR和Western Blot检测卵巢癌顺铂敏感细胞株SKOV3和耐药株SKOV3/DDP中survivin表达,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞技术检测卵巢癌细胞的凋亡率,Survivin反义寡核苷酸被脂质体转染至SKOV3/DDP细胞中。结果:SKOV3/DDP中Survivin mRNA的相对表达强度为(1.21±0.59),显著高于SKOV3细胞中(0.54±0.23),差异有统计学意义(P〈0.05)。Survivin蛋白在两种细胞的相对表达强度分别是SKOV3细胞(0.87±0.48)和SKOV3/DDP细胞(2.07±1.01),差异有统计学意义(P〈0.05)。Survivin-ASOD可降调卵巢癌细胞中Survivin的表达,并显著增加细胞对顺铂敏感性。结论:卵巢癌细胞对顺铂耐药可能与SKOV3/DDP细胞中Survivin表达增加有关。 展开更多
关键词 卵巢癌 细胞耐药 顺铂 凋亡抑制蛋白
Akt磷酸化在A549细胞抵抗rsTRAIL蛋白诱导细胞凋亡的研究 预览
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作者 刘磊 方艳秋 +3 位作者 齐亚灵 魏海峰 谭岩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期630-632,638共4页
目的:研究Akt磷酸化抵抗rsTRAIL蛋白诱导肺癌A549细胞株凋亡的作用机制。方法:rsTRAIL蛋白和哌立福新单独和联合作用于细胞株A549,Western blot检测A549细胞中Akt磷酸化水平变化、c-FLIPLL表达水平变化、caspase-8蛋白活化变化情况... 目的:研究Akt磷酸化抵抗rsTRAIL蛋白诱导肺癌A549细胞株凋亡的作用机制。方法:rsTRAIL蛋白和哌立福新单独和联合作用于细胞株A549,Western blot检测A549细胞中Akt磷酸化水平变化、c-FLIPLL表达水平变化、caspase-8蛋白活化变化情况。流式细胞术进行细胞凋亡检测。 MTT法检测A549细胞增殖率。结果:Western blot结果显示,rsTRAIL蛋白可以导致A549细胞中Akt磷酸化水平的增加,哌立福新能够抑制A549细胞中Akt的磷酸化水平及c-FLIPLL表达水平,增强A549细胞中caspase-8的活化。哌立福新能提升rsTRAIL蛋白诱导A549细胞的细胞凋亡率至(76.5±3.02)%和杀伤活性到(83.2±2.54)%。结论:Akt磷酸化是导致A549细胞对抵抗rsTRAIL 诱导细胞凋亡的重要原因,抑制其活性可以促进rsTRAIL蛋白发挥抗NSCLC的活性。 展开更多
关键词 A549细胞株 重组TRAIL蛋白 哌立福新
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