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不同启动子和MAR组合对重组CHO细胞转基因表达的影响
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作者 李琴 王小引 +4 位作者 赵春 田政伟 徐丹华 王天云 张俊河 《四川大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第1期18-23,共6页
目的分析不同启动子与核基质结合区(MAR)组合对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中转基因表达的影响。方法将β-珠蛋白MAR(gMAR)与人巨细胞病毒早期启动子(CMV-IE)、猿猴空泡病毒40(SV40)启动子组合,构建两种不同启动子与gMAR组合的表... 目的分析不同启动子与核基质结合区(MAR)组合对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中转基因表达的影响。方法将β-珠蛋白MAR(gMAR)与人巨细胞病毒早期启动子(CMV-IE)、猿猴空泡病毒40(SV40)启动子组合,构建两种不同启动子与gMAR组合的表达载体。转染CHO细胞,48h后观察增强型绿色荧光蛋白(eGFP)的瞬时表达情况;G418筛选稳定转化的细胞株,流式细胞术分析稳定CHO细胞eGFP基因的表达水平,实时荧光定量PCR(qPCR)分析eGFP基因的相对拷贝数。结果不含gMAR的表达载体,CMV-IE启动子eGFP表达明显强于8740启动子;gMAR能提高CMV-IE启动子eGFP表达水平,但在SV40启动子中并未表现出提高作用。两侧含gMAR的表达载体比一侧含有gMAR的表达载体CMV-IE启动子eGFP表达荧光强;G418加压筛选后,含8740启动子的gMAR表达载体eGFP基因表达不稳定,荧光逐渐减弱,因此,后期只对稳定表达eGFP基因的CMV-IE启动子表达载体进行流式细胞术和qPCR分析。流式细胞术检测结果显示,一侧含有与两侧含有gMAR的CMV-IE启动子表达载体eGFP基因表达量比不含gMAR的表达载体分别提高9.85倍和12.94倍;qPCR结果显示,以不含gMAR的载体的eGFP基因拷贝数为1,一侧含有与两侧含有gMAR的CMV-IE启动子表达载体eGFP基因相对拷贝数为3.68和9.25。结论CMV-IE启动子活性强于SV40启动子;gMAR能提高CMV-IE启动子外源基因的表达水平,其机制可能与增加基因拷贝数相关。 展开更多
关键词 核基质结合区 CMV启动子 SV40启动子 CHO细胞
富含GC的DNA片段对中国仓鼠卵巢细胞中转基因表达的影响及其位置效应 预览
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作者 陈思佳 赵春 +2 位作者 张俊河 王小引 王天云 《新乡医学院学报》 CAS 2017年第9期794-797,共4页
目的分析富含GC的DNA片段对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中转基因表达水平的影响及其位置效应。方法人工合成富含GC的DNA片段,将其克隆到表达载体的表达盒的5'、3'端及两端,构建在载体不同位置插入富含GC DNA片段的3个新表达载体(p IRES... 目的分析富含GC的DNA片段对中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中转基因表达水平的影响及其位置效应。方法人工合成富含GC的DNA片段,将其克隆到表达载体的表达盒的5'、3'端及两端,构建在载体不同位置插入富含GC DNA片段的3个新表达载体(p IRES-G1、p IRES-G2和p IRES-G3),分别转染CHO细胞并用荧光显微镜进行观察;对照载体为p IRES-EGFP。采用G418筛选稳定细胞株,流式细胞术分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测其转基因拷贝数。结果成功构建了在载体不同位置含有GC DNA片段的3个载体,瞬时及稳定转染结果显示,在载体表达盒两端及3'端插入富含GC DNA片段能够明显提高EGFP在CHO细胞中的表达水平。与对照载体比较,稳定表达情况下载体表达盒两端及3'端插入富含GC DNA能分别提高转基因表达水平约1.39、1.32倍,而在5'端插入富含GC DNA片断对于提高基因表达水平作用尚不明显。表达盒两端及3'端插入富含GC DNA片段的转基因拷贝数比对照载体提高了约1.32、1.24倍。结论富含GC的DNA片段在CHO细胞提高转基因表达与其在载体上的位置有关,在载体表达盒两端或3'端插入一段富含GC的DNA片段可以提高转基因表达水平。 展开更多
关键词 富含GC的DNA片段 转基因 位置效应
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重组CHO细胞中不同启动子对含MAR表达载体转基因表达的影响 预览
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作者 李琴 赵春 +2 位作者 王小引 孙秋丽 王天云 《重庆医学》 北大核心 2017年第17期2386-2388,共3页
目的分析在重组CHO细胞中不同启动子对含核基质结合区(MAR)表达载体转基因表达的影响。方法 PCR扩增CMV启动子及β-珠蛋白MAR,构建含β-珠蛋白MAR表达载体pCAT1,随后将CMV启动子替代pCAT1上SV40启动子构建CMV启动子驱动的表达载体pCAT... 目的分析在重组CHO细胞中不同启动子对含核基质结合区(MAR)表达载体转基因表达的影响。方法 PCR扩增CMV启动子及β-珠蛋白MAR,构建含β-珠蛋白MAR表达载体pCAT1,随后将CMV启动子替代pCAT1上SV40启动子构建CMV启动子驱动的表达载体pCAT2。pCAT1、pCAT2不含MAR的对照载体同时转染CHO细胞,G418筛选稳定转化的细胞株,酶联免疫吸附试验(ELISA)分析氯霉素乙酰转移酶(CAT)基因的表达水平。结果含MAR表达载体转染的细胞CAT酶表达量比不含MAR的pCATG和pCAT3载体转染的细胞高,分别提高2.14倍和1.25倍(P〈0.05);而由SV40启动子驱动含MAR表达载体pCAT1转染的细胞CAT酶表达水平明显比由CMV启动子驱动的pCAT2载体高3.26倍(P〈0.05)。结论在稳定重组CHO细胞中MAR能够提高转基因的表达水平,SV40启动子与MAR组合其启动效率优于CMV启动子与MAR组合。 展开更多
关键词 MAR 启动子 转基因表达 CHO细胞
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MAR提高重组CHO细胞中转基因表达的分子特性分析
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作者 孙秋丽 张俊河 +2 位作者 赵春 王小引 王天云 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期64-68,共5页
分析核基质结合区(matrix attachment region,MAR)调控转基因表达的分子序列特征,鉴定能有效提高CHO细胞转基因表达的MAR特征性元件。将人β-珠蛋白MAR片段从5'到3'端分为6个分段(1-540,421-1 020,901-1 500,1 381-1 980,1 861-2 4... 分析核基质结合区(matrix attachment region,MAR)调控转基因表达的分子序列特征,鉴定能有效提高CHO细胞转基因表达的MAR特征性元件。将人β-珠蛋白MAR片段从5'到3'端分为6个分段(1-540,421-1 020,901-1 500,1 381-1 980,1 861-2 460,2 341-2 999位置),分别采用PCR进行克隆,经测序证实正确后,分别连接到含有氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因的表达载体SV40启动子及上游,构建β-珠蛋白MAR渐次片段介导的表达载体,转染CHO细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,ELISA分析CAT报告基因的表达水平,生物信息学分析MAR序列特征。结果表明,β-珠蛋白MAR全长能显著提高转基因的表达,6个渐次片段相比较,421-1 020位的第2个分段和901-1 500位的第3个分段提高转基因表达作用显著。生物信息学分析结果显示,MAR-like motif有助于转基因表达提高。 展开更多
关键词 核基质结合区 CHO细胞 渐次克隆 转基因表达
内含子方向对MAR表达载体重组CHO细胞转基因表达的调控作用
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作者 李琴 赵春 +2 位作者 王小引 孙秋丽 王天云 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期189-191,243共4页
目的分析内含子方向对核基质结合区(matrix attachment region,MAR)表达载体在重组中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中对转基因表达水平的影响。方法 PCR扩增β-珠蛋白MAR,克隆至表达载体上,构建含MAR表达载体,将载体... 目的分析内含子方向对核基质结合区(matrix attachment region,MAR)表达载体在重组中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中对转基因表达水平的影响。方法 PCR扩增β-珠蛋白MAR,克隆至表达载体上,构建含MAR表达载体,将载体上一段内含子序列酶切正向、反向连接到载体上。酶切和测序鉴定正确后,转染中国仓鼠卵巢CHO细胞,G418筛选稳定转化的细胞株,ELISA分析氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因的表达水平。结果具有正向内含子的含MAR和不含MAR的表达载体CAT基因表达水平均高于含反向内含子的表达载体(P〈0.05),反向内含子存在情况下,MAR不能提高转基因表达。结论在重组CHO细胞中,内含子的方向影响转基因表达水平,正向内含子和MAR能提高转基因表达,反向内含子不能提高转基因表达水平。 展开更多
关键词 核基质结合区 内含子 转基因表达 CHO细胞
漆斑菌Myrotheciumsp.IMER1液体和固体发酵产胆红素氧化酶分析 预览
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作者 刘友勋 闫明阳 +1 位作者 黄娟 赵春 《科技与创新》 2015年第9期5-7,共3页
为了提高漆斑菌Myrothecium sp.IMER1的胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOX)产量,分析了其液体和固体发酵产酶的特性。首先分析了该菌株液体和固体发酵产 BOX 的时间变化曲线,对其所产的胞外酶进行了活性电泳,进一步分析了其液... 为了提高漆斑菌Myrothecium sp.IMER1的胆红素氧化酶(bilirubin oxidase,BOX)产量,分析了其液体和固体发酵产酶的特性。首先分析了该菌株液体和固体发酵产 BOX 的时间变化曲线,对其所产的胞外酶进行了活性电泳,进一步分析了其液体产酶的模型和宏观动力学内容。结果表明,菌株IMER1在液体发酵中第5天的产BOX酶量最大,其固体发酵产酶量最大时间也是在第5天,但是,其固体发酵能持续高产BOX。从BOX的底物活性显色中可知,在固体和液体发酵的粗酶液中都能检测到BOX,并且没有同工酶出现;而BOX生物合成模式为中期合成型,通过数据计算和模拟得出了产酶动力学方程。 展开更多
关键词 胆红素氧化酶 漆斑菌 液体发酵 固体发酵
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响应面法对漆斑菌液体发酵产胆红素氧化酶条件的优化 预览
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作者 刘友勋 闫明阳 +1 位作者 赵春 黄娟 《湖北农业科学》 2015年第5期1150-1154,共5页
对漆斑菌(Myrotheciumsp.IMER1)菌株液体发酵产胆红素氧化酶的条件进行了优化。采用单因素试验筛选出最适碳源为葡萄糖,氮源为硝酸铵,pH为7,温度为28℃和最有效促进产酶的金属离子为Cu^2+。在此基础上.利用Plackett—Burman设... 对漆斑菌(Myrotheciumsp.IMER1)菌株液体发酵产胆红素氧化酶的条件进行了优化。采用单因素试验筛选出最适碳源为葡萄糖,氮源为硝酸铵,pH为7,温度为28℃和最有效促进产酶的金属离子为Cu^2+。在此基础上.利用Plackett—Burman设计对影响产酶因素的效应进行评价.筛选出具有显著影响的3个因素葡萄糖、pH和温度。用最陡爬坡路径逼近最大产酶区域后,利用响应面中心组合设计对显著因素进行优化,得出pH、温度和葡萄糖分别为5.7、28℃、8g/L时,优化后液体发酵液中胆红素氧化酶活力提高到0.627U/mL.比未优化前的酶活力0.214U/mL提高了近2倍。结果表明单因素与响应面结合法可优化菌株IMERl液体发酵产胆红素氧化酶的条件. 展开更多
关键词 胆红素氧化酶 漆斑菌(Myrothecium sp.IMER1) Plackett—Burman设计 响应面法
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分层教学在医学生物化学与分子生物学实验教学中的应用 预览 被引量:5
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作者 李翠萍 张伟 赵春 《科教导刊》 2015年第9Z期111-112,共2页
医学生物化学与分子生物学实验是联系医学理论知识与实践应用的重要学科,对培养学生的动手能力、科研素质、创新能力等有重要的启示作用。但传统医学生物化学与分子生物学实验教学存在理论知识更新迅速,实验内容陈旧落后;学生被动参与... 医学生物化学与分子生物学实验是联系医学理论知识与实践应用的重要学科,对培养学生的动手能力、科研素质、创新能力等有重要的启示作用。但传统医学生物化学与分子生物学实验教学存在理论知识更新迅速,实验内容陈旧落后;学生被动参与实验课程,机械重复课本操作等局限性,不利于医学学生参与实践和发展创新能力。针对这些弊端,本文根据各学生对生物化学与分子生物学知识的掌握程度、能力水平及个人发展方向等教育资源的差异,提出"分层教学"的概念,将实验课分为基础实验、综合实验、设计性实验,并分析了"分层教学"对生物化学与分子生物学实验教学改革的重要作用。 展开更多
关键词 医学生物化学 分子生物学 实验教学 分层教学 教学改革
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活性电泳切胶法分离白腐菌(Trametes sp.B1)2种漆酶同工酶及其性质研究 预览 被引量:2
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作者 刘友勋 黄娟 +3 位作者 闫明阳 张文博 赵春 张煜 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第9期54-57,共4页
对白腐菌(Trametes sp.)菌株B1的固体发酵粗酶液进行活性电泳后发现含有5种漆酶同工酶。硫酸铵沉淀、离子交换柱层析和Sephadex G100柱层析的收集液中包含有2种带电荷和分子量接近的漆酶同工酶,进一步利用活性电泳切胶法纯化出这2种同工... 对白腐菌(Trametes sp.)菌株B1的固体发酵粗酶液进行活性电泳后发现含有5种漆酶同工酶。硫酸铵沉淀、离子交换柱层析和Sephadex G100柱层析的收集液中包含有2种带电荷和分子量接近的漆酶同工酶,进一步利用活性电泳切胶法纯化出这2种同工酶,用SDS-PAGE证明为单一漆酶,它们的分子量分别为64 ku(Lac1)和62 ku(Lac2),并对其理化性质进行了研究。Lac1漆酶反应的最适p H值为2.2,最适温度为50℃,氧化ABTS的Km值为1.952 mmol/L;Lac2漆酶反应的最适p H值为2.2,最适温度为40℃,氧化ABTS的Km值为0.255 mmol/L。 展开更多
关键词 白腐菌 漆酶同工酶 纯化 活性电泳 酶学性质
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生物化学中“物质代谢”相关章节的教学方法探索 预览 被引量:1
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作者 赵春 张煜 谭利娜 《河南职工医学院学报》 2012年第5期698-700,共3页
生物化学是一门研究生命化学的科学,它在分子水平上探讨生命的本质,即研究机体的分子结构与功能、物质代谢与调节及在生命活动中的作用。同时,生物化学又是一门重要的医学基础课程,它与生理学、药理学、病理学、免疫学等学科有着广泛的... 生物化学是一门研究生命化学的科学,它在分子水平上探讨生命的本质,即研究机体的分子结构与功能、物质代谢与调节及在生命活动中的作用。同时,生物化学又是一门重要的医学基础课程,它与生理学、药理学、病理学、免疫学等学科有着广泛的联系与交叉,并与临床医学关系密切。许多疾病的病因、发病机制都需要用生物化学的知识从分子水 展开更多
关键词 生物化学 物质代谢 教学方法
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对氧磷酶1基因Gln192Arg多态性与阿尔茨海默病相关的Meta分析 被引量:1
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作者 赵春 谭利娜 张耀东 《社区医学杂志》 2012年第4期 7-11,共5页
目的评价对氧磷酶1基因(PON1)Gln192Arg多态性与阿尔茨海默病(AD)的相关性。方法检索PubMed、EBSCO、中国学术期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库,收集PON1基因Gln192Arg多态性与AD相关性的文献。... 目的评价对氧磷酶1基因(PON1)Gln192Arg多态性与阿尔茨海默病(AD)的相关性。方法检索PubMed、EBSCO、中国学术期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库,收集PON1基因Gln192Arg多态性与AD相关性的文献。检索时间为建库至2011年9月。用Meta分析的方法检测基因型QR vsQQ、RR vs.QQ、QR+RR vs.QQ、和R vs Q在AD组与对照组中是否有差异。结果共纳入6篇文献,共有AD患者1270例,健康对照1335例。对总体人群进行Meta分析,未发现等位基因R与AD相关[OR=1.09,95%CI(0.84,1.42),P=0.51;]基因型QR vs QQ、RR vs.QQ、QR+RR vs.QQ在AD组与对照组中均无显著差异。结论本研究未鉴定出PON1基因Gln192Arg位点等位基因和基因型与AD相关。 展开更多
关键词 META分析 对氧磷酶1基因 阿尔茨海默病 基因多态性
小鼠感染伯氏疟原虫后TLR2、9、11及其下游因子表达量的变化 被引量:3
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作者 孙斐 赵春 许兵红 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第10期759-761,共3页
目的了解小鼠感染伯氏疟原虫后Toll样受体(TLRs)的免疫作用。方法用伯氏疟原虫感染小鼠,采用RT-PCR、ELISA等方法测定TLRs的mRNA和下游炎症因子血清水平。结果小鼠感染伯氏疟原虫后TLR2、9、11的mRNA分别升高3、3.5和6倍;在感染后96h,... 目的了解小鼠感染伯氏疟原虫后Toll样受体(TLRs)的免疫作用。方法用伯氏疟原虫感染小鼠,采用RT-PCR、ELISA等方法测定TLRs的mRNA和下游炎症因子血清水平。结果小鼠感染伯氏疟原虫后TLR2、9、11的mRNA分别升高3、3.5和6倍;在感染后96h,IL-6、TNF-α及IL-12均达到峰值,分别为10 023U/ml、485pg/ml和186pg/ml;IL-18持续升高,在144h为4 225pg/ml。结论小鼠感染伯氏疟原虫后TLRs mRNA表达上调,并增强下游炎症因子的表达。 展开更多
关键词 TOLL样受体 RT-PCR 疟原虫 伯氏 小鼠
亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与精神分裂症关系的Meta分析 预览 被引量:2
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作者 谭利娜 赵春 +3 位作者 张永红 王敏 卢爱莲 李强 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期1595-1597,共3页
目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性与精神分裂症易感性的关系。方法检索精神分裂症组和对照组MTHFR基因C677T位点多态性的优势比(0R)值或相对危险度(RR)值为效应指标的相关文献,对符合入选标准的文献,应... 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性与精神分裂症易感性的关系。方法检索精神分裂症组和对照组MTHFR基因C677T位点多态性的优势比(0R)值或相对危险度(RR)值为效应指标的相关文献,对符合入选标准的文献,应用RevMan5.0软件对各研究结果进行异质性检验和效应值合并,并进行敏感性分析和偏倚评估。结果纳入MTHFR基因C677T位点多态性文献11篇,共计病例5719例,其中,精神分裂症组2630例,对照组3089例,各研究异质性检验(P〈0.05),采用随机效应模型,第677位点CT、TT、CT+TT基因型的合并OR值(95%CI)分别为1.20(0.99-1.46)、1.58(1.09-2.29)、1.28(1.03-1.59),Z值分别为1.86、2.44、2.27,P值分别为0.06、0.01、0.02。除CT基因型的敏感性分析不稳定外,其他两型稳定。3种基因型的漏斗图形均对称。结论MTHFR基因677TT、CT+TT基因型为精神分裂症发生的危险因素。 展开更多
关键词 亚甲基四氢叶酸还原酶 精神分裂症 多态性 单核苷酸 META分析
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老年大鼠脑脂肪酸含量与脂肪酸β-氧化的关系 预览
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作者 杨磊 石如玲 +3 位作者 张煜 赵春 付云 黄艳梅 《新乡医学院学报》 CAS 2011年第6期 692-695,共4页
目的比较老年及青年大鼠脑脂肪酸含量、肝脏脂肪酸β-氧化关键酶表达水平的不同,探讨衰老时脂肪酸含量的变化与脂肪酸β-氧化功能的关系。方法老年组和青年组大鼠各10只,用气相色谱法分析脑皮质脂肪酸含量,用反转录聚合酶链反应(RT-PC... 目的比较老年及青年大鼠脑脂肪酸含量、肝脏脂肪酸β-氧化关键酶表达水平的不同,探讨衰老时脂肪酸含量的变化与脂肪酸β-氧化功能的关系。方法老年组和青年组大鼠各10只,用气相色谱法分析脑皮质脂肪酸含量,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定过氧化物酶体β-氧化关键酶脂酰辅酶A氧化酶(AOX1)、线粒体β-氧化关键酶肉碱脂酰转移酶1(CPT1)及过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)mRNA的表达水平,用游离脂肪酸试剂盒测定血清游离脂肪酸(FFA)含量。结果与青年组相比,老年组大鼠脑内C180、C204、C226含量降低(P〈0.05或P〈0.01),脑内C161、C181、C200、C201、C221、C240、C241含量升高(P〈0.05或P〈0.01),肝脏AOX1、CPT1、PPARαmRNA水平降低(P〈0.05),血清总FFA含量降低(P〈0.05)。结论衰老时大鼠脑脂肪酸含量变化的原因可能由线粒体和过氧化物酶体β-氧化功能降低所致。 展开更多
关键词 脂肪酸 β-氧化 线粒体 过氧化物酶体 老年
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坚持理论联系实际原则对生物化学教学改革的指导作用 被引量:3
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作者 石如玲 张煜 +4 位作者 张艳芳 赵春 王天云 杨保胜 谷兆侠 《中华医学教育杂志》 2010年第4期532-533,569共3页
本文分析了生物化学教学中存在的问题,提出必须坚持理论联系实际原则,全面改革生物化学教学。具体措施为:明确生物化学教学目标,合理安排教学内容;密切联系实际,激发学生学习兴趣,提高课堂教学效果;优化实验教学内容,开展创新... 本文分析了生物化学教学中存在的问题,提出必须坚持理论联系实际原则,全面改革生物化学教学。具体措施为:明确生物化学教学目标,合理安排教学内容;密切联系实际,激发学生学习兴趣,提高课堂教学效果;优化实验教学内容,开展创新实践,培养学生实践能力和创新意识;建立多元化考试方式,改革考试内容,注重实际应用能力。最后,对生物化学教学改革的实践效果进行了分析。 展开更多
关键词 生物化学 教学改革 理论 实践
卵巢切除合并慢性铝染毒大鼠中枢外某些元素含量的变化及雌激素的干预效应
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作者 赵长安 许娜 +2 位作者 张文 赵春 昝玉玺 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期共5页
目的探讨卵巢切除合并慢性铝中毒及雌激素干预对某些元素在中枢外组织分布和尿液排泄的影响。方法6月龄雌性SD大鼠40只,随机等分为卵巢假切组(Sham组)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除合并慢性铝中毒组(OVX+Al组)、卵巢切除合并慢性铝中... 目的探讨卵巢切除合并慢性铝中毒及雌激素干预对某些元素在中枢外组织分布和尿液排泄的影响。方法6月龄雌性SD大鼠40只,随机等分为卵巢假切组(Sham组)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除合并慢性铝中毒组(OVX+Al组)、卵巢切除合并慢性铝中毒及尼尔雌醇灌胃组(OVX+Al+E2组)。Sham组,切除腹腔卵巢体积大小的脂肪组织,以普通饲料喂养;OVX组,切除双侧卵巢,以普通饲料喂养;OVX+Al组,双侧卵巢切除,并以25mg/g的AlCl3.6H2O的饲料喂养;OVX+Al+E2组,双侧卵巢切除,以25mg/g的AlCl3.6H2O的饲料喂养并以尼尔雌醇灌胃(1次/周,每次0.125mg/kg)。手术3个月后,代谢笼收集24h尿液,处死动物取组织。用等离子体发射光谱仪测定肝脏、肾脏、心脏、脊髓、胫骨、骨骼肌和尿的硝解溶液中某些元素含量。结果(1)与Sham组比较,OVX组的心脏Zn降低(P<0.001)。(2)与Sham组比较,OVX+Al组的心脏Zn降低(P<0.001),Si升高(P<0.05);胫骨Mg降低(P<0.05);骨骼肌Cu升高(P<0.001),Se、Si降低(P<0.001,P<0.05);... 展开更多
关键词 卵巢切除 雌激素 染毒 心脏 肝脏 肾脏 脊髓 骨骼肌 胫骨 尿液 阿尔茨海默病
丝光绿蝇抗菌肽针刺诱导及初步电泳分离 预览 被引量:12
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作者 许兵红 赵春 曾莉萍 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期 114-117,共4页
目的探讨丝光绿蝇抗菌肽的诱导及电泳分离方法。方法丝光绿蝇3龄幼虫针刺体壁诱导后,第48小时提取其血淋巴,设置3、5、7、10μl不同的加样量和pH值60、6.5、7.0的琼脂平板,观察对溶壁微球菌的抑菌效果。置于100、80℃水浴30s、1、3... 目的探讨丝光绿蝇抗菌肽的诱导及电泳分离方法。方法丝光绿蝇3龄幼虫针刺体壁诱导后,第48小时提取其血淋巴,设置3、5、7、10μl不同的加样量和pH值60、6.5、7.0的琼脂平板,观察对溶壁微球菌的抑菌效果。置于100、80℃水浴30s、1、3和5min后,观察不同温度处理不同时间后的去杂蛋白效果和对溶壁微球菌的抑菌效果,并对各样品进行电泳分离。结果随加样量增加抑菌环直径增大,10μl环太大易变形,不易测量,以加7μl血淋巴对溶壁微球菌的抑菌效果最佳。平板pH值6.0时,对溶壁微球菌的抑菌环直径最大,随pH值增加而抑菌环直径减小。血淋巴100℃水浴30s、1min仍有抑菌活性,处理3和5min无抑菌活性;80℃水浴30s至5min均有抑菌活性,电泳显示100℃处理3和5min的样品与其他相比缺少2条蛋白区带。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽在酸性条件下抑菌活性更强,分离时血淋巴预处理采用80℃水浴1—3min去杂蛋白效果较好,诱导的血淋巴100℃处理3和5min即丧失抗菌活性,电泳显示缺少2条区带,此2条差异区带可能为抗菌肽组分。 展开更多
关键词 丝光绿蝇 抗菌肽 聚丙烯酰胺凝胶电泳
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宁夏枸杞谷胱甘肽过氧化物酶的测定 预览 被引量:11
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作者 董卫华 赵春 +2 位作者 谷兆侠 昝玉玺 赵长安 《新乡医学院学报》 CAS 2006年第1期 31-32,共2页
目的研究宁夏枸杞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的测定方法,以寻求测定枸杞中GSH-Px的最佳条件。方法以0.2mol·L^-1的磷酸缓冲液作为提取介质,1.67%的偏磷酸作为沉淀液,用分光光度计分别在410nm、412nm、414nm、416nm、418nm... 目的研究宁夏枸杞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的测定方法,以寻求测定枸杞中GSH-Px的最佳条件。方法以0.2mol·L^-1的磷酸缓冲液作为提取介质,1.67%的偏磷酸作为沉淀液,用分光光度计分别在410nm、412nm、414nm、416nm、418nm、420nm、422nm波长下比色测定宁夏枸杞中GSH-Px活性。结果宁夏枸杞中GSH-Px在含1mmol·L^-1已二胺四乙酸(EDTA)和1%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的0.2mol·L^-1磷酸缓冲液(pH6.24)作为提取介质,反应2min、412nm波长条件下比色测定,活性最高。结论本方法可以准确地测定枸杞中GSH-Px的活性,且重复性好。 展开更多
关键词 枸杞 谷胱甘肽过氧化物酶 测定
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丝光绿蝇室内种群孵化动态观察 预览 被引量:2
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作者 许兵红 赵春 +2 位作者 林立丰 江秀杰 周胜理 《热带医学杂志》 CAS 2006年第11期 1192-1193,1196,共3页
目的 观察丝光绿蝇室内种群的孵化特征。方法 每天观察丝光绿蝇室内种群第7代及第8代幼虫孵化数量,未孵出数量,计算每天的孵化率,并进行分析。结果 在产卵期前期,孵出的第7代及第8代幼虫数量相对较多,孵化率相对较高且稳定。后期... 目的 观察丝光绿蝇室内种群的孵化特征。方法 每天观察丝光绿蝇室内种群第7代及第8代幼虫孵化数量,未孵出数量,计算每天的孵化率,并进行分析。结果 在产卵期前期,孵出的第7代及第8代幼虫数量相对较多,孵化率相对较高且稳定。后期孵出的幼虫数量相对较少,孵化率较低。结论 丝光绿蝇室内种群产卵前期幼虫孵化率较高且稳定,转种应在前期进行。 展开更多
关键词 丝光绿蝇 饲养 孵化
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加强工商会计控制 建设节约型社会 预览
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作者 赵春 李林 《中国工商管理研究》 2006年第4期 44-46,共3页
降低行政成本是建设资源节约型社会的一个重要组成部分,而强化单位会计监督、实现内部控制是降低行政成本的重要措施,是促进行政管理职能到位的重要保障.本文从建设资源节约型社会角度,阐述工商部门内部会计控制的基本原则、主要途径和... 降低行政成本是建设资源节约型社会的一个重要组成部分,而强化单位会计监督、实现内部控制是降低行政成本的重要措施,是促进行政管理职能到位的重要保障.本文从建设资源节约型社会角度,阐述工商部门内部会计控制的基本原则、主要途径和内容以及应处理好的几个关系,探讨工商行政管理内部会计控制的基本思路. 展开更多
关键词 会计 内部 控制
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