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奶牛乳房炎的诊断与防治技术(四) 认领
1
作者 《中国动物保健》 2012年第6期29-31,共3页
上接2012年第5期(总159期)疫病防制栏目6乳房炎的治疗控制乳房炎的发病率,象对待其它传染性疾病一样,关键在于预防,一旦发病要做到准确诊断,迅速隔离,及时治疗。对疗效不明显的乳房炎患牛,要果断淘汰以消灭乳房炎的传染源。
关键词 奶牛乳房炎 防治技术 诊断 传染性疾病 疫病防制 发病率 传染源 治疗
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D型产气荚膜梭菌ε毒素基因表达及其免疫保护作用的初步研究 认领 被引量:10
2
作者 王光华 蔺国珍 +4 位作者 郑福英 曹小安 宫晓炜 周继章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期 36-41,共6页
利用PCR技术,从D型产气荚膜梭菌标准株(C60-2)染色体DNA中扩增出ε毒素基因。该基因产物大小为906bp,序列分析结果表明,与GenBank报道的产气荚膜梭菌参考菌株ε毒素基因序列同源性大于99%。将扩增的ε毒素基因定向克隆到原核表达载体p... 利用PCR技术,从D型产气荚膜梭菌标准株(C60-2)染色体DNA中扩增出ε毒素基因。该基因产物大小为906bp,序列分析结果表明,与GenBank报道的产气荚膜梭菌参考菌株ε毒素基因序列同源性大于99%。将扩增的ε毒素基因定向克隆到原核表达载体pET32a中,得到重组质粒pET32a-ETX,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plys中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析可见大小为54ku的特异条带;经Western blotting和ELISA检测结果表明,表达的ε毒素能与抗天然ε毒素抗体发生特异性反应,说明ε毒素蛋白具有较好的反应原性。将表达的ε毒素蛋白用0.4%的甲醛溶液制成类毒素疫苗,免疫小鼠后,具有一定的保护力,这表明该重组菌株有望成为产气荚膜梭菌基因工程类毒素疫苗的候选菌株。 展开更多
关键词 D型产气荚膜梭菌 ε毒素 类毒素 免疫保护
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奶牛乳房炎的诊断与防治技术(三) 认领
3
作者 《中国动物保健》 2012年第5期 30-34,共5页
5乳房炎的预防 乳房炎是奶牛场发病率最高、复发率最高的一种典型接触性传染病。可以说在每个奶牛场都存在这样的问题,只是发病率高低有所不同,在每年高发期对该病的控制水平有所不同。乳房炎发生的普遍性,是由奶牛本身的生理特性... 5乳房炎的预防 乳房炎是奶牛场发病率最高、复发率最高的一种典型接触性传染病。可以说在每个奶牛场都存在这样的问题,只是发病率高低有所不同,在每年高发期对该病的控制水平有所不同。乳房炎发生的普遍性,是由奶牛本身的生理特性及其它环境因素所决定: 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 防治技术 诊断 环境因素 发病率 奶牛场 传染病 复发率
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奶牛乳房炎的诊断与防治技术(二) 认领
4
作者 《中国动物保健》 2012年第4期 29-33,共5页
上接2012年第3期(总157期)疫病防制栏目4乳房炎的监测与诊断乳房炎是所有奶牛场最常见的疾病之一,也是对生产影响和危害最为严重的疾病之一。所以监测乳房炎应该作为每个奶牛场的一项十分重要的日常工作,作到及早发现隐性乳房炎,及时... 上接2012年第3期(总157期)疫病防制栏目4乳房炎的监测与诊断乳房炎是所有奶牛场最常见的疾病之一,也是对生产影响和危害最为严重的疾病之一。所以监测乳房炎应该作为每个奶牛场的一项十分重要的日常工作,作到及早发现隐性乳房炎,及时治疗,尽可能地防止隐性乳房向临床性乳 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 防治技术 诊断 隐性乳房炎 疫病防制 日常工作 奶牛场 疾病
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奶牛乳房炎的诊断与防治技术(一) 认领 被引量:2
5
作者 《中国动物保健》 2012年第3期 42-44,共3页
世界奶牛业,乳房炎是最常见的一种疾病,也是对奶牛业危害、对乳制食品安全威胁最为严重的一种疾病。所谓奶牛乳房炎就是由细菌和/或其毒素所引起的奶牛乳房发炎。1967年,国际奶业联合会(IDF)将奶牛乳房健康状况划分为四类:
关键词 奶牛乳房炎 防治技术 诊断 安全威胁 健康状况 奶牛业 疾病 毒素
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青海牦牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定 认领 被引量:8
6
作者 张芳芳 王光华 +4 位作者 郑福英 宫晓炜 周继章 吴润 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期 1101-1105,共5页
采集青海省泽库县某牧户疑似牦牛病毒性腹泻病牛的样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种MDBK细胞,并盲传至第10代,检测每一代细胞中牛病毒性腹泻病毒的E0基因。通过分离株接种细胞后产生的病变效应观察、免疫荧光试验、电镜观察、RT... 采集青海省泽库县某牧户疑似牦牛病毒性腹泻病牛的样品,将RT-PCR检测为阳性的样品处理后接种MDBK细胞,并盲传至第10代,检测每一代细胞中牛病毒性腹泻病毒的E0基因。通过分离株接种细胞后产生的病变效应观察、免疫荧光试验、电镜观察、RT-PCR扩增以及序列分析鉴定了该病毒。结果表明,盲传的每代细胞中均可检测到E0基因;接毒后的细胞在盲传至第7代时出现明显的细胞病变;免疫荧光试验中能观察到细胞内发出的特异性荧光;经浓缩、纯化的病毒在电镜下呈直径为40~60nm的病毒粒子,将其命名为QHZK株。对克隆的E0基因测序后提交至GenBank(登录号:JF927789),并将获得的序列与其他国内外分离株的E0序列比对,同源性为73.6%~98.2%;系统进化分析表明该分离株属于牛病毒性腹泻病毒1b亚型。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E0基因 分离 鉴定
猪流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及原核表达 认领 被引量:3
7
作者 李西玉 许信刚 +4 位作者 周继章 曹小安 宫晓炜 王光华 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2010年第7期共7页
【目的】克隆猪流产嗜性衣原体青海株主要外膜蛋白(Major outer membrane protein,MOMP)基因,并进行序列分析及原核表达。【方法】根据GenBank公布的猪流产嗜性衣原体MOMP基因的核苷酸序列,设计并合成4条特异性引物,用套式PCR方法扩增... 【目的】克隆猪流产嗜性衣原体青海株主要外膜蛋白(Major outer membrane protein,MOMP)基因,并进行序列分析及原核表达。【方法】根据GenBank公布的猪流产嗜性衣原体MOMP基因的核苷酸序列,设计并合成4条特异性引物,用套式PCR方法扩增猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因,将其克隆入pMD18-T载体中,进行测序及序列分析。然后将MOMP基因亚克隆入原核表达载体pGEX4T-1中,在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot检测。【结果】扩增到猪流产嗜性衣原体青海株1170bp的MOMP全长基因。序列分析结果表明,该基因与已发表的猪流产嗜性衣原体B11001株和CP/12株核苷酸同源性均为99.7%。SDS-PAGE电泳可检测到分子质量约为66ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在。Western-blot分析表明,重组蛋白可被猪流产嗜性衣原体抗体识别。【结论】成功克隆了猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因,并进行了原核表达,表达的蛋白具有抗原活性。 展开更多
关键词 流产嗜性衣原体 MOMP蛋白 原核表达
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牛布氏杆菌间接ELISA检测方法的建立 认领 被引量:11
8
作者 宫晓炜 +4 位作者 蔺国珍 郑福英 曹小安 王光华 周继章 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期598-602,共5页
采用原核表达并纯化的布氏杆菌周质蛋白BP26作为包被抗原,建立了检测牛布氏杆菌血清抗体的间接ELISA(iELISA)方法。用建立的iELISA方法对138份临床奶牛血清样本进行了检测,并与虎红平板凝集试验(RBPT)和套式PCR(nested-PCR)进行... 采用原核表达并纯化的布氏杆菌周质蛋白BP26作为包被抗原,建立了检测牛布氏杆菌血清抗体的间接ELISA(iELISA)方法。用建立的iELISA方法对138份临床奶牛血清样本进行了检测,并与虎红平板凝集试验(RBPT)和套式PCR(nested-PCR)进行了比较。结果表明,所建立的iELISA与RBPT和nes-ted-PCR的符合率分别为97.82%和98.55%。尽管该方法的敏感性略低于nested-PCR,但用iELISA检测病牛血清的阳性率可达93.00%。该iELISA方法可作为一种有效的牛布氏杆菌病血清学诊断的备用方法。 展开更多
关键词 牛布氏杆菌 BP26重组蛋白 间接酶联免疫吸附试验
产气荚膜梭菌青海分离株α毒素基因克隆与表达 认领 被引量:4
9
作者 王光华 周继章 +3 位作者 蔺国珍 郑福英 曹小安 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期 145-149,共5页
用PCR技术,从一株田间分离的产气荚膜梭菌基因组中扩增出了1 194 bp的α毒素基因,经限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切处理后将其连接在经同样内切酶处理的载体pET/|28a(+)中的相应位点上,最后转化至受体菌BL21(DE3)中。经... 用PCR技术,从一株田间分离的产气荚膜梭菌基因组中扩增出了1 194 bp的α毒素基因,经限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ和Nco Ⅰ双酶切处理后将其连接在经同样内切酶处理的载体pET/|28a(+)中的相应位点上,最后转化至受体菌BL21(DE3)中。经PCR、双酶切和核苷酸序列分析,证明重组质粒pET/|28a/|CPA含有产气荚膜梭菌α毒素基因,再将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,目的基因获得了良好表达。以羊抗α毒素多克隆血清进行Western blot分析,抗血清可与该融合蛋白发生特异性反应,表明目的蛋白具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 Α毒素基因 基因克隆 核苷酸序列
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衣原体致病机制的研究进展 认领
10
作者 《河北科技师范学院学报》 CAS 2010年第4期 55-60,共6页
衣原体通过GAG和GAG受体粘附在宿主细胞表面。衣原体具有Ⅲ型分泌系统,通过该系统病原菌穿过宿主细胞壁可将胞浆蛋白分泌入宿主周质内,从而为病原菌进入宿主细胞提供条件。
关键词 Ⅲ型分泌系统 粘附 进入 GAG 受体
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奶牛流产鹦鹉热衣原体ompA基因的克隆与原核表达 认领 被引量:6
11
作者 宋竹青 +6 位作者 周继章 曹小安 蔺国珍 郑福英 宫晓炜 王光华 魏彦明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期 140-143,共4页
目的表达奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因,探索其作为诊断抗原的可能性。方法采用套式PCR方法扩增出了奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因完整片段,此扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达... 目的表达奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因,探索其作为诊断抗原的可能性。方法采用套式PCR方法扩增出了奶牛源鹦鹉热衣原体ompA基因完整片段,此扩增产物经过双酶切后克隆到表达载体pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用SDS-PAGE和Western—blot检测重组目的蛋白的表达结果。结果重组蛋白经奶牛衣原体阳性血清鉴定正确。结论ompA基因在原核表达系统中得到正确表达。 展开更多
关键词 鹦鹉热衣原体 ompA基因 克隆 原核表达 奶牛
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奶牛流产衣原体OmpA抗原间接ELISA检测方法的建立 认领 被引量:2
12
作者 宋竹青 +6 位作者 周继章 郑福英 蔺国珍 曹小安 王光华 宫晓炜 魏彦明 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期696-700,共5页
以奶牛流产衣原体外膜蛋白A(OmpA)作为抗原,筛选最佳反应条件,建立了奶牛衣原体病间接ELISA检测方法。结果显示,OmpA的最佳包被浓度为1∶320;血清最佳稀释度为1∶40;酶标二抗的最佳工作浓度为1∶2000;抗原的最适包被条件为37℃1h加4... 以奶牛流产衣原体外膜蛋白A(OmpA)作为抗原,筛选最佳反应条件,建立了奶牛衣原体病间接ELISA检测方法。结果显示,OmpA的最佳包被浓度为1∶320;血清最佳稀释度为1∶40;酶标二抗的最佳工作浓度为1∶2000;抗原的最适包被条件为37℃1h加4℃过夜;ELISA的阴性、阳性临界值为0.391。用本方法和衣原体间接血凝试验检测奶牛血清田间样品206份,两者的符合率为95.3%。本试验建立的OmpA-ELISA方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,可为牛衣原体病的诊断及流行病学调查提供有效工具。 展开更多
关键词 流产衣原体 重组OmpA 间接酶联免疫吸附试验
产气荚膜梭菌ε毒素及其疫苗研究进展 认领 被引量:5
13
作者 王光华 黄生莲 +1 位作者 周继章 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期 73-75,共3页
产气荚膜梭菌病是由产气荚膜梭菌引起的一种重要的人兽共患传染病,可导致山羊、绵羊等动物的肠毒血症或坏死性肠炎,并且可引起动物脑、心、肺和肾组织的水肿。B型和D型产气荚膜梭菌所产生的ε毒素是引起动物上述病理变化和死亡的重要... 产气荚膜梭菌病是由产气荚膜梭菌引起的一种重要的人兽共患传染病,可导致山羊、绵羊等动物的肠毒血症或坏死性肠炎,并且可引起动物脑、心、肺和肾组织的水肿。B型和D型产气荚膜梭菌所产生的ε毒素是引起动物上述病理变化和死亡的重要因素之一。虽然甲醛灭活的毒素疫苗能对动物产生保护性抗体,但是,灭活苗潜在的安全性原因使其在应用上受到限制。因此,基于ε毒素基因的重组疫苗和弱毒疫苗就成为人们研究的目标。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 ε毒素 疫苗
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布鲁氏菌毒力基因的研究状况 认领 被引量:8
14
作者 曹小安 秦天达 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期 689-693,共5页
随着马耳他布鲁氏菌、猪布鲁氏菌和流产布鲁氏菌的全基因组被破译,发现这三种布鲁氏菌的染色体序列、组成和结构非常相似。染色体的序列测定和阐明为布鲁氏菌蛋白质的研究和分析铺平了道路,与以前通过分析染色体来推测布鲁氏菌的毒力... 随着马耳他布鲁氏菌、猪布鲁氏菌和流产布鲁氏菌的全基因组被破译,发现这三种布鲁氏菌的染色体序列、组成和结构非常相似。染色体的序列测定和阐明为布鲁氏菌蛋白质的研究和分析铺平了道路,与以前通过分析染色体来推测布鲁氏菌的毒力比较,这对后基因组时代完全弄清楚不同布鲁氏菌种生物学特征的研究提供了可能性。而对基因结构和功能的大量研究,很多与致病性和毒力有关的基因发现,将为弄清楚布鲁氏菌的致病机制打下坚实的基础, 展开更多
关键词 猪布鲁氏菌 毒力基因 后基因组时代 序列测定 基因结构 生物学特征 染色体 全基因组
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江西地区猪瘟感染和免疫状况的血清学调查 认领 被引量:7
15
作者 杨春华 祝建新 +3 位作者 段振龙 钟毅 沈艳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第8期 26-27,共2页
猪瘟(classical swine fever,CSF)是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒(classical swine:fever virus,CSFV)引起的一种热性高度接触性传染病,各个年龄阶段的猪群,不分品种对其均易感,目前依然是危害我国养猪业的主要传染病之一。... 猪瘟(classical swine fever,CSF)是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒(classical swine:fever virus,CSFV)引起的一种热性高度接触性传染病,各个年龄阶段的猪群,不分品种对其均易感,目前依然是危害我国养猪业的主要传染病之一。根据国际兽疫局(OIE)制定的《陆生动物卫生法典》2005年版,猪瘟被列为必须报告的传染病之一。1996年在意大利举行的国际猪病兽医大会上,肯定猪瘟仍是养猪业的头号大敌。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 血清学调查 免疫状况 江西地区 接触性传染病 国际兽疫局 感染 VIRUS
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奶牛衣原体ompA基因的克隆及序列分析 认领 被引量:1
16
作者 宋竹青 魏彦明 +3 位作者 周继章 曹小安 王光华 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期 6-9,15,共5页
以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompa基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5a后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA... 以流产奶牛肝组织块内提取的基因组DNA为模板,根据GenBank数据库中的衣原体ompa基因序列设计2对引物,采用套式PCR进行扩增.PCR产物经纯化后连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5a后,进行序列测定和生物信息学分析.结果表明:ompA基因的开放阅读框架全长1170bp,编码由389个氨基酸组成的多肽,理论分子质量为41.9ku,等电点为7.61;SMART分析表明,ompA基因编码的氨基酸中,1—22位氨基酸为信号肽序列,另外还有7个保守的半胱氨酸残基形成二硫键;BLAST同源性分析表明,ompA基因的核苷酸序列与已发表的衣原体ompa序列的同源性均达到了98%以上. 展开更多
关键词 奶牛衣原体ompA克隆 序列分析
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从国外引进奶牛应注意预防的几种传染病 认领
17
作者 《中国动物保健》 2009年第6期 82-85,共4页
“十五”以来,我国奶牛业发展迅速,虽然,中间遇到不少波折,养牛数量有所下降,但总的趋势还是上升的。特别是由单纯“数量型”慢慢向高产质量型的转变,是我国奶牛业发展逐渐成熟和理智化的一种可喜表现。不少地区为了获得高产稳产... “十五”以来,我国奶牛业发展迅速,虽然,中间遇到不少波折,养牛数量有所下降,但总的趋势还是上升的。特别是由单纯“数量型”慢慢向高产质量型的转变,是我国奶牛业发展逐渐成熟和理智化的一种可喜表现。不少地区为了获得高产稳产的奶牛遗传基因,大量从国外引进奶牛,这样有可能带进一些奶牛疫病,有些疫病国内已经存在, 展开更多
关键词 奶牛业 国外 传染病 预防 “十五” 遗传基因 高产稳产 质量型
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预防控制、阻断对奶牛业危害最严重的疫病之一:家畜布鲁氏菌病防制续谈二 认领 被引量:2
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作者 《中国动物保健》 2008年第6期 93-97,共5页
本刊12008年第一期专家视点刊出了邱昌庆研究员《布鲁氏菌病的传播路径》一文,引起了读者的强烈反响,本刊就读者普遍关心的布病根除规划、布病的检测预诊断等问题请邱昌庆研究员做进一步的解答。
关键词 布鲁氏菌病 奶牛业 控制 预防 防制 家畜 疫病 危害
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衣原体研究欧洲协会第六次会议 认领 被引量:2
19
作者 周继章 《今日养猪业》 2008年第5期 11-13,共3页
衣原体研究欧洲协会第六次会议(Sixth Meeting of the European Society for Chlamydia Research)于2008年7月1—4日在丹麦第二大城市奥呼斯市的Arhus大学召开。会议收到来自世界35个国家的215篇论文,其中,诊断方面的论文32篇;衣... 衣原体研究欧洲协会第六次会议(Sixth Meeting of the European Society for Chlamydia Research)于2008年7月1—4日在丹麦第二大城市奥呼斯市的Arhus大学召开。会议收到来自世界35个国家的215篇论文,其中,诊断方面的论文32篇;衣原体引发的各种疾病报告15篇;流行病学调查报告32篇;分子生物学研究报告13篇;免疫学与疫苗学研究论文27篇;动物模型与器官培养研究报告9篇。动物衣原体病及对人的危害研究报告25篇;沙眼衣原体感染的免疫遗传学研究报告8篇; 展开更多
关键词 动物衣原体病 协会 欧洲 研究论文 分子生物学 衣原体感染 调查报告 流行病学
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福氏志贺菌主动外排基因acrB的克隆与序列分析 认领
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作者 王松泰 张继瑜 +3 位作者 魏小娟 付元芳 曹小安 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2008年第6期 6-8,24,共4页
以福氏志贺菌2a型菌株基因组为模板,经PCR扩增得acrB基因,将该基因克隆到pMD18-T Vector载体,将重组质粒进行PCR和酶切鉴定及序列测定.结果表明:测定序列与Genbank收录的福氏志贺菌参考序列同源性为99.7%,与大肠杆菌的acrB基因... 以福氏志贺菌2a型菌株基因组为模板,经PCR扩增得acrB基因,将该基因克隆到pMD18-T Vector载体,将重组质粒进行PCR和酶切鉴定及序列测定.结果表明:测定序列与Genbank收录的福氏志贺菌参考序列同源性为99.7%,与大肠杆菌的acrB基因序列比较分析,序列同源性在98%~99%之间,说明志贺菌主动外排基因acrB在碱基序列和编码的氨基酸序列上均与大肠杆菌有很高的同源性,它可能是志贺菌引起多重耐药的主要原因. 展开更多
关键词 志贺菌 acrB基因 克隆 序列分析
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