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Lg-Flo1蛋白N端的诱导表达及活性研究 预览
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作者 谢莹 李晓敏 +1 位作者 蔡国林 陆健 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期9-14,共6页
研究了Lg-Flo1蛋白N端的诱导表达条件及与甘露糖的结合活性。将构建的巴氏酵母Lg-FLO1基因N端序列的重组表达载体pETFL1进行双酶切验证,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过菌落PCR鉴定阳性转化子,并进行诱导表达,利用SDS-PAGE检测不同诱导条件... 研究了Lg-Flo1蛋白N端的诱导表达条件及与甘露糖的结合活性。将构建的巴氏酵母Lg-FLO1基因N端序列的重组表达载体pETFL1进行双酶切验证,转化大肠杆菌BL21(DE3),通过菌落PCR鉴定阳性转化子,并进行诱导表达,利用SDS-PAGE检测不同诱导条件对目的蛋白N-Lg-Flo1表达的影响,并对目的蛋白进行变性溶解、纯化、复性及活性测定。结果表明,酶切证实重组表达载体含有N-Lg-FLO1基因片段;在LB培养基中的表达量高于TB培养基;和IPTG相比,乳糖诱导同样可以表达含量较高的目的蛋白且成本较低。以乳糖作为诱导剂,终质量浓度为0.2g/L,诱导温度37℃,诱导6h,目的蛋白的表达量均高于30%;荧光光谱分析表明,复性后的N-Lg-Flo1蛋白具有与甘露糖结合的活性。该研究为大规模生产絮凝蛋白并以此为原料制备糖的特异性吸附剂奠定了基础。 展开更多
关键词 N-Lg-Flo1蛋白 诱导表达 乳糖 甘露糖结合 絮凝
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丁酸梭菌的筛选及其胞外多糖抗氧化性的研究 预览
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作者 刘逸凡 蔡国林 +1 位作者 李晓敏 陆健 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期25-30,共6页
通过改良丁酸梭菌筛选培养基,提高了丁酸梭菌的筛选效率,获得1株高产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的丁酸梭菌RO-07。进一步研究丁酸梭菌RO-07的肠道耐受性和抗生素敏感性,结果表明,该菌株对质量浓度为0.5~4g/L的牛胆盐具有良好的耐... 通过改良丁酸梭菌筛选培养基,提高了丁酸梭菌的筛选效率,获得1株高产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的丁酸梭菌RO-07。进一步研究丁酸梭菌RO-07的肠道耐受性和抗生素敏感性,结果表明,该菌株对质量浓度为0.5~4g/L的牛胆盐具有良好的耐受性,对人工胃液和人工肠液有较好的耐受性,对氨基糖苷类抗生素的耐药性较强。对丁酸梭菌EPS的抗氧化特性研究表明,终质量浓度为0.33mg/mL的EPS对·OH的清除活性达到75.2%,对O-2·清除能力达到95%,具有很强的抗氧化性。 展开更多
关键词 筛选 鉴定 丁酸梭菌 胞外多糖 抗氧化
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电针对慢性应激抑郁模型大鼠脑组织内大麻素水解酶的影响 预览
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作者 刘娟 田磊 +4 位作者 赵杨 陆健 雷正权 杜旭 刘继平 《陕西中医》 2019年第5期553-555,共3页
目的:观察电针对慢性应激抑郁模型大鼠的大麻素系统FAAH(大麻素受体1)及行为学指标的影响,探讨电针抗抑郁的作用机理。方法:将30只健康雄性SD大鼠经1周环境适应及1周的蔗糖水训练后,将所有动物随机分为空白组、模型组和电针组。采用孤... 目的:观察电针对慢性应激抑郁模型大鼠的大麻素系统FAAH(大麻素受体1)及行为学指标的影响,探讨电针抗抑郁的作用机理。方法:将30只健康雄性SD大鼠经1周环境适应及1周的蔗糖水训练后,将所有动物随机分为空白组、模型组和电针组。采用孤养结合慢性轻度不可预见性的应激(CUMS)方法造模。针刺选取百会、内关、阳陵泉等穴。空白组正常喂养21d;模型组:建立CUMS抑郁症大鼠模型,共经历21d;电针组:于造模的第1天起,于每日上午进行应激前1h给予电针治疗,共治疗21d。治疗结束后,观察各组大鼠的蔗糖水摄入量、旷场试验空间移动量,采用免疫组化法检测大鼠脑组织中大麻素系统的FAAH的表达情况。结果:治疗结束后,三组大鼠蔗糖水摄入量、旷场试验空间移动量比较,模型组均明显低于空白组,差异具有统计学意义(P<0.01),电针组又均高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组大鼠脑组织中FAAH表达结果比较,模型组明显低于空白组,差异具有统计学意义(P<0.01);电针组明显高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:电针具有明显的抗抑郁作用,其机制可能是通过调节大鼠脑中内源性大麻素水解酶FAAH而实现的。 展开更多
关键词 抑郁症 电针 大鼠 内源性大麻素 水解酶FAAH 慢性应激
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短乳杆菌2-34中瓜氨酸转运蛋白的鉴定
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作者 刘晓慧 李晓敏 +2 位作者 禹伟 吴殿辉 陆健 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2249-2257,共9页
【背景】从黄酒发酵液中分离的短乳杆菌2-34具有重吸收瓜氨酸的能力,可用于降低黄酒中的瓜氨酸从而减少氨基甲酸乙酯的形成,然而瓜氨酸重吸收机制的不明确阻碍了该菌的合理利用。【目的】通过确定短乳杆菌2-34中的瓜氨酸转运蛋白编码基... 【背景】从黄酒发酵液中分离的短乳杆菌2-34具有重吸收瓜氨酸的能力,可用于降低黄酒中的瓜氨酸从而减少氨基甲酸乙酯的形成,然而瓜氨酸重吸收机制的不明确阻碍了该菌的合理利用。【目的】通过确定短乳杆菌2-34中的瓜氨酸转运蛋白编码基因,为其在黄酒中的利用提供理论依据。【方法】以pRSFDuet-1和pETDuet-1为表达载体,通过多顺反子串联表达系统及双质粒表达系统,在大肠杆菌C43(DE3)中表达短乳杆菌2-34精氨酸脱亚胺途径中瓜氨酸代谢相关蛋白:精氨酸降解酶ArcD和ADI、瓜氨酸降解酶OTC及膜蛋白DcuC和AO antiporter。【结果】重组表达大肠杆菌发酵过程中可利用精氨酸形成瓜氨酸,但表达了膜蛋白DcuC和AO antiporter的重组菌发酵液中瓜氨酸含量较低。【结论】短乳杆菌2-34中DcuC和AOantiporter均具有吸收瓜氨酸的功能,且DcuC活性更高。 展开更多
关键词 黄酒 短乳杆菌 瓜氨酸重吸收 重组表达
新时代事业单位财务风险控制与防范的重要性 预览
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作者 陆健 《现代商业》 2019年第2期149-150,共2页
随着我国社会经济的的不断发展,事业单位的财务工作面临着很大的风险。本文通过对新时代事业单位财务风险控制与防范的重要性进行分析,从完善财务风险管理体系、完善风险预警机制、强化内部成本核算、加强内部财产监管力度等方面论述了... 随着我国社会经济的的不断发展,事业单位的财务工作面临着很大的风险。本文通过对新时代事业单位财务风险控制与防范的重要性进行分析,从完善财务风险管理体系、完善风险预警机制、强化内部成本核算、加强内部财产监管力度等方面论述了新时代下事业单位财务风险控制与防范措施。 展开更多
关键词 新时代 事业单位 财务风险控制与防范
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论事业单位财务预算管理的问题与措施 预览 被引量:1
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作者 陆健 《中国市场》 2019年第7期147-148,共2页
随着我国社会经济的不断发展,事业单位内部体制改革也不断地深入,当前我国出台的各种政策,使各事业单位财政改革更加顺利,但是事业单位中的预算管理也暴露出很多问题。基于此,文章通过对事业单位中财务管理存在的问题进行分析,从强化预... 随着我国社会经济的不断发展,事业单位内部体制改革也不断地深入,当前我国出台的各种政策,使各事业单位财政改革更加顺利,但是事业单位中的预算管理也暴露出很多问题。基于此,文章通过对事业单位中财务管理存在的问题进行分析,从强化预算管理意识、制定合理的预算编制、加强预算执行的监督检查、强化资金支出管理等方面论述了事业单位中财务预算管理问题的解决对策。 展开更多
关键词 事业单位 财务预算 预算管理
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胃乙醇脱氢酶δδ-ADH的原核表达及酶学性质 预览
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作者 常开霞 孙军勇 +3 位作者 李晓敏 吴殿辉 朱德伟 陆健 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期78-85,共8页
为获得人胃乙醇脱氢酶δδ-ADH,根据GeneBank中δδ-ADH的基因序列合成目的基因ADH7,构建重组表达载体pET-32a(+)-ADH7,并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。获得的阳性转化子经异丙基硫化-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显... 为获得人胃乙醇脱氢酶δδ-ADH,根据GeneBank中δδ-ADH的基因序列合成目的基因ADH7,构建重组表达载体pET-32a(+)-ADH7,并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。获得的阳性转化子经异丙基硫化-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,目的蛋白质以包涵体的形式得到大量表达。用1 mol/L尿素溶解包涵体获得有活性的粗酶液,经HisTrapTM excel亲和层析柱纯化获得目的蛋白质,检测δδ-ADH酶活并对其基本酶学性质进行研究。结果显示,δδ-ADH的活性为2.085 U/mg,Km为28.43 mmol/L,Vmax为316.46μmol/(L·min)。δδ-ADH的最适反应温度为40℃,在30~50℃范围内温浴60 min,相对酶活在47%以上;最适pH为9.0,将δδ-ADH在不同pH(pH 3.0~11.0)的广泛缓冲液中于25℃保温30 min,在pH 6.0~11.0范围内酶活较稳定。pH 5.0时,相对酶活剩余60%;在0、500、1 000、1 500 mmol/L乙醇中37℃温浴30 min,相对酶活分别为65.6%、51.1%、45.4%和44.4%。 展开更多
关键词 乙醇脱氢酶 δδ-ADH 基因克隆 酶学性质
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毫秒激光辐射K9玻璃的激光损伤研究 预览
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作者 吴朱洁 潘云香 +3 位作者 赵竞元 陆健 沈中华 倪晓武 《红外与激光工程》 EI CSCD 北大核心 2019年第8期33-40,共8页
利用毫秒激光损伤测试平台,通过改变焦距和聚焦位置,研究了K9玻璃前后表面附近的损伤概率和损伤形貌。结果表明,焦平面位于前表面时以热熔损伤为主,焦平面位于后表面时则以应力损伤为主,且尺寸明显大于前表面。建立二维热力学模型并对... 利用毫秒激光损伤测试平台,通过改变焦距和聚焦位置,研究了K9玻璃前后表面附近的损伤概率和损伤形貌。结果表明,焦平面位于前表面时以热熔损伤为主,焦平面位于后表面时则以应力损伤为主,且尺寸明显大于前表面。建立二维热力学模型并对温度场和热应力场进行计算,结果显示,径向应力和环向应力是导致材料产生应力损伤的主要因素。激光辐照过程中在前表面产生的燃烧波能够增强激光能量耦合效率,是材料前表面产生熔融损伤的原因之一。此外,实验发现,焦距较短时,损伤概率随焦平面与样品表面距离的增大迅速下降,焦距较长时,易在样品前后表面同时产生损伤,这与透镜的焦深有关。 展开更多
关键词 激光损伤 毫秒激光 K9玻璃 焦距
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高产抑制大肠杆菌血凝性的胞外多糖的解淀粉芽孢杆菌 预览 被引量:1
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作者 蔡国林 冯文旭 +2 位作者 刘逸凡 李晓敏 陆健 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期14-18,共5页
产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一类引起断奶仔猪腹泻的重要病原菌,筛选获得高产抑制ETEC血凝性胞外多糖的芽孢杆菌可以有效预防这类动物疾病。该研究从健康动物粪便中分离获得芽孢杆菌,比较分析芽孢杆菌... 产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一类引起断奶仔猪腹泻的重要病原菌,筛选获得高产抑制ETEC血凝性胞外多糖的芽孢杆菌可以有效预防这类动物疾病。该研究从健康动物粪便中分离获得芽孢杆菌,比较分析芽孢杆菌胞外多糖产量及其抑制ETEC血凝性的能力,最终筛选获得1株多糖产量大于20g/L,多糖质量浓度在4mg/mL时就能抑制ETEC血凝性的芽孢杆菌JN4。体外益生潜力评价发现,其芽孢生成率高,萌发率高,具有很好的耐受人工肠、胃液能力,对大部分常规抗生素敏感。通过生理生化及16SrRNA序列分析,鉴定其为解淀粉芽孢杆菌JN4。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 胞外多糖 产肠毒素大肠杆菌 益生菌
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T-RFLP和454焦磷酸测序方法分析制麦过程细菌群落的动态变化 预览
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作者 邱然 陆健 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期71-77,共7页
确定微生物菌群特性是制麦管理与优化的关键一步。本研究以两个不同收获年份及两个同批次不同制麦方式的大麦为样品,采用两种非培养计数方法,即16S核糖体RNA(16S rRNA)末端限制片段长度多态性(T-RFLP)和454焦磷酸测序,检测制麦过程细菌... 确定微生物菌群特性是制麦管理与优化的关键一步。本研究以两个不同收获年份及两个同批次不同制麦方式的大麦为样品,采用两种非培养计数方法,即16S核糖体RNA(16S rRNA)末端限制片段长度多态性(T-RFLP)和454焦磷酸测序,检测制麦过程细菌及乳酸菌菌群结构,以期全面、准确分析细菌群落结构及动态变化。研究结果显示:不同收获年份的大麦细菌菌群结构存在差异,整个细菌群落结构随着制麦过程而发生变化,而不同发芽方式之间并没有明显的区别。454焦磷酸测序结果显示乳酸菌有139个运算分类单元(OTU),所有样品有88%的序列覆盖了5个OTU(如Weissella、Lactobacillus和Leuconostoc菌属),说明制麦过程乳酸菌的多样性较低,优势乳酸菌相对数量随着制麦条件变化而波动,并且大麦的收获年份和制麦环境也影响乳酸菌的菌群结构。 展开更多
关键词 麦芽 微生物菌群 乳酸菌 末端限制片段长度多态性
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基于职业素养的发动机构造与维修课程考试改革探讨 预览
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作者 林素敏 陆健 《杨凌职业技术学院学报》 2019年第3期89-91,共3页
通过分析发动机构造与维修课程的特点和目前考试中存在的问题,提出了适应高职院校人才培养模式的考试方式——“理论+实操”题卡型的考试方式,不仅考查了学生的基础知识,又强化了学生的专业技能和职业素养,充分发挥了课程考核对教学的... 通过分析发动机构造与维修课程的特点和目前考试中存在的问题,提出了适应高职院校人才培养模式的考试方式——“理论+实操”题卡型的考试方式,不仅考查了学生的基础知识,又强化了学生的专业技能和职业素养,充分发挥了课程考核对教学的导向作用,调动了学生学习积极性,更符合学校高技能型人才的培养目标。 展开更多
关键词 高职院校 考试改革 “理论+实操”专业技能 职业素养
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钆塞酸二钠增强MRI假性廓清型肝血管瘤的征象分析
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作者 陈培培 陆健 +3 位作者 缪小芬 张学琴 姜吉锋 陈小东 《临床放射学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第7期1335-1339,共5页
目的比较假性廓清(PWS)与非PWS肝血管瘤钆塞酸二钠(Gd-EOB-DTPA)增强MRI表现特点,总结PWS型血管瘤的相关影像学特征。方法回顾性分析行肝脏Gd-EOB-DTPA增强MRI检查的62例患者共83个肝血管瘤的影像资料。对肝血管瘤的强化方式(动脉期:结... 目的比较假性廓清(PWS)与非PWS肝血管瘤钆塞酸二钠(Gd-EOB-DTPA)增强MRI表现特点,总结PWS型血管瘤的相关影像学特征。方法回顾性分析行肝脏Gd-EOB-DTPA增强MRI检查的62例患者共83个肝血管瘤的影像资料。对肝血管瘤的强化方式(动脉期:结节状强化,均匀强化,动静脉瘘强化;门静脉期:是否充盈强化;过渡期:是否PWS;肝胆特异期:是否低信号)及强化程度(较肝实质信号明显增高,4分;较肝实质信号轻度增高,3分;与肝实质信号相等,2分;信号低于肝实质,1分)进行评估。采用卡方检验比较PWS与非PWS组或不同大小组肝血管瘤各期强化方式,采用Mann-Whitney U检验比较PWS及非PWS组肝血管瘤的大小及各期强化程度评分。结果 83个肝血管瘤中,14个(16. 9%)表现为PWS。与非PWS组肝血管瘤相比,PWS组血管瘤的最大径较小(P <0. 05),动脉期均匀强化比例较大(P <0. 05),动脉期结节状强化及门静脉期充盈强化的比例较小(P<0. 05),门静脉期强化程度评分较低(P <0. 05)。结论 Gd-EOB-DTPA增强MRI检查时,体积较小、动脉期均匀强化或门静脉期强化程度评分较低的肝血管瘤过渡期易表现PWS。 展开更多
关键词 肝血管瘤 GD-EOB-DTPA 磁共振成像 对比剂
肝癌小鼠血清荧光谱峰位蓝移及分子振动机理研究
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作者 关岑岑 骆晓森 +1 位作者 陆健 李泽文 《光电子.激光》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期221-226,共6页
通过多峰高斯拟合方法,对接种了肝癌小鼠生长5~15天期间的血清荧光光谱进行系统研究,结果表明,随着肿瘤的生长,荧光谱曲线及其高斯基元函数的峰值位置都有向短波方向移动的趋势。基于分子振动理论的分析认为,是肿瘤生长过程中,血清中部... 通过多峰高斯拟合方法,对接种了肝癌小鼠生长5~15天期间的血清荧光光谱进行系统研究,结果表明,随着肿瘤的生长,荧光谱曲线及其高斯基元函数的峰值位置都有向短波方向移动的趋势。基于分子振动理论的分析认为,是肿瘤生长过程中,血清中部分发光分子的含量增加,其分子趋于彼此靠近,分子间的相互作用增强,分子中原子间化学键趋于伸长,其基态的振动能级趋于降低,若第一电子激发态的最低振动能级未发生变化,则基态与第一电子激发态最低振动能级之间的能量差趋于增大,导致相关荧光谱曲线的峰值位置趋于蓝移。本文的研究结果表明,对血清荧光光谱进行非线性多峰拟合及分子振动理论分析,有助于从分子层面揭示血清中荧光物质变化的深层次原因。 展开更多
关键词 肝癌 血清 荧光光谱 峰位蓝移 高斯拟合 能级跃迁
35例直肠类癌患者内镜下治疗的回顾性分析 预览
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作者 徐呈 吴高珏 +3 位作者 王小云 唐学军 陆健 刘智娟 《黑龙江医学》 2019年第10期1158-1160,共3页
目的 探讨直肠类癌患者行内镜下黏膜剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)的疗效及安全性.方法 选取2015年1月-2018年1月期间的35例直肠类癌(直径<20 mm)患者行ESD治疗.镜下标识预切除范围,黏膜下注射抬高病灶,黏膜切开及... 目的 探讨直肠类癌患者行内镜下黏膜剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)的疗效及安全性.方法 选取2015年1月-2018年1月期间的35例直肠类癌(直径<20 mm)患者行ESD治疗.镜下标识预切除范围,黏膜下注射抬高病灶,黏膜切开及创面钛夹处理.结果 35例直肠类癌直径为1.5~2.0 cm,均一次性切除,病灶基底及切缘均未累及.随访3~5年均无复发.结论 对于直径<2 cm、无远处转移、未侵及固有肌层的直肠类癌患者,行ESD术疗效确切、简单、安全可靠,适宜开展. 展开更多
关键词 内镜黏膜下剥离术 直肠类癌 病理
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优布局强体系促进生猪产业健康可持续发展 预览
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作者 陆健 王志刚 +1 位作者 田莉 宋真 《中国畜牧业》 2019年第15期23-24,共2页
生猪产业是我国畜牧业第一大产业,但由于2018年8月非洲猪瘟疫情的爆发,生猪产业受到一定程度的影响,据国家统计局数据显示,2018年我国猪肉产量5404万吨,生猪存栏42817万头,出栏69382万头。
关键词 生猪产业 可持续发展 健康 国家统计局 非洲猪瘟 数据显示 生猪存栏 大产业
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环保型健康养猪关键技术简述 预览
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作者 陆健 王志刚 +8 位作者 黄萌萌 李保明 杨兴明 战汪涛 沈华伟 戴文霄 刘波 张海峰 陈忠洪 《中国畜牧业》 2019年第4期40-42,共3页
'猪粮安天下',我国是生猪生产大国和猪肉消费大国,生猪在我国畜牧业发展中占据着重要的地位。2017年,我国肉类产量8588万吨,其中猪肉产量5340万吨,占肉类总产量的62.2%;生猪存栏43324.8万头,其中能繁母猪存栏4393.4万头。近年来... '猪粮安天下',我国是生猪生产大国和猪肉消费大国,生猪在我国畜牧业发展中占据着重要的地位。2017年,我国肉类产量8588万吨,其中猪肉产量5340万吨,占肉类总产量的62.2%;生猪存栏43324.8万头,其中能繁母猪存栏4393.4万头。近年来,随着生猪养殖标准化、规模化、集约化进程的快速推进,生猪产业得到了大力发展。我国生猪核心育种场每头母猪年提供断奶仔猪数(PSY)不断提高,平均达20~22头。 展开更多
关键词 发酵床 微酸性电解水 发酵舍 干清粪 环保型
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适应分布式馈线自动化的配电网拓扑模型生成方法 预览
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作者 陈冉 陆健 +3 位作者 刘明祥 封士永 应俊 郑义 《南方电网技术》 CSCD 北大核心 2019年第1期60-65,共6页
分布式馈线自动化不依赖于主站的大量计算,仅采用局部网络拓扑分析实现快速故障处理。通过分析在智能配电终端中适应分布式馈线自动化需求的拓扑结构,并对IEC 61968、IEC 61970和IEC 61850的模型进行比较,找出配电主站全网拓扑模型与智... 分布式馈线自动化不依赖于主站的大量计算,仅采用局部网络拓扑分析实现快速故障处理。通过分析在智能配电终端中适应分布式馈线自动化需求的拓扑结构,并对IEC 61968、IEC 61970和IEC 61850的模型进行比较,找出配电主站全网拓扑模型与智能配电终端局部拓扑模型之间的差异。结合分布式FA的局部拓扑需求,建立智能配电终端局部拓扑模型和配电主站全系统拓扑模型,并通过模型转换实现局部拓扑模型的自维护。 展开更多
关键词 智能配电终端 分布式FA 局部拓扑模型 自动生成
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高粱制芽及啤酒酿造进展
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作者 陆健 《中外酒业》 2019年第9期34-36,共3页
啤酒作为世界上最受欢迎的饮料之一,2017年全球啤酒总产量约为19089万干升。自2014年以来,全球啤酒产量逐年下降,我国啤酒产量也稍有下降[1]。由于消费结构的转变,以及啤酒大麦价格的持续上涨,都将导致啤酒产量下降。
关键词 啤酒酿造 制芽 高粱 啤酒产量 消费结构 啤酒大麦 总产量 饮料
解淀粉芽孢杆菌胞外多糖对乳酸菌生长及代谢的调控作用 预览
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作者 蔡国林 刘逸凡 +1 位作者 李晓敏 陆健 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期16-21,共6页
研究解淀粉芽孢杆菌JN4的胞外多糖(exopolysaccharide, EPS-JN4)对乳酸菌生长及代谢的调控作用,有利于阐明EPS-JN4定向增殖乳酸菌的作用机制。采用PCR-变性梯度凝胶电泳技术分析EPS-JN4的定向增殖作用,并考察其对主要乳酸菌生长、主要... 研究解淀粉芽孢杆菌JN4的胞外多糖(exopolysaccharide, EPS-JN4)对乳酸菌生长及代谢的调控作用,有利于阐明EPS-JN4定向增殖乳酸菌的作用机制。采用PCR-变性梯度凝胶电泳技术分析EPS-JN4的定向增殖作用,并考察其对主要乳酸菌生长、主要代谢产物、肠道耐受性和表面疏水性的影响。EPS-JN4可以定向增殖罗伊氏乳杆菌,其对罗伊氏乳杆菌JN125的前期增殖速度较葡萄糖慢,但最高菌浓为葡萄糖的5.25倍,代谢产物中乳酸和醋酸含量则较葡萄糖分别降低了12.2%和32.4%。EPS-JN4增殖的罗伊氏乳杆菌JN125的肠道耐受性和表面疏水性显著提高,对其原因初步分析表明细胞膜蛋白和脂类物质含量提高了40.8%和105.7%,细胞膜组成中的十八碳脂肪酸和不饱和脂肪酸显著提高。EPS-JN4可以作为潜在的益生元,用于调节动物肠道健康。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 胞外多糖 乳酸菌 益生元 生长 代谢
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CRISPR/Cas9介导的低产尿素黄酒酵母工程菌的构建 预览
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作者 谢文娟 吴殿辉 +3 位作者 李晓敏 蔡国林 谢广发 陆健 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第13期45-51,共7页
通过代谢工程改造构建低产尿素的酿酒酵母工程菌,从根源上减少黄酒发酵液中尿素的含量及氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)的形成。该研究利用融合PCR构建DUR3过表达组件“HOL-PGK1p-DUR3-PGK1t-HOR”,通过CRISPR/Cas9介导的基因组编辑... 通过代谢工程改造构建低产尿素的酿酒酵母工程菌,从根源上减少黄酒发酵液中尿素的含量及氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)的形成。该研究利用融合PCR构建DUR3过表达组件“HOL-PGK1p-DUR3-PGK1t-HOR”,通过CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术转化酿酒酵母S.cerevisiae Na DUR1,2-Δcar1,在敲除CAR1和过表达DUR1,2基因的基础上过表达DUR3基因,获得工程菌S.cerevisiae Na DUR1,2/DUR3-Δcar1。实验室黄酒发酵实验结果表明,与亲本菌株S.cerevisiae Na相比,工程菌S.cerevisiae Na DUR1,2/DUR3-Δcar1所酿黄酒发酵液中尿素含量降低了92.1%,EC含量降低了58.6%;与出发菌株S.cerevisiae Na DUR1,2-Δcar1相比,工程菌S.cerevisiae Na DUR1,2/DUR3-Δcar1所酿黄酒发酵液中尿素含量降低了43.4%,EC含量降低了16.2%。过表达DUR3的工程菌S.cerevisiae Na DUR1,2/DUR3-Δcar1具有“尿素吸收”的能力,减少EC的形成。借助CRISPR/Cas9系统,构建的酵母工程菌无外源抗性基因的引入,具有工业化应用的潜在可能性。 展开更多
关键词 黄酒 酿酒酵母 尿素 氨基甲酸乙酯 CRISPR/Cas9
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