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TLR4-MMP-2/MMP-9信号通路在氧糖剥夺-复糖复氧诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用 预览
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作者 刘琳琳 魏海 +1 位作者 郭继锋 任峰 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第2期198-202,共5页
目的探讨Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)-基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotein,MMP-2)/基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein,MMP-9)信号通路在氧糖剥夺-复糖复氧诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法离体培养人脐静脉... 目的探讨Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)-基质金属蛋白酶2(matrix metalloprotein,MMP-2)/基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein,MMP-9)信号通路在氧糖剥夺-复糖复氧诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法离体培养人脐静脉内皮细胞株HUVEC-12,以1×106/mL接种于6孔板(每孔2mL)或1×104/mL接种于96孔板(每孔200μL),采用随机数字表法将36孔样本分为4组,对照组(C组)、氧糖剥夺组(O组),TAK242+氧糖剥夺组(TO组),CCT+氧糖剥夺处理组(MO组),每组6孔。O、TO和MO组人脐静脉内皮细胞接受氧糖剥夺6h后复糖复氧24h;TO和MO组人脐静脉内皮细胞接受氧糖剥夺前1h向培养基中分别加入TLR4特异性阻断剂TAK242(10μmol/mL)和MMP-2/MMP-9特异性抑制剂CCT(200μg/mL);对照组(C组)人脐静脉内皮细胞正常培养。按照各组处理收集细胞,AnnexinV-FITC/PI双染色-流式细胞法测定细胞凋亡率,MTT法测定细胞生存率,Transwell法检测HUVEC-12细胞电阻值及渗透性,酶联免疫吸附测定法检测TNF-α和IL-1β浓度,Western blot法测定MMP-2、MMP-9表达。结果与C组比较,O组、TO组和MO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度升高,存活率和电阻值降低,TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9表达水平升高(P<0.05);与O组比较,TO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度降低,存活率和电阻值升高,TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9表达水平下降(P<0.05);与O组比较,MO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度降低,存活率和电阻值升高,TNF-α和IL-1β表达水平下降(P<0.05);与TO组比较,MO组HUVEC-12细胞凋亡率和葡聚糖-FITC荧光强度升高,存活率和电阻值降低,TNF-α、IL-1β、MMP-2和MMP-9表达水平升高。结论氧糖剥夺-复糖复氧诱导HUVEC-12细胞凋亡的机制可能与激活TLR4-MMP-2/MMP-9信号通路相关。 展开更多
关键词 缺氧 人脐静脉内皮细胞 细胞凋亡
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补中益气丸联合地屈孕酮治疗68例习惯性流产的疗效观察 预览
2
作者 魏海 《北方药学》 2019年第5期45-46,共2页
目的:研究补中益气丸联合地屈孕酮治疗习惯性流产的临床效果。方法:选取我院2015年6月~2017年6月收治的习惯性流产孕妇136例,根据治疗方案不同分为两组。对照组68例,给予口服地屈孕酮治疗,研究组68例,给予口服补中益气丸+地屈孕酮治疗... 目的:研究补中益气丸联合地屈孕酮治疗习惯性流产的临床效果。方法:选取我院2015年6月~2017年6月收治的习惯性流产孕妇136例,根据治疗方案不同分为两组。对照组68例,给予口服地屈孕酮治疗,研究组68例,给予口服补中益气丸+地屈孕酮治疗。对比两组治疗效果、治疗前后血清孕激素及雌激素情况。结果:经治疗,研究组总有效率95.59%(65/68)高于对照组的85.29%(58/68),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组血清孕激素及雌激素水平均较治疗前提高,研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补中益气丸联合地屈孕酮治疗习惯性流产疗效确切,能显著改善血清性激素水平,有利于改善妊娠结局。 展开更多
关键词 补中益气丸 地屈孕酮 习惯性流产
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补肾止带汤治疗肝肾阴虚型老年性阴道炎29例 预览
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作者 魏海 《光明中医》 2018年第2期207-208,共2页
目的探讨加味补肾止带汤联合知柏地黄丸治疗肝肾阴虚型老年性阴道炎临床疗效。方法选取我院2016年6月—12月治疗肝肾阴虚型老年性阴道炎患者58例,随机数字表法分为两组,各29例。对照组采用甲硝唑治疗,观察组采用加味补肾止带汤联合知柏... 目的探讨加味补肾止带汤联合知柏地黄丸治疗肝肾阴虚型老年性阴道炎临床疗效。方法选取我院2016年6月—12月治疗肝肾阴虚型老年性阴道炎患者58例,随机数字表法分为两组,各29例。对照组采用甲硝唑治疗,观察组采用加味补肾止带汤联合知柏地黄丸治疗,统计对比两组临床疗效及治疗前后阴道p H值及血清性激素[雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)]水平。结果观察组治疗总有效率93.10%(27/29)高于对照组68.97%(20/29),差异有统计学意义(P〈0.05);治疗后观察组阴道pH值、血清E2水平均低于对照组,FSH水平高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论加味补肾止带汤联合知柏地黄丸治疗肝肾阴虚型老年性阴道炎临床疗效显著,能有效改善阴道pH值及血清性激素水平。 展开更多
关键词 加味补肾止带汤 知柏地黄丸 肝肾阴虚型老年性阴道炎 中医药疗法
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髓系分化因子88/核因子-κB信号通路在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能改变中的作用
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作者 任峰 谢薇薇 +4 位作者 魏海 刘琳琳 郭继峰 陈永清 卜少卿 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2018年第3期218-223,共6页
目的探讨髓系分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)/NF.KB信号通路在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能改变中的作用。方法雄性SD大鼠,20月龄,体重550—750g,根据随机数字表法分为3组(每组15只):对照组(C组... 目的探讨髓系分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)/NF.KB信号通路在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能改变中的作用。方法雄性SD大鼠,20月龄,体重550—750g,根据随机数字表法分为3组(每组15只):对照组(C组)、七氟醚处理组(S组)、ST2825+七氟醚处理组(IS组)。S组和IS组大鼠吸入4%七氟醚6h,C组仅吸入空气-氧气混合气体;IS组大鼠在七氟醚处理前行侧脑室注射MyD88抑制剂ST2825,C组和S组仅侧脑室注射等量生理盐水。采用Morris水迷宫实验及旷场实验评价老龄大鼠认知功能,采用凝胶迁移实验法测定海马组织中NF-κB活性,采用real-timePCR法测定海马组织中TNF-α、IL-1β的表达,采用Western blot法测定淀粉样蛋白(amyloid β,Aβ)42的表达。结果与C组比较,S组在七氟醚麻醉后2~4d逃避潜伏期延长,跨格次数和直立次数减少,中央格停留时间延长,海马组织中NF-κB活性增加,TNF-α和IL-1β mRNA表达增加,Aβ42表达明显增加(P均〈0.05);与S组比较,IS组七氟醚麻醉后2~4d逃避潜伏期缩短,跨格次数和直立次数增加,中央格停留时间缩短,海马组织中NF-κB活性降低,TNF-α和IL 1wmRNA表达降低,Aw42表达明显降低(P均〈0.05)。结论七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍的机制可能与海马中MyD88/NF-κB信号通路激活相关。 展开更多
关键词 七氟醚 髓系分化因子88 认知功能障碍
丹参注射液联合小剂量阿司匹林治疗妊娠高血压的效果观察 预览
5
作者 魏海 《河南医学研究》 CAS 2018年第9期1653-1654,共2页
目的 探讨丹参注射液联合小剂量阿司匹林治疗妊娠高血压的临床效果。方法 选取长垣县中医医院2016年1—12月收治的60例妊娠高血压患者,随机数表法分为两组,各30例。对照组采用硫酸镁治疗,观察组在对照组基础上采用丹参注射液联合小剂量... 目的 探讨丹参注射液联合小剂量阿司匹林治疗妊娠高血压的临床效果。方法 选取长垣县中医医院2016年1—12月收治的60例妊娠高血压患者,随机数表法分为两组,各30例。对照组采用硫酸镁治疗,观察组在对照组基础上采用丹参注射液联合小剂量阿司匹林治疗,统计对比两组治疗前后机体氧化应激反应指标[血清一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]水平变化及不良妊娠结局发生率。结果 治疗后观察组血清NO、MDA水平低于对照组、SOD水平高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组不良妊娠结局总发生率为10.00%(3/30),低于对照组的33.33%(10/30),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 丹参注射液联合小剂量阿司匹林治疗妊娠高血压临床效果显著,能改善机体氧化应激反应指标水平,降低不良妊娠结局发生率。 展开更多
关键词 丹参注射液 阿司匹林 妊娠高血压
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促红细胞生成素在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经细胞凋亡中的作用 被引量:1
6
作者 任峰 魏海 +4 位作者 刘琳琳 郭继峰 陈永清 卜少卿 谢薇薇 《临床麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1107-1111,共5页
目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)减轻七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经细胞凋亡的作用以及与Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)的关系。方法雄性SD大鼠,20月龄,体重550~750g,根据随机数字表法将大鼠分为三组(n=9... 目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)减轻七氟醚麻醉诱发老龄大鼠海马神经细胞凋亡的作用以及与Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)的关系。方法雄性SD大鼠,20月龄,体重550~750g,根据随机数字表法将大鼠分为三组(n=9):对照组(C组),七氟醚处理组(S组)和EPO+七氟醚处理组(ES组)。S及ES组大鼠吸入4%七氟醚6h;C组仅吸入空气-氧气混合气体;ES组大鼠在七氟醚处理后24、48和72h行尾缘静脉注射EPO(5 000U/kg),C组和S组仅注射等量生理盐水。采用Morris水迷宫实验评价大鼠的认知能力,采用TUNEL法评价大鼠海马神经细胞凋亡率,采用RT-PCR法测定海马组织中TLR4mRNA表达,采用JC-1免疫荧光染色法检测海马神经细胞线粒体膜电位水平;采用免疫蛋白印迹法测定海马组织中淀粉样前体蛋白(APP)和β-淀粉样肽(Aβ)蛋白表达。结果与C组比较,S组逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数差异无统计学意义,神经细胞凋亡率明显增加,TLR4mRNA表达明显下降,海马神经细胞线粒体膜电位水平明显下降,APP和Aβ表达明显增加(P〈0.05);与S组比较,ES组逃避潜伏期明显缩短,穿越平台次数差异无统计学意义,神经细胞凋亡率明显下降,TLR4 mRNA表达明显升高,海马神经细胞线粒体膜电位水平上升,APP和Aβ表达明显减少(P〈0.05)。结论促红细胞生成素能够减轻七氟醚诱发老龄大鼠海马区神经细胞的凋亡,其机制可能与抑制TLR4 mRNA表达,改善线粒体膜电位水平和抑制APP和Aβ蛋白活化相关。 展开更多
关键词 TOLL样受体 七氟醚 海马 细胞凋亡 神经毒性
海马Toll样受体4信号通路在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍中的作用
7
作者 魏海 任峰 +4 位作者 刘琳琳 郭继峰 陈永清 卜少卿 谢薇薇 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1507-1511,共5页
目的评价海马Toll样受体4(TLR4)信号通路在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍中的作用。方法SPF级健康雄性SD大鼠27只,20月龄,体重550~750 g,采用随机数字表法分为3组(n=9):对照组(C组)、七氟醚麻醉组(S组)和TLR4拮抗... 目的评价海马Toll样受体4(TLR4)信号通路在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍中的作用。方法SPF级健康雄性SD大鼠27只,20月龄,体重550~750 g,采用随机数字表法分为3组(n=9):对照组(C组)、七氟醚麻醉组(S组)和TLR4拮抗剂+七氟醚麻醉组(TS组)。TS组侧脑室注射兔抗鼠TLR4单克隆抗体30 μl,C组和S组侧脑室注射等量不含抗体的血清。侧脑室注射完成后10 min时,S组和TS组吸入4%七氟醚和30%氧气的混合气体6 h,C组仅吸入空气-氧气混合气体。七氟醚麻醉结束24 h后行Morris水迷宫实验;Morris水迷宫实验完成后,处死大鼠,取海马组织,采用TUNEL法确定神经细胞凋亡率,采用免疫荧光染色法测定活化caspase-3表达水平。七氟醚麻醉结束后6 h时,采用Northern blot分析法测定海马高迁移率族蛋白1(HMGB1) mRNA表达水平。七氟醚麻醉结束后24 h时采用Western blot法测定海马淀粉样前蛋白(APP)和β淀粉样蛋白(Aβ)的表达水平。结果与C组比较,S组逃避潜伏期延长,神经细胞凋亡率升高,活化caspase-3、HMGB1 mRNA、APP和Aβ表达上调,TS组神经细胞凋亡率升高,活化caspase-3、HMGB1 mRNA、APP和Aβ表达上调(P〈0.05),逃避潜伏期差异无统计学意义(P〉0.05);与S组比较,TS组逃避潜伏期缩短,神经细胞凋亡率降低,活化caspase-3、HMGB1 mRNA、APP和Aβ表达下调(P〈0.05)。结论海马TLR4信号通路的激活参与了七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍的机制。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 麻醉药 吸入 认知障碍 老年人
七氟醚诱发老龄大鼠认知功能的改变与TLR4-MyD88信号通路的关系 被引量:1
8
作者 任峰 魏海 +2 位作者 刘琳琳 郭继峰 谢薇薇 《中华神经医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期919-923,共5页
目的探讨七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能的改变以及与Toll样受体4-髓系分化因子88(TLR4-MyD88)信号通路的关系。方法雄性SD大鼠48只按照随机数字表法分为4组(n=12),分别为对照组、七氟醚处理组(S组)、TAK242+七氟醚处理组(TS... 目的探讨七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能的改变以及与Toll样受体4-髓系分化因子88(TLR4-MyD88)信号通路的关系。方法雄性SD大鼠48只按照随机数字表法分为4组(n=12),分别为对照组、七氟醚处理组(S组)、TAK242+七氟醚处理组(TS组)以及ST2825+七氟醚处理组(SS组)。TS和SS组大鼠侧脑室注射20μL TAK242(1g/L)和20μL ST2825(1g/L),对照组和S组仅侧脑室注射等量生理盐水。随后S组、TS组和SS组大鼠吸入40g/L七氟醚6h,对照组仅吸入空气.氧气混合气体。采用Morris水迷宫实验及旷场实验评价老龄大鼠认知能力.采用酶联免疫吸附法测定海马组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平,采用Western blotting法测定海马组织中β-粉样蛋白(Aβ)的表达。结果与对照组比较,S组大鼠在七氟醚麻醉后2-4d逃避潜伏期延长,跨格次数和直立次数减少,中央停留时间延长,TNF—α、IL-1β和Aβ表达增加,差异均有统计学意义(P〈0.05);与S组比较,TS和SS组七氟醚麻醉后2-4d逃避潜伏期缩短,跨格次数和直立次数增加,中央停留时间缩短,TNF-α、IL-1β和Aβ表达下降,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍的机制可能与TLR4-MyD88信号通路激活有关。 展开更多
关键词 TOLL样受体 七氟醚 神经毒性 认知功能
鸡β-防御素2在大肠杆菌中的串联表达及抗菌活性分析 被引量:1
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作者 石水琴 魏海 +5 位作者 祁克宗 涂健 吕小龙 刘红梅 薛挺 周秀红 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期516-523,共8页
利用基因串联技术表达鸡β-防御素2(AvBD2)重组蛋白,分析其生物结构活性以及蛋白表达量变化。构建了重组串联表达载体p ET-28a-AvBD2op-AvBD2,并将其转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达融合蛋白,经镍柱纯化后进行Western-blot检测、Tri... 利用基因串联技术表达鸡β-防御素2(AvBD2)重组蛋白,分析其生物结构活性以及蛋白表达量变化。构建了重组串联表达载体p ET-28a-AvBD2op-AvBD2,并将其转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达融合蛋白,经镍柱纯化后进行Western-blot检测、Tricine-SDS-PAGE分析和MALDI-TOF-MS质谱分析。结果显示,单表达工程菌和串联表达工程菌均在9500 u处有特异性条带;采用BCA法测得的单、串联表达工程菌纯化后的蛋白质量浓度分别为0.258和0.769 mg/m L;通过凝胶成像系统分析,单表达工程菌中目标蛋白的表达量约占上清总蛋白的10.3%,而串联表达的约占上清总蛋白的18.3%;MALDI-TOF-MS质谱分析结果表明,单、串联表达蛋白产物的分子质量分别为4 300、7 811 u;琼脂孔穴扩散抑菌法检测证明纯化蛋白对多种微生物具有不同的抗菌活性。 展开更多
关键词 鸡β-防御素2(AvBD2) 串联表达 抑菌活性 质谱分析
不同剂量羟考酮对妇科腹腔镜术后疼痛及应激反应的影响 被引量:24
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作者 李敬平 魏海 杨坤渹 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期765-768,共4页
目的观察不同剂量羟考酮对妇科腹腔镜术后疼痛及应激反应的影响。方法择期行妇科腹腔镜手术患者60例,年龄18~50岁,随机均分为三组,每组20例。手术结束前15 min,C组静脉注射生理盐水5 ml,L组静脉注射羟考酮0.05 mg/kg,H组静脉注射羟考酮0... 目的观察不同剂量羟考酮对妇科腹腔镜术后疼痛及应激反应的影响。方法择期行妇科腹腔镜手术患者60例,年龄18~50岁,随机均分为三组,每组20例。手术结束前15 min,C组静脉注射生理盐水5 ml,L组静脉注射羟考酮0.05 mg/kg,H组静脉注射羟考酮0.1 mg/kg。采用VAS评分和改良镇静-躁动评分(RASS)评价患者术后1、6、12、24 h的疼痛和镇静程度。于麻醉前、术后6、12、24 h测定血清中血糖和皮质醇水平。记录追加哌替啶及不良反应情况。结果 L组和H组在术后1 h的VAS评分明显低于C组(P〈0.05);H组在术后6 h的VAS评分明显低于C组和L组(P〈0.05)。L组和H组在术后1 h的RASS评分明显低于C组(P〈0.05)。与麻醉前比较,术后6、12、24 h三组血糖和血清皮质醇水平明显升高(P〈0.05)。L组和H组术后6、12 h血糖和血清皮质醇水平明显低于C组(P〈0.05)。三组无一例躁动、瘙痒和呼吸抑制,但均有1例(5%)恶心呕吐和头晕,组间差异无统计学意义。L组和H组术后均有2例(10%)追加哌替啶,明显少于C组的8例(40%)(P〈0.05)。结论术毕前静脉注射羟考酮0.1 mg/kg,可有效缓解妇科腹腔镜术后疼痛,术后应激反应较轻。 展开更多
关键词 羟考酮 妇科腹腔镜 术后疼痛 应激反应
癸酸-十六醇/沸石相陶粒相变储能材料的制备及性能研究 预览
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作者 林性水 李湘祁 魏海 《新型建筑材料》 北大核心 2016年第2期39-42,共4页
以癸酸(CA)-十六醇(H)二元低共熔混合物为储能材料,沸石相陶粒为载体,采用真空吸附法制备了复合相变材料,并采用XRD、SEM、DSC和FTIR对其结构和性能进行分析.结果表明:75%CA+25%H相变材料的相变开始温度为19.3℃,相变潜热为169.... 以癸酸(CA)-十六醇(H)二元低共熔混合物为储能材料,沸石相陶粒为载体,采用真空吸附法制备了复合相变材料,并采用XRD、SEM、DSC和FTIR对其结构和性能进行分析.结果表明:75%CA+25%H相变材料的相变开始温度为19.3℃,相变潜热为169.28 J/g;未经过水热处理的陶粒主要为石英相,其对CA-H的吸附率为31%,经过20h碱性溶液处理后的陶粒主要为沸石相,其对CA-H的物理吸附率达42%,对应的相变开始温度为20℃,相变潜热为41.48 J/g;与未处理陶粒相比,沸石相陶粒复合储能材料的储能性能显著提升. 展开更多
关键词 二元低共熔混合物 相变材料 沸石相陶粒 储热性能
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鸡β防御素2在毕赤酵母中的组成型表达及其发酵条件的优化 被引量:2
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作者 魏海 祁克宗 +4 位作者 王尔群 吕小龙 涂健 周秀红 刘红梅 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期693-699,共7页
合成鸡β防御素2(AvBD2)成熟肽基因,构建重组质粒pGHK-AvBD2;将其电转化至毕赤酵母GS115;Tricine-SDS-PAGE和Western-blot检测表达产物,琼脂扩散法测定产物的抑菌活性,并测定产物的溶血活性;响应面法优化接种量、装液量和发酵温度。Tr... 合成鸡β防御素2(AvBD2)成熟肽基因,构建重组质粒pGHK-AvBD2;将其电转化至毕赤酵母GS115;Tricine-SDS-PAGE和Western-blot检测表达产物,琼脂扩散法测定产物的抑菌活性,并测定产物的溶血活性;响应面法优化接种量、装液量和发酵温度。Tricine-SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,在5.8ku位置出现目的蛋白质条带;抑菌活性检测表明,表达产物对粪肠球菌(ATCC29212)、大肠杆菌(CMCC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和巴氏杆菌具有明显的抑菌活性;发酵产物在500mg/L时的溶血活性仅2.17%。由建立的响应面模型得到重组酵母最佳发酵条件为:接种量528mg/100mL、装液量8.43%、发酵温度27.8℃,产物蛋白浓度较优化前提高20%。本研究实现了AvBD2在毕赤酵母中的组成型表达,表达产物有较好的抗菌活性,为AvBD2作为新型饲料添加剂的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡β-防御素2 巴斯德毕赤酵母 组成型表达 响应面法优化
毕赤酵母组成型表达载体的构建及报告蛋白表达评价 被引量:1
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作者 张永正 温俊柳 +3 位作者 王燕 魏海 涂健 祁克宗 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第10期1379-1383,共5页
目的 构建毕赤酵母(Pichia pastoris)组成型分泌表达载体,并表达报告蛋白葡萄球菌核酸酶(staphylococcus nuclease,SNase,NucA),以评价其表达外源蛋白的能力。方法 从巴斯德毕赤酵母GS115基因组中PCR扩增毕赤酵母甘油醛-3-磷酸脱氢... 目的 构建毕赤酵母(Pichia pastoris)组成型分泌表达载体,并表达报告蛋白葡萄球菌核酸酶(staphylococcus nuclease,SNase,NucA),以评价其表达外源蛋白的能力。方法 从巴斯德毕赤酵母GS115基因组中PCR扩增毕赤酵母甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase promoter,pGAP)片段,克隆至载体pPIC9K中,构建组成型分泌表达载体pGHKα;从金黄色葡萄球菌基因组中PCR扩增编码报告蛋白金黄色葡萄球菌NucA成熟肽的序列nucA,克隆至载体pGHKα中,构建重组表达质粒pGHKα-nucA,经SacⅠ和BglⅡ依次酶切线性化后,电转化至毕赤酵母GS115中;PCR及TB-D平板法筛选阳性重组酵母菌;Tricine-SDS-PAGE检测表达产物;琼脂扩散法检测重组酵母菌表达上清液的核酸酶活性。结果 组成型分泌表达载体pGHKα经PCR鉴定,证明构建正确;重组表达质粒pGHKα-nucA经PCR及测序鉴定,证明nucA基因片段正确插入载体pGHKα中;重组酵母菌GS115/pGHKα-nucA经PCR及TB-D平板法检测证明构建成功;表达的目的 蛋白相对分子质量约为17000,表达量约占上清总蛋白的42%,且具有显著的核酸酶活性。结论 成功构建了毕赤酵母组成型分泌表达载体pGHKα,其能正确表达报告蛋白NucA,且表达的蛋白能分泌到细胞外,表达效率高,为异源蛋白在毕赤酵母中的安全高效表达奠定了基础。 展开更多
关键词 毕赤酵母 甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子 组成型表达 葡萄球菌核酸酶
血府逐瘀汤加味治疗输卵管结扎术后腰腹痛临床研究
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作者 魏海 付涛 付林安 《中医学报》 CAS 2012年第8期1053-1054,共2页
目的:探讨血府逐瘀汤加味治疗输卵管结扎术后腰腹痛的临床疗效。方法:将98例输卵管结扎术后腰腹痛患者随机分为治疗组和对照组,对照组50例采用青霉素480万U合质量分数0.9%氯化钠注射液及质量分数0.5%甲硝唑注射液静脉滴注,每12h... 目的:探讨血府逐瘀汤加味治疗输卵管结扎术后腰腹痛的临床疗效。方法:将98例输卵管结扎术后腰腹痛患者随机分为治疗组和对照组,对照组50例采用青霉素480万U合质量分数0.9%氯化钠注射液及质量分数0.5%甲硝唑注射液静脉滴注,每12h1次,7d为1个疗程,5个疗程后观察疗效。治疗组48例口服血府逐瘀汤加味(方药组成:当归15g,川芎10g,赤芍10g,熟地黄15g,怀牛膝15g,柴胡10g,枳壳10g,甘草6g)治疗。每日1剂,煎药机煎取2袋,旱晚2次分服。于月经干净后第2天开始服药,经前5d停药,3周为1个疗程。2个疗程后观察疗效。结果:治疗组痊愈29例(60%),好转16例(34%),无效3例(6%),有效率为94%。对照组痊愈4例(8%),好转11例(22%),无效35例(70%),有效率为30%。两组有效率经统计学处理,差异有统计学意义。结论:血府逐瘀汤加味治疗输卵管结扎术后腰腹痛疗效显著。 展开更多
关键词 输卵管结扎术 腰腹痛 血府逐瘀汤 活血祛瘀 行气解郁止痛 青霉素 甲硝唑注射液
早期子痫前期应用期待治疗对妊娠结局的影响 预览 被引量:1
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作者 魏海 《中国实用医药》 2012年第12期 103-104,共2页
目的 探讨早期子痫前期应用期待治疗对妊娠结局的影响.方法 回顾性分析我院自2010年01月至2011年12月收治的94例早期子痫前期患者的临床资料.结果 三组患者并发症随治疗时间延长而增加,A组围生儿死亡率为51.6%,B组围生儿死亡率为37.5%,... 目的 探讨早期子痫前期应用期待治疗对妊娠结局的影响.方法 回顾性分析我院自2010年01月至2011年12月收治的94例早期子痫前期患者的临床资料.结果 三组患者并发症随治疗时间延长而增加,A组围生儿死亡率为51.6%,B组围生儿死亡率为37.5%,C组围生儿死亡率为16.1%,三组差异显著,具有统计学意义(P〈0.05).结论 对于早期子痫前期患者实施期待治疗时,应综合考虑制定治疗时间,以保障母婴生命安全. 展开更多
关键词 早期子痫前期 期待治疗 妊娠结局
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活跃早期人工破膜对产程进展及分娩的影响研究 预览 被引量:5
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作者 魏海 《中国实用医药》 2012年第15期 105-106,共2页
目的探讨活跃早期人工破膜对产程进展及分娩的影响。方法选择我院2009~2010年度100例头位自然的孕妇为观察组,当宫口大于3cm时进行人工破膜,另选择100例头位自然分娩的孕妇作为对照,当宫口〉3cm时让其自然破膜,对两组的产程和分娩情况... 目的探讨活跃早期人工破膜对产程进展及分娩的影响。方法选择我院2009~2010年度100例头位自然的孕妇为观察组,当宫口大于3cm时进行人工破膜,另选择100例头位自然分娩的孕妇作为对照,当宫口〉3cm时让其自然破膜,对两组的产程和分娩情况进行评分。结果观察组100例有90例在人工破膜半小时之后存在不同程度的宫缩现象,所占比例为90%。对照组100例在进行人工破膜之后有45例存在宫缩增加现象,占到的比例为50%。自然分娩率观察组较对照组要高,对照组的胎头吸引率较高,两组结果具有显著统计学差异。结论活跃早期人工破膜可以缩短产程并且对于分娩没有不利的影响,可以在临床上推广使用。 展开更多
关键词 人工破膜 产程 分娩
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桂枝茯苓丸临床应用举隅 被引量:2
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作者 魏海 傅涛 傅林安 《河南中医》 2012年第7期818-819,共2页
桂枝茯苓丸功效活血化瘀、缓消瘢瘕,主治瘀阻胞宫证。临床应用桂枝茯苓丸治疗子宫肌瘤、卵巢囊肿、盆腔积液等疾病,疗效显著。
关键词 桂枝茯苓丸 癥瘕 子宫肌瘤 卵巢囊肿 盆腔积液 《金匮要略》 张仲景
三批雷公藤药材真伪的鉴别及其提取方法研究 预览 被引量:3
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作者 阮鸣 魏海 《云南民族大学学报:自然科学版》 CAS 2010年第2期143-145,共3页
目的:鉴别3批雷公藤药材的真伪,并优选雷公藤中雷公藤甲素的最佳提取方法.方法:以雷公藤甲素为检测指标,采用高效液相色谱法,鉴别3批雷公藤药材的真伪,并考察超声波提取法、冷凝回流法和索氏提取法对雷公藤甲素含量的影响.结果... 目的:鉴别3批雷公藤药材的真伪,并优选雷公藤中雷公藤甲素的最佳提取方法.方法:以雷公藤甲素为检测指标,采用高效液相色谱法,鉴别3批雷公藤药材的真伪,并考察超声波提取法、冷凝回流法和索氏提取法对雷公藤甲素含量的影响.结果:只有购于福建的一批雷公藤药材可检测出雷公藤甲素;索氏提取法提取的雷公藤甲素含量明显高于超声波提取法和冷凝回流法.结论:购于亳州的雷公藤药材为赝品药材;索氏提取法提取效率高,所需溶剂少,操作简便,适用于雷公藤药材中雷公藤甲素的提取. 展开更多
关键词 雷公藤 雷公藤甲素 鉴别 HPLC 提取方法
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从湿阻论治“当今夏日病” 预览
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作者 傅林安 傅涛 魏海 《河北中医》 2010年第6期 846-847,共2页
“当今夏日病”确切地说应该是“冰箱病”、“空调病”,是近年家用电器广泛应用,每至夏秋季节出现的一组以头重如裹、脘腹满闷、肢体困重、纳食呆滞或发热为主要临床表现的综合征,按其证候表现属中医学湿阻范畴。
关键词 湿邪 季节 辨证分型
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苓桂术甘汤临床新用例析
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作者 傅林安 傅涛 魏海 《实用中医内科杂志》 2010年第4期94-95,共2页
运用苓桂术甘汤临证新用三则:梅尼埃氏病,证属眩晕,痰邪中阻,清阳不升,浊阴下降;肾囊肿,证属腰痛(肾阳虚型);风湿性心脏瓣膜病伴心功能不全,证属心饮凌心射肺。
关键词 苓桂术甘汤 临床应用
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