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不同地区海芋与混淆品尖尾芋的生药鉴定与显微定量分析研究 认领
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作者 陈妍月 +2 位作者 汪红 钟晓明 黄真 《浙江中医药大学学报》 CAS 2020年第1期89-98,共10页
[目的]对不同地区的海芋和混淆品尖尾芋进行系统的生药鉴定和显微定量分析,明确不同来源品种的鉴别特征,为海芋的后续开发提供技术保障。[方法]采用中药鉴定方法,对重庆、广东、广西、四川和江苏的海芋及混淆品尖尾芋的原植物形态、性... [目的]对不同地区的海芋和混淆品尖尾芋进行系统的生药鉴定和显微定量分析,明确不同来源品种的鉴别特征,为海芋的后续开发提供技术保障。[方法]采用中药鉴定方法,对重庆、广东、广西、四川和江苏的海芋及混淆品尖尾芋的原植物形态、性状、显微特征及理化性质进行研究;利用显微定量分析法,结合SPSS软件对不同样品粉末的草酸钙针晶数量和长度进行定量分析。[结果]不同地区的海芋原植物、叶片和根茎的性状相似,没有显著的鉴别特征;混淆品尖尾芋与海芋的性状特征相近,在叶和根茎中存在较大差异。显微观察表明海芋叶上表皮被睫毛状角质层,栅栏组织约占叶肉组织1/2,维管束中以单个大型导管为主,不同地区海芋样品间的差异不明显;尖尾芋叶上表皮角质层较平坦,栅栏组织约占叶肉组织1/3,维管束中以成对导管为主。理化鉴定初步证明海芋根茎中含有鞣质、皂苷、有机酸、黄酮、甾醇、三萜类和生物碱等化学成分,不同地区的海芋在鞣质与黄酮等含量的显色反应程度上略有差异;尖尾芋中鞣质、皂苷及黄酮成分含量较少,与海芋存在显著差异。显微及定量分析结果表明,不同地区海芋的根茎结构特征相似,在草酸钙针晶和簇晶数量上存在一定差异,可作为鉴别特征用于不同地区海芋的区分;尖尾芋根茎中木栓层细胞数、草酸钙针晶和簇晶均明显少于海芋根茎,其中针晶数量差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]本研究初步建立了海芋与混淆品尖尾芋药材的中药鉴别方法,为后期的质量控制研究提供参考。 展开更多
关键词 不同地区海芋 尖尾芋 基原鉴定 性状鉴定 显微鉴定 理化鉴定 显微定量分析
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番薯藤提取物抗痤疮丙酸杆菌有效部位筛选研究 认领
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作者 马翊 +2 位作者 沈敏琪 钟晓明 黄真 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期824-828,共5页
目的研究番薯藤提取物对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌作用,并对其有效部位进行筛选。方法采用固体平板法、试管2倍比稀释法测定番薯藤水、醇提物对痤疮丙酸杆菌的抑菌圈大小和最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),采用系统... 目的研究番薯藤提取物对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌作用,并对其有效部位进行筛选。方法采用固体平板法、试管2倍比稀释法测定番薯藤水、醇提物对痤疮丙酸杆菌的抑菌圈大小和最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),采用系统溶剂法对番薯藤醇提物进行梯度提取,分别得到石油醚层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层和水层5个不同极性部位,并确定其有效部位及相应的MIC、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。结果番薯藤醇提物对痤疮丙酸杆菌有较强抑制作用,其MIC为50mg·mL-1。其中石油醚部位的抑菌作用最强,MIC为12.5 mg·mL-1,MBC为25 mg·mL-1;其次为正丁醇部位,MIC为25 mg·mL-1,MBC为100 mg·mL-1。结论番薯藤醇提物对痤疮丙酸杆菌存在体外抑制作用,其有效成分主要集中于石油醚和正丁醇部位。 展开更多
关键词 番薯藤 痤疮丙酸杆菌 系统溶剂法 固体平板法 试管二倍稀释法
玄参环烯醚萜苷对氧糖剥夺再灌注诱导的原代皮层神经元细胞内质网应激的作用研究 认领 被引量:1
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作者 章蕾 +1 位作者 钟晓明 黄真 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2934-2940,共7页
目的探讨玄参环烯醚萜苷通过内质网应激介导的细胞凋亡通路对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)诱导的原代皮层神经元细胞的作用及机制。方法分离SD大鼠原代皮层神经元,用玄参环烯醚萜苷(50、100、200 μg/mL)对原代皮层神经元进行预处理24 h,采用O... 目的探讨玄参环烯醚萜苷通过内质网应激介导的细胞凋亡通路对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)诱导的原代皮层神经元细胞的作用及机制。方法分离SD大鼠原代皮层神经元,用玄参环烯醚萜苷(50、100、200 μg/mL)对原代皮层神经元进行预处理24 h,采用OGD/R诱导制备脑缺血再灌注细胞模型,倒置显微镜下鉴定细胞纯度,观察细胞形态变化;MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞内乳酸脱氢酶(LDH)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting法检测C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白-78(GRP78)和Caspase-12蛋白表达。结果培养的原代皮层神经元胞体饱满,状态良好,纯度较高。与对照组比较,经OGD/R处理后原代皮层神经元整体回缩变圆,胞体表面变粗糙;细胞存活率、SOD活性显著降低;LDH水平、细胞凋亡率显著升高;CHOP、Caspase-12和GRP78蛋白表达水平显著升高。与模型组比较,玄参环烯醚萜苷预处理能改善细胞损伤情况;提高细胞存活率、SOD活性;降低LDH水平和细胞凋亡率;降低CHOP、Caspase-12和GRP78蛋白表达水平。结论玄参环烯醚萜苷能拮抗OGD/R诱导的原代皮层神经元神经损伤,其作用机制与抑制内质网应激介导的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 氧糖剥夺再灌注 玄参环烯醚萜苷 内质网应激 细胞凋亡 C/EBP同源蛋白 葡萄糖调节蛋白-78 CASPASE-12
芍药苷对皮质酮致原代皮层细胞神经损伤的保护作用及机制研究 认领 被引量:4
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作者 陈梦静 雪媛 +2 位作者 钟晓明 黄真 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1507-1511,共5页
目的:探讨促丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在芍药苷拮抗皮质酮诱导的神经损伤作用及其机制,为抑郁症的预防与治疗提供新思路。方法:采用高浓度皮质酮制备原代皮层神经细胞抑郁症及神经损伤模型,细胞... 目的:探讨促丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路在芍药苷拮抗皮质酮诱导的神经损伤作用及其机制,为抑郁症的预防与治疗提供新思路。方法:采用高浓度皮质酮制备原代皮层神经细胞抑郁症及神经损伤模型,细胞随机分为正常组、皮质酮组、芍药苷(1、10、50μmol/L)组、芍药苷(1、10、50μmol/L)+皮质酮组、U0126/PD98059组+正常组、U0126/PD98059组+皮质酮组、U0126/PD98059+芍药苷+皮质酮组,共14组。进行细胞纯度鉴定,观察细胞形态,检测细胞存活率,检测细胞ERK1、ERK2、CREB m RNA的表达,检测细胞p-ERK/ERK、p-CREB/CREB蛋白的表达。结果:培养的细胞胞体饱满,状态良好,纯度较高。与正常组比较,皮质酮组可降低细胞存活率(P〈0.01),芍药苷各剂量组可不同程度使细胞存活率增加(P〈0.01,P〈0.05),U0126或PD98059能逆转芍药苷提高细胞存活率的作用。与正常组比较,皮质酮组细胞ERK1、ERK2、CREB m RNA含量显著降低(P〈0.01,P〈0.05);与皮质酮组比较,芍药苷50μmol/L+皮质酮组细胞ERK1 m RNA及芍药苷10μmol/L+皮质酮组细胞中ERK2、CREB m RNA含量显著升高(P〈0.05)。与正常组比较,皮质酮组细胞p-ERK/ERK、p-CREB/CREB蛋白表达均下降(P〈0.01);与皮质酮组比较,芍药苷各剂量组细胞p-ERK/ERK蛋白表达水平呈显著性升高(P〈0.01);与芍药苷10μmol/L+皮质酮组比较,加入U0126/PD98059预处理后,细胞p-ERK/ERK、p-CREB/CREB蛋白表达水平下降。结论:芍药苷能拮抗皮质酮诱导的原代皮层神经细胞的神经损伤,其作用机制由MEK/ERK信号通路介导。 展开更多
关键词 芍药苷 抑郁症 神经损伤 MEK/ERK信号通路 皮质酮
肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶干扰慢病毒表达载体构建及稳定转染PC 12细胞株的建立 认领
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作者 王可 雪媛 +3 位作者 周炳文 钟晓明 黄真 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期951-955,共5页
目的 构建肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶(SERCA)基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞系。方法 人工设计、合成针对SERCA基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与p Gag/Pol、pRev、p VSV-... 目的 构建肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶(SERCA)基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞系。方法 人工设计、合成针对SERCA基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与p Gag/Pol、pRev、p VSV-G共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染PC 12细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western blot技术检测PC 12稳定细胞中SERCA基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较。结果 成功构建了针对SERCA基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为3×108U·m L-1;建立稳定转染的PC 12细胞株。有效干扰验证显示,sh SERCA能明显降低SERCA的mRNA及蛋白水平(P〈0.01)。结论 成功构建SERCA基因的sh SERCA慢病毒表达载体,建立稳定干扰SERCA表达的PC 12细胞株。 展开更多
关键词 肌浆网-内质网钙离子转运三磷酸腺苷酶基因 核糖核酸干扰 大鼠肾上腺嗜铬细胞 钙离子转运ATP酶 慢病毒
松针的显微及分子鉴别研究 认领 被引量:3
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作者 刘祖望 +3 位作者 陈妍月 张坚 程汝滨 黄真 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期300-306,共7页
目的:利用显微和分子鉴定技术对不同植物基源的松针药材进行鉴别,为松针的鉴别提供科学依据。方法:采用基源、显微鉴定的方法研究马尾松(Pinus massoniana Lamb.)、黑松(Pinus thunbergii Parl.)和华山松(Pinus armandii Franch... 目的:利用显微和分子鉴定技术对不同植物基源的松针药材进行鉴别,为松针的鉴别提供科学依据。方法:采用基源、显微鉴定的方法研究马尾松(Pinus massoniana Lamb.)、黑松(Pinus thunbergii Parl.)和华山松(Pinus armandii Franch.)的特征;利用PCR扩增和双向测序分析植物DNA条形码ITS2和rbc L序列特征;采用分子进化遗传分析(MEGA)6.0软件进行种间、种内Kimura2-parameter(K2P)遗传距离计算,并构建邻接系统聚类树。结果:三种松针数目及长度、维管束数、气孔线的分布、树脂道数目及分布等具有明显区别。马尾松、黑松和华山松的ITS2序列长度分别为470、469和470 bp,rbc L序列长度均为553 bp;ITS2序列在马尾松、黑松和华山松的种内变异率分别为0%、0.2%和2.8%,rbc L序列在这三种松针样品的种内变异率分别为0%、2.4%和1.1%。ITS2序列在松针的种内和种间遗传距离中不存在显著的条形码间隔;而rbc L序列的种内和种间距离存在一定的条形码间隔。邻接系统树结果表明,三种松针药材聚为不同的分支,rbc L条形码序列可鉴别马尾松、黑松、华山松及其近缘的植物。结论:利用基源、显微及分子鉴定技术可准确、快速地鉴别马尾松、黑松和华山松,为松针的质量评价和分类鉴别提供了方法和依据。 展开更多
关键词 松科/化学 序列分析 药材显微鉴定 自动数据处理
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哈巴苷对急性脑缺血及线粒体介导的Caspase依赖性细胞凋亡信号通路的影响 认领 被引量:9
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作者 楼烨亮 陈梦静 +5 位作者 王可 雪媛 钟晓明 程汝滨 黄真 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期563-567,共5页
目的探讨哈巴苷对急性脑缺血及线粒体介导的caspase依赖性细胞凋亡通路的影响。方法采用MCAO法建立小鼠急性脑缺血模型,造模后各组立即尾静脉注射(iv)哈巴苷(4、8、12 mg·kg-1)、依达拉奉(3.2 mg·kg-1),模型组及假手术... 目的探讨哈巴苷对急性脑缺血及线粒体介导的caspase依赖性细胞凋亡通路的影响。方法采用MCAO法建立小鼠急性脑缺血模型,造模后各组立即尾静脉注射(iv)哈巴苷(4、8、12 mg·kg-1)、依达拉奉(3.2 mg·kg-1),模型组及假手术组同法给予等量生理盐水,0.1 mL·(10 g)-1。造模6h后,观测小鼠神经功能评分、脑梗死体积及脑组织形态病理学变化;采用Western blot法测定各组脑组织线粒体中Cyt C及胞质中pro-caspase-3的含量。结果造模6 h后,哈巴苷各剂量组均能明显降低因缺血而增加的小鼠神经功能评分及脑梗死体积(P〈0.01,P〈0.05);均能不同程度减轻脑组织神经元核固缩、核溶解程度,改善脑组织因缺血造成的病理损伤;能明显上调脑组织线粒体中Cyt C及胞质中pro-caspase-3的表达。结论哈巴苷对急性脑缺血具有保护作用,其保护作用可能与抑制线粒体介导的caspase依赖性细胞凋亡信号通路相关。 展开更多
关键词 哈巴苷 急性脑缺血 线粒体 caspase依赖性细胞凋亡 细胞色素C pro-caspase-3
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球花石斛和流苏石斛的显微鉴别及多糖含量测定 认领 被引量:2
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作者 朱燕 +1 位作者 钟晓明 黄真 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2017年第6期1362-1363,共2页
目的 建立球花石斛和流苏石斛的鉴别方法,为进一步鉴别不同种石斛提供实验基础。方法 采用组织切片和显微数量分析对球花石斛和流苏石斛进行显微鉴别;采用苯酚-浓硫酸法测定二者多糖含量。结果 球花石斛和流苏石斛组织切片特征明显,且... 目的 建立球花石斛和流苏石斛的鉴别方法,为进一步鉴别不同种石斛提供实验基础。方法 采用组织切片和显微数量分析对球花石斛和流苏石斛进行显微鉴别;采用苯酚-浓硫酸法测定二者多糖含量。结果 球花石斛和流苏石斛组织切片特征明显,且针晶束和硅质块数量差异具有统计学意义(P〈0.01);球花石斛及流苏石斛的多糖含量分别为4.42%、4.47%。结论 球花石斛和流苏石斛多糖含量相近,可采用显微数量分析方法鉴别,此方法简单、快速、重复性好,可为临床上准确使用不同石斛品种提供可靠的鉴别方法。 展开更多
关键词 球花石斛 流苏石斛 显微数量分析 苯酚-浓硫酸法
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