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A quantitative understanding of lac repressor's binding specificity and flexibility
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作者 Zheng Zuo Yiming Chang Gary D. Stormo 《中国电气与电子工程前沿:英文版》 CSCD 2015年第2期69-80,共12页
关键词 结合特异性 阻遏蛋白 LAC 活性 转录调节因子 序列方法 运营商 键结构
A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51的原核表达及活性检测 预览
2
作者 吕梦娜 龙航宇 +3 位作者 王丽梅 唐陶 陈冰冰 林瑞庆 《华南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期19-23,共5页
【目的】原核表达A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51并研究其对A型产气荚膜梭菌Clostridium perfringens的体外抗菌活性。【方法】合成噬菌体裂解酶Cp51基因,并构建了p ET-32a-Cp51原核表达载体,转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21(... 【目的】原核表达A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51并研究其对A型产气荚膜梭菌Clostridium perfringens的体外抗菌活性。【方法】合成噬菌体裂解酶Cp51基因,并构建了p ET-32a-Cp51原核表达载体,转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),经终浓度为0.5 mmol·L–1的IPTG诱导以及镍柱纯化后,获得了可溶性的Cp51重组蛋白;用比浊法检测Cp51重组蛋白的杀菌活性。【结果】噬菌体裂解酶Cp51重组蛋白能够有效降低7株A型产气荚膜梭菌的浊度,裂解酶质量浓度在5μg·m L–1以上、作用30 min对A型产气荚膜梭菌的杀菌率可达到99.99%以上,而对其他种类细菌无杀菌效果。【结论】A型产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶Cp51重组蛋白对A型产气荚膜梭菌有较强的体外杀菌活性和特异性,研究结果为后续裂解酶Cp51的临床应用奠定基础。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 噬菌体 裂解酶 蛋白表达 杀菌活性
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噬菌体表面显示技术在生物医学研究中的应用 预览 被引量:1
3
作者 韩照中 苏国富 《微生物学免疫学进展》 1998年第3期 61-64,共4页
利用噬菌体表面显示技术,将蛋白质或短肽分子在噬菌体表面表达,可以对抗原表位及蛋白质的相互作用位点进行定位与模拟,并用于蛋白质的体外亲和力优化以及新基因的克隆,在小分子药物的设计和筛选中也具有重要的作用。环肽结构的设计... 利用噬菌体表面显示技术,将蛋白质或短肽分子在噬菌体表面表达,可以对抗原表位及蛋白质的相互作用位点进行定位与模拟,并用于蛋白质的体外亲和力优化以及新基因的克隆,在小分子药物的设计和筛选中也具有重要的作用。环肽结构的设计以及筛选策略和方法的改进,逐步推动着噬菌体表面显示技术在免疫学、基因工程药物及基础生物医学研究等研究领域中的成功应用。 展开更多
关键词 噬菌体 表面显示技术 生物医学 应用
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辅助噬菌体在噬菌体展示中的应用及研究进展 被引量:1
4
作者 杜东霞 张冉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期261-266,共6页
噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白质与特定噬菌体衣壳蛋白相融合,展示于噬菌体表面来构建蛋白质或多肽丈库,并从中筛选目的蛋白、多肽或抗体的基因工程高新技术。噬菌粒/辅助噬菌体系统是最常用的噬菌体展示系统,此系统中辅助噬... 噬菌体展示技术是一种将外源肽或蛋白质与特定噬菌体衣壳蛋白相融合,展示于噬菌体表面来构建蛋白质或多肽丈库,并从中筛选目的蛋白、多肽或抗体的基因工程高新技术。噬菌粒/辅助噬菌体系统是最常用的噬菌体展示系统,此系统中辅助噬菌体对噬菌粒的复制和组装发挥着至关重要的作用。本文结合当今该领域的最新研究动态,概述了噬菌粒和辅助噬菌体双基因组系统,着重介绍了不同辅助噬菌体的特点及其突变机制,并对其应用前景进行了展望,以期为该技术的进一步完善提供一定的借鉴作用。 展开更多
关键词 噬菌体展示 辅助噬菌体 噬菌粒 超感染
一种适于转基因水稻PCR检测的微量DNA快速提取法 预览 被引量:10
5
作者 许明 程祖锌 +2 位作者 黄志伟 杨志坚 郑金贵 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期 128-130,共3页
对已报道的小麦基因组DNA快速提取方法的部分步骤进行了简化,在水稻上进行了尝试。结果表明,简化法提取的水稻基因组DNA完整性好,PCR扩增效果与试剂盒提取法无明显的差异,结果稳定可靠;而且整个提取过程操作简单、花费时间少,样... 对已报道的小麦基因组DNA快速提取方法的部分步骤进行了简化,在水稻上进行了尝试。结果表明,简化法提取的水稻基因组DNA完整性好,PCR扩增效果与试剂盒提取法无明显的差异,结果稳定可靠;而且整个提取过程操作简单、花费时间少,样品用量少,仅需5—10mg,适用于大规模转基因水稻的PCR检测。 展开更多
关键词 转基因水稻 PCR检测 基因组DNA 快速提取
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金黄色葡萄球菌噬菌体的分离筛选 预览 被引量:2
6
作者 李雪玲 冯惠玲 +3 位作者 李锡平 黄玉敏 梁庆文 邓丽卿 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第15期158-161,165共5页
以金黄色葡萄球菌为宿主菌,采用富集法从污水、粪便样品中分离筛选噬菌体,纯化后观察噬菌斑特征,电镜形态,并测定其效价、RTD(RoutineTestDilution,常规实验稀释度)值,初步分析该噬菌体的宿主谱。结果获得一株对金黄色葡萄球菌... 以金黄色葡萄球菌为宿主菌,采用富集法从污水、粪便样品中分离筛选噬菌体,纯化后观察噬菌斑特征,电镜形态,并测定其效价、RTD(RoutineTestDilution,常规实验稀释度)值,初步分析该噬菌体的宿主谱。结果获得一株对金黄色葡萄球菌敏感的噬菌体,该噬菌体在宿主菌平板上能形成直径1-2mm、边界清晰、圆形透明的噬菌斑,效价是3.2×10^10PFU/mL,RTD值为10^-3,电镜观察显示此噬菌体由直径约为30nm的多面体头部和约50nm的尾部组成,可以裂解宿主菌及其它2株金黄色葡萄球菌,不能裂解大肠杆菌,鼠伤寒沙门氏菌及痢疾志贺氏菌。本文为深入研究金黄色葡萄球菌噬菌体的生物学特性及其功能提供了依据,为进一步利用噬菌体检测食源性金黄色葡萄球菌、防治由金黄色葡萄球菌引起的疾病提供了理论基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 噬菌体 分离筛选
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利用噬菌体展示文库筛选纤维素结合结构基元 被引量:4
7
作者 韩照中 苏国富 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 1998年第3期 263-266,共4页
从编码随机15肽序列的噬菌体表面展示文库中,筛选得到了与纤维素有特异亲和能力的噬菌体克隆。序列分析结果表明,这些噬菌体克隆编码的氨基酸序列中芒香族氨基酸残基高度保守,与天然纤维素结合结构域的结构有一定的类似性。
关键词 噬菌体 肽库 纤维素 结合结构基元
噬菌体抗体库技术及其研究进展 预览
8
作者 海岗 才学鹏 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期 40-45,共6页
随着分子生物学和细胞生物学技术的发展,抗体的研究已进入基因工程抗体时代.
关键词 分子生物学 噬菌体抗体库技术 噬茵体展示技术系统 抗体可变区基因 载体 表达
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视角:噬菌体的时代
9
作者 桑昱 《世界科学》 2014年第12期21-22,共2页
细菌噬菌体.简称“噬菌体”.是指可以感染和在某些情况下破坏细菌细胞的病毒。在19世纪初.科学家已经开始使用噬菌体作为一种医治手段。然而.在上世纪40年代这项技术不被重用了.主要是由于抗菌药物的引入.因为抗菌药物可治疗更多... 细菌噬菌体.简称“噬菌体”.是指可以感染和在某些情况下破坏细菌细胞的病毒。在19世纪初.科学家已经开始使用噬菌体作为一种医治手段。然而.在上世纪40年代这项技术不被重用了.主要是由于抗菌药物的引入.因为抗菌药物可治疗更多种类的感染。 展开更多
关键词 噬菌体 细菌细胞 抗菌药物 科学家 感染
热诱导速度对噬菌体包装蛋白提取物效价的影响
10
作者 任兆钧 冯其辉 刘新垣 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第2期 191-192,共2页
<正> 利用D蛋白和E蛋白基因缺陷λ的溶原菌热诱导制备蛋白质提取物,进行噬菌体的体外包装,提取物的效价高低,对重组噬菌体的包装是至为关键的,直接影响到外源基因库的完整性和随机性。目前一般包装效价为10~7—10~8Pfu/μgDNA本... <正> 利用D蛋白和E蛋白基因缺陷λ的溶原菌热诱导制备蛋白质提取物,进行噬菌体的体外包装,提取物的效价高低,对重组噬菌体的包装是至为关键的,直接影响到外源基因库的完整性和随机性。目前一般包装效价为10~7—10~8Pfu/μgDNA本文比较了快、慢诱导对效价的影响,快诱导的体外包装效价可达2.8×10~8Pfu/μgDNA,而慢诱导包装效价低。 展开更多
关键词 噬菌体 包装蛋白提取物 包装效价 热诱导
海洋玫瑰杆菌病毒的研究进展 预览
11
作者 甄卓 张永雨 刘静雯 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期112-117,共6页
玫瑰杆菌(Roseobacter)是由生理功能各异的细菌所组成的一大类α-变形细菌类群[1]。它们在海洋中分布广泛,且丰度较高,尤其在近海与极地海洋中,这一类细菌在整个微生物群落中所占的比例可高达25%[1-3]。玫瑰杆菌在海洋中几乎无处不在... 玫瑰杆菌(Roseobacter)是由生理功能各异的细菌所组成的一大类α-变形细菌类群[1]。它们在海洋中分布广泛,且丰度较高,尤其在近海与极地海洋中,这一类细菌在整个微生物群落中所占的比例可高达25%[1-3]。玫瑰杆菌在海洋中几乎无处不在,覆盖了大部分海洋生态区域,包括生活在浮游藻类、沉积物、海冰和海洋无脊椎动物身上等[4-5]。玫瑰杆菌属的很多成员在全球碳、硫循环以及气候变化中起着重要作用,例如玫瑰杆菌中的一些细菌具有好氧不产氧光合作用的生理功能, 展开更多
关键词 海洋无脊椎动物 杆菌 玫瑰 病毒 生理功能 微生物群落 细菌类 生态区域
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λ噬菌体DNA的快速提取法 预览 被引量:2
12
作者 徐建兰 曾木圣 《首都医科大学学报》 CAS 1998年第3期 264-265,共2页
从cDNA文库中筛选目的片段是获得新基因的常用和可靠手段。由于具有能扩增和长期保存不失活的优点,目前一般用λ噬菌体DNA来作为cDNA文库载体。因此提取λ噬菌体DNA便成为鉴定cDNA文库重组效率和获得目的片段的必由... 从cDNA文库中筛选目的片段是获得新基因的常用和可靠手段。由于具有能扩增和长期保存不失活的优点,目前一般用λ噬菌体DNA来作为cDNA文库载体。因此提取λ噬菌体DNA便成为鉴定cDNA文库重组效率和获得目的片段的必由之路。通常提取λ噬菌体DNA采用2... 展开更多
关键词 噬菌体DNA 快速提取法
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分枝杆菌噬菌体DNAⅢ的遗传学信息及抗结核潜力初步研究 预览 被引量:3
13
作者 甘易玲 刘平 +1 位作者 邬亭亭 郭述良 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1323-1327,1332共6页
目的了解分枝杆菌噬菌体DNAⅢ的遗传学信息,初步探索其在抗结核治疗中的应用潜力。方法试剂盒提取噬菌体DNA,鸟枪法测序,Phred/Phrad/Consed软件包组装、拼接重叠群,PCR扩增连接重叠群缺口。通过DNAStar软件包中的EditSeq软件、Gl... 目的了解分枝杆菌噬菌体DNAⅢ的遗传学信息,初步探索其在抗结核治疗中的应用潜力。方法试剂盒提取噬菌体DNA,鸟枪法测序,Phred/Phrad/Consed软件包组装、拼接重叠群,PCR扩增连接重叠群缺口。通过DNAStar软件包中的EditSeq软件、Glimmer3.0基因预测软件、共线性分析及构建DNAIII的系统发育树等对DNAHI基因组的遗传学信息进行分析。检测DNAⅢ对理化因素的抵抗力并行体外抗结核菌实验。结果DNAlll基因组是含39520bp的线性双链DNA,G+C含量是66.83%,不含tRNA和串联重复序列;DNAⅢ有60个基因,gene32编码整合酶,但未发现编码阻遏蛋白的基因;DNAⅢ与Angel和BPs核苷酸序列相似度高,且具有清晰的共线性;与DNAHI关系最近的是Liefie。DNAIH对温度、乙醇及酸碱度均敏感;抗结核菌实验第1、2、3天的DNAⅢ组结核菌数量与对照组比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论DNAⅢ是一株能有效杀灭结核菌的G簇烈性分枝杆菌噬菌体。 展开更多
关键词 噬菌体DNAⅢ 基因组 结核菌 抗结核菌
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利用重组噬菌体诱导表达的大肠杆菌表达系统 预览
14
作者 陈长征 黄华 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期 379-384,共6页
将编码噬菌体T7 RNA聚合酶的基因克隆至噬菌体M13 mp18RF DNA中,置于lac启动子的控制之下,得到了可表达T7RNA聚合酶的重组噬菌体M13HEP。利用该噬菌体感染含T7启动子表达质粒的宿主菌以提供T7 ... 将编码噬菌体T7 RNA聚合酶的基因克隆至噬菌体M13 mp18RF DNA中,置于lac启动子的控制之下,得到了可表达T7RNA聚合酶的重组噬菌体M13HEP。利用该噬菌体感染含T7启动子表达质粒的宿主菌以提供T7 RNA聚合酶,可以诱导T7启动子控制下的外源基因的表达。 展开更多
关键词 噬菌体 T7启动子 大肠杆菌 表达系统
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噬菌体T7溶菌酶基因的克隆 预览 被引量:2
15
作者 崔道珊 练永宁 +2 位作者 许永瑞 李殿君 宋兰芝 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期 91-95,共5页
以pBR322及含有噬菌体T7 RNA聚合酶强启动子φ10的pBR322衍生物作为克隆载体,经限制内切酶Ava Ⅱ+HaeⅢ切割的一段噬菌体T7 DNA片段分别克隆到pBR322及其衍生质粒的BamHI位点上。插入的DNA片段为632碱基对。该片段包括噬菌体T7基因3.5和... 以pBR322及含有噬菌体T7 RNA聚合酶强启动子φ10的pBR322衍生物作为克隆载体,经限制内切酶Ava Ⅱ+HaeⅢ切割的一段噬菌体T7 DNA片段分别克隆到pBR322及其衍生质粒的BamHI位点上。插入的DNA片段为632碱基对。该片段包括噬菌体T7基因3.5和T7 RNA聚合酶弱启动子φ3.8的全部编码序列。已知噬菌体T7基因3.5的功能为产生噬菌体T7溶菌酶,利用氯仿处理检测带有重组质粒的转化子胞内溶菌酶活力。证明两种克隆株整体细胞中,均有溶菌酶存在。用10—20%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检查噬菌体T7基因3.5蛋白带,结果表明T7基因3.5在pBR322衍生质粒中的表达优于pBR322。 展开更多
关键词 噬菌体 T7溶菌酶 基因克隆
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丝状噬菌体与噬菌体展示技术 预览 被引量:1
16
作者 黄仪秀 朱圣庚 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期 296-300,共5页
关键词 噬菌体 丝状噬菌体 噬菌体展示技术
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一种制备高效价噬菌合格悬液的有效方法 预览 被引量:4
17
作者 杨水云 郭春林 《西北大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期 45-46,共2页
介绍了一种制备高效价噬菌体悬液的方法,并将其产量和效价与传统方法所得结果进行了比较,结果证明了该方法所得噬菌体悬液的效价和产量最高。
关键词 噬菌体悬液 效价 制备 双层平板法 一次营养法
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南极假丝酵母脂肪酶A的表面展示及酶学性质 被引量:1
18
作者 严慧玲 蓝东明 +1 位作者 王永华 杨博 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1070-1076,共7页
采用a凝集素作为载体蛋白,首次将南极假丝酵母脂肪酶A展示在酿酒酵母细胞表面,通过MD平板筛选获得表面展示型的CALA酵母工程菌株。免疫荧光检测显示CALA被成功展示在酵母细胞壁表面,重组子经诱导后能在三丁酸甘油酯板上形成透明圈,说明... 采用a凝集素作为载体蛋白,首次将南极假丝酵母脂肪酶A展示在酿酒酵母细胞表面,通过MD平板筛选获得表面展示型的CALA酵母工程菌株。免疫荧光检测显示CALA被成功展示在酵母细胞壁表面,重组子经诱导后能在三丁酸甘油酯板上形成透明圈,说明展示的CALA具有活性。重组酵母在液体培养基培养72 h,活性达到最高,为80.4 U/g干细胞。酿酒酵母展示的CALA最适温度及pH值为70°C和pH 8.0。经50°C保温2 h,仍含有60%水解酶活力。展示的CALA在pH 7.0和pH 8.0溶液中比较稳定。经DMSO处理2 h,展示的CALA仍保持70%的活性。以上结果表明酵母展示的CALA可作为一种有潜质商业用途的全细胞催化剂。 展开更多
关键词 南极假丝酵母脂肪酶A 酵母表面展示 全细胞催化 酶学性质
噬菌体抗体库技术的研究进展及应用 预览 被引量:1
19
作者 王凯 刘洪艳 牟玲 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期 80-83,共4页
噬菌体抗体库技术是继噬菌体展示技术发展而来的一项基因抗体工程新技术。它可将含不同物种全部抗体可变区基因的基因库转化成展示在噬菌体表面的蛋白库,不仅使单克隆抗体的生产更方便、快速、高效地在体外进行,还开辟了单克隆抗体人源... 噬菌体抗体库技术是继噬菌体展示技术发展而来的一项基因抗体工程新技术。它可将含不同物种全部抗体可变区基因的基因库转化成展示在噬菌体表面的蛋白库,不仅使单克隆抗体的生产更方便、快速、高效地在体外进行,还开辟了单克隆抗体人源化的新途径,促进了人类单克隆抗体生产的发展。就近年来噬菌体抗体库技术的基因来源、发展关键及抗体应用的研究作一综述。 展开更多
关键词 噬菌体展示 抗体库
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噬菌体抗体库技术及其研究进展 预览 被引量:1
20
作者 杨乃娣 詹金彪 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第5期629-634,共6页
噬菌体抗体库技术将噬菌体展示技术与PCR技术相结合,在噬菌体表面成功表达抗体可变区基因,从而得到多样性噬菌体抗体集合。目前,噬菌体抗体库技术逐渐成为获得人源性抗体的主要手段之一,已有多株来源于噬菌体抗体库技术的单克隆抗体应... 噬菌体抗体库技术将噬菌体展示技术与PCR技术相结合,在噬菌体表面成功表达抗体可变区基因,从而得到多样性噬菌体抗体集合。目前,噬菌体抗体库技术逐渐成为获得人源性抗体的主要手段之一,已有多株来源于噬菌体抗体库技术的单克隆抗体应用于临床。现就噬菌体抗体库构建、筛选及应用作一综述。 展开更多
关键词 噬菌体抗体库 噬菌体展示
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