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世纪课题:干细胞研究 预览
1
作者 舟野 《江苏经济》 2001年第11期 54-55,共2页
早在17世纪就有人用显微镜看到了软木中死细胞残留的壁。到19世纪中叶,德国生物学家施旺和施莱登进一步证明细胞是生物体内普遍存在的结构,并提出了著名的细胞学说,认为一切动、植物都由细胞组成。这学说对推动生物学各方面的研究作... 早在17世纪就有人用显微镜看到了软木中死细胞残留的壁。到19世纪中叶,德国生物学家施旺和施莱登进一步证明细胞是生物体内普遍存在的结构,并提出了著名的细胞学说,认为一切动、植物都由细胞组成。这学说对推动生物学各方面的研究作出了重要贡献。现在已证实,细胞是生物形态结构和生命活动的基本单位。 展开更多
关键词 医疗服务 干细胞 应用 医疗市场 研究发展
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视网膜感光细胞早期发育的形态学研究现状 预览
2
作者 段欣荣 《国外医学:眼科学分册》 2002年第2期 91-95,共5页
许多眼底病都伴有感光细胞结构的改变,特别是一些变性疾病。对感光细胞早期发育过程和超微结构的研究为探讨视网膜的部分异常提供了参考依据。近年来免疫组化技术、分子生物学技术与超微结构研究的结合;对感光细胞的发育提出了一些新... 许多眼底病都伴有感光细胞结构的改变,特别是一些变性疾病。对感光细胞早期发育过程和超微结构的研究为探讨视网膜的部分异常提供了参考依据。近年来免疫组化技术、分子生物学技术与超微结构研究的结合;对感光细胞的发育提出了一些新观点,但也有一些问题尚存在争议。本文按照解剖层次,将感光细胞的早期发育过程和结构变化作一综述。 展开更多
关键词 视网膜 感光细胞 早期发育 形态学
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Decorin对肝癌细胞株凋亡作用的研究 预览 被引量:6
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作者 赵素莲 王桂琴 田树华 《肿瘤防治杂志》 2002年第3期 235-237,共3页
目的:探讨decorin对肝癌细胞株增殖及细胞凋亡的作用.方法:用不同浓度的decorin和正常肝细胞株(L-02细胞)、肝癌细胞株(SMMC-7721、MM45)共同孵育一定时间后,观察细胞的存活情况、形态学改变,用流式细胞仪分析DNA的分布.结果:Decorin在... 目的:探讨decorin对肝癌细胞株增殖及细胞凋亡的作用.方法:用不同浓度的decorin和正常肝细胞株(L-02细胞)、肝癌细胞株(SMMC-7721、MM45)共同孵育一定时间后,观察细胞的存活情况、形态学改变,用流式细胞仪分析DNA的分布.结果:Decorin在体外能抑制肝癌细胞的增殖,诱导肝癌细胞出现典型的凋亡细胞特征:细胞核浓缩、细胞膜皱摺、凋亡小体形成,而且其诱导凋亡作用呈剂量效应.结论:Decorin作为一种生物制剂可诱导肝癌细胞凋亡. 展开更多
关键词 多糖类 药理学 细胞学 肝肿瘤
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Notch1和Notch2表达与宣威女性肺癌的关系及意义 预览 被引量:5
4
作者 牛华涛 刘建兴 +5 位作者 周永春 刘馨 胡早秀 赵光强 雷玉洁 黄云超 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期2336-2339,共4页
目的 研究Notch1和Notch2在宣威女性肺癌中表达的临床意义。方法 采用免疫组化SP法检测54例宣威女性肺癌患者癌组织及远端正常肺组织中Notch1和Notch2表达,结合患者的临床病理特征及随访资料,探讨Notch1和Notch2在宣威女性肺癌患者病情... 目的 研究Notch1和Notch2在宣威女性肺癌中表达的临床意义。方法 采用免疫组化SP法检测54例宣威女性肺癌患者癌组织及远端正常肺组织中Notch1和Notch2表达,结合患者的临床病理特征及随访资料,探讨Notch1和Notch2在宣威女性肺癌患者病情评估及预后判断中的作用。结果 Notch1和Notch2蛋白主要表达于细胞质,在宣威女性肺癌中的阳性表达均显著高于远端正常肺组织(P〈0.05);Notch1和Notch2蛋白在不同临床分期、分化程度及淋巴结转移与否患者中的表达差异有统计学意义(P〈0.05)。Notch1、Notch2蛋白在宣威女性肺癌中的表达呈正相关(P〈0.05)。结论 宣威女性肺癌组织中存在Notch1和Notch2基因异常表达升高,Notch1和Notch2蛋白的表达水平结合临床分期作为宣威女性肺癌患者预后判断的参考指标有一定的指导意义。 展开更多
关键词 NOTCH1 NOTCH2 女性 肺肿瘤 宣威
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小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇对 PⅠNP 和 BMP -2表达的影响 预览 被引量:1
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作者 宗少晖 曾高峰 +2 位作者 邹斌 李柯柯 赵劲民 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第3期359-362,共4页
目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇(α-ZAL )对Ⅰ型前胶原 N 端前肽(PⅠNP)和骨形态发生蛋白-2(BMP -2)表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3... 目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中α-玉米赤霉醇(α-ZAL )对Ⅰ型前胶原 N 端前肽(PⅠNP)和骨形态发生蛋白-2(BMP -2)表达的影响。方法采用全骨髓培养差速贴壁法体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为空白诱导组、阳性诱导组及高、中、低浓度α-ZAL 诱导组。空白诱导组仅加入成骨条件培养基,阳性诱导组加入等量成骨条件培养基及雌二醇,高、中、低浓度α-ZAL 诱导组分别加入成骨条件培养基及梯度浓度(10-5、10-6、10-7 mol /L)的α-ZAL。采用 ELISΑ法测定 PⅠNP 和 BMP -2的表达量。结果小鼠骨髓间充质干细胞原代培养呈长梭形,有接触抑制现象,诱导后细胞呈三角形、多角形、不规则形状,细胞生长密集时可重叠生长。与空白诱导组比较,各组 PⅠNP 表达量均明显升高(P <0.01),阳性诱导组及低、中浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量均明显升高(P <0.01),高浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量明显下降(P <0.01)。与阳性诱导组比较,低浓度α-ZAL 诱导组 PⅠNP 表达量明显升高(P <0.01),而中、高浓度α-ZAL诱导组 PⅠNP 表达量明显下降(P <0.01),低、中浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量均明显升高(P <0.01),高浓度α-ZAL 诱导组 BMP -2表达量明显下降(P <0.01)。结论α-ZAL 呈剂量相关性促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化,低浓度(10-7 mol /L)α-ZAL 可显著促进骨髓间充质干细胞骨向分化过程中 PⅠNP 和BMP -2的表达,随着剂量的升高,促进作用下降。 展开更多
关键词 Α-玉米赤霉醇 骨髓间充质干细胞 成骨细胞分化 型前胶原 N 端前肽 骨形态发生蛋白 -2
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JWA参与细胞氧化应激机制的研究 预览
6
作者 王南平 周建伟 《实用医学进修杂志》 2002年第1期 15-20,共6页
目的:建立氧化应激模型探讨新基因JWA参与细胞氧化应激的机制。方法:用H2O2处理MCF-7(人乳腺癌细胞株)和WI-38(人胚胎肺纤维细胞株)两种细胞,观察细胞培养上清中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,用RT-PCR半定量... 目的:建立氧化应激模型探讨新基因JWA参与细胞氧化应激的机制。方法:用H2O2处理MCF-7(人乳腺癌细胞株)和WI-38(人胚胎肺纤维细胞株)两种细胞,观察细胞培养上清中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,用RT-PCR半定量的方法及Western blot免疫印迹分别检测JWA在mRNA水平和蛋白质水平上的表达以及应激蛋白HSP27、HSP70、HSP90的表达。结果:MCF-7细胞培养上清中MDA随H2O2孵育时间增加而升高、GSH随H2O2孵育时间增加而下降;WI-38细胞培养上清中MDAMDA的含量则先升高后于48h又恢复到对照水平,GSH含量先下降后于24h即升高至对照水平;MCF-7细胞经H2O2处理后JWA mRNA表现为明显的下降,WI-38则变化不明显;经H2O2处理后,JWA蛋白和HSP27在两种细胞的表达都有明显增加,但增加的程度不同。结论:JWA基因参与细胞氧化应激且在不同类型的细胞中作用机制不同;JWA蛋白可能是一种与HSP27作用有关的蛋白。 展开更多
关键词 JWA基因 氧化应激 HSP27 RT-PCR
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双酚A对人胎盘滋养细胞株BeWo生物学行为的影响 被引量:1
7
作者 王子一 张元珍 张铭 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 2016年第3期222-225,共4页
目的研究环境内分泌干扰物双酚A(bisphenol A,BPA)对人滋养细胞株BeWo增殖、凋亡、侵袭能力的影响,探讨BPA对不良妊娠结局的可能作用机制。方法不同浓度BPA处理24h后,流式细胞术及细胞增殖实验检测BeWo细胞凋亡及增殖的改变。分离... 目的研究环境内分泌干扰物双酚A(bisphenol A,BPA)对人滋养细胞株BeWo增殖、凋亡、侵袭能力的影响,探讨BPA对不良妊娠结局的可能作用机制。方法不同浓度BPA处理24h后,流式细胞术及细胞增殖实验检测BeWo细胞凋亡及增殖的改变。分离培养原代子宫内膜细胞,建立子宫内膜间质细胞与BeWo细胞体外共培养侵袭实验模型,Transwell法检测BPA对BeWo侵袭能力的影响。采取单因素方差分析及LSD法进行统计学分析。结果(1)1000μmol/LBPA引起BeWo细胞活力降低,凋亡率为(89.0±1.4)%,较对照组的(2.8±0.7)%明显增加(P〈0.05)。10μmol/L、1.0μmol/LBPA对Bewo细胞增殖具有促进作用,与对照组相比相对存活率分别为(124.3±10.3)%和(115.7±7.7)%(P值均〈0.05)。(2)在共培养模型中,BeWo细胞暴露于BPA后,侵袭力下降,呈浓度依赖性,侵袭指数在100μmol/L组为0.50±0.02,1.0μmol/L组为0.84±0.04,0.01μmol/L组为0.96±0.01(P值均〈0.05)。结论BPA能够抑制人胎盘滋养细胞株BeWo细胞的侵袭能力,影响细胞增殖能力,可能导致不良妊娠结局。 展开更多
关键词 二苯甲基化合物 酚类 滋养层 细胞系 妊娠结局 间质细胞
间充质干细胞条件培养基对实验性肺动脉高压大鼠的干预作用研究 预览 被引量:1
8
作者 牛志浩 戴坤鹏 +2 位作者 李宗辉 黄军华 刘俊峰 《疑难病杂志》 CAS 2016年第6期625-628,633,F0003共6页
目的探讨间充质干细胞(MSC)条件培养基(CM)对肺动脉高压(PH)大鼠的干预效果。方法实验于2010年3—10月在国家干细胞中心完成。取24只SD大鼠随机分为3组:模型组、治疗组和对照组,每组各8只。野百合碱(MCT)单次皮下注射制备PH大... 目的探讨间充质干细胞(MSC)条件培养基(CM)对肺动脉高压(PH)大鼠的干预效果。方法实验于2010年3—10月在国家干细胞中心完成。取24只SD大鼠随机分为3组:模型组、治疗组和对照组,每组各8只。野百合碱(MCT)单次皮下注射制备PH大鼠模型,治疗组大鼠于实验的5-9 d应用MSC-CM腹腔注射进行治疗,模型组及对照组同期注射等量PBS。实验第21天分别检测各组大鼠右室收缩压(RVSP)和平均主动脉压(MAoP),同时制备肺组织切片检测肺动脉中膜的厚度(WT),并对各组大鼠进行比较。结果模型组大鼠RVSP明显高于对照组[(48.26±3.93)mmHg vs.(27.58±3.47)mmHg,P〈0.01],而MAoP较对照组明显下降[(89.54±15.81)mmHg vs.(116.37±16.17)mmHg,P〈0.05]。经MSC-CM治疗后,治疗组大鼠RVSP较模型组明显下降[(31.42±3.38)mmHg vs.(48.26±3.93)mmHg,P〈0.01],同时MAoP明显上升[(儿2.97±14.26)mmHg vs.(89.54±15.81)mmHg,P〈0.05]。肺组织学检查显示,模型组大鼠的WT较对照组明显增加[(34.12±3.59)%vs.(12.53±1.82%),P〈0.01]。而经MSC-CM治疗后,治疗组较模型组有显著的减轻[(13.28±1.78)%vs.(34.12±3.59%),P〈0.01]。结论 MSC条件培养基对PH大鼠干预能够有效地抑制PH的进程。 展开更多
关键词 肺动脉高压 间充质干细胞 条件培养基 大鼠
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miR-34b对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及相关机制 预览 被引量:1
9
作者 齐磊 《临床与病理杂志》 2016年第7期898-904,共7页
目的:探讨miRNA-34b在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达及其可能的作用靶点和作用机制。方法:采用密度梯度离心和全骨髓贴壁相结合的方法分离培养人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs),并... 目的:探讨miRNA-34b在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达及其可能的作用靶点和作用机制。方法:采用密度梯度离心和全骨髓贴壁相结合的方法分离培养人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs),并在体外诱导成骨分化。采用实时荧光定量PCR技术,检测hBMSCs成骨分化过程中的miR-34b的表达水平;然后过表达miR-34b,进一步观察其对hBMSCs成骨分化的影响。同时检测过表达miR-34b对成骨分化的关键信号通路之一Notch信号通路的活性影响,初步探讨其可能涉及的作用机制。结果:成功分离出hBMSCs,并构建了hBMSCs体外诱导成骨分化模型;且随着成骨诱导培养时间的延长,miRNA-34b表达水平逐渐降低。ALP活性检测、茜素红染色检测结果显示过表达miRNA-34b后,ALP活性显著降低,且茜素红染色的钙盐结节明显减少;同时Western blot实验结果显示过表达miRNA-34b后,成骨特异性标记分子Runx2的蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。此外,过表达miRNA-34b后,Notch信号通路的活性显著降低。结论:miRNA-34b能够负向调控人骨髓间充质干细胞成骨分化;其作用机制可能与抑制Notch信号通路的活性有关,提示miRNA-34b可以作为诊断和靶向治疗慢性炎症性骨疾病的潜在作用靶点。 展开更多
关键词 miRNA-34b 成骨分化 骨髓间充质干细胞 NOTCH信号通路
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中医药对肿瘤干细胞相关性耐药的调控 预览
10
作者 孙玺媛 陈宏 +2 位作者 魏冬梅 姜梅 蒋岩 《齐齐哈尔医学院学报》 2016年第22期2831-2833,共3页
目的探讨肿瘤干细胞与耐药的机制及中医药的调控。方法采用综述的方法,阐述了肿瘤干细胞通过多种途径导致耐药的发生,以及中医药对其耐药机制调控。结果肿瘤干细胞通过多途径导致耐药的发生,中药单体对其有一定的调控的作用。结论肿瘤... 目的探讨肿瘤干细胞与耐药的机制及中医药的调控。方法采用综述的方法,阐述了肿瘤干细胞通过多种途径导致耐药的发生,以及中医药对其耐药机制调控。结果肿瘤干细胞通过多途径导致耐药的发生,中药单体对其有一定的调控的作用。结论肿瘤干细胞与肿瘤耐药的发生密切相关,中医中药对肿瘤干细胞耐药的调控作用的研究,尚处于初始阶段。 展开更多
关键词 中医药 肿瘤干细胞 耐药
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氢对内毒素致巨噬细胞氧化损伤时Nrf2表达的影响
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作者 刘刚 陈红光 +1 位作者 谢克亮 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1150-1152,共3页
目的评价氢对内毒素致巨噬细胞氧化损伤时核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的影响。 方法正常培养的RAW264.7细胞,采用随机数字表法分为4组(n=36):对照组(C组)、富氢液组(H组)、内毒素组(E组)和内毒素+富氢液组(EH组)。E组... 目的评价氢对内毒素致巨噬细胞氧化损伤时核因子E2相关因子2(Nrf2)表达的影响。 方法正常培养的RAW264.7细胞,采用随机数字表法分为4组(n=36):对照组(C组)、富氢液组(H组)、内毒素组(E组)和内毒素+富氢液组(EH组)。E组和EH组加入内毒素,终浓度1 μg/ml,H组和EH组加入富氢液(氢气浓度0.06 mmol/L),于富氢液孵育6、24和48 h时收集细胞,检测ROS活性,收集细胞提取蛋白,采用Western blot法检测SOD、过氧化氢酶(CAT)活性和Nrf2的表达。 结果与C组比较,E组和EH组ROS活性升高,SOD和CAT活性降低,巨噬细胞Nrf2表达上调(P〈0.05),H组上述指标差异无统计学意义(P〉0.05);与E组比较,EH组ROS活性降低,SOD和CAT活性升高,巨噬细胞Nrf2表达上调(P〈0.05)。 结论氢可减轻内毒素致巨噬细胞氧化损伤,其机制与上调Nrf2表达有关。 展开更多
关键词 内毒素类 巨噬细胞 氧化性应激
重组人tau蛋白对神经细胞的毒性作用 预览 被引量:3
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作者 张晶晶 王法财 +2 位作者 王海萍 梁燕 沈玉先 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期 167-172,共6页
目的观察重组人tau蛋白对神经来源的细胞株SH-SY5Y及体外原代培养的神经元是否有毒性作用。方法将原核表达纯化的重组人tau蛋白加入SH-SY5Y细胞和原代培养的大鼠神经元培养液中,通过观察细胞形态、四甲基偶氮唑盐(MTY)检测细胞增殖... 目的观察重组人tau蛋白对神经来源的细胞株SH-SY5Y及体外原代培养的神经元是否有毒性作用。方法将原核表达纯化的重组人tau蛋白加入SH-SY5Y细胞和原代培养的大鼠神经元培养液中,通过观察细胞形态、四甲基偶氮唑盐(MTY)检测细胞增殖活性、TUNEL染色检测细胞凋亡、免疫荧光染色观察凋亡诱导蛋白CHOP及内质网应激上调蛋白ARMET的表达情况研究tau蛋白对神经细胞生长、增殖和凋亡的影响。结果随着tau蛋白作用时间的延长,细胞胞体逐渐变圆,突起减少甚至消失,染色质聚集,部分神经元出现了凋亡。MTT检测结果显示tau蛋白可抑制细胞的增殖。同时发现,细胞外的tau作用可诱导内质网应激标志性蛋白CHOP和ARMET的表达。结论重组人tau蛋白对神经细胞有毒性作用,该作用可能部分与tau诱导的内质网应激有关。 展开更多
关键词 tau蛋白质类/毒性 原核细胞 神经元/药物作用 细胞凋亡
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巴戟天寡糖对成肌细胞增殖及向心肌样细胞分化的影响 预览
13
作者 吴瑶 冯国清 胡香杰 《中国药理通讯》 2009年第2期 42-43,共2页
目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d... 目的:研究巴戟天寡糖(Morinda officinalis How oligosaccha rides,MOO)诱导成肌细胞增殖、分化的机制并观察其是否可诱导心肌细胞标志物的表达,为临床探索运用心脏组织工程学治疗心肌梗死提供更有效的依据。方法:采用出生1~3d的SD大鼠乳离体差速贴壁法纯化培养双侧后肢骨骼肌成肌细胞的方法,用24h后的原代成肌细胞进行试验。实验分5组:空白对照组、5-氮杂胞苷(10μmol/ml)阳性药对照组、MOO各剂量(100gg/ml、300gg/ml、500μg/m1)组。分别检测以下指标:(1)观察加药前后成肌细胞形态学改变。(2)Desmin(结蛋白)鉴定。(3)加药前后成肌细胞对异丙肾上腺素(Isoprenaline,IP)的反应。(4)采用RT-PCR法检测成肌细胞中TGF-β1、GATA-4mRNA的表达。结果:(1)与空白对照组相比,MOO诱导48h后成肌细胞生长密集,胞浆丰富,增殖明显,具有较好的折光性。并呈一定方向性的长轴平行排列,细胞融合的肌管增多,分化良好,有明显自发性搏动的收缩现象,生长状态明显好于空白对照组。(2)与空白对照组相比,IP对阳性药对照组和MOO小剂量组成肌细胞正性变时作用不明显(P〉0.05);而IP对MOO中剂量组和大剂量组成肌细胞正性变时作用显著(P〈0.05)。 展开更多
关键词 心肌样细胞分化 成肌细胞增殖 巴戟天寡糖 PCR法检测 心脏组织工程学 骨骼肌成肌细胞 细胞形态学改变 对异丙肾上腺素
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免疫磁珠分选与顺铂富集喉癌Hep-2细胞系中肿瘤干细胞的比较 被引量:2
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作者 刘平平 李晓明 路秀英 《肿瘤研究与临床》 CAS 2009年第5期304-307,共4页
目的比较免疫磁珠分选(MACS)及化疗药物顺铂(DDP)筛选富集喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞的效果。方法以CD133MACS、DDP作用两种方法来富集喉癌Hep-2细胞系中的肿瘤干细胞,并以流式细胞术(FCM)检测处理后CD133^+细胞的百分率。同时... 目的比较免疫磁珠分选(MACS)及化疗药物顺铂(DDP)筛选富集喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞的效果。方法以CD133MACS、DDP作用两种方法来富集喉癌Hep-2细胞系中的肿瘤干细胞,并以流式细胞术(FCM)检测处理后CD133^+细胞的百分率。同时观察细胞形态学的改变,判断两种方法分选后细胞对后续实验的影响。结果经FCM检测,MACS分选喉癌Hep-2,CD133^+细胞得率为64.33%,不同浓度DDP作用于喉癌Hep-2细胞48h,FCM检测CD133^+细胞有不同的得率,其中质量浓度为4μg/ml时,所得CD133^+≥细胞百分率最高,为50.7%。MACS与DDP各组比较差异均有统计学意义(P〈0.01);两种方法处理后MACS组细胞的存活状态要好于DDP组。结论MACS分选纯度较高,对细胞损伤小,适合后续培养;但分选前耗时长,每次分选仅能用于一种Marker。DDP筛选简单易行,符合临床肿瘤干细胞(CSC)抵抗化疗的模式。但阳性细胞得率与细胞毒性成正比。MACS和DDP筛选肿瘤干细胞各有其优势及适用范围,实验中可根据不同目的来确定所用筛选方法。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 富集 免疫磁珠分选 化疗药物 CD133
Bcl—2蛋白对环匹阿尼酸诱导CHO细胞凋亡的保护作用 预览 被引量:1
15
作者 黎明涛 苏兴文 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期 184-187,共4页
Hoechst33258染色和DNA电泳分析揭示内质网钙泵抑制剂环匹阿尼酸(CPA)呈浓度依赖性地诱导CHO细胞凋亡,表现出染色体固缩和DNA片断形成的典型特征,Bcl-2的过度表达对CPA诱导的CHO细胞凋亡具有保... Hoechst33258染色和DNA电泳分析揭示内质网钙泵抑制剂环匹阿尼酸(CPA)呈浓度依赖性地诱导CHO细胞凋亡,表现出染色体固缩和DNA片断形成的典型特征,Bcl-2的过度表达对CPA诱导的CHO细胞凋亡具有保护作用,采用Fura-2技术测定细胞内了游离钙浓度(「Ca^2+」i)变化,观察到Bcl-2对CPA触发的细胞Ca^2+库Ca^2+释放无任何影响,结果表明Bcl-2蛋白对CPA诱导的 展开更多
关键词 BCL-2蛋白 环匹阿尼酸 细胞凋亡 保护作用
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子宫颈细胞学不典型腺细胞的临床意义 被引量:3
16
作者 王秋曦 王淑珍 刘军 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第39期2779-2782,共4页
目的探讨宫颈细胞学结果中不典型腺上皮细胞(AGC)的组织病理学特点及临床意义。方法选择87例富颈细胞学AGC患者,分析其阴道镜检查,宫颈活检、分段诊刮、子宫颈电热圈环切术(LEEP)的病理及随访结果。结果(1)87例中病理异常35例... 目的探讨宫颈细胞学结果中不典型腺上皮细胞(AGC)的组织病理学特点及临床意义。方法选择87例富颈细胞学AGC患者,分析其阴道镜检查,宫颈活检、分段诊刮、子宫颈电热圈环切术(LEEP)的病理及随访结果。结果(1)87例中病理异常35例(40.23%):腺上皮病变10(11.49%)例,包括子宫内膜轻度非典型增生2例、宫颈腺上皮内瘤变3例、宫颈腺癌3例、子宫内膜腺癌2例;宫颈鳞状上皮内病变(CIN)25例(28.74%)。(2)61例细胞学AGC不明意义(AGC NOS)有18例病理异常(29.51%);16例AGC提示倾向内瘤变(AGC SIL)中有9例组织学异常;10例为原位腺癌(AIS)/腺癌中,6例病理异常。病理异常在细胞学AGC NOS与AGC SIL或AIS比较差异有统计学意义,P〈0.05。(3)除2例子宫内膜腺癌及3例宫颈腺癌行开腹手术外,余82例行随访,随访率100%。随访时间6~46个月。随访中3例再次出现细胞学异常,经病理证实1例CIN1、1例CIN2、1例CIN3。(4)10例病理腺上皮病变中,除1例CGIN1患者的年龄〈35岁,余年龄均≥35岁。结论AGC中40.23%的患者有组织学异常。因存在CIN及癌,应行阴道镜检查及组织学确诊。疾病的存在与年龄有关,年龄〉135岁的患者存在腺癌和子宫内膜癌的概率增加,因此应重视年龄35岁以上妇女宫颈细胞学AGC的结果。 展开更多
关键词 细胞学 AGC 阴道镜检查 宫颈上皮内瘤变 病理学
HMGB1启动子荧光素酶报告基因的构建及鉴定 被引量:3
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作者 丁宁 肖慧 +2 位作者 高巨 许立新 佘守章 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第22期2580-2582,共3页
目的:构建高迁移率族蛋白B1(HMGB1)启动子驱动的荧光素酶报告基因的真核表达载体pGL3-HMGB1P,转染肺泡上皮细胞(A549)后检测报告基因在机械牵张刺激中的转录活性.方法:以A549细胞基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增HMGB1启动子片段... 目的:构建高迁移率族蛋白B1(HMGB1)启动子驱动的荧光素酶报告基因的真核表达载体pGL3-HMGB1P,转染肺泡上皮细胞(A549)后检测报告基因在机械牵张刺激中的转录活性.方法:以A549细胞基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增HMGB1启动子片段,测序正确后克隆入荧光素酶报告基因表达载体pGL3,将重组质粒pGL3-HMGB1P导入A549细胞,检测不同强度机械牵张(分别为5%和20%)刺激下荧光素酶的活性变化.结果:PCR和测序结果表明扩增的HMGB1启动子序列正确,酶切检测证实重组真核表达载体pGL3-HMGB1P构建成功.在5%牵张应变作用下,转染pGL3-HMGB1P的A549细胞荧光素酶活性是转染空载体pGL3-Basic的2.9倍(P〈0.05);而在20%牵张应变作用下,转染pGL3-HMGB1P的A549细胞荧光素酶活性是转染空载体pGL3-Basic的6.2倍(P〈0.01).结论:利用荧光素酶报告基因系统证实机械牵张可诱导HMGB1转录表达增加,为深入研究HMGB1转录表达的调控机制提供了基础. 展开更多
关键词 机械牵张 高迁移率族蛋白1 基因 报告
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钠氢交换蛋白3亚型的研究进展 预览 被引量:2
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作者 范小琴(综述) 高原(审校) 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第2期 334-336,共3页
机体酸碱平衡稳定是生命活动得以维持的基本条件之一,酸碱平衡对维持机体内环境稳态具有非常重要的生理学意义。细胞主要依赖于质膜上的钠氢交换蛋白(Na^+-H^+ exchanger,NHE)来调控细胞内pH的动态平衡,影响细胞内外离子的跨膜... 机体酸碱平衡稳定是生命活动得以维持的基本条件之一,酸碱平衡对维持机体内环境稳态具有非常重要的生理学意义。细胞主要依赖于质膜上的钠氢交换蛋白(Na^+-H^+ exchanger,NHE)来调控细胞内pH的动态平衡,影响细胞内外离子的跨膜转运、细胞容积和渗透压等。NHE3是该蛋白家族发现的第三个亚型.在肾脏组织有高表达.是主要的钠离子通道。主要参与Na^+、HCO3白蛋白的重吸收,对机体尿钠及液体重吸收和维持酸碱平衡方面发挥了重要作用。本文就NHE3的结构、功能、调节及其与肾脏疾病的关系作一综述。 展开更多
关键词 钠氢交换蛋白 亚型 细胞内pH 酸碱平衡 细胞内外离子 生理学意义 内环境稳态 钠离子通道
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RNAi沉默Notch1基因对人胶质瘤U251细胞增殖能力的影响 预览 被引量:4
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作者 张明芳 郭亚 +1 位作者 齐元麟 郑志竑 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期 199-203,共5页
目的探讨沉默Notch1基因对人神经胶质瘤U251细胞增殖能力的影响。方法采用Notch1—shRNA慢病毒感染人胶质瘤U251细胞,筛选稳定低表达Notch1的细胞单克隆,Westernblot法检测细胞Notch1蛋白的表达;CCK-8法测定细胞生长;平板克隆形成... 目的探讨沉默Notch1基因对人神经胶质瘤U251细胞增殖能力的影响。方法采用Notch1—shRNA慢病毒感染人胶质瘤U251细胞,筛选稳定低表达Notch1的细胞单克隆,Westernblot法检测细胞Notch1蛋白的表达;CCK-8法测定细胞生长;平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;裸鼠种植瘤模型观察Notch1沉默对种植瘤生长的影响。结果成功筛选得到Notch1稳定沉默的U251细胞单克隆,其Notch1蛋白下调(65.3±5.1)%。Notch1稳定沉默细胞的生长增殖能力明显受到抑制,生长曲线与对照组相比明显减慢;Notch1沉默组的平板克隆形成率为(18.6±2.5)%,低于对照组(37.0±3.3)%;Notch1沉默组软琼脂集落形成率(51±5)%,低于对照组(80±4)%;Notch1沉默组裸鼠腋下种植瘤生长速度减慢,30d后瘤重(0.31±0.09)g,明显低于对照组(2.35±0.71)g;统计学分析差异均有显著性。结论RNAi沉默Notch1基因可致人胶质瘤U251细胞的体外增殖和体内成瘤能力下降。 展开更多
关键词 NOTCH1 RNA干扰 慢病毒 细胞增殖 无胸腺小鼠 种植瘤
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胰腺癌干细胞的研究现状与展望 被引量:2
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作者 杨尹默 田孝东 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期7-9,共3页
胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,其发病率呈上升趋势,以早期诊断困难、肿瘤进展快、手术切除率低、放化疗不敏感、预后差等为临床特点。近年来胰腺癌相关的临床及基础研究一直为热点课题。临床方面随各种指南的颁布,以外科为单一... 胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,其发病率呈上升趋势,以早期诊断困难、肿瘤进展快、手术切除率低、放化疗不敏感、预后差等为临床特点。近年来胰腺癌相关的临床及基础研究一直为热点课题。临床方面随各种指南的颁布,以外科为单一或主要的治疗方式逐步过渡到多学科联合的综合模式;基础研究则由单一基因或单一信号通路逐步深入到多基因及多种信号通路的联合研究,以更加客观全面地反映出肿瘤形成的内在机制,为临床治疗提供理论基础。“肿瘤干细胞”的发现及确认,即为其中的重要方面。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 胰腺癌 消化道恶性肿瘤 临床特点 信号通路 手术切除率 早期诊断 治疗方式
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