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甜菜坏死黄脉病毒RNA3序列分析及在大肠杆菌中的表达 预览 被引量:1
1
作者 李毅 王琰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期 410-420,共11页
以G1株系的甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)RNA3为模板,以Oligo(dT)_(15)为引物合成cDNA第一链,以RNA3特异引物合成cDNA第二链。然后将双链DNA克隆在pGEM3zf(+)载体中。通过限制性内切酶图谱分析,构建了五个亚克隆,完成全序列1776bp的序列测定... 以G1株系的甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)RNA3为模板,以Oligo(dT)_(15)为引物合成cDNA第一链,以RNA3特异引物合成cDNA第二链。然后将双链DNA克隆在pGEM3zf(+)载体中。通过限制性内切酶图谱分析,构建了五个亚克隆,完成全序列1776bp的序列测定(不含Poly(A)尾巴)。对核苷酸序列和推测的氨基酸序列分析结果发现,RNA3含三个开放阅读框架(ORF),分别编码三个多肽,即P25、P4.6和蛋白N。与法国F2株系RNA3在核昔酸水平上的同源率达96.8%,相应的CRF F25、ORF P4.6和ORFN编码多肽的同源率分别为93.6%、93.2%和92.3%。P25含一个钉指结构(zinc finger),和酸性及碱性区域;蛋白N为疏水蛋白。ORF以外的两端序列高度保守,且3'端可形成双发卡结构(double hairpin motif),说明这段序列在病毒侵染或复制中有十分重要的作用。进一步将RNA3 eDNA体外定点突变后使P25 ORS 与卢-半乳糖苷酶基因位于同一阅读框架以表达卢-半乳糖苷酶和P25融合蛋白,在诱导产物中检测到卢-半乳糖苷酶与P25的融合蛋白已在大肠杆菌中得到表达。 展开更多
关键词 甜菜 坏死黄脉病毒 基因表达 序列分析
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作物病毒防治新途径 预览
2
作者 Micha.,T 李长松 《植物医生》 1995年第5期 34-38,共5页
作物病毒防治新途径T.Michael等大多数粮食作物受病毒为害而遭到严重损失或绝产。在热带和亚热带的发展中国家,问题尤为严重,在这些人口密度高的国家,作物种植方式、病毒诊断及防治技术都很落后,很少使用昂贵的化学防治。... 作物病毒防治新途径T.Michael等大多数粮食作物受病毒为害而遭到严重损失或绝产。在热带和亚热带的发展中国家,问题尤为严重,在这些人口密度高的国家,作物种植方式、病毒诊断及防治技术都很落后,很少使用昂贵的化学防治。因此,昆虫、线虫或真菌传毒介体容易... 展开更多
关键词 作物 病毒 防治 抗性基因
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洋葱黄矮病毒和韭葱黄条病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备 预览 被引量:4
3
作者 鲁宇文 沈嘉乐 +3 位作者 韦传宝 郑红英 陈炯 陈剑平 《科技通报》 2006年第5期 638-641,共4页
根据已报道的洋葱黄矮病毒(OYDV)和韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计特异引物.分别扩增OYDV和LYSV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)plys S中诱导表达。通过12%SDS—PAGE和5%~20%梯度SDS—P... 根据已报道的洋葱黄矮病毒(OYDV)和韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计特异引物.分别扩增OYDV和LYSV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)plys S中诱导表达。通过12%SDS—PAGE和5%~20%梯度SDS—PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠.获得高纯度的抗CP血清。Western blot分析表明,OYDV与LYSV血清学远缘相关。对大蒜田间样品的间接ELISA检测表明,OYDV和LYSV在田间普遍发生,且通常为复合侵染。两者间微弱的血清学交叉反应对ELISA检测结果影响极小,可用于样品检测。 展开更多
关键词 洋葱黄矮病毒 韭葱黄条病毒 原核表达 抗血清制备 间接ELISA
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番茄黄化曲叶病(TYLCV)的研究进展 预览 被引量:12
4
作者 刘剑峰 肖启明 +3 位作者 张德咏 周鹏 成成 唐前君 《中国农学通报》 CSCD 2013年第13期70-76,共7页
简述了番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的发病症状、病毒的鉴定和分类、发生与防治;总结了番茄黄化曲叶病主要发生在亚热带地区和热带地区,在中国的发展趋势是由南向北不断蔓延,其主要在番茄生产上造成严重的... 简述了番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的发病症状、病毒的鉴定和分类、发生与防治;总结了番茄黄化曲叶病主要发生在亚热带地区和热带地区,在中国的发展趋势是由南向北不断蔓延,其主要在番茄生产上造成严重的危害;依据番茄黄化曲叶病的发病条件、传播特点及国内外该病的研究现状;提出了以农业防治为基础,兼顾化学防治与生物防治的综合防治措施,并利用基因工程等分子生物学手段加快抗病育种的进程;分析表明加大抗病育种的力度,培育出稳定的抗病品种,能很好的控制和降低该病的危害。 展开更多
关键词 番茄 番茄黄化曲叶病毒病 抗病育种
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云南胡椒花叶病病原检测及亚组鉴定 预览 被引量:1
5
作者 刘向阳 刘爱勤 周琳 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期46-51,共6页
利用双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)和反转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)对采自云南的胡椒花叶病样品进行检测.结果表明,云南胡椒花叶病的病原为黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV),命名为CMV云南胡椒分离物(CMV—... 利用双抗夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)和反转录一聚合酶链式反应(RT—PCR)对采自云南的胡椒花叶病样品进行检测.结果表明,云南胡椒花叶病的病原为黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV),命名为CMV云南胡椒分离物(CMV—YNP).利用RT-PCR对CMV—YNP外壳蛋白(Coatprotein,CP)基因进行克隆,获得大小为657bp的基因序列.序列分析表明,CMV—YNP与从不同地域感病胡椒中分离的其它CM~株系虽同属CMVIB亚组,但并没有聚在一簇,而且与它们的印基因存在较大差异,核苷酸序列相似性仅在92%~94%. 展开更多
关键词 胡椒花叶病 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白 序列分析 亚组鉴定
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棉铃虫核型多角体病毒p35基因的PCR扩增和克隆及其在原核细胞中的表达 预览 被引量:2
6
作者 王业富 齐义鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期 252-259,共8页
用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒凋亡抑制基因p35的合成引物,从棉铃虫核型多角体病毒基因组中用PCR扩增到1kb片段。采用PCR-双脱氧核苷酸链终止银染法,测定了所扩增到的1010bp全序列,发现其开放阅读框完整,长89... 用苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒凋亡抑制基因p35的合成引物,从棉铃虫核型多角体病毒基因组中用PCR扩增到1kb片段。采用PCR-双脱氧核苷酸链终止银染法,测定了所扩增到的1010bp全序列,发现其开放阅读框完整,长897bp,编码299个氨基酸。 展开更多
关键词 杆状病毒 棉铃虫 P35基因 凋亡 表达 PCR
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柑桔指示植物鉴定接种方法改进研究 预览
7
作者 王明召 阳廷密 +2 位作者 赵小龙 邓崇岭 陈传武 《中国南方果树》 北大核心 2011年第3期 51-53,共3页
应用传统接种方法进行指示植物鉴定时,每株苗只能鉴定一种柑桔病害;但应用改进接种方法,将分别用来鉴定柑桔碎叶病、衰退病、裂皮病的腊斯克枳橙、墨西哥来檬、861-S-1香橼等3种指示植物的芽同时嫁接接种在一株枳砧上,就可以用一株... 应用传统接种方法进行指示植物鉴定时,每株苗只能鉴定一种柑桔病害;但应用改进接种方法,将分别用来鉴定柑桔碎叶病、衰退病、裂皮病的腊斯克枳橙、墨西哥来檬、861-S-1香橼等3种指示植物的芽同时嫁接接种在一株枳砧上,就可以用一株苗同时鉴定3种柑桔病害。’本试验以已知带病的柑桔品种作为被鉴定试材,应用该改进接种方法和传统接种方法分别对其进行鉴定,结果显示,该改进接种方法和传统接种方法的鉴定结果一致,也和被鉴定材料已知带病情况一致,且该改进接种方法和传统接种方法的指示植物病情指数之间并无显著性差异。 展开更多
关键词 指示植物鉴定接种方法 腊斯克枳橙 墨西哥来檬 861-S-1香橼
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苹果茎沟病毒梨分离物外壳蛋白基因的克隆和序列分析 预览 被引量:8
8
作者 郑银英 洪霓 +1 位作者 王国平 胡红菊 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 62-67,共6页
选取生物学和血清学特性存在较大差异的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)梨分离物P-6-1-17、P-4-1-69、P-L2和P-D-21,采用RT-PCR法对3′端进行扩增,所获扩增片段经序列测定,全长分别为1089nt(P-6-1-17、P-L2)和106... 选取生物学和血清学特性存在较大差异的苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)梨分离物P-6-1-17、P-4-1-69、P-L2和P-D-21,采用RT-PCR法对3′端进行扩增,所获扩增片段经序列测定,全长分别为1089nt(P-6-1-17、P-L2)和1069nt(P-4-1-69、P-D-21)。4个分离物的CP基因均由714nt组成,其核苷酸和推导编码蛋白氨基酸序列同源性分别为89.8%~96.4%和94.9%~97.9%。将我国4个分离物的CP基因与已报道ASGV分离物及分子变种进行序列同源性比较和系统进化树分析,结果表明我国ASGV分离物至少可分为2个组群,其中生物学表现明显不同于其它分离物的P-L2,其CP基因核苷酸序列显示较大的变异。 展开更多
关键词 苹果茎沟病毒 梨分离物 CP基因 序列分析 变异
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我国科学家研制出植物疾病监测新技术 预览
9
《农家致富顾问》 2013年第7期12-12,共1页
近期,由中国检验检疫科学研究院、中国农业科学院与爱尔兰都柏林大学学院合作研制的一种新型生物芯片,能高效快速的检测出农作物上的上百种植物病毒和类病毒感染。
关键词 植物病毒 疾病监测 中国检验检疫科学研究院 中国农业科学院 科学家 技术 生物芯片 病毒感染
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黔南烟草马铃薯Y病毒(PVY)株系的分子鉴定 预览 被引量:2
10
作者 陆新莉 钱凤英 +7 位作者 黄刚 苟正贵 陈威霖 王林玉 黎明江 刘书凯 朱显灵 江彤 《烟草科技》 EI CAS 北大核心 2013年第8期71-74,共4页
为了揭示贵州省黔南烟区马铃薯Y病毒(PVY)株系分布及分子变异规律,先利用血清学方法初步鉴定PVY株系,再选择19个PVY分离物进行分子鉴定。结果表明,克隆的19个PVYcDNA片段全长均为1074nts,包含1个801nts的完整cp基因,编码266个氨... 为了揭示贵州省黔南烟区马铃薯Y病毒(PVY)株系分布及分子变异规律,先利用血清学方法初步鉴定PVY株系,再选择19个PVY分离物进行分子鉴定。结果表明,克隆的19个PVYcDNA片段全长均为1074nts,包含1个801nts的完整cp基因,编码266个氨基酸。序列比对发现,19个黔南PVY分离物cp基因核苷酸序列相似性为87.0%~99.9%,与GenBank登录的其他17个PVY株系cp基因序列相似性为86.6%~99.9%。系统进化树分析表明,黔南烟区19个PVY分离物中,有3个PVY分离物与PVY“株系和PVY”“亲缘关系较近,而其他16个PVY分离物与PVY”。株系的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 烟草 马铃薯Y病毒 株系 CP基因 分子鉴定
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A novel strategy to enhance resistance to Cucumber mosaic virus in tomato by grafting to transgenic rootstocks 预览
11
作者 BAI Miao CHEN Wen-ting +1 位作者 XIE Bing-yan YANG Guo-shun 《农业科学学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2016年第9期2040-2048,共9页
Cucumber mosaic virus(CMV) can infect a wide range of host species. For the lacking of CMV resistant varieties of tomato, RNA interference(RNAi) can be used as a fast and effective method for the generation of transge... Cucumber mosaic virus(CMV) can infect a wide range of host species. For the lacking of CMV resistant varieties of tomato, RNA interference(RNAi) can be used as a fast and effective method for the generation of transgenic resistant varieties. In this current study, five intron-spliced hairpin RNA(ihp RNA) plant expression vectors aimed at five genes of CMV have been constructed. Transgenic tomatoes were obtained by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation with expression vectors. Highly resistant generations of transgenic plants were employed as rootstocks and grafted onto non-transgenic tomatoes that resulted in the successful transfer of resistance to the scions. Using a novel method of plant cuttings for rootstock propagation, we obtained large quantities of disease-resistant material. Further, this method produces scions that can remain undetectable for transgenic resistance marker genes that may provide novel approaches to evade collective concerns about genetically-modified organism(GMO) biosafety. 展开更多
关键词 转基因抗虫品种 黄瓜花叶病毒 番茄品种 砧木 嫁接 植物表达载体 转基因西红柿 RNAi
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桃蚜可高效率地传播小西葫芦黄化花叶病毒新疆株 预览 被引量:10
12
作者 赵荣乐 郑光宇 《北京师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期 382-385,共4页
研究了桃蚜传播小西葫芦黄化花叶病毒新疆株的规律,结果表明,无毒蚜虫能够获毒的最短取食时间为30s,获毒率随取食时间的延长而提高,取食时间为 70s以上时,获毒率达100%;带毒蚜虫传毒的最短取食时间为0.25h,当取食时间超过最短传毒时间时... 研究了桃蚜传播小西葫芦黄化花叶病毒新疆株的规律,结果表明,无毒蚜虫能够获毒的最短取食时间为30s,获毒率随取食时间的延长而提高,取食时间为 70s以上时,获毒率达100%;带毒蚜虫传毒的最短取食时间为0.25h,当取食时间超过最短传毒时间时,传毒率随取食时间的增加而升高,取食时间达2h以上时,传毒率达100%;带毒蚜虫能够传毒的最少头数为1头,传毒率随单株植物带毒蚜虫数目的增加而升高,单株虫量达15头以上时,传毒率达100%.说明桃蚜可以高效率地传播小西葫芦黄化花叶病毒新疆株. 展开更多
关键词 桃蚜 植物病毒 小西葫芦黄化花叶病毒新疆株 病毒传播 传毒效率 取食时间 获毒时间
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病毒编码的RNA沉默抑制子的特征及其生物技术应用 预览 被引量:3
13
作者 孙燕霞 刘红梅 《山东科学》 CAS 2008年第2期 21-26,38,共7页
RNA沉默是一种依赖核酸序列特异性的RNA降解过程,是动物、植物抵抗病毒等外源核酸的一种保守防御机制。而针对寄主的这种防御机制,许多病毒演化出RNA沉默抑制子以克服这种防御反应。本文综述了几种动物、植物病毒抑制子的结构和作用... RNA沉默是一种依赖核酸序列特异性的RNA降解过程,是动物、植物抵抗病毒等外源核酸的一种保守防御机制。而针对寄主的这种防御机制,许多病毒演化出RNA沉默抑制子以克服这种防御反应。本文综述了几种动物、植物病毒抑制子的结构和作用方式,讨论了病毒抑制子之间的交叉抑制功能,病毒运动和沉默抑制子之间的关系,病毒RNA和亚病毒寄生物通过沉默抑制子而进行的自我保护原理,抑制子对于miRNA(microRNA)途径的影响以及病毒抑制子在生物技术方面的应用。 展开更多
关键词 RNA沉默 病毒沉默抑制子 小分子干扰RNA 微RNA
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植物双生病毒研究进展 预览 被引量:5
14
作者 刘玉乐 田波 《中国病毒学》 CSCD 1998年第1期 6-16,共11页
双生病毒(Geminivirus)是一组具有双生颗粒形态的单链环状DNA植物病毒[1~3]。典型的双生病毒为18×30nm颗粒,基因组大小为2.5~3.0knt。双生病毒研究已成为植物病毒学最活跃的领域之一。1双... 双生病毒(Geminivirus)是一组具有双生颗粒形态的单链环状DNA植物病毒[1~3]。典型的双生病毒为18×30nm颗粒,基因组大小为2.5~3.0knt。双生病毒研究已成为植物病毒学最活跃的领域之一。1双生病毒的性质1.1双生病毒组的成员划分... 展开更多
关键词 双生病毒 鉴定 基因组 复制 植物病毒
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美国白蛾核型多角体病毒几丁质酶基因核苷酸序列研究 预览 被引量:13
15
作者 贡成良 金伟 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期 260-269,共10页
美国白蛾核型多角体病毒编码的几丁质酶A基因定位在HindⅢ-3.5kb片段上,DNA测序表明,半胱氨酸蛋白酶基因的5’上游反向存在ChiA基因,ChiA基因的ORF为1662个核苷酸,编码553个氨基酸,5‘,3’-... 美国白蛾核型多角体病毒编码的几丁质酶A基因定位在HindⅢ-3.5kb片段上,DNA测序表明,半胱氨酸蛋白酶基因的5’上游反向存在ChiA基因,ChiA基因的ORF为1662个核苷酸,编码553个氨基酸,5‘,3’-非编码区分别具有TAAG基序和AATAAApoly(A^+)信号序列。 展开更多
关键词 美国白蛾核型多角体病毒 几丁质酶 核苷酸序列
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豆科植物病毒害的发生与防治 预览
16
《农业新技术》 2005年第6期 17,共1页
豆科植物病毒病。在全国各地均有发生,近年来,呈加重趋势,春、夏播的大豆及菜用的豇豆、毛豆、扁豆、豌豆、蚕豆等都有零星或大面积发生、受害程度轻重不一,一般减产30%左右,严重影响豆科植物的品质、产量和商品价值。
关键词 豆科植物 防治 毒害 植物病毒病 受害程度 商品价值 豇豆 菜用 大豆 夏播
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澄江烟草病毒的初步电子显微研究 预览
17
作者 龙华 木崇俊 +1 位作者 周庆 和积鉴 《云南大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 1995年第S1期65-67,共3页
给出对澄江县凤麓镇受病毒感染烟叶进行电子显微研究的初步结果,并给出一些提高病毒电子显微图像质量技术条件.
关键词 病毒 负染色 电子显微图象
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葡萄卷叶伴随病毒4和5简并引物和多重PCR检测 预览 被引量:1
18
作者 范旭东 董雅凤 +2 位作者 张尊平 任芳 裴光前 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期95-97,114共4页
研究建立了葡萄卷叶伴随病毒4和5(Grapevine leafroll associated virus 4and 5,GLRaV-4and 5)的简并引物及多重PCR检测方法。比较了单一PCR、多重PCR和简并引物检测方法的灵敏度,并对简并引物的特异性进行了分析。结果表明,采用简并... 研究建立了葡萄卷叶伴随病毒4和5(Grapevine leafroll associated virus 4and 5,GLRaV-4and 5)的简并引物及多重PCR检测方法。比较了单一PCR、多重PCR和简并引物检测方法的灵敏度,并对简并引物的特异性进行了分析。结果表明,采用简并引物和多重PCR对这两种病毒进行检测,其灵敏度与单一PCR相同,且简并引物仅对葡萄卷叶伴随病毒4和5具有特异性。本研究建立的方法能够同时、快速、灵敏地检测上述2种葡萄卷叶病毒,提高了检测效率,降低了检测费用。 展开更多
关键词 葡萄卷叶伴随病毒4和5 多重RT-PCR 检测 简并引物
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马铃薯Y病毒福建分离物P1基因的分子变异和结构特征 预览 被引量:5
19
作者 史凤阳 高芳銮 +2 位作者 沈建国 常飞 詹家绥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期713-722,共10页
为揭示马铃薯Y病毒(Potato virus y,PVY)P1基因的分子变异及结构特征,并查明福建分离物P1基因的变异来源.文章设计一对简并引物从感染PVY的马铃薯病叶扩增、克隆获得福建分离物P1基因的cDNA全长序列,分析其核苷酸序列和氨基酸序列的特... 为揭示马铃薯Y病毒(Potato virus y,PVY)P1基因的分子变异及结构特征,并查明福建分离物P1基因的变异来源.文章设计一对简并引物从感染PVY的马铃薯病叶扩增、克隆获得福建分离物P1基因的cDNA全长序列,分析其核苷酸序列和氨基酸序列的特征,并采用贝叶斯法重建P1基因的系统发育树.结果显示,12个福建分离物均成功扩增出预期大小(约915 bp)的特异性片段,P1基因的核苷酸序列与已报道的PVY不同株系的核苷酸序列一致性为73%~99%; QK44,XT02,XT08,LH05分离物的309 nt位置均检测到一个强烈的重组信号.12个PVY分离物中,P1蛋白有85个变异的氨基酸位点,表明其高度变异;P1蛋白的第41~275位是一个高度保守的结构功能域,含有3个保守的活性位点(H192、D201、V235);系统发育分析显示,福建分离物形聚为3种不同的簇,其对应的卷曲结构(Coiled-coil domain)和空间结构也不相同,表明不同株系型的P1基因在系统发育关系上分化较大.该研究结果表明PVY P1基因在核苷酸序列、氨基酸序列以及空间结构具有高度变异性,但行使P1蛋白功能的活性位点所在的氨基酸(H192、D201和V235)均高度保守;福建分离物P1基因的变异源主要来自碱基突变和基因重组. 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒 P1基因 变异 重组
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Arabidopsis DET1 Represses Photomorphogenesis in Part by Negatively Regulating DELLA Protein Abundance in Darkness
20
作者 Kunlun Li Zhaoxu Gao +4 位作者 Hang He William Terzaghi Liu-Min Fan Xing Wang Deng Haodong Chen 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期622-630,共9页
DET1 否定地在黑暗中调整 DELLA 蛋白质丰富。
关键词 DELL 光形态建成 A蛋白 拟南芥 丰度 负调控 下胚轴伸长 合成抑制剂
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