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A Comparative Study on Toxicity of Two Type II Rips (Cinnamomin and Ricin) to Silkworm Larvae at BothCellular and Molecular Level
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作者 Guo-QingWEI Ren-ShuiLIU QiongWANG Wang-YiLIU Jia-LongDUAN 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期 159,共1页
关键词 蓖麻蛋白 毒性 家蚕 幼虫 细胞水平 分子水平 核糖核酸糖苷酶
家蚕30K蛋白新成员Slp的基因克隆及表达特征与亚细胞定位
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作者 李擎 于威 +3 位作者 姚玉华 全滟平 聂作明 张耀洲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期240-246,共7页
家蚕30K蛋白是家蚕生长发育的主要能源物质,具有多种生物学功能。根据已知的30K蛋白的氨基酸序列,利用NCBI在线BLAST程序在家蚕蛋白质数据库中进行氨基酸序列相似性比对分析,发现一条新的氨基酸序列,命名为Slp蛋白(GenBank登录号:NM_0... 家蚕30K蛋白是家蚕生长发育的主要能源物质,具有多种生物学功能。根据已知的30K蛋白的氨基酸序列,利用NCBI在线BLAST程序在家蚕蛋白质数据库中进行氨基酸序列相似性比对分析,发现一条新的氨基酸序列,命名为Slp蛋白(GenBank登录号:NM_001126256)。该蛋白质与已知的5种家蚕30K蛋白的氨基酸序列相似度达41%以上,且具有共同的保守结构域Lipoprotein_11,三级结构也极其相似,推测Slp蛋白可能是家蚕30K蛋白家族新成员。利用NCBI在线工具查找获得了编码Slp的基因序列,然后利用RT-PCR技术从家蚕5龄幼虫脂肪体中克隆得到Slp的cDNA序列,并在大肠杆菌中诱导表达。利用获得的纯化Slp蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,对该蛋白质进行亚细胞定位的结果显示其主要存在于BmN细胞的细胞膜上和细胞质中。Western blotting检测Slp蛋白在家蚕不同发育时期均有表达,以5龄幼虫期的表达量最高,蛹期次之,蛾期和卵期最低;在5龄幼虫不同组织均有表达,以血淋巴和脂肪体中的表达量最高,在其它组织中的表达量较低。依据Slp蛋白的序列结构与表达特征,推测其与已知的家蚕30K蛋白具有相似的多种生物学功能。 展开更多
关键词 家蚕 30K蛋白 基因克隆 序列特征 原核表达 组织分布 亚细胞定位
利用家蚕生物反应器生产有用蛋白的研究 预览 被引量:7
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作者 杨瑞丽 吴玉澄 +2 位作者 金勇丰 张耀洲 吴祥甫 《浙江大学学报:农业与生命科学版》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期 173-178,共6页
就家蚕/BmNPV表达系统的原理及生产流程、外源基因在该系统中的表达及表达产物的药物开发作了较为详细的阐述,介绍了利用家蚕大量生产有用蛋白的技术开发状况,展望了家蚕生物反应器的发展前景。
关键词 家蚕 BmNPV表达系统 生物反应器 蛋白质 技术开发
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Effect of Methyl Parathion on the Carbohydrate Metabolism of the Fish, Cirrhinus Mrigala 预览
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作者 Shreeman Nirjhar Chandra Ray Ramesh Chandra Sinha 《材料科学与工程:中英文B版》 2014年第12期366-371,共6页
关键词 碳水化合物代谢 甲基对硫磷 鱼类 琥珀酸脱氢酶 印度 化学应力 能源需求
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氮乙酰半胱氨酸对家蚕辛硫磷农药中毒的预防作用 被引量:2
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作者 臧允亮 高绘菊 +1 位作者 王彦文 牟志美 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期870-877,共8页
氮乙酰半胱氨酸(NAC)是谷胱甘肽的前体物质,能脱乙酰基生成半胱氨酸并具有很强的抗氧化作用。给家蚕5龄起蚕连续24 h添食200μg/mL NAC后,再连续24 h添食0.5倍半致死浓度(4μg/mL)的辛硫磷药液,检测家蚕体内蛋白质、碳水化合物含量... 氮乙酰半胱氨酸(NAC)是谷胱甘肽的前体物质,能脱乙酰基生成半胱氨酸并具有很强的抗氧化作用。给家蚕5龄起蚕连续24 h添食200μg/mL NAC后,再连续24 h添食0.5倍半致死浓度(4μg/mL)的辛硫磷药液,检测家蚕体内蛋白质、碳水化合物含量和相关解毒酶活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)代谢的变化,探究NAC对家蚕辛硫磷农药中毒的预防效果。试验结果表明:预添食NAC能显著提高辛硫磷中毒5龄幼虫的体质量和存活率(P〈0.05);能显著提高辛硫磷中毒家蚕产茧的全茧量、茧层量、茧层率和上茧率(P〈0.05);能有效缓解辛硫磷中毒家蚕血液蛋白质和碳水化合物含量的下降,能使超氧化物歧化酶(SOD)活性在更短时间内被激发,羧酸酯酶(ESTs)的活性上升至仅用辛硫磷处理组家蚕的1.64倍,并且能有效缓解辛硫磷对过氧化物酶(POD)活性的抑制作用;能促进家蚕体内的GSH代谢,激发谷胱甘肽合成酶(GSTs)的活性等。依据试验结果初步认为,NAC通过促进家蚕体内相关生化代谢活动,激发相关解毒酶的活性,从而提高蚕体对亚致死剂量辛硫磷毒性的抵抗能力。 展开更多
关键词 氮乙酰半胱氨酸 家蚕 农药中毒 辛硫磷 解毒酶
宜州市不同桑树品种生理生化性状研究 预览 被引量:4
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作者 岑忠用 苏江 +1 位作者 覃勇荣 李勇毅 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第23期 254-257,共4页
以宜州市当前栽培的主要桑树品种:特优2号、粤桑11号、桂桑优62为材料,对不同桑树品种生理生化性状进行研究。试验结果表明:在各个测定时期,特优2号叶片的叶绿素含量均高于粤桑11号和桂桑优62叶片的叶绿素含量;粤桑11号叶片可溶性... 以宜州市当前栽培的主要桑树品种:特优2号、粤桑11号、桂桑优62为材料,对不同桑树品种生理生化性状进行研究。试验结果表明:在各个测定时期,特优2号叶片的叶绿素含量均高于粤桑11号和桂桑优62叶片的叶绿素含量;粤桑11号叶片可溶性糖含量和水溶性蛋白质含量均比特优2号和桂桑优62的高;不同桑树品种叶片含水量和干物重均达正常水平;特优2号叶片丙二醛含量最低,而脯氨酸含量最高。 展开更多
关键词 桑树 品种 生理生化 性状
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几株家蚕蛹油降解细菌的分离鉴定与降解能力测定 预览 被引量:1
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作者 崔萍 张楠 +3 位作者 张莎莎 国辉 吴金娣 刘训理 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期 102-108,共7页
利用稀释培养法从缫丝废水中分离到5株可降解家蚕蛹油的细菌,采用紫外分光光度法测定了其对家蚕蛹油的降解能力,H73、H23、H1、H5和H43菌株在72 h内对家蚕蛹油的降解率分别达到76.36%、62.04%、60.58%、53.85%和51.20%。通过形态特征、... 利用稀释培养法从缫丝废水中分离到5株可降解家蚕蛹油的细菌,采用紫外分光光度法测定了其对家蚕蛹油的降解能力,H73、H23、H1、H5和H43菌株在72 h内对家蚕蛹油的降解率分别达到76.36%、62.04%、60.58%、53.85%和51.20%。通过形态特征、生理生化特性测定和16S rDNA序列系统发生分析对各菌株进行鉴定,其中H23、H1和H43为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),H5为微杆菌属(Microbacterium sp.),H73为肠杆菌属(Enterobacter sp.)。 展开更多
关键词 家蚕蛹油 降解 细菌 形态特征 生理生化特性 16S RDNA序列 降解能力
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家蚕新突变型从性黑蛾(sml)的遗传分析初报 预览 被引量:2
8
作者 罗尤海 代方银 +2 位作者 李明 鲁成 向仲怀 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 252-255,共4页
西南大学家蚕基因库保存的遗传系统18-130的蛾体色表现特殊性状,雄蛾为灰黑色,雌蛾为白色。用多个白色蛾系统与之进行杂交分析,饲养F1、F2和RF1代,分析该黑蛾的遗传规律,结果:18-130系统黑蛾由常染色体上隐性突变基因控制,且表... 西南大学家蚕基因库保存的遗传系统18-130的蛾体色表现特殊性状,雄蛾为灰黑色,雌蛾为白色。用多个白色蛾系统与之进行杂交分析,饲养F1、F2和RF1代,分析该黑蛾的遗传规律,结果:18-130系统黑蛾由常染色体上隐性突变基因控制,且表现为从性遗传,在雌体中几乎不能表现黑蛾性状,而在雄蛾中黑体色表现明显,即性别不同是影响其表型的主要因素。研究证明该灰黑蛾是家蚕从性遗传的一个典型代表,命名为sex-controlled melanism,基因符号为sml。同时,经过连锁分析探明sml基因与第7连锁群的鹑斑(q)、第13连锁群的隐性赤蚁(ch)、第16连锁群的颊尾斑(cts)均为独立遗传。 展开更多
关键词 家蚕 突变 黑色蛾 从性遗传
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Prognostic value of soluble MICA levels in the serum of patients with advanced hepatocellular carcinoma 预览 被引量:1
9
作者 Jian-Jun Li 《癌症:英文版》 SCIE CAS CSCD 2013年第3期141-148,共8页
Serum levels of soluble MHC class I-related chain A (sMICA) are related with the prognosis of various types of cancer; however, few studies on the prognostic value of sMICA in hepatocellular carcinoma (HCC) have been ... Serum levels of soluble MHC class I-related chain A (sMICA) are related with the prognosis of various types of cancer; however, few studies on the prognostic value of sMICA in hepatocellular carcinoma (HCC) have been reported. In this study, we retrospectively investigated the relationship between sMICA levels and clinical features of advanced HCC, and we assessed the prognostic value of sMICA in advanced HCC. Furthermore, the relationship of serum sMICA levels and natural killer group 2, member D (NKG2D) expression on natural killer (NK) cells was also evaluated. We detected sMICA levels in the serum of 60 advanced HCC patients using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and measured expression levels of NKG2D on NK cells using flow cytometry. We found that serum sMICA levels in HCC patients were in the range of 0.10 -6.21 ng/mL. Chi-square analyses showed that sMICA level was significantly related with only tumor size. Survival analysis showed that a high sMICA level was significantly related with poor prognosis among HCC patients. Multivariate analyses indicated that sMICA was an independent prognostic factor. In addition, the levels of CD56+NKG2D+NK cells were within the range of 11.2%-55.4%, and correlation analyses indicated that sMICA level was negatively correlated with the level of NKG2D+NK cells. Our results suggest that serum sMICA levels may be an independent prognostic factor for advanced HCC. 展开更多
关键词 细胞水平 可溶性 预后 血清 肝癌 晚期 患者 价值
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家蚕中肠羧酸酯酶基因的克隆及用槲皮素和有机磷杀虫剂诱导后的表达变化
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作者 李国印 余泉友 张泽 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期247-256,共10页
昆虫羧酸酯酶(carboxylesterases,COEs)在昆虫降解杀虫剂和代谢植物次生物质的过程中起重要作用。克隆了家蚕中肠特异表达的4个羧酸酯酶α-家族基因Bmae2、Bmae17、Bmae18和Bmae27。序列分析表明Bmae2和Bmae17编码的蛋白质均具有酯酶... 昆虫羧酸酯酶(carboxylesterases,COEs)在昆虫降解杀虫剂和代谢植物次生物质的过程中起重要作用。克隆了家蚕中肠特异表达的4个羧酸酯酶α-家族基因Bmae2、Bmae17、Bmae18和Bmae27。序列分析表明Bmae2和Bmae17编码的蛋白质均具有酯酶活性必需的催化残基Ser、Glu、His以及α-酯酶/β-酯酶家族的特征基序Gly-x-Ser-x-Gly,而Bmae18与Bmae27编码蛋白质的Ser残基分别突变为Asp和Gly残基,推测Bmae2和Bmae17具有酯酶的水解活性。4龄起蚕分别添食4种浓度的槲皮素(quercetin)后,通过半定量RT-PCR和定量PCR检测4个COEs基因在各处理组家蚕中肠中的表达均有显著上调,最大诱导表达量分别为对照组的6.90、2.21、1.30、8.78倍。分别用亚致死剂量的有机磷农药辛硫磷、敌敌畏和毒死蜱处理5龄第2天幼虫,检测中肠COEs活性均显著增强。通过半定量RT-PCR和定量PCR检测发现:Bmae17和Bmae27在低浓度辛硫磷处理的3 d内均上调表达,与酶活性检测结果基本一致,推测这2个基因可能主要参与了对辛硫磷的解毒作用;敌敌畏处理组家蚕只在处理第3天时中肠中的Bmae17、Bmae18和Bmae27的表达呈现诱导上调,在处理后的前2 d呈现出表达被抑制或与对照组无显著差异的现象,毒死蜱处理组也出现了类似现象,与酶活性检测结果不完全一致,推测与在中肠表达的其它COEs参与了对这2种农药的解毒作用有关。研究结果为进一步深入研究家蚕中肠COEs基因的解毒机制奠定了一定基础。 展开更多
关键词 家蚕 羧酸酯酶 基因克隆 有机磷杀虫剂 槲皮素 诱导
抗血液型脓病蚕品种华康1号在如皋市农村饲养调查 预览 被引量:2
11
作者 周慧勤 佘柳涛 徐安英 《中国蚕业》 2015年第3期48-51,共4页
华康1号是由中国农业科学院蚕业研究所培育的抗家蚕血液型脓病蚕品种,2014年中秋期在如皋市农村首次进行饲养调查,以当家蚕品种苏·菊×明·虎为对照。试验结果表明:华康1号蚕品种对家蚕血液型脓病具有较强的抗性,血液型... 华康1号是由中国农业科学院蚕业研究所培育的抗家蚕血液型脓病蚕品种,2014年中秋期在如皋市农村首次进行饲养调查,以当家蚕品种苏·菊×明·虎为对照。试验结果表明:华康1号蚕品种对家蚕血液型脓病具有较强的抗性,血液型脓病的全龄发病率比苏·菊×明·虎低3.2个百分点,其蚕期发病率比苏·菊×明·虎低2.9个百分点,死笼率低5.9个百分点;结茧率高2.8个百分点,虫蛹率高7.8个百分点;万头产茧量高3.1%,公斤茧用桑量低5.2%。华康1号的丝质成绩与苏·菊×明·虎相比,全茧量、茧层率相当,解舒率和万米吊糙优于苏·菊×明·虎。 展开更多
关键词 华康1号 抗血液型脓病 蚕品种 如皋市 养蚕成绩 丝质成绩
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家蚕雌蛾粘液腺的发达和蛋白质的合成 预览 被引量:1
12
作者 有泽宜幸 吴韬信 《国外农学:蚕业》 1992年第3期 33-37,共5页
<正> 本研究报道是家蚕雌蛾的粘液腺形态形成以后,蛋白质的合成为主要着眼点,对粘液腺的核酸,蛋白质的含量变化以及粘液腺蛋白质的组成等有关粘液腺发育的基础实验的结果。
关键词 家蚕 雌蛾 粘液腺 蛋白
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家蚕彩色茧丝的特性及应用前景 预览 被引量:8
13
作者 陈玉银 徐孟奎 《农业新技术》 2003年第5期 10-11,共2页
关键词 家蚕 彩色蚕茧丝 特性 应用前景 品种选育
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家蚕丝素重链启动子克隆片段在家蚕体内和昆虫培养细胞内的渗漏表达 预览 被引量:8
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作者 汪生鹏 陆长德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 491-496,共6页
为了探讨家蚕丝素重链基因的调控机制。应用重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)为基因转移载体,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,研究了丝素重链基因启动子克隆片段在家蚕丝腺的不同部位,以厦脂肪体细胞和Sf9培养细胞中的表达... 为了探讨家蚕丝素重链基因的调控机制。应用重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)为基因转移载体,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,研究了丝素重链基因启动子克隆片段在家蚕丝腺的不同部位,以厦脂肪体细胞和Sf9培养细胞中的表达渗漏。结果发现,丝素重链启动子克隆片段在家蚕中部丝腺存在表达渗漏,并且在中部丝腺前部的表达活性要强于中部丝腺的中部和后部;克隆片段在脂肪体组织存在表达渗漏,通过荧光解剖显微镜可以在体表观察到绿色荧光;克隆片段在Sf9培养细胞中也存在表达渗漏。上速结果说明目前已知的有关家蚕丝素重链基因的调控元件仍不充分,家蚕基因组中可能还有其他调控丝素重链基因表达组织和时相的特异性元件存在。 展开更多
关键词 家蚕 丝素重链基因 渗漏表达 重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒
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家蚕超氧化物歧化酶(SOD)不同品种活性差异的研究 预览 被引量:4
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作者 刘春 罗英 +3 位作者 代方银 陈萍 唐云明 鲁成 《蚕学通讯》 2002年第4期 1-6,共6页
对西南农业大学家蚕基因库和育种室的114个家蚕品种及遗传系统进行了SOD活性调查,结果表明:SOD活性最高值达237.375U/ml,而最低值为38.372U/ml,平均值为140.08U/ml;品种间SOD活性差异较大,其品种及遗传系统的活性值分布图似正态分布,而... 对西南农业大学家蚕基因库和育种室的114个家蚕品种及遗传系统进行了SOD活性调查,结果表明:SOD活性最高值达237.375U/ml,而最低值为38.372U/ml,平均值为140.08U/ml;品种间SOD活性差异较大,其品种及遗传系统的活性值分布图似正态分布,而一代杂交种的活性值居双亲活性值中间,并推测SOD受多基因作用.中国二化性品种SOD活性值比日本二化性品种高20%左右. 展开更多
关键词 家蚕 氧化物歧化酶 SOD 正态分布 酶活性 品种差异
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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因Bmserpin-6的特异性表达分析 被引量:5
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作者 王彦云 何渐鸣 +3 位作者 李国胜 王明慧 沈卫德 许雅香 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期257-260,共4页
丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)在昆虫的先天性免疫及生长发育中发挥重要作用。为研究家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂6(Bmserpin-6)在家蚕表皮黑化反应、蜕皮变态和先天性免疫等生理过程中的功能作用,采用实时荧光定量PCR方法,检测Bm-serpin-6... 丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpin)在昆虫的先天性免疫及生长发育中发挥重要作用。为研究家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂6(Bmserpin-6)在家蚕表皮黑化反应、蜕皮变态和先天性免疫等生理过程中的功能作用,采用实时荧光定量PCR方法,检测Bm-serpin-6 mRNA在家蚕幼虫组织和蜕皮过程以及免疫刺激处理后的转录特征。结果表明:Bmserpin-6 mRNA在4龄幼虫的头部、表皮、中肠、丝腺和脂肪体中有转录,其中在表皮中高水平转录,但在眠中的转录水平下调;在5龄幼虫头部的转录水平随发育时间呈先升后降的趋势;脂多糖(LPS)刺激5龄第3天幼虫后,Bmserpin-6 mRNA在血液和脂肪体中的转录水平上升,其中在脂肪体中的转录水平自刺激后6 h达到最高值,在血液中的转录水平自刺激后9 h达到最高值。结果提示,Bmserpin-6可能与家蚕的表皮黑化反应及蜕皮有一定关系。 展开更多
关键词 家蚕 丝氨酸蛋白酶抑制剂 实时荧光定量PCR 基因转录
新型抗感染药物研究模式生物——家蚕 预览 被引量:1
17
作者 陈明 章玉萍 +5 位作者 代君君 涂文君 张丽丽 吴传华 刘健 范涛 《中国蚕业》 2014年第3期19-22,46共5页
在抗生素耐药现象层出不穷的今天,寻找新的抗菌靶点和药物作用机制,开发新的抗感染药物变的越来越紧迫.家蚕,以其特有的生理生化特性和基因组学研究深入为优势,逐渐成为一种重要的用于抗感染药物研究的模式生物.综述了家蚕作为抗感染药... 在抗生素耐药现象层出不穷的今天,寻找新的抗菌靶点和药物作用机制,开发新的抗感染药物变的越来越紧迫.家蚕,以其特有的生理生化特性和基因组学研究深入为优势,逐渐成为一种重要的用于抗感染药物研究的模式生物.综述了家蚕作为抗感染药物研究新兴的模式生物,凭借世代短、子代多、遗传资源丰富以及基因和人类基因相似性高的若干优势,对家蚕用于抗感染药物研究的相关应用,如家蚕抗感染模型的建立、抗感染防御机制的研究,利用家蚕感染模型研究新型抗病毒药物、新型抗菌药物,家蚕的真菌感染研究等进行了综述,展望了家蚕模式生物研究的前景. 展开更多
关键词 家蚕 模式生物 抗感染 防御机制 药物筛选
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家蚕突变基因与连锁群(续) 预览
18
作者 土井良宏 张玲亚 《蚕学通讯》 1997年第1期33-40,共8页
第十连锁群(Suzuki,1929)l、dw-k(0.0)k小蚕(dwarf-k):发育迟缓,蚕体小,自然突变.2、Dus(3.9)二重星状纹(Star spots duplication):自然突变,第9环节复生星状纹,同质型胚子期致死.3、spr(12.1)隐性小球细胞缺失(recessive spherule ... 第十连锁群(Suzuki,1929)l、dw-k(0.0)k小蚕(dwarf-k):发育迟缓,蚕体小,自然突变.2、Dus(3.9)二重星状纹(Star spots duplication):自然突变,第9环节复生星状纹,同质型胚子期致死.3、spr(12.1)隐性小球细胞缺失(recessive spherule cell minus):自然突变,体液中没有小球细胞,全茧量比正常. 展开更多
关键词 自然突变 连锁群 等位基因 突变基因 家蚕 斑油蚕 星状纹 滞育激素 胰凝乳蛋白酶 小球细胞
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家蚕血细胞分类和造血功能研究 预览 被引量:4
19
作者 傅吉涛 刘朝良 +2 位作者 凌尔军 查新民 李东升 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2005年第5期 803-804,共2页
荧光染料丫啶橙和碘化丙啶可以用来正确分类家蚕所有的血细胞,并了解许多尚未知的血球特征.运用BrdU标记循环血细胞,结果表明:外科手术摘除家蚕造血器官后,血细胞以接近40%的比率分裂,说明家蚕血细胞自身的分裂能力是其造血功能的重要补... 荧光染料丫啶橙和碘化丙啶可以用来正确分类家蚕所有的血细胞,并了解许多尚未知的血球特征.运用BrdU标记循环血细胞,结果表明:外科手术摘除家蚕造血器官后,血细胞以接近40%的比率分裂,说明家蚕血细胞自身的分裂能力是其造血功能的重要补充,也显示出昆虫具有高度免疫功能. 展开更多
关键词 家蚕 血细胞 分类 造血功能 细胞分裂 荧光染色方法
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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂5的多克隆抗体制备及组织表达分析 被引量:2
20
作者 李国胜 王彦云 +4 位作者 王明慧 徐开遵 陈玉华 沈卫德 许雅香 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期261-265,共5页
为探讨家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂5(Serpin-5)的功能,制备其多克隆抗体并分析该蛋白质在家蚕组织中的表达特征。克隆获得去除信号肽的家蚕serpin-5基因,该基因大小为1 140 bp,编码379个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量42.6 kD,等电点6.02... 为探讨家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂5(Serpin-5)的功能,制备其多克隆抗体并分析该蛋白质在家蚕组织中的表达特征。克隆获得去除信号肽的家蚕serpin-5基因,该基因大小为1 140 bp,编码379个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量42.6 kD,等电点6.02。构建用于原核表达的pET28a-serpin-5载体,并在E.coli BL21中进行重组蛋白的诱导表达。经SDS-PAGE分析表明重组家蚕Serpin-5蛋白多以包涵体的形式存在,纯化后的融合蛋白的分子质量与预测值相符。以此为抗原免疫昆明小鼠,Western blot检测制备的多克隆抗体具有较高的特异性,ELISA检测该多抗对免疫抗原的效价达到1∶24 000。在制备高效价抗体的基础上,通过Western blot检测家蚕Serpin-5蛋白在5龄第3天幼虫精巢、卵巢中的表达量较高,中肠次之,在丝腺、马氏管、脂肪体中的表达量较低。推测家蚕Serpin-5蛋白在生殖腺中的高表达可能与家蚕的生殖功能相关。 展开更多
关键词 家蚕 丝氨酸蛋白酶抑制剂 原核表达 多克隆抗体 组织表达
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