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缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性分析(英文) 预览
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作者 刘京国 郭蓓 +1 位作者 赵晓萌 师光禄 《农业科学与技术:英文版》 CAS 2012年第2期 265-267,303,共4页
[目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达... [目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达。提取目标蛋白,并涂在棉铃虫饲料表面,检测其杀虫活性。[结果]Cry1Acdelα1基因在大肠杆菌中能正常表达目标蛋白,但该目标蛋白是以包涵体形式存在。生测结果显示,在相同浓度下,活化的Cry1Ac对棉铃虫的致死率达75%以上,而Cry1Acdelα1只有10%左右。[结论]用大肠杆菌表达的Cry1Acdelα1对棉铃虫基本没有杀虫活性。 展开更多
关键词 CRY1AC α1片段 杀虫活性
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缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性分析 预览
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作者 刘京国 郭蓓 +1 位作者 赵晓萌 师光禄 《安徽农业科学》 CAS 2012年第6期 3248-3250,共3页
[目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增缺乏α螺旋的Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目... [目的]对缺失α1螺旋的Cry1Ac在大肠杆菌中的表达、纯化和活性进行分析。[方法]以苏云金芽孢杆菌HD-1中的质粒为模板,扩增缺乏α螺旋的Cry1Ac基因,并将其与pET28a载体连接,构建重组质粒。重组质粒转化并经IPTG诱导后,用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达。提取目标蛋白,并涂在棉铃虫饲料表面,检测其杀虫活性。[结果]Cry1Acdelα1基因在大肠杆菌中能正常表达目标蛋白,但该目标蛋白是以包涵体形式存在。生侧结果显示,在相同浓度下,活化的Cry1Ac对棉铃虫的致死率达75%以上,而Cry1Acdelα1只有10%左右。[结论]用大肠杆菌表达的Cry1Acdelα1对棉铃虫基本没有杀虫活性。 展开更多
关键词 CRY1AC α1片段 杀虫活性
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α2—巨球蛋白基因多态性与帕金森病的相关研究 预览 被引量:2
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作者 郝怡鑫 徐玲 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期 13-15,共3页
目的 探讨α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,A2M)基因外显子18上5个碱基的插入/缺失(Ins/D)多态,外显子24上缬氨酸/异亮氨酸(V/I)多态与帕金森病(PD)发病风险间的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)... 目的 探讨α2-巨球蛋白(α2-macroglobulin,A2M)基因外显子18上5个碱基的插入/缺失(Ins/D)多态,外显子24上缬氨酸/异亮氨酸(V/I)多态与帕金森病(PD)发病风险间的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,在66例PD患者,190名健康老人中观察A2M两种基因多态的分布,并通过比值比(OR)对两种A2M多态与PD作相关分析。结果 (1)PD患者中A2M外显子24上缬氨酸等位基因的频率(9.1%)明显高于正常老人(3.9%,X^2=5.19,P=0.023);而且PD患者V/I杂合子基因型的频率(18.2%)亦明显高于对照组(6.8%,X^2=7.15,P=0.008);并使患PD的危险性增加2.97倍(95%可信区间为1.38,6.58)。(2)A2M外显子18上Ins等位基因在PD患者中的频率(99.2%)虽明显高于正常对照(96.2%,X^2=3.99,P=0.046),但相关分析未揭示其与PD的相关性(OR=5.18,95可信区间0.83,32.15;X^2=3.09,P>0.05),但相关分析未揭示其与PD的相关性(OR=5.18,95%可信区间0.83,32.15;X^2=3.09,P>0.05);且基因型在两组间分布差异亦无显著意义(X^2=3.23,P>0.05)。结论 A2M外显子24上V等位基因可能是PD发病的风险因子,而外显子18上Ins等位基因则可能与PD发病无明显相关。 展开更多
关键词 帕金森病 α-巨球蛋白类 等位基因型 多态性 限制片段长度
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HIF-1α基因C1772T、G1790A多态性与藏族人群高原低氧适应关系的研究 预览 被引量:14
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作者 刘坤祥 孙学川 +1 位作者 王圣巍 胡斌 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期 654-658,共5页
采集西藏登山队和西藏登山运动学校藏族登山队员(共86人)以及广东汉族健康个体(共90人)的外周静脉血样,提取白细胞基因组DNA,利用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术检测缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible facto... 采集西藏登山队和西藏登山运动学校藏族登山队员(共86人)以及广东汉族健康个体(共90人)的外周静脉血样,提取白细胞基因组DNA,利用限制性片段长度多态性-聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术检测缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因(HIF-1α)外显子12的C1772T、G1790A的单核苷酸多态性等位基因频率及其组合基因型分布特征,以探讨其与高原低氧适应的相关性。结果显示,C1772T的CC、CT和TT基因型分布频率在藏族组与汉族对照组分别为13.95%和16.67%、38.37%和41.11%、47.68%和42.22%,各基因型频率在两组间比较无显著性差异;G1790A的GG、GA和AA基因型分布频率在藏族组与汉族对照组分别为60.47%和75.56%、36.05%和21.11%、3.48%和3.33%,藏族组的GG基因型频率较汉族对照组的低(P〈0.05),而GA基因型频率较汉族对照组高(P〈0.05)。表明G1790A的GA基因型可能与藏族人群适应高原低氧有关,值得进一步深入探讨。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子1α(HIF-1α) 单核苷酸多态性 高原低氧适应 限制性片段长度多态性PCR
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α1-抗糜蛋白酶基因多态性与阿尔茨海默病相关性探讨 预览 被引量:1
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作者 廖伟娇 陈盛强 +2 位作者 陈柏铭 刘忠民 刘利东 《广州医药》 2003年第4期 57-59,共3页
目的:探讨阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)患者中α1-抗糜蛋白酶(AACT)基因的多态性及其与AD的相关性.方法:利用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)技术,对48例AD患者及86例对照者的AACT信号肽基因进行分型,并进行AD与A... 目的:探讨阿尔茨海默病(Alzheimer Disease,AD)患者中α1-抗糜蛋白酶(AACT)基因的多态性及其与AD的相关性.方法:利用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)技术,对48例AD患者及86例对照者的AACT信号肽基因进行分型,并进行AD与AACT信号肽基因多态性的相关分析.结果:①AD病人AACT信号肽A/T基因型占27.1%,明显低于对照组的51.2%(P<0.01,RR=0.355),T/T占60.4%,明显高于对照组的37.2%(P<0.01,RR=2.576),A/A占12.5%,与对照组11.6%无显著性差异(P>0.05,RR=1.086).②AD病人中AACT信号肽等位基因A的频率为26.0%,T的频率为74.0%,与对照组(A37.2%、T 62.8%)无显著性差异(P>0.05).结论:AD病人的AACTT/T可能与AD存在正相关;而AACTA/T则可能与AD存在负相关. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 Α1-抗糜蛋白酶 基因多态性 聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术
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