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诸葛菜种子抗真菌蛋白的提取及其抑菌活性 预览
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作者 张玮玮 袁素素 +1 位作者 王财成 叶秀娟 《福建农林大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第3期296-302,共7页
通过柱层析技术从诸葛菜种子中分离抗真菌蛋白,并采用纸片扩散法、琼脂平板稀释法和凹玻片法对抗真菌蛋白的抑菌活性和稳定性进行研究.结果表明:从诸葛菜种子中分离出一种分子质量约为10 ku的抗真菌蛋白,命名为Zp;经QE质谱鉴定,Zp蛋白... 通过柱层析技术从诸葛菜种子中分离抗真菌蛋白,并采用纸片扩散法、琼脂平板稀释法和凹玻片法对抗真菌蛋白的抑菌活性和稳定性进行研究.结果表明:从诸葛菜种子中分离出一种分子质量约为10 ku的抗真菌蛋白,命名为Zp;经QE质谱鉴定,Zp蛋白可能是诸葛菜种子中的一种防御素蛋白.Zp蛋白对11种植物病原真菌均具有较强抑制作用,其中对尖孢镰刀菌生长的半抑制浓度(IC50)为54.36μg·mL^-1,对其孢子萌发的IC50为15.97μg·mL^-1.Zp蛋白的抑菌活性在温度0~100℃和pH 1~14的范围内稳定,其对有机溶剂(15%甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚和丙酮)和金属阳离子(50~250 mmol·L^-1 Mg^2+、K^+、Mn^2+和Ca^2+)也具有较强的耐受力. 展开更多
关键词 诸葛菜 抗真菌蛋白 纯化 抑菌活性 稳定性
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京水菜种子SU1抗菌蛋白的纯化、稳定性和抑菌机制
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作者 袁素素 秦武洒 叶秀娟 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期369-376,共8页
为拓展抗菌蛋白在新型生物农药上的潜在应用价值,通过SP-Sepharose阳离子交换层析、Mone S阳离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析从京水菜Brassica juncea var. multisecta种子中纯化得到一种分子量约为30kD的SU1抗菌蛋白,采用纸片... 为拓展抗菌蛋白在新型生物农药上的潜在应用价值,通过SP-Sepharose阳离子交换层析、Mone S阳离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析从京水菜Brassica juncea var. multisecta种子中纯化得到一种分子量约为30kD的SU1抗菌蛋白,采用纸片扩散法测定该抗菌蛋白的稳定性和抑菌活性,并采用荧光染色法分析其抗菌机制。结果表明,在pH为1~3和11~13条件下,SU1抗菌蛋白抑菌活性不受影响;40~80℃热处理和100 mmol/L Mn^2+、Al^3+、Zn^2+、Cu^2+、Fe^3+、Pb^2+、Mg^2+、K^+和Cr^3+离子处理后,该抗菌蛋白仍具有抑菌活性,而100mmol/LCa^2+离子处理后该抑菌蛋白的抑菌活性消失。此外,乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)溶液处理后SU1抗菌蛋白的抑菌活性消失,再次加入Cr^3+离子时,其抑菌活性恢复。SU1抗菌蛋白能抑制7种植物病原真菌的生长,可破坏尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum菌丝细胞膜透性和细胞核的完整性,并引起线粒体膜电势增加和菌丝细胞脱氧核糖核酸的分解。 展开更多
关键词 京水菜种子 抗菌蛋白 纯化 稳定性 抑菌机制
芝麻菜种子抗菌蛋白的纯化及其抗菌活性 预览
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作者 张耀 王财成 +2 位作者 袁素素 张玮玮 叶秀娟 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第20期92-97,共6页
本文旨在从芝麻菜种子中分离纯化得到一种具有抗菌活性的蛋白,并对其抗菌活性进行研究。通过SPSepharose离子交换色谱、Mono S~(TM)5/50GL和Superdex~(TM)75 10/300GL快速蛋白液相色谱进行分离纯化,经Tricine-SDS-PAGE电泳分析;... 本文旨在从芝麻菜种子中分离纯化得到一种具有抗菌活性的蛋白,并对其抗菌活性进行研究。通过SPSepharose离子交换色谱、Mono S~(TM)5/50GL和Superdex~(TM)75 10/300GL快速蛋白液相色谱进行分离纯化,经Tricine-SDS-PAGE电泳分析;采用纸片扩散法、荧光染色法,对其抗菌活性和稳定性进行研究。结果表明,从芝麻菜种子中纯化一种抗菌蛋白ZSU2,经Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定达到电泳纯,相对分子质量约为12 kDa; ZSU2蛋白对小白菜炭疽病菌等12种真菌具有较强的抑制作用,抗菌活性在pH1~13、温度0~100℃稳定,且具有较强的金属阳离子耐受能力;此外,ZSU2蛋白能引起菌丝尖端几丁质积累和细胞膜选择透过性的改变。 展开更多
关键词 芝麻菜 抗菌蛋白 分离纯化 抗真菌活性
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紫菜薹种子抗菌蛋白的分离纯化及其抑菌活性和稳定性研究 预览
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作者 袁素素 秦武洒 +2 位作者 张玮玮 王财成 叶秀娟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第10期69-74,共6页
从紫菜薹种子中筛选和纯化抗菌蛋白,以促进未来新型抗菌药物的发展。通过SP-Sepharose阳离子交换层析柱、Mono S TM 5/50GL强阳离子交换层析柱和Superdex TM 75 10/300GL层析柱依次层析,从紫菜薹种子中纯化出一种分子质量约为13 ku的抗... 从紫菜薹种子中筛选和纯化抗菌蛋白,以促进未来新型抗菌药物的发展。通过SP-Sepharose阳离子交换层析柱、Mono S TM 5/50GL强阳离子交换层析柱和Superdex TM 75 10/300GL层析柱依次层析,从紫菜薹种子中纯化出一种分子质量约为13 ku的抗菌蛋白,其能够抑制8种植物病原真菌的生长。抗菌蛋白在40~80℃和pH值1~13条件下,抑菌活性不受影响;经200 mmol/L SDS溶液、2%吐温(Tween 80)溶液和20%有机溶剂处理后,仍具有抑菌活性;经Al 3+、Zn 2+、Cu 2+、Fe 3+、Pb 2+、Mg 2+、K+、Cr 3+金属离子处理后,具有抑菌活性,而经Mn 2+、Ca 2+金属离子处理后,抑菌活性消失。综上,紫菜薹种子抗菌蛋白是一种抑菌活性稳定的广谱抗菌蛋白,具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 紫菜薹 抗菌蛋白 纯化 抑菌活性 稳定性
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洋葱伯克氏菌Burkholderia contaminans抗菌蛋白分离纯化及生物学特性分析 预览
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作者 张婧婷 施俊凤 范三红 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第14期179-184,共6页
洋葱伯克氏菌(Burkholderia contaminans)从杏果实表面分离,实验证明其对果蔬采后多种病原真菌具有较强的抑制作用。为了进一步揭示其抑菌机理,通过菌体裂解、硫酸铵分级盐析、纤维素DE-52阴离子交换柱层析及Sephadex G-100凝胶过滤... 洋葱伯克氏菌(Burkholderia contaminans)从杏果实表面分离,实验证明其对果蔬采后多种病原真菌具有较强的抑制作用。为了进一步揭示其抑菌机理,通过菌体裂解、硫酸铵分级盐析、纤维素DE-52阴离子交换柱层析及Sephadex G-100凝胶过滤柱层析,得到一种具有抗菌活性的蛋白。经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测结果表明,该蛋白呈单一条带,其分子质量约为17.6kDa。粗提蛋白溶液具有一定热稳定性,在不同pH值条件下稳定,对有机试剂、紫外照射、蛋白酶不敏感。50mg/mL的Tween-80处理粗提液,活性比对照增加了12.5%,对还原剂SDS和二硫苏糖醇敏感。 展开更多
关键词 洋葱伯克氏菌(Burkholderia contaminans) 抗菌蛋白 分离纯化 理化性质
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枯草芽胞杆菌NCD-2菌株抑菌蛋白的分离及鉴定
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作者 张晓云 郭庆港 +4 位作者 鹿秀云 赵卫松 王培培 李社增 马平 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期395-401,共7页
枯草芽胞杆菌NCD-2菌株对灰葡萄孢菌具有较强的抑菌活性,抑菌蛋白是其产生的抑菌物质之一。本研究为明确NCD-2菌株所产抑菌蛋白的作用方式和特性,采用牛津杯法测定抑菌蛋白的抑菌活性及其对病原菌菌丝生长的影响,采用混合培养法测定其... 枯草芽胞杆菌NCD-2菌株对灰葡萄孢菌具有较强的抑菌活性,抑菌蛋白是其产生的抑菌物质之一。本研究为明确NCD-2菌株所产抑菌蛋白的作用方式和特性,采用牛津杯法测定抑菌蛋白的抑菌活性及其对病原菌菌丝生长的影响,采用混合培养法测定其对病原菌分生孢子萌发的影响,同时采用阴离子交换层析和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对其进行分离纯化,并利用MALDI-TOF-MS进行鉴定。结果表明,NCD-2菌株产生的粗蛋白能够显著抑制灰葡萄孢菌分生孢子的萌发和菌丝生长,并导致病原菌菌丝分枝增多、局部膨大肿胀。通过分离纯化获得具抑菌活性的蛋白组分D1-3,经鉴定该蛋白的肽指纹图谱与leucyl aminopeptidase[Bacillus subtilis](WP041057629.1)的氨基酸序列匹配率最高,达到65%,相对分子质量为53.936 k Da,功能分析表明组分D1-3可能是一种新的抑菌蛋白。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 抑菌蛋白 抑菌机制 鉴定
枯草芽孢杆菌Zl-2抗菌蛋白特性及对小麦赤霉病菌的抑制作用 预览 被引量:1
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作者 郑小亮 董超 +6 位作者 牛瑞艳 齐新月 孙超 王星星 刘超 贾桂燕 陈志宝 《黑龙江大学自然科学学报》 2018年第2期206-211,共6页
为揭示生防菌枯草芽孢杆菌菌株Zl-2产生的抗菌蛋白性质及对小麦赤霉病菌的抑制作用,采用硫酸铵对菌株Zl-2的发酵液进行分级沉淀获得抗菌粗蛋白,然后研究该抗菌蛋白对热、酸碱、紫外光和蛋白酶的稳定性,同时以小麦赤霉病病原菌禾谷镰刀菌... 为揭示生防菌枯草芽孢杆菌菌株Zl-2产生的抗菌蛋白性质及对小麦赤霉病菌的抑制作用,采用硫酸铵对菌株Zl-2的发酵液进行分级沉淀获得抗菌粗蛋白,然后研究该抗菌蛋白对热、酸碱、紫外光和蛋白酶的稳定性,同时以小麦赤霉病病原菌禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)为靶标菌,对活性蛋白的抗菌作用进行初步研究。结果表明,Zl-2产生的抗菌蛋白具有很好的耐热、耐紫外特性,对酸碱和蛋白酶敏感,抗菌蛋白的抗菌作用主要表现在对禾谷镰刀菌菌丝生长有强烈的抑制作用,并且使菌丝生长的形态畸形、底端膨大、对孢子的萌发也有抑制作用。因此,枯草芽孢杆菌Zl-2的抗菌蛋白具有稳定性好、抗菌能力强的特点,不同于目前已研究的来自枯草芽孢杆菌的抗菌物质,可能为新的抗菌蛋白。 展开更多
关键词 微生物学 抗菌蛋白 生物防治 枯草芽孢杆菌 小麦赤霉病
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Identification of In-intro Antagonistic Activity of HAS1 Protein against Sporisorium scitanminea 预览
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作者 Huiqing LIU Yuantao HUANG +3 位作者 Mengyu DAI Yimin QIU Gengfeng ZHAO Guoru XIONG 《农业生物技术:英文版》 CAS 2018年第6期9-11,15共4页
Sugarcane smut greatly influences yield and quality of sugarcane.HAS 1 gene in biocontrol strain HAS antagonistic to Sporisorium scitanminea was selected for prokaryotic expression vector construction and inducible ex... Sugarcane smut greatly influences yield and quality of sugarcane.HAS 1 gene in biocontrol strain HAS antagonistic to Sporisorium scitanminea was selected for prokaryotic expression vector construction and inducible expression,and the antagonistic effect of HAS1 protein was detected in vitro.The results showed that the expression product of antifungal HAS 1 gene obtained through prokaryotic expression vector construction and inducible expression had better antagonistic effect against S.scitanminea.This study provides an experimental basis for further utilization of this protein. 展开更多
关键词 BACILLUS SUBTILIS HAS Sporisorium scitanminea PROKARYOTIC expression ANTIFUNGAL PROTEIN
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抱茎苦荬菜内生甲基营养型芽孢杆菌G-5抗菌蛋白抗真菌特性研究 被引量:3
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作者 采俊香 李月梅 《中国植保导刊》 北大核心 2017年第4期20-26,共7页
为明确抱茎苦荬菜内生细菌G-5分类地位及其抗菌蛋白在生物农药开发中的应用潜力.本研究采用16SrRNA、硫酸铵沉淀法、生长速率法和琼脂扩散法对其分类地位和抗菌蛋白抑菌特性进行分析。结果表明,内生细菌G-5鉴定为Bacillus methylotrop... 为明确抱茎苦荬菜内生细菌G-5分类地位及其抗菌蛋白在生物农药开发中的应用潜力.本研究采用16SrRNA、硫酸铵沉淀法、生长速率法和琼脂扩散法对其分类地位和抗菌蛋白抑菌特性进行分析。结果表明,内生细菌G-5鉴定为Bacillus methylotrophicus;抗菌蛋白对番茄早疫病病菌、梨黑斑病病菌和番茄灰霉病病菌具有较好抑菌效果,抑菌率分别为88.3%、90.5%和95.4%;最佳硫酸铵沉淀饱和度为80%;在温度小于80℃、pH5-10和紫外照射12h后仍有较好抑菌活性。该抗菌蛋白在生物农药开发中具有一定的应用潜力。 展开更多
关键词 甲基营养型芽孢杆菌 抗菌蛋白 抗真菌特性 16S RRNA
小红豆抗菌蛋白的分离纯化及其功能活性 预览 被引量:1
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作者 赵立娜 何庆燕 汪少芸 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2017年第24期95-99,共5页
研究旨在从小红豆中分离纯化得到一种具有抗菌活性的蛋白,对其部分生物活性进行表征和研究。通过缓冲液抽提(NaAc-HAc,20 mmol/L,pH5.4)、硫酸铵分级沉降、Affi-gel blue gel亲和色谱、Sephadex SP C-25离子交换色谱及Sephadex G-50... 研究旨在从小红豆中分离纯化得到一种具有抗菌活性的蛋白,对其部分生物活性进行表征和研究。通过缓冲液抽提(NaAc-HAc,20 mmol/L,pH5.4)、硫酸铵分级沉降、Affi-gel blue gel亲和色谱、Sephadex SP C-25离子交换色谱及Sephadex G-50凝胶过滤色谱进行分离纯化,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析鉴定其相对分子质量,并对其抗真菌活性进行表征。结果表明,从小红豆中分离纯化出的一种抗菌蛋白,经SDS-PAGE鉴定达到电泳纯,且其相对分子质量约为4 kDa,通过纯化的抗菌蛋白对来自茄子、甜瓜及苦瓜的尖孢镰刀菌的抑制实验,证明此抗菌蛋白具有较强的抗真菌活性。从小红豆中分离纯化出的一种分子质量约为4 kDa的抗菌蛋白,其对真菌具有抑制作用,且其抑制率对浓度的依赖性较高。 展开更多
关键词 小红豆 抗菌蛋白 分离纯化 抗真菌活性
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生防菌成团泛菌XM2抗菌蛋白抗真菌特性研究 预览
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作者 张晓宇 高振峰 +3 位作者 张宝俊 王亮 赵迎丽 张立新 《河南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期693-698,共6页
以成团泛菌XM2为研究对象,采用硫酸铵分级沉淀和生长速率法对其次级代谢产物中抗菌蛋白的最佳硫酸铵沉淀质量浓度和抗真菌特性进行了研究。结果表明,该抗菌蛋白最佳硫酸铵沉淀质量浓度为209.4 g·L-1;具有较好的抑菌广谱性,对梨黑... 以成团泛菌XM2为研究对象,采用硫酸铵分级沉淀和生长速率法对其次级代谢产物中抗菌蛋白的最佳硫酸铵沉淀质量浓度和抗真菌特性进行了研究。结果表明,该抗菌蛋白最佳硫酸铵沉淀质量浓度为209.4 g·L-1;具有较好的抑菌广谱性,对梨黑斑病菌、辣椒疫病菌、西瓜枯萎病病菌以及辣椒枯萎病菌具有90%以上的抑菌活性;在温度低于80℃、pH值为4~9.5、紫外照射24 h以及蛋白酶K和胰蛋白酶处理后均可保持85%以上的抑菌活性。 展开更多
关键词 成团泛菌XM2 抗菌蛋白 抗真菌特性
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棉花黄萎病拮抗细菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的理化性质和抑菌机理 预览 被引量:1
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作者 王奕丁 姜婷婷 王全 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期560-569,共10页
【目的】旨在研究棉花黄萎病拮抗细菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的抑菌谱、理化性质以及抑菌机理,为棉花黄萎病生物农药的研制与开发奠定理论基础。【方法】采用抑菌圈法测定该抗菌蛋白的抑菌谱,以及温度、pH、无机... 【目的】旨在研究棉花黄萎病拮抗细菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的抑菌谱、理化性质以及抑菌机理,为棉花黄萎病生物农药的研制与开发奠定理论基础。【方法】采用抑菌圈法测定该抗菌蛋白的抑菌谱,以及温度、pH、无机离子、有机溶剂、蛋白酶对其稳定性的影响,并通过无菌小瓶等方法研究抗菌蛋白对大丽轮枝菌菌丝和孢子的抑制作用,测定了抗菌蛋白的纤维素酶和几丁质酶活力。【结果】棉花黄萎病拮抗细菌B.subtilis ZL2-70抗菌蛋白抑菌谱广,对19种植物病原菌表现出抑菌活性;该蛋白理化性质相对稳定,耐高温,在pH 5.0~10.0范围内抑菌活性较稳定,经EDTA处理后活性变化不大,对Fe3+敏感,对蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶不敏感;该抗菌蛋白对大丽轮枝菌的菌丝生长和孢子萌发有双重抑制作用,能使病原菌菌丝胞壁消融、原生质凝集渗漏、菌丝细胞泡囊化,并可抑制病菌孢子的萌发;抗菌蛋白具有纤维素酶和几丁质酶活性,且酶活力与抑菌活性有关。【结论】初步推断该抗菌蛋白通过多糖酶活力破坏大丽轮枝菌的细胞壁和抑制病原菌的孢子萌发而起到抑菌作用。 展开更多
关键词 棉花黄萎病 大丽轮枝菌 拮抗细菌 B.subtilis ZL2-70 抗菌蛋白 理化性质 抑菌机理
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花椒内生细菌Y-6抗菌蛋白抑菌活性及稳定性研究 预览 被引量:2
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作者 杜宾 李娜 李燕 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第6期67-73,共7页
为明确花椒内生细菌Y-6抗菌物质种类与特性,丰富生物农药开发源,采用生长速率法、硫酸铵沉淀及聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对其抗菌物质种类、抑菌活性、最佳硫酸铵沉淀饱和度及稳定性进行研究。结果表明,菌株Y-6代谢物对番茄早疫病菌、... 为明确花椒内生细菌Y-6抗菌物质种类与特性,丰富生物农药开发源,采用生长速率法、硫酸铵沉淀及聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法对其抗菌物质种类、抑菌活性、最佳硫酸铵沉淀饱和度及稳定性进行研究。结果表明,菌株Y-6代谢物对番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌和梨黑斑病菌具有较好的抑菌效果,抑菌率分别为90.4%、95.2%和90.1%。抗菌物质为蛋白质,在70%硫酸铵饱和度下可完全沉淀,其对番茄早疫病菌和番茄灰霉病菌的抑菌圈直径分别为24 mm和26 mm。抗菌物质在p H值4~11、温度低于80℃和紫外照射12 h后仍表现出较好的抑菌活性。综上说明,花椒内生细菌Y-6抗菌蛋白具有一定的生物农药开发应用潜力。 展开更多
关键词 花椒 内生细菌 抗菌蛋白 抑菌活性 稳定性 生物农药
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淀粉芽孢杆菌HAB-7对18株植物病原真菌的抑制作用 预览 被引量:3
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作者 刘文波 秦春秀 +4 位作者 熊燕红 孙亮 林春花 缪卫国 郑服丛 《热带农业科学》 2017年第2期52-57,66共7页
HAB-7是一株分离自豇豆根际土壤、具有较强抑菌作用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。研究HAB-7对18株植物病原真菌及其发酵液粗提蛋白对植物病原的抑制作用,并测定其对番茄种子的促生作用。采用平板对峙法测定其对18... HAB-7是一株分离自豇豆根际土壤、具有较强抑菌作用的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。研究HAB-7对18株植物病原真菌及其发酵液粗提蛋白对植物病原的抑制作用,并测定其对番茄种子的促生作用。采用平板对峙法测定其对18株植物病原真菌的抑制活性,以橡胶树炭疽菌为指示菌,对其发酵上清液经60%、80%硫酸铵盐析获得的抗菌粗蛋白进行测试;并将HAB-7菌液稀释成6个浓度梯度,分别用来对番茄种子进行促生测试。结果显示:HAB-7对18株植物病原真菌的平均抑菌率为61.03%;其发酵上清液对橡胶树炭疽病菌的抑制率为56.80%,80%硫酸铵粗提蛋白对橡胶树炭疽病菌的抑制率为38.88%;10-4CFU/m L的HAB-7菌液浓度促进了番茄种子胚根的伸长,长度比CK提高67.76%。HAB-7菌株对植物病原菌有较广谱的抑菌活性,其分泌的活性物质除了活性蛋白外,可能还有其他的活性物质,低浓度的HAB-7菌液能促进植物根系生长。本研究结果为后续研究其致病机理起到重要的作用。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 抑菌活性 抑真菌蛋白 促生作用
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枯草芽孢杆菌HAS中几丁质酶基因的克隆分析 预览
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作者 熊国如 赵更峰 +3 位作者 张树珍 蔡文伟 伍苏然 杨本鹏 《贵州农业科学》 CAS 2017年第2期1-4,共4页
为揭示枯草芽孢杆菌菌株HAS对甘蔗黑穗病菌抑制作用的机理,选取对多种病原真菌有抑制作用的几丁质酶进行克隆与分析。结果表明:菌株HAS基因组中含有1个ORF全长834bp的几丁质酶编码序列,其具有编码278个氨基酸的几丁质酶蛋白,该序列... 为揭示枯草芽孢杆菌菌株HAS对甘蔗黑穗病菌抑制作用的机理,选取对多种病原真菌有抑制作用的几丁质酶进行克隆与分析。结果表明:菌株HAS基因组中含有1个ORF全长834bp的几丁质酶编码序列,其具有编码278个氨基酸的几丁质酶蛋白,该序列同GenBank上登录的几丁质酶蛋白(Bacillus subtilis sub sp.subtilis str.168)(ref|NP_390566.1)的同源性最高,达98%。推测该几丁质酶在菌株HAS抑制甘蔗黑穗病菌过程中可能起关键作用。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌HAS 黑穗病菌 抗菌蛋白 几丁质酶基因
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弗氏链霉菌YH-1菌株抗菌蛋白特性及其对玉米茎腐病菌的抗菌作用 预览 被引量:1
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作者 王艳红 韩毅强 +2 位作者 郑小亮 刘铜 余丽芸 《黑龙江大学自然科学学报》 北大核心 2017年第2期218-223,共6页
以玉米茎腐病病原菌禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)为靶标菌,用硫酸铵分级沉淀菌株YH-1发酵液获得抗菌粗蛋白,采用混菌法研究抗菌蛋白对热、酸碱、蛋白酶及金属离子的稳定性,并进行了抗菌作用初步研究。结果表明,抗菌蛋白具有很好... 以玉米茎腐病病原菌禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)为靶标菌,用硫酸铵分级沉淀菌株YH-1发酵液获得抗菌粗蛋白,采用混菌法研究抗菌蛋白对热、酸碱、蛋白酶及金属离子的稳定性,并进行了抗菌作用初步研究。结果表明,抗菌蛋白具有很好的耐热、耐酸碱和耐蛋白酶的特性,金属离子Mn2+对抗菌蛋白活性有一定的激活作用,Cu2+完全抑制活性,其他的一价及二价金属离子均有部分抑制作用,抗菌蛋白对禾谷镰刀菌菌丝生长有很强的抑制作用,并使菌丝畸形、局部产生膨大及分支增多、抑制孢子萌发。本研究为玉米茎腐病菌防治方法及途径提供理论基础。 展开更多
关键词 弗氏链霉菌 抗菌蛋白 玉米茎腐病
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解淀粉芽孢杆菌HRH317抗菌蛋白发酵条件优化及其稳定性研究 被引量:2
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作者 秦楠 缪文玉 +1 位作者 李鑫 郝林 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2017年第13期130-135,146共7页
本文以抑菌圈直径为指标,采用单因素实验和响应面法对解淀粉芽孢杆菌HRH317菌株产抗菌蛋白的发酵条件进行优化。得到最佳发酵条件为:初始pH为7.0的NB培养液,接种量4%,37℃下振荡培养24h,转速为200r/min。在此条件下抗菌蛋白的... 本文以抑菌圈直径为指标,采用单因素实验和响应面法对解淀粉芽孢杆菌HRH317菌株产抗菌蛋白的发酵条件进行优化。得到最佳发酵条件为:初始pH为7.0的NB培养液,接种量4%,37℃下振荡培养24h,转速为200r/min。在此条件下抗菌蛋白的抑菌圈直径达21.85mm,结果表明该抗菌蛋白具有良好的抑菌效果。稳定性研究结果表明:蛋白在40-80℃、pH2-11稳定,对蛋白酶K有一定耐受性。 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌 抗菌蛋白 响应面法 稳定性
枯草芽孢杆菌B25抗真菌作用及抗菌蛋白的分离纯化 被引量:6
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作者 于杰 张荣意 +1 位作者 谭志琼 林宝英 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期629-634,共6页
枯草芽孢杆菌B25是对香蕉枯萎病镰刀菌有较好拮抗作用的一株生防菌。采用70%饱和(NH_4)_2SO_4沉淀法获得的B25的发酵液粗提物作用于病原菌,能使菌丝或孢子肿大、扭曲或畸形。粗提物质通过DEAE-Sepharose fast flow离子交换层析与Sepha... 枯草芽孢杆菌B25是对香蕉枯萎病镰刀菌有较好拮抗作用的一株生防菌。采用70%饱和(NH_4)_2SO_4沉淀法获得的B25的发酵液粗提物作用于病原菌,能使菌丝或孢子肿大、扭曲或畸形。粗提物质通过DEAE-Sepharose fast flow离子交换层析与Sephadex G-100凝胶层析进行分离纯化,经SDS-PAGE电泳检测得到了单一的条带,再通过Nano LC-ESI-MS/MS质谱分析,获得了17个肽段的氨基酸序列。NCBI数据库检索,与之序列相似性最高的仅为37%,可能是一种新的抗真菌蛋白。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌B25 抗真菌物质 作用 分离
转天麻抗真菌蛋白基因提高棉花对黄萎病抗性 预览 被引量:2
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作者 肖松华 赵君 +5 位作者 刘剑光 吴巧娟 王义琴 储成才 俞敬忠 喻德跃 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期212-221,共10页
黄萎病是全球植棉业的主要病害,严重缺乏抗黄萎病资源导致棉花抗黄萎病育种至今未取得显著进展。采用农杆菌介导法,以下胚轴为受体,将天麻抗真菌蛋白基因转化陆地棉品系苏研060,通过愈伤组织诱导、胚性愈伤组织分化和植株再生,获得大量... 黄萎病是全球植棉业的主要病害,严重缺乏抗黄萎病资源导致棉花抗黄萎病育种至今未取得显著进展。采用农杆菌介导法,以下胚轴为受体,将天麻抗真菌蛋白基因转化陆地棉品系苏研060,通过愈伤组织诱导、胚性愈伤组织分化和植株再生,获得大量再生苗。分别以NPT II基因、gafp基因、35S启动子-gafp基因特异引物对再生苗进行PCR检测,将95个阳性再生苗嫁接到海7124幼苗砧木上,获得37个成活植株。RT-PCR检测发现,31个植株出现预期的540 bp扩增片段。盆栽花铃期花粉育性鉴定表明,9个转基因植株雄性败育,22个植株花粉育性正常,通过人工自交得到T1代种子。通过转基因作物隔离区种植、特异引物PCR检测、卡那霉素抗性筛选、自交纯合与选择,培育获得22个T3代转基因纯系。Southern blotting检测发现,转基因植株体内有2个gafp基因拷贝。GAFP蛋白免疫印迹表明,16个转基因纯系出现分子量为14 k D的GAFP蛋白,另6个纯系表现出转录后水平上的基因沉默。黄萎病抗性鉴定结果证实,获得3个抗落叶型黄萎病的棉花株系TG09、TG16和TG23。 展开更多
关键词 棉花 天麻 抗真菌蛋白 基因 黄萎病 抗性
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响应面法优化棉花黄萎病拮抗菌Bacillus axarquiensis TUBP_1产抗菌蛋白发酵条件研究 预览 被引量:1
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作者 马江锋 曾红 《塔里木大学学报》 2016年第1期5-13,共9页
本实验拟采用Plackett Burman(PB)试验设计筛选出影响Bacillus axarquiensis TUBP1产抗菌蛋白关键因素,并采用响应面设计中Box-Behnken(BB)实验设计对其产抗菌蛋白最佳配比进行优化。本文使用Plackett Burman设计对影响B.axarquiens... 本实验拟采用Plackett Burman(PB)试验设计筛选出影响Bacillus axarquiensis TUBP1产抗菌蛋白关键因素,并采用响应面设计中Box-Behnken(BB)实验设计对其产抗菌蛋白最佳配比进行优化。本文使用Plackett Burman设计对影响B.axarquiensis TUBP1产抗菌蛋白的8个因素进行筛选,得到影响抗菌蛋白产量显著的因素为葡萄糖、蛋白胨和发酵pH。在此基础上进一步采用Box-Behnken设计对这3个显著因素的最佳配比进行优化,得到葡萄糖、蛋白胨、pH最佳配比为葡萄糖2.53%、蛋白胨1.76%和p H7.17,与优化前相比蛋白产量提高了34.55%。 展开更多
关键词 B.axarquiensis TUBP1 响应面法 抗菌蛋白 发酵条件
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