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采用肝癌球体细胞筛选鉴定识别肝癌干细胞的单抗 预览
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作者 孙力超 杨婧 +3 位作者 孙立新 张媛 杨治华 冉宇靓 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2019年第3期193-199,共7页
目的采用肝癌球体细胞筛选鉴定识别肝癌干细胞的单抗,为靶向肿瘤干细胞治疗肝癌提供候选治疗单抗。方法采用无血清悬浮培养的方法富集培养肝癌干细胞。通过细胞免疫荧光、顺铂耐药实验、Real-timePCR、裸鼠皮下成瘤实验等方法筛选、鉴... 目的采用肝癌球体细胞筛选鉴定识别肝癌干细胞的单抗,为靶向肿瘤干细胞治疗肝癌提供候选治疗单抗。方法采用无血清悬浮培养的方法富集培养肝癌干细胞。通过细胞免疫荧光、顺铂耐药实验、Real-timePCR、裸鼠皮下成瘤实验等方法筛选、鉴定抗肝癌干细胞单抗。采用免疫组织化学的方法鉴定单抗识别的抗原在肝癌组织中的表达情况。质谱鉴定抗原。结果MHCC97L细胞能在无血清悬浮培养条件下形成细胞球,并能被PKH26染料标记。流式细胞检测发现MHCC97L球体细胞中CD90表达比例较亲本细胞提高了3.4倍。无血清成球抑制实验获得6株显著抑制MHCC97L细胞在无血清成球的单抗,抑制率分别为54.67%,50.33%,45.73%,42.26%,39.11%,37.63%。细胞免疫荧光结果显示单抗28C10和CD90在MHCC97L细胞中能共定位。Real-TimePCR检测结果显示MHCC97L28C10^+细胞Sox-2和Oct-4表达显著高于MHCC97L28C10-细胞。流式细胞检测,在MHCC97L及其sphere细胞中28C10^+细胞比例分别为7.98%和10.7%,28C10^+细胞比例提高了1.34倍。流式细胞术分选获得的28C10^+细胞的体外成球能力、侵袭能力显著高于28C10-细胞。CCK-8法检测结果显示28C10^+细胞较28C10-细胞显示出对化疗药物顺铂的耐药,IC50分别为1.96μg/mL和1.16μg/mL。裸鼠致瘤实验结果显示,28C10^+细胞裸鼠皮下接种2×10^4cells/只,2个月可形成肿瘤,成瘤率为40%。另外1只未形成肿瘤的裸鼠形成了肺部转移灶(1/5)。免疫组化检测显示单抗28C10的靶抗原阳性率为72.0%(77/107),而在癌旁组织中低表达,差异有统计学意义。质谱结果显示28C10识别的抗原为HSP90α。结论采用MHCC97L球体细胞模型成功鉴定一株特异识别肝癌干细胞的单抗,为靶向肝癌干细胞的抗体治疗奠定基础。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤干细胞 单克隆抗体 CD90 HSP90Α
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阳和汤对乳腺癌干细胞CD90、IL-8mRNA表达水平的影响
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作者 沈伟 李康乐 +4 位作者 尚荣国 杨小娟 叶凯 钱建升 窦建卫 《四川中医》 2019年第3期44-46,共3页
目的:探讨阳和汤含药血清对乳腺癌干细胞HMLER90hi增殖的影响及其作用机制。方法:将20只雌性SD大鼠随机分为阳和汤低、中、高剂量组和空白对照组,按低、中、高剂量分别灌胃阳和汤,空白对照组给予生理盐水,连续给药3天,制备阳和汤含药血... 目的:探讨阳和汤含药血清对乳腺癌干细胞HMLER90hi增殖的影响及其作用机制。方法:将20只雌性SD大鼠随机分为阳和汤低、中、高剂量组和空白对照组,按低、中、高剂量分别灌胃阳和汤,空白对照组给予生理盐水,连续给药3天,制备阳和汤含药血清和空白血清。MTT法检测各组在含药血清干预24小时、48小时、72小时后对HMLER90hi细胞增殖的影响;qRT-PCR检测各组细胞CD90、IL-8mRNA表达情况。结果:阳和汤含药血清干预24小时、48小时、72小时后,与空白对照组相比,阳和汤各剂量含药血清组细胞增殖的抑制率均增高,且对细胞增殖的抑制作用呈时间与剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。阳和汤各剂量含药血清组CD90、IL-8mRNA表达量均降低,且呈时间与剂量依赖性,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:阳和汤可抑制乳腺癌干细胞HMLER90hi的增殖,其作用机制可能与其抑制单核巨噬细胞近分泌通路的传导有关。 展开更多
关键词 阳和汤 乳腺癌干细胞 近分泌通路 CD90 IL-8
两种培养法对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的影响
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作者 曹恒 李谨 +2 位作者 冯宁宁 张越山 王顺祥 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期2246-2249,共4页
目的观察对比贴壁培养法与悬浮培养法培养后的人肝癌细胞株SMMC-7721细胞相关特性的变化。方法(1)收集采用普通培养基贴壁培养与无血清培养基悬浮培养的人肝癌细胞株SMMC-7721细胞。(2)观察两种方法培养后肿瘤细胞的形态学特征。(3)流... 目的观察对比贴壁培养法与悬浮培养法培养后的人肝癌细胞株SMMC-7721细胞相关特性的变化。方法(1)收集采用普通培养基贴壁培养与无血清培养基悬浮培养的人肝癌细胞株SMMC-7721细胞。(2)观察两种方法培养后肿瘤细胞的形态学特征。(3)流式细胞仪检测两种方法培养后的肿瘤细胞中肿瘤干细胞表面标志CD90、CD133、CD24的各自表达量。(4)采用实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)检测两种方法培养后的肿瘤细胞中肿瘤干细胞表面标志CD90、CD133、CD24对应的mRNA相对表达量。(5)将两种方法培养后的肿瘤细胞各自注射到不同的裸鼠皮下,观察并记录种植瘤的体积变化,依此比较两种方法培养后肿瘤细胞的成瘤能力及增殖能力。结果倒置显微镜下观察到贴壁培养的SMMC-7721肿瘤细胞呈铺路石样生长,排列规整。而悬浮培养后肿瘤细胞逐渐由单细胞聚集、增殖成球状或类球状。流式细胞检测悬浮培养组中CD90、CD24的表达量(571.77±8.70、233.56±10.85)明显高于贴壁培养组(19.15±0.54、17.37±0.15)(CD90:P=0.000;CD24:P=0.000),但CD133在悬浮培养组与贴壁培养组中的表达量(1.42±0.61、1.48±1.09)比较差异无统计学意义。Real-timePCR结果同样显示,若贴壁培养组mRNA的表达量设定为1,悬浮培养后细胞肿瘤表面标志物CD90、CD24的mRNA相对表达量(1.72±0.19、1.72±0.19)明显高于贴壁培养组(CD90:P=0.020,CD24:P=0.000),而CD133的mRNA相对表达量两组间比较差异无统计学意义(1.05±0.03,P=0.080)。测量裸鼠皮下种植瘤体积大小变化显示随着时间的延长,悬浮培养组所致的皮下肿瘤体积变化趋势呈从开始注射到注射后6d为减小,6d后大幅增高;贴壁培养组所致的皮下肿瘤体积变化趋势则呈缓慢减小后趋于稳定,提示悬浮培养后的肿瘤细胞成瘤及增殖能力更强。结论对人肝癌细胞株SMMC-7721而言悬浮培养法可获得更多的肝癌干细胞样细� 展开更多
关键词 肝癌干细胞样细胞 悬浮培养 SMMC-7721 CD90 CD133 CD24
结肠癌微环境对HMSC-bm形态、增殖、周期及CD34、CD90的影响 被引量:1
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作者 赵慧巧 卢年华 +4 位作者 张旭东 柳娜 刘雪枫 陈正君 景明 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第5期745-751,共7页
该文旨在探究不同条件结肠癌微环境对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells-bone marrow,HMSC-bm)的影响。实验将不同配比的HMSC-bm和SW480细胞经Transwell非接触共培养3天、5天和7天后,通过检测HMSC-bm的显微形态、增殖... 该文旨在探究不同条件结肠癌微环境对人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells-bone marrow,HMSC-bm)的影响。实验将不同配比的HMSC-bm和SW480细胞经Transwell非接触共培养3天、5天和7天后,通过检测HMSC-bm的显微形态、增殖能力、细胞周期以及细胞表面标志分子CD34、CD90的变化,研究结肠癌微环境对HMSC-bm的影响,同时设立HMSC-bm单独培养组和SW480单独培养组作为对照组。研究发现,随着结肠癌细胞比例增加,共培养时间延长,HMSC-bm细胞的显微形态发生显著改变,HMSC-bm细胞增殖速度加快,且CD34阳性表达率逐渐增多;CD90阳性表达率逐渐减少。这说明,结肠癌微环境可能诱导HMSC-bm细胞发生恶性转化,且该恶性转化与细胞比例和诱导时间有关。 展开更多
关键词 结肠癌微环境 骨髓间充质干细胞 细胞周期 CD34 CD90
干细胞标志物CD44及CD90在卵巢癌组织中的表达及临床意义 预览
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作者 马琳 刘杏巧 +2 位作者 张志革 高敏 郑炜 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第4期415-418,共4页
目的研究干细胞标志物CD44及CD90在卵巢癌组织中的表达及意义。方法该院接受手术治疗的卵巢癌患者45例纳入研究组,取同期行子宫肌瘤切除手术的患者45例纳入对照组。采用免疫组化法分别检测两组患者卵巢组织中干细胞标志物CD44及CD90的... 目的研究干细胞标志物CD44及CD90在卵巢癌组织中的表达及意义。方法该院接受手术治疗的卵巢癌患者45例纳入研究组,取同期行子宫肌瘤切除手术的患者45例纳入对照组。采用免疫组化法分别检测两组患者卵巢组织中干细胞标志物CD44及CD90的表达情况,并分析CD44及CD90的表达与患者1年生存率的关系。结果研究组的CD44及CD90表达阳性率分别为64.44%、68.89%,均明显高于对照组的0.00%、0.00%。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、组织学分级G2+G3期及有淋巴结转移的卵巢癌组织中CD44表达阳性率分别为86.36%、88.46%、88.24%,明显高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、组织学分级G1期及无淋巴结转移卵巢癌组织的43.48%、31.58%、50.00%。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、组织学分级G2+G3期及有淋巴结转移的卵巢癌组织中CD90表达阳性率分别为90.91%、92.31%、88.24%,明显高于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、组织学分级G1期及无淋巴结转移卵巢癌组织的47.83%、36.84%、57.14%,差异均有统计学意义(P<0.05)。对45例卵巢癌患者进行为期1年的预后随访,其中CD44表达阳性患者的生存率为62.07%,低于CD44表达阴性患者的87.50%,而CD90表达阳性患者的生存率为64.52%,低于CD90表达阴性患者的85.71%,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论干细胞标志物CD44及CD90的表达可能参与了卵巢癌的发生、发展、转移及浸润过程,且两者的表达水平可作为临床上评估预后的生物学指标。 展开更多
关键词 卵巢癌 干细胞标志物 CD44 CD90 表达
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原发性肝癌超声造影参数与血管内皮生长因子、CD90表达的相关性研究 预览
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作者 董子秋 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第10期1480-1484,1521共6页
目的分析原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)超声造影参数与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、CD90表达的相关性.方法回顾性分析60例经病理证实的原发性肝癌患者的超声造影表现,免疫组织化学检测... 目的分析原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)超声造影参数与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、CD90表达的相关性.方法回顾性分析60例经病理证实的原发性肝癌患者的超声造影表现,免疫组织化学检测VEGF、CD90的表达,分析VEGF、CD90阳性与阴性肝癌与始增时间、达峰时间、峰值加速时间、始增速度及增强速率的关系.结果病灶的始增时间、达峰时间、峰值加速时间小于病灶周围背景肝组织,病灶始增速度、增强速率大于病灶周围背景肝组织,差异有统计学意义(P〈0.05).VEGF表达阳性率81.21%(87/107),CD90表达阳性率73.83%(79/107),两者表达呈正相关(r=0.264,P=0.001).VEGF、CD90阳性HCC的始增时间、达峰时间、峰值加速时间小于VEGF、CD90阴性HCC,VEGF、CD90阳性HCC始增速度、增强速率大于VEGF、CD90阴性HCC,差异有统计学意义(P〈0.05).结论CEUS可判定PHC不同血供灌注特征并与VEGF、CD90密切相关,对肝癌诊断与治疗具有重要临床价值. 展开更多
关键词 原发性肝癌 超声造影 血管内皮生长因子 CD90
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肝癌干细胞CD90^+和ESA^+亚群生物学特性研究
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作者 刘辉琦 舒雄 +4 位作者 孙立新 遇珑 孙力超 杨治华 冉宇靓 《大连医科大学学报》 CAS 2018年第5期394-398,407共6页
目的 研究肝癌干细胞不同亚群CD90+和ESA+细胞的生物学特性,为肝癌的治疗及预后判定提供新的思路。方法 采用活细胞流式细胞术检测肝癌细胞系MHCC97L中肝癌干细胞标志物CD90、ESA的表达情况,并分选ESA+,CD90+细胞,通过... 目的 研究肝癌干细胞不同亚群CD90+和ESA+细胞的生物学特性,为肝癌的治疗及预后判定提供新的思路。方法 采用活细胞流式细胞术检测肝癌细胞系MHCC97L中肝癌干细胞标志物CD90、ESA的表达情况,并分选ESA+,CD90+细胞,通过甲基纤维素成球实验、Transwell、CCK8法进行体外生物学特征研究。结果 肝癌细胞系MHCC97L中CD90+和ESA+细胞表达比例分别为2.37%和3.70%。ESA+细胞成球率明显高于ESA-细胞[成球率(35.6±2.1)% vs.(9.6±1.4)%, P〈0.01],CD90+细胞成球率明显高于CD90-细胞[成球率(29.2±1.3)% vs.(7.4±0.6)%](P〈0.01),ESA+细胞成球率明显高于CD90+细胞且ESA+细胞sphere球体积明显大于CD90+细胞体积;ESA+细胞较ESA-细胞侵袭能力提高2.12倍[(282±15.1 vs. 133±12.4),P〈0.01],CD90+细胞较CD90-细胞侵袭能力提高2.04倍[(231±18.1 vs. 113±10.2),P〈0.01]。CD90+细胞耐药性明显强于ESA+细胞[IC50(0.98 μg/mL vs. 0.36 μg/mL)],ESA+细胞增殖能力明显强于CD90+细胞。结论 肝癌组织中存在不同的干细胞亚群ESA+细胞及CD90+细胞,这些亚群具有不同的生物学特性,影响肝癌的耐药、侵袭,了解肝癌中不同干细胞亚群的表达情况可用于指导临床个体化治疗。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤干细胞 CD90 ESA
湿生扁蕾对结肠癌微环境中HMSCs恶性增殖以及CD34、CD90的影响 被引量:1
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作者 赵慧巧 卢年华 +6 位作者 张旭东 柳娜 芦彦兆 陈正君 刘雪枫 张艳霞 景明 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2018年第3期125-128,共4页
目的:探究湿生扁蕾乙酸乙酯部位对结肠癌微环境中人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,HMSCs)恶性增殖及表面标志分子CD34、CD90表达的影响。方法:通过MTT法筛选湿生扁蕾乙酸乙酯部位作用于SW480细胞和HMSCs的最佳给... 目的:探究湿生扁蕾乙酸乙酯部位对结肠癌微环境中人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,HMSCs)恶性增殖及表面标志分子CD34、CD90表达的影响。方法:通过MTT法筛选湿生扁蕾乙酸乙酯部位作用于SW480细胞和HMSCs的最佳给药剂量。建立SW480和HMSCs细胞Transwell非接触共培养模型,将试验分为正常对照组、肿瘤细胞对照组、共培养组和湿生扁蕾给药组,分别采用细胞计数试验、流式细胞术FCM观察各组细胞的增殖、周期及HMSCs表面标志分子CD34和CD90的表达情况。结果:湿生扁蕾乙酸乙酯部位最佳给药剂量为200μg/ml,100μl。与正常对照组相比,共培养组HMSCs增殖能力增强,G1期细胞比例明显降低,S期和G2/M期细胞比例明显升高,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率升高,CD90阳性表达率降低。与共培养组相比,湿生扁蕾给药组HMSCs增殖能力降低,G1期细胞比例明显升高,S期和G2/M期细胞比例明显降低,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率降低,CD90阳性表达率升高。结论:结肠癌微环境中HMSCs增殖能力增强,且HMSCs表面标志分子阳性表达率发生显著改变,提示HMSCs发生恶性增殖,且湿生扁蕾乙酸乙酯部位可抑制结肠癌微环境中HMSCs的恶性转变。 展开更多
关键词 湿生扁蕾 结肠癌微环境 骨髓间充质干细胞 增殖 CD34 CD90
CD90在胃癌干细胞中的表达及其对胃癌干细胞耐药性的影响 预览
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作者 陆俊杰 《中国处方药》 2018年第2期33-34,共2页
目的 探索CD90表面分子与胃癌干细胞的关系.方法 通过胃癌细胞无血清培养, 得到干细胞球, 检测胃癌干细胞相关基因CD44、CD24的表达情况, 明确其干细胞特性.再检测细胞球中CD90表达情况.培养胃癌干细胞球, 选择药物顺铂对其干预, 研究... 目的 探索CD90表面分子与胃癌干细胞的关系.方法 通过胃癌细胞无血清培养, 得到干细胞球, 检测胃癌干细胞相关基因CD44、CD24的表达情况, 明确其干细胞特性.再检测细胞球中CD90表达情况.培养胃癌干细胞球, 选择药物顺铂对其干预, 研究顺铂对胃癌干细胞及普通胃癌细胞的生长抑制作用, 了解其耐药性.结果 胃癌干细胞相关因子CD24、CD44在胃癌干细胞球中的表达明显高于普通胃癌细胞, 同时CD90表面分子在干细胞球中表达较普通胃癌细胞升高.顺铂作用下细胞球细胞的存活率明显高于普通胃癌细胞.结论 成球培养是富集肿瘤干细胞的有效手段, 获得的细胞球高表达干细胞相关基因CD90, 提示CD90的表达可能与胃癌干细胞存在相关性. 展开更多
关键词 胃癌 肿瘤干细胞 CD90
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高转移肺癌细胞株的建立及其肿瘤干细胞生物学特性 预览
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作者 遇珑 舒雄 +3 位作者 刘军 孙力超 杨治华 冉宇靓 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期83-87,共5页
目的研究高转移肺腺癌细胞株的肿瘤干细胞生物学特征。方法肺腺癌细胞系A549接种裸鼠皮下成瘤后,取肺的转移灶,通过机械分离法获取肺转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移的细胞株A549-V13。采用无... 目的研究高转移肺腺癌细胞株的肿瘤干细胞生物学特征。方法肺腺癌细胞系A549接种裸鼠皮下成瘤后,取肺的转移灶,通过机械分离法获取肺转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移的细胞株A549-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定A549-V13存在肿瘤干细胞。流式细胞术(FACS)检测和分选A549和A549-V13中肿瘤干细胞标志物CD133的表达并进行体内外生物学特征实验。结果建立稳定高转移A549-V13细胞株。无血清悬浮培养A549-V13,7天后形成的球形细胞团中存在单个PKH26阳性细胞。FACS检测显示,与A549中CD133~+细胞相比,高转移A549-V13细胞株中CD133~+细胞的表达比例显著提高4.85倍。A549-V13中CD133~+细胞具有更强的自我更新能力,侵袭能力提高1.42倍,耐药能力也显著增强,其IC50提高1.26倍,A549-V13的CD133~+细胞在裸鼠皮下接种2×10~2个细胞3月致瘤4/6,而接种2×10~2个A549的CD133~+细胞3月才致瘤2/6。结论建立高转移肺癌细胞株A549-V13,伴随CD133~+细胞表达比例的增加,其体内外生物学功能显著增强。 展开更多
关键词 人肺癌细胞 肿瘤干细胞 靶向治疗 CD133 CD90
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CD90和CD44分子在人肝癌组织中的表达 被引量:2
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作者 周四莲 匡志鹏 《中国癌症防治杂志》 CAS 2017年第3期185-189,共5页
目的 探讨肝癌干细胞标志物CD90和CD44分子在人肝癌组织中的表达。方法 采用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测40例人肝癌组织及其40例相应远端癌旁组织中CD90和CD44基因m RNA和蛋白的表达。结果 CD90和CD44基因m RNA在肝癌组织中的表达... 目的 探讨肝癌干细胞标志物CD90和CD44分子在人肝癌组织中的表达。方法 采用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测40例人肝癌组织及其40例相应远端癌旁组织中CD90和CD44基因m RNA和蛋白的表达。结果 CD90和CD44基因m RNA在肝癌组织中的表达高于远端癌旁组织,差异有统计学意义(P〈0.05);CD90和CD44阳性分子定位于癌细胞膜与细胞浆,CD90和CD44细胞在肝癌组织中的阳性表达率分别为82.5%(33/40)和77.5%(31/40),在远端癌旁组织中分别为17.5%(7/40)和12.5%(5/40),两者差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 CD90和CD44分子在人肝癌组织中高表达,但低表达于相应远端癌旁组织,CD90和CD44分子可能与肝癌的发生有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 干细胞标志物 CD90 CD44
CD44,CD90的表达与肝癌肝移植术后复发转移的关系 预览
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作者 杨杰 曹毅 +3 位作者 江艺 潘凡 杨和君 吕立志 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第19期3089-3094,共6页
目的:探讨CD44,CD90的表达与肝细胞肝癌肝移植患者预后的关系。方法:收集福州总医院2002至2012年行经典原位肝移植治疗的105例原发性肝细胞癌患者的石蜡包埋标本。应用免疫组化染色法检测肿瘤组织中CD90,CD44的表达,并对临床病理特征... 目的:探讨CD44,CD90的表达与肝细胞肝癌肝移植患者预后的关系。方法:收集福州总医院2002至2012年行经典原位肝移植治疗的105例原发性肝细胞癌患者的石蜡包埋标本。应用免疫组化染色法检测肿瘤组织中CD90,CD44的表达,并对临床病理特征及术后随访资料进行统计学分析。结果:CD44和CD90的表达相关关系经Spearman相关分析,两者呈正相关(r=0.5,P〈0.001)。COX多因素分析显示,患者5年无复发生存率与CD90高表达(HR=2.765,P=0.002)显著相关。Kaplan-Meier分析显示CD90高表达的患者与CD90低表达患者的肝切除术后5年无复发生存率、术后5年总生存率均有显著差异(40.4%vs57.6%)(P〈0.05)、(12.7%vs61.1%)(P〈0.001)。COX多因素分析显示,患者5年总生存率与肿瘤大小(HR=1.743;P=0.037)、AFP(HR=2.291;P=0.004)、肿瘤分化(HR=0.283;P〈0.001)、CD44(HR=1.977;P=0.029)、CD90(HR=1.883;P=0.041)表达显著相关。Kaplan-Meier分析显示CD44高表达的患者与CD44低表达患者的肝切除术后5年总生存率有显著差异(16.6%vs62.7%)(P〈0.001),CD44和CD90共同高表达的患者比CD44或CD90低表达患者的术后5年总生存率显著低(10.7%vs54.5%)(P〈0.001)。结论:CD90与CD44的高表达相关,CD90与肝癌肝移植术后复发转移有关,二者均影响肝癌肝移植患者预后。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 肝移植术 CD44 CD90 无复发生存 预后
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人尿源性干细胞的原代培养 预览 被引量:1
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作者 周明 孙震晓 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2017年第5期390-393,共4页
目的:建立一种人尿源性干细胞(hUSCs)的原代分离培养及保存方法,为hUSCs的应用奠定基础。方法:取10例成人健康志愿者的尿液分别进行hUSCs原代培养台盼蓝染色法比较不同冻存液配方复苏后的细胞存活率,进而确定hUSCs的最佳冻存液配方... 目的:建立一种人尿源性干细胞(hUSCs)的原代分离培养及保存方法,为hUSCs的应用奠定基础。方法:取10例成人健康志愿者的尿液分别进行hUSCs原代培养台盼蓝染色法比较不同冻存液配方复苏后的细胞存活率,进而确定hUSCs的最佳冻存液配方;采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测hUSCs细胞的增殖活性;流式细胞术测定间充质干细胞表面抗原CD44和CD90的表达情况。结果:10例健康成人志愿者中6例成功提取了hUSCs并体外培养形成集落;台盼蓝染色法确定配比为DMSO∶FBS∶hUSCs培养基=1∶4∶5的冻存液细胞存活率最高,与其他组比较差异具有统计学意义(P<0.05);MTT法检测显示hUSCs生长曲线呈S形且具有良好的增殖活性;流式细胞术鉴定干细胞表面抗原CD44和CD90呈阳性表达。结论:成功建立了一种人尿源性干细胞的原代分离培养及保存方法。 展开更多
关键词 人尿源性干细胞 原代培养 CD44 CD90
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良性胆管瘢痕中CD90、α-SMA的表达 预览
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作者 黄松泉 朱红 +4 位作者 张小文 吴涛 王琨 王连敏 赵松凌 《昆明医科大学学报》 CAS 2017年第4期40-44,共5页
目的研究良性胆管瘢痕CD90、α-SMA的表达.方法免疫组化SP法检测14例良性胆管瘢痕组织和10例正常胆管组织中CD90、α-SMA、I型和III型胶原的表达,并进行图像分析.取由良性胆管瘢痕组织培养成纤维细胞,细胞免疫荧光、流式细胞仪检测... 目的研究良性胆管瘢痕CD90、α-SMA的表达.方法免疫组化SP法检测14例良性胆管瘢痕组织和10例正常胆管组织中CD90、α-SMA、I型和III型胶原的表达,并进行图像分析.取由良性胆管瘢痕组织培养成纤维细胞,细胞免疫荧光、流式细胞仪检测检测CD90的表达.结果CD90、α-SMA在良性胆管瘢痕组织中表达高于正常组(P<0.05)且两者表达正相关(r=0.681,P=0.000);I型和III型胶原在良性胆管瘢痕组织中表达高于正常组(P<0.05)且两者表达负相关(r=-0.413,P=0.011).取由良性胆管瘢痕组织培养成纤维细胞,细胞免疫荧光、流式细胞仪检测CD90高表达.在良性胆管瘢痕组织中,CD90、α-SMA、I型胶原、III型胶原表达较正常组为高;CD90与α-SMA表达正相关;I型胶原与III型胶原表达负相关.结论良性胆管瘢痕成纤维细胞CD90高表达;CD90可能是良性胆管瘢痕异常增生的特异表型之一. 展开更多
关键词 CD90 Α-SMA I型胶原 III型胶原 良性胆管瘢痕
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乳腺浸润性导管癌不同分子分型中CD90的表达及其意义 预览 被引量:1
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作者 杨海玉 刘勇 +3 位作者 戴艳枝 吴晓霞 黄桃 袁晟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期245-249,共5页
目的 探讨CD90在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理特征、分子分型的相关性。方法 构建80例乳腺浸润性导管癌和20例乳腺良性病变的组织芯片,采用免疫组化MaxVision法检测乳腺不同病变组织中CD90、ER、PR、Ki-67和HER-2的表达水平... 目的 探讨CD90在乳腺浸润性导管癌中的表达及其与临床病理特征、分子分型的相关性。方法 构建80例乳腺浸润性导管癌和20例乳腺良性病变的组织芯片,采用免疫组化MaxVision法检测乳腺不同病变组织中CD90、ER、PR、Ki-67和HER-2的表达水平,并进一步分析其相关性。结果 CD90在乳腺浸润性导管癌和乳腺良性病变中的阳性率分别为62.5%和20.0%,两者差异有统计学意义(P〈0.001);CD90表达与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移相关(P〈0.05),与患者年龄、肿瘤大小、TNM分期及组织学分级无关(P〉0.05);在乳腺浸润性导管癌不同分子亚型中,CD90阳性率以LuminalA型最低(40.0%)、三阴型最高(82.4%),各亚型之间差异有统计学意义(P〈0.05);CD90与ER(r=-0.342,P〈0.05)、PR(r=-0.374,P〈0.05)表达呈负相关,与Ki-67表达之间无相关性(r=0.084,P〉0.05)。结论 CD90表达与乳腺癌分子分型有关,其高表达提示患者预后不良。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 CD90 分子分型 转移 免疫组织化学
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透明质酸锌凝胶联合复方倍他米松注射液对增生性瘢痕患者预后、CD90及TGF-β_1阳性表达率的影响 预览
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作者 汪阳 张颖 田婧 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2017年第10期213-216,共4页
目的分析透明质酸锌凝胶联合复方倍他米松注射液对增生性瘢痕患者预后、CD90及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)阳性表达率的影响。方法选取西安市中心医院2016年3月至2016年12月收治的79例增生性瘢痕患者... 目的分析透明质酸锌凝胶联合复方倍他米松注射液对增生性瘢痕患者预后、CD90及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)阳性表达率的影响。方法选取西安市中心医院2016年3月至2016年12月收治的79例增生性瘢痕患者为研究对象。按照随机双盲的原则将入选患者分为试验组(39例)和对照组(40例)。对照组患者采用复方倍他米松注射液治疗,试验组患者在对照组治疗基础上加用透明质酸锌凝胶治疗。比较两组患者治疗前后CD90和TGF-β1阳性表达率及预后的差异。结果治疗前两组患者CD90和TGF-β1阳性表达率均无显著差异(P〉0.05);治疗后,两组患者CD90和TGF-β1阳性表达率均显著降低,且试验组患者CD90和TGF-β1阳性表达率均显著低于对照组(P〈0.05)。试验组患者治疗有效率显著高于对照组(P〈0.05)。结论透明质酸锌凝胶联合复方倍他米松注射液可以显著降低增生性瘢痕患者CD90和TGF-β1的阳性表达率,提高治疗效果,改善患者预后,值得临床推广。 展开更多
关键词 透明质酸锌凝胶 倍他米松 增生性瘢痕 预后 CD90 转化生长因子-β1
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抗CD90单克隆抗体在治疗黑色素细胞瘤中的基础研究
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作者 焦运燊 沈光前 +6 位作者 初明 张苗苗 王颖 丁羚昱 李欢欢 蔡如意 王月丹 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第28期5401-5405,5440共6页
目的:探讨应用抗CD90单克隆抗体治疗黑色素细胞瘤的可行性及相关机制。方法:首先通过流式细胞检测技术,探究抗CD90单克隆抗体是否能在体外诱导B16细胞凋亡。之后,通过向C57BL/6J小鼠皮下注射B16细胞建立小鼠黑色素瘤模型,并给予抗... 目的:探讨应用抗CD90单克隆抗体治疗黑色素细胞瘤的可行性及相关机制。方法:首先通过流式细胞检测技术,探究抗CD90单克隆抗体是否能在体外诱导B16细胞凋亡。之后,通过向C57BL/6J小鼠皮下注射B16细胞建立小鼠黑色素瘤模型,并给予抗CD90单克隆抗体治疗,评价其抗肿瘤的治疗效果。同时,应用免疫组织化学的方法观察小鼠成瘤组织中新生血管的形成和分布情况,统计肿瘤中微血管密度进行比较。结果:抗CD90单克隆抗体在体外不能直接诱导B16细胞凋亡,但抗CD90单克隆抗体能够抑制小鼠黑色素瘤的原位生长(p=0.049);使用免疫组织化学染色法对肿瘤组织切片进行染色,发现经过抗体治疗的小鼠成瘤组织中的新生血管明显减少,治疗组和对照组肿瘤组织的微血管密度存在显著性差异(p=0.011)。结论:抗CD90单克隆抗体能够通过抑制肿瘤组织中新生血管的形成影响黑色素瘤的发生发展,从而达到治疗黑色素瘤的效果。 展开更多
关键词 CD90 黑色素瘤 单克隆抗体治疗
胃癌干细胞单克隆抗体联合顺铂靶向治疗胃癌的实验研究 预览 被引量:1
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作者 遇珑 舒雄 +3 位作者 何永燕 孙力超 杨治华 冉宇靓 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第7期1001-1005,共5页
目的:探讨靶向胃癌干细胞单克隆抗体的生物学特征及其联合顺铂治疗胃癌的疗效。方法:采用无血清悬浮培养法和PKH26染色法确定胃癌SNU-5细胞中存在肿瘤干细胞。细胞免疫荧光法检测单克隆抗体21A3识别的抗原蛋白与PKH26~+细胞及特异性... 目的:探讨靶向胃癌干细胞单克隆抗体的生物学特征及其联合顺铂治疗胃癌的疗效。方法:采用无血清悬浮培养法和PKH26染色法确定胃癌SNU-5细胞中存在肿瘤干细胞。细胞免疫荧光法检测单克隆抗体21A3识别的抗原蛋白与PKH26~+细胞及特异性抗原(CD90)在SNU-5细胞中的表达情况。无血清悬浮培养法检测流式细胞术分选出的21A3~+细胞的自我更新能力以及21A3对SNU-5细胞自我更新能力的影响。CCK8法检测21A3对细胞顺铂耐药能力的影响。裸鼠体内治疗实验分析21A3联合顺铂对SNU-5移植瘤生长的抑制作用。结果:SNU-5细胞无血清悬浮培养11d后形成的细胞球体中存在单个PKH26~+细胞。细胞免疫荧光显示,单克隆抗体21A3识别的抗原分子能与PKH26和CD90在SNU-5细胞上共定位。21A3~+细胞体外成球率高于21A3-细胞。21A3~+细胞具有更高的耐药性,21A3~+细胞和21A3-细胞的IC_(50)分别为0.104μmol/L和0.025μmol/L。单克隆抗体21A3能够显著抑制SNU-5细胞的无血清成球,抑制率为37.5%。经21A3处理后的SNU-5细胞,耐药能力下降,其IC_(50)为0.001μg/ml,而对照组的IC_(50)为0.003μg/ml。抗体体内治疗实验结果显示,10、5、2.5mg/kg的2 1 A3组的肿瘤生长抑制率分别为80.6%、69.6%和59.2%,10mg/kg 21A3~+顺铂组的肿瘤生长抑制率为90.6%,顺铂组的肿瘤生长抑制率为55.8%。结论:单克隆抗体21A3是抗胃癌干细胞的功能性单克隆抗体。 展开更多
关键词 胃癌干细胞 单克隆抗体 顺铂 21A3 SNU-5 CD90
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CD90在肝细胞肝癌组织中的表达及其与病理相关性研究 预览
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作者 曹毅 马娜 《肝脏》 2017年第3期241-244,共4页
目的探讨CD90在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达情况及其与临床病理参数的相关性。方法选择2015年10月至2016年4月期间,于我院行肝癌切除术治疗的HCC患者72例,采集患者癌旁组织和HCC各72份,分别作为癌旁组和HCC组,72例肝外伤患者的正常... 目的探讨CD90在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达情况及其与临床病理参数的相关性。方法选择2015年10月至2016年4月期间,于我院行肝癌切除术治疗的HCC患者72例,采集患者癌旁组织和HCC各72份,分别作为癌旁组和HCC组,72例肝外伤患者的正常肝脏组织作为对照组。所有标本的CD90均采用免疫组化法进行检测,分析CD90的表达情况以及与HCC临床病理参数的关系。结果对照组、癌旁组以及HCC组的CD90阳性表达率分别为0%、47.22%、77.78%,3组两两比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。CD90的表达情况与HCC患者的性别、肿瘤包膜是否完整、病理分级、是否合并门静脉瘤栓以及TNM分期相关,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。结论癌旁组织和HCC组织可表达CD90,而正常肝组织不表达,在HCC组织中表达最高;对于HCC患者预后的判断可借助癌组织中是否表达CD90,从而为患者的诊疗提供临床参考意义。 展开更多
关键词 干细胞标记物 肝细胞肝癌 CD90
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一株胃癌干细胞功能性单克隆抗体的鉴定及功能研究 被引量:1
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作者 矫婕 舒雄 +5 位作者 刘辉琦 孙力超 冉宇靓 遇珑 孙立新 杨治华 《肿瘤学杂志》 CAS 2016年第4期284-290,共7页
[目的]从抗人胃癌干细胞单克隆抗体杂交瘤库中筛选鉴定识别胃癌干细胞的单克隆抗体,并证明其具有抑制胃癌干细胞自我更新能力和侵袭功能的功能性单抗,为靶向人胃癌干细胞治疗胃癌提供有治疗潜能的单抗候选药物。[方法]采用无血清培养、P... [目的]从抗人胃癌干细胞单克隆抗体杂交瘤库中筛选鉴定识别胃癌干细胞的单克隆抗体,并证明其具有抑制胃癌干细胞自我更新能力和侵袭功能的功能性单抗,为靶向人胃癌干细胞治疗胃癌提供有治疗潜能的单抗候选药物。[方法]采用无血清培养、PKH26染色及流式细胞术等方法确定人胃癌细胞系SNU-5中存在肿瘤干细胞,可作为研究抗人胃癌干细胞单抗的细胞模型。应用双色免疫荧光、流式细胞分选等技术分析鉴定单克隆抗体25G5是识别胃癌干细胞的单克隆抗体。用肿瘤干细胞的成球生长实验、Transwell侵袭实验及耐药性实验研究分析25G5单抗对胃癌干细胞功能的影响。[结果]SNU-5细胞在无血清培养基中存活并增殖成球形生长,SNU-5球体细胞中表达胃癌干细胞标志物CD44^+和CD90^+的细胞比例分别为72.4%和8.55%,较亲本细胞分别提高了21.3倍和2.4倍,表明SNU-5中存在有CD44^+、CD90^+的胃癌干细胞。细胞免疫荧光结果显示25G5单抗识别的抗原分子与CD44、CD90胃癌干细胞标志物共染表达于胃癌干细胞膜上。流式细胞术分选的25G5^+细胞的成球率为(21.4±0.3)%,显著高于25G5-细胞(12.3±0.7)%和亲本细胞(16.1±1.0)%。Transwell侵袭实验、细胞耐药性实验和动物体内致瘤实验结果显示25G5^+细胞的侵袭能力和耐药能力也显著高于25G5-细胞和亲本细胞,表明25G5单抗识别的细胞是具有自我更新、高侵袭、高耐药性特征的肿瘤干细胞。体外功能研究发现,单抗25G5能显著抑制SNU-5胃癌细胞在无血清培养液中的成球生长,抑制率可达46.4%,也能显著地抑制SNU-5成球细胞(Sphere细胞)的侵袭,抑制率达58.4%。单抗25G5是一株能显著抑制SNU-5中肿瘤干细胞自我更新和侵袭能力的功能性抗人胃癌干细胞单抗。[结论]单克隆抗体25G5是一株抗胃癌干细胞的功能性单抗,为胃癌干细胞靶向治疗的候选抗体 展开更多
关键词 人胃癌细胞 肿瘤干细胞 单克隆抗体 CD44 CD90
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