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吉林省禽白血病的血清流行病学调查 认领
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作者 曹利利 郭衍冰 +5 位作者 宫鹏涛 董航 张雪 姚新华 苑淑贤 王治 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第2期97-100,共4页
为了解吉林省禽白血病的流行情况,对省内9个市区(吉林、长春、通化、白山、白城、延边、辽源、松原、长白山管委会)的养殖场,包括上游祖代鸡场以及下游的父母代种鸡场和商品代养殖场进行抽检,从10万只鸡中共随机采集血清2万份,利用商品E... 为了解吉林省禽白血病的流行情况,对省内9个市区(吉林、长春、通化、白山、白城、延边、辽源、松原、长白山管委会)的养殖场,包括上游祖代鸡场以及下游的父母代种鸡场和商品代养殖场进行抽检,从10万只鸡中共随机采集血清2万份,利用商品ELISA试剂盒和实验室已建立的禽白血病胶体金检测方法进行血清学检测。结果显示:禽白血病总阳性率为57.74%;长春地区阳性率最高(66.69%),其次为白山、延边、长白山管委会等;分析抽检结果显示,2种方法的阳性符合率为99.69%,且以商品代检出阳性率最高。结果表明:已建立的禽白血病胶体金检测方法临床应用效果良好,且流行病学调查结果为吉林省禽白血病的防控管理和种群净化提供一定参考。 展开更多
关键词 禽白血病 吉林省 ELISA 胶体金
ELISA法和荧光定量RT-PCR在登革热病毒感染早期检测中的差异对比 认领
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作者 何思杰 蔡银凤 +1 位作者 何锋荣 黄翠芳 《中外医学研究》 2020年第5期54-56,共3页
目的:比较ELISA法和荧光定量RT-PCR在登革病毒感染早期检测中的差异,提高早期筛查效率。方法:收集2016年1月-2018年12月广东省佛山市地区疑似登革热且发病7 d内的病例的血清标本3780份,均采用ELISA法(登革热病毒NS1抗原检测)及荧光定量R... 目的:比较ELISA法和荧光定量RT-PCR在登革病毒感染早期检测中的差异,提高早期筛查效率。方法:收集2016年1月-2018年12月广东省佛山市地区疑似登革热且发病7 d内的病例的血清标本3780份,均采用ELISA法(登革热病毒NS1抗原检测)及荧光定量RT-PCR(病毒核酸检测)进行检测,比较两种检测方法的差异。结果:在病程第2~5天,ELISA法检测的阳性率低于荧光定量RT-PCR检测,差异有统计学意义(P<0.05)。在病程第6~7天荧光定量RT-PCR检测的阳性率低于ELISA法检测,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对于疑似登革热病例早期筛查,发病2~5 d可先行荧光定量RT-PCR检测,对于发病6~7 d可先行ELISA法检测,以提高筛查效率。 展开更多
关键词 ELISA 荧光定量RT-PCR 登革病毒 实验室检测
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新疆双峰驼纳米抗体、重链抗体和常规抗体的热稳定性比较 认领
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作者 坤杜孜阿依·阿布都沙拉木 姜志强 +3 位作者 刘娅菲 熊静璠 娜斯拜·阿卜杜瓦哈普 李江伟 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期319-325,共7页
【目的】比较纳米抗体、HCAbs与常规抗体之间在温度稳定性方面的差异,为研究HCAb的功能特性和骆驼适应极端环境的免疫特点提供参考。【方法】从溶菌酶、蒜氨酸酶和丹毒丝菌表面抗原A 3种抗原免疫的新疆双峰驼血清中,采用Protein A和Prot... 【目的】比较纳米抗体、HCAbs与常规抗体之间在温度稳定性方面的差异,为研究HCAb的功能特性和骆驼适应极端环境的免疫特点提供参考。【方法】从溶菌酶、蒜氨酸酶和丹毒丝菌表面抗原A 3种抗原免疫的新疆双峰驼血清中,采用Protein A和Protein G亲和色谱纯化IgG1、IgG2和IgG33种亚型抗体,并在大肠杆菌BL21(DE3)菌中表达和纯化3种纳米抗体。采用ELISA方法,测定经过22~90℃一系列热处理后、平衡至室温的各抗体与相应抗原的结合活性,以剩余抗原结合活性的百分比作为衡量抗体温度稳定性的参数。【结果】3种抗原免疫后均能在骆驼激发明显的抗体反应。采用Protein A/G亲和色谱,从血清中纯化获得分子量分别为50 KD+25 KD、46 KD和43 KD的IgG1、IgG2和IgG3亚型抗体。骆驼IgG2和IgG3重链抗体比IgG1具有更高的温度稳定性,其中IgG3表现出比IgG2对温度更高耐受的趋势。从细菌表达纯化的3种纳米抗体都表现出比重链抗体和常规抗体更高的温度稳定性。【结论】抗体结构形式和分子大小可能显著影响了双峰驼抗体对温度的耐受性。 展开更多
关键词 重链抗体 纳米抗体 新疆双峰驼 温度稳定性 ELISA测定
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Investigation of Ovarian Follicular Waves and Major Hormonal Profile in Red Chittagong Cattle 认领
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作者 Saiful Islam Md. Ahsanul Kabir +6 位作者 Md. Faizul Hossain Miraz Effat Jahan Tamanna Satya Ranjan Sarker Zinia Islam S. M. Jahangir Hossain Sharif Hossain Gautam Kumar Deb 《生命科学与技术进展(英文)》 2020年第2期7-21,共15页
Red Chittagong Cattle (RCC) is one of the renowned varieties of cattle which is indigenous and most potential type of domestic animal genetic resource in Bangladesh with distinct phenotypic characteristics. Reproducti... Red Chittagong Cattle (RCC) is one of the renowned varieties of cattle which is indigenous and most potential type of domestic animal genetic resource in Bangladesh with distinct phenotypic characteristics. Reproductive management might be a process for multiplying this cattle variety. Therefore, the goals of this study were to characterize the follicular waves of RCC and to determine the Progesterone (P4), Follicle Stimulating Hormone (FSH) and Luteinizing Hormone (LH) profile during three consecutive estrus cycle. Follicular wave emergence (Day 0) was identified using trans-vaginal ultrasound technique and follicular growth was then monitored from Day 0 to Day 23 during three consecutive estrus cycle and blood samples were collected. After measuring the growth and diameter of the follicles, hormonal assays of collected blood samples were performed using Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). We found that, both RCC cows and heifers showed two waves inter-ovulatory intervals. The length of inter-ovulatory intervals and the diameter of the ovulatory follicle of RCC cows and heifers were slightly different from each other. The identification of the dominant follicle was confirmed from the start of its deviation from other subordinate follicles till it reached to the maximum diameter and identified as dominant follicle which increases linearly for approximately six days (growing phase). This dominant follicle is remained approximately same size for five days (static phase), and then begins to regress (regressing phase) decreasing the antral diameter. The follicular waves are first detectable as 4 - 5 mm follicles approximately at day 0 and day 10 both for RCC cows and heifers which showed two waves inter-ovulatory intervals. The circulating varied concentrations of LH, FSH and P4 were determined using ELISA in case of both cows and heifers and the concentration curves followed the similar pattern of change during the estrus cycle. Hence, the knowledge about ovarian follicular waves will create a base line for r 展开更多
关键词 RED Chittagong CATTLE OVARIAN FOLLICLES Progesterone Follicle Stimulating HORMONE Luteinizing HORMONE ELISA
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成都市某三甲医院腹泻儿童轮状病毒和隐孢子虫感染调查 认领
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作者 庞华胜 杨练 +2 位作者 匡紫微 马莹 刘成桂 《四川医学》 CAS 2020年第2期122-125,共4页
目的了解成都市腹泻儿童轮状病毒和隐孢子虫的感染情况。方法收集成都市某三甲妇幼医院腹泻儿童粪便样本297份,采用快速诊断试剂盒(胶体金法)进行轮状病毒抗原检测,同时分别用改良抗酸染色法检查隐孢子虫卵囊,用ELISA检测试剂盒检测隐... 目的了解成都市腹泻儿童轮状病毒和隐孢子虫的感染情况。方法收集成都市某三甲妇幼医院腹泻儿童粪便样本297份,采用快速诊断试剂盒(胶体金法)进行轮状病毒抗原检测,同时分别用改良抗酸染色法检查隐孢子虫卵囊,用ELISA检测试剂盒检测隐孢子虫卵囊抗原。结果共检出轮状病毒阳性31例,男童与女童阳性率分别为12.43%和7.50%,差异无统计学意义(P>0.05);两种隐孢子虫检测方法均未发现阳性病例。结论轮状病毒是成都市儿童腹泻的主要原因之一,感染以6个月至2岁患儿为主;成都市儿童腹泻患者的隐孢子虫感染率低于预期,此结果需要更大样本量的调查进行确认。 展开更多
关键词 儿童腹泻 轮状病毒 胶体金 隐孢子虫 ELISA
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2017-2019年四川省援藏工作人员包虫病感染情况调查 认领
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作者 邓银 李彦 +6 位作者 孙黎 邓璐 马传梁 王海蓉 陈曦阳 于婧 谭利民 《寄生虫病与感染性疾病》 CAS 2020年第1期31-34,40共5页
目的了解四川省援藏工作人员包虫病感染情况,为今后援藏人员的卫生保健工作提供参考。方法对2017-2019年四川省主要在四川阿坝羌族藏族自治州和四川甘孜藏族自治州包虫病流行区工作生活的援藏工作人员进行体检,并对体检结果进行分析。结... 目的了解四川省援藏工作人员包虫病感染情况,为今后援藏人员的卫生保健工作提供参考。方法对2017-2019年四川省主要在四川阿坝羌族藏族自治州和四川甘孜藏族自治州包虫病流行区工作生活的援藏工作人员进行体检,并对体检结果进行分析。结果 2017-2019年的2 781例援藏工作人员包虫病专科体检报告中,有包虫特异性抗体检测(ELISA)阳性者80例,其中共发现疑似病例7例,通过随访复查均已排除。不同性别、援藏时间及援藏地点的援藏人员感染包虫病及检出相关指标异常的概率差异无统计学意义(P>0.05)。结论四川省援藏工作人员感染包虫病的风险较低,援藏人员在援藏期间感染包虫病及包虫病核心检查结果异常的可能性和性别、援藏时间、援藏地点等因素无相关性。说明四川省目前针对援藏人员提供的卫生保健、健康教育及后勤保障等措施行之有效,降低了援藏工作人员感染包虫病的风险。另外,ELISA法检测包虫特异性抗体在临床诊断中的价值应结合流行病学、影像学等情况综合评判。 展开更多
关键词 包虫病 四川援藏人员 体检 ELISA检查
检测牛冠状病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用 认领
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作者 胡林杰 孟野 +4 位作者 周玉龙 贾伟强 翟海瑞 武瑞 侯喜林 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期330-338,共9页
[背景]牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)是引起新生犊牛死亡的主要病原之一,有效的检测手段是防治该病的前提。目前BCoV ELISA检测方法存在敏感性低、不稳定等缺陷。[目的]对原有BCoV ELISA方法进行改进,建立间接ELISA检测方法。[方... [背景]牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)是引起新生犊牛死亡的主要病原之一,有效的检测手段是防治该病的前提。目前BCoV ELISA检测方法存在敏感性低、不稳定等缺陷。[目的]对原有BCoV ELISA方法进行改进,建立间接ELISA检测方法。[方法]应用我国BCoV流行毒株CD株n基因为模板,预测N蛋白抗原表位,通过原核表达制备可溶性的重组N蛋白作为抗原,建立间接ELISA方法,应用该方法对黑龙江省2010-2017年的BCoV感染进行血清流行病学调查。[结果]该ELISA方法最佳工作条件为:用50 mmol/LpH 9.6碳酸盐作为包被液,抗原包被浓度2.5μg/mL;用PBST作为样本稀释液,稀释浓度1:50,37℃孵育1.5 h;HRP-羊抗牛IgG稀释浓度1:7 500,37℃孵育1.0 h;用1%明胶37℃封闭30 min。阴阳性临界值为0.225。该方法与BRV、BRSV、BVDV、IBRV、BPIV3和E.coli阳性血清均无交叉反应。批内和批间变异系数均小于10%,与病毒中和试验的符合率高达93.5%。对黑龙江省部分地区共603份奶牛血清样品检测结果显示,BCoV抗体阳性率为98.84%。[结论]建立的ELISA方法特异性强、敏感性高、稳定性好,为进一步研发ELISA试剂盒提供了技术基础。 展开更多
关键词 牛冠状病毒 核衣壳蛋白 ELISA 流行病学
浙江省和河北省规模猪场弓形虫感染的血清学调查 认领
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作者 严鹏 尚学东 +1 位作者 田忠园 华利忠 《现代畜牧兽医》 2020年第1期50-53,共4页
为了解浙江省和河北省规模化猪场猪群弓形虫自然感染的情况,在23个规模化猪场随机采集了463例猪血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)对猪血清中弓形虫抗体进行检测。结果表明:猪群总感染率为44.49%;浙江省猪群感染率为36.82%,河北省猪... 为了解浙江省和河北省规模化猪场猪群弓形虫自然感染的情况,在23个规模化猪场随机采集了463例猪血清,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)对猪血清中弓形虫抗体进行检测。结果表明:猪群总感染率为44.49%;浙江省猪群感染率为36.82%,河北省猪群感染率为50.38%;从不同年份感染情况分析,2016、2017和2018年猪群感染率分别为为37.11%、45.49%和52.20%,呈逐年上升的趋势;从胎次感染情况分析,1~6胎次、高胎次(6胎以上)母猪感染率分别为42.10%、52.94%、47.17%、45.95%、54.00%、63.64%、37.50%,母猪群总感染率为49.28%。调查检测结果表明猪群弓形虫感染很普遍,在不同猪场均有一定程度的感染,而母猪感染率较高。 展开更多
关键词 规模猪场 猪弓形虫 血清学 间接ELISA 浙江 河北
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黄衣红曲中黄曲霉毒素B1的酶联免疫检测法 认领
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作者 程广强 陈南 黄祖新 《福建分析测试》 CAS 2020年第2期47-49,共3页
本文报道了ELISA方法测定福建大田县传统工艺生产的酿酒用黄衣红曲中黄曲霉毒素B1含量。随机抽取了四个生产厂家的样品进行分析,检测结果表明四个黄衣红曲的样品所含黄曲霉毒素B1含量均低于国家食品安全限量标准,处于安全范围之内。
关键词 黄衣红曲 黄曲霉毒素B1 酶联免疫检测法ELISA
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核酸反应性标本9例与对应ELISA、CLIA法检测HBV的关联分析 认领
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作者 范菲 《中国社区医师》 2020年第13期114-115,共2页
目的:分析核酸反应性标本和对应ELISA、CLIA法检测HBV的关联性。方法:选取2017年1月-2018年1月无偿献血者1000例,提供核酸检测,同时对核酸反应性标本提供CLIA法检测。结果:通过核酸检测出HBV DNA反应性标本9例,没有检测出HCV RNA及HIV ... 目的:分析核酸反应性标本和对应ELISA、CLIA法检测HBV的关联性。方法:选取2017年1月-2018年1月无偿献血者1000例,提供核酸检测,同时对核酸反应性标本提供CLIA法检测。结果:通过核酸检测出HBV DNA反应性标本9例,没有检测出HCV RNA及HIV RNA反应性标本,其中属于ELISA法阴性高值标本1例;9例核酸反应性标本对应CLIA法HBV两对半检测产生HBsAg(-)抗-HBc(+)2例,HBsAg(-)抗-HBc(+)抗-HBe(+)血清型6例,剩余无反应性1例,怀疑为窗口期标本。结论:对于无偿献血者血液开展核酸检测以及ELISA法检测存在互补性,核酸检测能够良好弥补ELISA法检测窗口期问题,核酸检测和ELISA法检测存在相同结果,将影响血液质量的ELISA法阴性高值标本淘汰,能够有效减少输血感染的出现风险。 展开更多
关键词 核酸反应性标本 ELISA CLIA法 HBV 关联性
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运用双重PCR和ELISA法对云南部分地区PRRSV和PRV的检测分析 认领
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作者 王浩 单春兰 +11 位作者 王琛 高洪 严玉霖 赵汝 敖平星 高利波 刘超英 富国文 高斌 景麟稀 茶金龙 杨伟 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期75-79,共5页
为了解云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)的流行情况,试验采集云南省不同地区具有呼吸道症状的猪血清样品174份,首先建立PRRSV-GP基... 为了解云南省猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)的流行情况,试验采集云南省不同地区具有呼吸道症状的猪血清样品174份,首先建立PRRSV-GP基因和PRV-gB基因的双重PCR检测方法,然后运用建立的双重PCR方法和ELISA抗体检测试剂盒对PRRSV-GP和PRV-gB的阳性率及抗体水平进行检测分析。结果表明:试验建立了最低检测限度分别为1.48 ng/μL和0.67 ng/μL的PRRSV-GP和PRV-gB的双重PCR检测方法;单一PCR和双重PCR检测的PRRSV-GP阳性率为45.4%(79/174),PRV-gB阳性率为75.86%(132/174),混合检出率为5.17%(9/179);ELISA检测试剂盒检测的gE阳性率为0(0/174),PRRSV和PRV-gB的阳性率结果与单一PCR、双重PCR检测结果一致。说明试验构建的双重PCR方法有良好的敏感性和特异性;云南省部分地区PRRSV抗体阳性率低且免疫效果较差,PRV抗体阳性率相对较高且免疫效果良好。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP基因 猪伪狂犬病病毒gB基因 双重PCR ELISA 阳性率 抗体检测
某规模猪场保育育肥猪猪瘟抗体检测与分析 认领
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作者 高录贵 《现代畜牧兽医》 2020年第3期47-48,共2页
采用阻断ELISA检测法,对猪瘟免疫程序为4、6周龄的猪只分别在4、6、8、16和30周龄采血检测猪瘟抗体,查看猪瘟免疫效果。结果表明,猪瘟抗体阳性率从4周龄的92.9%下降到6周龄的65.8%,继续下降到8周龄的50%,直到16周龄才升高到90%并持续到3... 采用阻断ELISA检测法,对猪瘟免疫程序为4、6周龄的猪只分别在4、6、8、16和30周龄采血检测猪瘟抗体,查看猪瘟免疫效果。结果表明,猪瘟抗体阳性率从4周龄的92.9%下降到6周龄的65.8%,继续下降到8周龄的50%,直到16周龄才升高到90%并持续到30周龄。 展开更多
关键词 ELISA 猪瘟 抗体 免疫程序 保育育肥猪 免疫系统
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阿加曲班对MCAO大鼠不同时间点血小板功能的影响 认领
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作者 杨科 艾芬 余波 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期941-947,共7页
建立大脑中动脉闭塞(model of middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型,研究阿加曲班对大鼠不同时间脑缺血再灌注损伤血小板功能的影响。将120只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)和阿加曲班给药组(Argatro... 建立大脑中动脉闭塞(model of middle cerebral artery occlusion,MCAO)大鼠模型,研究阿加曲班对大鼠不同时间脑缺血再灌注损伤血小板功能的影响。将120只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)和阿加曲班给药组(Argatroban),其中Argatroban组分为4组:Argatroban+30 min组、Argatroban+1 h组、Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组,Sham组和Model组40只,其余各组每组10只。线栓法制备大鼠MCAO模型,术中输注Argatroban,剂量为0.3μg·kg^-1·min^-1,完成手术前5 min停止输注。手术完成后,Sham组和Model组分别于术后30 min、1 h、3 h和7 h处死10只取样;Argatroban给药组5个时间点处死取样。检测大鼠血浆血细胞数量,并计数骨髓有核细胞数的变化。采用流式细胞仪检测血小板-白细胞聚集体(platelet-leukocyte aggregates,PLA)表达水平,观察活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、血小板计数变化,ELISA检测血浆D-二聚体和TAT。结果显示,与Sham组相比,Model组大鼠的红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血红蛋白含量(HGB)和中性粒细胞(GR)数都显著升高(p<0.05),且与给药组没有统计学差异。Sham组、Model组和Argatroban给药组的骨髓有核细胞数也没有统计学差异。与Sham组相比,Model组PLA表达水平极显著升高(p<0.01),Argatroban+30 min组PLA表达水平却低于Sham组,但没有统计学差异,Argatroban+1 h组高于Sham组和Argatroban+30 min组(p<0.05),Argatroban+3 h组和Argatroban+7 h组高于Argatroban+1 h组低于Sham组。术后各组的血小板计数均高于Sham组(p<0.05),Argatroban各组的血小板计数要低于Model组(p<0.05),并在30 min时达到最低,30 min以后血小板升高,但是1 h以后血小板不再升高,趋于稳定。Argatroban各组PT和APTT虽略有降低,但是与Sham组和Model组并没有统计学差异。造模后各组TAT、D-二聚体水平显著升高,Argatroban各组TAT水平较模型组明显降低(p<0.05),Argatroban+30 min组水� 展开更多
关键词 动脉闭塞 阿加曲班 凝血活酶时间 ELISA 流式细胞仪
基于新城疫病毒V蛋白鉴别鸡群感染与免疫的间接ELISA方法的建立 认领
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作者 于得水 谢鹏 +5 位作者 梁健鹏 林秋燕 向斌 徐成刚 廖明 任涛 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期55-60,共6页
本研究以新城疫病毒(NDV)V蛋白羧基端结构域(Vc)的重组蛋白为包被抗原,建立了用于检测NDV V蛋白抗体的间接ELISA方法,并采用该方法检测了鸡群免疫或接毒后血清中的V蛋白抗体水平。结果显示:两组不同NDV灭活疫苗组在免疫后的3周内检测结... 本研究以新城疫病毒(NDV)V蛋白羧基端结构域(Vc)的重组蛋白为包被抗原,建立了用于检测NDV V蛋白抗体的间接ELISA方法,并采用该方法检测了鸡群免疫或接毒后血清中的V蛋白抗体水平。结果显示:两组不同NDV灭活疫苗组在免疫后的3周内检测结果均为阴性;两组灭活疫苗免疫3周后再人工感染NDV强毒的鸡群,攻毒后第7、14和21 d,NDV阳性率分别为60%、80%、70%和50%、80%、70%;两组不同的NDV弱毒疫苗免疫组鸡群,仅在免疫后第21 d阳性率分别为20%和10%。以上结果表明,NDV疫苗免疫组与强毒感染组的V蛋白抗体阳性率存在明显差异,本方法可在群体水平上区分新城疫疫苗免疫与强毒感染鸡群,为NDV血清学诊断和流行病学调查提供了一种新的检测手段。 展开更多
关键词 新城疫病毒 V蛋白 ELISA 区分感染与免疫
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鸡补体受体2基因克隆、蛋白表达纯化及其多克隆抗体的制备和鉴定 认领
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作者 孔子萌 江波 +3 位作者 蔡云虹 何后军 李永清 靳换 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期201-208,共8页
为初步鉴定鸡补体受体2(ChCR2)基因,本试验设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增ChCR 2基因。利用同源臂连接的方法构建去掉跨膜区的ChCR2-△TM基因的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-... 为初步鉴定鸡补体受体2(ChCR2)基因,本试验设计特异性引物,利用RT-PCR方法扩增ChCR 2基因。利用同源臂连接的方法构建去掉跨膜区的ChCR2-△TM基因的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM,将两个原核质粒转入大肠杆菌表达系统中表达GST-ChCR2-△TM和His-ChCR2-△TM蛋白。将纯化后的GST-ChCR2-△TM蛋白免疫BALB/c小鼠制备血清多克隆抗体,以His-ChCR2-△TM蛋白为包被原,ELISA检测血清多克隆抗体效价。利用间接免疫荧光试验和Western blotting对抗原抗体的特异结合性进行鉴定。结果显示,扩增到了一条大小为1113 bp的ChCR 2基因条带。成功构建了去掉跨膜区的原核表达载体pGEX-6P-1-ChCR2-△TM、pET-32a-ChCR2-△TM和真核表达载体pCMV-HA-ChCR2-△TM。诱导表达的GST-ChCR2-△TM蛋白在低温(16℃)诱导条件下可溶,而His-ChCR2-△TM蛋白以包涵体的形式存在。经ELISA测定,GST-ChCR2-△TM蛋白免疫的BALB/c小鼠血清效价为1∶512000。间接免疫荧光试验和Western blotting结果显示,制备的抗GST-ChCR2-△TM蛋白血清多克隆抗体可与ChCR2蛋白发生特异性结合。本研究结果为ChCR 2基因的进一步鉴定及鸡乃至禽类的相关免疫学研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 ChCR2基因 蛋白表达和纯化 多克隆抗体 ELISA 间接免疫荧光 Western BLOTTING
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2016—2018年我国规模化猪场伪狂犬病毒感染的血清学及传播风险因素调查 认领
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作者 宁慧波 李聪 +2 位作者 张婷婷 栗娟 杨汉春 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第3期97-106,共10页
为了解我国规模化猪场近三年伪狂犬病毒(PRV)野毒感染情况,探寻传播风险因素,在2016—2018年期间,采用横断面采样策略,对24个省(直辖市、自治区)的1461个规模化猪场93912份血清样品进行PRV gE抗体检测及系统分析。同步对采样猪场进行问... 为了解我国规模化猪场近三年伪狂犬病毒(PRV)野毒感染情况,探寻传播风险因素,在2016—2018年期间,采用横断面采样策略,对24个省(直辖市、自治区)的1461个规模化猪场93912份血清样品进行PRV gE抗体检测及系统分析。同步对采样猪场进行问卷调查,将问卷中涉及的风险因素进行轶和检验及logistic回归分析。结果显示:2016—2018年,猪场阳性率分别为80.93%,81.92%和75.75%;样品阳性率分别为36.03%,34.52%和32.45%。华北、华东、华中地区的猪场阳性率、样品阳性率相对较高;华南及西南地区的阳性率相对较低。母猪随着胎龄的增加,其阳性率逐渐升高。12-15周龄是仔猪易感阶段,且随着日龄的增加,阳性率逐渐升高。PRV的感染无明显的季节特性。701-2000头母猪规模的猪场更容易感染PRV,而<300头及>2000头母猪规模的感染几率相对较低。秩和检验表明:每平方公里猪只数量越多、购入后备猪体重越大等6项因素对PRV的传播有显著影响(P<0.05)。logistic回归分析结果显示:一点式生产模式、公猪感染、仔猪肌注免疫频率等17项因素与PRV的传播有较强的联系(P<0.01)。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 血清学 ELISA 风险因素 回归分析
ELISA法测定尿微量蛋白对高血压肾损害早期诊断的价值 认领
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作者 罗贞香 《中外医学研究》 2020年第8期51-53,共3页
目的:探讨分析ELISA法测定尿微量蛋白对高血压肾损害早期诊断的价值.方法:选取笔者所在医院2017年11月-2018年12月收治的97例高血压患者,作为研究组.选择同期在院接受体检的97例健康体检者,作为对照组.通过ELISA法检测两组患者尿微球蛋... 目的:探讨分析ELISA法测定尿微量蛋白对高血压肾损害早期诊断的价值.方法:选取笔者所在医院2017年11月-2018年12月收治的97例高血压患者,作为研究组.选择同期在院接受体检的97例健康体检者,作为对照组.通过ELISA法检测两组患者尿微球蛋白、尿转铁蛋白、尿微量清蛋白及尿免疫球蛋白.结果:高血压Ⅰ期组、Ⅱ期组、Ⅲ期组尿α1-微球蛋白、尿微量清蛋白、尿转铁蛋白、尿免疫球蛋白、血清肌酐测定值均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);高血压Ⅲ期组α1-微球蛋白、尿微量清蛋白、尿转铁蛋白、尿免疫球蛋白、血清肌酐测定值均高于高血压Ⅱ期组、Ⅰ期组,且高血压Ⅱ期组各指标均高于Ⅰ期组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:尿微量蛋白检测在高血压早期肾损伤中具有较高的诊断价值,尿微量清蛋白和尿微球蛋白含量可以真实反映出高血压早期肾小球与肾小管损伤症状,检测灵敏度比较高. 展开更多
关键词 ELISA 尿微量蛋白 高血压肾损害 诊断价值
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鲤疱疹病毒3型ORF148 DNA疫苗对建鲤鱼苗的免疫保护 认领
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作者 吴静 刘振兴 +6 位作者 马艳平 梁志凌 马江耀 郝乐 柯浩 冯国清 李玉谷 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期454-462,共9页
鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV),是一种高传染性、致死性病毒。为开发新型CyHV-3 DNA疫苗,前期研究中将CyHV-3 ORF148基因插入pEGFP-N1构建重组质粒,在此基础上,本研究通过转染... 鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,CyHV-3)又称为锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV),是一种高传染性、致死性病毒。为开发新型CyHV-3 DNA疫苗,前期研究中将CyHV-3 ORF148基因插入pEGFP-N1构建重组质粒,在此基础上,本研究通过转染试验、间接免疫荧光试验证实pORF148-EGFP融合蛋白可以在CCB-J细胞系和建鲤体内表达;将重组质粒作为DNA疫苗,肌肉注射免疫建鲤鱼苗,ELISA检测表明免疫pEGFP-ORF148重组质粒可以显著提高建鲤血清特异性抗体水平;RT-qPCR检测显示,免疫pEGFP-ORF148重组质粒后,建鲤脾脏和头肾中的免疫相关基因如IFN-a1、Mx-1、CXCa、CXCR1、TNF-α、IL-1β及IgM基因表达量均显著提高。攻毒实验显示,CyHV-3攻毒21 d后,PBS组、pEGFP-N1组和pEGFP-ORF148组的建鲤存活率分别为30%、35%和85%,免疫pEGFP-ORF148可以显著提高建鲤的存活率(P<0.01)。本研究旨在为CyHV-3 DNA疫苗的应用提供理论依据。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒3型 ORF148 DNA疫苗 ELISA RT-QPCR
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安徽地区献血人群HTLV感染调查 认领
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作者 周学勇 程卫芳 +5 位作者 张云 王成辉 吴洁 李龙活 徐曲明 李玲 《中国输血杂志》 CAS 2020年第2期145-147,共3页
目的了解安徽地区无偿献血人群人类T淋巴细胞病毒感染状况,为本地区临床用血提供合适的安全筛查策略。方法对安徽省合肥、蚌埠、芜湖、安庆、马鞍山5地区部分献血人群采用ELISA试剂筛查HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体,筛查阳性标本采用蛋白印迹法(Weste... 目的了解安徽地区无偿献血人群人类T淋巴细胞病毒感染状况,为本地区临床用血提供合适的安全筛查策略。方法对安徽省合肥、蚌埠、芜湖、安庆、马鞍山5地区部分献血人群采用ELISA试剂筛查HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体,筛查阳性标本采用蛋白印迹法(Westem blot,WB)确证和核酸检测,同时对献血者进行追踪、检测。结果 5地区共抽检献血者标本100 840份,ELISA法筛查出阳性标本57份,确证结果"不确定"2份,其余全部为阴性;确证阳性率为0%;追踪到献血者8人,结果7人仍为原ELISA试剂筛查阳性,确证结果均无阳性。结论安徽地区为HTLV低流行地区,可以暂不开展献血者HTLV全面筛查。 展开更多
关键词 安徽 无偿献血者 人类嗜T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ/Ⅱ ELISA 蛋白印迹试验(WB) 核酸检测
LADA多因子联合检测与临床应用 认领
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作者 朱晓丽 陈斌 +1 位作者 周成林 汪晓莺 《中国继续医学教育》 2020年第5期90-92,共3页
目的建立成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)多抗体联合检测的液体芯片技术,探讨该方法的实验室可行性及临床价值。方法建立液体芯片技术多抗体检测的初步模型,检测糖尿病患者血清中GADA、IAA、ICA、IA-2A、ZnT8A五中抗体含量,将其结果... 目的建立成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)多抗体联合检测的液体芯片技术,探讨该方法的实验室可行性及临床价值。方法建立液体芯片技术多抗体检测的初步模型,检测糖尿病患者血清中GADA、IAA、ICA、IA-2A、ZnT8A五中抗体含量,将其结果与酶联免疫吸附法(ELISA)作比较。结果该液体芯片模型实验室评价性能价良好,所测GADA、IAA、ICA、IA-2A、ZnT8A各值与ELISA法所测值的相关系数r分别为0.986,0.979,0.964,0.958,0.944;液体芯片法五个指标阳性率达到了85%,单指标GADA阳性率为63.8%,ELISA法五个指标阳性率为77.5%。结论使用液体芯片法联合筛查GADA、IAA、ICA、IA-2A、ZnT8A可提高LADA的阳性诊断率,在检测精密度方面与ELISA相当,检测范围更广、灵敏度更高,标本用量少于,所需时间短,是LADA筛查的有潜力的新手段。 展开更多
关键词 LADA 液体芯片 自身抗体 多因子联合检测 1型糖尿病 ELISA
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