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p27及HIF-1α在二甲双胍调节下咽癌细胞增殖与凋亡中的作用研究 被引量:1
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作者 单珊 李晓明 +1 位作者 周晨阳 苗玉花 《临床误诊误治》 2017年第4期94-98,共5页
目的 探讨二甲双胍在下咽癌细胞增殖与凋亡中的作用,以及p27和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1, HIF-1α)蛋白在该调节机制中的作用,为临床治疗下咽癌提供进一步的理论基础.方法 以0、5、10 mmol/L二甲双胍干预体外培养... 目的 探讨二甲双胍在下咽癌细胞增殖与凋亡中的作用,以及p27和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1, HIF-1α)蛋白在该调节机制中的作用,为临床治疗下咽癌提供进一步的理论基础.方法 以0、5、10 mmol/L二甲双胍干预体外培养人下咽癌Fadu细胞24 h,5 mmol/L组再干预至48 h,应用免疫细胞化学法检测p27和HIF-1α蛋白的表达.下咽癌移植瘤裸鼠随机分为对照组(不予二甲双胍干预),低剂量二甲双胍治疗组(met 40组,每日40 mg/kg),高剂量二甲双胍治疗组(met 200组,每日200 mg/kg),各5只,腹腔注射给药28 d后,取移植瘤测量肿瘤体积,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤细胞形态,免疫组织化学染色法检测p27和HIF-1α蛋白表达水平的变化.结果 体外培养的Fadu细胞p27蛋白表达随二甲双胍干预浓度的增加及干预时间的延长而增加(P均〈0.05),而HIF-1α蛋白表达随二甲双胍干预浓度的增加及干预时间的延长而降低(P均〈0.05).下咽癌移植瘤裸鼠药物干预后,met 40组和met 200组移植瘤体积均较对照组缩小(P均〈0.05);移植瘤标本p27蛋白表达随给药浓度的增加而增加,HIF-1α蛋白表达随给药浓度增加而降低(P均〈0.05).结论 二甲双胍可有效抑制下咽癌细胞体内、体外的增殖并促进其凋亡,为临床治疗下咽癌提供进一步的理论依据. 展开更多
关键词 二甲双胍 下咽肿瘤 fadu细胞 P27 HIF-1Α 细胞增殖 细胞凋亡
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STIM1基因在人下咽癌细胞系FaDu中的表达及对细胞凋亡的影响 预览 被引量:2
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作者 武帅 崔晓波 +2 位作者 孙源昊 王军 王博谦 《局解手术学杂志》 2016年第3期167-170,共4页
目的探索STIM1基因在人下咽癌细胞系Fa Du中的表达情况及其表达沉默后对细胞凋亡的影响。方法培养人下咽癌Fa Du细胞,根据不同慢病毒感染分2组。STIM1-siRNA组为经STIM1-siRNA慢病毒感染的下咽癌细胞;对照组为经阴性对照慢病毒感染的下... 目的探索STIM1基因在人下咽癌细胞系Fa Du中的表达情况及其表达沉默后对细胞凋亡的影响。方法培养人下咽癌Fa Du细胞,根据不同慢病毒感染分2组。STIM1-siRNA组为经STIM1-siRNA慢病毒感染的下咽癌细胞;对照组为经阴性对照慢病毒感染的下咽癌细胞。Real-Time PCR法检测STIM1在人下咽癌Fa Du细胞中的表达以及siRNA慢病毒感染后STIM1mRNA水平的表达;Western blot检测siRNA慢病毒感染后STIM1在蛋白水平的表达;流式细胞仪检测STIM1基因沉默后的人下咽癌Fa Du细胞的凋亡情况。采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析。结果以GAPDH为内参(Ct=12.08±0.05),STIM1在下咽癌细胞系Fa Du中表达显著(Ct=22.21±0.05,P〈0.01);Real-time PCR结果显示对照组和STIM1-siRNA组人下咽癌Fa Du细胞的表达值分别为(1.00±0.08)和(0.12±0.01),2组差异具有统计学意义(P〈0.01);Western blot的结果显示,STIM1-siRNA组Fa Du细胞中STIM1蛋白明显受抑制,与Real-time PCR结果一致,慢病毒感染成功;流式细胞仪检测结果显示对照组凋亡率为(4.36±1.32)%;实验组凋亡率为(9.81±0.56)%,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论 STIM1基因与人下咽癌Fa Du细胞凋亡显著相关,人下咽癌Fa Du细胞中,STIM1可能抑制凋亡,可能成为下咽癌诊治的全新切入点。 展开更多
关键词 STIM1 下咽癌 fadu细胞 SIRNA 慢病毒感染 凋亡
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咪达唑仑通过下调p300抑制人咽鳞癌FaDu细胞增殖 被引量:1
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作者 窦云凌 陈祯 +2 位作者 许静红 江楠 舒海华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1452-1457,共6页
目的:探讨咪达唑仑(midazolam)抑制人咽鳞癌FaDu细胞增殖的机制。方法:咪达唑仑处理FaDu细胞后,MTT及BrdU掺入比色法检测细胞增殖情况,RT-PCR及Westernblotting检测p300 mRNA及蛋白水平;沉默p300后,MTT比色法及BrdU掺入法检测... 目的:探讨咪达唑仑(midazolam)抑制人咽鳞癌FaDu细胞增殖的机制。方法:咪达唑仑处理FaDu细胞后,MTT及BrdU掺入比色法检测细胞增殖情况,RT-PCR及Westernblotting检测p300 mRNA及蛋白水平;沉默p300后,MTT比色法及BrdU掺入法检测细胞增殖情况,Westernblotting检测细胞周期相关蛋白的表达水平。结果:咪达唑仑抑制FaDu细胞增殖;咪达唑仑抑制p300表达;沉默p300后p21及p27表达上调,p-Rb表达下调FaDu细胞增殖被抑制。结论:咪达唑仑通过下调p300抑制人咽鳞癌FaDu细胞增殖。 展开更多
关键词 咪达唑仑 p300蛋白 fadu细胞 细胞增殖
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盐霉素对头颈部鳞状细胞癌Fadu细胞增殖和侵袭的影响
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作者 刘颜彬 许海平 +2 位作者 李金忠 苏明 韩正学 《临床口腔医学杂志》 2015年第7期397-399,共3页
目的:研究盐霉素对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)Fadu细胞增殖和侵袭的影响,初步探讨盐霉素在HNSCC发生发展中的作用。方法:不同浓度盐霉素(2、4、8、16μMmol/L)作用于Fadu细胞,分别处理12、24、36、48 h,用MTT法检测盐霉素对Fadu细... 目的:研究盐霉素对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)Fadu细胞增殖和侵袭的影响,初步探讨盐霉素在HNSCC发生发展中的作用。方法:不同浓度盐霉素(2、4、8、16μMmol/L)作用于Fadu细胞,分别处理12、24、36、48 h,用MTT法检测盐霉素对Fadu细胞增殖的影响,Transwell小室法测定盐霉素对Fadu细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot法检测盐霉素对Fadu细胞中基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白表达的影响。结果:盐霉素呈时间-剂量依赖性抑制Fadu细胞的增殖(P〈0.05),使Fadu细胞的迁移和侵袭能力明显下降。盐霉素还使MMP-7和MMP-9蛋白的表达水平下调(P〈0.05)。结论:盐霉素可以降低Fadu细胞的增殖能力,抑制该肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,迁移和侵袭能力的改变可能与下调MMP-7和MMP-9的蛋白表达有关。 展开更多
关键词 盐霉素 fadu细胞 增殖 迁移和侵袭 基质金属蛋白酶
检测DNA链断裂的简化荧光方法及其应用 被引量:5
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作者 贺涛 夏寿萱 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1990年第3期170-174,共5页
简化和改进了 DNA 解旋的荧光法,并用于辐射与平阳霉素所造成的 DNA 链断裂的检测。获得了不同剂量范围γ线照射所致 HeLa S3细胞 DNA 链断裂的线性效应曲线,最小检出剂量为0.25Gy。观察了不同剂量γ线照射后 DNA 链断裂的重接修复。并... 简化和改进了 DNA 解旋的荧光法,并用于辐射与平阳霉素所造成的 DNA 链断裂的检测。获得了不同剂量范围γ线照射所致 HeLa S3细胞 DNA 链断裂的线性效应曲线,最小检出剂量为0.25Gy。观察了不同剂量γ线照射后 DNA 链断裂的重接修复。并检测了平阳霉素在不同浓度不同温度下处理 HeLa S3细胞所致 DNA 链断裂。 展开更多
关键词 DNA链断裂 荧光法 肿瘤细胞
mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒靶向光热作用对下咽癌FADU细胞株和293T细胞株的温度影响 预览 被引量:2
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作者 张荧荧 何晓光 +5 位作者 丛林海 董守安 李玉晓 钟玲 王雨 丁演鹂 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期170-175,共6页
目的:探讨上皮生长因子受体单克隆抗体(epidermal grow th factor receptor monoclonal antibody , mAb-EGFR)功能化修饰的纳米金棒靶向光热作用对下咽癌FADU细胞株和非肿瘤细胞的温度影响。方法在CTAB体系下合成实验所需纳米金棒... 目的:探讨上皮生长因子受体单克隆抗体(epidermal grow th factor receptor monoclonal antibody , mAb-EGFR)功能化修饰的纳米金棒靶向光热作用对下咽癌FADU细胞株和非肿瘤细胞的温度影响。方法在CTAB体系下合成实验所需纳米金棒并完成上皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor ,EGFR)单克隆抗体功能化修饰,用紫外分光光度计及电镜表征;以体外培养的下咽癌FADU 细胞和非肿瘤细胞293T 细胞系为实验材料,用western blot免疫印迹法定性比较两株细胞EGFR的表达及明确细胞内吞纳米金棒;Annexin-5/PI双染法荧光显微镜观察FADU细胞和293T 细胞凋亡情况;设定不同剂量纳米金浓度(15%、25%、35%),应用808 nm波长近红外激光照射6分钟,每隔一分钟检测细胞培养介质温度,并用X T T 法检测细胞存活率。结果纳米金棒浓度在15%~25%、近红外激光照射6分钟时,细胞温度为41~43℃,并且趋于稳定,对下咽癌细胞有明显的杀伤作用(P<0.05),而对293T 细胞没有明显的杀伤作用,而纳米金棒浓度在35%时对下咽癌 FADU细胞和293T细胞都具有明显的杀伤作用(P<0.05)。结论浓度为15%~25% mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒在近红外激光照射6分钟时细胞温度升至41~43 ℃,对下咽癌细胞具有明显的杀伤作用,而对非肿瘤细胞无明显损伤。 展开更多
关键词 上皮生长因子受体单克隆抗体 纳米金棒 下咽癌fadu细胞株 细胞温度
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mAb-EGFR功能化修饰的金纳米棒靶向光热作用对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株和293T细胞株的细胞毒性分析 被引量:1
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作者 张荧荧 何晓光 +5 位作者 董守安 张世文 李玉晓 钟玲 王雨 杨云蔚 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期884-889,共6页
目的:探讨mAb-EGFR功能化修饰的金纳米棒靶向光热作用对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株和对非肿瘤细胞的细胞毒性,初步明确特定吸光度的金纳米棒在体外实验中所需剂量。方法:在CTAB体系下合成实验所需金纳米棒并且完成EGFR单克隆抗体功能... 目的:探讨mAb-EGFR功能化修饰的金纳米棒靶向光热作用对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株和对非肿瘤细胞的细胞毒性,初步明确特定吸光度的金纳米棒在体外实验中所需剂量。方法:在CTAB体系下合成实验所需金纳米棒并且完成EGFR单克隆抗体功能化修饰,用紫外分光光度计及电镜表征,以体外培养的人咽鳞状细胞癌FaDu细胞和非肿瘤细胞293T细胞系为实验材料,用Western blot免疫印迹法定性比较两株细胞EGFR的表达,及明确细胞内吞金纳米棒。设定不同剂量金纳米棒浓度(15%、25%、35%),乳酸脱氢酶法比较金纳米棒对FaDu细胞株和293T细胞株毒性差异及初步明确实验剂量。结果:金纳米棒对于FaDu细胞株的细胞毒性高于293T细胞株(P〈0.01),在293T细胞株实验组中金纳米棒剂量浓度15%、25%两组间无明显差异,而这两组与35%剂量比较均差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:mAb-EGFR功能化修饰的金纳米棒在近红外激光照射时对人咽鳞状细胞癌细胞作用表现出比非肿瘤细胞更高的细胞毒性,对于特定吸光度功能化修饰的金纳米棒光热作用杀伤人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株的安全剂量浓度为15%~25%。 展开更多
关键词 细胞毒性 mAb-EGFR 金纳米棒 鳞状细胞 fadu细胞株
Peroxynitrite诱导下咽癌细胞凋亡与PDCD4基因活性相关性研究
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作者 宋莎莎 李林 +3 位作者 张国栋 白晓卉 刘闻闻 李建峰 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2010年第6期84-87,91共5页
目的探讨peroxynitrite(ONOO-)作用于下咽癌细胞过程中PDCD4基因表达的变化。方法以体外培养的下咽癌FaDu细胞系为实验材料,不同浓度的ONOO-作用于FaDu细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生存率,采用Ho.33342/PI荧光双染进行形态学观察... 目的探讨peroxynitrite(ONOO-)作用于下咽癌细胞过程中PDCD4基因表达的变化。方法以体外培养的下咽癌FaDu细胞系为实验材料,不同浓度的ONOO-作用于FaDu细胞,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生存率,采用Ho.33342/PI荧光双染进行形态学观察,RT-PCR及Western-blot检测PDCD4mRNA水平及蛋白表达的变化,评价PDCD4基因在ONOO-诱导FaDu细胞凋亡过程中的作用。结果 ONOO-(50、100、200μmol/L)作用FaDu细胞24h,能够显著抑制细胞增值,并诱导细胞程序性凋亡,同时引起PDCD4mRNA水平显著上调,PDCD4蛋白表达显著增加。结论 PDCD4基因可能在ONOO-诱导下咽癌细胞生长的信号转导调节通路中起到关键作用。 展开更多
关键词 PEROXYNITRITE PDCD4 fadu细胞 细胞程序性凋亡
纳米金颗粒的制备及其生物相容性研究 预览
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作者 李昀 孙沫逸 +5 位作者 马超 鞠骏 倪前伟 高涛 赵振彦 任一雄 《口腔医学》 CAS 2016年第9期774-777,共4页
目的 制备纳米金颗粒并初步探讨其生物相容性。方法 采用柠檬酸钠还原法合成纳米金颗粒(GNPs),通过透射电子显微镜(TEM)观察其尺寸和形貌,利用光谱仪记录所制得的纳米金溶液的紫外-可见光谱(UV-Vis)。体外实验运用MTT比色分析法... 目的 制备纳米金颗粒并初步探讨其生物相容性。方法 采用柠檬酸钠还原法合成纳米金颗粒(GNPs),通过透射电子显微镜(TEM)观察其尺寸和形貌,利用光谱仪记录所制得的纳米金溶液的紫外-可见光谱(UV-Vis)。体外实验运用MTT比色分析法研究纳米金颗粒的细胞毒性;体内实验通过HE染色观察注射纳米金颗粒后动物心、肝、脾、肾的组织学变化。结果TEM表征和紫外-可见光谱结果显示成功合成直径均一的球形纳米金颗粒。MTT结果显示一定浓度的纳米金颗粒不影响人咽鳞状细胞癌细胞系Fa Du的增殖,无细胞毒性。HE染色结果显示所有动物心、肝、脾、肾组织无组织学变化和毒副反应。结论 成功制备了生物相容性良好的纳米金颗粒,展现出潜在的临床应用前景。 展开更多
关键词 人咽鳞状细胞癌细胞系fadu 纳米金颗粒 细胞毒性 生物相容性
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