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实时荧光定量PCR技术在白酒酿造过程中微生物数量检测的应用展望 认领
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作者 程平言 路虎 +1 位作者 胡峰 涂华彬 《酿酒科技》 2020年第5期74-77,共4页
实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction)是将普通PCR和光谱分析、实时检测等手段巧妙结合应用的一项技术。具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高等优点,已成为分子生物... 实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction)是将普通PCR和光谱分析、实时检测等手段巧妙结合应用的一项技术。具有特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高等优点,已成为分子生物学领域的重要技术工具。尤其是在微生物检测方面得到极大的推广应用。白酒酿造过程中微生物种类复杂、数量在不断变化,可培养方法的局限性很大,但是采用荧光定量PCR的方法有较理想的效果。本文对荧光定量PCR的原理、扩增序列的选择、基因组提取方法等方面做一综述。 展开更多
关键词 白酒酿造 荧光定量 PCR 应用
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全量程C-反应蛋白定量检测试剂盒的研制 认领
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作者 谭有将 梁德智 +4 位作者 陈静 戴尽波 陈耀 余一海 石星亮 《顺德职业技术学院学报》 2018年第4期5-8,共4页
[ 目的]基于荧光定量免疫层析技术,开发一种全量程C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)定量检测试剂盒.[方法]采用双抗体夹心法,检测人血中的CRP浓度水平.[结果]该方法的灵敏度为0.1 mg/L,线性范围为0.0~150 mg/L,批内变异系数为8.94%... [ 目的]基于荧光定量免疫层析技术,开发一种全量程C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)定量检测试剂盒.[方法]采用双抗体夹心法,检测人血中的CRP浓度水平.[结果]该方法的灵敏度为0.1 mg/L,线性范围为0.0~150 mg/L,批内变异系数为8.94%~13.39%,批间变异系数为10.0%~16.8%,相对偏差小于10%,40例临床标本的测试结果显示该试剂与国外试剂的测定结果具有良好的相关性,相关系数 r〉0.97.具有良好的相关性.[结论]建立-种操作简便,灵敏度高,有良好准确性和重复性,线性范围较宽,满足临床检验需求的全量程C-反应蛋白检测试剂盒. 展开更多
关键词 关键词C-反应蛋白 荧光定量 免疫层析技术 双抗夹心法
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荷花转录组测序及花青素苷合成相关基因表达分析 认领 被引量:6
3
作者 孟亚南 张琳 +3 位作者 刘召强 史芳芳 刘艺平 孔德政 《西南林业大学学报》 CAS 北大核心 2018年第2期61-69,共9页
以荷花不同花色品种‘青玉’和‘白洋淀红莲’为研究对象,运用高通量测序技术,对松蕾期的花瓣进行转录组测序,并对2个测序文库进行差异表达及实时荧光定量PCR分析。结果表明:共获得1142条差异表达基因,筛选出与花青素苷合成相关的... 以荷花不同花色品种‘青玉’和‘白洋淀红莲’为研究对象,运用高通量测序技术,对松蕾期的花瓣进行转录组测序,并对2个测序文库进行差异表达及实时荧光定量PCR分析。结果表明:共获得1142条差异表达基因,筛选出与花青素苷合成相关的关键基因ANS、CHS、DFR、UF3GT。4个基因在两种荷花花瓣不同时期中的表达量存在显著差异,在松蕾期或初花期的表达量最高。 展开更多
关键词 荷花 花瓣 转录组 测序基因 花青素苷 荧光定量
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实时荧光定量检测盐胁迫下香蕉幼苗CaM和Ca^2+-ATPase基因的相对表达量 认领 被引量:3
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作者 王文昌 周双云 +3 位作者 乔飞 吉福桑 李元元 李新国 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2017年第5期1745-1751,共7页
通过增加外源CaCl2和钙离子螯合剂EGTA处理后,研究香蕉幼苗在60 mmol/L NaCl人工模拟的盐胁迫0、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h不同时间下,测定其叶片和根的CaM和Ca^2+-ATPase基因的相对表达量。结果表明,在NaCl胁迫过程中,香蕉幼苗在正... 通过增加外源CaCl2和钙离子螯合剂EGTA处理后,研究香蕉幼苗在60 mmol/L NaCl人工模拟的盐胁迫0、4 h、8 h、12 h、24 h和48 h不同时间下,测定其叶片和根的CaM和Ca^2+-ATPase基因的相对表达量。结果表明,在NaCl胁迫过程中,香蕉幼苗在正常的生长条件下,其根和叶片的CaM基因和Ca^2+-ATPase基因均有表达。巴西蕉幼苗根在盐胁迫过程中Ca M基因没有发生显著变化,但是粉蕉根却发生了显著变化,这可能与粉蕉耐盐性高于巴西有关。随着盐胁迫时间的延长,巴西蕉和粉蕉幼苗根的Ca^2+-ATPase基因的相对表达量均呈现先上升后下降的趋势。 展开更多
关键词 香蕉幼苗 盐胁迫 CaM基因 Ca2+-ATPase基因 荧光定量
铜陵市河流沉积物中硝化和反硝化微生物分布特征 认领 被引量:11
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作者 程建华 窦智勇 孙庆业 《环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期1362-1370,共9页
矿区河流不仅受到矿业活动带来污染物的影响,还受到区域内生活污水及农田退水中氮、磷和有机物的污染.本研究以铜陵市河流表层沉积物为研究对象,采用荧光定量PCR技术分析季节和污染类型对沉积物样品中硝化(amoA)和反硝化(nirS和nirK... 矿区河流不仅受到矿业活动带来污染物的影响,还受到区域内生活污水及农田退水中氮、磷和有机物的污染.本研究以铜陵市河流表层沉积物为研究对象,采用荧光定量PCR技术分析季节和污染类型对沉积物样品中硝化(amoA)和反硝化(nirS和nirK)功能基因丰度的影响.结果表明,沉积物样品中氨氧化古菌(AOA)和细菌(AOB)基因丰度变化范围分别为1.74×10^5-1.45×10^8copies·g^-1和1.39×10^5-3.39×10^7copies·g^-1,AOA平均丰度是AOB的4.39倍;反硝化基因(nirS和nirK基因)丰度变化范围分别为1.69×10^7-8.55×10^9copies·g^-1和4.45×10^6-1.51×10^8copies·g^-1,nirS基因平均丰度为nirK基因的28.35倍.沉积物AOA丰度呈现春季和秋季较高,夏季和冬季较低的趋势,而AOB在春季和冬季沉积物中的丰度高于夏季和秋季;反硝化基因丰度则表现为春季(nirS)/秋季(nirK)〉夏季〉冬季〉秋季(nirS)/春季(nirK).矿区周围以重金属为主要污染物的河流沉积物中两种amoA和nirS基因的丰度高于毗邻农田区域主要受到氮、磷及有机物污染的河流,后者的nirK基因丰度更高. 展开更多
关键词 沉积物 硝化 反硝化 荧光定量 重金属
黑龙江东部地区禽流感病毒的监测研究 认领 被引量:3
6
作者 张小林 金洪梅 +10 位作者 张佳洁 黄俊洋 孙静 李凤勇 李祥 丁圆英 周长宇 华育平 杨国祥 杨思远 柴洪亮 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期16-18,21共4页
为了调查禽流感病毒在黑龙江东部地区野鸟中的流行情况,试验于2012年5月份至2013年10月份分别在安邦河国家湿地公园、七星河湿地国家级自然保护区、雁窝岛自然保护区、千鸟湖湿地自然保护区、三环泡国家级自然保护区、黑龙江兴凯湖国家... 为了调查禽流感病毒在黑龙江东部地区野鸟中的流行情况,试验于2012年5月份至2013年10月份分别在安邦河国家湿地公园、七星河湿地国家级自然保护区、雁窝岛自然保护区、千鸟湖湿地自然保护区、三环泡国家级自然保护区、黑龙江兴凯湖国家级自然保护区采集野鸟拭子样品、粪便样品,共816份,采用荧光定量RT-PCR方法进行流感病毒的初步检测,再通过SPF鸡胚对疑似阳性样品进行病毒分离,最后通过RT-PCR方法进行病毒鉴定。结果表明:有2份样品的禽流感病毒呈阳性,其亚型为H10N7和H3N5,均为低致病性禽流感病毒。说明黑龙江东部地区的野鸟携带低致病性禽流感病毒。 展开更多
关键词 黑龙江东部 禽流感病毒 监测研究 荧光定量 病毒分离 低致病性
Hcmv—miR—UL112荧光定量RT—PCR检测方法的建立 认领 被引量:1
7
作者 陈琼娜 沈凯 +6 位作者 黄燕燕 查瑶 方建玮 续力云 周吉航 陈芬 刘晓光 《医学研究杂志》 2016年第4期53-56,共4页
目的 建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法 根据miRBase网站中公布的hcmv-miR-UL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特... 目的 建立一种能快速准确检测hcmv-miR-UL112的方法。方法 根据miRBase网站中公布的hcmv-miR-UL112基因序列,通过设计引物、探针及优化反应条件,建立了一种实时荧光定量PCR方法对hcmv-miR-UL112进行定量检测,并进行敏感度、重复性和特异性实验,同时对PCR产物进行测序验证。结果 获得了1条特异性茎环反转录引物,一条特异性PCR正向引物和通用反向引物。PCR最佳反应条件为95℃ 10min,53℃ 2min;95℃ 15s,57℃ 40s,共40个循环。该方法的批内变异系数CV和批间CV均〈5%,相关系数R2均〉0.99,扩增效率均〉90.0%。结论 成功建立了一种敏感度高、特异性强、重复性好并且简便快速的hcmv-miR-UL112荧光定量qRT-PCR检测方法。 展开更多
关键词 hcmv-miR-UL112 MICRORNA RT-PCR 荧光定量
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妊娠期肝内胆汁淤积症患者外周血中维生素D水平及维生素D受体的表达相关性研究 认领 被引量:2
8
作者 胡健蓉 徐健红 黄小霞 《中国优生与遗传杂志》 2015年第2期56-58,共3页
目的通过检测妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者外周血中维生素D的浓度及维生素D受体(VDR)的表达水平,来研究维生素D对ICP的影响。方法对35例轻度ICP、35例重度ICP及35例正常孕妇收集相关资料(孕周、妊娠并发症、维生素D摄入、钙片摄... 目的通过检测妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者外周血中维生素D的浓度及维生素D受体(VDR)的表达水平,来研究维生素D对ICP的影响。方法对35例轻度ICP、35例重度ICP及35例正常孕妇收集相关资料(孕周、妊娠并发症、维生素D摄入、钙片摄入等),分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)及实时荧光定量检测三组孕产妇外周血中的维生素D含量及VDR m RNA的表达情况。结果 (1)重度ICP组外周血中维生素D的浓度及VDR m RNA的表达水平均明显低于轻度ICP组(t=5.21、15.512,P=0.000、0.000);(2)轻度ICP组外周血中维生素D的浓度与正常组比较无明显差异(t=1.06,P=0.23);(3)轻度ICP组外周血中VDR m RNA的表达水平明显低于正常组(t=-19.34,P=0.000)。结论重度ICP患者容易引起维生素D缺乏,VDR的表达在不同程度的ICP患者中均低于正常孕妇,ICP的发病可能与维生素D有一定的关系。 展开更多
关键词 维生素D 酶联免疫吸附试验 荧光定量 妊娠期肝内胆汁淤积症
BCR-ABL融合基因核酸检测试剂的研发及临床应用 认领
9
作者 付朝泓 李艳 +1 位作者 童永清 陈占国 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第6期52-55,59共5页
目的研发同时检测多种BCR-ABL融合基因类型的试剂并建立相对应的荧光定量检测方法,同时进行临床标本检测。方法检索GeneBank等生物信息数据库,获得BCR—ABL基因可能的融合亚型,对亚型之间的序列进行比对并设计BCR—ABL融合基因特异... 目的研发同时检测多种BCR-ABL融合基因类型的试剂并建立相对应的荧光定量检测方法,同时进行临床标本检测。方法检索GeneBank等生物信息数据库,获得BCR—ABL基因可能的融合亚型,对亚型之间的序列进行比对并设计BCR—ABL融合基因特异性引物,从而应用质粒建立新的荧光定量体系。收集武汉大学人民医院2014年1月1日-11月31日住院部确诊为初发白血病患者30例,其中慢性髓细胞白血病15例,急性淋巴细胞白血病15例,另同时收集体检中心健康对照20例。应用新建立体系、商品试剂盒及直接测序法进行BCR—ABl。融合基因的检测。结果新建荧光定量PCR体系准确度验证结果阳性符合率为100%,阴性符合率为100%;特异性验证结果各干扰项检测均为阴性;可检测11种融合基因类型。对BCR—ABL融合基因亚型e13a2,e14a2和e1a2的检测新方法阳性符合率为100%(10/10),阴性符合率为100%(5/5)。对稀有融合基因亚型e19a2检测新方法检测阳性率100%(2/2),商品试剂盒检测阳性率为0%(0/2)。新方法与直接测序法相比阳性符合率为100%(16/16),阴性符合率为100%(14/14)。结论以研发的BCRABL融合基因检测试剂而建立的荧光定量方法检测BCR—ABL融合基因与测序结果符合率为100%,是一种快速、可靠的检测方法,可应用于临床。 展开更多
关键词 BCR—ABL 融合基因 荧光定量 白血病
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家蚕滞育激素受体基因的克隆及在多化性和二化性品种间的表达差异 认领 被引量:1
10
作者 何庆玲 钱荷英 +4 位作者 孙平江 罗旭芳 李刚 张月华 徐安英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期19-24,共6页
为探究无滞育多化性家蚕品种‘MF'体外注射滞育激素(DH)后不能产下滞育卵这一现象是否与DH诱导的下游信号通路受阻有关,丰富鳞翅目昆虫的滞育发生机理,本研究从滞育激素信号接受器——滞育激素受体(DHR)人手,从该家蚕‘MF'品种中... 为探究无滞育多化性家蚕品种‘MF'体外注射滞育激素(DH)后不能产下滞育卵这一现象是否与DH诱导的下游信号通路受阻有关,丰富鳞翅目昆虫的滞育发生机理,本研究从滞育激素信号接受器——滞育激素受体(DHR)人手,从该家蚕‘MF'品种中克隆了DHR基因的全长cDNA,结构分析表明该基因编码的蛋白质与其他家蚕品种存在差异。运用半定量RT-PCR及qRT-PCR技术检测滞育激素受体基因在不同家蚕品种蛹期的血液和卵巢以及同一家蚕品种‘MF'5龄幼虫的不同组织(血液、头部、脂肪体、丝腺、中肠及卵巢)中的表达水平。结果表明:DHR在家蚕‘MF'品种幼虫的5个组织中都有表达,在血液和卵巢组织中表达较高;另外该基因的表达水平在不同化性家蚕品种存在差异,即使在同为无滞育多化性的2个品种间也存在显著差异,在‘MF'品种中的表达水平明显低于‘尼斯塔里'。推测滞育激素受体的表达量不足可能与‘MF'品种蛹期注射滞育激素不能产生滞育卵有一定的关联。 展开更多
关键词 家蚕 滞育激素受体 基因表达 家蚕品种 化性 实时荧光定量PCR
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胃癌组织中MMP-11 mRNA的表达及临床意义 认领 被引量:1
11
作者 徐大方 陈平 +3 位作者 赵群 赵伟 石磊 蒋健 《实用临床医药杂志》 CAS 2012年第15期32-34,43共4页
目的研究基质金属蛋白酶11(MMP-11)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用荧光定量PCR方法检测40例胃癌组织和40例癌旁组织中的MMP-11mRNA的表达。结果荧光定量PCR检测胃癌组织及癌旁组织中MMP-11mRNA的表达水平发现癌组织中的MMP-1... 目的研究基质金属蛋白酶11(MMP-11)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用荧光定量PCR方法检测40例胃癌组织和40例癌旁组织中的MMP-11mRNA的表达。结果荧光定量PCR检测胃癌组织及癌旁组织中MMP-11mRNA的表达水平发现癌组织中的MMP-11mRNA表达显著高于癌旁组织(P〈0.05),MMP-11mRNA的表达与胃癌淋巴转移以及分期相关(P〈0.05),与患者年龄、性别及分化程度及大小无关。结论 MMP-11mRNA在胃癌组织中的高表达,与胃癌的发生发展密切相关。MMP-11很有可能在胃癌的发病机制中起着重要的作用。 展开更多
关键词 胃癌 基质金属蛋白酶 荧光定量
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实时荧光定量PCR技术的研究进展与应用 认领 被引量:42
12
作者 钟江华 张光萍 柳小英 《氨基酸和生物资源》 CAS 2011年第2期 68-72,共5页
实时荧光定量PCR技术(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高、速度快、全封闭反应等优点在人类和动物疾病的快速检测、食品安全检测、定量分析、基因分型、基因... 实时荧光定量PCR技术(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高、速度快、全封闭反应等优点在人类和动物疾病的快速检测、食品安全检测、定量分析、基因分型、基因表达研究、以及疫苗效力测定中成为分子生物学研究的重要工具,而且其定量范围极宽,无需做梯度稀释,特异性更强,克服了假阳性。本文分别从实时荧光定量PCR技术的背景、原理、类型、技术优点和定量方法、实验条件和主要影响因素、应用前景以及存在的不足等方面作了一个综述。 展开更多
关键词 荧光定量 PCR 原理 应用
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主动外排泵在铜绿假单胞菌多药耐药机制中的作用实验研究 认领 被引量:12
13
作者 吴春明 宋建新 +2 位作者 曹家麟 朱小区 欧阳钦 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1721-1723,共3页
目的采用荧光定量RT-PCR的方法检测铜绿假单胞菌MexAB-Opr M、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-Opr M、MexGHI-OpmD 5种外排泵表达情况,探讨主动外排泵在多药耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)耐药机制中的作用。方法采用分子克隆技术,构建克隆... 目的采用荧光定量RT-PCR的方法检测铜绿假单胞菌MexAB-Opr M、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-Opr M、MexGHI-OpmD 5种外排泵表达情况,探讨主动外排泵在多药耐药铜绿假单胞菌(MDRPA)耐药机制中的作用。方法采用分子克隆技术,构建克隆载体pMD18-T-mexB、pMD18-T-mexD、pMD18-T-mexF、pMD18-T-mexF、pMD18-T-mexY及pMD18-T-rpsL作为定量模板,建立标准曲线;采用荧光定量RT-PCR检测并分析30株MDRPA临床分离株外排基因mexB、mexD、mexF、mexH、mexY的mRNA表达。结果成功构建pMD18-T-mexB、pMD18-T-mexD、pMD18-T-mexF、pMD18-T-mexF、pMD18-T-mexY及pMD18-T-rpsL的标准曲线;在30株MDRPA中,16株高表达MexAB-Opr M(53.33%),7株高表达MexCD-OprJ(23.33%),8株高表达MexEF-OprN(26.67%),2株高表达MexGHI-OpmD(6.67%),3株高表达MexXY-Opr M(10.00%)。结论主动外排泵在多药耐药铜绿假单胞菌耐药机制中起着重要作用。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 荧光定量 聚合酶链反应 多药耐药 主动外排泵
呼吸道合胞病毒实时荧光RT-PCR定量检测方法的建立 认领 被引量:2
14
作者 何瑰 程春燕 陈娟 《分子诊断与治疗杂志》 2009年第3期161-164,共4页
目的建立实时荧光RT-PCR(real-time fluorescent reverse transcriptase PCR,real-time fluorescent RT-PCR)一步法定量检测人呼吸道合胞病毒的方法。方法以人呼吸道合胞病毒基因的保守序列为模板设计特异性引物和探针,通过优化相关反... 目的建立实时荧光RT-PCR(real-time fluorescent reverse transcriptase PCR,real-time fluorescent RT-PCR)一步法定量检测人呼吸道合胞病毒的方法。方法以人呼吸道合胞病毒基因的保守序列为模板设计特异性引物和探针,通过优化相关反应体系和条件,建立实时荧光RT-PCR一步法检测样本中呼吸道合胞病毒的方法;对方法的特异性,灵敏度,重复性进行了评价。结果本研究建立的实时荧光RT-PCR一步法检测方法特异性好,灵敏度可以达到500PFU/mL,重复性Ct值的变异系数均小于5%。结论本研究建立的实时荧光RT-PCR定量检测方法可靠、准确、简便、稳定。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 荧光定量 RT-PCR
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婴幼儿人巨细胞病毒感染154例PCR与ELISA检测比较 认领 被引量:5
15
作者 缪美华 邵雪君 +2 位作者 朱宏 徐俊 丁云芳 《南通大学学报:医学版》 2009年第6期,共2页
目的:探讨采用不同的定量方法及不同的标本检测婴幼儿人巨细胞病毒(HCMV)感染阳性率。方法:采用荧光定量PCR法和ELISA定量法分别对154例疑感染HCMV住院患儿进行HCMV DNA和HCMV IgM抗体的定量检测,其中对73例患儿的血及尿标本同时进行HCM... 目的:探讨采用不同的定量方法及不同的标本检测婴幼儿人巨细胞病毒(HCMV)感染阳性率。方法:采用荧光定量PCR法和ELISA定量法分别对154例疑感染HCMV住院患儿进行HCMV DNA和HCMV IgM抗体的定量检测,其中对73例患儿的血及尿标本同时进行HCMV DNA的检测。结果:血和尿HCMV DNA同时检测,尿检出率明显高于血;血和尿HCMVDNA检出率明显高于血清HCMV IgM;两种方法的联合检测进一步提高阳性率。结论:两种方法同时检测可提高HCMV的检出率;尿标本HCMV DNA的检出率明显高于血标本,采用尿标本更方便,且阳性率高。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 荧光定量 聚合酶链反应 人巨细胞病毒IgM抗体 儿童
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骨髓间充质干细胞在全身照射大鼠体内分布实验研究 认领
16
作者 白守民 梁碧玲 +3 位作者 李志伟 韩非 陈春燕 卢泰祥 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第2期125-129,共5页
目的用荧光定量RT—PCR方法探讨骨髓间充质干细胞在大鼠经过全身照射后其体内分布的状况,为进一步研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对正常组织器管放射性损伤的治疗提供理论依据。方法培养MSCs细胞,用绿色荧光蛋白标记。分别对大鼠行全... 目的用荧光定量RT—PCR方法探讨骨髓间充质干细胞在大鼠经过全身照射后其体内分布的状况,为进一步研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对正常组织器管放射性损伤的治疗提供理论依据。方法培养MSCs细胞,用绿色荧光蛋白标记。分别对大鼠行全身照射及全身照射+全脑照射,经尾静脉注入标记的MSCs,荧光显微镜观察MSCs在各器官的分布,荧光定量RT-PCR检测MSCs在不同组织器官的分布。结果获得绿色荧光标记MSCs,经尾静脉注入各实验组大鼠体内后显示,未行照射时MSCs仅少量分布在肺、骨髓、脾中;6Gy全身照射后各器官MSCs的分布明显增加,小肠、骨髓等早反应组织增加的更显著;7Gy全身照射进一步增加了各器官MSCs数量;6Gy全身照射+全脑照射20Gy后MSCs在大脑的分布明显增多,在其他器官的发布也明显增加。结论放射损伤可诱导MSCs产生趋化作用;MSCs在各器官分布随照射剂量及放射损伤程度增加而增多;局部照射可增加局部及其他器官MSCs分布。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 荧光定量 逆转录聚合酶链反应 照射 大鼠
住院8天过敏性紫癜患儿肠道菌群的变化研究 认领 被引量:12
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作者 娄俊丽 黄永坤 +3 位作者 刘梅 刘华 李琪 李海林 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期410-414,共5页
目的研究住院1~8d过敏性紫癜患儿肠道菌群的变化。方法(1)提取43例过敏性紫癜患儿(观察组)住院1~8d和43例健康儿童(对照组)粪便标本的细菌DNA,测量并比较对照组和观察组标本细菌的DNA-A240值;(2)采用16SrRNA/DNA荧光定量PC... 目的研究住院1~8d过敏性紫癜患儿肠道菌群的变化。方法(1)提取43例过敏性紫癜患儿(观察组)住院1~8d和43例健康儿童(对照组)粪便标本的细菌DNA,测量并比较对照组和观察组标本细菌的DNA-A240值;(2)采用16SrRNA/DNA荧光定量PCR技术进行对照组和观察组粪便标本中双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠埃希菌的定量分析和比较。结果(1)粪便标本中细菌的DNA-A240值分别为:对照组d0(3605.9±1096.9)ng/μl,观察组治疗前1天d1(2225.9±616.1)ng/μl,治疗第3~4天d2(1780.3±547.4)ng/μl,治疗第7~8天d3(2055.6±570.2)ng/μl;对照组和观察组治疗前以及观察组治疗不同时期相比,d0与d1差异有显著性(P〈0.05),d1与d2差异有显著性(P〈0.05),d1与d3差异有显著性(P〈0.05),d2与d3差异无显著性(P〉0.05);(2)粪便标本中3种细菌量的对数值比较差异均有显著性(P〈0.05)。观察组双歧杆菌和乳酸杆菌数量在治疗第3—4天较低,第7—8天有所回升;大肠埃希菌的对数值亦有减少,治疗第3—4天较低,但第7~8天没有明显回升。结论(1)过敏性紫癜患儿肠道菌群总DNA-A260量和健康儿童相比有减少;(2)过敏性紫癜患儿肠道双歧杆菌、乳酸杆菌和大肠埃希菌量与正常儿童相比有下降,治疗的第7天有回升的趋势。过敏性紫癜患儿肠道益生菌数量减少可能影响其发病和转归。 展开更多
关键词 过敏性紫癜 肠道菌群 荧光定量 PCR
16S rRNA/DNA-PCR对初生新生儿肠道乳酸杆菌和大肠埃希菌的动态检测 认领 被引量:10
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作者 杨武 刘华 +5 位作者 曹志琅 梁琨 李利 黄永坤 贺湘英 李海林 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期 356-358,共3页
目的观察新生儿生后肠道菌群的动态变化。方法采用16S rRNA/DNA荧光定量PCR技术,分别对40例足月儿和40例早产儿生后第1(〉12h)、4、7天粪便标本中的乳酸杆菌和大肠埃希菌进行定量分析。结果不同日龄足月儿粪便标本中乳酸杆菌数量的对... 目的观察新生儿生后肠道菌群的动态变化。方法采用16S rRNA/DNA荧光定量PCR技术,分别对40例足月儿和40例早产儿生后第1(〉12h)、4、7天粪便标本中的乳酸杆菌和大肠埃希菌进行定量分析。结果不同日龄足月儿粪便标本中乳酸杆菌数量的对数值分别为5.50±0.81、6.87±0.81、9.20±0.87,早产儿分别为4.89±0.46、6.05±0.46、8.06±0.18;不同日龄足月儿粪便标本中大肠埃希菌数量的对数值分别为6.49±0.40、7.59±0.58、7.15±0.55,早产儿分别为6.32±0.51、7.39±0.78、7.05±0.63;2种细菌对数值分别在组间行单因素方差分析,差异有显著性(P〈0.05);组内行配对t检验,差异也有显著性(P〈0.05)。结论新生儿肠道菌群的建立是动态变化的,个体间差异受多因素影响,早产儿落后于足月儿。 展开更多
关键词 新生儿 肠道菌群 荧光定量 PCR
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全脑缺血-再灌注鼠STAT3基因的表达 认领 被引量:3
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作者 方舒东 姜虹 朱也森 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期 52-54,共3页
目的研究鼠海马组织中信号转导与转录激活子-3(STAT3)mRNA在短暂性全脑缺血-再灌注过程中的表达变化。方法将健康雄性SD大鼠25只,随机均分为全脑缺血-再灌注4、24、48、72h组和假手术组。以“双侧颈总动脉阻断加全身低血压法”建立... 目的研究鼠海马组织中信号转导与转录激活子-3(STAT3)mRNA在短暂性全脑缺血-再灌注过程中的表达变化。方法将健康雄性SD大鼠25只,随机均分为全脑缺血-再灌注4、24、48、72h组和假手术组。以“双侧颈总动脉阻断加全身低血压法”建立大鼠短暂性全脑缺血模型,采用实时荧光定量PCR技术观察大鼠缺血性脑损伤海马组织中STAT3 mRNA的变化。结果短暂性全脑缺血后海马组织STAT3 mRNA的表达增强,再灌注24h达高峰。结论短暂性全脑缺血-再灌注后STAT3 mRNA的活化及超量表达可能介导了缺血神经细胞信号传导过程,并参与了脑神经细胞损伤的病理生理过程。 展开更多
关键词 脑缺血-再灌注 信号转导与转录激活子-3 逆转录聚合酶链反应 荧光定量
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婴儿配方粉中阪崎肠杆菌荧光定量PCR检测方法的建立 认领 被引量:3
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作者 卢雁 王淼 +3 位作者 房玉国 王旻 王宇 赵长利 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2008年第7期 47-49,56,共4页
建立奶粉中阪崎肠杆菌荧光定量PCR检测方法,为准确、快速地定量检测阪崎肠杆菌奠定基础。根据阪崎肠杆菌16S rDNA基因序列,设计特异引物和荧光标记探针并合成,用PCR扩增产物克隆的重组质粒作为阳性对照,经紫外分光光度计测定重组质... 建立奶粉中阪崎肠杆菌荧光定量PCR检测方法,为准确、快速地定量检测阪崎肠杆菌奠定基础。根据阪崎肠杆菌16S rDNA基因序列,设计特异引物和荧光标记探针并合成,用PCR扩增产物克隆的重组质粒作为阳性对照,经紫外分光光度计测定重组质粒浓度.梯度稀释后作为标准品绘制标准曲线,其Ct值与模板浓度有良好的线形关系,相关系数R^2值为:0.997,可以用于阪崎肠杆菌浓度鉴定。用该方法检测阪崎肠杆菌样品21份,阳性4份,阳性检出率为19%,与常规检测方法结果完全符合。本文建立的检测阪崎肠杆菌的荧光定量PCR方法,较常规技术更为简便、快速,有很好的应用前景和研究价值。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌 荧光定量 阈值
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