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舌癌单细胞培养建系与癌干细胞相关标志的检测 预览 被引量:3
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作者 姚金光 解继胜 +3 位作者 李俊 韦星 杨永荣 陈海波 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期86-90,共5页
目的以舌癌Tea8113M1细胞系单细胞培养建系为基础,观察Tea8113M1细胞系中舌癌干细胞存在的现象及其相关标志的变化规律。方法选取Tca8113M1细胞系,以有限稀释法进行体外单细胞培养并建立细胞亚系,在证实其成瘤性的基础上,进一步采... 目的以舌癌Tea8113M1细胞系单细胞培养建系为基础,观察Tea8113M1细胞系中舌癌干细胞存在的现象及其相关标志的变化规律。方法选取Tca8113M1细胞系,以有限稀释法进行体外单细胞培养并建立细胞亚系,在证实其成瘤性的基础上,进一步采用流式细胞术检测癌干细胞相关标志CD44、CD184、细胞外可溶性抗原(ESA)的表达情况,着重观察单个细胞培养形成细胞克隆的形态与时间。结果以有限稀释法获取192个Tea8113M1舌癌单个细胞,在96孔板中进行体外培养,获取12个细胞亚系(获取比例为6.25%),均有高成瘤性。癌干细胞相关标志CD44与ESA均为高水平表达,而CD184表达则在12个细胞系之间有差异。在单个细胞培养中,形成完全克隆、部分克隆与旁克隆3种形态,12个细胞亚系均源于单个细胞形成的完全克隆,均可进行连续传代与扩增,而部分克隆与旁克隆则在后续培养中逐渐衰老与消亡。结论Tea8113M1细胞系中可能存在癌干细胞,而单细胞培养可形成完全克隆并建立细胞亚系,是进行舌癌干细胞后续研究重要的细胞培养模式。 展开更多
关键词 单细胞 有限稀释法 舌癌干细胞 完全克隆
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全克隆与肿瘤干细胞 被引量:1
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作者 周志华(综述) 王卫兵(综述) 张建东(综述) 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2011年第5期 420-423,共4页
干细胞在体外单个培养时,形成的克隆具有规则而致密的形态,这种独特的克隆被称为全克隆。近年来发现肿瘤内也存在具有干细胞特性的肿瘤细胞,即肿瘤干细胞,是肿瘤发生、复发和转移的根源。而研究证实,多种类型的肿瘤干细胞在体外单克隆... 干细胞在体外单个培养时,形成的克隆具有规则而致密的形态,这种独特的克隆被称为全克隆。近年来发现肿瘤内也存在具有干细胞特性的肿瘤细胞,即肿瘤干细胞,是肿瘤发生、复发和转移的根源。而研究证实,多种类型的肿瘤干细胞在体外单克隆培养亦可形成特征性的全克隆,这对分离富集肿瘤干细胞及深入研究其生物学特性具有重要意义。全克隆可望作为肿瘤干细胞研究一个有用的体外模型。 展开更多
关键词 全克隆 肿瘤干细胞 克隆
阿霉素对肾上腺皮质癌细胞系SW-13克隆特性的影响
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作者 曾文清 陈小舟 +3 位作者 黄振兴 杨海燕 邝晓聪 罗佐杰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期343-346,共4页
目的:研究阿霉素在体干预对肾上腺皮质癌系SW-13克隆特性的影响。方法:通过建立阿霉素干预裸鼠连续传代SW-13细胞系皮下移植瘤模型,将空白组及实验组细胞进行单细胞克隆行成试验,观察单个细胞生长曲线,并计算克隆形成率及3种克隆... 目的:研究阿霉素在体干预对肾上腺皮质癌系SW-13克隆特性的影响。方法:通过建立阿霉素干预裸鼠连续传代SW-13细胞系皮下移植瘤模型,将空白组及实验组细胞进行单细胞克隆行成试验,观察单个细胞生长曲线,并计算克隆形成率及3种克隆(全克隆、部分克隆和旁克隆)的百分比,并进行Hoechst33342试验检测细胞的耐药性。结果:SW-13细胞系经过阿霉素干预裸鼠连续传代移植瘤模型后,克隆形成率较空白对照组增加(P〈0.05);全克隆的百分比高于空白对照组(P〈0.05);经Hoeehst33342试验发现经阿霉素干预肾上腺皮质癌细胞荧光减弱。结论:阿霉素在体干预提高肾上腺皮质癌细胞系SW-13的克隆形成能力及全克隆形成能力,并提高其耐药性。 展开更多
关键词 肾上腺皮质肿瘤 克隆 全克隆 阿霉素 BALB/c-nu裸鼠
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Isolation and Identification of Putative Oral Cancer Stem Cells 被引量:1
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作者 张敏 汤晓飞 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期389-392,396共5页
目的:分离鉴定口腔鳞癌细胞系Tca8113中的肿瘤干细胞。方法:利用有限稀释的方法分离Tca8113细胞系中的肿瘤干细胞。通过MTT法、流式细胞技术、细胞免疫荧光、克隆形成率分析、细胞迁移能力检测和裸鼠皮下成瘤实验确定分离得到的肿瘤... 目的:分离鉴定口腔鳞癌细胞系Tca8113中的肿瘤干细胞。方法:利用有限稀释的方法分离Tca8113细胞系中的肿瘤干细胞。通过MTT法、流式细胞技术、细胞免疫荧光、克隆形成率分析、细胞迁移能力检测和裸鼠皮下成瘤实验确定分离得到的肿瘤干细胞的生物学特点。结果:分离得到的紧密型克隆肿瘤细胞表现为异倍体样细胞周期,大部分细胞处于GO/G1期,增殖能力、克隆形成率和体外迁移能力都明显高于未分离的肿瘤细胞。紧密型克隆肿瘤细胞肿瘤于细胞标记物ABCG2表达也高于未分离的肿瘤细胞,并且具有更强的裸鼠皮下成瘤能力。结论:我们分离得到的紧密型克隆细胞具有较强的细胞增殖和自我更新能力,可能就是口腔鳞癌细胞系Tca8113中的肿瘤于细胞。 展开更多
关键词 紧密型克隆 肿瘤干细胞 TCA8113 鉴定
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基于耐药特性联合单细胞培养识别肝癌干细胞克隆亚群 被引量:1
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作者 陈娟 区泳芳 +3 位作者 蔡捷 陶璐 陈相宜 邝晓聪 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期319-326,共8页
目的:基于癌干细胞的耐药特性联合单细胞培养方法识别肝癌干细胞所在的克隆亚群.方法:以BEL-7404细胞系为研究对象,裸鼠体内移植瘤形成实验,并予阿霉素(adriamycin,ADM)8 mg/kg干预,待肿瘤直径为1.5 cm时取移植瘤细胞做原代培养,并... 目的:基于癌干细胞的耐药特性联合单细胞培养方法识别肝癌干细胞所在的克隆亚群.方法:以BEL-7404细胞系为研究对象,裸鼠体内移植瘤形成实验,并予阿霉素(adriamycin,ADM)8 mg/kg干预,待肿瘤直径为1.5 cm时取移植瘤细胞做原代培养,并在裸鼠体内连续传代4代,并将第4代移植瘤细胞命名为"BEL-7404-ADM-P4",根据成瘤时间检测肝癌干细胞富集情况.联合单细胞培养,取BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4所形成的克隆根据克隆形态分为全克隆、部分克隆、旁克隆,检测BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆的癌干特性,即增殖能力、克隆形成率及悬浮球形成率;取其全克隆、部分克隆、旁克隆做hoechst33342染色,并在共聚焦显微镜下观察其染色情况;根据BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆的增殖能力、克隆形成率及悬浮球形成率以及hoechst33342染色情况识别癌干细胞所在的克隆亚群.结果:裸鼠体内低剂量阿霉素干预,在体内连续成瘤传代过程中,裸鼠皮下移植瘤成瘤率均为100%,且成瘤时间从第一代到第四代均有所缩短,以此达到了肝癌干细胞的初步富集;增殖能力:全克隆增殖速度最快,细胞量最大,部分克隆次之,旁克隆增殖速度最慢,并于第10天开始出现细胞皱缩死亡;克隆形成率:BEL-7404-ADM-P4-H高于BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4-M,差异有统计学意义(P〈0.05);悬浮球形成率:仅BEL-7404-H及BEL-7404-ADM-P4-H可形成悬浮球,其余细胞系不形成悬浮球,而BEL-7404-H及BEL-7404-ADM-P4-H悬浮球形成率比较,无统计学意义(P〉0.05);BEL-7404及BEL-7404-ADM-P4单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆hoechst33342染色情况:BEL-7404及BEL-7404-A D M-P4单克隆中全克隆都有极少数不染和低染的细胞存在,但部分克隆、旁克隆全染,且BEL-7404单克隆中全克隆、部分克隆、旁克隆hoechst33342荧光强度均强� 展开更多
关键词 阿霉素干预 肝癌干细胞 单细胞培养 全克隆 部分克隆 旁克隆
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肝癌干细胞体外富集模式的构建 预览 被引量:1
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作者 杨帅 陈娟 +3 位作者 佘佐亚 陈相宜 蔡捷 邝晓聪 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第23期1-4,共4页
目的 构建肝癌干细胞体外富集模式。方法 选择肝母细胞瘤Hep G2细胞系,以有限稀释法培养体外单细胞,观察体外单细胞克隆培养的克隆细胞生长曲线和形成全克隆、部分克隆以及旁克隆的比例,选取全克隆逐级扩增,取1×104和1×106的H... 目的 构建肝癌干细胞体外富集模式。方法 选择肝母细胞瘤Hep G2细胞系,以有限稀释法培养体外单细胞,观察体外单细胞克隆培养的克隆细胞生长曲线和形成全克隆、部分克隆以及旁克隆的比例,选取全克隆逐级扩增,取1×104和1×106的Hep G2细胞进行裸鼠皮下成瘤实验,qRT-PCR检测全克隆癌干细胞表面标志物ABCG2、ALDH1A3、CD44、CXCR4、OCT4 mRNA,悬浮球形成实验计算全克隆悬浮球形成率。对全克隆细胞加0.5、0.3、0.2、0.1、0.05、0.01μg/m L浓度的阿霉素干预48 h,观察全克隆生长情况;对于干预后存活的全克隆全部进行逐级扩增和裸鼠荷瘤实验。结果 Hep G2细胞克隆形成率为32.78%±9.03%,其中全克隆、部分克隆、旁克隆百分比分别为7.12%±2.96%、62.67%±13.39%、30.21%±14.87%;所有全克隆均可逐级扩增;1×104、1×106个Hep G2细胞全克隆接种裸鼠成瘤率分别为12.5%、100%;与Hep G2细胞相比,单细胞全克隆ABCG2、CD44、ALDH1A3、CXCR4和OCT4表达倍数分别为2.26±0.33、2.67±0.55、3.96±1.56、2.56±0.55、1.05±0.40,两者ABCG2、ALDH1A3、CD44、CXCR4相比,P均〈0.05;只有Hep G2全克隆细胞可形成悬浮球。单细胞克隆培养后的全克隆进行阿霉素干预,发现仅加入0.1、0.05、0.01μg/m L阿霉素的Hep G2细胞全克隆存活,接种裸鼠成瘤率均为100%。结论 成功构建了肝癌干细胞体外富集模式。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 肝癌干细胞 细胞全克隆 细胞培养
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