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利用荧光定量PCR和荧光定量RT-PCR检测猪瘟活疫苗(细胞源)中的16种外源病毒 预览
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作者 孙博 宋新刚 +6 位作者 张萌萌 张健 高习文 张立恒 尹辉 郭伟 任德强 《现代畜牧科技》 2019年第1期1-4,共4页
本文为分子生物学方法检测猪瘟活疫苗(细胞源)外源病毒提供实验数据。用经过验证的荧光定量PCR和荧光定量RT-PCR方法检测哈尔滨元亨生物药业有限公司生产的24批猪瘟活疫苗(细胞源)中的16种外源病毒(FMDV、PCV2、CSFVW、BCoV、BVDV、BPI... 本文为分子生物学方法检测猪瘟活疫苗(细胞源)外源病毒提供实验数据。用经过验证的荧光定量PCR和荧光定量RT-PCR方法检测哈尔滨元亨生物药业有限公司生产的24批猪瘟活疫苗(细胞源)中的16种外源病毒(FMDV、PCV2、CSFVW、BCoV、BVDV、BPIV-3、TGEV、PEDV、RV、PRRSV、PCV1、MRV、JEV、PPV、PRV、BHV-1),结果显示24批猪瘟活疫苗(细胞源)成品均无以上16种外源病毒。 展开更多
关键词 猪瘟活疫苗 PCR RT-PCR 外源病毒
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米槠叶片基因组DNA的提取及分析
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作者 林莉莉 郭丽倩 +3 位作者 陈潇潇 游章湉 游水生 曹世江 《福建林业科技》 2019年第2期25-29,共5页
以米槠(Castanopsis carlesii)群落的叶片为材料,采用改良的CTAB法提取米槠基因组DNA,并对获得的基因组DNA进行浓度检测、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测、含量测定分析以及扩增结果测序。结果表明:米槠叶片提取的基因组DNA质量和浓度较好... 以米槠(Castanopsis carlesii)群落的叶片为材料,采用改良的CTAB法提取米槠基因组DNA,并对获得的基因组DNA进行浓度检测、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳检测、含量测定分析以及扩增结果测序。结果表明:米槠叶片提取的基因组DNA质量和浓度较好,具有良好的完整性,PCR效果好,电泳图谱条带显示清晰,测序结果长度符合要求。利用该方法提取的DNA可用于米槠遗传多样性的分析,可进一步为米槠和格氏栲等其它栲属植物的DNA提取以及其它分子研究提供参考。 展开更多
关键词 米槠 DNA提取 CTAB PCR
PCR结合毛细管电泳技术用于FMR1基因前突变家系分析 预览
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作者 谢建红 余洁 +3 位作者 胡利清 周玉球 陈兴 邱显荣 《检验医学与临床》 CAS 2019年第15期2117-2119,共3页
目的应用PCR结合毛细管电泳技术检测FMR1基因CGG重复数并对一个前突变家系进行分析。方法采用PCR结合毛细管电泳方法检测FMR1基因前突变家系成员的CGG重复数。结果咨询者CGG重复数为54/55,父亲为56,母亲为32/55,妹妹为33/58,弟弟为54,... 目的应用PCR结合毛细管电泳技术检测FMR1基因CGG重复数并对一个前突变家系进行分析。方法采用PCR结合毛细管电泳方法检测FMR1基因前突变家系成员的CGG重复数。结果咨询者CGG重复数为54/55,父亲为56,母亲为32/55,妹妹为33/58,弟弟为54,丈夫为37。结论PCR结合毛细管电泳技术能快速检测FMR1基因CGG重复数,并能对FMR1基因前突变进行准确诊断。 展开更多
关键词 脆性X综合征 FMR1基因 前突变 PCR 毛细管电泳
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胎儿弯曲菌PCR检测方法的建立及其初步应用 预览
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作者 唐虹 徐仲兰 +4 位作者 孔科 唐海燕 范正杨 焦新安 黄金林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期694-698,共5页
目的建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法。方法 以胎儿弯曲菌表面蛋白基因 sapB2 为靶基因,应用软件设计特异性引物,通过反应条件的优化,引物敏感性、特异性和灵敏度的试验以及模拟污染样品的检测,建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法并应用于临... 目的建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法。方法 以胎儿弯曲菌表面蛋白基因 sapB2 为靶基因,应用软件设计特异性引物,通过反应条件的优化,引物敏感性、特异性和灵敏度的试验以及模拟污染样品的检测,建立胎儿弯曲菌PCR快速检测方法并应用于临床样品检测。结果该研究建立的PCR方法能特异性扩增胎儿弯曲菌 sapB2 (789 bp)基因片段,空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、唾液弯曲菌和豚肠弯曲菌以及其他17株参考菌如大肠杆菌、沙门菌等均未扩增出条带;胎儿弯曲菌纯培养物最低可检出0.23 pg/μL的DNA,模拟感染样品污水和奶牛粪便样品中胎儿弯曲菌的最低检出量分别为0.9 CFU/mL和20 CFU/g;临床样品检测中,400份奶牛肛门擦拭样品和125份产妇阴道擦拭样品的PCR检测结果均为胎儿弯曲菌阴性,与传统的平板分离方法同步检测结果一致。结论 所建立的胎儿弯曲菌PCR检测方法具有特异性强、敏感度高、简便快速等特点,为胎儿弯曲菌的快速检测提供了技术支持,对识别该菌株的暴发流行,相关疾病的诊断和控制具有重要意义。 展开更多
关键词 胎儿弯曲菌 PCR 快速检测
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两种PCR法试剂盒用于结核分枝杆菌检测价值比较 预览
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作者 张欣 《中国卫生标准管理》 2019年第15期120-122,共3页
目的探讨抗酸染色法、CapitalBio及Qiagen RTFQ-PCR试剂盒用于结核分枝杆菌检测临床价值差异。方法选取本院2015年3月-2018年8月收治确诊结核病患者共120例,分别采用抗酸染色法、CapitalBio及Qiagen RTFQ-PCR试剂盒进行结核分支杆菌检测... 目的探讨抗酸染色法、CapitalBio及Qiagen RTFQ-PCR试剂盒用于结核分枝杆菌检测临床价值差异。方法选取本院2015年3月-2018年8月收治确诊结核病患者共120例,分别采用抗酸染色法、CapitalBio及Qiagen RTFQ-PCR试剂盒进行结核分支杆菌检测,比较不同组用于结核分支杆菌检测阳性率。结果抗酸染色法、CapitalBio及Qiagen RTFQ-PCR试剂盒结核分支杆菌检出阳性率分别为53.33%(64/120),57.50%(69/120),80.83%(97/120);Qiagen RTFQ-PCR试剂盒结核分支杆菌检出阳性率显著高于抗酸染色法、CapitalBio RTFQPCR试剂盒(P <0.05);同时抗酸染色法和CapitalBio RTFQ-PCR试剂盒结核分支杆菌检出阳性率比较差异无显著性(P> 0.05)。结论PCR法用于结核病结核分枝杆菌检测敏感性优于抗酸染色法,其中优选Qiagen RTFQ-PCR法试剂盒;但CapitalBio RTFQ-PCR试剂盒能够实现结核分枝杆菌和非结核分支杆菌鉴别诊断。 展开更多
关键词 抗酸染色法 PCR 结核分枝杆菌 检测 实验室 价值
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河南部分地区湖羊血液无浆体感染情况调查 预览
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作者 宁晓冬 崔艳艳 +6 位作者 闫亚群 王晓星 史柯 王坤轮 周永春 宁长申 菅复春 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期563-567,共5页
为了解湖羊血液无浆体病的流行情况,采用巢式PCR对采自河南省驻马店、洛阳、安阳、汝州市共4个地区湖羊的165份血液样品,基于无浆体16S rRNA和MSP4基因进行检测。结果表明,共测出嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum)、牛无浆体... 为了解湖羊血液无浆体病的流行情况,采用巢式PCR对采自河南省驻马店、洛阳、安阳、汝州市共4个地区湖羊的165份血液样品,基于无浆体16S rRNA和MSP4基因进行检测。结果表明,共测出嗜吞噬细胞无浆体(Anaplasma phagocytophilum)、牛无浆体(A.bovis)和绵羊无浆体(A.ovis)3种无浆体,阳性率分别为1.21%(2/165)、9.70%(16/165)和24.85%(41/165);无浆体总阳性率为32.73%(54/165)。表明湖羊无浆体感染普遍存在,不同饲养方式、不同年龄湖羊的无浆体阳性率存在差异。 展开更多
关键词 湖羊 无浆体 PCR 流行病学
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局部进展期直肠癌新辅助放化疗后病理完全反应相关临床因素的研究 预览
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作者 刘燕 曾敏 +1 位作者 张瑾熔 王海江 《新疆医科大学学报》 CAS 2019年第8期1015-1020,共6页
目的探讨局部进展期直肠癌新辅助放化疗后病理完全反应(pathologic complete response,pCR)相关的临床因素。方法回顾性分析新疆医科大学附属肿瘤医院2010年1月1日-2017年12月31日收治的接受新辅助放化疗联合全直肠系膜切除术(total mes... 目的探讨局部进展期直肠癌新辅助放化疗后病理完全反应(pathologic complete response,pCR)相关的临床因素。方法回顾性分析新疆医科大学附属肿瘤医院2010年1月1日-2017年12月31日收治的接受新辅助放化疗联合全直肠系膜切除术(total mesorectal excision,TME)治疗的289例直肠癌患者资料,分为pCR组(n=53,18.3%)和非pCR组(n=236,81.7%)。采用单因素和二元Logistic回归分析法、ROC曲线评估与pCR反应相关的临床因素。结果治疗前癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、肿瘤最大径是影响pCR反应的独立因素,治疗前糖链抗原72-4(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)(P=0.004)、分化程度(P=0.012)对pCR反应有影响;ROC曲线结果显示治疗前平均表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)值、ADC值增长率零阶矩曲线下面积(AUC)分别为0.648、0.746。结论治疗前CEA≤5 ng/mL、肿瘤最大径较短(≤3 cm)的患者获得pCR的机会更大,治疗前平均ADC值和增长比率在预测pCR中具有一定价值。 展开更多
关键词 直肠癌 新辅助放化疗 PCR 临床因素
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西藏曲水某水产养殖场螺内吸虫蚴虫的形态观察及PCR鉴定 预览
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作者 周磊 李云灿 +2 位作者 参木有 罗布次仁 李家奎 《高原农业》 2019年第5期506-509,514共5页
为研究西藏拉萨地区螺内寄生虫感染情况,采集了西藏曲水县某水产养殖场的螺进行压片镜检,观察寄生虫感染情况,统计寄生虫感染率并进行虫种鉴定。在螺内发现了雷蚴,统计分析其感染率为26.15%;提取寄生虫的DNA进行PCR反应并测序,发现其与... 为研究西藏拉萨地区螺内寄生虫感染情况,采集了西藏曲水县某水产养殖场的螺进行压片镜检,观察寄生虫感染情况,统计寄生虫感染率并进行虫种鉴定。在螺内发现了雷蚴,统计分析其感染率为26.15%;提取寄生虫的DNA进行PCR反应并测序,发现其与肝片吸虫同源性为82%。本次调查明确了本地区螺体内肝片吸虫的流行情况,对今后西藏地区肝片吸虫病的防控工作具有指导意义。 展开更多
关键词 肝片吸虫 PCR 西藏
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镇江地产腌渍蔬菜的安全性研究 预览
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作者 邹曙婷 肖香 祝莹 《粮食与食品工业》 2019年第4期24-28,共5页
本论文拟通过比较镇江地产罐装和散装腌渍蔬菜中亚硝酸盐等理化指标及优势腐败菌的差异,为指导腌渍蔬菜的安全性生产提供理论基础。结果表明:罐装腌渍蔬菜中亚硝酸盐含量均未超过国家标准,而散装腌渍蔬菜则全部超标;腌渍蔬菜的含水量均... 本论文拟通过比较镇江地产罐装和散装腌渍蔬菜中亚硝酸盐等理化指标及优势腐败菌的差异,为指导腌渍蔬菜的安全性生产提供理论基础。结果表明:罐装腌渍蔬菜中亚硝酸盐含量均未超过国家标准,而散装腌渍蔬菜则全部超标;腌渍蔬菜的含水量均超过60%,pH值均在4~6之间,总酸含量在1.2g/100g左右,属于低酸性食品,乳瓜和腌黄瓜在TSA培养基上的菌落数分别为3.78×10^2CFU/g和7.65×10^2CFU/g,辣白菜在MRS培养基上的菌落数为2.95×10^6CFU/g,泡菜在PDA培养基上的菌落数为2.49×10^3CFU/g。分离鉴定出的腐败菌主要有阿耶波多杆菌、黄瓜芽胞杆菌和沃氏葡萄球菌,还有一菌株与已知细菌的相似性都不高,可能是一个新种。 展开更多
关键词 腌渍蔬菜 腐败菌 理化指标 PCR
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新疆某猪场母猪繁殖障碍病病原学检测和毒株鉴定 预览
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作者 范士龙 刘丹丹 +2 位作者 韦丽婷 巴音查汗 张伟 《中国动物检疫》 CAS 2019年第9期83-87,共5页
2018年4月,新疆某规模化繁育猪场出现大量母猪流产,产死胎、木乃伊胎等繁育障碍症状。为确诊病因,采集胎儿组织和母猪流产分泌物,通过普通PCR、RT-PCR、real-timePCR技术,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病... 2018年4月,新疆某规模化繁育猪场出现大量母猪流产,产死胎、木乃伊胎等繁育障碍症状。为确诊病因,采集胎儿组织和母猪流产分泌物,通过普通PCR、RT-PCR、real-timePCR技术,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、弓形虫4种病原进行检测。结果显示,PRRSV检测呈阳性,PRV、PPV和弓形虫检测呈阴性。通过PRRSV特异性引物NSP2进行PRRSV毒株鉴定,确定该猪场存在PRRSV类NADC30毒株。结果表明,类NADC30毒株是导致该猪场出现母猪繁殖障碍的重要病原,说明该新型毒株已经蔓延到新疆地区,并开始对该地生猪养殖业造成危害。本试验为新疆地区猪场母猪繁殖障碍的病因调查提供了依据。 展开更多
关键词 母猪繁殖障碍 病原学检测 PCR 毒株鉴定 猪繁殖与呼吸综合征病毒
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房山区4种动物源性成分PCR检测试验 预览
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作者 田璐 王伟青 +1 位作者 肖海峻 杨新建 《北京农业职业学院学报》 2019年第4期26-29,共4页
本研究利用牛、羊、猪、鸡线粒体mtDNA中保守序列16srRNA,设计一对动物的通用引物,检测了含有动物源性成分的样品,同时设计了针对牛、羊、猪、鸡mtDNA中的保守序列,选择4对特异性引物,扩增得到目的片段大小分别为271bp、274bp、212bp和2... 本研究利用牛、羊、猪、鸡线粒体mtDNA中保守序列16srRNA,设计一对动物的通用引物,检测了含有动物源性成分的样品,同时设计了针对牛、羊、猪、鸡mtDNA中的保守序列,选择4对特异性引物,扩增得到目的片段大小分别为271bp、274bp、212bp和266bp。利用通用引物,优化了PCR反应体系及其反应条件,建立了从未知样品中快速获取动物源性成分检测的PCR方法;利用牛、羊、猪、鸡特异性引物,建立了PCR方法快速鉴定牛、羊、猪、鸡这4种动物源性成分的方法。 展开更多
关键词 动物源性成分 动物食品 PCR
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蓝狐牙釉质基因克隆及性别鉴定的应用 预览
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作者 朱柯郦 于新生 +2 位作者 姜恩泽 刘珈羽 白秀娟 《经济动物学报》 CAS 2019年第1期9-12,共4页
牙釉质(Amelogenin,AMEL)基因在哺乳动物X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失,已在动物性别鉴定方面得到一定程度的应用。本试验对蓝狐牙釉质基因片段进行克隆、纯化和测序,并通过测得序列设计1对引物,对50个蓝狐DNA样本(其中25个来自雄... 牙釉质(Amelogenin,AMEL)基因在哺乳动物X、Y染色体上存在不同程度碱基缺失,已在动物性别鉴定方面得到一定程度的应用。本试验对蓝狐牙釉质基因片段进行克隆、纯化和测序,并通过测得序列设计1对引物,对50个蓝狐DNA样本(其中25个来自雄性蓝狐精液,25个来自雌性蓝狐静脉血液)进行PCR扩增和电泳分析,鉴定蓝狐性别。结果显示,雌性蓝狐产生1条X带,雄性蓝狐产生1条X带和1条Y带,50个蓝狐DNA样本鉴定结果符合实际性别。判断所设计牙釉质基因引物可以用于蓝狐性别鉴定。 展开更多
关键词 蓝狐 牙釉质基因 性别鉴定 PCR
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黄羽肉鸡实验性感染火鸡组织滴虫后体内虫体的动态分布 预览
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作者 孔令明 禚振男 +5 位作者 郭平 曲昌宝 王子静 刘丹丹 陶建平 许金俊 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期755-758,共4页
为研究火鸡组织滴虫感染黄羽肉鸡后在其体内的动态分布,本研究将JSYZ-A株虫体通过泄殖腔感染15日龄苏禽黄羽肉鸡,在感染后1d~34d内,每3d迫杀5只感染鸡,采集其不同组织脏器样品,并对样品进行PCR检测。结果显示,火鸡组织滴虫主要靶器官为... 为研究火鸡组织滴虫感染黄羽肉鸡后在其体内的动态分布,本研究将JSYZ-A株虫体通过泄殖腔感染15日龄苏禽黄羽肉鸡,在感染后1d~34d内,每3d迫杀5只感染鸡,采集其不同组织脏器样品,并对样品进行PCR检测。结果显示,火鸡组织滴虫主要靶器官为肝脏和盲肠。感染后4d,感染鸡肝脏和盲肠中检测到虫体特异性基因,感染后13d和16d虫体检出率即达到100%,之后检出率逐渐降低,一直持续到感染后34d还能检测到虫体特异性基因。感染后10d~22d从鸡十二指肠、直肠和脾脏能够检测到虫体特异性基因。感染后13d~19d从鸡腺胃和空肠、心脏均检测到虫体特异性基因。感染后19d从鸡肺脏检测到虫体特异性基因,并且呈现一过性感染。感染鸡的胰腺、脑、肾脏和睾丸组织在整个实验过程中并未检测到虫体DNA。上述结果为临床火鸡组织滴虫致病机理的研究、诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 黄羽肉鸡 火鸡组织滴虫 PCR 动态分布
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VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统对致泻性弧菌鉴定效果评价
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作者 杜波 任妍妍 +3 位作者 蔡楠楠 修敏 刘文新 田晓东 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第19期2311-2315,共5页
目的探讨VTTEK2Compact全自动微生物鉴定系统对致泻性弧菌鉴定能力的准确性。方法分层随机采集的82份海产品按照国家标准方法进行前增菌和分离培养,应用VITEK 2对初筛得到的65株弧菌分离株进行生化鉴定,同时以PCR法鉴定弧菌分离株。并以... 目的探讨VTTEK2Compact全自动微生物鉴定系统对致泻性弧菌鉴定能力的准确性。方法分层随机采集的82份海产品按照国家标准方法进行前增菌和分离培养,应用VITEK 2对初筛得到的65株弧菌分离株进行生化鉴定,同时以PCR法鉴定弧菌分离株。并以toxR基因测序构建分离株的进化树。结果82 份海产品中,分离平板上初筛出65株可疑弧菌,经过VITEK2鉴定为弧菌54株,准确率为89.2%,而PCR法鉴定为弧菌65株,准确率为100%,VITEK2法显著低于PCR法,差异有统计学意义(X^2=5.274,P <0.05)。VITEK 2法将弧菌误判为单胞菌的7株菌,toxR基因测序显示均为弧菌。不同弧菌VTTEK 2鉴定准确率不同,溶藻弧菌符合率最低,为77. 4%,其次为霍乱弧菌(85.7%)和副溶血性弧菌(86.4%),而创伤弧菌鉴定符合率为100%。结论VITEK2鉴定弧菌时具有简便快速的特点,但在检测嗜盐性的弧菌时,具有--定的错误率,建议在进行弧菌鉴定时除了进行VTTEK2生化鉴定,还需要补充黏丝试验等传统生化检测项目和PCR法鉴定,根据VITEK2鉴定、传统生化检测和PCR法鉴定结果,综合判断菌株的最后鉴定结果。 展开更多
关键词 弧菌 toxR基因 PCR VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统 食源性致病菌
鸡源志贺氏菌的分离鉴定及耐药性研究 预览 被引量:1
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作者 谭珊 宋欣媛 吴培福 《现代畜牧兽医》 2019年第3期12-16,共5页
昆明地区某鸡场部分鸡群突发痢疾,并有小部分鸡群死亡,疑似肠道病原菌感染所致,将采集的12份病死鸡病料进行志贺氏菌的分离鉴定、生化试验及PCR鉴定,并检测分离菌的耐药性。结果表明,共分离鉴定出志贺氏菌5株,分离菌均能发酵葡萄糖、麦... 昆明地区某鸡场部分鸡群突发痢疾,并有小部分鸡群死亡,疑似肠道病原菌感染所致,将采集的12份病死鸡病料进行志贺氏菌的分离鉴定、生化试验及PCR鉴定,并检测分离菌的耐药性。结果表明,共分离鉴定出志贺氏菌5株,分离菌均能发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇,其中有1株菌能迟缓发酵发酵乳糖,有2株菌不发酵蔗糖;针对志贺氏菌特异性ipaH基因设计的1对引物,扩增出393 bp的目的条带,与预期大小一致;抗生素抑菌结果显示,5株志贺氏菌对加替沙星、头孢氨苄、恩诺沙星、氨苄西林和庆大霉素均产生了耐药性,并且是多重耐药,对卡那霉素和四环素的耐药程度处于中介,对氧氟沙星具有较高的敏感性。中药抑菌方面,5株分离菌对诃子、五味子和黄芩高度敏感,但是对大黄和白头翁处于低敏程度。 展开更多
关键词 志贺氏菌 细菌分离 生化鉴定 PCR 药敏试验
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6对通用引物检测不同型别人乳头瘤病毒效果分析 预览
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作者 吴瑶 吴亮 +5 位作者 阴晴 周亚玲 何蕾 戴晓玥 夏雯 许化溪 《江苏大学学报:医学版》 CAS 2019年第5期405-409,共5页
目的:比较6对通用引物检测9种不同型别人乳头瘤病毒(HPV)的效果,为临床提供一种快速简便的HPV检测方法。方法:收集女性宫颈脱落细胞标本954例,使用HPV分型试剂盒进行HPV-DNA检测并分型。分别使用6对通用引物(①GP5/GP6,②GP5+/GP6+,③CP... 目的:比较6对通用引物检测9种不同型别人乳头瘤病毒(HPV)的效果,为临床提供一种快速简便的HPV检测方法。方法:收集女性宫颈脱落细胞标本954例,使用HPV分型试剂盒进行HPV-DNA检测并分型。分别使用6对通用引物(①GP5/GP6,②GP5+/GP6+,③CP-Ⅰ/CP-ⅡS,④CP-I/CP-ⅡG,⑤外:MY09/MY11,内:GP5+/GP6+,⑥SPF1/GP6++)对HPV-DNA阳性标本进行PCR检测,比较6对通用引物检测9种不同类型HPV-DNA效果。结果:采用HPV分型试剂盒从954例标本中共检出263例HPV-DNA阳性标本,阳性率为27.57%。在阳性标本中,采用通用引物SPF1/GP6++检出的阳性例数为223例,检出率为84.79%;采用巢氏PCR引物(外:MY09/MY11,内:GP5+/GP6+)检出的阳性例数为207例,检出率为78.71%。上述两对通用引物均可以检出9种型别HPV-DNA。结论:通用引物SPF1/GP6++检测效果最佳,但引物含次黄嘌呤,成本较高;巢氏PCR引物(外:MY09/MY11,内:GP5+/GP6+)检测效果次之,且合成成本较低。在HPV研究中可以根据实际情况选用。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 通用引物 HPV基因型 PCR
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牛源马巴氏杆菌的分离鉴定
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作者 刘心怡 刀筱芳 +2 位作者 张斯旂 李璞君 杨发龙 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第15期79-81,85共4页
为了解引起牛肺炎的主要病原,试验从患有肺炎的牛支气管中分离获得一株巴氏杆菌,并对其进行生化鉴定、16S rRNA 测序、特异性 PCR鉴定及药敏试验。结果表明:分离菌株与马巴氏杆菌( Pasteurella caballi)的生化特性一致;16S rRNA 序列与 ... 为了解引起牛肺炎的主要病原,试验从患有肺炎的牛支气管中分离获得一株巴氏杆菌,并对其进行生化鉴定、16S rRNA 测序、特异性 PCR鉴定及药敏试验。结果表明:分离菌株与马巴氏杆菌( Pasteurella caballi)的生化特性一致;16S rRNA 序列与 Pasteurella caballi 参考菌株 ATCC49197 的同源性为 100%;特异性 PCR鉴定为 Pasteurella caballi;分离菌株对诺氟沙星、头孢噻吩、四环素等多种抗生素敏感。说明分离菌株为 Pasteurella caballi,该细菌同样可以感染牛。 展开更多
关键词 肺炎 马巴氏杆菌 分离鉴定 PCR 16S RRNA 测序 药敏试验
实验动物布鲁杆菌PCR检测方法团体标准的编制 预览
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作者 冯育芳 邢进 +3 位作者 张雪青 王洪 李晓波 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期88-91,共4页
布鲁杆菌病是一种人畜共患的传染病,病原为布鲁杆菌,该菌是实验动物必需排除的微生物之一。随着时间的推移、条件的变化及技术的进步,原有检测方法和标准已明显不适用于检测现状,需要制定新的实验动物布鲁杆菌检测方法和标准。本文介绍... 布鲁杆菌病是一种人畜共患的传染病,病原为布鲁杆菌,该菌是实验动物必需排除的微生物之一。随着时间的推移、条件的变化及技术的进步,原有检测方法和标准已明显不适用于检测现状,需要制定新的实验动物布鲁杆菌检测方法和标准。本文介绍实验动物布鲁杆菌PCR检测方法团体标准的编制背景、法律依据、内容编制、及未来展望等内容,以便于相关人员更好的理解该标准,更好地进行实验动物布鲁杆菌的检测。本团体标准的编制完成进一步完善了实验动物相关标准,为保障实验动物质量,适应我国实验动物国际化发展的需求提供了技术支持。 展开更多
关键词 实验动物 布鲁杆菌 PCR 检测方法 团体标准
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常规PCR法同时检测食品中的小麦、大麦和黑麦致敏原
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作者 柯燕娜 葛宇 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第7期1811-1815,共5页
目的建立一种常规PCR法同时检测食品中的小麦、大麦和黑麦致敏原(WBR155bp)。方法采用ClustalW软件分析小麦ω-醇溶谷蛋白、大麦醇溶谷蛋白和黑麦ω-黑麦碱的核苷酸编码序列的同源性,进而确定同源区域,用Primer Premier5.0基于同源区域... 目的建立一种常规PCR法同时检测食品中的小麦、大麦和黑麦致敏原(WBR155bp)。方法采用ClustalW软件分析小麦ω-醇溶谷蛋白、大麦醇溶谷蛋白和黑麦ω-黑麦碱的核苷酸编码序列的同源性,进而确定同源区域,用Primer Premier5.0基于同源区域设计引物。选取不同种属的植物考查所建立PCR方法的特异性。将小麦粉,大麦粉、黑麦粉与米粉混合制备谷物含量梯度为100%、10%、1.0%、0.1%、0.01%的样品,考查WBR155 bp的检出限。结果扩增产物片段<200 bp,可以检测到高度降解的DNA片段。引物WBR155bp对小麦、大麦和黑麦的检出限分别为1.0%, 0.01%和0.1%。结论该方法具有良好特异性,可用于食品中的小麦、大麦和黑麦致敏原的日常检测。 展开更多
关键词 小麦 大麦 黑麦 谷蛋白 PCR 乳糜泻
主成分回归分析在火炬松早期选择中的应用研究
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作者 栾启福 丁显印 +2 位作者 徐永勤 徐陆雨 姜景民 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2019年第2期264-269,共6页
以19年树龄的火炬松自由授粉家系遗传测试林为研究对象,利用其中6年的生长数据,基于主成分回归(PCR)和遗传相关分析的方法估算火炬松胸径和树高的早期选择树龄,并利用实际数据验证早期选择的准确性。结果显示:(1)19年胸径性状与7年胸径... 以19年树龄的火炬松自由授粉家系遗传测试林为研究对象,利用其中6年的生长数据,基于主成分回归(PCR)和遗传相关分析的方法估算火炬松胸径和树高的早期选择树龄,并利用实际数据验证早期选择的准确性。结果显示:(1)19年胸径性状与7年胸径性状的遗传相关系数达到0.83;根据早晚胸径数据建立的回归模型决定系数达到0.847,模型显示7年时胸径数据已经能够解释19年时胸径变异的88.13%;实际数据验证分析显示树龄7年进行胸径的早期选择其准确率可达到83.33%,两种方法均表明树龄7年是火炬松胸径性状早期选择的较好树龄。(2)树高性状早晚遗传相关系数出现无规律变动,难以确定早期选择树龄,而根据早晚树高数据建立的回归模型决定系数仅为0.418,不适宜做早期选择预测,如果以树龄7年或者13年作为树高早期选择年龄,验证分析表明19年树高选择准确率仅为33.33%。表明两种方法在早期选择中结果的一致性。结果表明主成分回归分析(PCR)和遗传相关分析的方法均成功估算到火炬松胸径早期选择树龄为7年,两种方法同时显示该试验材料无法获得树高合适的选择年龄,遗传相关分析结合PCR分析能够互相印证,提高早期选择的准确性,PCR分析还能利用已经建立的模型对无法计算遗传相关系数的一般林分进行优树早期筛选。 展开更多
关键词 主成分回归(PCR) 早期选择 遗传相关 火炬松
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